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庶江
9 years ago
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1 利用封群策略某 5000 头母猪场在 120 天内成功净化 PRRSV NADC 30 毒株 Eradication of PRRSV NADC 30 strain from a 5000-sow farm through herd closure in 120 days 环山集团养猪事业部曲向阳 ( ) 2016 年 10 月 16 日 1

2 提纲 01 PRRSV NADC 30 毒株简介 PPRSV NADC 30 Strain 02 病史与临床症状 Clinical Signs 03 综合诊断 Comprehensive diagnosis 04 封群净化程序 Herd closure 05 断奶仔猪的跟踪检测 Follow-up testing of weaning piglets 06 讨论与总结 Dicussion & Summary 2

3 1.PRRSV NADC 30 毒株简介蓝耳病是威胁全球养猪业的最重要的病毒性疾病之一, 特别是新型高致病性蓝耳病毒感染可诱发更严重的临床症状在美国,60% 的感染性流产是由蓝耳病毒所导致的 [1] 杨汉春老师等报告 :2014 年 08 月份以来我国多地发现新的蓝耳病毒株 NADC30 的感染 [2] 但同行对 NADC30 所导致的蓝耳病的临床表现诊断要点净化与防控等认知尚不足 2015 年 11 月 23 日起, 笔者经历了一场由蓝耳病毒 NADC30 毒株感染导致的以母猪流产为主要临床表现的蓝耳病通过及时采取封群净化策略, 在 120 天内成功将 NADC30 毒株净化, 重新生产出蓝耳抗原阴性的仔猪 [1] Jeffrey 等. 猪病学 ( 第 10 版 )[M].353. [2] Xiuling Yu et al.pathogenic Pseudorabies Virus, China, 2012.Emerging Infectious Diseases. 2014,20:

4 1. 病史与临床症状该猪场为小栋舍多单元传统母猪场, 存栏 5100 头 ; 母猪场 + 合作养殖模式 ; 发病前, 猪瘟蓝耳伪狂犬口蹄疫等均抗原阴性断奶 - 上市保育育肥猪平均成活率高于 95%, 健康状态良好 ; 蓝耳免疫 : 母猪群普免, 一年免疫 3 次蓝耳疫苗选用某品牌天津毒株 ; 断奶仔猪不免疫蓝耳疫苗, 转群到养户家饲养, 且可持续保持阴性 ; 后备母猪由体系内供种, 每两个月引种一次 ; 最近一次引种是 2015 年 10 月 30 日免疫背景 : 蓝耳 6 月 22 日 ; 伪狂犬 :11 月 11 日 ; 该猪场周围 3 公里处有另一母猪场, 年曾感染蓝耳病 4

5 2. 临床症状 Clinical Signs 2015 年 11 月 23 日母猪场报告 :47 周 11 月 21 日 -26 日流产 8 头, 周流产数显著高于正常值 ( 依照流产率 2% 推算, 周流产数应控制在 4 头 ) ( 图 1 流产数曲线 ) 第一周的流产母猪主要集中于妊娠前期 ( 妊娠天 )( 图 2. 流产胎儿 ) 两周后逐渐向妊娠中期 ( 妊娠天 ) 转移 ; 四周后以妊娠后期 ( 妊娠天 ) 流产为主发病初期, 流产母猪体温在 40 左右, 流产前母猪采食量未发现明显异常, 流产后 1-2 天内体温恢复正常 (38.5 ) 发病第二周 : 部分母猪发烧 ( 产 5,178 头母猪,8 头发烧, 发烧率 :4.49% ), 体温 , 采食量下降随后出现跳跃式采食量下降流产 ( 流产母猪栏位不是相邻的, 呈跳跃式分布 ) 12 月 05 日起 ( 发病 2 周后 ), 产房部分母猪奶水变差, 仔猪整窝表现出呼吸急促, 断奶前死亡率显著升高 ; 5

6 2. 临床症状 Clinical Signs 图 1. 周流产数变化曲线 (2015 年 44 周至 52 周的周流产窝数统计, 正常每周流产不超过 4 头 ) 6

7 2. 临床症状 Clinical Signs 图 2. 妊娠前期 (30-60 天 ) 流产胎儿 : 全身充血出血 7

8 2. 临床症状 Clinical Signs 图 3. 流产母猪妊娠日龄及流产数变化曲线 8

9 2. 临床症状 Clinical Signs 月 26 日 11 月 28 日 11 月 30 日 12 月 2 日 12 月 4 日 12 月 6 日 12 月 8 日 12 月 10 日 12 月 12 日 12 月 14 日 12 月 16 日 12 月 18 日 12 月 20 日 12 月 22 日 12 月 24 日 12 月 26 日 12 月 28 日 12 月 30 日 1 月 1 日 1 月 3 日 1 月 5 日 1 月 7 日 1 月 9 日 1 月 11 日 1 月 13 日 1 月 15 日 1 月 17 日 1 月 19 日 1 月 21 日 1 月 23 日 1 月 25 日 1 月 27 日 1 月 29 日 1 月 31 日 2 月 2 日 2 月 4 日 2 月 6 日 2 月 8 日 2 月 10 日 2 月 12 日 2 月 14 日图 4. 每日流产母猪头数监控 9

10 2. 临床症状 Clinical Signs 图 5. 妊娠 90 天以上胎儿的剖检病变 : 明显的间质性肺炎, 肺脏充血出血水肿 10

11 3. 综合诊断 Comprehensive diagnosis 疑似病因分析伪狂犬蓝耳病其他全身性细菌感染 ( 丹毒链球菌弓形体等 ) 11

12 3. 综合诊断 Comprehensive diagnosis ( 续 ) 实验室与临床诊断过程伪狂犬 : 11 月 07 日至 12 月 20 日间共采集 152 份流产母猪与正常母猪血液, 检测 ge 抗体, 均阴性基本排除了伪狂犬感染检测日期病料来源检测数量检测情况 2015/11/7 随机采样母猪群 31 阴性 2015/11/9 流产母猪血样 4 阴性 2015/11/25 流产母猪血样 16 阴性 2015/12/4 流产母猪血样 25 阴性 2015/12/20 流产母猪血样 76 阴性前次伪狂犬的免疫时间 : 伪狂犬 11 月 11 日 ; 12

13 3. 综合诊断 Comprehensive diagnosis ( 续 ) 实验室与临床诊断过程细菌性感染排除 : a. 分为三组投药,10% 阿莫西林 :20 g/ 头 / 天 ( 丹毒链球菌 );62.5% 磺胺氯哒嗪钠 :1.5 g / 头 / 天 ( 弓形体 ); 20% 替米考星 :20g/ 头 / 天 ( 蓝耳病 ) b. 临床反馈 : 替米考星组流产数量较少但各组之间差异性不大 c. 根据用药后的临床反馈, 基本排除全身性细菌性感染因素 ; 13

14 3. 综合诊断 Comprehensive diagnosis( 续 ) 蓝耳病诊断 : 流产胎儿及流产母猪血液利用 PCR 进行病原检测 : a. 实验室一 (12 月 01 日 ):9 头流产的死胎, 蓝耳猪瘟圆环伪狂犬均 real-time PCR 阴性 ; b. 实验室二 (12 月 06 日 ): 将 21 份流产母猪血液与流产胎儿, 混合成 4 个样品,Real-time PCR 诊断, 蓝耳病毒阳性 ( 血液 + 胎儿 ), 伪狂犬阳性 ( 胎儿 ), 圆环阳性 ( 胎儿 ); 14

15 3. 综合诊断 Comprehensive diagnosis( 续 ) 蓝耳病诊断 : ELISA(12 月 02 日 ) 5 S/P Value 发病后第 2 周, 流产母猪的血清 PRRSV ELISA S/P 值 1 份阴性 (3.8%);5 份 (19.2%) 0.4<S/P<2.0;20 份 (77%) 2.0<S/P<4.5 15

16 3. 综合诊断 Comprehensive diagnosis( 续 ) 蓝耳病诊断 : ELISA(06 月 23 日 ) S/P Value 发病前 5 个月妊娠母猪的血清 PRRSV ELISA S/P 值 16 份 (64%) 0.4<S/P<2.0;9 份 (36%) 2.0<S/P<3.0 16

17 3. 综合诊断 Comprehensive diagnosis( 续 ) 蓝耳病血清性诊断 : ELISA 检测结果对比分析时间 6 月 23 日 12 月 02 日 70% 发病前后猪群 PRRSV ELISA S/P 值 S/P<0.4 0/25 (0%) 1/26 (3.8%) 60% 50% 0.4<S/P< <S/P< <S/P< /25 (64%) 9/25 (36%) 0/25 (0%) 5/26 (19.2%) 4/26 (15.4%) 16/26 (61.5%) 40% 30% 20% 10% 0% S/P< <S/P< <S/P< <S/P<4.5 6 月 23 日 12 月 2 日 17

18 3. 综合诊断 Comprehensive diagnosis( 续 ) 蓝耳病 PCR 诊断 12 月 06 日北京某实验室确认 : 流产母猪血清存在 PRRSV 病毒血症 18

19 致病毒株的测序与遗传进化树 12 月 05 日 : 对流产母猪胎次重新采样 ; 送检实验室 ; 并测序, 结果为 NADC30 感染所检测 NADC30 蓝耳毒株的遗传进化树 ( 依据 ORF 6 /7 序列 ) 与 CH-1a,JXA1 及 VR2332 均不在同一个分枝上 19

20 产房仔猪病料 PCR 及序列分析母猪血清与仔猪组织病料 PRRSV 属于同一分支 ; 该病毒株与周边 2 公里内某场的病毒株基因属于同一分支 ; 故运转车辆风媒是本次疾病传播的最大因素 ; 20

21 4. 封群净化方案 Herd closure 后备猪引入 : 一次性引入足量的后备母猪, 满足未来 7 个月使用 ; 同群感染 / 免疫 : 通过全群暴露 PRRSV, 让猪群取得一致的免疫状态基础种猪群 a) 采用带毒血清或疫苗 =>> 我们选择活疫苗 b) 所有存栏种猪 ( 不包括哺乳仔猪 ) 免疫 1 头份蓝耳苗 ;(11 月 27 日 ) c) 间隔 30 天, 第二次普免 1 头份蓝耳苗 ;(12 月 27 日 ) d) 让种猪群 100% 处于同期感染, 同期康复状态 ; 后备母猪群 : 利用流产母猪进行驯化 ; 21

22 4. 封群净化方案 Herd closure( 续 ) 产房管理 a) 闭群期间减少产房仔猪之间的传播 b) 所有断奶仔猪全部出售, 不允许留在场内 ; c) 产房 3 日龄一次性完成去势断尾补铁保健 ; d) 每窝更换手套,24 小时后不再寄养, 人员不允许上产床, 不允许产床刮粪, 抓猪治疗需换手套 22

23 5. 断奶仔猪的跟踪检测 Follow-up testing of weaning piglets 第 12 周开始对病弱断奶仔猪进行蓝耳病毒的 PCR 检测, 每窝一头第一次 : 检测 30 头 (Pool-PCR), 如果阳性,4 周后重新检测 ; 如果全阴,2 周后检测 30 头 ( 第二次 ) 如果阳性,2 周后重新检测 ; 如果全阴,2 周后测 60 头 ( 第三次 ) 如果阳性,2 周后重新检测 ; 如果全阴,2 周后 120 头 ;( 第四次 ) 23

24 5. 断奶仔猪的跟踪检测 Follow-up testing of weaning piglets 检测次数时间血清份数结果 ( 阳性率 ) 第一次 2016/3/5 30 0/6 第二次 2016/3/ /6 第三次 2016/4/ /6 第四次 2016/4/ /12 第五次 2016/5/5 40 0/8 第六次 2016/5/ /22 第七次 2016/5/ /24 自 2015 年 11 月 21 日至 2016 年 03 月 05 日历时 105 天, 首次检测即获得蓝耳阴性仔猪自蓝耳感染 230 天后, 宣布净化成功 24

25 6. 讨论与总结 Dicussion & Summary 此案例的主要表现为母猪流产 ; 对产房仔猪的危害较小但爆发后前两周, 母猪流产均集中于妊娠天, 之后逐渐向后转移并非典型的妊娠后期流产 ; 蓝耳病的实验室诊断可结合 ELISA 方法与 PCR 方法进行 ; 某些实验室无法通过 PCR 方法检测出 NADC30 毒株后备猪的引种运猪车辆控制是本次感染的最大潜在风险封群净化的重点 : 后备猪一次性引入, 全群感染, 严格的产房管理, 持续性断奶仔猪跟踪检测通过封群净化措施, 在 120 天内成功将蓝耳病毒从母猪场内净化, 生产出蓝耳阴性的仔猪 ; 25

26 谢谢大家的关注电话 : 微信 :xiangyangvet 请指正!

serum acclimation

血清驯化在PRRS防控中的应用 Application of serum acclimation/therapy in controlling and preventing PRRS 回顾和分析 Review and analysis 广西农垦永新伍少钦 Shaoqin Wu Email: [email protected] 广西农垦永新畜牧集团良圻原种猪场蓝耳病控制与净化 Control and