一、项目吊称

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1 一 项目名称 纳米载体运载 STAT3 调控基因对人卵巢癌靶向治疗的研究 二 申报奖种 山东省科技进步奖 三 申报单位 山东大学齐鲁医院 四 推荐单位意见 我单位认真审阅了该项目推荐书及其附件材料, 确认全部材料真实有效, 相关栏目均符合山东省科学技术奖励委员会办公室的填写要求 按照要求, 我单位和项目完成单位都已对该项目的拟推荐情况进行了公示, 公示期间无异议 该项目基于基因工程学中的诱骗寡核苷酸技术与新兴的纳米技术相结合, 运用基因工程学 分子生物学 纳米科学 药剂学等多学科的知识, 研发构建了一种新型的载基因纳米复合物 :SLN-STAT3 decoy ODN 体外研究显示 SLN-STAT3 decoy ODN 能够被卵巢癌细胞 SKOV3 和 A2780 高效摄取并且抑制卵巢癌细胞的生长, 诱导卵巢癌细胞发生凋亡和自噬性细胞死亡, 抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力 采用人卵巢癌裸鼠移植瘤模型的体内研究进一步证实了其抗瘤效应和生物安全性 该项目还通过体内外实验进一步探讨了 SLN-STAT3 decoy ODN 诱导卵巢癌细胞凋亡 自噬和抑制细胞侵袭的机制, 并探讨了 STAT3 相关调控基因对卵巢癌的生物学行为的影响及机制, 为卵巢癌的基因靶向治疗提供了实验基础和理论依据 该项目选题新颖, 设计合理, 方法先进 正确, 技术路线清晰, 实验数据可靠, 统计学方法正确, 结论可靠, 论证充分 共发表 SCI 论文 6 篇, 全国学术会议论文 1 篇, 山东大学博士学位论文 2 篇 经科技查新, 达国际先进水平 该项目密切结合当前国内外关注的问题和临床需要而设计, 有广阔的应用前景,

2 已在 2 家省市级医院推广应用 对照山东省科学技术奖授奖条件, 推荐该项目申报 2016 年度山东省科学技术进步奖二等奖 五 项目简介 卵巢癌在女性生殖系统恶性肿瘤中死亡率高居首位, 寻找新型的合理有效的治疗方法, 是临床上亟待解决的难点之一 纳米载体运载 STAT3 调控基因对人卵巢癌靶向治疗的研究 来源于国家自然科学基金, 以信号转导和转录激活因子 3(STAT3) 为基因靶点, 以阳离子固体脂质纳米粒 (SLN) 为基因载体, 采用转录因子诱骗技术 (decoy ODN), 构建载 STAT3 decoy ODN 阳离子固体脂质纳米粒复合物 (SLN-STAT3 decoy ODN), 通过体内 外实验研究探讨对卵巢癌的靶向治疗作用及对细胞凋亡 自噬和侵袭迁移的作用机制, 试图达到应用一种干预措施阻断多种基因表达 干预肿瘤发生发展多个环节的目的, 为卵巢癌药物治疗寻找高效 经济的靶点及给药途径 本研究的主要内容及技术指标如下 : 1. 诱骗寡核苷酸靶向阻断 STAT3 对人卵巢癌细胞生长 侵袭活性的影响及机制 设计合成 STAT3 decoy ODN, 转染卵巢癌细胞, 结果 :1. STAT3 decoy ODN 抑制人卵巢癌细胞的生长, 诱导细胞凋亡, 抑制细胞周期从 GO/GI 期向 S 转化, 增加细胞对紫杉醇的敏感性 ;2.STAT3 decoy ODN 显著抑制卵巢癌细胞的体外侵袭力 发表 SCI 论文 1 篇, 国内会议论文 1 篇, 完成博士学位论文 1 篇 2. 诱骗寡核苷酸靶向阻断 STAT3 对人卵巢癌裸鼠移植瘤治疗作用研究 探讨 STAT3 deeoy ODN 的体内抗瘤效应及安全性 结果 :STAT3 decoy ODN 通过调控肿瘤侵袭转移及凋亡相关蛋白的表达而抑制裸鼠体内种植瘤的生长, 诱导肿瘤细胞凋亡 发表 SCI 论文 1 篇, 国内会议论文 1 篇, 完成博士学位论文 1 篇 3. 载 STAT3 诱骗寡核苷酸阳离子固体脂质纳米粒的制备及表征研究 制备空白 SLN 及 SLN-STAT3 decoy ODN 结果:1. 成功制备 SLN 和 SLN-STAT3 decoy ODN 2.SLN 对卵巢癌细胞无明显细胞毒性 发表 SCI 论文 1 篇, 完成博士学位论文 1

3 篇 4.SLN-STAT3 decoy ODN 复合物靶向阻断 STAT3 对人卵巢癌细胞体外抑制作用及机制研究 应用 SLN-STAT3 decoy ODN 转染卵巢癌细胞 结果 :SLN-STAT3 decoy ODN 能够被卵巢癌细胞高效摄取, 抑制细胞的生长, 诱导细胞凋亡和自噬性细胞死亡, 抑制细胞的侵袭和迁移 发表 SCI 论文 1 篇, 完成博士学位论文 1 篇 5. SLN-STAT3 decoy ODN 复合物靶向阻断 STAT3 对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用及机制研究 探讨 SLN-STAT3 decoy ODN 体内抗瘤效应及安全性 结果 :SLN-STAT3 decoy ODN 能抑制裸鼠移植瘤的生长, 诱导细胞的凋亡和自噬性细胞死亡, 抑制肿瘤组织的侵袭转移 在裸鼠体内无明显的骨髓抑制作用和心 肝 肾毒性 完成博士学位论文 1 篇,1 篇 SCI 论文在审 6.STAT3 相关调控基因对卵巢癌生物学行为的影响研究 结果 :1) 塞来昔布增强卵巢癌细胞的侵袭性 ; 促进人卵巢癌细胞发生上皮间质转化 ; 主要通过激活 PI3K/AKT 和 MEK/ERK 信号通路上调上皮间质转化相关转录因子 ZEB1 表达完成 发表 SCI 论文 1 篇 2) mir-519d 抑制卵巢癌细胞增殖, 并增强其对顺铂作用的敏感性 mir-519d 通过调控 XIAP 的表达发挥抑癌基因功能 发表 SCI 论文 1 篇 3) Smac N7 多肽增强细胞对 TRAIL 或紫杉醇的敏感性, 其联合 TRAIL 或紫杉醇作用于移植瘤模型时能起到协同抗癌作用 发表 SCI 论文 1 篇 项目共发表 SCI 收录论文 6 篇, 国内会议论文 1 篇, 完成博士学位论文 2 篇 经查新, 除本课题组成员发表的论文外, 国内外未见相关文献报道, 研究结果达国际先进水平 本项目是密切结合当前国内外关注的问题和临床的迫切需要而设计, 在临床有广阔应用前景, 已在 2 家省市级医院推广应用 六 客观评价 七 推广应用情况

4 本课题组凭借此项目研究, 目前已发表相关论文 9 篇, 其中 SCI 收录论文 6 篇 国内会议论文 1 篇 完成博士学位论文 2 篇 进一步促进了本项目的推广应用 山东大学第二医院科研人员结合本项目的研究方法, 已参照本研究裸鼠皮下移植瘤模型的建立方法, 建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型, 进一步应用基因靶向药物, 探讨其在体内外对卵巢癌细胞的治疗作用及机制 济南市妇幼保健院的科研人员结合本项目的研究方法, 已在科研工作中参考项目中的实验方法及设计思路, 进行了相关科研研究 参考该项目中 STAT3 诱骗寡核苷酸纳米粒复合物的体外细胞转染方法及检测方法, 通过体外细胞实验将基因靶向试剂转染肿瘤细胞, 并检测其在肿瘤细胞中的摄取情况, 进行肿瘤的基因靶向治疗研究 八 主要知识产权证明目录 九 主要完成人情况表 1 姓名: 刘培淑排名 :1/8 技术职称 : 主任医师工作单位 : 山东大学齐鲁医院对本项目技术创造性贡献 : 本候选人对项目 主要科技创新 栏中第 1-6 项创新点均做出了创造性贡献, 负责整个项目的设计及实验安排 贡献时间为 , 投入的工作量最大, 进行临床标本收集, 实验分工及进行, 实验数据分析等工作 以通讯作者发表本课题相关 SCI 论文 6 篇 指导博士学位论文 2 篇 支撑材料见附件 1-9. 曾获省级以上科技奖励情况 : 1. 刘培淑, 毛洪鸾, 张培海, 董瑞英, 周黎光, 孙玉兰.TRAIL 对卵巢癌治疗作用的研究 :Smac 在 TRAIL 诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用 JB 山

5 东省省科委科技进步奖三等奖 2. 刘培淑, 毛洪鸾, 张小磊, 王岸聪, 周黎光, 王毓, 郑靖芳.Smac 多肽 类 Smac 小分子对卵巢癌细胞的耐药性调节及其诱导凋亡作用的机制 JB 山东省科学技术进步奖二等奖 3. 刘培淑, 张培海, 沈亮, 代彩凤, 毛洪鸾, 王岸聪, 哈春芳, 宁辉孕激素受体亚型与子宫内膜异位症内分泌治疗的相关性研究 山东省科学技术进步奖三等奖 2 姓名: 张小磊排名 :2/8 技术职称 : 主治医师工作单位 : 山东大学齐鲁医院对本项目技术创造性贡献 : 本候选人对项目 主要科技创新 栏中第 1-5 项创新点均做出了创造性贡献, 负责整个项目的方案设计及实验的具体实施 贡献时间为 , 投入的工作量较大, 进行实验思路设计, 实验试剂及动物购置, 实验过程实施, 实验结果收集分析等 以第一作者发表本课题相关 SCI 论文 2 篇 第二作者发表本课题相关 SCI 论文 1 篇 发表国内会议论文 1 篇, 完成本课题相关博士学位论文 1 篇 支撑材料见附件 1-4,7,9 曾获省级以上科技奖励情况 : 刘培淑, 毛洪鸾, 张小磊, 王岸聪, 周黎光, 王毓, 郑靖芳.Smac 多肽 类 Smac 小分子对卵巢癌细胞的耐药性调节及其诱导凋亡作用的机制 JB 山东省科学技术进步奖二等奖 3. 姓名 : 董瑞英排名 :3/8 技术职称 : 副主任医师工作单位 : 山东大学齐鲁医院对本项目技术创造性贡献 : 本候选人对项目 主要科技创新 栏中第 1-5 项创新点均做出了创造性贡献, 负责统筹安排实验的进展 贡献时间为 , 投入的工作量较大, 监督实验实施过程 实验数据的统计和

6 论文的撰写及发表等工作 曾获省级以上科技奖励情况 : 刘培淑, 毛洪鸾, 张培海, 董瑞英, 周黎光, 孙玉兰.TRAIL 对卵巢癌治疗作用的研究 :Smac 在 TRAIL 诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用 JB 山东省省科委科技进步奖三等奖 4. 姓名 : 马延慧排名 :4/8 技术职称 : 住院医师工作单位 : 山东大学齐鲁医院对本项目技术创造性贡献 : 本候选人对项目 主要科技创新 栏中第 2-5 项创新点均做出了创造性贡献, 负责整个项目的实验研究的具体实施 贡献时间为 , 投入的工作量较大, 进行 STAT3 decoy ODN-SLN 复合物的构建, 以及复合物对卵巢癌体内外作用的实验研究 以第一作者发表本课题相关 SCI 论文 1 篇 非第一作者发表本课题相关 SCI 论文 1 篇 完成课题相关博士学位论文 1 篇 支撑材料见附件 1,2,8 曾获省级以上科技奖励情况 : 5. 姓名 : 毛洪鸾排名 :5/8 技术职称 : 副主任医师工作单位 : 山东大学齐鲁医院对本项目技术创造性贡献 : 本候选人对项目 主要科技创新 栏中第 项创新点均做出了创造性贡献 贡献时间为 , 主要参与进行 STAT3 decoy ODN 的体内实验研究, 以及 Smac 多肽促进 TRAIL 或紫杉醇介导的卵巢癌细胞死亡的体内外研究 以第一作者发表本课题相关 SCI 论文 1 篇, 非第一作者发表本课题相关 SCI 论文 3 篇 支撑材料见附件 2,4,6,7. 曾获省级以上科技奖励情况 :

7 1. 刘培淑, 毛洪鸾, 张培海, 董瑞英, 周黎光, 孙玉兰.TRAIL 对卵巢癌治疗作用的研究 :Smac 在 TRAIL 诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用 JB 山东省省科委科技进步奖三等奖 2. 刘培淑, 毛洪鸾, 张小磊, 王岸聪, 周黎光, 王毓, 郑靖芳.Smac 多肽 类 Smac 小分子对卵巢癌细胞的耐药性调节及其诱导凋亡作用的机制 JB 山东省科学技术进步奖二等奖 3. 刘培淑, 张培海, 沈亮, 代彩凤, 毛洪鸾, 王岸聪, 哈春芳, 宁辉孕激素受体亚型与子宫内膜异位症内分泌治疗的相关性研究 山东省科学技术进步奖三等奖 6. 姓名 : 郑靖芳排名 :6/8 技术职称 : 主治医师工作单位 : 山东大学齐鲁医院对本项目技术创造性贡献 : 本候选人对项目 主要科技创新 栏中第 1 6 项创新点均做出了创造性贡献 贡献时间为 , 主要参与进行 STAT3 decoy ODN 的体外实验研究, 以及塞来昔布诱导卵巢癌细胞发生上皮间质转化的作用及其机制研究 以共同第一作者发表本课题相关 SCI 论文 1 篇, 非第一作者发表本课题相关 SCI 论文 1 篇 支撑材料见附件 4,5 曾获省级以上科技奖励情况 : 刘培淑, 毛洪鸾, 张小磊, 王岸聪, 周黎光, 王毓, 郑靖芳.Smac 多肽 类 Smac 小分子对卵巢癌细胞的耐药性调节及其诱导凋亡作用的机制 JB 山东省科学技术进步奖二等奖 7. 姓名 : 韩冰排名 :7/8 技术职称 : 主治医师工作单位 : 山东大学齐鲁医院对本项目技术创造性贡献 : 本候选人对项目 主要科技创新 栏中第

8 3-5 项创新点均做出了创造性贡献 贡献时间为 , 主要参与 STAT3 decoy ODN-SLN 的制备和相关理化特性的研究, 协助进行复合物对卵巢癌体内外作用的实验研究 8. 姓名 : 庞迎新排名 :8/8 技术职称 : 主治医师工作单位 : 山东大学齐鲁医院对本项目技术创造性贡献 : 本候选人对项目 主要科技创新 栏中第 6 项创新点做出了创造性贡献 贡献时间为 , 主要参与进行 STAT3 decoy ODN 的体内实验研究, 以及 mir-519d 通过靶向调控 XIAP 抑制卵巢癌细胞增殖及增强顺铂敏感性的研究 以第一作者发表本课题相关 SCI 论文 1 篇, 非第一作者发表本课题相关 SCI 论文 2 篇 支撑材料见附件 5-7 十 主要完成单位及创新推广贡献 1 山东大学齐鲁医院排名 :1 ( 对本项目科技创新推广应用情况的贡献 ) 齐鲁医院为国家卫生部直属医院, 拥有研究所 ( 室 )6 个, 设有国家教育部重点实验室 - 山东大学心血管重构和功能教育部重点实验室, 山东省医药卫生重点实验室 - 妇产科重点实验室 实验条件优厚, 仪器设备先进, 可提供各种试验设施, 为本项目提供了良好的研究平台 本项目候选人均来自本候选单位, 在单位提供的实验平台下, 完成了全部实验内容, 共六个部分 : 一 诱骗寡核苷酸靶向阻断 STAT3 对人卵巢癌细胞生长 侵袭活性的影响及机制 结果显示 :STAT3 decoy ODN 能抑制人卵巢癌细胞的生长, 诱导细胞凋亡, 抑制细胞周期从 GO/GI 期向 S 转化, 增加细胞对紫杉醇的敏感性 ; 能够显著抑制卵巢癌细胞的体外侵袭力

9 二 STAT3 decoy ODN 通过调控肿瘤侵袭转移及凋亡相关蛋白的表达而抑制裸鼠体内种植瘤的生长, 诱导肿瘤细胞凋亡 三 成功制备 SLN 和 SLN-STAT3 decoy ODN 四 SLN-STAT3 decoy ODN 能够被卵巢癌细胞高效摄取, 抑制细胞的生长, 诱导细胞凋亡和自噬性细胞死亡, 抑制细胞的侵袭和迁移 五 SLN-STAT3 decoy ODN 能抑制裸鼠移植瘤的生长, 诱导细胞的凋亡和自噬性细胞死亡, 抑制肿瘤组织的侵袭转移 在裸鼠体内无明显的骨髓抑制作用和心 肝 肾毒性 六. STAT3 相关调控基因对卵巢癌生物学行为的影响研究 1. 塞来昔布通过激活 PI3K/AKT 和 MEK/ERK 信号通路上调 EMT 相关转录因子 ZEB1 表达而诱导卵巢癌细胞发生上皮间质转化 2.miR-519d 通过靶向调控 XIAP 抑制卵巢癌细胞增殖及增强顺铂敏感性的研究 3.Smac 多肽促进 TRAIL 或紫杉醇介导的卵巢癌细胞死亡的研究 十一 完成人合作关系

次 ; 全国学术会议论文 1 篇 ; 核心期刊论文 1 篇 ; 山东大学博硕士学位论文 15 篇, 培养博硕士研究生 15 名 密切结合当前国内外热点问题和临床迫切需要, 应用前景广阔, 在多家省市级医院推广应用 获得成果如下 : 从核转录因子水平对卵巢癌生物学特性相关的分子机制及靶向干预进行研究

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