第 4 期黄帅等 : 拟南芥 GEF14 不独立参与 ROP10 介导的 ABA 信号转导途径 317 ylene,et) 等所调控的生物胁迫信号转导途径互作, 调控植物对生物胁迫的抗性 [2] 植物小 G 蛋白 Rops (Rho relatedgtpasefrom plants) 是 G 蛋白信
|
|
|
- 潞便疲 费
- 5 years ago
- Views:
Transcription
1 第 21 卷第 4 期 2012 年 8 月 激光生物学报 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Vol.21No.4 Aug.2012 doi: /j.isn 拟南芥 GEF14 不独立参与 ROP10 介导的 ABA 信号转导途径? 黄帅, 刘选明, 葛光君, 秦盈, 向芬, 廖红东, 朱咏华 ( 湖南大学生物学院, 湖南长沙 ) 摘要 : 通过 PCR 扩增技术, 从 DNA 和 mrna 水平上鉴定出拟南芥 GEF14 基因的 T DNA 插入纯合突变体 gef14 1 不同浓度 ABA 处理拟南芥野生型 (Col 0) 及 gef14 1 的 7d 龄幼苗, 采用实时荧光定量 PCR(Real time quantitativepcr,q PCR) 方法, 分析小 G 蛋白 ROP10 的表达模式, 结果表明 gef14 1 在不同浓度 ABA 处理下的 ROP10 的表达模式与 Col 0 中的一致 ; 表型分析结果显示 gef14 1 与野生型并无明显区别 推测 GEF14 不参与 ROP10 介导的 ABA 信号转导途径或其调控与其他 GEFs 存在功能冗余 关键词 :GEF14;ROP10; 突变体 ; 基因表达 ; 表型中图分类号 :Q943.2 文献标识码 :A 文章编号 : (2012) ArabidopsisGEF14isnotInvolvedIndependentlyinthe ROP10 mediatedabasignaltransductionpathway HUANGShuai,LIUXuanming,GEGuangjun,QINYing,XIANGFen,LIAOHongdong,ZHUYonghua (ColegeofBiology,HunanUniversity,Changsha410082,Hunan,China) Abstract:ThehomozygousT DNAmutantofGEF14(gef14 1)wasidentifiedatDNAandmRNAlevelsbyPCR.The quantitativereal timepolymerasechainreaction(q PCR)wascariedouttoanalyzetheexpresionpaternsofROP10 (Rho relatedgtpasefromplants)geneinarabidopsisthalianacol 0andgef14 1mutant7dseedlingsunderdiferent ABAstres.TheresultsshowedthattheRop10expresionlevelsingef14wassimilartoCol 0.Itsphenotypeasayindi catesthatthereisnovisiblediferencebetweengef14 1andCol 0.TheseresultssuggestedthatGEF14wasnotinvolved inrop10 medicatedabasingaltransductionpathwayorgef14mightshareredundantactivitiestowardrop10with othergefs. Keywords:GEF14;ROP10;mutant;geneexpresion;phenotype 脱落酸 (abscisicacid,aba), 作为一种重要的植物激素, 在种子休眠 萌发 气孔关闭等非生物胁迫 应答中起重要调控作用 [1], 还通过与水杨酸 (aslicyl icacid,sa) 茉莉酸 (jasmonicacid,ja) 和乙烯 (eth 收稿日期 : ; 修回日期 : ? 基金项目 : 中央高校基本科研业务费资助 作者简介 : 黄帅 (1986-), 女, 湖南长沙人, 硕士研究生, 主要从事植物分子生物学研究 ( 电子邮箱 )huang134zhou@ 126.com 通讯作者 : 朱咏华 (1968-), 女, 湖南长沙人, 教授, 硕士生导师, 从事生物化学与分子生物学教学与科研 ( 电话 ) ;( 电子邮箱 )zyh20@hotmail.com
2 第 4 期黄帅等 : 拟南芥 GEF14 不独立参与 ROP10 介导的 ABA 信号转导途径 317 ylene,et) 等所调控的生物胁迫信号转导途径互作, 调控植物对生物胁迫的抗性 [2] 植物小 G 蛋白 Rops (Rho relatedgtpasefrom plants) 是 G 蛋白信号转导途径中关键的信号元件 [3], 在极性生长 激素的信号转导 细胞分化以及非生物胁迫中起 分子开关 的作用 [4,5] 拟南芥中,Rops 家族中的 ROP10 蛋白定位于质膜上, 作用于共有的 ABA 信号转导途径并特异性地抑制各种 ABA 应答 推测依赖 ROP10 的信号转导途径可能由一个质膜定位的 ABA 受体直接调节而与信号网络中其他的 ABA 信号转导途径或模块协同作用 [6 8] 为了剖析 ROP10 介导的 ABA 信号途径, 本实验选择 ROP 鸟苷酸交换因子家族 GEFs(guaninenucleo tideexchangefactor,gef) 基因作为研究对象 在拟南芥中, 由 14 个成员组成的 GEFs 催化 ROPGT Pase [9], 使之由 GDP 结合的失活状态 (GDP GTPase) 转变成 GTP 结合的活化状态 (GTP GTPase), 从而介导胞外信号传递到胞内而产生胞内信息 [10] 目前有关 GEFs 家族的报道不多, 它们在 ABA 信号转导途径中的作用尚有待确定 前期研究已经表明, GEF14 与 ROP10 在 ABA 处理下表现出不同的应答趋势, 但基因表达谱的研究只从基因表达水平进行分析, 即使其表达谱与 ROP10 不相同, 仍不能否定其作为 ROP10 激活子的可能性 为此, 本文通过 PCR 扩增方法验证筛选出 gef14 基因的 T DNA 插入突变体 gef14 1 的纯合子, 并通过半定量及定量方法对纯合子中 GEF14 基因的表达进行确证分析 在此基础上针对 gef14 1 在外源 ABA 作用下 ROP10 的转录表达情况进行分析, 同时开展了突变体有关种子萌发 根伸长等生理表型实验, 以探明 GEF14 蛋白在拟南芥生长发育中是否参与 ROP10 介导的 ABA 信号转导途径 1 材料与方法 1.1 材料培养及处理拟南芥 [Arabidopsisthaliana(L.)Heynh.] 哥伦比亚生态型野生型 Col 0 为湖南大学生物学院植物分子生物学实验室保存 Col 0 背景的拟南芥 GEF14 的 T DNA 插入株系 gef14 1(SALK_075562) 和 gef14 2(SALK_078417) 的种子购自美国拟南芥生物资源中心 (ArabidopsisBio ResourceCenter:ABRC) 种子先用 70% 乙醇消毒 30s, 再用 10% NaClO 消毒 7min, 无菌水清洗 5 6 次, 于黑暗下 4 春化 4d 用 0.1% 琼脂悬液悬浮种子后均匀点播在含 0.8% 琼脂的 MS 固体培养基表面, 置于 22 全日照培养箱中生长 10d, 把苗子移栽到盆钵中, 置于恒温培养室中长日照条件下生长 1.2 方法 植株总 DNA 的提取从待检拟南芥植株上单株剪取 2 4 片幼叶, 液氮处理并研磨成粉末, 加人 400μLDNA 提取液漩涡, 静置 15min 后取上清加 500μL 氯仿 异丙醇 (6 15), 混匀,4 离心 ;30μL TE 室温处理 30min,70% 酒精洗涤两次, 干燥, -20 保存备用 DNA 的 PCR 扩增 PCR 反应体系 (25μL): Taq 酶,0.25μL;Taqbufer,2.5μL;dNTPs,2μL; DNA 模板,1μL; 正向引物,0.5μL; 反向引物, 0.5μL;H 2 O,18.25μL PCR 反应条件 :95, 预变性 4min;94, 变性 30s;55, 退火 30s;72, 延伸 45s; 反应 35 个循环 PCR 产物的检测检测 PCR 产物一般利用 1% 的琼脂糖凝胶进行电泳, 所用的电泳缓冲液为 0.5 TAE, 电压为 5V/cm,PCR 产物点样量为 6μL, 电泳结果用 UVP 凝胶成像系统拍照记录 PCR 引物的设计采用 三引物法 (ht tp://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html), 以所提取的总 DNA 为模板, 进行 PCR 扩增 [11] 每个 T DNA 插入株系基因型的鉴定需要三条引物, 它们分别是 : LP, 位于基因组上距离 T DNA 插入位点左臂端约 600bp 处 ;RP, 位于距离 T DNA 插入位点右臂端约 300bp 处 ; 同时, 根据 ABRC 所提供的 SALKT DNA 边界序列设计一条 T DNA 专一的引物 BP(R 0 ), 其序列为 5 TGGTTCACGTAGTGGGCCATC 3 基因引物由上海生工生物公司合成, 引物分别为 LP(F): 5 TCAACAAAGATCCTACGGCTG 3 ;RP(R):5 CCATATCATGCCCATAAATGC 拟南芥花总 RNA 提取及 gef14 纯合子株系的半定量和定量分析 GEFs 家族基因表达有组织特异性,GEF14 主要在花中表达 [12] 取 Col 0 和 gef14 的花样品, 总 RNA 提取采用 Invitrogen 公司的 Trizol 试剂盒 用 DEPC H 2 O 将 RNA 稀释到 100ng/L, 除去基因组 DNA, 按照 InvitrogenM MLV ReverseTranscriptaseInstruction 说明书进行反转录, 合成 cdna 的第一链, 该合成链作为半定量和定量的模板, 用于检测 gef14 基因的表达水平
3 318 激光生物学报第 21 卷 Q PCR 反应体系 (10μL):DEPC 水 5.4μL,buf er1μl,10mmol L 1 dntps0.2μl,mgcl 2 0.8μL, 引物各 0.05μL,SYBR Green I0.25μL,ROX 0.05μL,2.5U L 1 JumpStartTaq 聚合酶 0.2μL, cdna 模板 2μL 其中,ROX 为被动参考染料 反应程序为 :95,10min;95,30s;55, 30s;72,30s;40 个循环 实验数据采用 MxPro 软件 (Stratagene) 进行分析,ACT7 的表达水平被用作均 一化的内参, 所有检测样品均设置 3 个重复 引物序列见表 不同 ABA 浓度处理下 ROP10 的表达水平取拟南芥生长 7d 的 Col 0 和 gef14 纯合体幼苗, 根部分别置于含不同浓度 ( nmol/l)aba 的 MS 液体培养基中, 处理 4h 提取 RNA 逆转录 Q PCR 方法与之前一致 引物序列见表 1 表 1 实时定量 PCR 引物序列 Tab.1 Primersequencesusedinreal timequantitativepcranalysis 基因 Genes ACT7 GEF14 ROP10 正向引物序列 Forwardprimersequences(5 3 ) ATCCCTCAGVACCTTCCAAC GATGGGACAGAGACTGGTTGATTT GGCCAGTTTGTGATTCTGATAAGTC 反向引物序列 Reverseprimersequences(5 3 ) ACAAACTCACCACCACGAAC TTACTCAAACACCACAGTCTACTGCTT AAACATCAGGGTCACATATACAAACAG 拟南芥野生型和 gef14 1 突变体表型实验取消毒后的种子, 播种于添加不同浓度 ( μmol/L)ABA 的含 0.8% 琼脂的 MS 固体培养基表面, 以不含 ABA 的 MS 固体培养基处理的材料为对照, 用封口膜封口, 置于 22 全日照培养箱中培养, 以胚根突破种皮为准, 连续 7d 观察并统计种子的萌发率 每个处理播种约 40 粒种子, 重复 3 次 在根长实验中, 首先将拟南芥野生型和 gef14 1 种子播种在 MS 培养基上生长, 将生长 7d 的幼苗转移到不同浓度 ( μmol/L)ABA 的培养基上垂直培养 7d, 拍照并统计根长 所有实验均重复 3 次 2 结果与分析 2.1 GEF14 基因 T DNA 插入突变体的鉴定及插入位点分析纯合子鉴定采用普通的 三引物法 根据 T DNA 插入位点和 GEF14 基因序列分别设计了左端引物 LP(F) 和右端引物 RP(R), 提取 gef14 1 gef14 2 各 5~10 个单独株系的基因组 DNA 进行 PCR 扩增 野生型没有 T DNA 的插入, 只能用 LP+RP 引物扩增出大小约 1000bp 的条带 ; 杂合子的双链之一插入了 T DNA, 所以既能扩增出 400 bp 或 600bp 左右的 LP+BP 或 RP+BP 的带, 也能扩增出 1000bp 的 LP+RP 条带 ; 纯合子因为 T DNA 的插入, 前后引物之间的片段大大超过 PCR 的扩增能力, 无法扩增出 LP+RP 的带 图 1 的 PCR 结果表明, (1) 植株没有扩增出 LP+RP 的约 1000bp 条带, 为 gef14 1 纯合子突变体 图 1 gef14 突变体 PCR 鉴定电泳检测图示 Fig.1 Electrophoresispictureofgef14mutantsviaPCR detection 根据 ATIDB(TheArabidopsisthalianaIntergrated Database) 提供的信息, 针对获得的纯合突变体 SALK _075562(gef14 1) 进行突变体 T DNA 插入位点的分析 ( 图 2), 其插入位点位于 GEF14 基因起始密码子下游的第 855bp 处, 在第二个外显子上 2.2 gef14 1 突变体中基因 GEF14 的表达分析由于 三引物法 易产生非特异性扩增, 为确认筛选到的 gef14 1 是纯合子, 我们采用半定量和定量 PCR 技术对突变体进行检测 由图 3(a)PCR 扩增
4 第 4 期黄帅等 : 拟南芥 GEF14 不独立参与 ROP10 介导的 ABA 信号转导途径 319 图 2 拟南芥 GEF14 基因结构及其 T DNA 插入位点 Fig.2 SchemeofGEF14genestructureandposition ofthet DNAinsertion 的电泳图可以看出, 缺失突变体 gef4 1 无扩增条带 ; 图 3(b) 的 Q PCR 结果表明,gef14 1 突变体中只能检测到微量的 GEF14 的表达, 再次确定突变体中 GEF14 基因表达被破坏, 证实了所用实验材料是可信的 图 3 gef14 1 和野生型植株花中 GEF14 表达的半定量 (a) 和 Q PCR(b) 分析 Fig.3 GEF14 gene expresion ofthe flowersin gef14 1andCol 0byRT PCRanalysis(a)andtheQ PCRanalysis(b) 2.3 不同 ABA 浓度处理下 ROP10 的表达水平分析作为小 G 蛋白上游调控因子的 GEFs, 如果其作用于 ROP10 上游参与调控 ABA 应答, 那么当 GEF 基因缺失后, 由于 ABA 信号通路的中断, 下游 ROP10 无法做出相应的 ABA 应答反应, 则缺失突变体中 ROP10 的表达水平应该不受外源 ABA 的影响 本实验借鉴以往关于 ROP10 介导的 ABA 信号转导途径的研究中的 ABA 处理浓度 (0.3 50μmol/L) [13], 采用从低到高的 ABA 浓度 ( nmol/l) 分别处理生长 7d 的幼苗 4h, 提取 RNA, 再用 Q PCR 方法检测 gef14 1 突变体在不同浓度 ABA 浓度处理下的 ROP10 转录表达水平 结果显示,gef14 1 中 ROP10 的表达量和 Col 0 基本一致 ( 图 4) 由此推测 GEF14 不调控 ROP10 介导 ABA 的信号转导途径或者 GEF14 的调控与其他 GEFs 存在功能冗余 图 4 野生型和 gef14 1 突变体幼苗在不同浓度 ABA 处理下 ROP10 的表达量 Fig.4 Q RCRanalysisofROP10mRNAexpresionin seedlingsofcol 0 and gef14 1 mutantatdiferent ABAtreatment 2.4 gef14 1 突变体表型分析 ABA 是植物生长发育过程中的重要激素, 它主要有两个方面的作用 [14] : 一方面是参与植物发育的诸多过程, 促进休眠 气孔关闭 抑制种子萌发和植物生长 ; 另一方面参与植物逆境胁迫的应答, 外源 ABA 干旱及高盐等胁迫条件可以诱导 ABA 的大量合成, 大量合成的 ABA 可以通过正调控增强其信号转导途径, 从而影响与 ABA 有关的生理表型 为了进一步确定 GEF14 是否调控 ROP10 介导 ABA 的信号转导途径, 我们进行了纯合突变体 gef14 1 种子的萌发实验 连续 7d 观察并统计野生型 gef14 1 的种子萌发情况, 图 5 显示两者在不含 ABA 的培养基上正常萌发 ( 图 5,a~b), 在含有不同浓度 ABA 的培养基上,gef14 1 与野生型的萌发率差异不明显 ( 图 5,c~f) 同时, 我们对外源 ABA 胁迫处理的野生型和纯合突变体 gef14 1 的根长表型进行了观察 统计结果表明, 不同浓度 ABA 胁迫处理中, 未发现野生型和突变体间有明显表型差异 ( 图 6), 上述结果进一步表明 GEF14 不调控 ROP10 介导 ABA 的信号转导途径或者 GEF14 与其他 GEFs 存在功能冗余 3 讨论植物小 G 蛋白 ROP10 是定位于质膜上的 ABA 应答的特异性调控因子 [15], 拟南芥基因组编码了 14 个 GEFs, 它们都定位在质膜上, 是 Rops 的上游调控子 研究发现, 一个类 ROP 蛋白与质膜定位的 CLV1 受体丝氨酸 / 苏氨酸激酶 (RLKs) 活性复合物相关联, 且直接激活 ROP 的 GEFs 与 RLKs 有直接相互作用 [16 17] ; 同时, 负调控 ABA 信号转导途径的 ROP10 只定位于质膜, 推测 GEFs 通过 RLKs 参与调控
5 320 激光生物学报第 21 卷 图 5 野生型和 gef14 1 突变体种子在不同浓度 ABA 处理下的萌发率 Fig.5 GerminationeficiencyofCol 0 andgef14 1 mutantseedoftreatmentwithdiferent ABAconcentration 上述推论 以上研究结果为更进一步探寻拟南芥 GEFs 的调控作用提供了一定依据, 后续研究将从蛋白水平以及通过构建多突变体对参与 ROP10 介导的信号转导途径调控的 GEFs 家族作进一步考察 图 6 gef14 1 和野生型的幼苗根长受 ABA 的影响一致 Fig.6 gef14 1showedsimilarABAinhibitionofroot elongationascol 0 ROP10 介导的 ABA 应答反应 有关拟南芥 GEFs 家族在 ABA 信号转导途径中相关功能的研究非常有限, 该家族中的 gef14 基因的研究也未见报道 基于此, 本实验选择 gef14 基因进行初步研究 通过 PCR 扩增技术对 gef14 基因的两个 T DNA 插入突变体 gef14 1 和 gef14 2 进行 DNA 和 mrna 水平的鉴定, 筛选到拟南芥 gef14 1 纯合突变体, 为揭示该基因的功能奠定了材料基础 不同浓度 ABA 处理下的 gef14 1 突变体中 ROP10 的表达量和野生型 (Col 0) 基本一致的研究结果初步推断 GEF14 基因不调控 ABA 信号转导或者其功能的发挥必须借助于与其他 GEFs 的相互作用 ; 有关拟南芥种子的萌发 根长的表型结果验证了 参考文献 [1] LEUNG J,GIRAUDATJ.Abscisicacidsignaltransduction [J].AnnuRevPlantPhysiolPlantMolBiol,1998,19: [2] THOMASC,ABERKEN.StructureandfunctionofROPsand theirgefs[j]. Signalingand Communication in Plants, 2010,10: [3] LIH,SHENJJ,ZHENGZL,etal.TheRopGTPaseswitch controlsmultipledevelopmentalprocesesinarabidopsis[j]. PlantPhysiology,2001,126: [4] ZHENGZL,NAFISIM,TAMA,etal.Plasmamembrane as sociatedrop10smalgtpaseisaspecificnegativeregulatorof abscisicacidresponsesinarabidopsis[j].theplantcel, 2002,14: [5] YANGZ.SmalGTPases:versatilesignalingswitchesinplants [J].PlantCel,2002,14(Suppl): [6] XIQING WANG,HEMAYETULLAH,ALAN M JONES,et al.gproteinregulationofionchannelsandabscisicacidsigna lingin Arabidopsisguard cels[j]. Science,2001, 292 (5524):
6 第 4 期黄帅等 : 拟南芥 GEF14 不独立参与 ROP10 介导的 ABA 信号转导途径 321 [7] LEMICHEZE,WUY,SANCHEZJP,etal.Inactivationof AtRaclbyabicisicacidisesentialforstomatalclosure[J]. GenesDev,2001,15(14): [8] ZHENGZL,YANGZ.TheRopGTPaseswitchturnsonpolar growthinpolen[j].trendsplantsci,2000,5: [9] BERKENA,CTHOMAS.AwitinghoferanewfamilyofRho GEFsactivatestheRopmolecularswitchinplants[J].Na ture,2005,436: [10] SCHMIDTA,HALLA.Guaninenucleotideexchangefactors forrho GTPases:turningontheswitch[J].GenesDev, 2002,16(13): [11] 杨双, 阮燕晔, 樊金娟, 等. 一种简易的拟南芥幼苗单株微量 DNA 提取方法 [J]. 沈阳农业大学学报,2005,36 (1): YANGShuang,RUANYanye,FANJinjuan,etal.Asimple andrapidmethodforthearabidopsisindividualtracednaex traction[j]. JournalofShenyangAgriculturalUniversity, 2005,36(1): [12] SHINDH,KIM TL,KWONYK,etal.Characterizationof ArabidopsisGEF familygenesinresponsetoabioticstreses [J].PlantBiotechnolRep,2009,3: [13] 王会, 金宇?, 卢曼曼, 等. 拟南芥 GEFs 家族基因在外源 脱落酸处理下的表达分析 [J]. 植物生理学通讯,2010, 46(8): WANGHui,JINYufei,LUManman,etal.AnalysisofEx presionofgefsgenesinarabidopsisthaliana[arabidopsis thaliana(l.)heynh.]treatedwithaba[j].plantphysi ologycommunictions,2010,46(8): [14] GANDIKOTAM,KOCHKOA,CHENL,etal.Development oftransgenicriceplantsexpresingmaizeanthocyaningenes andincreasedblastresistance[j].molbreed,2001,7(5): [15] ZHENGZL,NAFISIM,TAMA,etal.Plasmamembrane as sociatedrop10smalgtpaseisaspecificnegativeregulatorof abscisicacidresponsesinarabidopsis[j].plantcel,2002, 14: [16] KAOTHIENP,OKSH,SHUAIB,etal.Kinasepartnerpro teininteractswiththeleprk1andleprk2receptorkinases andplaysaroleinpolarizedpolentubegrowth[j].plantj, 2005,42: [17] WENGIERD,VALSECCHII,CABANASML,etal.There ceptorkinasesleprk1andleprk2asociateinpolenand whenexpresedinyeast,butdisociateinthepresenceofstyle extract[j].procnatlacadsci,2003,100: 激光生物学报 征订启事 激光生物学报 创刊于 1992 年, 是由中国科学技术协会主管 中国遗传学会主办 湖南师范大学承办 华南师范大学激光生命科学研究所 安徽农业大学生命科学学院 中国海洋大学物理系 福建师范大学物理与光电信息科技学院等协办, 由国内外有关专家 学者组成的 激光生物学报 编委会编辑部编辑 激光生物学报杂志社出版的学术性刊物, 是目前国际上唯一的一份激光生物学科的专业性学术刊物, 已逐渐发行到中国 美国 英国 日本 俄罗斯 法国 德国 意大利 奥地利 瑞典诸国 双月刊, 大 16 开,112 页, 每逢双月底出版发行, 国外发行代号 : DK43001, 国内发行代号 :42-194, 欢迎订阅 报道内容 : 以激光 ( 光 ) 生物学 生物光子学 激光 ( 光 ) 生物医学 ( 含光子中医学 光动力疗法 激光整形美容 ) 辐射生物学 ( 含激光育种 辐射育种 空间育种等 ) 离子束生物工程及其相关的激光生物技术 ( 含微束照射技术 光镊技术 成像技术 光谱技术 共聚焦扫描显限微技术 细胞分流技术等 ) 仪器研制诸领域的学术论文, 适量兼登生物物理学 生物化学 遗传学 医学 农学等基础学科方面的 学术论文 本刊栏目 : 激光生物学报 包含以下栏目 : 专题论述 基础研究 应用研究 技术研究 科技信息等 读者对象 : 凡从事上述领域的研究人员 高等院校教师 研究生 医务工作者 育种工作者 激光仪器研制者等, 均有裨益 订阅办法 : 1 国内主要是到全国各地邮局直接订阅, 亦可通过邮局直接汇款至编辑部或由银行汇款 地址 : 长沙岳麓山 : 湖南师范大学生命科学学院内 ; 邮编 : 开户行 : 中国银行股份有限公司长沙市湖南师范大学支行账号 : 户名 : 长沙市岳麓区激光生物学报杂志社国内定价 :25 元 / 期,150 元 / 年 2 国外直接向中国出版对外贸易总公司 ( 北京 782 信箱 ) 订阅 欢迎有国内外读者订阅本刊! 激光生物学报 编辑部
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析
福建农业学报 林 甦 朱春华 陈 珍 刘斌琼 施少华 江 斌 蔡国漳 林 羽 黄 瑜 甦 男 硕士 助理研究员 主要从事病毒学和动物传染病学研究 福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 福建农业学报 讨 论 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 责任编辑
中国科学技术大学 材料工程 05 校外调剂 0870 化学工程 吉林大学 应用化学 05 校外调剂 0870 化学工程 四川大学 制药
045700000787 东北大学 07030 分析化学 05 校外调剂 07030 无机化学 68 66 94 04 34 063700000004 沈阳药科大学 07030 分析化学 04 校内跨专业调剂 070303 有机化学 73 56 9 00 30 0007008903 北京大学 0780Z 药学类 05 校外调剂 070303 有机化学 75 67 09 8 4 085750830 苏州大学
福建农林大学硕士学位论文番茄抗叶霉菌相关基因的鉴定及 TRV 16K 基因的功能分析姓名 : 郑璐平申请学位级别 : 硕士专业 : 分子病毒学指导教师 : 吴祖建 ; 蔡新忠 20070401 番茄抗叶霉菌相关基因的鉴定及 TRV 16K 基因的功能分析 作者 : 郑璐平
材料 方法 载体构建 转基因植株的获得
生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料
生命科学研究 房 蓓 武泰存 王景安 以玉米沈单 号为材料 用溶液培养的方法研究了缺锌 低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响 进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大 并对其 同工酶谱及蛋白质表达进行了分析 结果表明 一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重 且地上部分比地下部分更敏感 低锌和缺锌处理时 种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异 尤其在一定量低锌浓度时 有些同工酶的表达增强或被特异性诱导
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
材料 方法
生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
第 期 赵金莲等 荧光光谱法分析花茶对羟自由基 诱导的 氧化损伤的保护作用!!!!!!!! 花茶冲泡方法 荧光扫描方法 # 稳定性试验方法 重复性试验方法
年 月 华南师范大学学报 自然科学版 年第 期 赵金莲 曾佑炜 李 宽 彭永宏 采用荧光光谱扫描法定性定量研究了 种花茶对羟自由基 诱导的 氧化损伤的保护作用 结果表明 桂花茶 复合花茶 绿茶和芍药花茶的保护作用要优于红玫瑰花茶和金莲花茶 且各花茶的保护作用在 范围内均随质量浓度的增加而增强 该方法的稳定性和重复性都较好 花茶 氧化损伤 荧光光谱扫描 第 期 赵金莲等 荧光光谱法分析花茶对羟自由基
从美国 加拿大 英国 澳大利亚 韩国和日本图书馆学情报学学院的发展历程入手 介绍并分析国外图书馆学情报学研究生教育的改革与重组 教学目标与教学方法 专业设置与课程体系 师资队伍与学生情况 入学资格与毕业条件 进而对我国的图书馆学情报学研究生教育制度提出一些改进意见 图书馆学 情报学 研究生 教育 作者简介 葛敬民 男 年生 教授 硕士生导师 刘荣华 女 年生 硕士生 王林 男 年生 硕士生
福建农业学报 材料与方法 外植体无菌株系的建立 启动培养 增殖培养 继代培养 生根培养 瘤状苗的细胞学观察
福建农业学报 邓素芳 杨 旸 赖钟雄 福建农业学报 材料与方法 外植体无菌株系的建立 启动培养 增殖培养 继代培养 生根培养 瘤状苗的细胞学观察 邓素芳等 朱砂根成年茎段的离体培养研究 结果与分析 福建农业学报 第3期 邓素芳等: 朱砂根成年茎段的离体培养研究 带空洞, 无法观察 图1 朱砂根成年茎段的离体繁殖 Fig 1 I n vitro propagation of A crenata 图 2
二 外汇风险溢酬的度量及其时间序列模型
外汇风险溢酬理论述评 郑振龙 邓弋威 一 外汇风险溢酬问题的提出 国家自然科学基金项目 非完美信息下基于观点偏差调整的资产定价 福建省自然科 学基金项目 卖空交易对证券市场的影响研究 教育部人文社科一般项目 市场有效性 价格发现与 定价权争夺 基于人民币即期汇率和远期汇率的研究 教育部留学回国人员科研启动基金 人民币 即期与远期汇率关系及外汇市场协同稳定机制研究 郑振龙 男 福建平潭人 厦门大学金融系教授
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na
![124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na](/thumbs/91/105785327.jpg "124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na")
河南农业科学,2013,42(2):123-127 JournalofHenanAgriculturalSciences PCR PRRSV CSFV PCV2,, (, 450011) : 根据 TaqMan 复合荧光探针设计原则, 应用 Primer5.0 和 Oligo6.0 软件设计检测猪繁殖 与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 猪瘟病毒 (CSFV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 的特异性引物和探针,
国内高等医学院校基础医学二级学科评价结果（1）
国内高等校基础医学二级学科竞争力评价简介 北京大学医学图书馆参考国内外各项评价指标体系, 建立了一套基础医学二级学科竞争力评价指标体系 分别从人才队伍 科学研究和教学成果三方面一共涉及 34 项指标, 对全国 39 家校的 12 个基础医学二级学科进行了评价 我们已经连续做了 4 年的评价,2012 年度的评价结果见下表或 http://library.bjmu.edu.cn/ 名 次 2012 年度国内高等校基础医学二级学科评价结果
生物技术通报 材料 方法
生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显
考生编号政治政治分外语外语分科目 1 科目 1 分科目 2 科目 2 分总分专业代码专业名称考试方式报名号 思想政治理论缺考英语一 45 生物综合 38 生理学缺考 药理学全国统考 思想政治理论
100019008910001 思想政治理论缺考英语一 45 生物综合 38 生理学缺考 83 078006 药理学全国统考 110190172 100019008910002 思想政治理论 61 英语一缺考药学综合 ( 缺考生理学 51 112 078006 药理学全国统考 110199187 100019008910003 思想政治理论缺考英语一缺考生物综合缺考 生物化学与分子生物学 缺考 --
< 1+1 <! " #$% &!"#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) "' )!"#$%&' (1% ( )* " + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物
213456!"# $ % # %557;&/55/?5,/ @@@!88>>!"#!$% &'()*+ 武汉市疾病预防控制中心 武汉 /&55, % 华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物教研室 武汉 /&55&5 & 武汉市第十一医院 武汉 /&5555,- O ' 0 ' =! 6!, 2 M*34!. 5 '2 ' 0 0* 6) 7 88^9:;0, 6! 89-4 O?@ 7%58
第一章 图 １ １ 传染病的特征 ９ Ｔ ｈ１ Ｔ ｈ２ 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 Ｔ Ｎ Ｆα 和 ＩＦＮγ 可抑制放线菌的生长而 ＩＬ ６ 的作用则 反之 ＩＬ １ ２ 和 ＧＭ ＣＳＦ 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 ＩＬ １ｒａ 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与
材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响
水相中 组氨酸单分散分子印迹聚合物微球的合成 表征及其识别性能研究 李思平等 李思平 徐伟箭 较佳工艺条件下 在水性体系中选用无皂乳液聚合法制得的单分散微米级聚苯乙烯微球为种球 分别以组氨酸 甲基丙烯酸 或丙烯酸胺 乙二醇二甲基丙烯酸酯 为模板分子 功能单体和交联剂 合成了 组氨酸分子印迹聚合物微球 研究了形貌 粒径及其分布以及模板分子与功能单体之间的相互作用 分别以 激光粒度分析仪紫外分光光度法和红外光谱表征功能单体与交联剂之间的共聚情况
考生编号政治政治分外语外语分科目 1 科目 1 分科目 2 科目 2 分总分专业代码专业名称专业排名考试方式报名号 思想政治理论 缺考 英语一 缺考 数学三 缺考 思想政治理论 60 英语一 78 数学三
100019000470001 思想政治理论 英语一 数学三 100019000470002 思想政治理论 60 英语一 78 数学三 119 100019000470003 思想政治理论 61 英语一 72 数学三 121 100019000470004 思想政治理论 62 英语一 82 数学三 108 100019000470005 思想政治理论 英语一 数学三 100019000470006
福建农业学报 发酵最佳转速的确定 确定 发酵周期 培养基配方试验 最优培养条件下碳源筛选 最优培养条件下氮源筛选 结果与分析 均匀设计 最佳
福建农业学报 赵 健 高晓丹 邱荣洲 翁启勇 材料与方法 种子罐的制备 发酵条件单因素试验 发酵最佳 值的确定 发酵最佳温度的确定 福建农业学报 发酵最佳转速的确定 确定 发酵周期 培养基配方试验 最优培养条件下碳源筛选 最优培养条件下氮源筛选 结果与分析 均匀设计 最佳 赵 健等 应用均匀设计优化生防细菌 发酵培养基组分及条件研究 最佳温度 碳源 最佳转速 氮源 福建农业学报 均匀设计 讨 论 赵
Microsoft Word - 4--冯政夫_news_.doc
海洋无脊椎动物组织总 RNA 提取方法的探讨 冯政夫, 王琳, 李文侠, 部凡, 胡彦江, 朱伟 (, 266109) 摘要 : RNA 提取是分子生物学研究的基础实验, 由于海洋无脊椎动物组织结构以及体成分的特殊性, 导致现有的 RNA 提取方法不能完全胜任此工作 作者以刺参 (Apostichopus japonicus) 栉孔扇贝 (Chlamys farreri) 和凡纳滨对虾 (Litopenaeus
程汉良 夏德全 吴婷婷 孟学平 吉红九 董志国 陈淑吟 对文蛤 青蛤 硬壳蛤 江户布目蛤 薄片镜蛤 和菲律宾蛤仔 种帘蛤科贝类和 个地理种 群文蛤 大连 连云港 湛江 防城港 的细胞色素 氧化酶亚基 基因片段的核苷酸序列进行了分析 以探讨这一序列在种质鉴定 种群遗传结构和分子系统发生研究中的应用价值 测序结果 表明 所有物种扩增片段长度均为 序列 含量 明显高于 含量 物种间共有变异位点 个 其中简约信息位点
南通大学学报 社会科学版 第 卷 第 期 双月刊 年 月出版!"# " < ABC DE c AB ^ " M F GE PQ M ""# = 摘要! "#$ %&' (!)*+,!-*.# /.01 # $ 89 :; /.012 # ' $ <= ABCD E /.01 F
南通大学学报 社会科学版 第 卷 第 期 双月刊 年 月出版 " < ABC DE c AB ^ " M F GE PQ M ""# = 摘要! "#$ %&' (!)*+,!-*.# /.01 # 234 567$ 89 :; /.012 # ' $ ?@ ABCD E /.01 F >GH >? I'J K ABCD > LMNO > > 0PQ RI'7 > S. KTUVW XY EN
荧光定量PCR
荧 光 定 量 PCR 荧 光 定 量 PCR 原 理 荧 光 定 量 PCR 最 早 称 TaqMan PCR, 后 来 也 叫 Real-Time PCR, 是 美 国 PE(Perkin Elmer) 公 司 1995 年 研 制 出 来 的 一 种 新 的 核 酸 定 量 技 术 该 技 术 是 在 常 规 PCR 基 础 上 加 入 荧 光 标 记 探 针 或 相 应 的 荧 光 染 料
儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 耳鼻咽喉科学 ( 专业学位 ) 非定向 全国统考
2017 年医学院 ( 含转化院 遗传所 ) 硕士研究生上线考生名单 准考证号 报考专业 外语政治 业务 1 业务 2 总分 报考类别 考试方式 备注 103357000912484 72 72 242 0 386 非定向 全国统考 103357000912003 71 72 242 0 385 非定向 全国统考 103357000911503 77 73 234 0 384 非定向 全国统考 103357000911098
Microsoft Word - tck-103-4y-10-1(衛生)
103 學 年 度 技 術 校 院 四 年 制 與 專 科 學 校 二 年 制 統 一 入 學 測 驗 衛 生 與 護 理 類 ( 專 一 ) 試 題 試 題 分 析 : 今 年 衛 護 類 專 一 ( 基 礎 生 物 ) 部 分, 考 題 概 念 簡 單, 選 項 敘 述 也 不 繁 瑣, 且 大 部 分 皆 為 考 古 題 相 關 概 念, 要 拿 高 分 甚 至 滿 分 都 不 是 太 困 難
南通大学学报 社会科学版 第 卷 第 期 双月刊 年 月出版 3 9 S ^ 9 F = S ]( ^ >? 67 = D ^ E Y GH I 摘要!"#$%&' ()*+,-./* :; 1 < #D.E? FGAH!" BI7JK LM.NO F
*+,-./* :; 1 < #D.E? FGAH! BI7JK LM.NO F](/thumbs/99/140818707.jpg "南通大学学报 社会科学版 第 卷 第 期 双月刊 年 月出版 3 9 S ^ 9 F = S ]( ^ >? 67 = D ^ E Y GH I 摘要!#$%&' ()*+,-./* :; 1 < #D.E? FGAH! BI7JK LM.NO F")
南通大学学报 社会科学版 第 卷 第 期 双月刊 年 月出版 3 9 S ^ 9 F = S ]( ^ >? 67 = D ^ E Y GH I 摘要!"#$%&' ()*+,-./*+01. 23456789:;1 < =>?
从菜鸟到高手-手把手教你qPCR教程II
从 菜 鸟 到 高 手 - 手 把 手 教 你 qpcr 教 程 II --- 定 量 PCR 原 理 常 见 问 题 分 析 和 数 据 统 计 分 析 前 言 由 于 Real-time qpcr 的 众 多 优 点, 现 在 已 经 是 生 命 科 学 领 域 的 一 项 常 规 技 术 越 来 越 多 的 研 究 文 章 中 涉 及 RT-PCR 的 实 验, 也 基 本 上 被 real-time
见图 二 社会主义改造时期 图
河北师范大学学报 蒋纯焦 通过采用计量研究 比较研究的方法 对 年以来中国东中西部高等教育区域差异的变迁作系统的梳理与分析 探讨形成和影响高等教育的区域差异的原因 揭示高等教育区域差异与社会变迁区域差异之间的互动关系 从而建立地方社会发展与高等教育发展之间的良性互动 实行区域推进策略 这是中国高等教育发展的应然选择 当代中国 东中西部 高等教育 区域差异 实证研究 一 建国初期 见图 见图 二 社会主义改造时期
干细胞和再生医学 科学学位 免考 免考 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 85 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 69 非定向 护理学 科学学位 免考 免考 非定向 护理学 科学学位
2018 年秋季报考博士上线考生名单 序号 准考证号 报考专业名称 学位类型外语成绩专业基础课成绩报考类别 备注 1 180371 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 2 180393 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 3 180427 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 4 180436 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 5 180474
2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告
PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)
第 期 牛文翰等 模板辅助合成氮掺杂的多孔碳基氧还原电催化剂的研究进展!"#$ %&' ' () * +,,,,,,( *,( - -, ( '+, *, -,,, +, ',,. /, ',,+, " $ 2 * ' /+ / / / (+ 5 (/(
第 # 卷第 # 期 # 年 月 =2>3(8 &27& "432"? @543A B 1%&# &&&( %&# 8-*%&&# & - % # CD%1/)* / % # # & # 9&,%&# " &%&./01 &-. # 9& ; ##&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& ( -& ; # #; ; & &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 9CC1/)*
!!! ! " # $% $& $#!!!!&!(!# %$ %) $ !"!#!$ %& % %% %( "& "% "$ #) #% (& (! (# (* $! !" #$ #% & & & " & # &&& &&( &&$ &&% &&# &)& &)* * !"#!$%!$&!!! $! %!()!(!(%!(&!#!##!#&!%"!%#!%&!*$ !"#!$%!$&!$ (%%
乌鲁木齐城市交通改善项目Ⅱ
世 界 银 行 贷 款 发 展 新 疆 职 业 教 育 项 目 少 数 民 族 发 展 行 动 计 划 ( 预 评 估 稿 ) 乌 鲁 木 齐 长 治 久 安 社 会 经 济 咨 询 有 限 公 司 乌 鲁 木 齐 中 国 二 〇 一 四 年 十 一 月 少 数 民 族 发 展 行 动 计 划 总 负 责 人 : 李 泽 ( 新 疆 社 会 科 学 院 ) 少 数 民 族 发 展 行 动 计 划 主
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
生物技术通报 材料 方法
生物技术通报 谭颖 王凭青 樊奇 何腾龙 张宝云 储明星 刘重旭 邓腊梅 性激素结合球蛋白 是广泛存在于哺乳动物血清中的糖蛋白 血清 可结合与转运性激素 从而在一定程度上控制血清性激素浓度 血清性激素浓度将会影响体内促黄体激素 促卵泡激素比率 最终影响排卵性能 以大足黑山羊基因组 为模板 通过 扩增 克隆测序等方法获得 基因序列 经 软件与 比对分析其单核苷酸多态性 结果发现 基因内含子 中有两处
第 卷 第 期 年 月 水 生 生 物 学 报 肠 丫 搔蒸霎 原 位杂 交 和 原 位 技 术在 鱼 类基 因 定位 中 的 应 用 黄 袁仕 取 梅 朱作言 中 国科 学 院 水 生 生 物 研 究 所 淡 水 生 态 与 生 物 技 术 国 家 重 点 实验 室 武 汉 陕 西 师 范 大学 生 命 科 学 院 西 安 # 万 尸 了夭 如 趾 郑 人 扭寿 卿 关 键词 艺 只 妙 毛山知
PCR专题改.doc
Primer3 http://frodowimitedu/cgi-bin/primer3/primer3_wwwcgi Primer5 Oligo665 Primer5 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=38536 Oligo667 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=40898 1 PCR 1
经济管理学院 金融学 非在职 经济管理学院 金融学 非在职 经济管理学院 金融学 非在职 经济管理学院 国际贸易学 非在职 经济管理学院 国
考试编号 录取学院 录取专业 录取类别 100023111502601 林学院 林业 非在职 100023122409117 人文学院 马克思主义基本原理 非在职 100033005000092 环境科学与工程学院 环境工程 非在职 100033069001339 人文学院 哲学 非在职 100033069110101 人文学院 哲学 非在职 100033070108695 人文学院 哲学 非在职
第 期 房建成等 动态定位的强跟踪卡尔曼滤波研究
第 卷第 期 年 月 东南大学学报 房建成万德钧吴秋平 东南大学仪器科学与工程系 南京 提出一种改进的强跟踪卡尔曼滤波算法 应用于 动态定位滤波中获得明显效果 首先采用描述机动载体运动的 当前 统计模型 建立了一种新的 动态定位扩展卡尔曼滤波模型及其自适应算法 然后 为了进一步提高滤波器的动态性能 改进了周东华等提出的强跟踪滤波器 大大提高了 动态定位扩展卡尔曼滤波器的跟踪能力 动态定位 卡尔曼滤波
自然科学版 预处理 视盘粗定位 视盘垂直坐标的粗定位 视盘水平坐标的粗定位
自然科学版 文章编号 视网膜图像中视盘的快速自动定位方法 赵晓芳 林土胜 李碧 摘 要 基于眼底视网膜血管的分布结构及视盘本身的特点 提出一种快速自动定位视盘的方法 首先根据视网膜血管的网络分布结构大致定位视盘的垂直坐标 然后根据视盘 的亮度信息及视盘与血管的关系来定位视盘的水平坐标 最后把视盘限定在以粗定位的视盘为中心的一个小窗口内 用 变换精确定位视盘中心 该方法不需要事先分割视网膜血管 也不需要对算法进行训练
(Microsoft Word - 102-3-\245|\247\336\244G\261M-\271A\267~\270s\261M\244G\270\325\303D)
農 業 群 專 業 科 目 ( 二 ) 1. 有 關 生 命 現 象 之 配 對, 下 列 何 者 錯 誤? (A) 光 合 作 用 - 新 陳 代 謝 (B) 金 蟬 脫 殼 - 繁 殖 (C) 趨 光 性 - 感 應 (D) 狗 急 跳 牆 - 運 動 2. 下 列 何 者 是 膜 狀 構 造 的 胞 器? (A) 粒 線 體 (B) 核 糖 體 (C) 中 心 粒 (D) 染 色 體 3. 下
未命名-1
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 ss a c y e vg 13 14 15 16 17 18 19 H 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 发现生命的螺旋 克里克在提出 中心法则 时曾指出 遗传信息是沿 Ｄ Ｎ Ａ - Ｒ Ｎ Ａ - 蛋白质的方向流动的 遗传信息不可能从 Ｒ Ｎ Ａ 回到 Ｄ Ｎ
臧晓南 张学成 王高歌 刘金姐 张晓辉 刘 滨 对两种丝状蓝藻 钝顶节旋藻和盐泽螺旋藻 在基因工程中常用作选择试剂的 种抗生素 氯霉素 氨苄青霉素 红霉素 链霉素 卡那霉素 庆大霉素和新霉素 的敏感性作比较实验 结果表明 两种蓝藻对抗生素的敏感性既有共同的特点 也有 明显的差异 它们对红霉素 氯霉素和链霉素最敏感 致死浓度分别为 和 两种蓝藻对氨苄青霉素比较敏感 的氨苄青霉素即可抑制 和 的生长 但
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 山药多糖研究进展 王洪新 王远辉 江南大学食品学院 江苏无锡 山药是药食兼用植物 山药多糖被认为是山药中重要的活性物质 综述山药多糖的提取分离工艺 纯化方法 化学结构分析和生理活性研究的现状 为未来研究山药多糖的新提取工艺 探讨构效关系 作用机制提供参考 山药多糖 研究进展 提取与分离 食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷 第 期 王洪新等 山药多糖研究进展
中国商人必胜宝典--各地商人性格特征剖析
-- 13 -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- - 1 - - 2 - 570 350-3 - - 4 - (1) (2) (3) 100-5 - ! ( ) 1985-6 - 20 21 300 600-7 - (1) (2) (3) (4) ( ) - 8 - 24-9 - - 10 - ! 20 20 30 100 1994 5 5 5! - 11 -
2015年全国硕士研究生入学考试
2015 年 全 国 硕 士 研 究 生 入 学 考 试 佛 山 科 学 技 术 学 院 自 命 题 考 试 科 目 考 试 大 纲 ( 科 目 名 称 : 农 业 知 识 综 合 二 科 目 代 码 :340 ) 一 考 查 目 标 农 业 知 识 综 合 二 侧 重 于 动 物 生 产 类 综 合 知 识 的 考 查 考 试 内 容 应 主 要 涵 盖 动 物 遗 传 学 动 物 生 理 学 动
<4D6963726F736F667420576F7264202D204238A67EABD7B2C4A447BEC7B4C1BCCCBEF0B0EAA4A4B0CFB0ECA4E8AED7A5D3BDD0AED130313037>
臺 北 縣 立 樟 樹 國 中 96 學 年 度 第 二 學 期 區 域 性 自 然 科 學 領 域 資 賦 優 異 教 育 方 案 實 施 計 劃 一 依 據 : ( 一 ) 特 殊 教 育 法 第 二 十 九 條 ( 二 ) 特 殊 教 育 法 施 行 細 則 第 四 條 第 二 項 ( 三 ) 身 心 障 礙 及 資 賦 優 異 學 生 鑑 定 標 準 二 目 的 : ( 一 ) 推 廣 資
國立中山大學學位論文典藏.PDF
國 立 中 山 大 學 中 國 文 學 系 ( 暑 期 專 班 ) 碩 士 在 職 專 班 碩 士 論 文 漢 初 異 姓 諸 侯 王 研 究 研 究 生 : 林 裕 斌 撰 指 導 教 授 : 劉 文 強 教 授 中 華 民 國 97 年 5 月 摘 要 本 篇 論 文 探 究 的 對 象 是 漢 朝 初 年 八 位 異 姓 諸 侯 王, 並 涵 蓋 與 操 縱 他 們 興 盛 殞 落 息 息 相
商 周 三 代 年 代 學 的 研 究 經 過 近 五 年 的 努 力, 完 成 夏 商 周 年 表 本 大 事 概 覽 中 夏 商 周 三 代 的 大 事 紀 年, 即 採 用 夏 商 周 斷 代 工 程 的 考 論 成 果 對 於 無 法 考 證 年 份 的 史 事 或 發 生 在 史 前 時
中 外 歷 史 大 事 概 覽 編 者 說 明 : 1. 傳 說 時 代 與 夏 商 周 年 表 : 人 類 在 未 有 文 字 記 事 之 前, 口 耳 相 傳 的 神 話 傳 說, 是 先 民 對 自 然 變 化 的 體 驗 與 歷 史 經 歷 的 口 述 這 些 傳 說, 或 者 存 有 誇 張 和 穿 鑿, 隨 著 考 古 文 物 的 出 土 與 歷 史 學 家 的 努 力, 汰 偽 存 真,
第 三 条 实 验 室 技 术 安 全 工 作 贯 彻 以 人 为 本 安 全 第 一 预 防 为 主 综 合 治 理 的 方 针 各 单 位 及 教 职 工 学 生 应 树 立 安 全 意 识, 履 行 安 全 义 务 承 担 安 全 责 任 第 四 条 实 验 室 技 术 安 全 工 作 坚 持
校 发 2015 28 号 北 京 科 技 大 学 实 验 室 技 术 安 全 管 理 规 定 第 一 章 总 则 第 一 条 为 加 强 学 校 实 验 室 安 全 管 理, 防 止 实 验 室 安 全 事 故 发 生, 保 障 教 职 工 及 学 生 的 人 身 财 产 安 全, 促 进 学 校 各 项 事 业 健 康 稳 定 发 展, 根 据 国 家 相 关 法 律 法 规, 结 合 学 校
500 C ~ C 2
???? 19 16 * 4 16 500 C ~ C 2 20 20 1 29 12 5 2 50 5 3 5 20 40 30 ** 10 5 6 10 3 3 N 39 4 10 4 * ** ** 21 -, 3 2 9 9 9 11 13 13! >! 167 500 500 2 21 21 2 210 32 10 ~ ~ 100 ~ 2 16 100 4 8 5 35 4 29
资 产 种 类 市 值 ( 元 ) 占 净 资 产 银 行 活 期 存 款 8,220,340.39 0.77 中 央 银 行 票 据 0.00 0.00 一 年 期 以 内 ( 含 一 年 ) 定 期 0.00 0.00 存 款 / 协 议 存 款 流 动 性 买 入 返 售 金 融 资 产 0.
企 业 年 金 养 老 金 产 品 管 理 情 况 报 告 ( 报 告 期 间 : 2016 年 4 月 1 日 至 6 月 30 日 ) 一 产 品 基 本 概 况 产 品 名 称 : 易 方 达 稳 健 配 置 二 号 混 合 型 养 老 金 产 品 产 品 代 码 :11B002 产 品 起 始 投 资 日 期 : 2014 年 11 月 18 日 投 资 管 理 人 : 易 方 达 基 金
结果与讨论
金青哲 谢 峰 丁志华 施峰华 王兴国 利用碳同位素比值法进行花生油和玉米油掺合物的检测研究 用气相色谱仪获得 转化途径 的玉米油和 转化途径的花生油的脂肪酸组成 再用气相色谱 燃烧 同位素比值质谱仪确定三种主要脂肪 酸 的 值 利用所测得的数据 构建了玉米油与花生油混合油中主要脂肪酸的 值 混合比例的标准曲线 结果表明 玉米油与花生油的 值差异很大 应用试验中将花生油与一种未知的其他植物油进行掺和
Microsoft Word - ....9.\.U.e.~.g...X...doc
附 錄 九 餐 廳 委 外 經 營 合 約 德 育 醫 護 管 理 專 科 學 校 ( 以 下 簡 稱 甲 方 ) 委 託 公 司 ( 以 下 簡 稱 乙 方 ), 經 營 甲 方 經 國 樓 地 下 室 上 廳 供 應 社, 供 應 本 校 師 生 餐 食, 經 雙 方 協 議, 茲 訂 定 左 列 條 款 以 資 共 同 遵 守 履 行 第 一 條 本 ( 臨 時 ) 合 約 有 效 期 限 自
2014 年度军队文职人员招聘信息
序号 1 军事交通学院讲师 研究生 : 新闻传播学本科 : 新闻传播学类 天津 022-84657561 2 军事交通学院讲师 研究生 : 俄语语言文学本科 : 俄语 天津 022-84657561 3 军事交通学院讲师 1 硕研以上音乐与舞蹈学天津 022-84657561 4 军事交通学院药师 研究生 : 药学本科 : 药学类 天津 022-84657561 5 军事交通学院护师 3 大专以上
<4D6963726F736F667420506F776572506F696E74202D20332DC1D9B4B2504352BCECD1E9B1EAB1BEB5C4B4A6C0EDA1A2B1A3B4E6BCB0BACBCBE1CCE1C8A1B7BDB7A82DD5D4C9C6C4C8205BBCE6C8DDC4A3CABD5D>
检 验 过 程 临 床 PCR 检 验 标 本 的 处 理 保 存 及 核 酸 提 取 方 法 医 师 申 请 检 验 项 目 申 请 患 者 准 备 患 者 识 别 样 本 采 集 样 本 运 送 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 分 析 测 定 样 本 处 理 分 析 前 分 析 中 分 析 后 报 告 临 床 应 用 烟 台 市 烟 台 山 医 院 赵 善 娜 结 合 临 床 资 料 分 析 结 果 并 确 认 出
(2) (3) 1.3 (1) (2) (3) (4) (5) (6)
(GB/T -1987) 771 (GB/T 1.1 2000---- ) GB/T 7714-2005 ( ) 1 (1) (2) (3) (4) (5) (6) abstract (7) 1.2 (1) 1 (2) (3) 1.3 (1) (2) (3) (4) (5) (6) 2.1 1. 25 1 2. 15 2 3. 4. 300 4 8 2 3 5. abstract 6. : 5 2.2
第 一 节 项 目 概 况 一 项 目 简 介 二 投 资 主 体 第 二 节 投 资 方 案 一 预 计 投 资 总 额 二 建 设 方 案 目 录 韶 关 爱 尔 项 目 可 行 性 研 究 报 告 第 三 节 项 目 实 施 的 必 要 性 与 可 行 性 一 项 目 实 施 的 必 要 性
爱 尔 眼 科 医 院 集 团 股 份 有 限 公 司 关 于 韶 关 爱 尔 眼 科 医 院 建 设 项 目 的 可 行 性 研 究 报 告 报 告 日 期 二 一 二 年 三 月 第 1 页, 共 14 页 第 一 节 项 目 概 况 一 项 目 简 介 二 投 资 主 体 第 二 节 投 资 方 案 一 预 计 投 资 总 额 二 建 设 方 案 目 录 韶 关 爱 尔 项 目 可 行 性 研
o -8 1 4 A 1A = 10 cm 1 44 A o o G1 S G2 M 68 31 72 15 89 22 88 22 99.6 28 27 4 95 87 80 13 32 3 77 19 84 37 89 7 1 1450O l 1700 8.5 35 1 23000 l 2200 10.5 40 l 40000
生物真题+模拟卷（14）.FIT)
教 师 招 聘 考 试 中 学 生 物 全 真 模 拟 试 卷 ( 一 ) 渊 时 间 院 120 分 钟 满 分 院 100 分 冤 一 尧 单 项 选 择 题 渊 圆 园 小 题 袁 每 小 题 员 分 袁 共 圆 园 分 冤 员 援 关 于 人 体 细 胞 功 能 和 结 构 的 叙 述 袁 正 确 的 是 渊 粤 援 在 细 胞 核 内 砸 晕 粤 能 够 传 递 和 表 达 遗 传 信 息
发 行 省 市 公 开 发 行 额 度 定 向 发 行 额 度 一 般 债 券 专 项 债 券 一 般 债 券 专 项 债 券 合 计 黑 龙 江 省 624.24 59.70 102.74 5.32 792.00 吉 林 省 473.07 133.97 76.47 81.49 765.00 新 疆
2015 年 地 方 政 府 债 券 发 行 情 况 统 计 分 析 上 海 新 世 纪 资 信 评 估 投 资 服 务 有 限 公 司 公 共 融 资 部 戴 晓 枫 郭 燕 一 地 方 政 府 债 券 发 行 情 况 统 计 经 全 国 人 大 国 务 院 批 准,2015 年 财 政 部 下 达 了 6000 亿 元 新 增 地 方 政 府 债 券 和 3.2 万 亿 元 地 方 政 府 债
浙 江大 学 学 报 农业与生命科学版 ４２ ４ ＡＶＧ 处理的大豆叶片 ＣＯ２ 饱和点 ＲｕＢＰ 最大 再生 速 率 羧 化 效 率 均 显 著 高 于 对 照 Ｐ ０畅０５ 而 ３ 个 ＡＣＣ 处理的大豆叶片 ＣＯ２ 饱和 点 ＲｕＢＰ 最大再生速率 羧化效率均低于对照 因此 ＡＶＧ 处理有利于提高大豆叶片 ＣＯ２ 浓度 的可利用范围 从而有利于改善大豆的光合性 能 而 ＡＣＣ 的处理效果与 ＡＶＧ
2010年全国执业兽医资格考试大纲
2013 年 全 国 执 业 兽 医 资 格 考 试 大 纲 ( 兽 医 全 科 类 ) 全 国 执 业 兽 医 资 格 考 试 委 员 会 二 〇 一 三 年 四 月 目 录 动 物 解 剖 学 组 织 学 及 胚 胎 学 考 试 大 纲... 1 动 物 生 理 学 考 试 大 纲... 5 动 物 生 物 化 学 考 试 大 纲... 9 动 物 病 理 学 考 试 大 纲... 13 兽 医
1950 5 1954 1906 3000 3 1911 30 3 2000 6 10 3 33 1944 34 38 4 1950 32 1943 500 1955 8 1740 1000 1961 1 10 1956 204 28 1939 1 14 25 3 8 8 29 2 6 200 6 10 4 22 1933 60 800 10 26 27 29 38 4 9 1950 1951 1968
:,,?,?,,,,,,, 1 ( ) (. ) ( ) :,?? :,,,,, ( ) (. ) : (. ) ( ),,, ( ) ( ), (. ), ( ) ( ) - (. - ) (. ) ;, (. ) ( ),, ( ),,, : ( - ), ( - - ) ( ) (. ),,,
* 以徐家村为例 黄玉琴 :, -.' : '.,,??,., :,. -,,,,. : -,, - -.,, '. 1,, ( ) ( ) 2 3,,, 4 :? :,,? :,,,,,,!,,!!! :, 5, * 1 : ; : 2 :,, ;,, 3 :,, 4 :, 5 :, :,,?,?,,,,,,, 1 ( ) (. ) ( ) :,?? :,,,,, ( ) (. ) : (. )
南通大学杂志社 南通大学学报 医学版. */(& 0 1&( () (' / ' '-& -' (- 评价血清 %'8$ 在肝细胞肝癌诊断中的作用 张 玉 邵建国 陈 琳 卞兆连 管海涛 南京中医药大学 南京 江苏省南通市第三人民医院肝病研究所 摘 要 目的 探讨血清 %'8$ 作为一种新的生物标志
.*/& 0 1&) '/' '-& -'- 评价血清 %'8$ 在肝细胞肝癌诊断中的作用 张 玉 邵建国 陈 琳 卞兆连 管海涛 南京中医药大学 南京 江苏省南通市第三人民医院肝病研究所 摘 要 目的 探讨血清 %'8$ 作为一种新的生物标志物在肝细胞肝癌 2&-*&/ -&/-'%&3 44 诊断中 的作用 方法 采用实时定量聚合酶链式反应 /&$'% 9*&'&' 2%/& -&' /&-'3
湖南师范大学硕士学位论文关于制定 校园安全法 的若干思考姓名 : 李红雁申请学位级别 : 硕士专业 : 法学理论指导教师 : 黄捷 20020401 关于制定 校园安全法 的若干思考 作者 : 李红雁 学位授予单位 : 湖南师范大学 本文链接 :http://d.g.wanfangdata.com.cn/thesis_y663208.aspx
:,,, :,, ; (, : ) :, ;,,,, ;, ; ;,,, -,,. %, %,,. %, ;. % ;. % (, : ),,, :,,,, (, : ),,,, -,, (, : ), -,,,,,,,,, - (, : ),,,,,,,
吴亦明 : '. ',,, -,,, -,., -..., -. - -.,, ( ),,,,,,,,,,,,,,,, :,,, :,, ; (, : ) :, ;,,,, ;, ; ;,,, -,,. %, %,,. %, ;. % ;. % (, : ),,, :,,,, (, : ),,,, -,, (, : ), -,,,,,,,,, - (, : ),,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,.
标题
第 35 卷第 期西南大学学报 ( 自然科学版 ) 3 年 月 Vol.35 No. JouralofSouthwestUiversity (NaturalScieceEditio) Feb. 3 文章编号 :673 9868(3) 69 4 一类积分型 Meyer-KiḡZeler-Bzier 算子的点态逼近 赵晓娣, 孙渭滨 宁夏大学数学计算机学院, 银川 75 摘要 : 应用一阶 DitziaṉTotik
考 试 科 目 代 码 考 试 科 目 名 称 724 教 育 心 理 学 728 建 筑 理 论 综 合 729 中 外 美 术 史 及 理 论 730 美 术 史 论 732 城 乡 规 划 基 本 理 论 与 相 关 知 识 733 细 胞 生 物 学 734 教 育 学 综 合 801 理
2016 年 硕 士 研 究 生 初 试 考 试 自 命 题 科 目 大 纲 查 询 导 航 页 考 试 科 目 代 码 考 试 科 目 名 称 211 翻 译 硕 士 英 语 240 德 语 245 二 外 俄 语 246 二 外 日 语 247 二 外 德 语 248 二 外 法 语 333 教 育 学 综 合 337 工 业 设 计 理 论 344 风 景 园 林 基 础 349 药 学 综
! % % % % % %!
年 月 日 由中国社会科学院近代史研究所! 抗日战争研究 编辑部与哈尔滨师范大学社会与历史学院联合举办的 抗日战争与沦陷区问题研究 学术研讨会在哈尔滨师范 大学召开 来自中国社会科学院近代史研究所! 中国社会科学 杂志社 中国人民大学 南开大 学 南京第二历史档案馆! 民国档案 编辑部 南京大学 南京师范大学 河南大学! 史学月刊 编辑 部 安徽大学 河北师范大学 杭州师范大学 黑龙江省社会科学院等十多个高校和科研院所的
考生编号 科目代码 科目名称 成绩 复核结果 翻译硕士英语 66 无误 翻译硕士英语 65 无误 翻译硕士英语 58 无误 日语 ( 外 )
考生编号 科目代码 科目名称 成绩 复核结果 110659850003734 211 翻译硕士英语 66 无误 110659850004303 211 翻译硕士英语 65 无误 110659850007372 211 翻译硕士英语 58 无误 110659850009803 245 日语 ( 外 ) 65 无误 110659850005177 308 护理综合 170 无误 110659850006267
1986 1 20 (1) (4) (6) (9) (17) (22) (23) (27) (33) (34) (35) (35) (96) (36) (37) (38) (39) (39) (40) (40) (41) (42) (43) (44) (44) (45) (45) (46) ( ) (50) ( ) (51) ( ) (52) (53) (55) (56) (59) (62) (67)