王 宁 等 心肌梗死相关微 1- 的研究进展 1! 的基因沉默效应 多项研究表明 1! 在 调控 * 后心脏纤维化 血管生成和心肌肥 大等病理生理过程中扮演重要角色 提示 1! 表达的改变与 * 存在紧密关联 因此 调控 1! 为治疗 * 引起的心功能不全提供了新策略 这在 心脏缺血预适应的保护机制

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1 复旦学报 医学版 心肌梗死相关微 *& 的研究进展 王 宁 综述 文 平 审校 大连医科大学附属大连市儿童医院心脏中心 大连 第四军医大学生物医学工程系 西安 摘要 微 1-1-!1! 是一类非编码 1- 能够调控基因组中大部分基因的表达 心肌梗死 $* 常伴随基因表达谱的改变和相关信号通路的失调 1! 在 * 中扮演重要角色 其对心肌细胞的存活及缺血后血管生成有着多方面的调控作用 * 后 1! 表达升高或下降可能参与心脏整体功能的调节 本文总结了 * 相关 1! 的最新进展 并讨论了 1! 应用于 * 治疗中的前景和局限性 关键词 微 1- 心肌梗死 纤维化 血管生成 中图分类号 1 文献标志码 0,!!' $$"!$*&"$!$$ - # &)#!"#$&$!'"!+*!"#!!!!/!#'!! "#%!!! $' "#!+!&'!./!#'! &'"$ 1-! 1!#1-!$%$$#$$%# $ *!%$/!$# $ #."!!#$ #!##"$%!"$"$!1!1!"!"$$ *%$"$!$%!$!"!$!%##!!-$ *1!$ "!!#%$ #$$*$%!!/ $% $4#$!1!$ *!!!$%""$$$! 1!$$# * ($"1-$!!##!! )#"($("" $'#**$+,#-.29-/1 心肌梗死 $* 是冠状动脉急性 持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死 可进一 步导致心脏重构而直接影响心脏的内部结构 长期的心脏重构是造成心功能失代偿的重要原因 但 相关分子机制目前尚未完全明确 心肌缺血可诱发心脏炎性应答和转录组学的改变 微 1-1-!1! 与 * 之间的关联日益成为心 血管疾病研究的焦点 据报道 心脏特异性敲除 1! 合成酶 可诱导失代偿性心脏重构和心力衰竭 提示 1! 的合成通路对于心脏功能有着 极其重要的意义 此外 1! 组装过程中的核心因子 - #$ 经转录后修饰可增强低氧刺激后 国家自然科学基金!"#$% &'

2 王 宁 等 心肌梗死相关微 1- 的研究进展 1! 的基因沉默效应 多项研究表明 1! 在 调控 * 后心脏纤维化 血管生成和心肌肥 大等病理生理过程中扮演重要角色 提示 1! 表达的改变与 * 存在紧密关联 因此 调控 1! 为治疗 * 引起的心功能不全提供了新策略 这在 心脏缺血预适应的保护机制中得到了证实 本文将逐一介绍 * 相关 1! 的功能 并讨论其在临床治疗 * 的应用前景!1' 具有心肌细胞特异性 能够抵抗新生大鼠胰岛素样生长因子!'4#$% $ *' 缺陷诱导的心肌细胞肥大 1' 表达增高能够抑制钠钙交换体!'.%# 的表达 后者在衰竭心 脏中表达显著增高 内质网钙离子 ' 三磷酸腺苷! $"%!"%$ -() 酶! "! $ '-()!&1- 活性降低是心力衰竭的重要特征 由腺伴随病毒 '!!$! -- 介导的 &1- 能增加衰竭心脏中 1' 的表达 并逆转心脏重构 值得注意的是 血浆 1' 水平升高对于 * 后心力衰竭的发生有一定提示意义 % 等 报道 1' 在 * 后表达增高 可通过转录后抑制 *' 来增强心肌细胞内的促凋亡通路 此外 1' 具有致心律失常效应 受体阻滞剂普萘洛尔可有效抑制 1' 在缺血心肌内的表达 改善 心脏传导功能 从而保护缺血心肌 总之 1' 与 * 相关的心力衰竭关系密切 虽可作为生物标志物和治疗靶点 但其在心脏中扮演的角色积极与否仍待进一步研究!7 据报道 1' 在猪和小鼠 * 模型梗死区和边界区内表达增高 其内源性沉默能降低细胞应激水平 应用基于锁核酸 4 +- 的 1 疗法能够显著抑制在体 1' 的表达 从而减小梗死面积 相关机制涉及其下游分子丙酮酸脱氢酶激酶同工酶 "$ %#! " 4!!/ $%)5 和血清 糖皮质激素调节激酶!#$'#$4! 5 参与的线粒体功能和心肌细胞凋亡 此外 1' 可抑制转化生长因子 ' $! # #$%$' (' 信号通路 从而调控心肌肥大和间质纤维化 促进心脏重构向心力衰竭 转变!2 研究表明 1' 在衰竭心脏内表达 增高 可促进成纤维细胞增殖 梗死区内 1' 升高能够特异性抑制其下游的磷酸酶 张力蛋白同系物 "%!"%$! $! %# )(& 导致成纤维细胞的金属蛋白酶 表达增高 进而激活成纤维细胞的生存信号通路 加剧梗死 灶的纤维化重构 通过抑制 1' 可以有效减 轻 * 后组织的炎性损伤 降低处于增殖期的成纤维细胞的数量 从而减轻心脏整体的纤维化水平 并维持心功能 虽然 1' 具有显著的抗纤维化效果 但该效应未能在全身敲除 1' 的动物 模型中得到证实 该分歧可能是使用不同长度的 1' 拮抗剂所造成的 二十二聚体反义 1' 比八聚体反义 1' 的心脏保护效应更强!201' 可影响心肌细胞和成纤维细 胞的生物学特性 其在 * 后表达下降 慢病毒介导的 1' 过表达能够阻碍心肌细胞的促凋亡通路 抑制一系列成纤维细胞标志物 如 型胶原蛋白 型胶原蛋白 纤连蛋白和 ' 平滑肌肌动蛋白 '!$%!$'- 从而减轻心肌 损伤 然而 另有研究发现 1' 在低氧和缺血诱 导的小鼠内皮细胞内表达升高 1' 过表达还可促进体外内皮细胞的凋亡 抑制发育期斑马鱼的血管生成 在小鼠 * 模型中治疗性拮抗 1' 可直接促进心脏内皮细胞的存活 从而改善心脏 重构 上述结果表明 1' 在心脏成纤维细胞 心肌细胞和内皮细胞中发挥多方面作用!281' 在成纤维细胞中也高度表达 并在 * 后的心脏重构中扮演重要角色 1' 可抑制胶原蛋白 原纤维蛋白和弹性蛋白等一系列纤维化相关蛋白的表达 而 * 后抑制 1' 能够诱导细胞培养物和小鼠体内的胶原等细胞外基质 蛋白的表达 不仅如此 1' 对其他脏器的 纤维化进程也有抑制作用 )$ 等从信使 1-!!# 1-1- 和 1! 水平上证实了 1' 在纤维化中的作用 值得注意的是 在心脏缺血再灌注损伤中 通过药物抑制 1' 可减轻心肌细胞凋亡并发挥心脏保护作用 因此 1' 过表达有望成为治疗 * 相关纤维化的靶点 但其在 * 不同时相中对心脏表现出的不同效应应当慎重考虑

3 复旦学报 医学版 年 月!821' 过表达可阻断内皮细胞的血管生成通路 继而引发出芽能力降低等一系列血 管生成缺陷 加重缺血组织的损伤 而全身给予 1' 拮抗剂能够阻断内皮细胞血管生成通路的恶化 抑制 1' 可增加信号转导分子 $%! #!$ "$"# %# - 的表达 从而减轻低氧 复氧诱导的心肌细 胞凋亡 此外 1' 基因簇的其他成员也具有较强的抗血管生成特性 为调控缺血损伤后的血管生成提供了强劲工具!. 1' 包括 1' 和 1' 两个异构体 大鼠冠状动脉结扎 周后 梗死周边区的 1' 表达下调 腺病毒介导的 1' 过表达可降低 '! 及其下游的 (' 的水平 从而减轻 * 后的间质纤维化并改善左心室顺 应性 然而 等发现 1' 可通过诱导自噬来减轻低氧 复氧所致的 心肌细胞凋亡 因此 我们仍需开展更多的研究去论证 1' 的表达在心脏疾病治疗中需增强还是抑制!291' 具有内皮细胞特异性 其在正常血管发育以及维持 * 后内皮细胞的正常功能 和完整性中扮演重要角色 1' 在内皮细 胞中表达降低会减弱血管生成通路的活性 血管内皮生长因子! $% #$% $ & 和成纤维细胞生长因子等趋化因子在 1' 缺失时并不能发挥它们在 * 后新生血 管化当中的重要作用 此外 富含于内皮细胞源性的凋亡小体 1' 可介导 '' 模体趋化因子 '' $%4+ 的生成 从而发挥血管保护效应!88 研究表明 1' 可抑制许多细胞周期的负性调控因子 包括 蛋白同系物 和唯同源域蛋白 其异位表达能够增强新生大鼠心肌 细胞的增殖能力 此外 腺伴随病毒 介导的 1' 过表达可诱导成年小鼠心肌细胞的增殖并 刺激 * 后的心肌再生 值得注意的是 转录因子 (!$ 相关蛋白 (!$'$ "$ (*( 的下调能够降低 1' 的表达 进而激活心脏中泛素 蛋白酶体系统的表达 并最终导致 心力衰竭 因此 1' 在通过促进心肌细胞再生以治疗 * 方面有一定研究价值 但其在心力衰竭终末状态中所参与的分子机制仍待进一步研究!20 与正常小鼠相比 1' 敲除小鼠的缺血再灌注损伤更为严重 1' 能抑制钠钙交换体!.%# 调节心肌细胞的钙稳态 从而保护缺血心肌抵御钙超 载引发的细胞死亡 1' 还可降低 )(& 的表达 从而减轻过氧化氢诱导的心肌细胞 凋亡 等发现 1' 于心力衰竭后表达上调 1' 过表达可通过与 盒结合蛋白 '.#"$0) 作用降低人脐静脉内皮细胞的血管生成 其沉默可减轻异丙肾上腺素诱导的心功能障碍和血管生成损害 1' 还能通过抑制 /!$ 基因增强子同源物 % /!$ %#&3 促进心肌肥大 因此 1' 在心脏中的作用是多方面的!4/-1' 是主要表达于心肌细胞内 的负性调控心肌肥厚的内源性因子 其在人衰竭的心脏和多种不同心肌肥大模型中的表达水平是降 低的 1' 过表达可通过干扰活化 ( 细胞核因子 $ $$(!-( 在核内的积累与胎儿基因程序的表达 从而阻止心肌细胞的肥大 并防止压力负荷诱导的小鼠心功能 障碍 ## 等报道 1' 的抑制可通过旁分泌的方式诱导 (' 的表达并促进小鼠心脏内成纤维细胞的分化 从而加剧血管紧张素 诱导的心肌肥大和纤维化 研究表明 1' 能够抑制!"!' 从而减 少 心肌细胞的凋亡 然而 5/ 等 发现 过表达 1' 可作用于胰岛素样生长因子 受体!'4 #$% $ "$ *1 以降低蛋白激酶 0"$4!0-4$ 信号通路活性 从而促进心肌细胞凋亡 另一方面 利用反义 1 抑制 1' 能够保护心肌细胞免受过氧化氢和缺氧复氧诱导的凋亡 这种分歧可能与不同研究所采用的模型及研究对象所处的生长阶段不同有关 但以上研究提示 1' 可在多层面调控 * 所涉及的病理生理机制 结语 目前 1! 在 * 中的研究虽已取得很大进展 但 1! 应用于临床亦面临诸多挑战 许多可治疗 * 的靶 1! 同时也参与癌症等其他疾病进程 例如 抑制 1' 虽能促进心脏修复 但 却有诱导肿瘤形成的危险 但 * 后 1' 的短期抑制是否增加肿瘤发生的风险仍待进一步研

4 王 宁 等 心肌梗死相关微 1- 的研究进展 究 值得注意的是 仅有少数 1! 特异性表达于 一种细胞类型 如 1' 仅表达于心肌细胞 大多数 1! 广泛或普遍表达于多种不同组织细胞 这将导致全身应用 1! 治疗时会产生不同程度的脱靶效应 而规避脱靶效应的主要策略是实现 1! 的组织或细胞特异性定位 一种方法是通过导管将反义 1! 或对 1- 的成熟体设计并合成的小片段双链 11! 递送至心脏 然而无论是通过顺行还是逆行实施导管递送 反义 1! 或 1! 在其他组织的效应均不能被完 全阻止 对于 1' 等具有不同血管和心脏效应的 1! 甚至可能需要为其设计细胞特异性的递送工具 例如 微球包被的 1' 拮抗剂经冠状 动脉内给药便可靶向定位至毛细血管 规避脱靶效应的另一种方法是采取能够靶向作用于心肌细胞的腺伴随病毒 这在一定程度上能解决细胞特异性给药的问题 此外 考虑到许多 1! 之间具有协同作用 联合应用反义 1! 或 1! 可实现最佳的治疗效果 然而 这种组合疗法有可能增加脱靶效应和不良反应 从而使临床效果的调控复杂化 迄今为止 只有 1' 和 1' 的治疗性抑制在猪中研究过 大多数 1! 在投入临床试验前依然需要在更大的动物模型中验证效果并完成相应的毒理学 药物代谢动力学以及药效学测试 总之 * 的诊断和治疗是需谨慎对待的艰巨任务 1! 在调控 * 后心肌细胞的存活与凋亡 血管生成 心肌肥大和心脏纤维化等病理生理过程中扮演重要角色 1! 疗法在 * 处理的常规手段之外提供了新的途径 诸多 1! 有望成为实现 * 后心脏再生修复的治疗靶点 目前 我们仍需开展更多的基础研究和临床试验去验证其可行性 最终将 1! 疗法发展成为诊断和治疗 * 的有效策略 参 考 文 献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

5 复旦学报 医学版 年 月 (%1-'%$!$% ($'"$% $%%$"#( (% (!! 1-' $$! $!!!$$# -)4!!##!$!$ 15%!! 1 1-."!!!"!$ $ 1' #$!!$ $ "$!' "%!"%$!$! %#"#( (! -// & *$ 1-'$%.#!%#!$$!!%$, #"#! # 01-' "$!!! "$ %$ $% "! $ $,$ $ "' #$#0'!1!%. /' )$4$# 1+8 $!!' "$ #! $%! 1-'1!! (% (% 0%$0"!$ 1'%$ %!$!!! 1!!$% " ## 11-' #$!!!$ $1 " 8++4+# :1'%$! ""$!! "!!!0!$! 1%. " /$$ 5% 01-' #$!!$$ $ #$! -! -- &.$ $.!$!$! 1-'1-'#( 1,&$% +0 (%$% &!#$ 1-!$ $! 1'!!/# -#"&#&- : # 1 1-' %$!"$!!!"$!!!!%#+5# )+< (% 1' "!!#' )$4 +-)4("."!! 1-! 1-!! $ /'! # ::3+ :#$1-' $!!%$! ))-1'##!$ "$$!#!$!%'"!, "#( 0 -*!41-' $!##!!$!% $!!!&#!# 0 -!% -!$% 1-''!$.%$'$!$##' $ $%!" 3%#03% +1-'%$ $$! %"..#$' $ ""$!! $#$# /&,! )3 % 1-'%$ "!$$!!"$$ " $% 0!$! # $!# #$% $'$ "$% #$! #%*%$1-' $$! %"..#$ ""$!! $%#%$$"%# $! "( #0,4410 (% 1-'! %!$!!$ 7# /' #!(-:4%5 &$!'&$!' #$$%."!!1-'$%!-#' 7# 34-0/%4 5! 1-' ""$$!! +' "$! "$$&#&! #$! 1-! #$$,!" 0#$-0# (!% - (*( #$!$%$$2$"$!!!$ $% 1'!$ % '!$# $ "$%!1 " --0% -*+ 1-' "$$! $%! %$!%, $#$%1!! +% # 1-' "$$! $!#!$6',1 #' 8:# +# 1-'!"' #$%$"$$!!""!!!0)' $ $%! ##!! 1 /' 下转第 -.7 页

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