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- 尉征 段
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1 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 蕥 第 41 卷 摇 2013 年 4 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 分 析 化 学 (FENXI HUAXUE) 摇 研 究 快 报 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 Chinese Journal of Analytical Chemistry 第 4 期 467 ~ 472 蕥 蕥 藡 藡 研 究 快 报 藡 藡 DOI: / SP. J 微 流 控 芯 片 子 宫 * 李 伟 萱 摇 梁 广 铁 摇 严 伟 摇 张 琼 摇 王 维 摇 周 小 棉 摇 刘 大 渔 ( 广 州 医 学 院 附 属 广 州 市 第 一 人 民 医 院 检 验 科 研 究 室, 广 州 ) 摘 摇 要 摇 由 于 体 外 环 境 对 受 精 和 胚 胎 发 育 的 影 响, 现 有 人 工 辅 助 生 殖 技 术 存 在 受 精 成 功 率 低 和 胎 儿 出 生 后 风 险 高 的 问 题 针 对 上 述 问 题, 本 研 究 发 展 了 一 种 基 于 微 流 控 芯 片 的 人 工 子 宫, 其 特 色 在 于 使 用 子 宫 内 膜 细 胞 鄄 胚 胎 共 培 养 机 制, 并 以 连 续 灌 流 方 式 实 现 细 胞 与 外 界 物 质 交 换 实 验 利 用 上 述 芯 片 完 成 了 排 卵 受 精 着 床 以 及 胚 胎 发 生 等 一 系 列 过 程 与 传 统 方 法 相 比, 芯 片 方 法 不 仅 操 作 简 便, 而 且 可 以 获 得 更 高 的 桑 椹 胚 率 和 囊 胚 率 已 经 取 得 的 研 究 结 果 显 示, 这 种 芯 片 子 宫 有 希 望 发 展 成 人 工 辅 助 生 殖 的 有 力 工 具 关 键 词 摇 微 流 控 芯 片 ; 子 宫 ; 共 培 养 ; 受 精 ; 胚 胎 1 摇 引 摇 言 辅 助 生 殖 技 术 的 应 用 使 得 不 育 夫 妇 得 以 实 现 妊 娠 生 子 的 愿 望, 由 不 育 引 发 的 相 关 问 题 也 随 之 得 到 解 决 体 外 受 精 鄄 胚 胎 移 植 ( In vitro fertilization 鄄 embryo transplantation, IVF 鄄 ET), 即 试 管 婴 儿, 是 辅 助 生 殖 技 术 的 重 要 内 容 该 技 术 是 指 将 从 母 体 取 出 的 卵 子 体 外 受 精 并 发 育 成 前 期 胚 胎 后 移 植 回 母 体 子 宫 内, 经 妊 娠 后 分 娩 婴 儿 [1,2] 历 经 60 余 年 的 发 展,IVF 鄄 ET 已 经 得 到 广 泛 推 广 并 成 为 治 疗 不 孕 症 的 主 要 手 段 尽 管 IVF 鄄 ET 取 得 了 巨 大 成 功, 该 技 术 仍 存 在 许 多 不 足, 其 中 最 突 出 的 问 题 包 括 妊 娠 率 低 多 胎 妊 娠 发 生 率 明 显 增 高 和 出 生 后 缺 陷 风 险 增 高 [3] 究 其 原 因, 主 要 是 由 于 现 有 细 胞 培 养 技 术 不 能 有 效 模 拟 体 内 条 件, 因 而 影 响 了 胚 胎 质 量 因 此, 现 实 医 疗 工 作 中 迫 切 需 要 一 种 能 够 模 拟 子 宫 环 境, 保 证 高 质 量 受 精 和 胚 胎 发 育 的 细 胞 培 养 技 术 微 流 控 芯 片 是 组 织 器 官 仿 真 的 有 力 工 具 [4 ~ 9] 一 方 面, 微 流 控 通 道 具 有 与 体 内 微 血 管 相 似 的 尺 寸, 在 这 个 尺 度 下 流 体 所 具 有 的 层 流 特 性 便 于 实 现 精 确 的 流 体 控 制 ; 另 一 方 面, 通 过 芯 片 材 料 和 芯 片 结 构 设 计, 可 以 有 效 模 拟 组 织 或 器 官 的 结 构 和 功 能 前 期 研 究 报 导 了 一 系 列 基 于 微 流 控 芯 片 的 精 子 分 选 受 精 以 及 胚 胎 发 育 等 单 元 操 作 技 术 [10 ~ 13] 在 这 些 工 作 基 础 上, 微 流 控 芯 片 技 术 有 望 实 现 子 宫 的 整 体 功 能 以 促 进 胚 胎 发 育 和 提 高 胚 胎 质 量 [14,15] 本 工 作 设 计 了 一 种 微 流 控 芯 片 子 宫, 保 证 在 类 似 子 宫 内 部 的 环 境 下 实 现 排 卵 受 精 和 胚 胎 发 生 初 步 结 果 显 示, 芯 片 子 宫 较 之 传 统 细 胞 培 养 平 台 可 以 获 得 更 高 的 桑 椹 胚 率 和 囊 胚 率 2 摇 实 验 部 分 2. 1 摇 实 验 材 料 细 胞 呈 像 使 用 倒 置 荧 光 显 微 镜 ( IX71, Olympus);TS 鄄 2A 四 通 道 独 立 可 控 式 微 量 注 射 泵 ( 保 定 兰 格 ); 聚 碳 酸 酯 (Polycarbonate,PC) 薄 膜 (8 滋 m 滤 孔, 英 国 Whatman 公 司 );SU 光 刻 胶 ( 美 国 Micro 鄄 Chem 公 司 ) 聚 二 甲 基 硅 氧 烷 ( Polydimethylsiloxane, PDMS) 前 体 及 引 发 剂,30 mm 培 养 皿 ( 美 国 Dow Corning 公 司 ) 3 鄄 氨 丙 基 三 乙 氧 基 硅 烷 (3 鄄 aminopropyl triethoxysilan, APTES) PBS M16 培 养 基 明 胶 及 透 明 质 酸 酶 ( 美 国 Sigma 公 司 ) 矿 物 油 二 甲 基 亚 砜 ( 上 海 生 工 ( 上 海 ) 有 限 公 司 ) CellTracker Green 和 CellTracker Red( 美 国 Life Technologies 公 司 ) 成 年 昆 明 小 鼠 购 自 广 东 省 动 物 实 验 中 心 ; 小 鼠 摇 2013 鄄 01 鄄 09 收 稿 ;2013 鄄 02 鄄 26 接 受 基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 ( Nos , ) 国 家 国 际 科 技 合 作 项 目 ( No.2010DFB33880) 广 州 市 医 药 卫 生 科 技 项 目 (Nos A213046, A212028, 20121A021002) 资 助 * E 鄄 mail:[email protected]
2 4摇 68摇 分析化学 第 41 卷 子宫内膜上皮细胞 子宫内膜上皮细胞培养基购自中国齐氏生物科技有限公司 孕马血清促性腺激素 ( Pregnant mare serum gonadotropin,pmsg) 人绒毛膜促性腺激素( Human chorionic gonadotrophin,hcg) 购自杭州动物药品厂 精子洗液 PureSperm Wash( 瑞典 Nidacon international AB 公司) 实验用水为二 次蒸馏水 2. 2摇 芯片结构与加工 芯片包含 3 层结构,顶层和底层为 PDMS 而中间层为多孔 PC 膜( 图 1a) PDMS 层采用标准软刻蚀 工艺 [16] 加工 首先在平板玻璃上完成 SU鄄8 模板的制作 取直径为 3 英寸的玻璃置于浓 H2 SO4 鄄H2 O2 (3 颐 1, V / V) 中煮沸 30 min,取出后用蒸馏水冲洗 3 次,并在蒸馏水中超声清洗 2 次,每次 30 min 超声 后的玻璃用氮气吹干,备用 将洁净玻璃置于匀胶台,向其中心处滴加 SU 光刻胶,匀胶机转速为 600 r / min,持续 30 s,升高转速至 1000 r / min,再持续 30 s 铺胶后的玻璃置于烘胶台上进行前烘,95 益 烘 15 min 待玻璃自然冷却后,用掩膜覆盖玻璃表面的 SU鄄8 胶层,置于紫外光刻机下曝光 20 s 曝光 后立刻将玻璃置于烘胶台上 95 益 烘 15 min 待玻璃自然冷却后将其置于显影液中,轻轻震荡进行显 影,之后用电吹风将其吹干 最后,将模板置于 175 益 烘箱中烘 1 h,进行坚模以得到 SU鄄8 模板 将 Sylgard184 单体与引发剂按体积比 10:1 混合均匀,导入 SU鄄8 模板,将模板置于真空气缸内真空脱气 脱气后置于 80 益 烘箱固化 1 h,自然冷却后将 PDMS 从模板上剥离,剥离后在入口和出口处打孔 芯片 顶层含有宽 500 滋m,高 110 滋m 蜿蜒形通道,通道中交错分布一系列用于捕获卵细胞的弧形筛网,筛网 直径 150 滋m,由 6 根直径 35 滋m 的微柱围成 芯片底层含有 4 个平行的矩形通道 ( 6 mm 伊 3 mm 伊 110 滋m),两端与共同的入口和出口连接 通道底面具有 4 伊3 微柱阵列用于支撑 PC 膜 PC 膜处理按 照文献[17] 的方法,将 PDMS 层等离子处理后与 APTES 处理的 PC 膜封接,步骤如下:淤将需要封接的 PDMS 及 PC 膜 表面氧等离子处理 1 min;于等离子处理后的 PC 膜浸泡于 5% APTES 溶液中 20 min; 盂将 PC 膜取出,用蒸馏水冲洗3 次,以去除表面未结合的APTES,氮气吹干薄膜;榆将PDMS 与PC 膜 摇 图 1摇 a. 芯片结构立体示意图; b. 芯片结构截面图说明芯片对于子宫结构的仿真;c. 芯片结构俯 视图及单个灌流培养单元放大图 Fig. 1摇 a. Schematic illustration of microchip; b. A section鄄view picture illustrating the microchip that mimics the uterus; c. A top鄄view picture showing the pattern of microfluidic channels ( left) and an enlarged view of a single perfusion culture unit
3 第 4 期 李 伟 萱 等 : 微 流 控 芯 片 子 宫 摇 469 摇 加 压 接 触 1 h, 实 现 两 者 的 有 效 封 接 2. 3 摇 生 殖 细 胞 和 子 宫 内 膜 细 胞 的 准 备 IVF 公 鼠 的 选 择 取 精 与 精 子 处 理 [18], 具 体 方 法 : 选 择 8 周 龄 以 上 体 重 大 于 25 g 雄 性 特 征 明 显 的 公 鼠, 颈 部 脱 臼 致 死, 剖 开 腹 部 取 出 附 睾 及 输 精 管, 用 小 镊 子 挤 压 附 睾 尾 部 使 精 子 挤 入 1 ml 平 衡 过 夜 的 精 子 洗 液 滴 中, 去 掉 附 睾 组 织, 将 此 液 滴 置 于 37 益 5 % CO 2 饱 和 湿 度 条 件 下 培 养 20 ~ 25 min, 使 精 子 自 由 浮 动 精 子 获 能 操 作 参 考 精 子 洗 液 试 剂 盒 说 明 书 进 行, 具 体 方 法 : 取 10 滋 L 上 述 初 步 孵 育 分 散 较 好 的 活 跃 精 子 悬 浮 液 加 入 到 50 滋 L 平 衡 过 夜 的 精 子 洗 液 滴 中, 用 血 细 胞 计 数 器 计 算 精 子 浓 度 并 调 整 至 2 伊 10 5 ~ 5 伊 10 5 个 / ml, 将 此 精 子 悬 浮 液 置 于 37 益 5 % CO 2 和 饱 和 湿 度 条 件 下 继 续 培 养 2 h IVF 母 鼠 的 选 择 与 处 理 参 考 文 献 [19,20], 具 体 方 法 : 选 择 6 周 龄 以 上 体 重 大 于 20 g 的 健 康 母 鼠, 每 只 母 鼠 腹 腔 注 射 10 IU PMSG, 间 隔 48 h 后 再 注 射 10 IU HCG, 间 隔 13 ~ 17 h 待 用 将 上 述 处 理 的 母 鼠 于 注 射 HCG 后 13 ~ 17 h, 取 其 输 卵 管 置 于 1 ml 卵 细 胞 洗 涤 液 中, 自 输 卵 管 壶 腹 部 取 出 成 熟 卵 冠 丘 复 合 体 (Oocyte 鄄 corona 鄄 cumulus complex, OCCC), 用 0. 3 % 透 明 质 酸 酶 溶 液 处 理 去 除 卵 丘 细 胞, 再 用 50 滋 L 洗 涤 液 冲 洗 4 次, 得 到 成 熟 裸 卵 小 鼠 子 宫 内 膜 细 胞 在 培 养 瓶 中 进 入 指 数 生 长 期 后 收 获 并 制 成 密 度 为 2 伊 10 5 / ml 的 细 胞 悬 液 备 用 2. 4 摇 芯 片 实 验 操 作 芯 片 和 聚 四 氟 乙 烯 毛 细 管 在 使 用 之 前 80 益 烘 烤 1 h, 微 量 注 射 器 在 75% 乙 醇 中 浸 泡 6 h 后 用 灭 菌 蒸 馏 水 冲 3 次 使 用 前 芯 片 毛 细 管 和 注 射 器 均 置 于 紫 外 灯 下 照 射, 使 用 时 在 超 净 工 作 台 上 将 芯 片 与 注 射 器 通 过 毛 细 管 连 接 明 胶 用 灭 菌 双 蒸 水 配 制 成 0. 5% 的 溶 液 部 分 实 验 中 使 用 CellTracker Green 标 记 小 鼠 子 宫 内 膜 细 胞, 以 CellTracker Red 标 记 卵 细 胞 CellTracker 工 作 液 使 用 二 甲 基 亚 砜 新 鲜 配 置 细 胞 标 记 步 骤 如 下 : 淤 收 集 细 胞 悬 液 后 离 心, 吸 取 上 清 液, 加 入 CellTracker 染 液 于 细 胞 悬 液 中 至 终 浓 度 10 滋 mol / L,37 益 孵 育 30 min; 于 将 细 胞 离 心, 弃 上 清 后 加 入 PBS 缓 冲 液,37 益 孵 育 10 min; 盂 再 次 离 心 并 加 入 PBS 缓 冲 液 洗 涤 细 胞, 目 的 在 于 清 除 未 结 合 染 料 用 CellTracker Green 标 记 细 胞 在 荧 光 显 微 镜 下 观 察 时 用 蓝 光 激 发 观 察, 而 CellTracker Red 标 记 细 胞 用 绿 光 激 发 观 察 芯 片 操 作 步 骤 如 图 2 所 示 :(a) 芯 片 通 道 出 入 口 1, 4 开 放,2, 3 关 闭 操 作 前 先 用 0. 5% 明 胶 溶 液 灌 注 芯 片 通 道 2 min 微 量 注 射 泵 抽 取 20 ml 子 宫 内 膜 细 胞 悬 液 从 芯 片 进 样 通 道 缓 慢 注 入, 该 步 骤 使 子 宫 内 膜 细 胞 沉 积 在 上 层 通 道 的 卵 细 胞 捕 获 区 排 出 剩 余 细 胞 悬 液 后 芯 片 静 置 于 培 养 箱 中 静 置 8 h 后, 用 齐 氏 实 验 室 配 制 的 子 宫 内 膜 培 养 基 以 10 滋 L / h 流 速 灌 流 培 养 ; (b) 培 养 小 鼠 子 宫 内 膜 上 皮 细 胞 24 h 后, 芯 片 通 道 出 入 口 1, 2 开 放,3, 4 关 闭, 以 10 滋 L / h 流 速 引 入 小 鼠 卵 细 胞 悬 液 以 将 卵 细 胞 其 捕 获 于 微 筛 网 中 ;(c) 继 而 以 10 滋 L / h 流 速 向 通 道 引 入 获 能 精 子, 保 留 6 h 完 成 受 精 ; (d) 芯 片 通 道 出 入 口 3, 4 开 放,1,2 关 闭, 以 10 滋 L / h 速 度 持 续 灌 流 M16 胚 胎 培 养 液 实 验 期 间 每 隔 24 h 在 倒 置 显 微 镜 下 观 察 芯 片 中 胚 胎 的 发 育 情 况 并 拍 照 记 录 2. 5 摇 芯 片 与 传 统 方 法 对 照 实 验 对 照 实 验 中, 在 直 径 30 mm 的 培 养 皿 中 加 入 胚 胎 培 养 液 M 滋 L, 覆 盖 矿 物 油 每 个 液 滴 中 约 含 5 个 卵 细 胞 加 入 获 能 的 精 子, 受 精 后 把 受 精 卵 移 到 新 的 培 养 液 滴 中, 每 24 h 更 换 一 次 培 养 液, 直 到 受 精 卵 发 育 成 囊 胚 芯 片 组 的 卵 细 胞 样 本 总 数 为 292, 对 照 组 卵 细 胞 样 本 总 数 为 295 比 较 芯 片 方 法 与 传 统 方 法 在 受 精 率 4 鄄 细 胞 率 桑 葚 胚 率 和 囊 胚 率 方 面 的 差 别 其 中, 受 精 率 4 鄄 细 胞 率 桑 葚 胚 率 和 囊 胚 率 分 别 为 发 育 成 2 鄄 细 胞 体 4 鄄 细 胞 体 16 鄄 细 胞 体 和 32 鄄 细 胞 体 的 受 精 卵 占 卵 细 胞 总 数 的 百 分 比 两 组 实 验 数 据 差 异 显 著 性 用 t 检 验 分 析 3 摇 结 果 与 讨 论 3. 1 摇 微 流 控 芯 片 设 计 本 研 究 借 助 微 流 控 芯 片 细 致 模 拟 子 宫 的 结 构 与 功 能, 保 证 受 精 和 胚 胎 发 生 过 程 在 类 似 体 内 环 境 下 完 成 子 宫 腔 内 衬 子 宫 内 膜, 是 直 接 与 受 精 卵 / 胚 胎 接 触 的 部 分 为 模 拟 上 述 结 构, 研 究 设 计 了 一 种 多
4 4摇 70摇 分析化学 第 41 卷 层微流控芯片,其特色在于以多孔薄膜材料支撑子宫内膜细胞生长,模拟子宫内膜结构( 图 1b) 实验 选用孔径为 8 滋m 的 PC 滤膜,一方面可以截留子宫内膜细胞,另一方面可以作为细胞培养的支撑并允许 培养液经由滤孔扩散为细胞及受精卵提供养分 子宫内膜细胞培养区的微筛网结构可以实现卵细胞定位 捕获,这样就模拟体内微环境建立了卵细胞 / 胚胎鄄子宫内膜细胞共培养体系(见图 2) 此外,结合芯片内 部设计与外部控制,将卵细胞定位 受精和胚胎形成在芯片上集成,可以尽量减少外界对细胞的干扰 图 2摇 明场与荧光合成图显示芯片上卵细胞与子宫内膜细胞的共培养 Fig. 2摇 A composite photo showing the co鄄culture of endometrial epithelial cells and zygote on microfluidic chip a. 明场下芯片内的受精卵与子宫内膜上皮细胞; b. 子宫内膜上皮细胞荧光染色图( CellTracker Green 标记) ; c. 受精 卵荧光染色图( CellTracker Red 标记) ; d. 合成图( 放大倍数 10伊10, 标尺 100 滋m) a. Endometrial epithelial cells and zygote on microfluidic chip ( bright field) ; b. Fluorescence photo of endometrial epithelial cells ( stained with CellTracker Green) ; c. Fluorescence photo of zygote ( stained with CellTracker Red) ; d. A composite pho鄄 to of a, b and c. (10伊10, scale bar: 100 滋m). 3. 2摇 芯片上细胞共培养机制的建立 如图 3 所示,在连接芯片出入口的 4 路微量注 射泵协同控制下,可以完成一系列细胞操作 首先 利用多孔滤膜截留子宫内膜细胞,继而用微筛网捕 获卵细胞 这样,卵细胞贴附于子宫内膜细胞层上, 模拟了排卵过程 贴附有子宫内膜细胞的滤膜模拟 子宫内膜结构,不仅对卵细胞起到支持 保护和营养 作用,还可以通 过 细 胞 连 接 建 立 细 胞 之 间 的 通 讯 滤膜上的细胞藉由滤孔与底部的灌流培养液进行物 质交换,模拟了体内细胞与毛细血管之间的物质交 换形式 这种结合主动灌流与被动扩散的物质运输 形式,不仅避免了流体剪切力对于细胞的伤害,而且 还可以及时排除代谢产物,消除代谢物蓄积对细胞 摇 图 3摇 芯片操作步骤示意图( 箭头表示液流方向) 生长发育的不利影响 这种包含细胞鄄细胞相互作用 以及细胞鄄外界物质交换作用的芯片共培养体系,有 效模拟了子宫内部的微环境 3. 3摇 芯片子宫内的受精及着床 卵细胞培养 24 ~ 48 h 后,向芯片引入获能的小 鼠精子模拟受精过程 少量精子接触卵细胞后与其 结合,约 6 h 后完成受精 受精后继续灌流培养,培 Fig. 3摇 Illustration of operation processes on microfluidic chip ( arrows show the directions of fluid) ( a) 子宫内膜细胞沉积; ( b) 卵细胞定位捕获; ( c) 受精; ( d) 胚胎生成 (a) Sedimentation of endometrial epithelial cells on porous poly鄄 carbonate ( PC) film; ( b) Capturing of mouse oocytes; ( c) Fer鄄 tilization; ( d) Embryo formation. 养液一方面为受精卵不断补充新的营养物质,另一方面可以及时排除代谢废物 受精后约 12 h 后能观 察到小鼠精卵细胞结合 受精卵经过连续多次分裂之后在 4 d 内形成桑椹胚(16 细胞),后者在芯片通 道内继续分裂形成囊胚(32 细胞),大约在受精后 6 ~ 8 d 进入子宫内膜层完成着床( 见图 4) 3. 4摇 芯片子宫与传统方法的比较 实验比较了芯片子宫与传统方法获得的 2鄄细胞率 4鄄细胞率 桑椹胚率和囊胚率,这些指标可以动 态地反映胚胎生成状况 在离体培养哺乳类动物( 包括人) 受精卵时发现,在一些化学成分确定的培养
5 第4 期 李伟萱等: 微流控芯片子宫 摇 4摇71 图 4摇 连续观察芯片上受精卵细胞 Fig. 4摇 Continuous observation of a fertilized ovum on microchip a. 0 h;b. 12 h (2鄄细胞) ;c. 72 h(16鄄细胞) ;d. 96 h(32鄄胞) ( 放大倍数 10 伊10, 标尺 100 滋m) a. 0 h; b. 12 h (2鄄cells) ; c. 72 h (16鄄cells) ; d: 96 h (32鄄cells) ( 10伊10, scale bar: 100 滋m). 基中受精卵往往不能发育到囊胚,而是停顿在某个特定的发育时期,这种现象被称作 发育阻断冶 发 育阻断冶 发生的具体机制尚不明了,分析可能是由于体外环境中存在不利于胚胎生成的因素 为了克 服胚胎体外发育阻断,实验在芯片上采用卵细胞与子宫内膜细胞灌流共同培养方法,提供高度仿真的微 环境以促进胚胎发育 结果显示,培养皿组的 2鄄细胞体,4鄄细胞体,桑椹 胚以及囊胚数目分别为 202,149,128 和 73,而芯片 组的对应数值为 206,200,159 和 122 芯片组受精 卵各时期地发育情况均优于培养皿组 ( 图 5) 虽然 两组的受精情况(2鄄细胞率) 大致相当,但在胚胎逐 渐发育的过程中体现出明显差异 结果表明,芯片 组桑椹胚率和囊胚率明显高于培养皿对照组,以囊 胚率的提高最为显著 相对于传统的培养皿方法, 本研究发展的芯片子宫方法更有利于提高受精率及 囊胚率 与单纯的卵细胞培养相比,微流控芯片子 宫更有利于体外小鼠胚胎发育,分析其原因可能为: (1) 子宫内膜上皮细胞模拟体内子宫内环境,可分泌 一些对早期胚胎发育有利的物质;(2) 子宫内膜上皮 细胞可能通过与胚胎的相互作用促进其发育;(3) 所 摇 图 5摇 芯片子宫与传统培养皿中胚胎形成的比较 Fig. 5 摇 Comparison of embryo development in petri dish and microfluidic uterus *: p<0. 05, difference is significent compared with the control鄄 group. 采用的灌流培养方法模拟了生理状态细胞与外界的物质交换形式,不仅为细胞提供充足的养分, 还可 以及时清除对于胚胎发育不利的代谢产物 综上所述,研究通过在微流控芯片上细致仿真子宫的结构 和功能形成了一个类似于子宫的微环境 这种芯片子宫有利于卵细胞受精及受精后胚胎的生长发育, 并能得到质量较好的胚胎 该技术除可应用于人类生殖医学工程,还可为深入研究胚胎发育机制及动 物胚胎工程提供优质的胚胎,具有较为广阔的应用前景 4摇 结摇 论 发展了一种微流控芯片子宫,通过使用子宫内膜细胞鄄胚胎共培养以及连续灌流方式细致模拟子宫 环境以促进胚胎生成 利用上述芯片子宫,完成了排卵 受精 着床以及胚胎发生等一系列实验过程 芯片子宫不仅操作简便,还可以获得较之传统方法更高的胚胎形成率 我们的后续实验会将芯片子宫 发生的囊胚移植到动物子宫,直至发育成胎儿 References 1摇 Reefhuis J, Honein M A, Schieve L A, Correa A, Hobbs C A, Rasmussen S A. Hum. Reprod, 2009, 24(2) : 摇 Lii J, Hsu W J, Parsa H, Das A, Rouse R, Sia S K. Anal. Chem., 2008, 80(10) :
6 4 摇 72摇 分 析 化 学 第 41 卷 3 摇 Hansen M, Bower C, Milne E, de Klerk N,Kurinczuk J J. Hum. Reprod, 2005, 20(2): 摇 HUO Dan 鄄 Qun, LIU Zhen, HOU Chang 鄄 Jun, YANG Jun, LUO Xiao 鄄 Gang, FA Huan 鄄 Bao, DONG Jia 鄄 Le, ZHANG Yu 鄄 Chan, ZHANG Guo 鄄 Ping, LI Jun 鄄 Jie. Chinese J. Anal. Chem., 2010, 38(9): 霍 丹 群, 刘 振, 侯 长 军, 杨 军, 罗 小 刚, 法 焕 宝, 董 家 乐, 张 玉 婵, 张 国 平, 李 俊 杰. 分 析 化 学, 2010, 38(9): 摇 Viravaidya K, Sin A, Shuler M L. Biotechnol. Prog., 2004, 20(1): 摇 GAO Jian, YING Xue 鄄 Feng, FANG Zhao 鄄 Lun, XIA Fang 鄄 Quan. Chem. J. Chinese Universities, 2003, 24(9): 高 健, 殷 学 锋, 方 肇 伦, 夏 方 诠. 高 等 学 校 化 学 学 报, 2003, 24(9): 摇 LIU Wen 鄄 Ming, LI Li, REN Li, WANG Jian 鄄 Chun, TU Qin, WANG Xue 鄄 Qin, WANG Jin 鄄 Yi. Chinese J. Anal. Chem., 2012, 40(1): 刘 文 明, 李 立, 任 丽, 王 建 春, 涂 琴, 王 雪 琴, 王 进 义. 分 析 化 学, 2012, 40(1): 摇 ZHANG Qiong, ZHOU Xiao 鄄 Mian, YAN Wei, LIANG Guang 鄄 Tie, ZHANG Qi 鄄 Chao, LIU Da 鄄 Yu. Chinese J. Anal. Chem., 2012, 40(7): 张 琼, 周 小 棉, 严 伟, 梁 广 铁, 张 其 超, 刘 大 渔. 分 析 化 学, 2012, 40(7): 摇 YAO Bo, FENG Xue, LUO Guo 鄄 An. Chem. J. Chinese Universities, 2005, 26(1): 姚 波, 冯 雪, 罗 国 安 王 义 明. 高 等 学 校 化 学 学 报, 2005, 26(1): 摇 Heo Y S, Cabrera L M, Bormann C L, Shah C T, Takayama S, Smith G D. Hum. Reprod, 2010, 25(3): 摇 Wheeler M B, Walters E M, Beebe D J. Theriogenology, 2007, 68( Suppl. 1): S178-S 摇 Eisenbach M, Giojalas L C. Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 2006, 7(4): 摇 Ong S M, Zhang C, Toh Y C, Kim S H, Foo H L, Tan C H, van Noort D, Park S,Yu H. Biomaterials, 2008, 29(22): 摇 Hoffman L H, Olson G E, Carson D D, Chilton B S. Endocrinology, 1998, 139(1): 摇 Blauer M, Heinonen P K, Martikainen P M, Tomas E, Ylikomi T. Hum. Reprod, 2005, 20(4): 摇 Duffy D C, McDonald J C, Schueller O J, Whitesides G M. Anal. Chem., 1998, 70(23): 摇 Sunkara V, Park D K, Hwang H, Chantiwas R, Soper S A, Cho Y K. Lab Chip, 2011, 11(5): 摇 Han C, Zhang Q, Ma R, Xie L, Qiu T, Wang L, Mitchelson K, Wang J, Huang G, Qiao J, Cheng J. Lab Chip, 2010, 10(21): 摇 Nagy A, Gertsenstein M, Vintersten K, Behringer R. Manipulating the Mouse Embryo. USA: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2005:, 摇 Ma R, Xie L, Han C, Su K, Qiu T, Wang L, Huang G, Xing W, Qiao J, Wang J, Cheng J. Anal. Chem., 2011, 83(8): Uterus on a Microfluidic Chip LI Wei 鄄 Xuan, LIANG Guang 鄄 Tie, YAN Wei, ZHANG Qiong,WANG Wei, ZHOU Xiao 鄄 Mian, LIU Da 鄄 Yu * (Department of Laboratory Medicine, Guangzhou First People 忆 s Hospital, Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou , China) Abstract 摇 Due to the influence of environment in vitro, conventional human assisted reproduction technology associates the problems such as low fertilization rate and high risk of postnatal infants. To circumvent this issue, we developed a microfluidic chip based artificial uterus which features the co 鄄 culture of embryo and endometrial cells with perfusion flow. A series of steps related to embryogenesis, including ovulation, fertilization, implantation and embryo formation, were continuously implemented on the microfluidic chip. In comparison with conventional petri dish methods, the microfluidic uterus based protocol is simple in operation, and is able to achieve higher morulae rates and blastocyte rates. The results indicated that the developed microfluidic uterus may serve as a powerful tool for human assisted reproduction. Keywords 摇 Microfluidic chip; Uterus; Co 鄄 culture; Fertilization; Embryo ( Received 9 January 2013; accepted 26 February 2013)
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an tai yin 安 胎 饮 775 ba wei dai xia fang 八 味 带 下 方 756 ba zhen tang 八 珍 汤 600 ba zheng san 八 正 散 601 bai he gu jin tang 百 合 固 金 汤 680 bai hu jia ren shen tang 白 虎 加 人 参 汤 755 bai hu tang 白 虎 汤 660 bai
Stock Transfer Service Inc. Page No. 1 CENTURY PEAK METALS HOLDINGS CORPORATION (CPM) List of Top 100 Stockholders As of 12/31/2015 Rank Sth. No. Name
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(CIP) : /. :, (/ ) ISBN T S H CI P (2006) CH IJIASH EN GXIAN G YINSHI WEN H U A Y U CHENGY U 1
(CIP) : /. :, 2006. 12 (/ ) ISBN 7-81064-917-5... - - - - -. T S971-49 H136. 3 CI P (2006) 116732 CH IJIASH EN GXIAN G YINSHI WEN H U A Y U CHENGY U 105 100037 68418523 ( ) 68982468 ( ) www. cnup. cnu.
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参 会 人 员 名 单 Last Name 姓 名 公 司 Tel Fax Bai 柏 煜 康 复 之 家 8610 8761 4189 8610 8761 4189 Bai 白 威 久 禧 道 和 股 权 投 资 管 理 ( 天 津 ) 有 限 公 司 8610 6506 7108 8610 6506 7108 Bao 包 景 明 通 用 技 术 集 团 投 资 管 理 有 限 公 司 8610
No. Name College Major 1 Ke Yang Chuan College of Science Chemistry 2 Wang Li Qun College of Science Mathematics
No. Name College Major Email 1 Ke Yang Chuan College of Science Chemistry [email protected] 2 Wang Li Qun College of Science Mathematics [email protected] 3 Xu Tao College of Science Mathematics [email protected]
诗 经 简介 诗经 是中国第一部诗歌总集 它汇集了从西周初年到春秋中期 五百多年间的诗歌三百零五篇 诗经 在先秦叫做 诗 或者取诗的 数目整数叫 诗三百 本来只是一本诗集 从汉代起 儒家学者把 诗 当作经典 尊称为 诗经 列入 五经 之中 它原来的文学性质就 变成了同政治 道德等密切相连的教化人的教
诗经 目录 诗经 简介 国风 关睢 葛覃 卷耳 螽斯 桃夭 阿芣苢 汉广 汝坟 鹊巢 采蘩 草虫 甘棠 行露 摽有梅 小星 江有汜 野有死麕 驺虞 柏舟 绿衣 燕燕 日 月 击鼓 凯风 雄雉 匏有苦叶 谷风 式微 简兮 泉水 北门 静女 二子 乘舟 柏舟 墙有茨 相鼠 载驰 考磐 硕人 芄兰 氓 河广 有狐 木瓜 黍离 君子阳阳 葛蕉 采葛 大车 将仲子 叔于田 遵大路 女曰鸡鸣 有 女同车 狡童
(CIP) : /. :, (/ ) ISBN T S H CI P (2006) XIANGPIAOWANLI JIUW ENH UA YU CH ENGYU
(CIP) : /. :, 2006. 12 (/ ) ISBN 7-81064-916-7... - - - - -. T S971-49 H136. 3 CI P (2006) 116729 XIANGPIAOWANLI JIUW ENH UA YU CH ENGYU 105 100037 68418523 ( ) 68982468 ( ) www.cnup.cnu.cn E- mail cnup@
CIP /. 2005. 12 ISBN 7-5062 - 7683-6 Ⅰ.... Ⅱ.... Ⅲ. Ⅳ. G624.203 CIP 2005 082803 櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶櫶 17 710001 029-87232980 87214941 029-87279675 87279676 880 1230 1/64 4.0 110 2006 2 1 2006 2 1 ISBN
xiè hòu qù fù tiáo pàn xiáng sh ng l huán fú yóu sh n du wán guì d u còu g qiè qì bì j x ng yín dào j ji yòu hàndàn lián tu yín qìn k n * chán zhòu yán yóu kuòy láo jìn jíwéi su
Microsoft Word - Chord_chart_-_Song_of_Spiritual_Warfare_CN.docx
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International Federation of Bodybuilding and Fitness 019 ``The Belt and Road`` Worldwide Bodybuilding and Fitness Championships 10-14.10.019, Xi`an, O F F I C I A L C O N T E S T R E S U L T S Men's Classic
1 yáo zhuàn jué gu zài liè r sh ng xué yíng ch jié jù rèn g wù yú qiè yàng huán P9 líng luò jiàn sh ng y ku liàn r shàn dùn sì lièlièqièqiè rèn zhù yìj yíng guà dí yú bò chu n láng huán dù xià
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2 *. 20037 2. 50640 CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI 0. 980 /j. issn. 0254-508X. 207. 08. 004 Incipient Fault Detection in Papermaking Wastewater Treatment Processes WANG Ling-song MA Pu-fan YE Feng-ying XIONG
yòu xù 373 375 xiá : guà jué qi n mi o dú k ng tóng luán xié háng yè jiào k n z z n shèn chì x 1óng l n t n kuáng qi q ch qì yì yùn yo q w zhuàn sù yí qìng hé p suì x tán cuàn mi o jù yú qìng shì sh
現代學術之建立 陳平 998 7-3-3592-6 美學十五講 淩繼堯 美學 23 7-3-643-4 論集 徐複觀 書店出版社 的方位 陳寶生 宣傳 敦煌文藝出版社 論集續篇 徐複觀 書店出版社 莊子哲學 王博 道家 7-3-666-3 的天方學 沙宗平 伊斯蘭教 7-3-6844- 周易 經傳十
東西方比較研究 範明生, 陳超南 物流發展報告 物流與採購聯合會 物流發展報告 物流與採購聯合會 物流發展報告 丁俊發 唯物史觀與歷史科學 地理學 社會科學院出版 23 23 物流 研究報告 2 物資出版社 22 7-547-88-5 物流 物資出版社 7-547-22-3 龐卓恒 歷史唯物主義 高等教育出版社 7-4-4333-X 周尚意, 孔翔, 朱竑 地理學 高等教育出版社 7-4-446-
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Microsoft Word - Chord_chart_-_The_Word_of_God_in_Song CN.docx
100:1-5 D A D 1 Pu tian xia dang xiang ye he hua huan hu G Em A 2 Ni men dang le yi shi feng ye he hua D G Dang lai xiang ta ge chang Em G A 3 Ni men dang xiao de ye he hua shi shen D G Em A Wo men shi
戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s
370 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(3) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 戊 酸 雌 二 醇 片 联
Microsoft Word - 詩經注釋.docx
詩 經 注 釋 目 錄 詩 經 簡 介 關 雎 葛 覃 卷 耳 螽 斯 桃 夭 芣 苢 漢 廣 汝 墳 鵲 巢 采 蘩 草 蟲 甘 棠 行 露 摽 有 梅 小 星 江 有 汜 野 有 死 麕 騶 虞 柏 舟 綠 衣 燕 燕 日 月 擊 鼓 凱 風 雄 雉 匏 有 苦 葉 穀 風 式 微 簡 兮 泉 水 北 門 靜 女 二 子 乘 舟 柏 舟 牆 有 茨 相 鼠 載 馳 考 磐 碩 人 芄 蘭 氓 河
DELE julio 2018
01665571 180703156001020001 SONG HAOWEN 01320735 180703156001020002 LI HUILING 01820246 180703156001020003 WANG MENGXIAO 01820248 180703156001020004 ZHANG YI 01820249 180703156001020005 LI HENGYANG 01821138
2010 10 28 1 106 ... 5... 6... 7... 10... 15... 18... 18... 22... 25... 27... 27... 40... 40... 43... 50... 50... 59... 59... 68... 69 2 106 ... 71... 72... 73... 75... 76... 77... 77... 77... 78... 79...
2010.6-FM
发 展 视 窗 Fa Zhan Shi Chuang 关 注 发 展 动 向 感 受 发 展 节 拍 宝 钢 沪 上 固 废 资 源 综 合 利 用 业 务 整 合 启 动 6 月 17 日, 宝 钢 发 展 公 司 与 一 钢 公 司 在 宝 山 宾 馆 签 订 了 一 钢 公 司 拥 有 的 昌 新 钢 渣 公 司 和 开 拓 磁 选 金 属 公 司 等 两 家 钢 渣 处 理 公 司 的 股
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2019 Chinese Taipei National High School Athletic Game Boxing Championship Junior Men Division Top 8 As of WED 24 APR 2019 Men s Mosquito(38-41Kg) Ran
Junior Men Division Men s Mosquito(38-41Kg) 1 CHANG, CHI-EN TPE 2 HUANG, YU-CHEN TPE 3 YANG, MIN-SHUN TPE 3 CHIU, CHENG TPE 5 WU, CHIA-TING TPE 5 LIN, KUAN-YI TPE 7 TSAI, MING-FENG TPE 7 CHOU, MING-HSIEN
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PARTE ESCRITA PARTE ORAL NIVEL CÓDIGO APELLIDO NOMBRE FECHA HORA AULA FECHA Hora Prep Hora Ex AULA 13050315601020001 NI HUANMENG 25-may 13050315601020002 GUO YUANCHUN 25-may 13050315601020004 XU AI 25-may
Wu Yi Shan Slalom Open Wu Yi Shan, China, November 2018 Final Ranking Battle Senior Women Rank ID Name Ctry Zapuskalova Nadezhda
Wu Yi Shan Slalom Open Wu Yi Shan, China, 24-25 November 2018 Final Ranking Battle Senior Women 1 2851510000097 Zapuskalova Nadezhda RUS 2 2010930000595 Moritoki Mika JPN 3 2891510000072 Pervenenok Oksana
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Nurture Category Boy's Under 12 Event - Main Draw Q -Final S- Final Final Cornelius Tan Yu En Ang Jiun Yong M205 2/6, 4.10pm, T5 Loser to A1 M230 2/6,
Nurture Category Boy's Under 12 Event - Main Draw Q -Final S- Final Final Ang Jiun Yong M205 2/6, 4.10pm, T5 Loser to A1 M230 2/6, 4.50pm,T8 Loser to D4 Ang Jiun Yong Ng Hao Lun Brian Tan Kai Yang M206
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中 国 农 业 大 学 学 报 1999, 4(3): 109~113 Journal of China Agricultural University 小 鼠 桑 棍 胚 玻 璃 化 冷 冻 前 后 生 物 频 谱 处 理 对 体 外 发 青 的 影 晌 1 朱 士 恩 2 王 海 彦 曾 申 明 王 永 胜 张 忠 诚 ( 中 国 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院 ) 周 林 陈 银 (
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区 政 协 第 十 三 届 委 员 会 第 五 次 会 议 召 开 区 政 协 举 行 十 三 届 十 二 次 常 委 ( 扩 大 ) 会 议 区 政 协 组 织 重 点 课 题 调 研 2014 / 4 总 第 16 期 团 结 民 主 的 大 会 中 国 人 民 政 治 协 商 会 议 上 海 市 普 陀 区 第 十 三 届 委 员 会 第 五 次 会 议 于 7 月 29 日 在 普 陀 区
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吉 林 农 业 全 省 农 业 产 业 化 工 作 会 议 现 场 王 守 臣 副 省 长 作 重 要 讲 话 全 省 农 业 产 业 化 工 作 会 议 现 场 月 日, 省 政 府 在 长 春 召 开 了 全 省 农 业 产 业 化 工 作 会 议, 深 入 研 究 农 产 品 加 工 业 发 展 面 临 的 新 情 况 新 问 题, 全 面 部 署 应 对 新 挑 战 夺 取 新 跨 越 的
CONTENTS 目录 县区人武 35 坚持军民融合理念 打造渌湘发展升级版 基地巡礼 38 工农武装割据的星星之火在这里点燃 走访秋收起义文家市会师纪念馆 党管武装 41 强根固本推进国防后备力量建设 株洲县人武部民兵建设纪实 2014 年 2 月 第 2 期 总第 4 期 内部资料准印证号 04
卷首语 JUAN SHOU YU 无悔军旅 老兵 初冬时节 我含泪送别了曾朝夕相处三年的战友 就要踏上归家的 旅途 那情同手足的每一幕 以及所有军旅生活的点点滴滴也将随之装 入行囊 但愿这终生难忘的军旅生涯永远是每一个军人心中最美好的珍 藏 广州军区副参谋长许再华 省军区领导黄跃进 戴焕 陈长寿 姜英宇以及广州军区机关工作组领导现场观摩 军队就是陶冶情操的熔炉 军队就是塑造灵魂的基地 当你们回到 家乡
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48 東華漢學 第20期 2014年12月 後 卿 由三軍將佐取代 此後 中大夫 極可能回歸原本職司 由 於重要性已然不再 故而此後便不見 中大夫 記載於 左傳 及 國 語 關鍵詞 左傳 中大夫 里克 丕鄭 卿
東華漢學 第 20 期 47-98 頁 東華大學中國語文學系 華文文學系 2014 年 12 月 春秋晉國 中大夫 考 黃聖松** 摘要 本文討論 左傳 國語 所載 中大夫 之含義及職司內容 認為 中大夫 不可與 上大夫 下大夫 排比 視為 大夫 等 第 左傳 所載 大夫 一詞前常冠以其他名詞 如 中軍大夫 上軍大夫 下軍大夫 七輿大夫 公族大夫 及 僕大 夫 筆者認為 冠諸 大夫 前名詞即是該大夫職司範圍
Please sign your attendance in the column in accordance to the date of the lesson you are attending Semiconductor Physics and Devices Attendanc
8-Jan 10-Jan 14-Jan 15-Jan 17-Jan 21-Jan 22-Jan 23-Jan 24-Jan 25-Jan 28-Jan 29-Jan 31-Jan 11-Feb 12-Feb 14-Feb 18-Feb Lect 1 Lect 2 Lect 3 Lab 1 - L1 Lab 1 - L2 Lab 1 - L3 Lect 4 Lab 1 - L4 Lect 5 Lect
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Supporting Information The Synthesis and Bioactivity Investigation of the Individual Components of Cyclic Lipopeptide Antibiotics A-Long Cui, Xin-Xin Hu, Yan Gao, Jie Jin, Hong Yi, Xiu-Kun Wang, Tong-Ying
SURVEY OF XISHAN DISTRICT (m) 3.74 4.36 (m) 2.82 2.98 SURVEY OF XISHAN DISTRICT SURVEY OF XISHAN DISTRICT SURVEY OF XISHAN DISTRICT SURVEY
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吉 林 农 业 全 省 农 机 购 置 补 贴 工 作 会 议 现 场 3 月 15 日, 全 省 农 机 购 置 补 贴 工 作 会 议 在 长 春 市 召 开 会 议 的 主 要 任 务 是 进 一 步 深 入 贯 彻 全 省 农 村 农 业 工 作 会 议 和 全 国 农 机 化 工 作 会 议 精 神, 认 真 落 实 全 国 农 机 购 置 补 贴 工 作 会 议 的 部 署, 全 面 总
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成 大 中 文 學 報 第 五 十 二 期 Re-examination of the Core Value in Yi Jing Studies of Xun Shuang: Constructing the Confucius Meaning via Phenomenon and Number
成 大 中 文 學 報 第 五 十 二 期 2016 年 3 月 頁 1-28 國 立 成 功 大 學 中 文 系 縱 橫 象 數, 儒 門 義 理 荀 爽 易 學 核 心 價 值 的 重 建 與 再 定 位 * 曾 暐 傑 摘 要 荀 爽 (128-190) 易 學 歷 來 為 人 所 關 注 的 即 其 乾 升 坤 降 的 學 說, 並 將 此 視 為 其 易 學 的 核 心 觀 念 順 此,
Case Doc 1062 Filed 11/26/18 Entered 11/26/18 11:08:44 Desc Main Document Page 1 of 8 UNITED STATES BANKRUPTCY COURT DISTRICT OF MASSACHUSETT
Document Page 1 of 8 UNITED STATES BANKRUPTCY COURT DISTRICT OF MASSACHUSETTS ) In Re: ) ) Chapter 11 ) TELEXFREE, LLC, ) Case No. 14-40987-MSH TELEXFREE, INC., ) Case No. 14-40988-MSH TELEXFREE FINANCIAL,
211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont
210 毛 果 芸 香 碱 联 合 拉 坦 前 列 素 治 疗 原 发 性 急 性 闭 角 型 青 光 眼 的 疗 效 观 察 符 元 党 1, 郑 振 优 2, 林 再 雄 2, 周 吉 良 1. 昌 江 黎 族 自 治 县 中 西 医 结 合 医 院, 海 南 昌 江 572700 2. 海 南 医 学 院 附 属 医 院 眼 科, 海 南 海 口 570100 1 摘 要 : 目 的 探 讨
Microsoft Word - 201506定版
56 Chinese Journal of Library and Information Science for Traditional Chinese Medicine Dec. 2015 Vol. 39 No. 6 综 述 中 医 药 学 语 言 系 统 研 究 综 述 于 彤, 贾 李 蓉, 刘 静, 杨 硕 *, 董 燕, 朱 玲 中 国 中 医 科 学 院 中 医 药 信 息 研 究 所,
NCCC Swim Team James Logan High school - 8/5/2018 Results - Adult Event 102 Mixed Yard Medley Relay Team Relay Finals Time 1 Beida-Zhonglian
NCCC Swim Team James Logan High school - 8/5/2018 Results - Adult Event 102 Mixed 60-69 200 Yard Medley Relay 1 Beida-Zhonglian B 3:11.63 2 Beida-Zhonglian A 3:18.29 HY-TEK's MEET MANAGER Event 103 Mixed
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16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%
综合报道
55 doi:10.3969j.issn.1000-3606.2014.01.01 论 著 不 同 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 赵 玉 祥 岳 虹 霓 杨 占 华 江 苏 省 淮 安 市 保 健 院 新 生 儿 科 ( 江 苏 淮 安 223002) 摘 要 : 目 的 探 讨 妊 娠 期 高 血 压 疾 病 胎 膜 早 破 等 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 方 法 回 顾 性
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吉 林 农 业 封 面 : 东 丰 县 梅 花 鹿 之 乡 P08 全 国 测 土 配 方 施 肥 手 机 信 息 服 务 现 场 会 在 长 春 召 开 9 月 17 日, 东 丰 县 农 民 科 技 教 育 中 心 在 东 丰 县 大 阳 镇 平 安 村 举 办 了 农 村 经 纪 人 阳 光 工 程 培 训 班 图 为 培 训 结 束 后, 参 训 学 员 拿 到 结 业 证 时 和 同 行
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20 1 2010 10 Vol.20 Special 1 The Chinese Journal of Nonferrous Metals Oct. 2010 1004-0609(2010)S1-s0127-05 Ti-6Al-4V 1 2 2 (1. 710016 2., 710049) 500~1 000 20 Ti-6Al-4V(TC4) TC4 800 TC4 800 TC4 TC4 800
管 理 论 道 创 新 内 部 审 计 工 作 的 实 践 和 思 考 党 建 征 文 紧 跟 改 革 步 伐 勇 担 发 展 责 任 心 情 随 笔 那 些 年 和 字 母 恋 爱 的 美 好 时 光 SHENZHEN INVESTMENT HOLDINGS 深 圳 投 控 危 废 处 理 行 业 任 重 道 远 两 会 聚 焦 国 企 改 革 刘 仲 健 : 与 兰 为 伴, 创 新 不 止 深
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PARTE ESCRITA PARTE ORAL NIVEL CÓDIGO APELLIDO NOMBRE FECHA HORA AULA FECHA Preparación Examen AULA 171102156001020001 LI LINGWEN 171102156001020002 CHENG LIXIA 171102156001020003 YAN QI 171102156001020004
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2016 GCE O Level Results Release 11 Jan 2017 CLASS OF 2016 HOMECOMING 21 Apr 2017 (Friday) 2017 Sec 5 Normal(Academic) Students who qualify for Polytechnic Foundation Programme 1. ADAM B ZULKIFLY (5B)
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33 2 2011 4 ol. 33 No. 2 Apr. 2011 1002-8412 2011 02-0104-08 1 1 1 2 361003 3. 361009 3 1. 361005 2. GB50023-2009 TU746. 3 A Study on Single-span RC Frame Reinforced with Steel Truss System Yuan Xing-ren
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0 岚 卷 第 二 编 第 二 编 岚 卷 121 日 照 122 第 二 编 安东卫城池图 丁士价 1676 1727 字介臣 号龙溪 丁景次子 日照丁氏 十支 六世 日照市岚区后村镇丁家皋陆人 康熙五十六年 1717 丁酉科举人 与同邑秦 yi 尹纯儒为同科举人 拣选 知县 后参加会试屡试不第 遂弃举子业 居家课子训侄 以故四弟士 可考中甲辰科举人 诸子孙皆累试前茅 丁士价教育子弟兢兢业业 读
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38 3 2014 5 Vol. 38 No. 3 May 2014 55 Population Research + + 3 100038 A Study on Implementation of Residence Permit System Based on Three Local Cases of Shanghai Chengdu and Zhengzhou Wang Yang Abstract
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第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
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GLOBAL GEOLOGY Vol. 35 No. 4 Dec
35 4 2016 12 GLOBAL GEOLOGY Vol. 35 No. 4 Dec. 2016 1004 5589 2016 04 1164 05 1 2 3 1 2 1 2 4 5 1. 210018 2. 210018 3. 210098 4. 100080 5. 214000 4 1 ~ 4 20 mm 2 d 30 ~ 40 mm 3 d 40 ~ 50 mm X43 A doi 10.
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2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来
![2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来](/thumbs/42/22962570.jpg "2 JCAM. June,2012,Vol. 28,NO. 6 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 是 急 性 创 伤 或 慢 性 劳 损 所 致 的 关 节 滑 膜 的 无 菌 性 炎 症, 发 病 率 达 2% ~ 3% [1], 为 骨 伤 科 临 床 的 常 见 病 多 发 病 近 年 来")
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物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在
![物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在](/thumbs/41/22573722.jpg "物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在")
数 据 插 值 对 正 电 子 发 射 断 层 成 像 设 备 的 图 像 重 建 影 响 的 研 究 * 杨 昆 刘 新 新 李 晓 苇 ( 河 北 大 学 物 理 学 院, 保 定 071000 ) ( 2013 年 1 月 30 日 收 到 ; 2013 年 4 月 9 日 收 到 修 改 稿 ) 正 电 子 发 射 断 层 扫 描 (positron emission computed tomography,
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32 1 2013 2 Journal of Chinese Electron Microscopy Society Vol. 32 No. 1 2013-02 1000-6281 2013 01-0054-08 1 1* 2 1 1 1. 2. 710062 AFM SEM WPOJ-DS UPOJ-DS WPOJ-DS β- UPOJ-DS AFM WPOJ-DS UPOJ-DS SEM UPOJ-DS
2 / 中 冶 月 刊 MONTHLY MAGAZINE
2014.9.1 09 国 务 院 派 驻 中 冶 集 团 监 事 会 到 大 连 地 区 子 公 司 检 查 指 导 工 作 国 文 清 与 天 津 市 市 长 黄 兴 国 举 行 会 谈 国 内 同 行 优 秀 建 筑 央 企 走 出 去 的 经 验 与 做 法 ( 一 ) 以 人 事 改 革 为 基 石, 以 科 技 创 新 为 引 擎, 实 现 建 研 院 长 富 久 安 让 彩 云 之 南
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2005 年 第 25 卷 有 机 化 学 Vol. 25, 2005 第 7 期, 771~779 Chinese Journal of Organic Chemistry No. 7, 771~779 综 述 与 进 展 紫 草 素 的 全 合 成 研 究 进 展 徐 德 锋 管 鹏 健 毛 志 强 李 绍 顺 * ( 上 海 交 通 大 学 药 学 院 上 海 200030) 摘 要 综 述
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微 生 物 学 通 报 Microbiology China [email protected] Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
Dan Buettner / /
39 1 2015 1 Vol. 39 No. 1 January 2015 74 Population Research 80 + /60 + 90 + 90 + 0 80 100028 Measuring and Comparing Population Longevity Level across the Regions of the World Lin Bao Abstract Appropriate
~-' 一 ~ U 百 陳 子 展 ( ), 本 名 炳 聾, 字 子 展, 以 字 行 於 世, 湖 南 長 沙 人 幼 時 曾 在 私 塾 求 學, 後 入 長 沙 縣 立 師 範 學 校, 再 入 東 南 大 學 教 育 系, 因 病 輯 學 回 湖 南, 寄 住 長 沙
2 0 12 年 9 月 頁 1 65~ 19 0 臺 北 : 國 立 臺 灣 師 範 大 學 國 文 學 系 ISSN 1021-7 851 陳 子 展 研 究 詩 經 方 法 述 評 * 史 甄 陶 * * ( 收 稿 日 期 : 1 01 年 3 月 3 1 日 ; 接 受 刊 登 日 期 : 10 1 年 7 月 15 日 ) 提 要 本 文 探 討 陳 子 展 研 究 詩 經 的 方 法
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o yáo háng, y u jiàn xiá shì zhèn hu zào w zào qi nlìn cuò j n é sì, nì sì lian zhang kuang sè ne kai f ng jiù w huàn chi j l g, j, shàn liji pìn ming dang xiedài ai z n àn qù qú 1 p
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2017 동계도록 ( 대만 ).indd 1 2017. 1. 26. 오후 5:20 2017 동계도록 ( 대만 ).indd 2 2017. 1. 26. 오후 5:20 2017 동계도록 ( 대만 ).indd 3 2017. 1. 26. 오후 5:20 KSDC & KSPD Culture, Design, and Technology 2017 Invited Winter International
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