序 Director of the sequence (104) e 費 雯 綺 105 6

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1 中 華 民 國 一 五 年 六 月 出 版

2 序 Director of the sequence (104) e 費 雯 綺 105 6

3 目 錄 C ontents 1 2 鮮 食 蔬 果 農 藥 殘 留 調 查 2 作 物 中 非 多 重 殘 留 檢 測 法 農 藥 殘 留 之 調 查 2 果 菜 類 上 市 前 把 關 技 術 建 立 4 農 作 物 農 藥 使 用 推 薦 方 法 合 理 性 探 討 及 安 全 評 估 4 建 立 農 藥 殘 留 快 速 篩 檢 技 術 5 油 料 作 物 重 金 屬 檢 驗 與 調 查 研 究 5 油 料 作 物 產 品 農 藥 殘 留 檢 驗 方 法 建 立 與 調 查 研 究 6 7 天 然 及 生 化 植 物 保 護 資 材 商 品 化 研 發 及 有 效 應 用 毒 理 試 驗 7 農 藥 對 內 分 泌 干 擾 作 用 影 響 之 評 估 8 農 藥 對 動 物 毒 性 及 混 合 殘 留 危 險 之 評 估 17 國 產 油 茶 與 胡 麻 成 分 對 調 節 血 脂 與 預 防 心 血 管 疾 病 之 動 物 模 式 確 效 研 究 21 I

4 目 錄 應 用 基 準 劑 量 分 析 技 術 探 討 常 用 農 藥 對 人 體 健 康 風 險 評 估 22 系 統 性 評 估 農 藥 撲 克 拉 之 毒 性 及 內 分 泌 干 擾 作 用 25 類 荷 爾 蒙 農 藥 對 雄 大 鼠 發 身 與 甲 狀 腺 功 能 影 響 研 究 25 符 合 GLP 規 範 之 理 化 性 質 及 毒 理 試 驗 開 發 防 治 香 蕉 黃 葉 病 與 草 莓 葉 蟎 之 微 生 物 資 材 30 開 發 防 治 線 蟲 之 非 化 學 資 材 30 微 生 物 農 藥 菌 種 資 源 檢 驗 新 技 術 之 開 發 31 研 發 增 益 植 物 健 康 之 多 功 能 蘇 力 菌 資 源 32 雜 草 之 植 物 源 除 草 資 材 研 發 33 防 治 作 物 病 害 及 促 進 作 物 生 長 之 木 黴 菌 研 發 34 微 生 物 資 材 對 難 防 治 小 型 害 蟲 薊 馬 粉 蝨 與 蚜 蟲 之 防 治 效 力 評 估 36 液 化 澱 粉 芽 孢 桿 菌 Nanall 防 治 蝴 蝶 蘭 黃 葉 病 之 資 材 商 品 開 發 與 產 業 應 用 評 估 成 品 農 藥 檢 測 多 重 分 析 方 法 精 進 37 分 子 標 靶 設 計 之 安 全 農 藥 開 發 37 II

5 C ontents 農 藥 製 劑 有 效 性 及 安 全 性 之 改 良 38 新 劑 型 之 理 化 特 性 研 究 40 天 然 及 生 化 植 物 保 護 資 材 商 品 化 開 發 及 有 效 應 用 理 化 試 驗 40 昆 蟲 性 費 洛 蒙 及 登 記 資 料 提 審 服 務 41 液 體 皂 植 保 製 劑 防 治 小 黃 瓜 蚜 蟲 之 商 品 化 研 發 與 應 用 41 肉 桂 油 微 乳 劑 ( 黑 修 羅 ) 防 治 番 茄 根 瘤 線 蟲 之 商 品 化 研 發 與 應 用 42 五 倍 子 中 草 藥 植 保 製 劑 ( 活 力 能 ) 防 治 草 莓 炭 疽 病 之 商 品 化 研 發 與 應 用 42 坡 縷 石 可 濕 性 粉 劑 防 治 紋 白 蝶 及 斜 紋 夜 蛾 之 商 品 化 研 發 與 應 用 42 中 和 亞 磷 酸 製 劑 防 治 番 茄 疫 病 之 商 品 化 研 發 及 應 用 43 乳 化 植 物 油 製 劑 防 治 胡 瓜 白 粉 病 之 商 品 化 研 發 及 應 用 43 草 酸 防 治 蜂 蟹 蟎 新 資 材 的 商 品 化 利 用 43 TK99 水 懸 劑 防 治 薊 馬 危 害 柑 橘 幼 果 之 商 品 化 研 發 與 應 用 43 油 茶 粕 於 天 然 殺 蝸 牛 劑 產 品 化 開 發 與 利 用 侷 限 導 管 細 菌 替 代 性 寄 主 植 物 及 媒 介 昆 蟲 相 關 性 探 討 45 臺 灣 農 田 難 防 治 雜 草 之 生 態 與 防 治 研 究 45 植 物 源 植 物 保 護 資 材 防 治 果 樹 炭 疽 病 之 評 估 46 III

6 目 錄 開 發 觀 賞 植 物 輸 出 前 介 質 中 雜 草 種 子 活 力 滅 除 技 術 46 殺 蟲 劑 對 蜜 蜂 之 毒 性 評 估 47 果 樹 炭 疽 病 菌 之 致 病 性 與 化 學 防 治 47 油 茶 關 鍵 害 物 調 查 與 用 藥 需 求 評 估 47 殺 菌 劑 對 木 黴 菌 之 毒 性 評 估 48 延 伸 使 用 之 藥 效 驗 證 研 究 調 查 方 法 標 準 化 49 建 全 農 藥 容 許 量 與 其 使 用 方 法 一 致 性 之 研 究 50 臺 灣 地 區 農 藥 對 蜜 蜂 風 險 研 析 50 強 化 植 物 有 害 生 物 防 範 措 施 蟲 媒 植 物 病 原 原 核 生 物 之 偵 測 與 培 養 技 術 研 習 會 51 薊 馬 在 蔬 果 上 之 為 害 損 失 形 式 及 其 監 測 技 術 之 改 進 51 蟲 媒 傳 播 植 物 病 毒 之 取 食 行 為 與 防 治 之 研 究 52 殺 菌 劑 對 植 物 病 原 真 菌 之 藥 效 及 抗 藥 性 評 估 52 害 蟲 對 殺 蟲 劑 之 感 受 性 與 抗 藥 性 評 估 及 農 藥 延 伸 使 用 之 精 進 研 究 54 殺 蟎 劑 對 植 物 葉 蟎 及 根 蟎 之 藥 效 及 抗 藥 性 評 估 56 IV

7 C ontents 臺 灣 農 田 抗 性 雜 草 之 監 測 與 管 理 57 入 侵 紅 火 蟻 全 面 防 除 計 畫 57 植 物 重 大 有 害 生 物 監 測 預 警 及 診 斷 服 務 58 重 要 蔬 果 作 物 小 菜 蛾 及 薊 馬 類 抗 藥 性 監 測 與 管 理 策 略 之 開 發 與 應 用 58 外 來 植 物 入 侵 潛 能 風 險 評 估 量 表 之 建 立 持 久 性 藥 物 與 病 原 菌 對 環 境 安 全 之 評 估 研 究 70 V

8 目 錄 檳 榔 耕 作 環 境 農 藥 殘 留 監 測 71 利 用 開 頂 式 燻 氣 室 探 討 臭 氧 環 境 下 對 作 物 水 稻 產 量 之 影 響 72 市 售 堆 肥 中 食 媒 性 病 原 菌 之 調 查 研 究 72 茶 葉 中 有 機 污 染 物 檢 測 技 術 及 調 查 評 估 水 產 動 物 中 新 興 污 染 物 之 殘 留 分 析 74 禽 及 蛋 類 產 品 中 多 溴 聯 苯 類 有 機 污 染 物 之 檢 測 74 農 水 畜 產 品 中 藥 物 殘 留 容 許 量 之 國 際 調 和 與 適 用 性 調 查 建 構 農 產 品 農 藥 安 全 檢 測 資 訊 聯 繫 系 統 76 農 藥 毒 理 及 田 間 施 用 查 詢 系 統 與 重 要 病 蟲 害 圖 鑑 之 建 構 研 究 76 農 藥 資 訊 檢 索 資 料 庫 整 合 平 台 之 建 構 與 應 用 系 統 開 發 研 究 產 業 議 題 導 向 之 農 業 科 技 計 畫 先 期 作 業 規 劃 研 究 - 藥 毒 所 小 科 管 平 台 運 作 79 農 民 學 院 病 蟲 害 防 治 及 安 全 用 藥 課 程 訓 練 成 效 追 蹤 評 核 之 研 究 80 VI

9 C ontents 中 部 地 區 蔬 菜 產 業 青 年 農 民 經 營 管 理 能 力 建 構 及 輔 導 效 能 之 研 究 81 農 業 訓 練 品 質 管 理 輔 導 行 動 研 究 82 社 區 人 力 活 化 運 用 輔 導 之 研 究 年 度 農 民 學 院 農 民 訓 練 計 畫 VII

10 2015 Annual Report 壹 試 驗 研 究 試 驗 研 究 1

11 一 加 強 農 藥 安 全 使 用 殘 留 檢 測 之 研 究 壹 試 驗 研 究 QuEChERS method LC-MS/MS GC-MS/MS ( ) ( ) ~20% 80% 3~19% 貳 技 術 服 務 參 附 錄 ppm ppm 2

12 2015 Annual Report 0001 ppm ppm 7 44 ( ) ( 1) 1 ( ) (ppm) 量 (ppm) ( ) ( )

13 104 6 (PHRL) ppm PHRL 1 ppm PHRL 4 ( 0 ) 2 (PHI) 6 12 PHI 20 (25 ) 5% 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 3 PHI 4 10 ( ) PHI PHI 4

14 2015 Annual Report 建立農藥殘留快速篩檢技術 農藥殘留化學檢驗法 可同時分析最多數的藥劑 達到準確定性定量之目的 但需 配合適當的前處理方法 以液相或氣相層析質譜儀進行分析 此過程除需要大量時間 尤以樣品前處理及農藥萃取最為耗時 缺乏一個快速可檢測多種農藥之檢測方法 使農 藥化學檢測之即時性不足 本研究完成開發可適用於所有農產品殘留農藥快速萃取套 組 萃取操作時間少於 1 分鐘 (圖 1) 另一方面 藉由改進儀器分析條件以縮短 LC-MS/ MS 儀器分析時間至 10 分鐘 並應用 APCI 技術將 22 種 GC-MS/MS 的藥劑移往 LC-MS/ MS 分析 本研究建立之方法期能應用於田間蔬果中之農藥殘留檢測 提早為保障消費者 食用安全做一把關 圖 1 一步驟淨化萃取技術示意圖 油料作物重金屬檢驗與調查研究 重金屬藉由自然發生的過程或是人類活動行為而進入生態系 環境中重金屬可藉由 作物吸收而轉移至食品中 進入食物鏈後可能會產生生物累積作用 而對人類健康產生 危害 近年來屢有食用油受重金屬污染事件發生 造成民眾對食用油的安全產生疑慮 為了評估風險 檢測食用油脂中的重金屬確有其必要性 本試驗建立應用微波消化法及 感應耦合電漿質譜儀分析油料作物中砷 鎘 鉻 銅 汞 鎳 鉛與鋅的檢測方法 並 進行方法確效 油茶 (圖 2) 及芝麻作物分析方法最低定量極限介於 mg/kg 砷回收率介於 % 其他重金屬回收率 % 重複性試驗相對變異係數介於 % 採集桃園市及南投縣 9 件油茶樣品榨成苦茶油檢測重金屬 結果顯示除有三 5

15 壹 試驗研究 件樣品檢出銅元素 ( mg/kg) 外 其他元素皆檢測不到 貳 技術服務 油料作物產品農藥殘留檢驗方法建立與調查研究 參 附錄 圖 2 油茶果實構造 建立苦茶油產品農藥殘留檢測規格及管理標準實為完善苦茶油產業重要之一環 方 能強化苦茶食用油產業之健康安全性 本試驗參照歐盟訂定農產品中農藥殘留分析方法 (QuEChERS) 及衛福部公告之多重殘留分析方法 (五) 進行 458 種農藥於苦茶油 芝麻 油 苦茶籽及芝麻樣品中 2 種濃度各 3 重複之回收率及重複性測試 (圖 3) 並以 GC-MS/ MS 及 LC-MS/MS 進行定性與定量分析 在符合平均回收率介於 70%-120% 及回收率重 複的偏差係數小於 20% 的評估標準下 結果顯示 70%-80% 的農藥符合標準 另進行於 苦茶油 芝麻油 苦茶籽及芝麻樣品中 1 種濃度 3 重複之再現性測試 結果顯示 90% 以 上的農藥符合標準 其檢測方法定量極限測試 結果顯示 90% 以上的農藥其定量極限可 005 ppm 圖 種農藥於苦茶油 芝麻油 苦茶籽及芝麻樣品中之回收率 重複性及再現性測試結果 6

16 2015 Annual Report 二 毒理檢測技術之研發 天然及生化植物保護資材商品化研發及有效應用 毒理試驗 本計畫以支援天然植物保護資材商品化及有效應用之整合型計畫 目的是建構天然 資材商品化運作平台 進行資材產品登記所需毒理試驗項目需求之製備 本年度延續去 年點收的 10 種產品與今年點收的 3 種產品 依據初步評估所需的毒理試驗項目陸續進行 毒理試驗 結果乳化植物油製劑對大鼠口服急毒性 LD50 為 5000 mg/kg (低毒) 具輕微 眼刺激性與具皮膚過敏性 蜜蜂口服急毒性與蜜蜂接觸急毒性 LD50 均為 100 μg/bee (低 毒) 肉桂油乳劑對大鼠口服急毒性 LD50 為 5000 mg/kg (低毒) 呼吸急毒性 LC50 為 2246 mg/l (輕毒) 但具嚴重眼刺激性及中度皮膚刺激性 且具潛在皮膚過敏性 液體 皂植保製劑口服急毒性與蜜蜂急毒性亦為低毒 且具嚴重刺激性 但不具皮膚過敏性 斜紋夜蛾性費洛蒙及甜菜夜蛾性費洛蒙等 2 種產品 則依費洛蒙理化特性及使用方法 預期對人畜風險低 不需動物毒理安全評估試驗資料 (表 2) 綜合以上結果得知 乳化植 物油製劑 肉桂油乳劑 液體皂植保製劑 斜紋夜蛾性費洛蒙及甜菜夜蛾性費洛蒙等 5 表 2 五種天然資材產品之綜合安全性評估 產品名稱 乳化植物油製劑 7 研發單位 農試所 毒理試驗項目 結 果 備註 口服急毒性 眼刺激性 皮膚過敏性 蜜蜂口服急毒性 蜜蜂接觸急毒性 口服急毒性 呼吸急毒性 眼刺激性 皮膚刺激性 皮膚過敏性 大鼠口服急毒性為低毒 白兔具輕微眼刺激性 小鼠具潛在皮膚過敏性 103年延續 蜜蜂口服急毒性為低毒 蜜蜂接觸急毒性為低毒 大鼠口服急毒性為低毒 大鼠呼吸急毒性為輕毒 白兔具嚴重眼刺激性 103年延續 白兔具中度皮膚刺激性 小鼠具潛在皮膚過敏性 大鼠口服急毒性為低毒 ph>11 口服急毒性 直接標示具腐蝕性 (具嚴重眼刺 眼刺激性 激性) 不再進行動物試驗 皮膚過敏性 103年延續 小鼠不具皮膚過敏性 蜜蜂口服急毒性 蜜蜂口服急毒性為低毒 蜜蜂接觸急毒性 蜜蜂接觸急毒性為低毒 肉桂油乳劑 同黑修羅乳劑 農試所 液體皂植保製劑 農試所 斜紋夜蛾性費洛蒙VP 藥毒所 不需毒理試驗 評估-對人畜風險低 104年新增 甜菜夜蛾性費洛蒙VP 藥毒所 不需毒理試驗 評估-對人畜風險低 104年新增

17 3 ( ) 1 herα-hela H295R herα-hela-9903 herα- HeLa-9903 MCF-7 (E-screen) herα-hela-9903 E2 ( 4 5) 2 H295R H295R ( 3) (17αethynylestradiol, EE, ) 5 mg/kg/day EE (testosterone, T) (luteinizing hormone, 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 8

18 2015 Annual Report 圖 4 herα-hela-9903 細 胞 與 第 滅 寧 (Deltamethrin) 芬 化 利 (Fenvalerate) 及 益 達 胺 (Imidacloprid) 共同處理 24 小時後經冷光表現檢測促雌激素作用 數據呈現以 mean±sd (n=4~5) A 圖為每次試驗之品質控制 10-9 M E2 陽性對照組 (PC) 與 01% DMSO 溶劑對 照組 (VC) 相比需大於等於 4 倍 ** 表示與溶劑對照組相比 經雙尾 t-test 分析 p<001 B C D 圖為三種農藥之 7 組濃度與溶劑對照組經 one-way ANOVA 分析得顯著 差異結果 (p<005) 後再以 Dunnett test 事後檢定 ** 表示經 Dunnett test 分析與溶劑對 照組相比有小於 1% 顯著性 LH) 濃度 增加激甲狀腺素 (thyroid stimulating hormone, TSH) 濃度 對三碘甲狀腺素 (triiodothyroxine, T3) 甲狀腺素 (thyroxine, T4) 激濾泡素 (follicular stimulating hormone, FSH) 及環化酶 (aromatase) 等濃度無明顯影響 芬化利 第滅寧及益達胺等三藥劑均增加 血清中 E2 濃度 (圖 9) 但均降低 T3 (圖 6) T 4 (圖 7) TSH (圖 8) 及 aromatase (圖 10) 等濃度 對 T LH 及 FSH 等濃度均無明顯影響 就甲狀腺組織絕對與相對重而言 三 藥劑除第滅寧降低甲狀腺不含氣管相對重外無明顯影響 但三藥劑均降低雌大鼠 T3 T4 TSH 及 aromatase 等濃度 且在另一以雄大鼠為試驗動物研究中 芬化利增加雄大 鼠血清中 T3 與 TSH 對 E2 T4 LH T FSH 及 aromatase 無明顯影響 第滅寧在低 9

19 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 圖 5 MCF-7 細 胞 與 第 滅 寧 (Deltamethrin) 芬 化 利 (Fenvalerate) 及 益 達 胺 (Imidacloprid) 共 同 處 理 120 小 時 經 染 色 觀 測 細 胞 增 生 情 形 用 於 檢 測 促 進 或 抑 制 雌 激 素 作 用 數 據 呈 現 以 mean±sd (n=3~4) A B C 圖 為 各 農 藥 單 獨 與 細 胞 作 用, 而 D E F 圖 為 各 農 藥 與 陽 性 對 照 組 (10-9 M E2) 及 細 胞 共 同 作 用, 各 農 藥 有 7 組 濃 度 和 溶 劑 對 照 組 (01% DMSO, VC) 或 陽 性 對 照 組 (10-9 M E2) 經 one-way ANOVA 分 析 得 顯 著 差 異 結 果 (p<005) 後 再 以 Dunnett test 事 後 檢 定 **" 表 示 經 Dunnett test 分 析 與 溶 劑 對 照 組 或 陽 性 對 照 組 相 比 有 小 於 1% 顯 著 性 10

20 2015 Annual Report 表 3 各農藥對類固醇生成作用影響之檢測結果摘要 農 藥 結果摘要 Deltamethrin 第滅寧 無影響 Fenvalerate 芬化利 無影響 Imidacloprid 益達胺 無影響 Dimethomorph 達滅芬 較高劑量刺激動情素生成 Fenitrothion 撲滅松 高劑量抑制動情素生成 中劑量促進睪固酮生成 Procymidone 撲滅寧 高劑量刺激動情素生成 抑制睪固酮生成 低劑量抑制睪固酮生成 Permethrin 百滅寧 高劑量刺激動情素 睪固酮生成 低劑量抑制睪固酮生成 Ametryn 草殺淨 高劑量刺激動情素生成 Quizalofop-ethyl 快伏草 高劑量刺激動情素 睪固酮生成 Iprodione 依普同 高劑量及低劑量抑制睪固酮生成 Probenazole 撲殺熱 低劑量抑制動情素 睪固酮生成 Diuron 達有龍 低劑量抑制動情素 睪固酮生成 Cypermethrin 賽滅寧 高劑量刺激睪固酮生成 mg/kg/day 圖 6 芬化利 第滅寧和益達胺等三種農藥對雌大鼠血清中三碘甲狀腺素濃度影 圖 6 芬化利 第滅寧和益達胺等三種農藥對雌大鼠血清中三碘甲狀腺素濃度影響 響 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not are not statistically different according to thetest ANOVA test at p 005 statistically different according to the ANOVA at p

21 圖 6 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 農 藥 對 雌 大 鼠 血 清 中 三 碘 甲 狀 腺 素 濃 度 影 響 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not statistically different according to the ANOVA test at p 005 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 mg/kg/day 圖 7 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 農 藥 對 雌 大 鼠 血 清 中 甲 狀 腺 素 濃 度 影 響 圖 7 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 農 藥 對 雌 大 鼠 血 清 中 甲 狀 腺 素 濃 度 影 響 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not not statistically different different according according to the ANOVA to the ANOVA test at p 005 test at p 005 參 附 錄 1 圖 8 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 mg/kg/day 三 種 農 藥 對 雌 大 鼠 血 清 中 激 甲 狀 腺 素 濃 度 影 圖 8 響 芬 Data 化 利 第 are 滅 寧 means 和 益 達 of 胺 10 等 三 replicates± 種 農 藥 對 雌 standard 大 鼠 血 清 error 中 激 甲 Bars 狀 腺 素 labeled 濃 度 影 by 響 the same letter are Data not are statistically means of 10 different replicates± according standard to the error ANOVA Bars labeled test at by p the 005 same letter are not statistically different according to the ANOVA test at p

22 圖 8 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 農 藥 對 雌 大 鼠 血 清 中 激 甲 狀 腺 素 濃 度 影 響 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter 2015 Annual are not statistically Report different according to the ANOVA test at p 005 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not statistically different according to the mg/kg/day ANOVA test at p 005 圖 9 圖 芬 9 化 利 芬 化 第 利 滅 寧 第 和 益 滅 達 寧 胺 和 等 益 三 達 種 農 胺 藥 等 對 三 雌 種 大 農 鼠 血 藥 清 對 中 雌 大 素 鼠 二 血 醇 濃 清 度 中 影 雌 響 素 二 醇 濃 度 影 響 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not statistically different according to the ANOVA test at p mg/kg/day 圖 10 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 農 藥 對 雌 大 鼠 血 清 中 環 化 酶 濃 度 影 響 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not statistically 圖 10 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 農 藥 對 雌 大 鼠 血 清 中 環 化 酶 濃 度 影 響 different according to the ANOVA test at p 005 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not statistically different according to the ANOVA test at p 005

23 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 圖 11 農 藥 對 斑 馬 魚 生 殖 能 力 之 影 響 (A) (C) (E) 21 天 累 積 產 卵 量, control 低 劑 量 中 劑 量 高 劑 量,(B) (D) (F) 平 均 每 日 產 卵 量 (A-B) 益 達 胺 08, 40, 200 μg/l,(c-d) 芬 化 利 0012, 0060, 0300 μg/l,(e-f) 第 滅 寧 00032, 00160, μg/l *, Statistically significant difference from controls at p <01,** p <005 14

24 2015 Annual Report Control Low Mdium High 益達胺 Control 芬化利 Low EE 第滅寧 Mdium (A) High 益達胺 芬化利 第滅寧 EE (B) 圖 12 雄性 (A) 及雌性 (B) 斑馬魚暴露不同農藥原體 (21 日 ) 魚尾 VTG 蛋白含量 益達胺 08, 40, 200 μg/ L 芬化利 0012, 0060, 0300 μg/l 第滅寧 00032, 00160, μg/l *, Statistically significant difference from controls at p <005 ** p <001 *** p <

25 03 mg/kg/day 1 mg/kg/day E2 T3 TSH FSH aromatase T4 LH T3 TSH aromatas FSH T4 T LH E2 啓 - - (hypothalamic- pituitary- gonadalaxis) Tier I (no observed adverse effect level, NOAEL) (benchmark dose lower bound, BMDL) BMDLhormone or tissue /BMDLchronic BMDLhormone or tissue /NOAELchronic 1 1 Tier II Tier II BMDL 1 ADI NOAELchronic mg/kg/day NOAEL mg/kg/ day BMDLtissue /BMDLchronic BMDLtissue / NOAELchronic 1 NOAEL mg/kg/day BMDLhormone / BMDLchronic BMDLhormone / NOAELchronic 1 4 (00800 μg/l) 21 ( 11) (vitellogenin, VTG) ( 12) VTG herα-hela- 9903hERα - HeLa-9903 E2 H295R E2 T LH FSH T3 T4 TSH aromatase - - 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 16

26 2015 Annual Report (Guideline) ( 4) ( 5) (OECD test guideline 207) CO 1 ITS - 4 ( ) ( ) 48 ( 6) (1000 μg/cm 2 ) 48 17

27 ( ) 495 SC (LC 50 >1000 μg/cm 2 ) (LC 50 >1000 μg/cm 2 ) (LC μg/ cm 2 ) (LC μg/cm 2 ) ( ) 40 SC (LC μg/cm 2 ) 249 EC (LC μg/cm 2 ) 23 SC (LC μg/cm 2 ) BUN Creatinine BUN (mg/dl) Creatinine (mg/dl) ) 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 ) BUN Creatinine ± 3-5 * Student s t-test (p < 005) 18

28 2015 Annual Report SGOT SGPT gamma-gt SGOT (U/l) SGPT (U/l) gamma-gt (mg/dl) 76 ± 6 1) 34 ± 5 10 ± ± ± 5 20 ± ± 7 33 ± 5 18 ± ± ± ± ± 6 23 ± 5 16 ± ± ± ± ± ± 7 10 ± ± ± 3 13 ± ± 3 31 ± ± ± 8 14 ± 5 18 ± ± 9 30 ± 5 28 ± ± 5 25 ± 4 22 ± ± ± 3 14 ± ± ± 3 23 ± ± ± 4 14 ± ± ± 2 15 ± 06 1) SGOT SGPT gamma-gt 3-5 * Student's t-test ( p < 005) OECD test Guideline 403 (2009) US EPA OCSPP (1998) 215 Sprague-Dawley (SD) (8-12) SD (X ) (LC 50 ) US EPA probit 1023 mg/l 19

29 (MMAD) (GSD) ( ) μm ( ) ( ) (p <005) (Y ) ( ) mg/l MMAD GSD ( ) μm ( ) 14 (2 mg/l) LC 50 > 2 mg/l (Guideline) 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 6 4 ( ) ( ) (LC 50 ) ( ) >1000 μg/cm SC ( ) >1000 μg/cm 2 ( ) 48 μg/cm EC 12 μg/cm 2 ( ) 135 μg/cm 2 23 SC 54 μg/cm 2 ( ) >1000 μg/cm 2 40 SC 141 μg/cm μg/cm 2 ( <1 μg/cm μg/cm μg/cm μg/ cm 2 >1000 μg/cm 2 ) SPSS Probit LC 50 20

30 2015 Annual Report 國產油茶與胡麻成分對調節血脂與預防心血管疾病 之動物模式確效研究 本試驗一方面建立 3T3-L1 及 HepG 2 調節血脂之細胞快篩平台 (圖 13) 另一方面建 立倉鼠之評估動物試驗模式以評估驗證國產油茶及胡麻調節血脂功能 (圖 14) 藉由對細 胞與動物試驗 完成評估所測試之加工形式之國產油茶及胡麻調節血脂機能性 以配合 國產油茶及胡麻保健食品之開發及符合衛福部之調節血脂功能性驗證需求 可提昇國產 油茶及胡麻之附加價值及競爭力 Nile red FSC-Height FSC-Height Nile red Blank control 300μM Nile red Galic acid 150μM SSC-Height Counts SSC-Height Blank control 0μM Counts FSC-Height Counts SSC-Height Counts SSC-Height Hypolipidemic effect of gallic acid on 3T3-L1 cells FSC-Height Nile red Galic acid 600μM 圖 13 以 3T3-L1 細胞調節血脂快篩試驗 驗證油茶中指標性成分 gallic acid 調節血脂能力 圖 14 倉鼠之評估動物試驗模式以評估驗證國產油茶及胡麻調節血脂功能 21

31 (benchmark dose soft, BMDS) (benchmark dose lower bound, BMDL) BMDL NOAEL BMD 29 BMDL BMD BMDL (mg/kg/day) (SF) (RfD) (mg/ kg/day) ( 7) Tier I BMDL BMDLEDC /BMDLChr BMDLEDC / NOAELChr 1 Tier II Tier II BMDL 1 ADI 9 (T3) (male and female E2 male and female TSH aromatase) (LH) (FSH T3) (T) BMD BMDL NOAEL 1 1 ( 8) 9 NOAEL NOAEL 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 22

32 2015 Annual Report BMD No Pesticide RfD (BMDL/SF) 1 Acephate ( ) Carbofuran ( ) Chlorpyrifos ( ) Methomyl ( ) Terbufos ( ) Carbendazim( ) Fenitrothion ( ) Paraquat ( ) Captan ( ) Methidahtion ( ) Carbosulfan ( ) Fipronil ( ) Thiodcarb ( ) Abamectin ( ) Iprodione ( ) Triadimefon ( ) Propineb ( ) Propamocarb HCl( ) Chlorpyrifos-CH3 ( ) Propoxur ( ) Diflubenzuron ( ) Etofenprox ( ) Dicofol ( ) Bifenthrin ( ) Flusilazole ( ) Fenarimol ( ) Phosalone ( ) Imazalial ( ) Ethoprophos ( ) RfD (ADI)(NOAEL/SF) mg/kg/day 23

33 8 NOAEL BMDL BMDL 5 Pesticide Imidacloprid 1 EDC tests (mg/kg/day) Chronic test (mg/kg/day) BMDL h BMDL t NOAEL h NOAEL t BMDL NOAEL 3(LH) < 10 (m, f) 30(m) 60(f) 2 BMDL EDC / BMDL Chr 3 BMDL EDC / NOAEL Chr Source 6 3/6 Dir 08/116 Iprodione Dir 03/v92 Propiconaozle Tebuconazole Triadimefon 01(T3) < 15 (m, f) < 15 (m, f) < 10 (m, f) Difenoconazole 100 (m,f) Hexaconazole Prochloraz Fenvalerate 16(T) 004(m,TSH) 150 (m,f) 50(m) 150(f) < 1 (m, f) 150(m, f) 4 Dir 03/70 50(m) 150(f) 30(m) 100(f) 100(m) 10(f) 150(m) 15(f) 50(m) < 15(f) 3 EFSA /28 01/3 JMPR Dir 08/69 05 JMPR /1 EFSA11 5(m) 20(f) 2 004/2 JMPR1986 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 1(f,E2) 1/2 2(m,E2) 2/2 5(aromatase) 5/2 04( f,tsh) 04/2 Deltamethrin 085(T3) < 03 (m, f) 1(m) 3(f) 1 085/1 Dir 03/5 076(FSH) 076/1 Carbendazim 76 2 Dir 06/135 Flusilazole Dir 06/133 1 EDC tests: tests for endocrine disrupting chemical 2 BMDL EDC /BMDL Chr : BMDL for endocrine disrupting chemical /BMDL for chronic toxicity 3 BMDL EDC /NOAEL Chr : BMDL for endocrine disrupting chemical /NOAEL for chronic toxicity 24

34 2015 Annual Report 系統性評估農藥撲克拉之毒性及內分泌干擾作用 以撲克拉進行全面性評估 作為系統性評估之評估示範 (圖15) 評估結果為除撲克 拉為內分泌干擾農藥外 現行撲克拉管理法規已達保護哺乳動物之能力 然對環境方 面 則建議應限定撲克拉於水域之使用或加註警語 此研究結果可證實利用此系統性評 估 可針對不同農藥進行內分泌干擾作用評估及達到法規政策建議之目的 另外為參考 國外先進國家有關內分泌干擾作用農藥之政策及國內外相關領域之專家意見 統整國 內外最新農藥內分泌干擾作用檢測技術及結果 舉辦 農藥內分泌干擾作用專題研討 會 並將研討會內容發行專刊 1 冊 而藉由與國家衛生研究院合作 更確實形成一跨 領域研究團隊 未來可於其他領域或計畫繼續合作 提供相關單位擬定管理措施之建 議 圖 15 以撲克拉作為系統性評估示範 類荷爾蒙農藥對雄大鼠發身與甲狀腺功能影響研究 本計畫完成芬化利 第滅寧和益達胺等三種農藥之雄大鼠發身與甲狀腺功能影響 農藥芬化利 第滅寧和益達胺等以胃管口服投予出生後第 23 至 53 天雄大鼠 人工合 成睪固酮 (testosterone propionate, TP) 04 mg/kg/day 顯著降低睪丸 副睪絕對重與相對 重 縮短陰莖與包皮分離時間及降低分離時體重等 增加腎上腺 貯精囊含液與不含液 等絕對重與相對重及前列腺相對重 對甲狀腺及其他組織或器官之絕對與相對重等無明 顯影響 雄性素受體拮抗劑 Flutamide 3 mg/kg/day 顯著降低副睪及貯精囊含液與不含液 等絕對重及相對重 球海棉體肌與提睪肌及陰莖等絕對重及腎臟相對重 對甲狀腺及其 他組織或器官之絕對與相對重等無明顯影響 芬化利降低肝絕對重 對甲狀腺及其它組 25

35 TP 04 mg/kg/day (luteinizing hormone, LH) (follicular stimulating hormone, FSH) (17ßestradiol, E2) (triiodothyroxine, T3) (thyroxine, T4) (thyroid stimulating hormone, TSH) (testosterone, T) (aromatase) Flutamide 3 mg/kg/day T E2 LH FSH T3 T4 TSH aromatase T3 ( 16) TSH ( 18) E2 T ( 19) LH FSH T4 ( 17) aromatase ( 20) T3 ( 16) TSH ( 18) FSH aromatase ( 20) T ( 19) 03 mg/kg/day 1mg/kg/day E2 T4 ( 17) LH T4 ( 17) LH T ( 19) E2 T3 ( 16) TSH ( 18) FSH aromatase ( 20) T3 TSH T LH FSH T4 aromatase FSH aromatase T T4 LH T4 LH T FSH aromatase T3 T4 TSH aromatase T LH FSH (T3 T4) (T) (E2) - - (hypothalamic- pituitarygonadal axis) Tier I (no observed adverse effect level, NOAEL) (benchmark dose lower bound, BMDL) BMDLhormone or tissue / BMDLchronic BMDLhormone or tissue / NOAELchronic 1 1 Tier II Tier II BMDL 1 ADI NOAELchronic mg/kg/day NOAEL mg/kg/day BMDLtissue / BMDLchronic BMDLtissue /NOAELchronic 1 NOAEL mg/kg/day BMDLhormone / BMDL chronic BMDL hormone / NOAEL chronic 1 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 26

36 2015 Annual Report mg/kg/day 圖 16 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 mg/kg/day 農 藥 對 雄 大 鼠 血 清 中 三 碘 甲 狀 腺 素 濃 度 影 圖 16 響 芬 Data 圖 化 16 利 are 芬 第 滅 化 means 寧 利 和 益 第 of 達 滅 胺 10 寧 等 replicates± 和 三 益 種 農 達 藥 胺 對 等 雄 standard 三 大 種 鼠 血 農 清 藥 error 中 對 三 雄 碘 Bars 大 甲 狀 鼠 labeled 腺 血 素 清 濃 中 度 by 三 影 碘 響 the 甲 same 狀 腺 letter 素 濃 度 影 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not statistically are 響 not Data statistically are means different of 10 according replicates± to standard the ANOVA error test Bars at p labeled 005 by the same letter different according to the ANOVA test at p 005 are not statistically different according to the ANOVA test at p mg/kg/day 圖 17 圖 芬 17 化 利 芬 化 第 利 滅 寧 和 第 益 滅 達 寧 胺 和 等 益 三 達 種 農 胺 藥 等 對 三 雄 種 大 mg/kg/day 農 鼠 血 藥 清 對 中 雄 甲 大 狀 鼠 腺 素 血 濃 清 度 中 影 甲 響 狀 腺 素 濃 度 影 響 Data 圖 17 are means 芬 化 利 of 10 第 replicates± 滅 寧 和 益 達 standard 胺 等 三 error 種 農 Bars 藥 對 labeled 雄 大 by 鼠 血 the 清 same 中 甲 letter 狀 腺 are 素 not 濃 度 statistically 影 響 different according to the ANOVA test at p

37 Data are means of 10 replicates± standard error Bars labeled by the same letter are not statistically different according to the ANOVA test at p 005 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 mg/kg/day 圖 18 芬 化 利 圖 18 第 滅 芬 寧 化 和 利 益 達 第 胺 滅 等 寧 三 和 種 益 農 達 藥 胺 對 等 雄 三 大 種 鼠 農 血 藥 清 對 中 雄 激 大 甲 鼠 狀 血 腺 清 素 中 濃 激 度 甲 影 狀 響 腺 素 濃 度 影 Data 響 are Data means are of means 10 replicates± of 10 replicates± standard standard error Bars error labeled Bars labeled by the by same the letter same are letter not statistically different are not according statistically to the different ANOVA according test at p to 005 the ANOVA test at p 005 參 附 錄 5 mg/kg/day 圖 19 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 農 藥 對 雄 大 鼠 血 清 中 睪 固 酮 濃 度 影 響 圖 19 芬 化 利 第 滅 寧 和 益 達 胺 等 三 種 農 藥 對 雄 大 鼠 血 清 中 睪 固 酮 濃 度 影 響 Data are are means of of replicates± standard error error Bars Bars labeled labeled by the by same the same letter are letter not are statistically different according to the ANOVA test at p not statistically different according to the 005 ANOVA test at p

38 2015 Annual Report mg/kg/day 圖 20 芬化利 第滅寧和益達胺等三種農藥對雄大鼠血清中環化酶濃度影響 圖 20 芬化利 第滅寧和益達胺等三種農藥對雄大鼠血清中環化酶濃度影響 Data means of 10 replicates± standard error Bars labeled same letter Data are are means of 10 replicates± standard error Bars labeled byby thethe same letter areare not statistically p different according to the ANOVA test at 005 not statistically different according to the ANOVA test at p 005 符合 GLP 規範之理化性質及毒理試驗 在生物及理化性特性試驗部分 完成 4 項微生物製劑之不同劑型理化性質試驗 至 少產出 4 份 GLP 理化性質試驗登記資料 在安全評估試驗方面 完成至少 5 種微生物製 劑原體毒理試驗前之菌種分析 其中 4 種微生物製劑並完成 8 項 GLP 動物毒理試驗 (表 9 不含 103 年完成項目) 表 年完成試驗 菌株 29 毒理前試驗與 菌數分析 毒理試驗報告 理化性質試驗 PMB01 Tcba05 TKS1-1 ML S1 TCTr-668 雙孔孢菌

39 本計畫已完成光桿菌菌液的三種 3 公升發酵配方與通氣條件的調整 經由室內檢 定 顯示稀釋 250 倍觀察 120 小時對於神澤氏葉蟎的殺蟲效果皆大於 70% 具有開發為 生物農藥的潛力 由於起泡嚴重 完成不通氣的攪拌式發酵槽條件再確認 發現殺蟲效 貳 技術服務 開發防治香蕉黃葉病與草莓葉蟎之微生物資材 壹 試驗研究 三 微生物農藥資源之研發與應用 果較差 已改用氣舉式發酵槽繼續評估最適條件 氣舉式發酵液的總蛋白含量大於攪拌 式發酵液 氣舉式發酵液的殺蟲效果較優 已依據氣舉式發酵條件 調整攪拌式發酵條 的撰寫與第二次修訂 正在申請審查許可的行政程序中 已完成香蕉黃葉病的田間試驗 場地的勘查與澆灌次數評估設計 並開始進行田間測試的試驗收集與分析 參 附錄 件 殺蟲效果有提升 已完成液化澱粉芽孢桿菌防治香蕉黃葉病的田間試驗設計書 EUP 開發防治線蟲之非化學資材 根瘤線蟲可於多種作物造成危害 由於其生活型態與生活史短暫 使得線蟲之防 治困難度增加 目前用於線蟲防治之藥劑多因毒性高 對環境不友善等因素而逐漸遭淘 汰 隨著消費者的安全意識提高 發展低毒有效的替代性防治方法是具有急迫性的 生 物藥劑為一種低毒友善的防治方法 本計畫主要藉由篩選具潛力的拮抗微生物來防治根 瘤線蟲 藉由篩選 培養與機制的探討 期能提供有效的線蟲防治資材 本年度主要是評估先前所篩出之潛力菌株的防治能力 利用不同培養基配方 先行 澆灌菌株後 再接種二齡根瘤線蟲 接著繼續澆灌菌液六週後 評估其防治線蟲侵染的 能力 由表 10 可發現 溫室試驗中有兩株菌株具有防治潛力 此外部分菌株可產生含氨 氣 (圖 21) 與含硫化物之氣體 (圖 22) 所產生的氣體亦具有防治二齡線蟲的能力 圖 21 以特定氣體偵測試管測試 每 100 ml 約可測得 5 ppm 的 NH3 30

40 2015 Annual Report 圖 22 以 GC/MS 質譜儀初步分析 氣體中含有雙硫化物 表 10 溫室試驗澆灌潛力菌株後植物所產生之根瘤數 No of galls per plant 2dpi 2dpi Cori/PDA 703 ± 418 a 540 ± 167 a Cho2/PDA 490 ± 252 a 458 ± 225 a XiPep/PDA 571 ± 195 a 463 ± 175 a Cu4/CM 384 ± 103 a 426 ± 163 a Lu16/CM 582 ± 397 a 421 ± 219 a Xcw6/CM 436 ± 58 a 456 ± 301 a DW 467 ± 133 a 567 ± 143 a 微生物農藥菌種資源檢驗新技術之開發 針對有效農藥登記許可證之蘇力菌 枯草桿菌 木黴菌及核多角體病毒等微生物產 品 開發菌種檢驗新技術 蘇力菌產品分屬於不同亞種及品系 已建立以 cry1 型基因 PCR 鑑定分析方法 其殺蟲結晶蛋白基因組成可區分成 1Aa, 1Ab, 1Ac 1Aa, 1Ac, 1C, 1D 1Aa, 1Ab, 1C, 1D 1Ac, 1C 及 1Ab, 1Ac, 1D, 1E 等 5 型 再以殺蟲 結晶蛋白 (cry1ab) 全基因定序 殺蟲結晶蛋白 HPLC 圖譜分析及逢機擴增多型性 DNA (RAPD) 分析 搭配高解析溶解曲線分析 HRM 可再進一步將其區分為 7 型 利 用質體圖譜 (plasmid profile) 鑑別分析 可再進一步區分至 8 型 枯草桿菌 (或液化澱粉 芽孢桿菌) 已建立杜邦全自動核酸指紋鑑定系統及脈衝式電泳分析等菌種鑑別技術 綠 木黴菌已建立 ITS 定序區分鑑定技術 已建立甜菜夜蛾核多角體病毒基因鑑定技術 以 31

41 壹 試驗研究 DNA 快速萃取試劑萃取甜菜夜蛾核多角體病毒 ( Spodoptera exigua nucleopolyhedro virus, SeNPV) 樣品 及 PCR 增幅產生 bp 之專一性 DNA 產物核酸定序分析 序列於 NCBI 基因資料庫 BLAST 比對確實為 SeNPV 質體圖譜 plasmid profile 鑑別分析 蘇力菌 殺蟲結晶蛋白之 HPLC 圖譜分析 殺蟲結晶蛋白之 cry1ab 全基因定序 高解析溶解曲線 HRM 分析 杜邦全自動核酸指紋鑑定系統 脈衝式電泳分析 PFGE 真菌 綠木黴菌 ITS 定序 病毒 甜菜夜蛾核多角體病毒基因定序 參 附錄 枯草或液 化澱粉芽 孢桿菌 逢機擴增多型性 DNA RAPD 貳 技術服務 微生物農藥菌種資源檢驗新技術之開發 cry1 型基因 PCR 鑑定分析 圖 23 開發菌種之檢驗新技術 研發增益植物健康之多功能蘇力菌資源 選擇屬於鮎澤蘇力菌 (Bacillus thuringiensis subsp aizawai Bta) 及庫斯蘇力 菌 (Bt subsp kurstaki Btk) 亞種下 不同品系之五菌株 (Bta A603 Bta Ab12 Bta ABTS1857 Btk E911 及 Btk ABTS351) 探討對促進生長 抑制病原菌等殺蟲以外的附 加效果 先以聚合酶連鎖反應 (PCR) 進行基因檢測 供試菌株皆可檢出溶磷 (Phosphate solubilization) 吲哚-3-乙酸 (Indole-3-acetic acid, IAA) 嵌鐵物質 (Siderophore) 1-胺基環 丙烷-羧酸脫胺酶 (1-aminocyclopropane-1- carboxylate deaminase, ACCD) 幾丁質分解酶 (Chitinase) 及 β-1,3-葡萄聚醣水解酶 (β-1,3-glucanase) 之相關基因 再藉由生化分析 發現供試蘇力菌菌株均有 IAA 生成 溶磷反應 以及尿素分解酶 幾丁質分解酶及硝酸 還原酶的產生 另與植物病原菌共同對峙培養 也產生拮抗效果 表現抑菌的潛力 而 在高鹽環境下 供試蘇力菌也仍有 IAA 及尿素分解酶的生成 表現耐鹽特性 半田間 試驗結果 蘇力菌確實促進青梗白菜 小白菜 (圖 24) 菸草 四季豆 小黃瓜 茄子等 作物生長 也能協助葉面噴灑及根部施用等肥料利用 以及降低軟腐及黑腐病原菌危害 等效用 田間試驗中 也顯示增加結球甘藍的重量 綜合顯示蘇力菌兼具促生 增進肥 效 抑菌及減緩高鹽逆境等多項特性 可提升作物健康 品質及產量 32

42 2015 Annual Report 圖 24 蘇力菌可以促進小白菜作物生長 雜草之植物源除草資材研發 植物相剋化合物為二次代謝物質 常被測試及運用為雜草生物防治之資材 施用 於農業生態系中 具有生物安全性高及對環境友善的特質 本研究已篩選 67 種植物地 上部位進行防除雜草潛力之 測試 首先利用大花咸豐草 (Bidens pilosa L var radiata Sch) 及牛筋草 (Eleusine indica L) 的種子萌芽率及切離葉片 傷害程度 篩選具萌前或萌 後施用之植物資材 初步篩 選出 2 種菊科植物 2 種禾 測試植物的資材收集 萃取液製備及除草活性測試 本科植物 1 種芸香科植物 及 1 種木犀科植物具除草潛 力 萌前測試可分別抑制雜 草種子 50%-80% 萌芽率 以 及萌後測試對離體葉片 60% 以上的褐化 (圖 25) 經由適 當混合 2 種植材 以及添加 5-mix-2 的組合型佐劑 於早 期萌後施用對 8-10 葉齡雜草 33 噴施後雜草 噴施前雜草 圖 25 初選具相剋除草潛力植材添加適當佐劑 早期萌後噴 施之防治測試 (A) 禾本科雜草 (B) 闊葉雜草

43 壹 試驗研究 易受傷 防治率介於 % 之間 此初選的混合 2 種植材可於慣行農法整地後之早期 萌後噴施 有效降低雜草族群 以及協助有機栽培之雜草管理 本年度主要是探討是否木黴菌具有溶磷以及生成植物賀爾蒙之能力 在實驗室溶磷 能力測試中 利用含有磷酸鈣 磷酸鋁及磷酸鐵的 MPB 培養基 Modified Pikovskaya's 貳 技術服務 防治作物病害及促進作物生長之木黴菌研發 Broth medium 液態培養 完成 6 株木黴菌溶磷 (鈣 鋁 鐵) 之 參 附錄 定性試驗 其中有 2 株溶鈣能力 較強 另外 4 株溶鋁能力較強 而在溶鐵測試中 6 株木黴菌均 無溶鐵之能力 (圖 26) 而文獻指 出為生物之溶磷能力與其分泌有 機酸有關 經測試亦發現有溶磷 能力之菌株的培養液確實具有較 低之 ph 值 後續可繼續探討菌 株是分泌何種有機酸 另外利用 Ascorbic Acid Method 測量水中 磷含量之試驗進行中 以接種木 黴菌的處理與對照組相比 可以 提高鈣磷的溶解約兩倍 (圖 27) 而 鋁磷超過三倍 (七天) 證明木黴 菌確實具有幫助不易溶解型的磷 溶解 具有潛力開發為微生物肥 料 (溶磷菌) 在生成植物賀爾蒙 能力 (吲哚乙酸 IAA) 測試中 6 株木黴菌培養於含有 1 色胺酸 (tryptophan) 的 PDB 培養基中 以 Salkowaski 試劑對 IAA 之專一 呈色反應 完成 6 株木黴菌分泌 圖 26 利用 MPA 液態培養基測試木黴菌之溶磷能力 MPA 液 態培養基分別含 (a) 磷酸鈣 (b) 磷酸鐵及 (c) 磷酸鋁 結果顯示 1 及 6 號兩株菌株具溶鈣磷之能力 及 6 號四株菌株具溶鋁磷之能力而無有菌株具溶鐵磷 之能力 34

44 2015 Annual Report IAA 之定性試驗 結果顯示其中 2 株木黴菌具有分泌 IAA 之能力 (圖 28) 可促進作物 生長 另在分光光度計波長 530 nm 的條件下 製作吸收值與 IAA 濃度相關性的標準曲 線 藉以推估各菌株在不同處理產生 IAA 的濃度 而在相關盆栽試驗 (番茄 白菜 玉 米) 初步結果顯示其中木黴菌對白菜生長 (根及葉面積) 無顯著差異 而木黴菌可促進番 茄及玉米根部生長 本研究證明木黴菌對植物生長的益處除了在拮抗病原菌的防治病害 的能力外 確實具有溶磷及產生植物生長激素的能力可促進植物生長 圖 27 利用 Ascorbic Acid Method 測量鈣磷含量之試驗 1 及 6 號菌株確實能增加不溶性鈣磷 之溶解 其中 6 號菌株在第七天與對照組相比可提高兩倍的可利用磷含量 圖 28 利用 Salkowaski 試劑測試木黴菌之 IAA 生成能力 利用含 1 色胺酸之 PDA 培養基培 養木黴菌 14 天後利用 Salkowaski 試劑與離心後之上清液以 1 4 之比例混合 結果 顯示有 5 及 6 號兩株木黴菌具有生成 IAA 之能力 35

45 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 Nanall GLP GLP

46 2015 Annual Report 四 農藥品質檢測及安全資材之開發 成品農藥檢測多重分析方法精進 我國所生產之抗凝血殺鼠餌劑目前使用於防除農地老鼠之危害 針對殺鼠餌劑中摻 雜其他抗凝血殺鼠劑有效成分之偵測極限及限量基準均為 0001% 意即若成品農藥中摻 雜含量超過 0001% 者 即為劣農藥 由於過去分析有效成分為個別檢驗 耗時且效率不良 為提升檢驗效率及減少溶劑 使用 本計畫利用液相層析串聯質譜儀檢驗國內外常使用之 14 種殺鼠劑有效成分 樣 品置於燒杯後加入甲醇 經簡易加熱萃取有效成分後冷凍並以濾紙過濾 以液相層析串 聯質譜儀搭配 MRM 模式分析回收率均可達 70%~120% 間 檢量線迴歸係數介於 0974 至 0999 間 配製標準液約 1 ppm 重複注入分析四次求其相對標準偏差介於 間 本方法定量極限為 00001% 低於法規值 分子標靶設計之安全農藥開發 經由電腦預測模擬及酮醇酸還原異構酶 (ketol- acid reductoisomerase, KARI) 抑制活性 分析 篩選出具 KARI 抑制活性 之化合物 Compound X 其 IC μm (RSD 284%) 可有效 的應用此策略於新藥成分開發 (圖 29) 並於 RNA 殺蟲劑開發 方面 成功建立小菜蛾的 RNA 干擾技術 其對於小菜蛾目標 基因之 RNA 表現已能達到有效 干擾 由於干擾效率除受雙股 RNA 之長度與序列影響 亦取 決於雙股 RNA 的量 即 足夠 的雙股 RNA 才能夠引起有效的 干擾 對此除了前期利用蛋白質 37 圖 29 對照藥劑 cyclopropane-1,1-dicarboxylate (CPD) 抑制化合 物 Compound X 與 KARI 分子模擬受體的結合力及 IC50 之 相關性

47 壹 試驗研究 保護雙股 RNA 的策略 今年更由根本著手 利用引入 T7 終止子 使 RNA 在適當的地方 停止合成 減少無用的單股 RNA 合成與水解的徒勞無功 藉以達到有效提升雙股 RNA 產率的目的 (圖 30) 貳 技術服務 參 附錄 圖 30 利用 T7 終止子有效提升雙股 RNA(dsRNA) 產率 (A) 部分的 dsrna 表現質體序 列 兩端紅字序列為 T7 終止子 (T7 terminator) 中間黑字序列則為小菜蛾 (Plutella xylostella) 的液泡腺核苷三磷酸水解酶基因 下方以 mfold 軟體計算 T7 終止子的二 級結構能量 (B) 加入 T7 終止子增加 dsrna 產量 Lane 1 無表現質體的負對照 沒有產生預期的 dsrna Lane 2 當質體不含 T7 終止子 預期的 dsrna 非常不明 顯 Lane 3 當基因兩端放置 T7 終止子 預期的 dsrna 非常明顯 農藥製劑有效性及安全性之改良 本計畫擬針對難防治之土壤根蟎及根瘤線蟲開發低毒性之天然素材產品提供農民更 多選擇 以供試根蟎飼養於經菊科 脣形科植物與中藥材等 11 種材料水萃液處理之飼料 上 經 14 日觀察其族群生長發育情形 篩選出 P004 P005 與 P006 具潛力萃取液 5% 與 05% 濃度下 經 14 日後觀察皆可抑制根蟎族群發育 (圖 31) 後續分析其指標成分 並 持續進行天然素材之篩選 並依試驗結果調配成為方便 安全與有效之根蟎防治藥劑 此外 初步進行二齡線蟲抑制篩選具潛力線蟲防治的天然資材 初步由廢棄的柑橘類果 皮 食品級天然植物香料粉末以及 2 種植物萃取液中 篩選出柑橘類果皮及 1 種植萃液 具有抑制潛力 同時建立其萃取最佳化製程及含量分析分法 80 克果皮可萃到 128 mg 指標成分 並初步以液相層析儀建立指標成分分析方法 檢量線 R2 為 滯留時間 為 1838 分鐘 後續將持續產品製劑開發以提供線蟲防治新選擇 38

48 2015 Annual Report 此外 農藥噴灑為了增加霧化效果常使用較高的壓力使霧滴粒徑細化 然而較細 的霧滴增加了隨風飄散到非目標區域之風險 本研究初步測量出農民常用的其中五種噴 頭 黃銅可調式圓錐噴頭 黃銅五孔噴頭 白鐵扇形 PL D-4 PL D-5 KS K-5 噴頭 在 農民慣用動力噴霧 20 kg/cm2 高壓下 50% 以上霧滴大小皆大於之霧滴粒徑 Dv(50) 分別為 9216± 394 μm 1378±116 μm 6885±381 μm 6760±110 μm 774±213 μm (表 10) 為非常細 (Very Fine) 的霧滴 而農民常用於水稻田 蔬菜田之白鐵扇形 K-5 的霧 滴 以模擬向下噴施地上栽培作物在低壓 21 kg/cm2 於風速 1 m/s 時飄散距離已達 3 公 尺 風速提高至 2 m/s 以上後 飄散距離會達到 5 公尺以上 若是使用農民慣用的高壓 噴施 飄散的情況影響將更趨嚴重 藉由了解及累積目前田間噴施情況數據 以開發降 低飄散之有效方法 如改良使用適中的噴頭或調整降低噴施壓力 或是添加抗飄散助劑 等等 來達到最終減少霧滴飄移兼具藥效有效發揮之目標 14天 水 14天 5% P004 14天 5% P005 14天 5% P006 14天 5% P008 14天 5% P009 圖 31 P004 P005 與 P006 三種天然素材 5% 水萃液相對於其他材料具抑制根蟎族 群正常生長效果 表 10 國內農民常用噴頭在高壓 (20 kg/cm2) 時之粒徑分布 噴頭形式 黃銅實心圓錐噴頭 黃銅五孔圓錐噴頭 扇形噴頭 PL D-4 扇形噴頭 PL D-5 扇形噴頭 KS K-5 39 粒徑分佈(μm) DV(10) DV(50) DV(90) 5599 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 483

49 壹 試驗研究 新劑型之理化特性研究 油提供真菌疏水性分生孢子之保護性 也減少陽光中紫外線的傷害 開發含大量油 的 HLB 需求約在 8 左右 椰子油的 HLB 需求則約在 12 左右 我們再進一步篩選 HLB 介於 8~12 的界面活性劑種類 測試對於調和油 (亞麻仁油+椰子油) 的乳化效果 最後找 到 POE (16) hydrogenated caster oil (HLB 84) 具有不錯的乳化效果 再經數種 HLB 介於 8~12 的界面活性劑進行混用測試 發現當 POE (16) hydrogenated caster oil 與 Triton X-45 貳 技術服務 的製劑之第一步在於配方用油的親水親油平衡 (HLB) 值需求之測定 我們測定亞麻仁油 以 1:1 混用於含 50% 植物油 SC 製劑 其乳化性質穩定且殺蟲效果比一般水懸劑型更好 (圖 32) 參 附錄 圖 32 白殭菌含油 SC 製劑加工及其小菜蛾殺蟲效果 (A) 兩種植物油先混合篩選出合適的界 面活性劑 然後一邊攪拌 一邊慢慢加入含有白殭菌的水懸浮液 形成具有 50% 植物 油 並且具有類似水懸劑 SC 的新劑型 (B) 白殭菌含油新劑型之小菜蛾殺蟲效果 上 及左培養盤分別為純水對照及白殭菌加水作為對照 新劑型白殭菌含油製劑噴施使用 之二齡小菜蛾殺蟲效果顯然較佳 ( 右下 ) 天然及生化植物保護資材商品化開發及有效應用 理化試驗 依照各試驗單位及學研界已有潛力產品盤點結果 例如 坡縷石 70% WP 高 嶺土 5% SC 沒食子酸 25% SL 亞磷酸 20% SL 乳化植物油90% EC 肉桂醛 38% EC 脂肪酸鉀鹽 80% SL 草酸液劑及小菜蛾 花姬捲葉蛾 斜 紋夜蛾 甜菜夜蛾 番茄夜蛾 茶姬捲葉蛾 茶捲葉蛾 甘藷蟻象等性費洛蒙製劑 依 其所缺技術缺口與登記資料 完成理化性試驗資料製備及規格檢驗 協助產品完成商品 化 以供技轉或授權 40

50 2015 Annual Report 昆蟲性費洛蒙及登記資料提審服務 本所技服組協助提審相關案件 8 案取得 EUP 完成小菜蛾 花姬捲葉蛾性費洛蒙等 各三場確效試驗 已完成小菜蛾確效試驗報告 小菜蛾性費洛蒙商品化資料完成技轉 完成書寫甘藷蟻象 (防檢三字 104 年 9 月 14 日第 號 案號 104GV08) 斜 紋夜蛾 (防檢三字 104 年 9 月 14 日第 號 案號 104GV09) 甜菜夜蛾 (防檢 三字 104 年 9 月 14 日第 號 案號 104GV10) 性費洛蒙確效試驗設計書 及 提送動植物防疫檢疫局審查 已取得 EUP (圖 33) 取得配製斜紋夜蛾 甜菜夜蛾性費洛 蒙的三種原料 Z9E11-14Ac Z9E12-14Ac Z9-14OH 進口許可證 完成檢送斜紋夜蛾 甜菜夜蛾 甘藷蟻象性費洛蒙產製物理化規格試驗樣品 完成斜紋夜蛾性費洛蒙誘餌之 田間藥效評估試驗設置 完成甘藷蟻象 斜紋夜蛾性費洛蒙佐證資料收集 田間試驗設計書 書寫計畫書 費洛蒙原料 技術服務組 行文廠商委託進口 本所應用組協助審視 廠商上網申請 計畫書審查 防檢局審核通過 檢送防檢局 取得EUP 購置費洛蒙原料 配製害蟲性費洛蒙 經檢定有效後 配製性費洛蒙誘餌 農藥田間藥效試驗 送檢本所農化組 進行農藥理化性試驗 約6-10公克 圖 33 產品化害蟲性費洛蒙誘餌 之商品化工作流程 液體皂植保製劑防治小黃瓜蚜蟲之商品化研發與應用 利用少於 200 ppm 的液體皂植保製劑的 50 及 100 倍稀釋溶液於小黃瓜蚜蟲 其作用 機制為殺蟲皂直接包覆蟲體 覆蓋蟲體窒息及經由脫水造成蟲體死亡 本計畫已證實該 製劑在 1-2% 濃度下之對田間小黃瓜蚜蟲具良好的防治成效 相較於化學農藥 此植物保 護製劑除標的害蟲外 對其他非標的的植物或昆蟲並無傷害 且易被環境分解 為生產 優質安全農產品及永續農業重要的一環 田間試驗 已完成 3 場田間試驗 毒理試驗 41

51 4 ph >13 ( ) ( ) GLP ( ~ ) ( ) ( ) ( ) 5 (PE PET) 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 ( ) ( ) 3 20%

52 2015 Annual Report ( ) ( ) (105 ) GLP TK99 20% 43

53 壹 試驗研究 治方法 本計畫以防檢局核准之田間試驗設計書 選擇柑桔園進行 TK99 SC 資材防治柑 桔薊馬之田間試驗 根據試驗結果評估應用高嶺土的可行性 計畫目標是透過優良實驗 操作 將 TK99 發展為可預防茂谷果實日燒與防治花期或幼果薊馬危害的商品化產品 廠商申請) 預計 105 年正式技轉 毒理試驗 已完成口服急毒性 眼刺激性與皮膚過敏 性及蜜蜂口服與接觸急毒性 5 項毒理試驗 均屬輕至低毒等級 不具皮膚過敏性 理化 試驗 已完成 貳 技術服務 田間試驗 104 年 6 月已完成 3 場 104 年 7 月已完成送智審會 10 月公告技轉 (已有 1 油茶粕於天然殺蝸牛劑產品化開發與利用 茶粕中茶皂素含量 其含量為 1413 % 並以香草醛 濃硫酸法分析茶皂素純度 其純度 為 7446 % (圖 34) 另外 以 application topic method 完成扁蝸牛觸殺活性試驗 95% 信 賴區間下 LD (μg / flat snail) 完成殺扁蝸牛生物活性方法建立 參 附錄 本年度完成油茶粕中茶皂素萃取方法與純化製程建立 經由建立重量分析法分析油 β -Escin 標準減量線 茶皂素純度分析 圖 34 茶皂素含量分析 標準檢量線範圍於 μg/ml 有良好的線性迴歸 以濃度為 x 軸 吸 光值為 y 軸 線性迴歸方程式 y 3237x ( 線性迴歸相關係數 (r2) 09973) 茶皂素 ( 批 號 ) 以香草醛 - 濃硫酸法分析含量為 7446% (n=3, RSD 071%) 44

54 2015 Annual Report 五 農藥對植物 病菌 昆蟲毒理之研究 侷限導管細菌替代性寄主植物及媒介昆蟲相關性探討 侷限導管細菌 (Xylella fastidiosa) 能經年棲息於寄主導管內導致寄主死亡 該菌亦 是國際上檢疫之重要病原菌 近年在國內葡萄產區偵測葡萄皮爾斯病( Pierce's disease, PD) 的病原菌 並於罹病園附近偵測到雙輪瓜 漢氏山葡萄 葎草 白匏仔 玉珊瑚 山黃麻 小花蔓澤蘭等 7 種中間寄主也被此菌感染 臺灣特有的梨葉緣焦枯病 (Pear leaf scorch, PLS) 將被歸類於新種 並引用葡萄皮爾斯病成功的研究及調查經驗 針對此特 有菌系進行深入的研究 本計畫於梨葉緣焦枯病的標定罹病園鄰近進行植物種類偵測調 查 以釐清中間寄主植物種類及分布 本年度共採集 364 個替代性寄主植物樣本 同時 於罹病園以蟲網採集梨病園媒介昆蟲樣本 將進行病原菌分離並以專一性引子對 (PLS-F/ PLS-R) 進行 PCR 偵測 本年度共採集 139 個昆蟲樣本 以玉珊瑚及葡萄作為侷限導管細 菌蟲媒傳播試驗模式的模式作物 確認白邊大葉蟬為侷限導管細菌之媒介昆蟲並建立侷 限導管細菌蟲媒室內傳播試驗模式 臺灣農田難防治雜草之生態與防治研究 依分類地位 形態特徵 生育特性及防治方法等項目 完成 40 種農田重要或難防治 雜草資料蒐集與整理 馬齒莧種子於 25 以上之溫度處理 2 天即可發芽 可發芽溫度範 圍為 15~35 30~35 處理下發芽率大於 50% 黑暗環境下發芽率為 3% 顯著低於照光 環境 (發芽率 82%) 水分潛勢於 -08 Mpa 處理下不發芽 ph4~10 處理下發芽率皆大於 50% 且無顯著差異 埋土深度 0 cm 種子萌芽率大於 50% 深度 05~25 cm 萌芽率最高 僅 15% 於春 秋兩季節環境下馬齒莧生長勢相似無顯著差異 植株於栽種 4 週後葉片 數 節數及分支數顯著增加 秋季鮮重於栽種 8 週後達 531 g 大於春季 267 g 空心蓮子 草於一期作環境下生長勢 (植株長度 葉片數 節數 分支數及鮮重) 大於二期作 一期 作鮮重於栽種 12 週後達 2099 g 大於二期作 856 g 萌前藥劑樂滅草 復祿芬處理下馬齒 莧種子發芽率為 0% 施得圃與比達寧不影響種子發芽 但可造成植株發芽後生長停止 萌後藥劑固殺草對馬齒莧植株可達100% 抑制率 2,4-D 及伏速隆對馬齒莧防治率分別為 57 及 74% 三氯比 伏速隆以登記劑量處理下對空心蓮子草防治率為 100% 固殺草防 治率為 78% 45

55 ( ) (Colletotrichum gloeosporioides) 96 (Origanum majorana ) (Lawsonia inermis Linn) (Cananga odorata) (Breynia nivosa (Bull) Small ) (Allamanda neriifolia Hook) (Cinnamomum osmophloeum) (Laurus nobilis) (Moringa oleifera Lam) (Spiraea cantoniensis Lour) (Allium schoenoprasum) (Allium ampeloprasum) (Curculigo orchioides Gaertn) ( ) 11 ( ) 11 ( ) 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 46

56 2015 Annual Report OECD (LD 50 /72hrs) 352 μg/ bee μg/bee, 95 CL 0551 μg/bee μg/bee, 95 CL 0765 μg/bee ( μg/bee, 95 CL) 1093 μg/bee ( μg/bee, 95 CL) 304 μg/bee μg/bee, 95 CL μg/bee μg/bee, 95 CL > 4589 μg/bee (LD 50 ) 2 μg /bee (Spinosad) (Fipronil) μg /bee (Dimethoate) (Spinetoram) μg /bee (Thiamethoxam) 100 μg /bee (Clothianidin) (Acetamiprid) Colletotrichum spp 24 ITS C acutatum 2 4 C gloeosporioides 1 2 (Camellia oleifera) (Camellia brevistyla) 1,163 1,123 ( ) 47

57 壹 試驗研究 離及鑑定 確定的病害有煤煙病 炭疽病 藻斑病 枝枯病及茶餅病 於園區內以捕蟲 網捕捉昆蟲 以調查園區內蟲相 將田區捕捉到的活體帶回實驗室中 並培養蟲體於有 健康油茶苗的蟲箱中 觀察其是否能生存超過三天 以確認是否取食油茶 並觀察其危 小白紋毒蛾 粉介殼蟲 柑桔刺粉蝨 蚜蟲 小綠葉蟬 (浮塵子) 及花薊馬 除了已確認 的害蟲之外 於鄰近雜草中發現梨刺蛾 巨網台蛾 灰蛾 紅角輝椿象 綠斑平盲椿象 稻棘緣椿象 其是否造成油茶植株的危害仍待證實 貳 技術服務 害狀況 確定的油茶蟲害包括 茶避債蛾 烏桕黃毒蛾 臺灣黃毒蛾 捲葉蛾 椿象 殺菌劑對木黴菌之毒性評估 料 以及應用綜合防治於防治植物病害時 建置化學防治與生物兩者輪用與混用之重要 參 附錄 本計畫擬就農藥對木黴菌之毒性進行研究 長期建立農藥對木黴菌之安全評估資 參考依據 本年度完成多保鏈黴素 甲基多保淨 鏈黴素 貝芬菲克利 貝芬替 依滅 列 貝芬依滅列 腐絕 菲克利腐絕等 10 種殺菌劑對 9 株木黴菌之安全性評估 其中鏈 黴素對供試木黴菌之安全性最高 其 EC50 及 MIC 分別為 (11±33) x 1011 及 (83±250) x 1022 mg/l 甲基多保淨對供試木黴菌菌株之 EC50 及 MIC 分別為 157±328 及 (72±228) x 103 mg/l 兩者混合劑多保鏈黴素對供試木黴菌菌株之 EC50 及 MIC 分別為 147±257 及 (49±109) x 103 mg/l 其餘供試藥劑對木黴菌菌株之安全性風險高 其 EC50 及 MIC 分別介於 002±001 ~ 033±014 及 129±125 ~ 8324±6952 mg/l (圖 35 與圖 36) 總 言之 供試之 10 種 FRAC B 類殺菌劑與其混合劑中 甲基多保淨 鏈黴素與其混合劑多 圖 種 FRAC B 類殺菌劑與其混合劑對 9 株供試木黴菌菌株之半數抑制濃 度 (EC50) 分布圖 48

58 2015 Annual Report 保鏈黴素對供試之木黴菌菌株的安全性高 可做為田間與化學藥劑輪替施用時之可用藥 劑種類之一 圖 種 FRAC B 類殺菌劑與其混合劑對 9 株供試木黴菌菌株之最低有效抑 制濃度 (MIC) 分布圖 延伸使用之藥效驗證研究 調查方法標準化之研究 本年度針對梨樹蚜蟲類 十字花科蔬菜蚜蟲類 薔薇科果樹葉蟎類及葡萄露菌病 蒐集國內以及 EPPO PP1 美國 印度 中國 日本等國藥效試驗之調查方法與期刊相關 文獻 並進行彙整與比對分析 再依據國內作物種植模式 進行調查方法之調整 結果共完成梨樹蚜蟲類 十字花科蔬菜蚜蟲類 薔薇科果樹葉蟎類及葡萄露菌病等 4 篇 田間藥效試驗之害物調查方法指引 本計畫自 101 年至 104 共完成 19 篇重要害 物之調查方法指引 並於 藥毒所專題報導 118 期與 119 期 中 出版 菊科作物露菌 病 葫蘆科作物露菌病 梨木蝨 芸香科作物粉介殼蟲類 葫蘆科作物白粉病 葡萄葉 蟎類 等 6 篇調查方法指引 其餘 13 篇調查方法指引將陸續發表 於害物調查指引中 說明此指引之目的 適用之作物與害物範圍 並逐項述明調查 方法 包括害物好發季節 樣本單位與大小 取樣調查方式與頻度 調查標的 害物密 度或危害情形評估方式以及記錄內容等 此指引應可顯示該藥劑在不同氣候條件 露天 或溫室栽培環境下之藥效 應可做為日後設計執行藥效試驗之重要依據 49

59 壹 試驗研究 建全農藥容許量與其使用方法一致性之研究 本計畫針對已訂定大類容許量之藥劑 依據國內外藥效 藥害相關資料 分別訂 非目標生物之安全評估 以調和現行大類容許量引起作物農藥殘留標準與使用方法之落 差 已完成資料庫建置及具有效許可證藥劑使用方法及安全採收期訂定 將持續相關作 業之進行 以期符合田間實際用藥需求 及降低消費大眾對農藥使用之疑慮 貳 技術服務 定各別單一作物之藥劑施用劑量與方法及安全採收期 同時針對增訂之作物類別考量對 臺灣地區農藥對蜜蜂風險研析 殺草劑 2 種 其中 RQ >50 法定風險啟動值) 者有 26 種 約佔 58 參 附錄 評估完成之市售農藥有 45 種 其中包括殺蟲劑 32 種 殺蟎劑 8 種 殺菌劑 3 種及 強化植物有害生物防範措施 一 完成根蟎性費洛蒙誘引裝置雛型之設計 二 完成複方藥劑對甘藍小菜蛾之田間藥效評估試驗一場 (圖 37 與圖 38) 其中複方藥劑 蘇力菌 481 水分散性粒劑 (稀釋 4000 倍) 與阿巴汀 2 乳劑 (稀釋 2000 倍) 以 1 1 混合之田間藥效 於第二次施藥後 3-10 天對小菜蛾之平均防治率高於 60 為較 具潛力之組合 圖 37 施藥前進行風速 溫度 濕度等測量並記錄 圖 38 田間施藥情形 50

60 2015 Annual Report 六 植物疫情偵測及抗藥性之研究 蟲媒植物病原原核生物之偵測與培養技術研習會 由昆蟲傳播的植物蟲媒病害 其病原包括細菌 病毒 真菌 線蟲與其他病原等 其中有一群植物病原微生物無法在一般細菌性培養基生長或者需在含特殊成分或豐富複 合配方之培養基才能生長 是為營養苛求原核生物 本計畫邀請美國喬治亞大學榮譽退 休教授 Prof Chung-Jan Chang 及農試所石憲宗博士 於本所傳授媒介昆蟲傳病技術及偵 測培養病原菌的實務操作課程 授課對象包括各試驗場所與大學之相關研究同行與學 生 以強化國內基盤研究 研習會正課課程包含 1 張宗仁教授講授植物病原原核生物的 研究回顧 2 蘇秋竹博士講授台灣植物病原原核生物引發病害之發生及重要性 3 石憲 宗博士講授傳播台灣植物病原原核生物病害之媒介昆蟲的鑑定及重要性 研習會亦包含 實習課課程 1 製備分離與培養 Xylella fastidiosa 及蜜蜂螺旋菌體兩類病原之培養基 2 Xylella fastidiousa 及蜜蜂螺旋菌體的分離及培養 3 完成人為接種病原菌至健康植株之 柯霍氏法則試驗 4 由昆蟲傳播病原菌至健康植株的方法 5 透過 PCR, ELISA, TEM 與 SEM 監測與鑑定植物病原原核生物的方法 本研習會共有 32 名學員參加 並完成蟲媒 植物病原原核生物之偵測與培養技術研習會專刊 1 本 內容共計 111 頁 薊馬在蔬果上之為害損失形式及其監測技術之改進 一 本年度於雲林及嘉義地區之西瓜 洋香瓜和香瓜園進行調查 共計調查 34 塊瓜園 嘉義水上鄉以 MYSV 發生率高於 WSMoV 但雲林地區則未檢出二種病毒 2015 年 5-11 月底 調查南投縣信義鄉彩椒園共 7 次 18 塊田區 採集彩椒株數 33 株 結 果顯示甜椒感染 TSWV 為 606% 台灣花薊馬獲毒 48 小時後 傳毒至健康青椒苗分 別為 6 24 及 48 小時 植物罹病率為 333% 516% 及 419% 台灣花薊馬帶毒率 為 531% 384% 及 618% 二 本年度分別在台中市霧峰區 台南市南化區及台南市楠西區三處檬果園調查 霧峰 檬果園捕獲小黃薊馬 202 隻/黃色黏紙/週 花薊馬 33 隻/藍色黏紙/週 南化果園果 實期捕獲小黃薊馬居多 平均 1884 隻/黃色黏紙/ 2 週 現場目測調查果實受害情 形 共調查 9 次 本年度果實有套袋處理 果實受害率低於 5% 103 年未套袋 果 實受害率高達 80% 楠西果園果實期捕獲小黃薊馬 451 隻/藍色黏紙/ 2 週 果實受 51

61 9 5% 467% 壹 試 驗 研 究 Gregory P Walker (EPG) Walker (EPG) 3 3 EPG EPG EPG EPG 貳 技 術 服 務 參 附 錄 FRAC B 10 FRAC B ( 39 40) 3 3 FRAC B FACC G FRAC C 4 FRAC C3 C4 5 52

62 2015 Annual Report 存在 QoI 抗藥性基因族群 在藥效分析方面 雲林元長菌株對 C3 及 C4 類殺菌劑大都不 敏感 然其對百克敏仍維持敏感性 其 EC50 為 76 mg/l 另一雲林斗六菌株則呈現相反 現象 對供試之 C3 及 C4 類殺菌劑大都呈現敏感性 但對百克敏之感受性不佳 其 EC50 高達 120 mg/l (圖 41) 當胡瓜露菌長期受到 C 類殺菌劑防治時 容易產生抗藥性 如南 投水里 雲林斗六與嘉義新港等受測菌株存在 QoI 抗藥性基因族群 (圖 42) 因此面臨此 種困擾時 宜輪替其它非 FRAC C 類殺菌劑 可減少田間抗 C 類殺菌劑之胡瓜露菌菌株 發生與蔓延 圖 種 FRAC B 類殺菌劑與其混合劑等對 3 類植物病原菌核類真菌之半數抑制 濃度 (EC50) 分布圖 (n=30) 圖 種 FRAC B 類殺菌劑與其混合劑對 3 類植物病原菌核類真菌之最低有效抑 制濃度 (MIC) 分布圖 (n=30) 53

63 壹 試驗研究 貳 技術服務 參 附錄 圖 41 供試之 FRAC C3 與 C4 類殺菌劑對 5 株胡瓜露菌菌株之半數抑制濃度 (EC50) 分布圖 圖 42 供試胡瓜露菌 (Pseudoperonospora cubensis) 菌株之抗 QoI 基因族群分布圖 R+ QoI 抗藥性族群 R- 非 QoI 抗藥性族群 害蟲對殺蟲劑之感受性與抗藥性評估及農藥延伸使用之精進研究 本計畫針對重要害物菸草粉蝨進行長期的感受性與抗藥性監測 今年度持續完成洋 香瓜 南瓜 胡瓜等葫蘆科作物上菸草粉蝨對亞滅培 達特南等新尼古丁類藥劑 (IRAC 4A) 及氟尼胺等取食抑制類藥劑 (IRAC 9C) 之感受性分析 於新尼古丁類藥劑方面 (圖 43) 就寄主作物種類而言 南瓜 洋香瓜 胡瓜等 3 種葫蘆科作物中 以南瓜上菸草粉 54

64 2015 Annual Report 蝨對亞滅培 (acetamiprid) 達特南 (dinotefuran) 之感受性較佳 就地區品系而言 南投縣 地區菸草粉蝨對亞滅培之感受性較達特南佳 雲林縣與彰化縣地區則無差異 另於取食抑制類藥劑方面 (圖 44) 結果顯示雲林縣二崙鄉大同村 彰化溪湖媽厝里 之洋香瓜品系對氟尼胺之 LC50 分別為 3839 mg/l mg/l 而雲林縣北港鎮好 收里之胡瓜品系對氟尼胺之 LC50 則為 2335( ) mg/l 由各子代對供試藥劑感受性變化 (圖 45) 可見感受性逐漸上昇之情形 以南投縣草 屯鎮新豐里南瓜品系之菸草粉蝨為例 其對達特南之 LC50 即由 mg/l 上昇至 2818 mg/l 顯示經由輪用策略 使部分藥劑停止用藥一段時間 應可減緩抗藥性發展之速 度 為強化農友之用藥策略 今年度進行田間輔導時 即以此為例 建議農友輪用不同 作用機制之藥劑 以達維持藥效之目的 圖 43 葫蘆科蔬菜上銀葉粉蝨對 IRAC 4 類殺蟲劑之感受性分布圖 圖 44 葫蘆科蔬菜上銀葉粉蝨對 IRAC 9 類殺蟲劑之感受性分布圖 55

65 壹 試驗研究 另於精進農藥延伸使用及執行效能評估方面 計畫針對已建構之 農藥延伸使用查 詢系統 持續蒐集約 6,700 筆農藥 作物 害物 以及害物感受性與抗藥性之資料 以更新與豐富資料庫 並進行系統查詢功能與結果的除錯作業 將提供系統使用者完善 業 今年度已通過審查並公告者超過 300 項使用範圍 為農民解決無藥可用問題 並增 加可輪用的藥劑種類 有利於農民生產優質 安全的農產品 貳 技術服務 的資訊與友善之使用環境 此外 持續針對地區用藥需求完成農藥延伸使用之評估作 參 附錄 圖 45 南投縣草屯鎮新豐里各子代菸草粉蝨對達特南之感受性變化圖 殺蟎劑對植物葉蟎及根蟎之藥效及抗藥性評估 一 本年度完成豆科神澤氏葉蟎 5 個地區品系對 4 種蟎類生長調節劑之抗藥性分析 依 據試驗結果顯示 4 種供試藥劑對豆科神澤氏葉蟎田間 5 個地區品系之毒性 (LC50 μg/ml) 分別是 賜派芬為 μg/ml 依殺蟎為 μg/ml 克芬蟎為 μg/ml 及合賽多為 μg/ml 試驗結果顯示豆科作物神澤氏葉蟎田間 5 品系對 4 種供試藥劑之抗性比介於 之間皆小於 10 屬低度抗藥性品系 其中 藥效部分以依殺蟎最佳 二 至於選用依殺蟎 賜派芬及氟芬隆對羅賓根蟎與長毛根蟎之毒性藥效 結果顯示依 殺蟎與氟芬隆藥效佳 未來可考慮研發適合之劑型以利田間應用之便 另外為解決 豆科作物於連續採收期間 化學農藥殘留問題 除了降低化學農藥之使用量及次數 外 本年度持續在微生物農藥-光桿菌對神澤氏葉蟎毒性測試結果 期望可以替代化 學農藥在採收期間防治豆科葉蟎之危害 並解決農藥殘留問題 56

66 2015 Annual Report 9 87% % 7 80% % 14 90% % 80% acetoin acetoin 8-15 acetoin ALS ( )

67 , , , , ,090 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 IRAC A 1 9C 1 LC g/ml LC g/ml

68 2015 Annual Report 外來植物入侵潛能風險評估量表之建立 外來種入侵目前被認為是全球生態環境之重大威脅及全球環境變遷之主要因素 除 了對原產地之生態系有重大影響外 對當地經濟亦會造成嚴重衝擊 近十幾年來因全球 貿易活動及人為移動頻繁 外來種引進機率大幅提昇 而這樣的發展趨勢將對生態系及 經濟發展造成負面影響 一旦入侵種立足 將很難完全被移除或控制 防止外來入侵種 之重要性可見一斑 因此 研擬外來種之入侵潛能預警系統極為迫切 其中外來植物風 險評估系統之建立即為有效降低外來種入侵之方式 本計畫針對具普遍性及危害程度差 異之臺灣農地及環境中 21 種水田草及 50 種旱田草 完成野化潛力評估及發生現況之比 較 同時依其重要性將 13 項評估指標予以加權 作為訂定決策分數之依據 59

69 七 害 物 整 合 管 理 技 術 之 開 發 壹 試 驗 研 究 7 ( 1%) ppm ( ) 002 ppm phytoplasma (ND) ( ) 50% % WP % EC % SC 800 A B C 貳 技 術 服 務 參 附 錄 60

70 2015 Annual Report %

71 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 (Diaphania indica) I:E11-16:Ald II: E, E-10, 12-16:Ald 3 5 I/II I/II = 1/0 0/1 1/1 2/1 3/1 4/1 5/1 I/II = 3/1 5/1 2/1 ( 46) BHT Vit-A Vit-E Vit-E 1 mg , ,974 1, % = 1:1 1:2 1:4 1:8 1:1 1:2 1:4 1:8 62

72 2015 Annual Report 效果 以 1:8 製劑誘蟲效果較穩定 經於毛豆田以性費洛蒙監測 誘得豆莢斑螟 (Etiella behrii) 白緣螟蛾 (Etiella zinckenella) 粗腳姬捲葉蛾 (Cryptophlebia ombrodelta) 花姬捲 葉蛾 (Cydia notanthes) 亞洲玉米螟 (Ostrinia furnacalis) 斜紋夜蛾 (Spodoptera litura) 及甜菜夜蛾 (Spodoptera exigua) 等 其中食葉性害蟲以斜紋夜蛾族群密度較高 蛀入性 害蟲以亞洲玉米螟較高 其次為粗腳姬捲葉蛾 豆莢斑螟與白緣螟蛾的族群密度很低 Total no insects trapped (n=5) 惟因其危害習性常成為客訴對象 上述害蟲性費洛蒙誘餌初步可建議農友使用 圖 46 以六角型木質轉盤檢定 I/II 不同比例配方對瓜螟的誘引性 建立應用昆蟲費洛蒙體系綜合防治胡麻之重要害蟲 2014 年於嘉義朴子 東石及台中大肚秋作胡麻 發現危害胡麻新梢花及果莢之芝 麻莢野螟 (Antigastra catalaunalis) 以花姬捲葉蛾 粗腳姬捲葉蛾 甜菜夜蛾 斜紋夜 蛾 番茄夜蛾 豆莢斑螟 白緣螟蛾 (Ez-A, Ez-E, Ez-st) 亞洲玉米螟 粉斑螟蛾 印度 榖蛾等 12 種害蟲性費洛蒙誘餌 偵測朴子 東石鄉胡麻害蟲發生情形 於朴子分場內偵 測到斜紋夜蛾 (Spodoptera litura) 甜菜夜蛾 (Spodoptera exigua) 番茄夜蛾 (Helicoverpa armigera) 豆莢斑螟 (Etiella behrii) 及亞洲玉米螟 (Ostrinia furnacalis) 等 於東石鄉 除偵測到上述害蟲種類 亦誘得粗腳姬捲葉蛾 (Cryptophlebia ombrodelta) 於 2015 年春 作胡麻於朴子分場 東石鄉繼續以斜紋夜蛾 甜菜夜蛾 番茄夜蛾 豆莢斑螟 白緣螟 蛾 粗腳姬捲葉蛾 亞洲玉米螟等害蟲性費洛蒙監測 又增加偵測擬尺蠖 小白紋毒蛾 等 結果顯示以斜紋夜蛾族群密度較高 ( insects/trap/14 day) 其次依序為甜菜夜 蛾 ( insects/trap/14 day) 亞洲玉米螟 (5-47 insects/trap/14 day) 小白紋毒蛾 (15 30 insects/trap/14 day)等 擬尺蠖於 5 月底至 6 月初族群密度升高 ( insects/trap/14 63

73 day) ( 47 48) (Nesidiocoris sp) 7 Ez-st 05 mg in microtube No of insects caught / trap No of insects caught / trap 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 圖 年 3 月 17 日 至 2015 年 6 月 22 日 以 性 費 洛 蒙 監 測 嘉 義 縣 東 石 鄉 胡 麻 害 蟲 斜 紋 夜 蛾 甜 菜 夜 蛾 亞 洲 玉 米 螟 發 生 情 形 64

74 No of insects caught / trap No of insects caught / trap 2015 Annual Report 圖 年 3 月 17 日至 2015 年 6 月 22 日以性費洛蒙監測嘉義縣東石鄉 6 種胡麻害蟲發 生情形 建立應用昆蟲費洛蒙體系綜合防治油茶之重要害蟲 經先期試驗調查顯示油茶作物屬粗獷栽培 鮮少進行修剪 施藥防治 由油茶園田 間被害果調查顯示薊馬危害嚴重 危害率高達 897% 於蓮華池油茶花採集的薊馬經鑑 定為花薊馬 (Thrips hawaiiensis ) 花色薊馬 (Thrips coloratus ) 經查薊馬危害常導致落 花與落果 可能影響油茶產量與品質 於 2014 年 9 月以茶姬捲葉蛾 小白紋毒蛾 花 姬捲葉蛾 粗腳姬捲葉蛾 甜菜夜蛾 斜紋夜蛾 豆莢斑螟 粉斑螟蛾等 8 種性費洛蒙 誘餌 分別偵測/監測三灣 蓮華池 東勢 白毛台油茶害蟲發生情形 由幾次費洛蒙 調查以小白紋毒蛾 花姬捲葉蛾 粗腳姬捲葉蛾 斜紋夜蛾 茶姬捲葉蛾發生較多 於 65

75 g/plant g/plant ( 49 50) 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 圖 年 12 月 起 於 蓮 華 池 評 估 警 戒 費 洛 蒙 綜 合 防 治 效 果 設 置 圖 圖 年 於 蓮 華 池 利 用 警 戒 費 洛 蒙 綜 合 防 治 油 茶 薊 馬 之 效 果 評 估 ( 產 量 ) 66

76 2015 Annual Report 利用昆蟲性費洛蒙管理水稻二化螟之應用推廣 利用性費洛蒙大量誘殺水稻二化螟 之示範推廣 於 104 年 8 月 10 日至 104 年 11 月中下旬止 於台中市豐原 大甲水稻慣行防治區及外埔有機區水稻栽培區進行 每 區推廣 30 公頃 總共推廣 90 公頃 每公頃設置 60 個水稻二化螟性費洛蒙誘蟲器 結果 顯示以每公頃設置 60 個水稻二化螟性費洛蒙誘蟲器大量誘殺水稻二化螟 可降低水稻二 化螟的族群密度 以性費洛蒙監測紫螟結果顯示 紫螟在台中市豐原區 大甲區 外埔 區的水稻田皆存在 惟其族群密度很低 經估算水稻二化螟全期誘捕蟲數於大甲 豐原 及外埔大量誘殺處理區分別為 1,938 2,858 及 1,335 隻 水稻二化螟性費洛蒙防治最佳 田間設置數量試驗初步結果 於慣行防治區設置性費洛蒙誘蟲器不同密度 個 誘蟲器/公頃 其水稻二化螟的族群密度均較對照區者為低 顯示田間設置 個誘蟲器/公頃 均能有效降低水稻二化螟的族群密度 於有機水稻區的結果 於前期能 有效降低水稻二化螟的族群密度 惟至 10 月高峰期 無明顯降低效果 此可 能係使用翼型黏膠式誘蟲器 因風沙 蟲多導致無法完全誘捕水稻二化螟 104 年 10 月 19 日 10 月 20 日及 10 月 29 日分別於大甲 外埔 (圖 51) 及豐原 區等 3 區農會進行昆蟲性費洛蒙誘引劑 之使用介紹與水稻二化螟性費洛蒙防治 推廣示範講習暨田間示範觀摩會 共 260 人參加 圖 51 於外埔區農會舉辦 104 年度昆蟲性費洛蒙誘引劑 之使用介紹與水稻二化螟性費洛蒙防治推廣示範 講習 高粱及玉米關鍵害蟲性費洛蒙製劑與應用技術開發 亞洲玉米螟 (Ostrinia furnacalis) 與玉米穗蟲 (Helicoverpa armigera) 分別為玉米與高 粱產業的關鍵害蟲 本試驗自 2000 至 2015 年陸續探討亞洲玉米螟性費洛蒙田間應用技 術與評估 已建立其性費洛蒙誘餌試量產技術 開發其乾式誘蟲器及其田間應用技術 試驗顯示不同來源之 Z12-14Ac E12-14Ac 雖配成配方相同的誘餌 其對亞洲玉米螟 的誘引性有差異 本試驗已找到可試量產亞洲玉米螟性費洛蒙誘餌配方 建立試量產亞 67

77 cm cm 6 m cm ( 8 insects/ week/ trap) ( insects/ week/ trap) traps /ha 10 insects/ trap/ month insects/ trap/ month traps /ha 10 insects/ trap/ month % % % ( 52) 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 圖 年 春 作 玉 米 不 同 防 治 方 法 其 植 株 受 亞 洲 玉 米 螟 之 危 害 情 形 68

78 2015 Annual Report 米再進行一次試驗 結果顯示降低亞洲玉米螟族群密度均在 10 insects/ trap/ month 以下 兩區費洛蒙處理與藥劑處理田區的植株為害率 於 2014 年 12 月 5 日分別為 % 2014 年 12 月 16 日分別為 % 2015 年 1 月 14 日分別為 % 2015 年 2 月 7 日分別為 % (圖 53) 顯示利用性費洛蒙大量誘殺 亞洲玉米螟 可降低亞洲玉米螟的危害 由誘蟲試驗顯示玉米穗蟲在台灣與金門的族群 密度不同 以金門地區者較高 於 2013 年 9 月 1 日至 2013 年 10 月 30 日與於 2014 年 2 月 24 日至 2014 年 10 月 13 日 分別在金門高梁田與台灣雲林縣虎尾鎮花生田 比較 A B C 等三種性費洛蒙配方對玉米穗蟲之誘引效果 結果顯示於金門高梁田 A B C 等三種性費洛蒙配方之誘蟲總數 分別為 隻 以 C 配方較佳 在台灣 雲林縣虎尾鎮花生田 A B C 等三種性費洛蒙配方之誘蟲總數 分別為 隻 以 B 配方較佳 不同劑量性費洛蒙誘餌劑量由 1 mg 增加至 8 mg 玉米穗蟲誘蟲總 數隨之增加 其經濟之劑量仍需再探討 玉米穗蟲性費洛蒙誘餌配方 (1 mg/ microtube)在 田間持效可至 8 9 週 圖 年秋作玉米不同防治方法其植株受亞洲玉米螟之危害情形 69

79 一 羽毛分解菌之篩檢 本研究自農業環境中篩選共 417 株羽毛分解菌 其中 7 株之羽 毛分解力為 3 級及 4 級 (圖 54) 二 農產品與農產加工品之致病菌調查 104 年完成 39 件樣品之抽檢 樣品分別來自 2 貳 技術服務 持久性藥物與病原菌對環境安全之評估研究 壹 試驗研究 八 農業公害 污染防治與環境生態研究 家速食店 2 家超市及 1 家量販店 其中有 17 件陽性 (生食性蔬果 14 件 生菜沙拉 2 件 醃漬品 1 件) 22 件為陰性 (果醬及醃漬品) 陽性樣品中檢出率最高為大腸桿 菌均為陰性 (表 11 與表 12) 參 附錄 菌群 (100% 17/17) 其次為大腸桿菌 (706% 12/17) 沙門氏桿菌與病原性大腸桿 4 圖 54 環境分離菌株分解羽毛之情形 羽毛分解力共分為 0 級至 4 級 0 級 無明顯分解情形 1 級 有部分分解 只有少許羽毛碎屑懸浮 2 級 羽毛明顯分解 且碎屑沉澱量多 3 級 羽毛呈粉碎狀 只剩羽軸 4 級 羽毛全分解 外觀無殘留 表 件農產品與農產加工品之致病菌檢出率 (%) 生食性蔬果 (19) 0 (0/19) 病原性 大腸桿菌 0 (0/19) 生菜沙拉 (2) 0 (0/2) 0 (0/2) 100 (2/2) 50 (1/2) 農產加工品 (18) 0 (0/18) 0 (0/18) 56 (1/18) 56 (1/18) 樣品(件數) 沙門氏桿菌 大腸桿菌群 大腸桿菌 737 (14/19) 526 (10/19) 70

80 2015 Annual Report 表 件農產品與農產加工品中大腸桿菌群與大腸桿菌之不符合率 (%) 大腸桿菌群 大腸桿菌 樣品 (檢出件數) 檢出率 不符合 檢出率 不符合 生食性蔬果 (19) 737 (14/19) 684 (13/19) 526 (10/19) 316 (6/19) 生菜沙拉 (2) 100 (2/2) 0 (0/2) 50 (1/2) 50 (1/2) 農產加工品 (18) 56 (1/18) 0 (0/18) 56 (1/18) 0 (0/18) 大腸桿菌群衛生標準 < 103 MPN/g 大腸桿菌衛生標準 < 10 MPN/g 檳榔耕作環境農藥殘留監測 農藥施用於田間後 可間接 直接對環境生態產生衝擊 毒性高 殘效性長之農 藥 長期使用下 勢必累積於環境中或進入地下水體中 其對環境安全之衝擊性更大 本計畫評估檳榔延伸使用農藥 監測農委會動植物防疫檢疫局擬公告核准使用於 檳 榔 之農藥農業環境中之殘留 於檳榔不同生長期採集檳榔園土壤及水樣品 (圖 55) 並進行多重農藥殘留監測 結果顯示結果顯示所有檳榔園土壤皆檢出殘留農藥 檢出率 最高依序 草殺淨=陶斯松 (909%) 益達胺 (818%) 土壤殘留農藥濃度最高為草殺淨 (006 mg/kg) 有 3 種農藥在 4 個灌溉水樣品中檢出 農藥檢出率依序為草殺淨 (125%) 貝芬替 (625%) 及益達胺 (313%) 檢出藥劑濃度以草殺淨 (135 μg/kg) 最高 依據建立 之飲用水估算安全基準判斷 有 1 件草殺淨超過安全基準值 圖 55 檳榔園實地水土採樣 71

81 6 稉 ( 11 稉 9 稉 14 稉 ) 2 ( 10 1 ) ppb ppb Leaf Bronzing Score (LBS) 145 ( ) 稉 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 ( 13) MPN/g MPN/g 77~230 0% (0/40) 0% (0/40) 0% (0/40) 0% (0/20) 5% (2/40) 0% (0/40) sub-ppb (Agilent Bond Elut PPL SPE ) 16 PAHs PAHs 72

82 2015 Annual Report ng/g Chrysene ( 2793 ng/g) Benzo[b]fluoranthene ( 2793 ng/g) PAHs PAHs (light PAHs) PAHs 6 17 呋

83 九 農 水 畜 產 品 有 機 污 染 物 之 檢 測 研 究 壹 試 驗 研 究 20 ng/g mg/kg PBDE ( ng/g ww) 72 ng/g ww 10 ( ) 80 ng/g ww 貳 技 術 服 務 參 附 錄 24 NIEA M80200B EPA Method NoBDE-206 ( pg/g wet weight ) DeBDE-209 ( pg/g ww) 10 DeBDE-209 ( pg/g wet weight ) NoBDE-207 ( pg/g ww) 10 DeBDE-209 ( pg/g wet weight ) NoBDE-207 ( pg/g ww) NoBDE-206 ( pg/g ww) 24 BDE-209 BDE (BDE ) PBDEs (Screen Index, 6PBDE) 74

84 2015 Annual Report PBDEs 3 44 MRL 3 9 ( ) ( 14) 14 / 3-OH Carbofuran Carbofuran (Fenamiphos sulfone Fenamiphos sulfoxide) Fenamiphos (Fenthion-oxon) (Fenthion-oxonsulfone Fenthion-oxon-sulfoxide Fenthion-sulfone Fenthion-sulfoxide) Fenthion (Fipronil-desulfinyl Fipronil-sulfone) Fipronil Spinetoram-J Spinetoram-L Spinetoram ( ) Cyhalothrin ( ) Cypermethrin (4-epimer) Tetracycline 4-epimer-Tetracycline Tetracycline Ciprofloxacin Enrofloxacin 75

85 本計畫建立整合式檢驗資訊管理平台 (圖 56) 整合採樣地理資訊系統 資料庫建 置 基本資料建置 檢驗案件管理模組 樣品接收管理模組 數據處理作業模組 檢驗 品管作業模組 及檢驗報告管理模組及檢驗資料分析 以網頁架構及 ASPNET 程式語言 貳 技術服務 建構農產品農藥安全檢測資訊聯繫系統 壹 試驗研究 十 農藥資訊體系研究 撰寫 此平台可匯整本所及 8 處區域檢驗中心檢驗結果 並經由檢驗資料的分析 提供 農糧署及縣市政府作為農藥殘留檢驗相關行政措施之參考依據 此外 並運用各種輸入 之貿易障礙 提升國家農產品外銷之競爭力 參 附錄 及市售農產品中可能之殘留農藥問題 對內為國人食品安全把關 對外可協助解決可能 圖 56 檢驗資訊平台登錄頁面 農藥毒理及田間施用查詢系統與重要病蟲害圖鑑之建構研究 田間施用查詢系統輸入主管機關公告各項農藥使用範圍及方法之訊息 民眾僅需 輸入農藥中文名稱 農藥英文名稱 作物名稱或害物名稱等關鍵字即可查詢到欲瞭解之 相關作物防治方法 惟常有民眾反應僅知作物病蟲害名稱 若有圖片用以佐證其判斷之 正確性 將能更正確的使用主管機關推薦之農藥及使用方法 本次將作物之重要病蟲害 圖鑑與田間施用查詢系統結合 選擇易發生殘留容許量超量之連續採收作物 故新增十 字花科葉菜類 菊科葉菜類 茄科作物及草莓之病蟲危害圖鑑 於 98 年起政府開始積 極辦理農藥延伸使用制度 該制度為解決農民用藥種類不足之情況 而延伸之範圍多以 76

86 2015 Annual Report 大類或作物科別為主 與以往只公告單一作物之推薦用藥不同 故原始建置之田間施用 技術系統以單一作物名稱搜尋各類病蟲害之推薦用藥時 常有搜尋結果不夠全面 完整 (如 搜尋 胡瓜 病蟲害之防治用藥 查詢結果卻未包括 葫蘆科作物 及 葫蘆科瓜 菜類 病蟲害之防治用藥) 另許多防檢局公告之作物名稱有其他別名或俗名 亦常使不 熟悉之使用者無法查詢到相關資訊 (如:公告 甘藍 搜尋 高麗菜 卻無相關防治資 訊) 因此 擴充田間施用技術系統之功能 新建各作物類群所含各項作物及各種作物之 別名或俗名 讓使用者之查詢能更符合其需求 查詢各種作物之病蟲害防治用藥 且可 由病蟲害之病徵或危害圖片更進一步確認其田間之病蟲害為何種 進而使田間施用查詢 系統之搜尋結果能更符合使用者之需求 圖 57 田間施用查詢系統搜尋 甘藍 + 黑斑病 即可查詢到十字花科蔬菜及甘藍之黑斑病防治藥劑及使 用方法 (A) 點選甘藍黑斑病即可查詢其防治藥劑及使用方法 點選顯示害物相關圖片 即可查詢 甘藍黑斑病之病徵 (B) 農藥資訊檢索資料庫整合平台之建構與應用系統開發研究 本計畫開發 農藥資訊檢索平台 以及 農藥標示查詢APP 兩項資訊系統 整合 本所已開發之相關資訊系統包含植物保護資訊系統 農藥標示查詢系統 農藥使用資訊 系統 農藥作用機制及化學分類檢索 公害藥害資料庫查詢 民意信箱問答集共計 6 項 資料庫 藉由共通性整合平台將資料庫匯集建置 提供檢索入口網模式開放查詢 並採 用動植物防疫檢疫局 農藥資料查詢 Open Data 作為農藥基本資料之來源 設計以作 物 害物 害物別名 農藥商品名 廠商名稱 藥劑中英文名 劑型 含量 危害作物 以及作用機制等關鍵字為查詢標的 並以單一 混合 精準 模糊等查詢條件進行資料 檢索 提供多功能之整合資訊檢索平台作業 輸入單一檢索關鍵字即可迅速在不同系統 之間擷取關聯資料 並以友善操作介面設計 提升資訊服務滿意度 (圖 58) 農藥標示查 77

87 APP 104 Google Play ( 59) 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 圖 58 農 藥 資 訊 整 合 檢 索 平 臺 圖 59 農 藥 標 示 查 詢 APP 78

88 2015 Annual Report 十 農業推廣傳播及人力資源之研究 一 藥毒所小科管平台運作 規劃完成本所小科管平台運作模式 依需求籌組專責科技幕僚 (含學研專家團隊) 進 行內部評核 完成每季目標管理與績效評核會議 (圖 60) 單位計畫會議及工作績效檢討 考評等管理與追蹤 並配合年度細部計畫授權由各機關/單位自行列管 完成各計畫之期 中及期末評核作業 就已完成階段性任務之計畫進行換新 由專責科技幕僚盤點機關內部之研發能量及優勢技術 於 104 年 8 月 18 日及 11 月 26 日與產業業者意見交流 (圖 61) 共同討論分析影響產業之關鍵技術缺口 並擇定 3 項 可行之研發策略 於 11 月 2 日提送 3 項產業鏈關鍵技術缺口及產業缺口魚骨圖 (圖 62) 針對所提送之 3 項產業鏈關鍵技術缺口與大科管所提供之優先議題資訊 轉化為 本所 106 年度換新競爭計畫之研發議題 透過專責科技幕僚之腦力激盪會議分別研提農 糧 防檢及環境等領域 4 項計畫構想書 並與領域推動小組共同提送 106 年度換新整合 型計畫 圖 60 每季目標管理與績效評核會議 圖 61 與農民及產業業者意見交流 79

89 壹 試驗研究 貳 技術服務 參 附錄 圖 62 我國中獸藥產業鏈 關鍵技術缺口魚骨圖 農民學院病蟲害防治及安全用藥課程訓練成效追蹤評核之研究 本研究以本所農民學院於 102 年新設立之 病蟲害防治與安全用藥訓練班 (圖 63) 進階訓練課程參訓之 專業農民 為調查對象 以 作物病 蟲 草害管理能力 農藥毒性識別能力 農藥安全使用及防護能力 農藥器材使用及調配能 力 作物整合管理能力 課程內容推廣主題知識 設計問卷 瞭解課程教學前後學 員對安全用藥之認知行為是否有影響與改變 因此以 Kirkpatrick 四層次訓練評鑑模式為 基準 分為 反應 學習 行為 結果 等四個由低至高的層次之評鑑模 式 本計畫 前 後測能力認知量表 即為 學習 層次評鑑 評量當 (104) 年度參訓 學員 因為參與訓練而改變態度 增進知識及增加技能的程度 結果顯示 學員 (N=70) 對課程的認知在訓練前 後有顯著的差異 (p 001) 另在 Kirkpatrick 行為 結 果 層次部份 評量學員完訓後 回到田間工作後 是否能運用病蟲害防治及安全用藥 課程知識 進而改變栽培管理行為 增加農產品產量和農產品收入 並降低農藥支出 因此針對 年完訓 125 名學員郵寄問卷進行 成效追蹤調查 結果顯示 (回收率 792%) 課程結束 1-2 年後 667% 學員表示銷售額有提升 798% 學員表示農業經營利 潤有提升 899% 學員表示農藥支出有降低 (圖 64) 顯示訓練成效良好 本計畫兼具教育宣導與行為研究性質 主動積極宣導政府在農藥管理及輔導安全用 藥體系的工作成效 自農業生產端導正相關知識與用藥習慣 降低農藥殘留案件與農藥 80

90 2015 Annual Report 中毒事件之發生 並以本研究之訓練前後認知差異與追蹤成效調查結果進行訓練品質監 控 作為講師教學方式及課程內容檢討調整之依據 以不斷持續提升訓練品質與安全用 藥職能 圖 63 農民學院病蟲害防治及安全用藥班 - 農藥健康 危害預防與安全防護示範教學 圖 年參訓學員在課程完訓回到田間實作 1-2 年後 進行成效追蹤調查顯示 ( 問 卷回收 99 份 ) 667 學員表示銷售額有提升 798 學員表示農業經營利潤有提 升 899 學員表示農藥支出有降低 中部地區蔬菜產業青年農民經營管理能力建構及輔導效能之研究 鑒於新進青年農民踏入農業經營之初期 生產管理技術 財務管理及行銷等較不成 熟 收益較不穩定 爰農委會自 102 年開始規劃 青年農民專案輔導實施計畫 遴選 青年農民 提供為期 2 年之專案輔導 協助其於經營初期得以穩健經營 並持續擴大經 營規模 讓其成為活絡並創新台灣農業發展的新血 本研究針對中部地區蔬菜產業農委會輔導之百大 4 位青年農民進行訪談 (圖 65) 調 查探討青年農民從事農業須具備之經營管理能力與輔導需求 以作為農民學院或農政與 81

91 壹 試驗研究 推廣輔導單位擬訂產業輔導諮詢策略之參考依據 歸納綜整 4 位訪談個案針對政府與欲 從農青年之建議如下: 建議政府鼓勵青年從農時 1 應考量一 二代觀念差異 提供心理諮商與溝通協 應考量租地需有完善配套 3 由於各地區農會及產銷班運作差異大 建議農會運作參考 日本農協運作合作社 自慢市之串連方式 建議欲從農青年 1 需具抗壓性 能耐受父執輩觀念差異以及記取經營失敗教訓 持續調整生產與經營方式 2 先紮基本工 須有一到二年以上 農業基礎技術 3 須 貳 技術服務 助 百大專案之陪伴師可扮演此溝通角色 2 由於青年從農首要條件為須有土地 政府 預先規劃栽種至銷售流程之管理 4 建議先有父執輩傳承土地為佳 若租田需先考量栽 種風險與承擔成本層面 才能得以成功持續經營農業 參 附錄 圖 65 與中部地區蔬菜產業農委會輔導之百大 4 位青年農民進行訪談 農業訓練品質管理輔導行動研究 農業人力老化是目前亟待解決的問題 引進青年投入農業及提昇農業經營能力是政 府當務之急 又農民學院針對主辦之各項教育訓練均有持續辦理學員滿意度調查工作 82

92 2015 Annual Report 然未曾接受任何正式認證 本研究擬將教育訓練導入 訓練品質認證系統 建置評核 指標與方法 提升農業訓練品質及有效性 通過品質認證以提升結訓證書實用性 建構 完善農業人力培育制度 本年度工作成效重點包含教育訓練辦理 內部品質管理系統建立 標準文件建立審 查與內部稽核 人員培訓與外部稽核等 依據 ISO 驗證作業流程 本團隊於 103 年起著手進行品質管理系統之建立 逐步完 成系統之規劃 依照本所組織發展藍圖 策略規劃之動態程序以及學習服務迴圈 規劃 出品質管理系統之架構 期可依照 願景 使命 策略營運計畫 之策略規劃品質政策 與目標 依據 ISO29990 之國際條文 自 103 年起開始建置標準文件 共建置完成品質管理 手冊 1 本 以及作業程序書 12 本 文件中各 項條文 作業流程以及表單 依照開班時實際 狀況及內部員工開會討論進行滾動式修正 期 符合社會變遷趨勢 在台灣科技檢驗股份有限公司 (SGS) 協助 下 自 104 下半年起經由其朱宏斌經理與簡檛 榕經理針對標準文件及訓練流程紀錄實施外部 評鑑 包括預評 文件審查與正式評鑑 本團 隊於 11 月 11 日通過認證 與農試所成為農委 會第一批通過 ISO29990 認證之團隊 (圖 66) 本團隊雖已通過認證 但未來因應國際價 值觀更迭及市場需求調整 ISO29990 條文勢必 會再次改版 如何持續自我精進以符合相關規 範將為日後重要之議題 圖 66 本所通過 ISO29990 認證證書 社區人力活化運用輔導之研究 本研究欲了解雲林地區目前在人力活化調度上運用之情形 以問卷發放之形式進行 議題調查 研究之進行主要分為問卷設計與資料蒐集兩部分 自 104 年 2 月 2 日起農委會召開 社區人力活化年度工作會議確認本年度以地區別作為各單位調查之對象 其後經電話詢 83

93 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 ( 67) ISO

94 2015 Annual Report 劑 藉由器械實地施用落實技能傳授 於 生物農藥與生物肥料班 中 以 真菌製劑 之置備 昆蟲性費洛蒙 (誘引劑) 誘餌及誘蟲器製作 有機堆肥之製作 等實習 課程指導學員各種非化學方式之病蟲害防治方法 使其皆能理解無毒農業在實行上可利 用之策略 以達到本所對於 安全農業 之願景 圖 67 本所 104 年度農民學院辦理情形 85

95 貳 技 術 服 務 技 術 服 務 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 86

96 2015 Annual Report 一 104 年 度 辦 理 之 專 題 演 講 01/08 1To strengthen bio-input for increasing the productivity of ecological agriculture- Taiwan and Thailand 2Effective communication; Capacity building; Career planning 03/13 (Big Data) 04/17 The principles of electrical penetration graphs (EPG) and their application to the study of insecticide effects on feeding behavior of piercing-sucking plant pest Professor Gregory P Walker Department of Entomology, University of California, Riverside, USA 05/15 07/10 07/14 KPI - 07/15 09/11 10/07 10/23 11/6 ScienceDirect Elsevier 11/09 ISO SGS 12/01 87

97 壹 試 驗 研 究 07/01 ( ) 07/16 ( ) 07/30 ( ) 08/13 ( ) 08/27 ( ) 09/10 ( ) 10/15 ( ) 11/12 ( ) 貳 技 術 服 務 12/17 ( ) 12/24 ( ) 二 104 年 發 表 之 著 作 參 附 錄 ( ) 24(1) Etiella spp 35(1):

98 2015 Annual Report Variations of cellular components in Thermosynechococcus sp CL-1 under electrochemical treatment Acute imidacloprid poisoning caused prolong depression of butyrylcholinesterase First record of Eutypella sp as a mycoparasite on Fusarium oxysporum f sp cubense Magnesium lithospermate B and rosmarinic acid, two compounds present in Salvia miltiorrhiza, have potent antiviral activity against enterovirus 71 infections Detecting benomyl and its metabolite carbendazim inducing androgenic activity in rats by using uterotrophic and hershberger assays RSC Advances Journal Clinical Toxicology 5(4) Plant Protection Bulletin 57(2) European Journal of Pharmacology Taiwanese Journal of Agriculture Chemistry and Food Science 53(6): Tzu Hsing Ko Yao Chun Hsu Yung Fu Wang Yen Hui Chang Shao Kai Lin Hsin Ta Hsueh Hsing Hui Chen Chih Chuan Lin Jen Hou Li Te Fa Chiu Tsai Yu Sun Feng Chia Hsieh Yi Ching Chung Feng Chia Hsieh Ying Ju Lin Tzong Yuan Wu Cheng Wen Lin Ching Ting Lin Nou Ying Tang Tzyy Rong Jinn Shui Yuan Lu Min Chen Chen Chao Yun Yuan Ya Hui Hsu Wei Ren Tsai 89

99 三 104 年 出 版 之 技 術 專 刊 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 No No No No

100 2015 Annual Report No No ( ) 112 ( ) ( ) 115 ( ) 116 ( ) 117 ( ) 118 ( )

101 參 附 錄 附 錄 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 92

102 2015 Annual Report 一 104 年 本 所 組 織 架 構 圖 ORGANIZATION Residue Control Division Pesticide Chemistry Division Applied Toxicology Division Director Deputy Director Bio-Pesticide Division Pesticide Application Division Plant Toxicology Division Technical Service Division General Service Administration Accounting Personnel 93

103 二 104 年 本 所 重 要 活 動 紀 實 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 94

104 Annual Report

105 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 96

106 Annual Report

107 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 98

108 Annual Report

109 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 100

110 2015 Annual Report 三 104 年 本 所 研 究 及 行 政 人 員 101

111 壹 試 驗 研 究 貳 技 術 服 務 參 附 錄 102

112 (104 ) 11 (04) / (02) / / 6 (04) / (04) 著 作 財 產 權 人 行 政 院 農 業 委 員 會 農 業 藥 物 毒 物 試 驗 所 欲 利 用 本 書 全 部 或 部 份 內 容 者, 須 徵 求 著 作 財 產 權 人 同 意 惜 用 資 源 顧 地 球, 本 印 刷 品 採 用 大 豆 環 保 油 墨 印 製 103