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1 学校编码 :10384 密级 学号 : 硕士学位论文 池养条件下的负选择对凡纳滨对虾 种质退化的影响 Effect of Negative Selection under Pond-rearing Conditions on Germplasm Degradation of Shrimp Litopenaeus vannamei 林莉 2015 年 06 月

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3 厦门大学学位论文原创性声明 本人呈交的学位论文是本人在导师指导下, 独立完成的研究成 果 本人在论文写作中参考其他个人或集体已经发表的研究成果, 均 在文中以适当方式明确标明, 并符合法律规范和 厦门大学研究生学 术活动规范 ( 试行 ) 另外, 该学位论文为 ( ) 课题 ( 组 ) 的研究成果, 获得 ( 资助, 在 ( ) 课题 ( 组 ) 经费或实验室的 ) 实验室完成 ( 请在以上括号内填写 课题或课题组负责人或实验室名称, 未有此项声明内容的, 可以不作特别声明 ) 声明人 ( 签名 ): 年月日

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5 厦门大学学位论文著作权使用声明 本人同意厦门大学根据 中华人民共和国学位条例暂行实施办法 等规定保留和使用此学位论文, 并向主管部门或其指定机构送交学位论文 ( 包括纸质版和电子版 ), 允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅 借阅 本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士 硕士学位论文共建单位数据库进行检索, 将学位论文的标题和摘要汇编出版, 采用影印 缩印或者其它方式合理复制学位论文 本学位论文属于 : ( )1. 经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文, 于年月日解密, 解密后适用上述授权 ( )2. 不保密, 适用上述授权 ( 请在以上相应括号内打 或填上相应内容 保密学位论文应是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文, 未经厦门大学保密委员会审定的学位论文均为公开学位论文 此声明栏不填写的, 默认为公 开学位论文, 均适用上述授权 ) 声明人 ( 签名 ): 年月日

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7 目 录 目 录 摘要... VI Abstract... IX 第一章绪论 本研究的目的和意义 凡纳滨对虾的分类 分布及其在我国养殖概况 分类与分布 养殖概况 凡纳滨对虾的生态习性与繁殖习性 生态习性 繁殖习性 国内外相关的研究概况 养殖环境和近亲繁殖对对虾种质退化的影响 对虾亲体状态对生殖性能及早期子代质量的影响 亲虾的生殖营养与性腺发育 对虾卵子质量和幼体质量的评价 养成 科学问题的提出 研究思路及其研究内容 第二章原种和池养亲虾的生殖性能 卵子质量和幼体质量的差异比 较 材料与方法 实验材料 实验方法 结果 原种亲虾和池养亲虾的若干形态学参数和存活率的差异比较 原种亲虾和池养亲虾的若干生殖性能参数的差异比较 原种亲虾和池养亲虾卵巢和肝胰腺的生化组分含量 I

8 目 录 原种和池养亲虾所产的卵子和无节幼体的形态学观测和生化组分含量分析 讨论 亲虾的个体大小,GSI 和 HPI 与生殖能力的关系 亲虾的成熟与交配 亲虾卵巢和肝胰腺几种生化组分含量变化 原种和池养亲虾的生殖产量及其卵子质量与无节幼体质量 第三章第一代和第二代无节幼体质量的差异分析 材料与方法 实验材料 实验方法 幼体生产性能的观测 幼体生化组分含量的测定 幼体形态学的观察与测量 幼体趋光性行为实验 仔虾的盐度胁迫实验 实验数据的统计分析处理 结果 第一代和第二代无节幼体生产性能的差异比较 幼体培育过程 Z3, M3, PL3 生化组分含量测定 形态学方面的差异比较 幼体的趋光性与盐度胁迫存活率 讨论 对虾不同来源幼体的生产性能 对虾各期幼体存活率 对虾幼体发育蜕壳与同步性 对虾幼体发育过程各期的生化组分含量变化 对虾幼体生长发育 对虾各期幼体的趋光性行为表现 II

9 目 录 对虾幼体盐度胁迫耐受性 第四章原种和池养亲虾两种来源种苗养殖效果差异分析 材料与方法 调查的区域与对象 实验方法 相关参数测定与处理 结果 不同养殖模式下凡纳滨对虾一代和二代苗养殖结果的比较 不同养殖模式下凡纳滨对虾一代和二代苗养殖经济效益的比较 讨论 苗种质量对养殖效果的影响 对虾养殖模式对养殖效果的影响 影响对虾养殖成功与否的其他因素 第五章结语 主要结果 本研究的创新点与特色 不足之处 展望 参考文献 在学期间参加的科研活动和发表的文章 致谢 III

10 Contents Contents Abstract (in Chinese)...VI Abstract (in English)... IX Chapter 1. Introduction Purpose and significance of the research Classification, distribution and cultivation situation of Litopenaeus vannamei Classification and natural distribution Cultivation situation of Litopenaeus vannamei in China Ecological habits and reproductive habits of Litopenaeus vannamei Ecological habits Reproductive habits Related research of domestic and foreign Effect of culture environment and inbreeding on germplasm degradation of shrimps Effect of broodstock condition on reproductive performance and early offspring quality Reproductive nutrition and gonadal development of broodstock Assessing shrimp egg and larval quality Cultivation Problems to be put forward, research idea and research content...13 Chapter 2. Comparison of the differences of reproductive performance, egg and larval quality between original strain and pond-reared broodstock Materials and methods Experimental materials Experimental methods Results Comparison of some morphological differences and survival rates between original strain and pond-reared broodstock...22 IV

11 Contents Comparison of some reproductive performance differences between original strain and pond-reared broodstock Biochemical component content in the ovary and hepatopancreas of original strain and pond-reared broodstock Analysis about morphology and biochemical component content of egg and nauplius bred by original strain and pond-reared broodstocks Discussion Body size, GSI and HPI of broodstock in relation to reproductive ability Maturation and mating of broodstock Biochemical component content in the ovary and hepatopancreas of broodstock Reproductive output of original strain and pond-reared broodstock, egg quality and nauplius quality...36 Chapter 3. Analysis of differences between the quality of first-generation nauplius and that of second-generation nauplius Materials and methods Experimental materials Experimental methods Production performance of larvae Biochemical component content determination of larvae Morphological observation and measurement of larvae Experiment of larval phototactic behavior The salinity stress experiment of postlarvae Data analysis Results Comparison of differences between the production performance of first-generation nauplius and that of second-generation nauplius Biochemical components of Z3,M3 and PL3 in the larval breeding process Comparison of morphological differences Larval phototaxis and survival rates under the salinity stress...54 V

12 Contents 3.3 Discussion productive performance of larvae of different souces Survival rates of larvae during different development periods Molting and development synchronization of shrimp larvae Biochemical component content change of larvae during different development periods Growth and development of shrimp larvae Phototactic behavior of shrimp Larvae during different development periods Tolerance ability of shrimp larvae under salinity stress...62 Chapter 4. Investigation on the cultivation effectiveness of shrimp seeds bred by original strain and pond-reared broodstock Materials and methods Area and objects of investigation Experimental methods Data determination and analysis Results Comparison of the cultivation situation of first-generation and second-generation shrimp seeds, Litopenaueus vannamei under different culture modes Comparison of the cultivation economic efficiency of first-generation and second-generation shrimp seeds, Litopenaueus vannamei under different culture modes Discussion Effect of the quality of shrimp seed on cultivation effectiveness Effect of culture modes on shrimp cultivation effectiveness Effect of other factors on shrimp cultivation success...75 Chapter 5. Epilogue The main results of the present research Innovation and characteristic of the present research Shortage of the present research...80 VI

13 Contents 5.4 Prospects of the present research References...83 Research activities and paper published during the learning...97 Acknowledgements...98 VII

14 摘要 摘要 凡纳滨对虾 (Litopenaeus vannamei) 是我国对虾养殖最重要经济种类 本研究综合应用实验生态学 形态学 海水养殖学及生物化学等多学科的方法和技术, 探讨了在相同养殖环境条件下原种亲虾和池养亲虾在生殖生产性能及其卵子和无节幼体质量的差异 ; 研究了第一代和第二代的无节幼体在育苗实验过程生产性能 生化组分 形态 行为及 抗应激能力的差异 ; 查明一代虾苗和二代虾苗养殖的生产性能和经济效益 以期为对虾 养殖业的健康 安全 高品质和可持续发展提供理论指导, 并为甲壳动物生殖生态学和遗传育种学的研究积累基础资料 主要结果如下 : 1 原种亲虾和池养亲虾的生殖性能及其卵子质量和无节幼体质量以亲虾形态学参数 生殖性能参数及组织生化组分作为指标对凡纳滨对虾原种亲虾 ( 对照组 ) 和池养亲虾 ( 实验组 ) 进行研究 结果如下 :(1) 性腺指数对照组显著高于实验组 (P<0.01); 体况指数 肝胰腺指数也是对照组高于实验组但无差异 (P>0.05) (2) 在促熟期间, 对照组的存活率均高于实验组, 差异明显 (P<0.05) 日均成熟率 日均交配率对照组均高于实验组, 且走势随促熟天数的增加均呈上升趋势, 达极值后稍有下降 相对产卵量和无节幼体产量对照组均明显高于实验组 (P<0.01); 呈现逐日增长趋势, 并各有一峰值 ; 当天产卵虾比例和受精率均保持在 99 % 以上, 对照组与实验组之间差异不明显 (P>0.05); 孵化率对照组明显高于实验组 (P<0.01) (3) 在卵巢, 蛋白质 葡萄糖及甘油三酯含量对照组均高于实验组, 总胆固醇含量对照组与实验组之间差异不明显 (P>0.05) 在肝胰腺蛋白质含量 葡萄糖含量及甘油三酯含量对照组均极明显低于实验组 (P<0.01), 而总胆固醇含量前者明显高于后者 (P<0.05) (4) 卵径对照组明显高于实验组 (P<0.01), 而无节幼体体长对照组与实验组之间无差异 (P>0.05) 在卵子, 蛋白质 葡萄糖 甘油三酯及总胆固醇含量对照组均高于实验组, 其中, 蛋白质 葡萄糖含量差异极明显 (P<0.01), 甘油三酯含量差异明显 (P<0.05), 总胆固醇含量差异不明显 (P>0.05) 无节幼体的蛋白质含量 葡萄糖含量 甘油三酯含量及总胆固醇含量对照组均明显高于实验组 (P<0.01) 表明原种亲虾与池养亲虾在生殖生产性能上是存在比较明显的差异, 前者表现出更好的优势 ; 同时亲虾的不同来源对卵和无节幼体的质量也有较大影响 2 第一代和第二代无节幼体质量的差异分析以原种亲虾和池养亲虾繁育的第一代和第二代无节幼体作为材料, 在水温 30~ VIII

15 摘要 33, 盐度 18~20,pH7.8~8.2 条件下, 培育至第五期仔虾 (PL5), 结果如下 :(1) 无节幼体的变态率和发育同步性 育苗存活率和单位水体出苗量等几项主要生产性能参数的指标, 对照组均明显高于实验组 (P<0.05);(2) 在培育过程各期幼体蛋白质 葡萄糖 甘油三酯和总胆固醇的含量变化情况两组表现一致, 且实对照组均高于实验组 (3) 各期幼体的体长 体质量 生长速率 增重率和体长与体质量的相关关系等形态 学参数指标对照组和实验组相比略有差异, 但不明显 (P>0.05);(4) 幼体趋光性随着 幼体的发育呈上升态势, 从无节幼体发育至 PL2 达峰值, 对照组明显高于实验组 (P<0.01); 幼体盐度剧减和剧增应激试验的存活率对照组明显高于实验组 (P<0.01) 表明池养亲虾在养殖过程受其养殖环境的影响是负选择的作用, 严重地影响幼体的质量 3 第一代和第二代虾苗养殖的生产性能和经济效益的差异比较对一代和二代虾苗养殖的生产性能和经济效益进行调查分析, 结果如下 :(1) 一代虾苗和二代虾苗放养的时间不同, 前者集中在 9~10 月, 后者集中在 4~5 月 在相同养殖模式下放苗密度相近时, 二代虾苗养殖天数略长于一代虾苗 (P>0.05) 放养密度一代虾苗明显低于二代虾苗 (P<0.01) 生长速率, 一代虾苗明显优于二代虾苗, 土池养殖优于高位池养殖, 但都没显著程度 (P>0.05) 养殖到商品虾的存活率一代虾苗为 58.19%, 二代虾苗为 39.52%, 相差 1.47 倍 (P<0.01); 高位池养殖模式为 62.15%, 土池养殖模式为 35.54%, 相差 1.75 倍 (P<0.01) 每亩单产一代虾苗( kg) 高于二代虾苗 (652.5 kg) 但都没达显著程度 (P>0.05); 高位池养殖模式为 1200 kg, 土池养殖模式为 kg (2) 养殖经济效益每亩盈利, 一代虾苗为 万元, 二代虾苗为 0.49 万元, 相差 倍 ; 若消除商品虾价格因素的影响, 一代虾苗盈利 万元, 是二代虾苗 倍 表明一代虾苗养殖的生产性能和养殖效果都比二代虾苗好 关键词 : 凡纳滨对虾 ; 负选择 ; 原种亲虾 ; 池养亲虾 ; 生殖性能 ; 卵子质量 ; 幼体质 量 IX

16 Abstract Abstract Litopenaeus vannamei is the most important economic species in Chinese shrimp culture. This comparative study was conducted to investigate 1) the reproductive performance of original strain and that of pond-reared broodstocks, as well as the quality of egg and nauplius bred by them under same culture conditions and 2) the differences of production performance, the biochemical component, morphological and behavior characteristics, anti-stress ability between the first and second generation of nauplius, 3) the cultivation production performance and economic benefit of the first-gereration shrimp seed and the second-generation ones by using the methods of experimental ecology, morphology, biochemistry and mariculture technology. The results would provide theoretical guidance to a healthy, safe and sustainable development of aquaculture industry, and basic data for the study of the reproductive ecology and genetic breeding of crustaceans in aquaculture. The main results and conclusions were as follows: 1. Reproductive performance and the quality of posterity -- egg and nauplius, of original strain and pond-reared broodstocks The experimental subjects were original strain (control group) and cultured broodstocks (experimental group), BCI (body condition index), GSI(gonadosomatic index), HPI (Hepatosomatic index), reproductive performance parameters and tissue biochemical component were used as indicators in this study. The results were showed as follows: (1) GSI of control group was higher, very significantly (P<0.01), than experimental groups, while there were no significant differences on BCI and HPI (P>0.05); (2) During maturation-promoting, survival rates of the control groups were higher than that of experimental groups, significantly (P<0.05). Daily maturating rate and daily mating rate of control groups were higher than that of treatment group, but no differences with the increase of maturation-promoting processing in the two groups, up to its peak and then declined. Relative fecundity and daily yield of nauplius in control groups were higher than that in treatment groups, very significantly(p<0.01); both of them rose during maturation-promoting processing and reached a peak each; spawning rate and fertility rate were above 99% both in control groups and treatment groups, with non-significant differences (P>0.05), but there was X

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