食品安全国家标准 食品添加剂柠檬酸脂肪酸甘油酯 1 范围 本标准适用于由甘油与柠檬酸和可食用脂肪酸酯化制得 或者由可食用脂肪酸的单双甘油酯混合物与柠檬酸反应制得的食品添加剂柠檬酸脂肪酸甘油酯 它由柠檬酸和可食用脂肪酸与甘油的混合酯组成, 可含有少量游离脂肪酸 游离甘油 游离柠檬酸和单双甘油酯, 可全
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1 中华人民共和国国家标准 GB 食品安全国家标准 食品添加剂柠檬酸脂肪酸甘油酯 ( 征求意见稿 ) 发布 实施 中华人民共和国卫生部 发布
2 食品安全国家标准 食品添加剂柠檬酸脂肪酸甘油酯 1 范围 本标准适用于由甘油与柠檬酸和可食用脂肪酸酯化制得 或者由可食用脂肪酸的单双甘油酯混合物与柠檬酸反应制得的食品添加剂柠檬酸脂肪酸甘油酯 它由柠檬酸和可食用脂肪酸与甘油的混合酯组成, 可含有少量游离脂肪酸 游离甘油 游离柠檬酸和单双甘油酯, 可全部或部分被氢氧化钠或氢氧化钾中和 2 结构式 其中,R 1 R 2 和 R 3 中至少有一个为柠檬酸基团, 一个为脂肪酸基团, 其他可以是柠檬酸 脂肪酸或氢 3 技术要求 3.1 感官要求 : 应符合表 1 的规定 表 1 感官要求 色泽 状态 项 目 要 求 检验方法 白色至乳白色 将适量试样均匀置于白搪瓷盘内, 于自然光线下 油状至蜡状 观察其色泽和状态 3.2 理化指标 : 应符合表 2 的规定 表 2 理化指标 项 目 指 标 检验方法 硫酸灰分, /% 0.5( 未中和产品 ) 附录 A 中 A.3 10( 部分或完全中和的产品 ) 游离甘油, /% 附录 A 中 A. 总甘油, /% 8~33 附录 A 中 A.5 总柠檬酸, /% 13~50 附录 A 中 A.6 总脂肪酸, /% 37~81 附录 A 中 A.7 铅 (Pb)/(mg/kg) 2 GB
3 附录 A GB 检验方法 A.1 一般规定 本标准除另有规定外, 所用试剂的纯度应在分析纯以上, 所用标准滴定溶液 杂质测定用标准溶液 制剂及制品, 应按 GB/T 601 GB/T 602 GB/T 603 的规定制备, 实验用水应符合 GB/T 中三级水的规定 试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时, 均指水溶液 A.2 鉴别试验不溶于冷水, 可分散于热水, 可溶于油脂, 不溶于冷乙醇 A.3 硫酸灰分的测定 A.3.1 分析步骤称取 2 g 试样, 置于已在 800 ±25 下灼烧至恒重的坩埚中, 加入少量硫酸, 缓缓加热, 直至试样完全 挥发或炭化 继续加热至硫酸蒸汽逸尽, 在 800 ±25 的高温炉中灼烧至恒重 A.3.2 结果计算硫酸灰分的质量分数 1 按式 (A.1) 计算 : m1- m % (A.1) m m 1 灼烧后坩埚和残渣的质量, 单位为克 (g); m 0 坩埚的质量, 单位为克 (g); m 试样的质量, 单位为克 (g) A. 游离甘油的测定 A..1 试剂和溶液 A..1.1 冰乙酸 A..1.2 三氯甲烷 A..1.3 高碘酸溶液 : 将 5. g 高碘酸溶解在 100 ml 水和 1900 ml 冰乙酸的混合液中, 避光保存在具塞玻璃 瓶中 A..1. 碘化钾溶液 :150 g/l A..1.5 硫代硫酸钠标准滴定溶液 :c(na 2 S 2 O 3 )=0.1 mol/l A..1.6 淀粉指示液 :10 g/l A..2 分析步骤 A..2.1 试样溶液的制备先将试样熔融 ( 温度不超过其熔点 10 ), 并充分混匀 准确称取 1 g 混匀后的试样, 精确至 g, 置于 100 ml 容量瓶中, 加入 50 ml 三氯甲烷使之溶解, 再加入 25 ml 水, 加塞密闭, 强烈震摇 30 s~60 s, 然后静置使三氯甲烷与水相分层 ( 如形成乳浊状, 则可加冰乙酸 3 ml 或 ml 破乳 ) 使用玻璃虹吸管, 将水相转移至另一个 100 ml 容量瓶中 再分别用 25 ml 25 ml 和 20 ml 水萃取三氯甲烷溶液三次 将 萃取后的水相集中到同一个容量瓶中, 加水定容至 100 ml, 混匀, 此为试样溶液 A..2.2 测定 2
4 准备两个 500 ml 的碘量瓶, 分别加入 50 ml 高碘酸溶液 移取 50 ml 试样溶液 (A..2.1), 置于其中 一个碘量瓶中 移取 50 ml 水, 置于另一个碘量瓶中, 做空白试验 分别摇匀后, 静置 30 min~90 min 在每个碘量瓶中分别加入 20 ml 碘化钾溶液, 小心摇匀后, 在暗处静置 1 min~5 min 再分别加入 100 ml 水, 用硫代硫酸钠标准滴定溶液分别进行滴定, 滴定时用磁力搅拌器搅拌以保持溶液充分混匀 滴定至碘 的棕色消褪后, 分别加入 2 ml 淀粉指示液, 继续滴定, 至溶液蓝色消褪即为滴定终点 A..3 结果计算游离甘油的质量分数 2 按公式 (A.2) 计算 : V0 V1 c M m V 0 空白滴定消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积, 单位为毫升 (ml); 100% (A.2) V 1 试样水溶液滴定消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积, 单位为毫升 (ml); c 硫代硫酸钠标准滴定溶液的实际浓度, 单位为摩尔每升 (mol/l); M 甘油的摩尔质量, 单位为克每摩尔 (g/mol)[m(c 3 H 8 O 3 )=92]; m 试样的质量, 单位为克 (g); 50/100 试样溶液的体积比 ; 1000 体积换算因子 ; 换算因子 A.5 总甘油的测定 A.5.1 试剂和溶液 A 冰乙酸 A 三氯甲烷 A 氢氧化钾 - 乙醇溶液 :0.5 mol/l A.5.1. 高碘酸溶液 : 溶解 5. g 高碘酸在 100 ml 水和 1900 ml 冰乙酸的混合液中, 避光保存在具塞玻璃瓶 中 A 碘化钾溶液 : 质量分数为 15% A 硫代硫酸钠标准滴定溶液 :c(na 2 S 2 O 3 )=0.1 mol/l A 淀粉指示液 :10 g/l A.5.2 仪器和设备 A 圆底烧瓶 :250 ml A 回流冷凝器 A.5.3 分析步骤 A 试样溶液的制备准确称取约 2 g 试样, 置于圆底烧瓶中, 加入 50 ml 氢氧化钾 - 乙醇溶液 将装有混合液的烧瓶与回流 冷凝器相连, 加热回流 30 min 用三份每份为 25 ml 的水定量地将圆底烧瓶中的混合液转移至一个 1L 的 容量瓶中, 准确加入 99 ml 三氯甲烷和 25 ml 冰乙酸, 再加入约 500 ml 水, 剧烈震摇约 1 min 用水稀 释至刻度, 充分混匀, 静置让其分层 分层后得到的水相为试样溶液 A 测定准备两个 00 ml 的烧杯, 分别加入 50 ml 高碘酸溶液 移取 50 ml 试样溶液 (A.5.3.1), 置于其中一 个烧杯中 移取 50 ml 水, 置于另一个烧杯中, 做空白试验 小心摇匀后, 盖上玻璃皿, 暗处静置 30 min~ 90 min 在每一个烧杯中分别加入 20 ml 碘化钾溶液, 小心摇匀后, 静置 1 min~5 min 再分别加入 100 ml 水, 用硫代硫酸钠标准滴定溶液分别进行滴定, 滴定时用磁力搅拌器搅拌以保持溶液充分混匀 滴定至碘 3
5 的棕色消褪后, 分别加入 2 ml 淀粉指示液, 继续滴定, 至溶液蓝色消褪即为滴定终点 A.5. 结果计算总甘油含量的质量分数 3 按公式 (A.3) 计算 : V V c m M V 0 空白滴定消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积, 单位为毫升 (ml); GB 100% (A.3) V 1 试样水溶液滴定消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积, 单位为毫升 (ml); c 硫代硫酸钠标准滴定溶液的实际浓度, 单位为摩尔每升 (mol/l); M 甘油的摩尔质量, 单位为克每摩尔 (g/mol)[m 1 (C 3 H 8 O 3 )=92]; m 试样的质量, 单位为克 (g); 50/900 试样溶液的体积比 ; 1000 体积换算因子 ; 换算因子 A.6 总柠檬酸的测定 A.6.1 原理用醇化氢氧化钾溶液对试样进行皂化, 通过萃取去除脂肪酸, 试样中的柠檬酸转化成三甲硅烷 (TMS) 衍生物, 采用气相色谱法进行分析 A.6.2 试剂和材料 A 庚烷 A 盐酸 A 吡啶 A.6.2. 三甲基氯硅烷 (TMCS) A 六甲基二硅烷 (HMDS) A N- 甲基 -N- 三甲硅烷基 - 三氟乙酰胺 (MSTFA) A 氢氧化钾 - 乙醇溶液 :0.5moL/L A 酒石酸溶液 :1 mg/ml A 柠檬酸对照溶液 :3 mg/ml A.6.3 仪器和设备 A 回流冷凝器 A 旋转蒸发器 A 分液漏斗 A.6.3. 气相色谱仪 : 配备火焰离子化检测器 A.6. 分析步骤 A.6..1 皂化反应准确称取约 1 g 试样, 置于一圆底烧瓶中, 加入 25 ml 氢氧化钾 - 乙醇溶液, 将装有混合液的烧瓶与回 流冷凝器相连, 回流 30 min 用盐酸对混合液进行酸化, 然后在旋转蒸发器中对其进行蒸发 A.6..2 萃取用不超过 50 ml 的水将烧瓶中的蒸发浓缩物 (A.6..1) 定量转移到一个分液漏斗中, 用三份每份为 50mL 的庚烷进行萃取, 弃去萃取物, 将水相层转移至一个 100 ml 的容量瓶中, 中和后加水稀释至刻度, 混匀 后备用 A.6..3 衍生反应
6 吸取 1 ml 经 A.6..2 步骤得到的溶液以及 1 ml 酒石酸溶液, 加入到一个 10 ml 带盖的圆底烧瓶中, 蒸发至干 加入 1 ml 吡啶 0.2 ml 三甲基氯硅烷 (TMCS) 0. ml 六甲基二硅烷 (HMDS) 和 0.1 ml N- 甲基 -N- 三甲硅烷基 - 三氟乙酰胺 (MSTFA) 将烧瓶的盖子盖紧并小心旋转直至溶质全部溶解 将烧瓶置入烘箱 中, 在 60 下加热 1 h, 得到三甲硅烷 (TMS) 衍生化的试样溶液 A.6.. 气相色谱分析 A 参考气相色谱条件 A 色谱柱 : 玻璃柱,1.8 m 2 mm( 内径 ), 用承载在红藻硅土 Q 色谱载体 (180 μm/150 μm) 上浓度为 10% 的 DC-200 进行填充 A 柱温 :165 A 进样口温度 :20 A 检测器温度 :20 A 载气 : 氮气 A 载体流速 :2 ml/min A 进样量 :5 μl A 测定 在 A 参考气相色谱条件下, 对试样溶液 (A.6..3) 进行色谱分析, 记录色谱图 酒石酸的保留时 间约 12 min, 柠檬酸 / 酒石酸的相对保留时间约 2.3 用 1 ml 柠檬酸对照溶液代替 1 ml 的试样溶液, 重复上述 的衍生反应 (A.6..3) 和气相色谱分析 A.6.5 结果计算总柠檬酸的质量分数 按式 (A.) 计算 : A ATR mcr 100 A A m CR TS CR A CS 试样溶液色谱图中柠檬酸的峰面积值 ; A TR 柠檬酸对照溶液色谱图中酒石酸的峰面积值 ; m CR 1mL 柠檬酸对照溶液中柠檬酸的质量, 单位为克 (g); 100 试样溶液的体积, 单位为毫升 (ml); A TS 试样溶液色谱图中酒石酸的峰面积值 ; A CR 柠檬酸对照溶液色谱图中柠檬酸的峰面积值 ; m 试样的质量, 单位为克 (g) A.7 总脂肪酸的测定 100% (A.) A.7.1 试剂和材料 A 盐酸 A 乙醚 A 无水硫酸钠 A.7.1. 氯化钠溶液 : 质量分数为 10% A 氢氧化钾 - 乙醇溶液 :1 mol/l A 甲基橙指示液 :1 g/l A.7.2 仪器和设备 A 分液漏斗 A 回流冷凝器 A.7.3 分析步骤 5
7 准确称取约 5 g 试样, 置于一个 250 ml 的圆底烧瓶中, 加入 50 ml 氢氧化钾 - 乙醇溶液, 在水浴上回 流 1 h 用三份每份为 25 ml 的水将烧瓶中皂化反应后的混合液定量转移到一个 1000 ml 的分液漏斗中, 加入 5 滴甲基橙指示液 小心加入盐酸直至溶液颜色变成鲜红色, 然后摇匀, 以分离出脂肪酸 用三份每 份为 100 ml 的乙醚萃取分离出来的脂肪酸 合并萃取液, 用 50 ml 氯化钠溶液进行洗脱, 直至洗出的氯 化钠溶液为中性 用无水硫酸钠干燥试样酯溶液 然后在蒸气浴上将乙醚蒸发掉, 再在蒸气浴上放置 10 min, 称量残留物 A.7. 结果计算总脂肪酸的质量分数 5 按式 (A.5) 计算 : m m % (A.5) m 1 蒸发后残留物的质量, 单位为克 (g); m 0 试样的质量, 单位为克 (g) 6
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