符 合 国 标 的 乳 制 品 中 三 聚 氰 胺 检 测 的 全 套 解 决 方 案 大 连 依 利 特 分 析 仪 器 有 限 公 司
前 言 大 连 依 利 特 分 析 仪 器 有 限 公 司 作 为 国 内 知 名 厂 家, 秉 承 着 质 量 更 佳 服 务 更 优 创 新 更 快 的 理 念, 十 几 年 来 为 食 品 安 全 药 品 检 测 及 高 校 应 用 等 众 多 行 业 提 供 着 完 善 的 分 析 方 法 及 先 进 的 仪 器 配 置 从 苏 丹 红 孔 雀 石 绿 到 此 次 三 鹿 奶 粉 三 聚 氰 胺 事 件, 关 系 着 国 计 民 生 的 食 品 安 全 问 题 一 次 次 的 为 我 们 敲 响 警 钟, 并 引 起 社 会 的 广 泛 关 注 针 对 三 聚 氰 胺 事 件, 依 利 特 人 在 第 一 时 间 做 出 反 应, 按 照 GB/T 22388-2008 原 料 乳 与 乳 制 品 中 三 聚 氰 胺 检 测 方 法 GB/T 22400-2008 原 料 乳 中 三 聚 氰 胺 快 速 检 测 液 相 色 谱 法 的 国 家 标 准, 在 经 过 大 量 实 验 验 证 后, 为 您 提 供 符 合 国 标 的 三 聚 氰 胺 检 测 解 决 方 案, 包 括 分 析 方 法 验 证 及 推 荐 仪 器 配 置 在 内 的 全 套 解 决 方 案! 一 按 GB/T 22388 2008 方 法 的 分 析 方 法 验 证 本 国 标 适 用 于 原 料 乳 乳 制 品 以 及 含 乳 制 品 中 的 三 聚 氰 胺 的 定 量 测 定 适 用 单 位 : 质 检 所 奶 粉 制 造 企 业 乳 品 饮 料 制 造 企 业 含 乳 产 品 制 造 企 业, 如 : 奶 酪 奶 油 巧 克 力 等 仪 器 与 试 剂 UV1201 紫 外 - 可 见 检 测 器 ;P1201 高 压 恒 流 泵 ;ZWⅡ 型 色 谱 柱 温 箱 ; 三 聚 氰 胺 标 准 品 (>99%); 辛 烷 磺 酸 钠 ( 色 谱 纯 ); 柠 檬 酸 ( 分 析 纯 ) 乙 腈 ( 色 谱 纯 ) 超 纯 水 ( 二 次 过 滤 );HyperSep Retain-CX SPE 小 柱 分 析 方 法 按 GB/T 22388 2008 的 液 相 色 谱 分 析 方 法 : 色 谱 柱 :Elite MSP C18 5μm(ID4.6mm 250mm) 流 动 相 : 乙 腈 / 缓 冲 盐 =10/90( 缓 冲 盐 10mM 辛 烷 磺 酸 钠 10mM 柠 檬 酸 水 溶 液, 调 ph 值 至 3.0) 流 速 :1.0mL/min 波 长 :240nm 温 度 :40 进 样 量 :20μL 实 验 结 果 1. 标 准 品 谱 图 1
2μg/mL 的 三 聚 氰 胺 标 准 品 的 实 验 谱 图 如 下 : 图 1 2μg/mL 标 准 溶 液 谱 图 表 1 2μg/mL 标 准 溶 液 组 分 信 息 2. 重 现 性 采 用 GB/T 22388-2008 法 分 析 三 聚 氰 胺, 连 续 进 样 实 验 结 果 重 现 性 良 好 melamine 10 15 20 Retention time [min] 图 2 2μg/mL 标 准 溶 液 连 续 进 样 11 次 重 现 性 2
表 2 2μg/mL 标 准 溶 液 连 续 进 样 11 次 重 现 性 数 据 编 号 保 留 时 间 /min 峰 面 积 /mv sec 1 18.383 124.65 2 18.354 124.49 3 18.353 124.31 4 18.354 124.49 5 18.46 124.81 6 18.451 124.51 7 18.386 124.31 8 18.442 124.39 9 18.428 124.85 10 18.413 124.7 11 18.353 124.31 平 均 值 18.398 124.53 RSD% 0.23 0.16 3. 标 准 曲 线 配 置 浓 度 分 别 为 0.2 2 20 40 80μg/mL 的 三 聚 氰 胺 标 准 溶 液 将 以 上 5 种 标 准 溶 液 在 下 述 色 谱 条 件 下 按 浓 度 由 低 至 高 进 样 : 图 3 按 GB/T 22388-2008 法 实 验 的 校 准 曲 线 3
4. 加 标 回 收 率 按 GB/T 22388-2008 的 样 品 前 处 理 方 法, 利 用 HyperSep Retain-CX SPE 小 柱, 含 三 聚 氰 胺 0.5 mg/kg 阳 性 成 品 奶 样 的 加 标 回 收 率 均 在 90%-96.7% 之 间, 符 合 国 标 要 求 melamine 0 5 10 15 20 Retention Time[min] 图 4 含 三 聚 氰 胺 0.5 mg/kg 阳 性 成 品 奶 样 的 加 标 谱 图 表 3 含 三 聚 氰 胺 0.5 mg/kg 阳 性 成 品 奶 样 的 加 标 回 收 率 结 果 加 标 量 (mg/kg) 理 论 量 (mg/kg) 计 算 结 果 (mg/kg) 回 收 率 % 2.0 2.5 2.25 90.0% 4.0 4.5 4.35 96.7% 6.0 6.5 6.08 93.5% 8.0 8.5 8.06 94.8% 10.0 10.5 9.73 92.7% 5. 检 测 限 定 量 限 依 据 噪 声 值, 按 3 倍 信 噪 比, 计 算 其 理 论 检 出 限, 按 10 倍 信 噪 比, 计 算 其 理 论 定 量 限 如 下 : 检 出 限 (mg/kg) 定 量 限 (mg/kg) 0.011 0.038 4
6. 实 际 样 品 定 性 和 定 量 结 果 按 照 GB/T 22388-2008 分 析 三 聚 氰 胺, 三 个 平 行 样 品 测 试 稳 定 性 良 好, 偏 差 也 达 到 国 标 要 求 melamine 0 5 10 15 20 Retention time[min] 图 5 三 个 平 行 鲜 奶 样 品 谱 图 叠 加 表 4 三 个 平 行 样 品 分 析 结 果 对 比 编 号 样 品 一 样 品 二 样 品 三 RSD% 结 果 9.54mg/Kg 9.57mg/Kg 9.79mg/Kg 1.42% 5
附 件 1:HyperSep Retain-CX 产 品 介 绍 产 品 名 称 : HyperSep Retain-CX 填 料 基 质 : 磺 酸 基 功 能 化 的 聚 苯 乙 烯 / 二 乙 烯 基 苯 萃 取 柱 规 格 型 号 :60mg/3mL 产 品 货 号 :60107-303 产 品 图 片 : 生 产 商 : Thermo Fisher Scientific 产 品 特 点 : 三 聚 氰 胺 前 处 理 碱 性 非 极 性 分 析 物 的 均 可 保 留 从 生 物 样 品 中 萃 取 碱 性 药 物 的 理 想 选 择 HyperSep Retain-CX 回 收 率 采 用 国 标 GB/T 22388-2008 处 理 样 品 净 化,Thermo Retain-CX 有 非 常 好 的 回 收 率 表 5 HyperSep Retain-CX 回 收 率 测 试 平 行 测 试 1 2 3 1 2 3 理 论 值 (mg/l) 0.8 1.0 计 算 值 0.816 0.815 0.793 1.03 1.04 0.966 回 收 率 (%) 102 102 99.1 103 104 96.6 回 收 率 平 均 值 101% 101% 6
附 件 2: 国 标 GB/T 22388 三 聚 氰 胺 检 测 依 利 特 全 套 配 置 清 单 国 标 GB/T 22388 三 聚 氰 胺 测 试 用 分 析 方 法 包 : 序 号 名 称 规 格 级 别 数 量 产 地 1 柠 檬 酸 分 析 纯 50g 国 产 2 辛 烷 磺 酸 钠 色 谱 纯 60g 国 产 3 三 聚 氰 胺 标 准 品 CAS108-78-01, 纯 度 99.0% 1 克 美 国 4 水 系 滤 膜 (100 片 / 盒 ) φ50mm,0.45μm 1 盒 上 海 5 有 机 系 滤 膜 (100 片 / 盒 ) φ50mm,0.45μm 1 盒 上 海 6 7 8 针 筒 式 有 机 相 过 滤 器 (100 支 / 包 ) 混 合 型 阳 离 子 固 相 萃 取 柱 (50 支 / 盒 ) Elite MSP C18 三 聚 氰 胺 专 用 柱 φ13mm,0.22μm 2 包 天 津 HyperSep Retain-cx,60mg/3mL 4 盒 进 口 ID:4.6 250mm,5μm 依 利 特 国 标 GB/T 22388 三 聚 氰 胺 测 试 用 前 处 理 配 置 包 : 序 号 名 称 规 格 级 别 数 量 产 地 1 超 声 波 水 浴 AS3120 型,3L, 功 率 :120W 1 台 天 津 2 隔 膜 真 空 泵 GM 型 1 台 天 津 3 溶 剂 过 滤 器 1000mL 天 津 4 分 析 天 平 5 ph 计 AL104, 感 量 0.0001g 1 台 进 口 JD60-4,0.0001g 1 台 沈 阳 FE20K 酸 度 计 1 台 进 口 6010 酸 度 计 1 台 上 海 6 离 心 机 TG16G,16000 转,6 50mL 1 台 湖 南 TD5G,5000 转,12 10mL 1 台 湖 南 7 固 相 萃 取 仪 SPE-12 天 津 8 氮 气 吹 干 仪 PGC-01D 1 台 天 津 9 涡 旋 混 合 器 QL-861 1 台 江 苏 10 研 钵 90, 氧 化 铝 7
国 标 GB/T 22388 液 相 色 谱 仪 标 准 配 置 包 序 号 名 称 数 量 1 2 3 P1201 三 聚 氰 胺 测 试 用 液 相 色 谱 系 统 ⑴P1201 高 压 恒 流 输 液 泵 ⑵UV1201 紫 外 可 变 波 长 检 测 器 ⑶Elite MSP C18 三 聚 氰 胺 专 用 柱 ⑷Rheodyne 7725i 高 压 六 通 进 样 阀 ⑸ZJ-1 阀 及 色 谱 柱 安 装 支 架 ⑹25µL 微 量 进 样 器 ⑺100µL 微 量 进 样 器 ⑻ 专 用 工 具 包 ⑼EC2006 色 谱 数 据 处 理 系 统 软 件 V1.0 版 ⑽ZWII 型 色 谱 柱 恒 温 箱 高 级 配 置 ( 更 多 功 能, 人 性 化 配 置, 工 作 效 率 更 高 ) ⑴P1201 在 线 清 洗 装 置 ⑵P1201 溶 剂 管 理 器 ( 含 进 口 二 元 脱 气 机 ) ⑶AS230 固 定 体 积 型 自 动 进 样 器 升 级 配 置 ( 升 级 后, 可 在 以 后 工 作 中 检 测 多 种 样 品, 适 用 面 更 广, 节 约 成 本 ) ⑴P1201 等 度 升 级 梯 度 配 置 包 ⑵AS230 可 变 体 积 型 自 动 进 样 器 1 台 1 台 备 注 : 如 需 分 析 三 聚 氰 胺, 以 上 三 个 配 置 包 所 列 仪 器 试 剂, 都 需 配 备, 缺 一 不 可 8
二 按 GB/T 22400 2008 方 法 的 分 析 方 法 验 证 本 国 标 适 用 于 原 料 乳 不 含 添 加 物 的 液 态 乳 制 品 中 的 三 聚 氰 胺 的 定 量 测 定 适 用 单 位 : 质 检 所 畜 牧 局 奶 站 收 奶 检 测 奶 粉 制 造 企 业 原 料 乳 进 料 检 验, 纯 牛 奶 生 产 企 业 仪 器 与 试 剂 UV1201 紫 外 - 可 见 检 测 器 ;P1201 高 压 恒 流 泵 ; 三 聚 氰 胺 标 准 品 (>99%); 磷 酸 二 氢 钾 ( 分 析 纯 ) 磷 酸 柠 檬 酸 ( 分 析 纯 ) 乙 腈 ( 色 谱 纯 ) 超 纯 水 ( 二 次 过 滤 ) 分 析 方 法 按 GB/T 22400 2008 的 液 相 色 谱 分 析 方 法 : 色 谱 柱 :BioBasic SCX 5μm(ID4.6mm 250mm) 流 动 相 : 乙 腈 / 缓 冲 盐 =30/70( 缓 冲 盐 称 取 6.8 g 磷 酸 二 氢 钾, 加 水 800 ml 完 全 溶 解 后, 用 磷 酸 调 节 ph 至 3.0, 用 水 稀 释 至 1 L) 流 速 :1.5mL/min 波 长 :240nm 温 度 : 室 温 进 样 量 :20μL 实 验 结 果 1. 标 准 品 谱 图 2mg/L 的 三 聚 氰 胺 标 准 品 的 实 验 谱 图 如 下 : 9
图 6 2mg/L 标 准 溶 液 谱 图 2. 重 现 性 采 用 GB/T 22400-2008 法 分 析 三 聚 氰 胺, 连 续 进 样 重 现 性 良 好 melamine 3 4 5 6 Retention time(min) 图 7 2mg/L 标 准 溶 液 连 续 进 样 11 次 重 现 性 10
表 6 2mg/L 标 准 溶 液 连 续 进 样 11 次 重 现 性 数 据 编 号 保 留 时 间 /min 峰 面 积 /mv sec 1 4.803 87.74 2 4.803.87.85 3 4.807 87.58 4 4.800 87.46 5 4.804 87.87 6 4.798 87.83 7 4.800 88.12 8 4.807 88.24 9 4.806 87.78 10 4.798 87.82 11 4.799 88.06 平 均 值 4.802 87.85 RSD% 0.07 0.26 3. 标 准 曲 线 按 GB/T 22400-2008 制 作 标 准 曲 线 的 要 求 绘 制 3.1 高 浓 度 三 聚 氰 胺 校 准 曲 线 配 置 浓 度 分 别 为 0.20 0.50 2.00 5.00 20.0 50.0mg/L 的 三 聚 氰 胺 标 准 溶 液 将 以 上 5 种 标 准 溶 液 在 下 述 色 谱 条 件 下 按 浓 度 由 低 至 高 进 样 : 图 8 按 GB/T 22400-2008 法 高 浓 度 校 准 曲 线 11
3.2 低 浓 度 三 聚 氰 胺 校 准 曲 线 配 置 浓 度 分 别 为 0.005 0.01 0.02 0.10 0.20mg/L 的 三 聚 氰 胺 标 准 溶 液 将 以 上 5 种 标 准 溶 液 在 下 述 色 谱 条 件 下 按 浓 度 由 低 至 高 进 样 : 图 9 按 GB/T 22400 2008 法 低 浓 度 校 准 曲 线 4. 加 标 回 收 率 按 GB/T 22400-2008 的 样 品 前 处 理 方 法, 阴 性 成 品 奶 样 品 的 五 次 加 标 回 收 率 在 93.8%-97.1% 之 间, 符 合 国 标 要 求 melamine 1 2 3 4 5 6 Rentention Time[min] 图 10 阴 性 成 品 奶 样 品 的 加 标 谱 图 12
表 7 阴 性 成 品 奶 样 品 的 加 标 回 收 率 结 果 加 标 量 (mg/kg) 计 算 结 果 (mg/kg) 回 收 率 % 0.15 0.143 95.2% 1.50 1.44 96.0% 5.0 4.82 96.5% 25.0 23.5 93.8% 50.0 48.6 97.1% 5. 检 测 限 定 量 限 依 据 噪 声 值, 按 3 倍 信 噪 比, 计 算 其 理 论 检 出 限, 按 10 倍 信 噪 比, 计 算 其 理 论 定 量 限 : 检 出 限 (mg/kg) 定 量 限 (mg/kg) 0.008 0.026 6. 实 际 样 品 定 性 和 定 量 结 果 按 照 GB/T 22400-2008 分 析 三 聚 氰 胺, 三 个 平 行 样 品 测 试 稳 定 性 良 好, 偏 差 也 达 到 国 标 要 求 melamine 0 1 2 3 4 5 6 Retention time(min) 图 11 三 个 平 行 鲜 奶 样 品 谱 图 叠 加 表 8 三 个 平 行 样 品 分 析 结 果 对 比 编 号 样 品 一 样 品 二 样 品 三 RSD% 结 果 1.416mg/Kg 1.422mg/Kg 1.439mg/Kg 0.84% 13
附 : 国 标 GB/T 22400 三 聚 氰 胺 检 测 依 利 特 全 套 配 置 清 单 国 标 GB/T 22400 三 聚 氰 胺 快 速 测 试 用 分 析 方 法 包 序 号 名 称 规 格 级 别 数 量 产 地 1 一 次 性 注 射 器 (200 支 / 包 ) 2mL 1 包 国 产 2 三 聚 氰 胺 标 准 品 纯 度 99.0% 1 克 美 国 3 水 系 滤 膜 (100 片 / 盒 ) φ50mm,0.45μm 1 盒 上 海 4 有 机 系 滤 膜 (100 片 / 盒 ) φ50mm,0.45μm 1 盒 上 海 5 针 筒 式 有 机 相 过 滤 器 (100 支 / 包 ) φ13mm,0.45μm 2 包 天 津 6 BioBasic SCX 强 阳 离 子 交 换 色 谱 柱 ID:4.6 250mm,5μm 进 口 7 BioBasic SCX 保 护 柱 套 ID:4.6 10mm 进 口 8 BioBasic SCX 保 护 柱 芯 (4 支 / 包 ) ID:4.6 10mm,5μm 1 包 进 口 国 标 GB/T 22400 三 聚 氰 胺 快 速 测 试 用 前 处 理 配 置 包 序 号 名 称 规 格 级 别 数 量 产 地 1 超 声 波 水 浴 AS3120 型,3L, 功 率 :120W 1 台 天 津 2 隔 膜 真 空 泵 GM 型 1 台 天 津 3 溶 剂 过 滤 器 1000mL 天 津 4 分 析 天 平 5 PH 计 AL104, 感 量 0.0001g 1 台 进 口 JD60-4,0.0001g 1 台 沈 阳 FE20K 酸 度 计 1 台 进 口 6010 酸 度 计 1 台 上 海 6 涡 旋 混 合 器 QL-861 1 台 江 苏 14
国 标 GB/T 22400 液 相 色 谱 仪 标 准 配 置 包 序 号 名 称 数 量 1 2 P1201 三 聚 氰 胺 测 试 用 液 相 色 谱 系 统 ⑴P1201 高 压 恒 流 输 液 泵 ⑵UV1201 紫 外 可 变 波 长 检 测 器 ⑶Rheodyne 7725i 高 压 六 通 进 样 阀 ⑷BioBasic SCX 强 阳 离 子 交 换 色 谱 柱 ⑸BioBasic SCX 保 护 柱 (1 柱 套 1 柱 芯 ) ⑹25µL 微 量 进 样 器 ⑺100µL 微 量 进 样 器 ⑻ZJ-1 阀 及 色 谱 柱 安 装 支 架 ⑼EC2006 色 谱 数 据 处 理 系 统 软 件 V1.0 版 ⑽ 专 用 工 具 包 高 级 配 置 ( 更 多 功 能, 人 性 化 配 置, 工 作 效 率 更 高 ) ⑴P1201 在 线 清 洗 装 置 ⑵ZWII 型 色 谱 柱 恒 温 箱 ⑶P1201 溶 剂 管 理 器 ( 含 进 口 二 元 脱 气 机 ) ⑷AS230 固 定 体 积 型 自 动 进 样 器 1 台 1 台 3 升 级 配 置 ( 升 级 后, 可 在 以 后 工 作 中 检 测 多 种 样 品, 适 用 面 更 广, 节 约 成 本 ) ⑴P1201 等 度 升 级 梯 度 配 置 包 ⑵AS230 可 变 体 积 型 自 动 进 样 器 备 注 : 如 需 分 析 三 聚 氰 胺, 以 上 三 个 配 置 包 所 列 仪 器 试 剂, 都 需 配 备, 缺 一 不 可 三 按 NY/T 1372-2007 饲 料 中 三 聚 氰 胺 的 检 测 方 法 按 照 此 方 法, 使 用 依 利 特 公 司 仪 器 验 证, 重 现 性 标 准 曲 线 回 收 率 等 方 面 均 达 到 或 超 过 此 标 准 要 求, 请 客 户 放 心 使 用 具 体 验 证 方 法 及 仪 器 配 置, 请 关 注 我 公 司 网 站! 15
四 三 种 方 法 的 对 比 测 试 分 别 采 用 河 北 省 省 标 方 法 GB/T 22388-2008 国 标 方 法 GB/T 22400-2008 国 标 方 法 测 试 同 一 鲜 奶 样 品, 并 对 比 三 种 方 法 测 试 结 果 仪 器 与 试 剂 UV1201 紫 外 - 可 见 检 测 器 ;P1201 高 压 恒 流 泵 ;ZWⅡ 型 色 谱 柱 温 箱 ; 三 聚 氰 胺 标 准 品 (>99%); 磷 酸 二 氢 钾 柠 檬 酸 ( 分 析 纯 ) 乙 腈 ( 色 谱 纯 ) 超 纯 水 ( 二 次 过 滤 );Elite MSP 专 用 分 析 柱 (ID4.6mm 250mm),Hypersil BDS C18(ID4.6mm 250mm),BioBasic SCX 柱 (ID4.6mm 250mm) 分 析 方 法 在 某 鲜 奶 样 品 中 加 入 一 定 量 的 三 聚 氰 胺 标 准 品, 分 别 按 照 国 标 和 河 北 省 标 进 行 样 品 前 处 理, 样 品 分 析 条 件 参 照 标 准 实 验 结 果 1 河 北 省 省 标 前 处 理 方 法 30 25 20 Signal(mV) 15 10 Melamine 5 0 0 5 10 15 Retention time(min) 图 12 河 北 前 处 理 鲜 奶 样 品 谱 图 16
2 GB/T 22388 国 标 处 理 方 法 6 Signal(mV) 4 2 Melamine 0 0 5 10 15 20 Retention time(min) 图 13 GB/T 22388 方 法 处 理 鲜 奶 谱 图 3 GB/T 22400 国 标 处 理 方 法 50 40 Signal(min) 30 20 10 Melamine 0 0 1 2 3 4 5 6 Retention time(min) 图 14 GB/T 22400 方 法 处 理 鲜 奶 谱 图 17
采 用 三 种 不 同 方 法 测 试 鲜 奶 中 三 聚 氰 胺 含 量, 结 果 一 致! 表 9 三 种 方 法 结 果 对 比 河 北 省 标 GB/T 22388 GB/T 22400 三 聚 氰 胺 峰 面 积 (mv.sec) 样 品 含 量 (mg/kg) 平 均 值 (mg/kg) 平 行 实 验 1 平 行 实 验 2 平 行 实 验 1 平 行 实 验 2 平 行 实 验 1 平 行 实 验 2 91.09 93.02 57.71 58.24 15.77 15.43 2.32 2.36 2.32 2.35 2.39 2.34 2.34 2.34 2.36 备 注 :GB/T 22388 方 法 测 试 中, 空 白 加 标 准 品 回 收 率 96%, 符 合 国 标 要 求 大 连 依 利 特 分 析 仪 器 有 限 公 司 www.elitehplc.com 公 司 地 址 : 高 新 园 区 七 贤 岭 学 子 街 2-2 号 公 司 电 话 :0411-84753333( 总 机 )- 转 销 售 部 公 司 传 真 :0411-84732323 公 司 邮 箱 :info@elitehplc.com 东 北 销 售 大 区 陈 书 博 13130022566 华 北 销 售 大 区 陈 有 新 13889453929 上 海 办 事 处 宋 站 凯 13604081698 地 址 : 中 山 北 路 3064 号 绿 洲 广 场 B 座 2312 室 电 话 :021-64233161 传 真 :021-64233161 西 安 办 事 处 张 靖 一 13842893909 地 址 : 西 安 市 环 城 西 路 南 段 78 号 东 光 大 厦 一 区 1112 室 电 话 :029-87915697 传 真 :029-87915698 长 沙 办 事 处 张 洪 翼 13904268201 地 址 : 长 沙 市 岳 麓 区 集 贤 路 129 号 晶 鑫 小 区 4 栋 101 室 电 话 :0731-5151735 传 真 :0731-5151837 18