中国中西医结合杂志年月第卷第期 $ -.!'4 )!3(4 )(' <! ' '2'(' ( )(' '('! ( 4 '! ( '!4! (! 4!!!3)! ( 6!42 %)' (! + (!& (! '! ( ' '2'(' 4 (!,"0,0 < ( 2 6! ' )!42.' (

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区涓景
5 years ago
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1 味酸味药性提取物影响黑素合成的实验研究张理平梁娟陈彬王英豪摘要目的证实酸味药性对黑素的合成具有抑制作用方法以碱提酸沉醇提水提种方法提取味酸味有效成分分为 $ -. 个浓度用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法检测各提取物对酪氨酸酶活性的影响比较种不同提取物不同浓度酪氨酸酶活性抑制率分别与熊果苷水溶液 && -. 的差异结果味酸味山茱萸山楂乌梅五味子木瓜虎杖牛膝地榆酸枣仁墨旱莲覆盆子枳实枳壳绿萼梅枳蓂子桑椹石榴皮白芍金樱子马齿苋诃子五倍子碱提物除墨旱莲外余味对酪氨酸酶均有不同程度的抑制作用其中乌梅在 -. 时抑制率最高 ##/" ""#0 枳实在 $ -. 时抑制率最低 $0 醇提物除墨旱莲无抑制作用外其余味均可抑制酪氨酸酶活性以枳蓂子在 -. 时抑制率最高,",0 枳壳在 $ -. 时抑制率最低 "$ 0 水提物均有抑制酪氨酸酶活性的作用其中桑椹在 -. 时抑制率最高 / $0 酸枣仁在 $ -. 时抑制率最低 #0 与 && -. 熊果苷水溶液比较乌梅五味子五倍子金樱子覆盆子木瓜马齿苋桑椹牛膝石榴皮碱提物乌梅五倍子石榴皮枳蓂子山楂牛膝醇提物及木瓜覆盆子桑葚水提物在 -. 浓度时酪氨酸酶抑制率明显升高差异有统计学意义 1 1 与 && -. 熊果苷水溶液比较木瓜碱提物及乌梅醇提物在 -. 时酪氨酸酶抑制率明显升高差异有统计学意义 1 1 结论具有酸味药性的一类均具有抑制黑素合成的作用其机制与抑制酪氨酸酶活性有关关键词药性理论酸味酪氨酸酶黑素! ' (! '!)(! 2 %3(4 )( 5' '!! 6!42 )' (! %3!4' &! ( ( ' ' % :' 9 ;'!! 1 4 & ) 7 ' '!!! ') '!4 '( 7 7 ' *! 4(&! ( 1! ' (4') ' 7 (!4 ' 4! 6! ( 6 '( 7 ' ' : +2!)('! ) '4& (! ' '2'( 4!!)( '!!!42 )' ( (! &! ' (! '!( )('! ' 4! '! ( ' '!!!42 )' ( (! <!4!!3(4 )(! 2 '!3(4 )(' )' 4!)' '( (' )!3(4 )(' < (!4!3(4 )(' 4!!)('! < ') < (! '!! ' ( $ -. 7! '!'4!!)( )(' '('! ( 4 '! <!4!! (!)(! 7 ' &7 4 &( 4 '!*+1!! 3' ('!'4 ' '2'(' 4 (! )(' '('! ( 4 '! <!4! 4!!)('! ) & 4! <'( ' '2'(' 4 (! && ('! 7(! ' '!!!42 )' ( (! ' )7! ')' ' 4 (! 7 ' (' ' 4 7& 47'( ) ' 4 '! '! &!! '! ' 5!!! 7(4' ') 6 7(( ) 4 (! :'! ( ( 7' 42 ')' '.!&! 8' ' ' '! 6!42 %)' (! 27!2!44 '&& (74! 2'((!4 4! 72& (74! 2'((!4 4! &7&! 4 6! ' )!42.' 47)(7 4' 1 &! 4 (! ' < '(!! 4 (! ' ( ') 3 1 4(7 )!4 )!.!4&' ' )!27!( 7 ) '! ' '!'4 '!!3(4 )(' <! ' '2'(' ( )(' '('! ( 4 '! ( '!4! (! 4!!!3)! ( 6!42 %)' (! + (!& (! '! ( ' '2'(' 4 (! ##/"0 ""#0 < ( 2 4 7& 47'( ( -. < '! (! <! ( ' '2'(' 4 (! 0 $0 < ( 2 '&& (74! 2'((!4 4! ( 基金项目福建省自然科学基金资助项目作者单位福建中医药大学药学院福州南平建瓯市妇幼保健院儿科福建通讯作者张理平!" #$%& ' ' ' $# (& ') & *+,$$- $#

2 中国中西医结合杂志年月第卷第期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色素增多性皮肤病是皮肤科疑难病证迄今无治疗良药西医采用维甲酸曲酸等酸性药中医常用乌梅山楂等含酸性成分为此笔者提出酸性成分对黑素合成存在一定影响的假说前期研究已初步证实假说的科学性结合黄褐斑病因多为肝郁治疗多用酸药中医学认为酸入肝现代研究亦证实酸味药性主要含有机酸并根据黑素产生机理从权威学, 专著标明药性为酸味的中筛选常用药味用种不同提取方法体外分别测定提取物对黑素合成催化酶酪氨酸酶活性的影响探讨含酸味药性的一类是否具有祛斑增白的作用为高效安全价廉天然祛斑药物的筛选发现奠定基础材料与方法药材查阅中华人民共和国药典中华本草学第, 版 / 大辞典临床学 $ 新编辞典, 选出上述 $ 种文献中至少种记载性味为酸味的常用味分别为山茱萸山楂乌梅五味子木瓜虎杖牛膝地榆酸枣仁墨旱莲覆盆子枳实枳壳绿萼梅枳蓂子桑椹石榴皮白芍金樱子马齿苋诃子五倍子药物均购自福建中医药大学国医堂门诊部仪器 * 粉碎机温岭市林大机械有限公司超声微波清洗器昆山市超声仪器有限公司 " 型紫外分光光度计北京瑞利分析仪器公司 / 电子天平上海精密科学仪器有限公司 *.# : 低速离心机上海安亭科学仪器厂 *69"/ 型电热恒温鼓风干燥箱上海精宏实验设备有限公司 66/ 型数显恒温水浴锅国华电器有限公司试剂酪氨酸酶 ' & 公司批号 $ *. 多巴.* 西安润泽生物技术有限公司批号, 熊果苷江苏鑫源生化科技有限公司批号 $ 碳酸氢钠无水乙醇浓盐酸均为分析纯试剂配制磷酸盐缓冲液 1: 6 =$# 磷酸二氢钠 $ 氢氧化钠 " 溶于 &. 双蒸水中酪氨酸酶用时以 1: 稀释为 -&. 的溶液 *. 多巴以 1: 稀释为 -. 的溶液 / 有效成分的提取 / 碱提酸沉法方法参考文献 # 将味分别粉碎各称重加 0 碳酸氢钠溶液浸泡 &' 超声提取过滤将药渣再次提取过滤合并滤液在滤液中加适量浓盐酸调 6 至得沉淀将沉淀置 $ 烘箱低温烘干 / 冰箱保存备用 / 醇提法方法参考文献 " 将味药物分别粉碎各称重加 "0 乙醇浸泡周过滤将药渣再次提取过滤合并滤液离心 &' 后取上清液置沸水浴中挥尽乙醇浓缩成膏 / 冰箱保存备用 / 水提法将味药物分别粉碎各称重置烧杯中加蒸馏水煮沸 &' 后冷却过滤将药渣再次提取过滤合并滤液置沸水浴上浓缩成膏 / 冰箱保存备用以上种方法提取物临用时以蒸馏水溶解设高 -. 中 -. 低 $ -. 个浓度酪氨酸酶活性抑制率检测方法参考文献

3 取不同浓度提取物 &. 加入 1: 后与蘑菇酪氨酸酶 &. 混合置 # 水浴中温育 &' 后加入 *. 多巴 &. 反应 &' 后立即于分光光度计 /, & 测定吸光度值另设个浓度 && -. 熊果苷水溶液为阳性药物对照每次实验重复次取平均值酪氨酸酶抑制率按下式计算酪氨酸酶抑制率 0 2 ) 式中为未加的加酶混合液 2 为未加和酶的混合液 ) 为加和酶的混合液为加而未加酶的混合液比较种不同提取物不同浓度酪氨酸酶活性抑制率与熊果苷水溶液的差异 $ 统计学方法实验数据采用 1 $ 统计软件计量资料均以 3 表示抑制率者符合正态分布采用 ( 检验若不能符合正态分布采用非参数检验 1 表示差异有统计学意义结果熊果苷水溶液酪氨酸酶抑制率结果熊果苷 && -. 浓度抑制率分别为 /# 0, 0 0 味碱提物与熊果苷水溶液酪氨酸酶抑制率比较表味酸味碱提物除墨旱莲外均对酪氨酸酶有不同程度的抑制作用其中乌梅在 -. 时抑制率最高 ##/" ""#0 枳实在 $ -. 时抑制率最低 $0 五味子五倍子枳蓂子诃子 / 味具有 -. 浓度时抑制 $ -. 浓度时激活的作用虎杖酸枣仁绿梅花地榆白芍味表现为 $ -. 浓度时抑制及 -. 浓度时激活作用碱提物在 -. 时抑制率高于 && -. 熊果苷的有味分别是乌梅五味子覆盆子桑椹牛膝马齿苋石榴皮木瓜五倍子诃子金樱子其中乌梅五味子五倍子金樱子覆盆子木瓜马齿苋桑椹牛膝石榴皮差异具有统计学意义 1 1 碱提物在 -. 时抑制率高于 && -. 熊果苷的有 # 味分别是乌梅覆盆子牛膝山茱萸马齿苋石榴皮木瓜金樱子其中木瓜差异有统计学意义 1 碱提物在 $ -. 时抑制率高于 && -. 熊果苷的有 $ 味分别是乌梅山楂覆盆子桑葚牛膝山茱萸马齿苋白芍绿梅花石榴皮木瓜枳壳金樱子地榆虎杖酸枣仁但差异均无统计学意义 1 > 表味碱提物抑制率比较 3 = 乌梅 ## /" " "# $ /, # / 五味子,$ //,, # #" $ "$ /, #, 山楂 /# # / " / $ # # $/ 覆盆子 #$ / / / # $ #/ # # " 桑椹 $ " $ # " $, " # " 牛膝 " $ #, / # " 山茱萸 / / $" /, # $ 马齿苋 $/,,, $ $ $ #, / 白芍 # # #, / / "" / # 绿梅花 $,," "$ $ # $ /,/ $ " 石榴皮 $ #, # #$ $ / #/ / $" 木瓜 # " # ", /" $ ## / $# 墨旱莲 $ /, " $ " # 五倍子 $ / $/, /# $ ## / 枳蓂子 / #" $, / # # 诃子, #, / # 枳壳 " $ /,$, / $ 枳实, " / /, $ 金樱子 $# $ / $ /$ $ / " " 地榆 / $" " / # $ 虎杖 # $ " $ / 酸枣仁 # $$, # "$ $ / 注味碱提物在 -. 浓度时与 && -. 熊果苷抑制率比较 1 1 味碱提物在 -. 浓度时与 && -. 熊果苷抑制率比较 1 味醇提物与熊果苷水溶液酪氨酸酶抑制率比较表醇提物中除墨旱莲无抑制作用外余味均可抑制酪氨酸酶活性以枳蓂子在 -. 时抑制率最高,", 0 枳壳在 $ -. 时抑制率最低 "$ 0 山茱萸马齿苋枳蓂子酸枣仁绿梅花味具有在 -. 时抑制在 $ -. 时激活的作用五味子覆盆子桑椹枳实虎杖味表现为在 $ -. 时抑制在 -. 时激活作用醇提物在 -. 时高于 && -. 熊果苷抑制率的有, 味分别是乌梅山楂牛膝五倍子枳蓂子地榆石榴皮其中乌梅五倍子石榴皮枳蓂子山楂牛膝差异具有统计学意义 1 1 醇提物在 -. 时高于 && -. 熊果苷抑制率的有 # 味分别是乌梅五味子木瓜牛膝五倍子诃子地榆石榴皮其中乌梅差异有统计学意义 1 醇提物在 $ -. 时高于 && -. 熊果苷抑制率的有味分别是乌梅五味子山楂覆盆子桑葚牛膝白芍石榴皮木瓜五倍子诃子枳实金樱子地榆虎杖但差异均无统计学意义 1 >

4 中国中西医结合杂志年月第卷第期表味醇提物抑制率比较 3 = 表味水提物抑制率 3 = 乌梅, ", $" 五味子 "#, / / #/ /, $ # 山楂, /,, / $ /, #,, 覆盆子 $, / / $ /,# $, 桑椹,", / / "" # # / 牛膝 $ / $ $ $ 山茱萸,, / " " / #, # 马齿苋 $ $, $, "" / # 白芍 " $ # #, / / 绿梅花 / $ /, # " /" 石榴皮 $, ",# ## # $ 木瓜, / " $ # $ 墨旱莲 $,, #$ / $ / 五倍子 $ # $# /# / # / / 枳蓂子, ", $ # / "# /, 诃子 /, # / # " "$ " 枳壳 "," # " " $ 枳实 # ",,, $$, $ 金樱子 / $ # /" " " 地榆 / # / ", $,$ /" 虎杖,/ / $ # /,$ $ 酸枣仁, " $ " $ # / $, / 注味醇提物在 -. 浓度时与 && -. 熊果苷抑制率比较 1 1 味醇提物在 -. 浓度时与 && -. 熊果苷抑制率比较 1 / 味水提物抑制率比较表味水提物均有抑制酪氨酸酶活性的作用其中桑椹在 -. 时抑制率最高 / $0 酸枣仁在 $ -. 抑制率最低 #0 五味子墨旱莲具有在 -. 时抑制在 $ -. 时激活的作用酸枣仁地榆表现为在 $ -. 时抑制在 -. 时激活作用其余在高中低浓度时均有抑制作用水提物在 -. 时高于 && -. 熊果苷抑制率的有味分别是木瓜覆盆子桑葚差异均具有统计学意义 1 水提物在 -. 时高于 && -. 熊果苷抑制率的有味分别是乌梅山楂覆盆子桑葚牛膝马齿苋石榴皮木瓜五倍子枳蓂子金樱子地榆虎杖但差异均无统计学意义 1 > 水提物在 $ -. 时高于 && -. 熊果苷抑制率的有 " 味除五味子墨旱莲酸枣仁外但差异均无统计学意义 1 > 讨论酸味是药性理论五味学说的重要组成部分传统认为其可收敛固涩主治久咳虚喘及各种滑脱不禁之症随着人们用药知识的不断丰富乌梅,, $ $ $/ "$ # 五味子 ", / # $ /, / $$ 山楂 ## $ ", $ / 覆盆子, / / / /, ", 桑椹 / $ / ",, "/ 牛膝 / # " / # $ #, / 山茱萸 $ /, /# $ #$ / $ "" 马齿苋, #/ " " # " " 白芍 / $/ $ $,#, /, 绿梅花 / " $ / " / "# 石榴皮 " $# / $" $ # / / $ 木瓜,$ $/ $" #, " 墨旱莲 $ / # /# " $ " 五倍子 / # / " / /# " /, / 枳蓂子 # # ", /,, 诃子 /, $ $ "# " / 枳壳 /,, $, " / $/ 枳实 " "$ / " " /, $ 金樱子 # /" $ $ # #/ 地榆 ## /, / / / /# " 虎杖 / " / #, #, 酸枣仁 # ", # 注味醇提物在 -. 浓度时与 && -. 熊果苷抑制率比较 1 以及性味学说本身的局限性导致仅用传统药性来概括药物的作用已显得力不从心酸味药性正是如此如传统理论没有酸能祛斑增白的论述但神农本草经中记载酸味代表药乌梅有去青黑痣的作用不少著名的祛斑方剂中也含有酸味如六味地黄丸和金匮肾气丸中的山茱萸逍遥丸中的白芍等等而本研究的结果则进一步证实味酸味碱醇水提取物除墨旱莲碱醇提物外均可抑制黑素产生的催化酶酪氨酸酶的活性其中以高浓度乌梅碱提物抑制率最高 ##/" ""#0 提示含酸味药性的一类对黑素产生的抑制作用具有普遍性而碱提物的抑制率最高是因为该法提取物的主要成分为有机酸前期研究已证实酸性成分具有抑制酪氨酸酶活性的作用故与既往研究结果相吻合而醇提与水提因提出物多成分复杂故抑制率略低此外实验结果还显示种提取方法中均有部分对黑素的调控具有双向性提示某些酸味对黑素的合成具有双向调节作用适当调控其用量溶度可能亦可用于色素减少性疾病的治疗这种双向调节的机制是不同成分的影响还是同一成分的双向作用有待今后进一步分离研究总之酸味药性具有抑制黑素合成美白祛斑

5 的作用是一类具有进一步深入研究价值的美白物质而这一重要作用古文献从未从理论上进行阐述导致传统酸味药性的功能范围与现代临床应用实验研究存在不一致性和滞后性这是否与性味学说本身口尝身受之不足以及千百年来疾病谱的扩大以及经济水平的提高人们对影响容貌的色素增多性疾病关注度的上升有关有待深入探讨今后若能进一步从多方面研究阐明酸味药性美白祛斑的作用机制不仅能为传统药性理论的完善提供科学依据并可缩小高效祛斑的筛选范围有利于新的有效复方研究的开展为治疗黑素增多性皮肤病天然药物的发现和临床疗效的提高奠定理论基础和提供创新性思维参考文献陈翠华浅议性味与现代药学的联系河南中医 # #$,$ 国家药典委员会中华人民共和国药典第一部北京中国医药科技出版社,,/ 国家中医药管理局中华本草编委会中华本草上海科学技术出版社 """ #$ " / 高学敏学第七版北京中国中医药出版社 / 南京中医药大学大辞典上海上海科学技术出版社 $ $, $$ $ 张廷模邓家刚临床学上海上海科学技术出版社 $ $, 王本祥新编大辞典天津天津科学技术出版社 "", # 肖崇厚化学上海上海科学技术出版社 ""# /, /# " 王媚吴皓有机酸类成分的提取分离测定方法研究进展南京中医药大学学报自然科学版 / " 杨柳依曹煜魏羽佳等 / 种提取成分对酪氨酸酶活性的抑制作用中华皮肤科杂志 $ /, # 张理平张海燕李孝栋等 # 味酸性成分提取物影响黑素合成的实验研究中华中医药杂志 " / // // 收稿, $ 修回 " 征订启事欢迎订阅年中国中西医结合杂志中国中西医结合杂志是由中国科学技术协会主管中国中西医结合学会和中国中医科学院主办的中西医结合综合性学术期刊 "# 年创刊由中国科学院院士陈可冀担任总编辑设有述评专家论坛专题笔谈临床论著基础研究临床报道综述学术探讨思路与方法学临床试验方法学病例报告中医英译会议纪要等栏目本刊多次获国家科委中宣部新闻出版署及国家中医药管理局颁发的全国优秀期刊奖年被新闻出版署评为双效期刊列入中国期刊方阵年连续年被评为百种中国杰出学术期刊次获中国科协择优支持基础性和高科技学术期刊专项资助 / 次获国家自然科学基金重点学术期刊专项基金资助 / 次获中国科协精品科技期刊工程项目期刊并被多种国内外知名检索系统收录如中国科学引文数据库中国生物医学文献数据库美国医学索引 %*. % 美国化学文摘俄罗斯文摘杂志日本科学技术文献速报美国乌利希期刊指南 4') 1* 波兰哥白尼索引英国国际农业与生物科学研究中心 : 6+ 西太平洋地区医学索引 1 等为中国科技论文统计源期刊中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊被编入中文核心期刊要目总览每年影响因子及总被引频次在中医药类期刊中均名列前茅中国中西医结合杂志为大 $ 开本月刊 # 页铜版纸印刷彩色插图国内定价元 - 期全年定价元国际标准刊号, 国内统一刊号,#,- 国内邮发代号国外代号 $/ 国内外公开发行在各地邮局均可订阅也可直接汇款至本社邮购地址北京市海淀区西苑操场号中国中西医结合杂志社邮政编码 " 电话 $##$#, $#,$/,$#,$/# 传真 $#,/"% & ' ) '& ) '&) 网址 (( --<<<) '&)

中国科学技术大学材料工程 05 校外调剂 0870 化学工程吉林大学应用化学 05 校外调剂 0870 化学工程四川大学制药

中国科学技术大学材料工程 05 校外调剂 0870 化学工程吉林大学应用化学 05 校外调剂 0870 化学工程四川大学制药 045700000787 东北大学 07030 分析化学 05 校外调剂 07030 无机化学 68 66 94 04 34 063700000004 沈阳药科大学 07030 分析化学 04 校内跨专业调剂 070303 有机化学 73 56 9 00 30 0007008903 北京大学 0780Z 药学类 05 校外调剂 070303 有机化学 75 67 09 8 4 085750830 苏州大学

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