第五节、囊泡与囊泡转运 ( vesicle and vesicular transport)

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1 2015 年春夏学期 细胞的物质运输 Substance transportation 柳华副教授 干细胞和组织工程中心

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3 2013 NOBEL PRIZE IN PHYSIOLOGY OR MEDICINE 因在细胞囊泡转运机制的新发现而获奖 诺贝尔奖委员会的评价 : 对我们理解细胞内部和外部发生运送物质 的时机和准确性产生了很大影响 如果没有上述运送机制, 细胞就会陷入混乱

4 感染与免疫缺陷性疾病 内分泌系统 / 代谢性疾病 ( 免疫细胞成熟障碍 抗原递呈障碍等等 ) ( 白化病 糖尿病 精神分裂症 帕金森病等等 ) 囊泡运输参与细胞多项重要的生命活动 如神经递质的释放及信息传递 激素分泌 天然 免疫等, 其运输障碍会导致多种细胞器发生缺陷 和细胞功能紊乱, 并与许多重大疾病密切相关 肿瘤发生发展

5 囊泡转运 (vesicular transport) 穿膜运输 (membrane transport)

6 第一节 囊泡与囊泡转运 ( vesicle and vesicular transport)

7 囊泡转运 (vesicular transport): 指囊泡以出芽的形式, 从一种细胞器膜产生 脱离后又定向地与另一种细胞器膜融合的过程 由囊泡转运所承载和介导的双向运输, 不仅是细胞内外物质交换和信号传递的重要途径, 也是细胞物质定向运输的基本形式

8 知识要点 囊泡转运的特点 已知的囊泡类型 囊泡的形成过程 囊泡转运的方向

9 囊泡转运的特点 方向性 ; 流动性 ; 芽生 ; 特异性 ; 保守性 ; 高度有序 ; 精密控制 是真核细胞特有的一种细胞物质内外转运形式

10 囊泡 (vesicle): 真核细胞中常见的膜泡结构 各种囊泡, 均由细胞器膜外凸或内凹芽生而成 囊泡的产生形成过程, 是一个主动的自我装配过程, 并总是伴随着物质的转运

11 囊泡的主要类型 承担细胞内物质定向运输的囊泡类型至少有 10 种以上 目前了解较多的类型主要有以下三种 : 网格蛋白有被囊泡 (clathrin-coated vesicle) COPI 有被囊泡 (COP I-coated vesicle) COPII 有被囊泡 (COP II-coated vesicle)

12 网格蛋白有被小泡 (Clathrin-coated vesicle) 可产生于高尔基复合体或细胞膜 介导 Golgi endosome(and/or lysosome) outside cytoplasm Clathrin 网格蛋白 Adaptin 衔接蛋白 Vesicular membrane 囊膜 GTP 形态结构 Dynamin

13 网格蛋白 (Clathrin) Clathrin triskelion and its formed three structures Nature 432, (2 December 2004)

14 网格蛋白有被小泡的形成 衣被组装及货运选择 有被小窝形成 有被小泡形成 脱衣被

15 网格蛋白有被小泡的运输 Transport vesicles bud off from one compartment and fuse with another

16 COPI 有被囊泡 (COP I-coated vesicle) COP:Coatmer-protein subunits 产生于高尔基体, 主要负责内质网逃逸蛋白的捕捉 回收转运以及高尔基体膜内 蛋白的逆向转移 ; 也能间接进行内质网到高尔基体的顺向转移

17 COPI 有被囊泡的形成 COPI coatmer ARF1 receptor The key steps in the formation of COPI-coated vesicles.

18 COPII 有被囊泡 (COP II-coated vesicle) 产生于内质网, 主要介导内质网到高尔基体的物质运送

19 COPII 有被囊泡的形成 The key steps in the formation of COPII-coated vesicles.

20 三种囊泡的异同点 网格蛋白有被囊泡 COPI 有被囊泡 COPII 有被囊泡 起源细胞膜 高尔基体高尔基体 ( 内质网 ) 内质网 方向细胞膜高尔基体高尔基体内质网高尔基体内质网 网格蛋白 COPI(6 种亚基 ) COPII(5 种亚基 ) 成分 衔接蛋白 ARF 蛋白 Sar 蛋白 发动蛋白 形成过程 芽生, 需 ATP/GTP 参与聚合和解聚

21 How vesicles travel in cells? Vesicles travel cellular highways

22 The intracellular compartments involved in biosynthetic-secretory and endocytic pathway

23 第二节 穿膜运输 (membrane transport)

24 根据运输分子大小分类 小分子 / 离子运输 一 简单扩散 二 易化扩散 大分子 / 颗粒物质运输 一 胞吞 二 胞吐 三 主动运输 四 离子通道扩散

25 根据是否耗能分类 被动运输 passive transport 一 简单扩散二 易化扩散三 离子通道 主动运输 active transport 一 ATP 泵二 协同运输

26 简单 / 被动扩散 (simple/passive diffusion) 依赖于 1) 溶质必须能透过膜 ; 2) 膜两侧存在浓度差 ; 自由扩散 : 脂溶性分子 ( 如醇 苯 甾体类激素 ) 和小的不带电荷的分子 (O2 CO2 NO 和 H2O) 等

27 Factors Affecting the Rate of Diffusion

28 膜运输蛋白 (Membrane transport protein) 载体蛋白 (Carrier protein) 介导 主动运输 易化扩散 ( 被动运输 ) 通道蛋白 (Channel protein) 介导 被动运输

29 易化扩散 / 被动运输 (facilitated diffusion/passive transport) 易化扩散的条件 : 膜两边存在浓度差 ; 载体蛋白的存在 非脂溶性 ( 亲水性 ) 分子 如葡萄糖 氨基酸 核苷 酸以及细胞代谢物等

30 易化扩散 Facilitated Diffusion

31 主动运输 (active transport) 主动运输是载体蛋白介导的小分子物质逆电化学梯度, 由低浓度一侧向 高浓度一侧进行的穿膜转运方式, 需要耗能和膜上特异性载体蛋白介导 主动运输可分为 ATP 驱动泵 ( 由 ATP 直接提供能量 ) 和协同运输 (ATP 间接提供能量 ) 两种类型 对向运输 顺浓度梯度 ATP 水解 光吸收 共运输

32 ATP 驱动泵 (ATP pump) A. P- 型离子泵 ; B. V- 型质子泵 ;C. F- 型质子泵 ;D. ABC 转运体 (P-class ion pump) (V/F-class proton pump) (ABC transports)

33 以 Na + -K + 泵 (Na + -K + pump) 为例 (P- 型离子泵 ) 水解 1 个 ATP, 输出 3 个 Na +, 转入 2 个 K +

34 协同运输 协同运输 (co-transport) 是一类由 Na + - K + 泵 ( 或 H + 泵 ) 与载体蛋白协同作用, 间接消耗 ATP 所完成的主动运输方式 根据溶质分子运输方向与顺电化学梯度转移的离子 (Na + 或 H + ) 方向的关系, 又可分为共运输 (symport) 与对向运输 (antiport)

35 小肠上皮细胞共转运葡萄糖入血示意图 Na + - 葡萄糖协同运输蛋白 共转运 : 物质的逆浓度梯度穿膜运输与所依赖的另一物质的顺浓度梯度的穿膜运输两者方向相同 共运输载体蛋白专一地输入某一种糖 ( 如葡萄糖 果糖 甘露糖 半乳糖 ) 或氨基酸

36 离子通道 (ion channel) 离子通道的特点 1 通道蛋白介导的被动运输, 通道是双向的 2 对被转运离子的大小和所带电荷都有高度的选择性 3 转运速率高 4 多数离子通道不持续开放, 离子通道开放受 闸门 控制

37 离子通道的类型 配体门控通道 电压门控通道 应力激活通道

38 (1) 配体门控通道 配体门控通道 (ligand-gated channel) 与细胞外的特定配体 (ligand) 结合后, 发生构象改变, 结果将 门 打开, 允许某种离子快速穿膜扩散 乙酰胆碱受体 (acetylcholine receptor,nachr) 是典型的配体门控通道 其他如 ɣ 氨基丁酸受体 甘氨酸受体 5- 羟色氨受体及谷氨酸门控阴离子通道等

39 M2 亮氨酸残基 纽扣结构 乙酰胆碱受体模式图

40 (2) 电压门控通道 膜电位的改变是控制电压门控通道 (voltage-gated channel) 开放与关闭的直接因素 电压门控通道主要存在于神经元 肌细胞及腺上皮细胞等可兴奋细胞, 包括钾通道 钙通道 钠通道和氯通道

41 (3) 应力激活通道 : 应力激活通道 (stress-activated channel) 是通道蛋白感受应力而改变构象, 开启通道使 门 打开, 离子通过亲水通道进入细胞, 引起膜电位变化, 产生电信号 内耳听觉毛细胞顶部的听毛即具有应力激活通道

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43 水通道 (aquaporin, AQP) 水通道的分类 :11 个成员 (AQP0~AQP10) 水通道蛋白的结构 : AQP1 的结构比较清楚 Peter Agre American physician, professor, and molecular biologist who was awarded the 2003 Nobel Prize in Chemistry for his discovery of aquaporins.

44 Asn-Pro-Ala (NPA) 水分子的转运不消耗能量, 也不受门控机制调控, 其通过水通道的方向由两侧的渗透压决定, 低的一侧流向高的一侧

45 肾性水肿 星形细胞胶质瘤 脑水肿

46 大分子和颗粒穿膜运输 / 小泡运输 胞吞作用 (endocytosis): 细胞摄入大分子或 颗粒物质的过程 胞吐作用 (exocytosis): 细胞排出大分子或颗 粒物质的过程 蛋白质 多核苷酸 多糖 属主动转运

47 胞饮作用 (pinocytosis) 胞吞作用 吞噬作用 (phagocytosis) 受体介导的胞吞作用 (receptor-mediated endocytosis)

48 胞饮作用 细胞非特异性吞入细胞外液或极小的颗粒物质

49 吞噬作用 细胞内吞较大的固体颗粒物质, 如细菌 细胞碎片等, 称为吞噬作用

50 受体介导的胞吞作用 细胞通过受体的介导选择性高效摄取细胞外特定大分子物质 的过程

51 胞吐作用 (exocytosis) 有待排出胞外的物质以小泡的形式从细胞内逐步移到质膜下方并与质膜 融合, 将物质排出细胞外的过程 包括连续性分泌和受调分泌

52 胞吐作用的电镜图

53 小结 三种有被囊泡的组成 形成过程和功能 小分子运输的类型

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