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措渔席
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1 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室 HeNan Provincial Key Laboratory of Animal Immunology 猪繁殖与呼吸综合征防控体会郭振华农学博士国家执业兽医师 2016 年 10 月 16 日, 南京手机 : 电子邮箱

2 PRRSV 感染流行历史及现状 1987 年, 美国报道 1990 年, 德国发生 1991 年, 欧洲分离到病毒 1992 年, 北美分离病毒 1995 年, 中国报道 1996 年, 分离到病毒 CH ~2005 年, 经典毒株弱毒疫苗在国内开始大范围使用 2006 年, 中国爆发 PRRS 2007 年, 分离到毒株 JXA1(HP-PRRSV) 2011 年, 高致病性毒株弱毒疫苗在国内大范围使用 2015~2016 现状经典毒株 (CH-1) 高致病性毒株 (JXA1) 未来? NADC30-like 毒株 HENAN-HEB / HENAN-XINX

3 PRRSV 病原简介 1 病毒学分类套式病毒目 (Nidovirals), 动脉炎病毒科 (Arteriviridae), 动脉炎病毒属 (Arterivirus) 2 基因组结构单股正链 RNA 病毒, 大小约 15kb, 编码 16 个非结构蛋白和 8 个结构蛋白 3 分子流行病学 Genotype I: 欧洲型毒株, 以 LV(Lelystad virus) 毒株为代表 ; 进一步又分为 3 个亚型中国已有欧洲毒株的流行 Genotype II: 美洲型毒株, 以 VR2332 毒株为代表, 进一步又分为 9 个系谱 (Lineages) 4 PRRSV 难于防控原因抗原变异基因重组弱毒返祖不同毒株之间血清学交叉保护性差

4 研究简介跟踪 2014 年 10 月份以来, 代表性规模化猪场 PRRS 的发病控制情况, 对比一年来代表性猪场的生产成绩, 评估 : 1) 现有疫苗免疫在 PRRS 防控中的效果 2) 血清学和病原学检测在 PRRS 诊断防控中的应用 3) 总结现阶段 PRRS 的有效防控措施

5 材料方法猪场选择 : 1) 母猪存栏 200~1000 头之间, 2) 相对标准化的猪场建造模式均为一点式生产模式 3) 生产管理水平接近 4) 有农场生产管理软件, 便于监控生产数据诊断检测由专业可靠的检测服务中心提供病原或血清学检测结果

6 PRRS 发病场跟踪观察情况规模场发病猪群及临床表现检测样品猪瘟伪狂犬圆环蓝耳 - 经典蓝耳 - 变异疫苗免疫情况 A 保育喘气, 发烧肺脏, 淋巴结母猪和商品猪均免疫 VR2332 毒株 B 产房仔猪, 发烧, 肺脏, 淋巴死亡率高结 - - NT + - 母猪和商品猪均免疫群免疫 TJM-F92 毒株 C 育肥咳嗽喘气, 肺脏, 淋巴发烧结 - - NT + - D 妊娠母猪流产流产胎儿 E 妊娠母猪流产流产胎儿 F 保育喘气, 发烧肺脏, 淋巴结 - - 弱阳 +( 未区分 ) 母猪群免疫 VR2332 毒株, 商品猪免疫 CH-1R 毒株母猪群免疫 TJM-F92 毒株, 商品猪未免疫疫苗母猪群免疫 VR2332 毒株, 商品猪免疫 TJM-F92 毒株母猪免疫 VR2332 毒株 ; 商品猪未免疫疫苗 G 保育喘气, 发烧肺脏, 淋巴结, 扁桃体 - - NT +( 未区分 ) 母猪群免疫 JX-AR 毒株, 商品猪未免疫疫苗 H 保育喘气, 发烧肺脏母猪群免疫 VR2332 毒株, 商品猪未免疫疫苗

7 代表性规模场生产成绩对比 PRRSV 疫苗未免疫场和免疫场商品猪各阶段生产成绩比较代表性猪场产房仔猪保育猪育肥猪未免疫场免疫场未免疫场免疫场未免疫场免疫场 % 9.38% 1.62% 9.26% 2.22% 8.71% 9.00% P> % 6.38% 7.87% 6.39% 8.53% 4.4% % 3.89% 2.07% 5.06% 3.23% 1.68% % 7.27% 5.33% 5.14% 6.73% 4.34% % 2.63% 0.66% 4.77% 1.47% 3.57% % 7.47% 1.78% 3.97% 2.96% 4.2% % 5.33% 4.67% 7.1% 7.97% 3.71% 平均损失率 5.62% 6.05% 3.43% 5.96% 4.73% 4.37% 各阶段猪群损失率 6.00% 3.00% 0.00% 产房仔猪保育育肥未免异场 5.62% 3.43% 4.73% 免疫场 6.05% 5.96% 4.37%

8 诊断检测血清学 A 血清学监控结果 % 80.00% 60.00% 40.00% 20.00% 0.00% 2013 年 2014 年 2015 年抗体阳性率 77.80% 85.70% 84.90% 猪场阳性率 99.50% 98.70% 98% 疫苗免疫或者 PRRSV 感染的普遍性数据来源 : 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室 B 猪群种猪群保育猪育肥猪良好 S/P 值 0.7~2.0 <1.4 <2.0 离散度 40% 偏高 S/P 值离散度 40% 血清学检测结果结合猪群临床表现血清学检测在疫病防控中的应用 (IDEXX)

9 诊断检测病原学针对 ORF5 的通用型引物 A bp M B HP-PRRSV Classical PRRSV NADC30-like ORF5 基因检测结果及分子进化树构建 A)ORF5 基因的检测, 泳道 1~5 分别对应样品 BJ-4 HN07 HNzm1 HNzm2 HNhx B) 基于 ORF5 基因全序列的分子进化树构建 HNzm1 和 HNzm2 属于 HP-PRRSV 毒株,HNhx 属于 NADC30-like 毒株

10 诊断检测病原学针对 Nsp2 设计的特异型引物 A bp M (CH-1a) 950(HP-PRRSV) 647(NADC30-like) B TSFDWNVVLPGVEAANQTTKQLHVNQCRALVPVVTQEPLDKDSVPLTAFSLSNCYYPAQGDEVRHRERLNSVLSKLEGVVLEEYGLMSTGLGPRPVLPSGLDELKDQMEEDLLKLANAQATSEMMAWAAEQVDLKAWVKSYPRWTPPPPP TSFDWNVVLPGVVAANQTTEQPHVNSCCTLVPPVTQEPLGKDSVPLTAFSLSNCYYPAQGDEVHHRERLNSVLSKLEEVVLEEYGLMSTGLGPRPVLPSGLDELKDQMEEDLLKLANTQATSEMMAWAAEQVDLKAWVKSYPRWTPPPPP TSFDWNVVLPGVEAANQTTDQPHVNSCCTLVPPVTQEPLGKDSVPLTAFSLSNCYYPAQGDEVHHRERLNSVLSKLEEVVLEEYGLMSTGLGPRPVLPSGLDELKDQMEEDLLKLTNTQATSEMMAWAAEQVDLKAWVKSYPRWTPPPPP TSFDWNVVLPRVEAANQTTDQPHVNSCCTLVPPVTQEPLGKDSVPLTAFSLSNCYYPAQGDEVHHRERLNSVLSKLEEVVLEEYGLMSTGLGPRPVLPSGLDELKDQMEEDLLKLTNTQATSEMMAWAAEQVDLKAWVRSYPRWTPPPPP TSFDWDVVLPGVGVAAQAAKLPLINQCHAPVTVVTQKSL TSFDWGFVLPGVEMVAQAAELPLVNQCHAPVTVVAQRSS CH-1a JXA1 HNzm1 HNzm2 HNhx NADC30 481/ PRVQPRKTKPVKSLPENKPVPAPRRKVGSDCGSPILMGDNVPNGWEDFAVGGPLDFPTPSEPMTPLSEPVLMPASQHIPRPVTPLSGPAPVPAPRRTVSRPMTPLSEPIFVSAPRHKFQQVEEANPAATTLTYQDEPLDLSAFSQTECEA PRVQPRRTKSVKSLPEGKPVPAPRRKVRSDCGSPVLMGDNVPNGSEE-TVGGPLNFPTPSEPMTPMSEPVLVPASRRVPKLMTPLSGSAPVPAPRRTVT TTLTHQDEPLDLSASSQTEYEA PRVQPRRTKSVKSLPEGKPVPAPRREVRSDCSSPVLMGDNVPNGSEE-TVGGPLNFPTPSEPMTPMNEPALVPASRRVPKLMTPLSGSAPVPAPRRTVT TTLTHQDEPLDLSVSSQTEYEA PRVQPRRTKSVKSLPEGKPVPAPRRKVRSDCSSPVLMGDNVPNGSEE-TVGGPLNFPTPSEPMTPMSEPVLVPASRRVPKLMTPLSGSAPVPAPRRTVT TTLTHQDEPLDLSVSSQTEYEA PEFQSRKAESVRSLPENRPLPAPRRKIRSRCGSLVSLGGNFPDSWEDL-AGGPFRSPVLPESVARSNEPV PVPAPRRTVSRLKPSPIVSTPVPAPRCGLQQVEGMNLAVGTLACQDELLDLSTSSQTEYEA PEFQSQKAESVRSLPENRPTPTPRKKIRPRCGSLVSLGSNIPDSWGDL-VGGSFHSPVQPESVARSNEPV PVPAPRRTVSRLKPSPITSTPVPAPRCGLQQVGGMNLAVGTPACQDRLLDLSASSQTEYEA CH-1a JXA1 HNzm1 HNzm2 HNhx NADC30 无缺失 30aa 缺失 131aa 缺失

11 小结 1 PRRSV 逐步成为猪场的一种常在病毒, 呈亚临床感染长期存在, 在特定条件下表现出较严重的临床疾病 ( 应激源 ) 2 中国田间流行的 PRRSV 毒株多样性在进一步加大目前以 HP-PRRSV 和 2013 年以来新出现的 NADC30-like 毒株为主, 后者应着重关注

12 PRRS 防控措施 1. 疫苗免疫科学使用疫苗种类毒株新兽药证书时间研发机构及企业灭活疫苗 CH-1a 株 2005 年哈尔滨维科 NVDC-JXA1 农医药便函 (2007)176 号温氏大华农 R98 株 2009 年南农高科 / 瑞普 / 中岸弱毒苗 ( 经典毒株 ) CH-1R 株 2007 年哈尔滨维科 VR 年 4 月勃林格 JXA1-R 2011 年中国动物疾病预防控制中心 HuN4-F112 株 2011 年中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨维科生物技术开发公司上海海利生物药品有限公司吉林正业生物制品股份有限公司哈药集团生物疫苗有限公司弱毒疫苗 ( 高致病毒株 ) TJM-F92 株 2011 年北京健翔和牧生物科技有限公司中国农业科学院特产研究所吉林特研生物技术有限责任公司山西隆克尔生物制药有限公司新疆天康畜牧生物技术股份有限公司吉林国原动物保健品有限公司青岛易邦生物工程有限公司 GDr180 株 2015 年广东永顺, 国兽医药品监察所 TJM-F92 株 +C 株 2015 年华威特中监所硕腾中牧 7 种毒株,10 类疫苗产品

13 PRRS 防控措施 1. 疫苗免疫科学使用后备猪和母猪群应根据本场具体情况来确定公猪不进行免疫商品猪不建议做, 有时出于疫病控制的考虑, 可阶段性使用重新认识自家组织灭活疫苗在疫病控制中的作用

14 PRRS 防控措施 2. 重视生产工艺改进两点式的生产布局对于猪场疫病的防控净化具有重要的意义商品猪群经历了一个蓝耳缓慢温和感染的过程, 蓝耳处于阳性稳定状态

15 PRRS 防控措施 2. 重视生产工艺改进两点式的生产布局对于猪场疫病的防控净化具有重要的意义

16 PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善环境控制是防控 PRRS 的关键因素夏季通风模式和冬季通风模式

17 PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善环境控制是防控 PRRS 的关键因素屋顶进风口屋顶出风口夏季通风模式和冬季通风模式

18 PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善环境控制是防控 PRRS 的关键因素冬季通风模式 ( 管道式通风 )

19 冬季通风模式 ( 管道式通风 ) PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善环境控制是防控 PRRS 的关键因素

20 冬季通风模式 ( 管道式通风 ) PRRS 防控措施 3. 环境控制的改善

21 PRRS 防控措施 4. 重视通过生产环节的改进来控制清除病毒全进全出 : 转群标准的设定与执行空舍消毒 : 清洁清洗消毒干燥部分清群或者闭群 : 制定周密的生产调整计划后备猪驯化流程

22 小结猪场建设布局环境改善 ( 温度和通风 ) 生产流程标准化疫苗和药物的应用疫苗免疫是疫病防控的最后一道防线, 而非第一道防线大多数的疫苗免疫不是消除性免疫或者不再发生感染的免疫

23 郑州国际会展中心谢谢您的倾听河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

24 欧洲型美洲型 East European L9 ATP/JA142 CH-1a JXA1 L8 East European L7 L6 MLV/VR2332 BJ-4 L5.1 L5.2 L4 L3 L2 Pan-European Tomasz Stadejek, Martin B. Oleksiewicz et al,2008 MN184A~C NADC30 NADC30-like Mang Shi, Tommy Tsan- Yuk Lam et al,2010 L1

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重要声明长城证券股份有限公司编制本报告的内容及信息来源于陕西东岭工贸集团股份有限公司提供的证明文件以及第三方中介机构出具的专业意见长城证券对报告中所包 2015 年陕西东岭工贸集团股份有限公司 ( 宝鸡市马营路东段 ) 公司债券受托管理事务报告 (2015 年度 ) 债券代理人长城证券股份有限公司 ( 深圳市福田区深南大道 6008 号特区报业大厦 16-17 层 ) 2016 年 4 月 12 日 1 重要声明长城