卷 期 草 业 科 学 夏枯草提取物的抗氧化活性 "##$"% 张淼 董宝婧 苗芳 周乐 & 西北农林科技大学生命科学学院 陕西杨凌 # 西北农林科技大学农学院 陕西杨凌 # & 西北农林科技大学理学院 陕西杨凌 # 摘要 对夏枯草 不同溶剂提取物体外抗氧化活性进行评价 为进一步开发利用夏枯草提供参考 采用 #' 乙醇超声波提取 然后用等体积的乙酸乙酯 正丁醇和水萃取 得到乙酸乙酯 正丁醇和水提取物 并以 为对照 研究不同溶剂提取物的抗氧化活性 结果表明 夏枯草提取物具有良好的抗氧化性 不同溶剂提取物及 清除 的能力高低次序为乙酸乙酯提取物 正丁醇提取物 水提物 清除 的能力高低次序为 乙酸乙酯提取物 正丁醇提取物 水提物 清除 $ 的能力高低次序为乙酸乙酯提取物 水提物 正丁醇提取物 还原力高低次序为 乙酸乙酯提取物 正丁醇提取物 水提物 夏枯草乙酸乙酯提取物具有较强的抗氧化活性 关键词 夏枯草 抗氧化活性 自由基中图分类号 " ()# 文献标识码 文章编号 *)*"##*( 自由基可攻击生命大分子造成组织损伤 从而导致疾病与衰老 所以 寻找适当的外源性抗氧化剂 清除体内自由基 对治疗疾病和保护人体健康大有裨益 近年来 研发高效 低毒的天然抗氧化剂和 抗衰老保健品 已成为新的研究热点之一 夏枯草 为多年生草本 属唇形科夏枯草属 是我国传统中药之一 以干燥果穗 入药 历代草本记载 夏枯草具有清火 明目 散 & 结 消肿之功效 现代医学认为 夏枯草具有抗菌消炎 抗病毒 抗癌活 增强免疫 抗衰老 降血压 降 " 血糖及活血化瘀等功效 而以上药理活性与夏枯草的抗氧化活性是密切相关的 夏枯草的有效成分包括甾醇类 三萜类 黄酮类和多糖等 黄酮类物质是夏枯草的重要活性成分 有降血脂 提高免疫力 ( ) 保护心血管系统等功效 +,-./ 等研究发现 由体积分数 "' 的乙醇提取的夏枯草黄酮具有良 # 好的抗氧化活性 熊双丽和李安林认为 夏枯草总黄酮的自由基清除活性接近 0 强于 并推测该黄酮可能属于黄烷酮和双氢黄酮醇类 1 和 / % 的研究表明 夏枯草水提取物有很强的体外抗 氧化活性 并且能够很好地抑制大鼠体内器官的脂质过氧化 迄今关于夏枯草中黄酮等有效物质药理活性与提取工艺研究甚多 而对夏枯草抗氧化活性的探讨报道仍然较少 而且评价体系较单一 本研究对夏枯草不同溶剂提取物对 和 $ 的清除能力和还原能力进行分析 旨在为夏枯草的合理开发利用以及寻找新的抗氧化药源提供理论依据 材料与方法 试验材料 年 # 月底 在秦岭采集夏枯草全草 阴干后 粉碎 装袋备用 夏枯草不同溶剂提取物的制备 取夏枯草全草粗粉 "/ 以 #' 乙醇 料液比为 "( 条件下进行超声提取, 提取 & 次 合并提取液 减压浓缩 加石油醚去除叶绿素后 依次用等体积的乙酸乙酯 正丁醇和水萃取 每级重复 & 次 得到乙酸乙酯 正丁醇和水提取物 夏枯草不同溶剂提取物抗氧化活性测定 抗氧化活性测定所用的 )* 二叔丁基 *"* 甲基苯酚 购于上海阿拉丁试剂有限公司 酚嗪硫酸甲酯 收稿日期 ** 接受日期 **& 基金项目 国家自然科学基金项目 &##"("&#&)(&#&)) 作者简介 张淼 %)* 女 河北保定人 在读硕士生 主要从事药用植物学研究 * -1 #&"%#)&0 通信作者 苗芳 * -1 1- -./ )&0
"#% * 二苯基 ** 苦苯肼自由基 购于美国 1/ - 公司 氮蓝四唑 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 购于国药集团化学试剂有限公司 其他试剂均为国产分析纯 清除 活性测定参照 -213 230 等 的方法 清除 活性测定参照 451 等的方法 清除 $ 参照 678 等的方法 还原力测定 参照 +,-./ 等的方法 以清除率 对样品浓度进行回归处理 计算出提取物的半数抑制浓度 ( 数值 半数抑制浓度是当自由基被清除 (' 时的提取物浓度 即 ( 越小 提取物清除自由基的能力越强 数据处理 采用 & 和 905 软件对数据进行处理分析 结果与分析 夏枯草不同溶剂提取物对 的清除活性 夏枯草不同溶剂提取物对 均有清除能力 且在一定浓度范围内清除能力与浓度呈正相关 当提取物浓度达到一定值后 随着浓度的增加 对 的清除活性增加逐渐缓慢或趋于平缓 夏枯草 & 种溶剂提取物相比较 乙酸乙酯提取物对 的清除活性最强 (:(" / $ 强于阳性对照 提取物 (:& / $ 正丁醇提取物的清除能力弱于乙酸乙酯提取物 (: " / $ 但也强于阳性对照 提取物 水提物清除活性 (:" / $ 略弱于 提取物 图 夏枯草 & 种溶剂提取物及阳性对照 清除 的能力由强到弱依次为乙酸乙酯提取物 正丁醇提取物 提取物 水提取物 夏枯草不同溶剂提取物对 的清除活性 夏枯草不同溶剂提取物都具有清除 图 夏枯草不同溶剂提取物对 清除活性 "# # $$%&' '" "#$" $ $ &' 注 不同小写字母表示同一提取物不同浓度间差异显著 ( 下同 ;5 1 525.; 520-755;527 2;,57-559;2-0;7, 71/.1 10-.; 1 525.05-./ 1 525.;0.05.;2-;1.7-;( 5 5,57-5 5 图 夏枯草不同溶剂提取物对 的清除活性 % & % "# # $$%&' '" "#$" $ $ &'
草 业 科 学 第 卷 期 "# 的活性 且清除能力与浓度呈正相关 在正丁醇提取物 乙酸乙酯提取物和 提取物中 乙酸乙酯提取物的清除能力最强 在浓度为 ) / $ 时清除活性就已达到 %%&#' 正丁醇提取物活性稍差于乙酸乙酯提取物 在浓度为 # / $ 时清除活性达到 %("' 图 而水提物对 的清除活性较弱 在 &# / $ 范围内清除活性不及 ' 图 夏枯草 & 种溶剂提取物及阳性对照 清除 的活性由强到弱依次为 提取 夏枯草不同溶剂提取物的还原力 夏枯草不同溶剂提取物均具有还原力 且与提取物浓度呈剂量依赖关系 & 种提取物相比较 乙酸乙酯提取物的还原能力最强 正丁醇提取物次之 水提物较差 各提取物还原力均低于阳性对照 提取物 夏枯草 & 种溶剂提取物及阳性对照 提取物还原力由强到弱依次为 提取物 乙酸乙酯提取物 正丁醇提取物 水提物 图 " 物 (:)) / $ 乙酸乙酯提取物 (: ") / $ 正丁醇提取物 ( :(&% / $ 水提物 (:"" / $ 夏枯草不同溶剂提取物对 $ 的清除活性 夏枯草不同溶剂提取物对 $ 均有清除作用 且清除能力在一定范围内与浓度呈正相关 在提取物浓度为 & / $ 时 乙酸乙酯提取物的清除能力最强 其次是水提物 它们的清除活性分别为 #((' 和 (%&' 均高于阳性对照 提取物 而正丁醇提取物对 $ 清除活性最低 但其 清除率有超过对照 提取物的趋势 图 & 夏枯草 & 种溶剂提取物及阳性对照 提取物清除 $ 活性由强到弱依次为乙酸乙酯提取物 (: % / $ 水提物 (:#& / $ 提取物 (:% / $ 正丁醇提取物 (:" / $ 图 夏枯草不同溶剂提取物的还原力 (" # &)" &' '" "#$ " $ $ &' 讨论本研究采用 " 种评价方法对夏枯草不同溶剂提取物抗氧化活性进行了分析 结果表明 夏枯草提取物具有良好的抗氧化活性 但由于抗氧化反应机制不同 不同评价方法中各提取物可能表现出不同 & 的抗氧化活性 等采用多方法体系对 " 种草药提取物的抗氧化活性进行评估发现 各方法测定结果有所差异 这种差异性主要表现在提取物具有良好的 清除活性和亚铁离子螯合活性 但 还原能力较差,5. 等 " 从黑灵芝 图 夏枯草不同溶剂提取物对 的清除活性 " & " "# # $$%&' '" "#$" $ $ &' 子实体中提取并纯化出一种活性多糖 用多体系对其抗氧化活性进行测定 发现此种多糖在不同体系中均表现较高活性 从而证明其有显著抗氧 ( 化活性 马小媛和钱卫平认为 单一的检测方法不能够综合评价某种物质的抗氧化能力 可见 有必要采用多体系综合评价有效物质的抗氧化活性 综合本研究各测定结果 夏枯草不同溶剂提取物在
"% 一定浓度范围内 其抗氧化活性与有效物质浓度呈正相关 但当提取物达到一定浓度后 便不再表现出更高的抗氧化能力 这是由于自由基消耗殆尽或反应趋于平衡 所以 抗氧化体系中抗氧化剂浓度的选用应考虑到实际条件和底物浓度 参照生物体内自由基浓度范围 使评价更有实际意义 夏枯草乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物的抗氧化活性较强 尤其是乙酸乙酯提取物 这可能与夏枯草中黄酮类物质有关 有国内外学者研究发现 黄 ) 酮类物质具有很强的抗氧化能力 - - 等认为 黄酮类化合物儿茶素是绿茶中最主要的抗氧化 # 成分 吴晓宁等研究表明 乌蕨 " 黄酮类物质具有显著的还原力 抗脂质体氧 % 化和清除自由基等作用 52/ -. 等对菠菜 # 水提物中的黄酮类物质进行研究分析 证实它有比一般人工抗氧化剂强的抗氧化 能力 此外 王川等证实夏枯草黄酮对猪油有抗氧化作用 但目前对夏枯草抗氧化物质研究较少 尚不能确定其种类及结构 需要进一步对各部分的成分进行深入研究 夏枯草提取物具有良好的抗氧化活性 加之植物药的天然低毒性 有开发为天然抗氧化剂和抗衰老保健品的潜力 具有广泛的发展前景 参考文献 1,5. 1. 4.;1 ;-/5.10-. -.* ;191 -.;<2<52;157 13* 5 12-. 8 13* 5 12 2.- /210 ; 2--. =,5 17;28( (& ")#*"#" 国家药典委员会 中华人民共和国药典 一部 北京 化学工业出版社 ( # & 王祝举 唐力英 付梅红 等 夏枯草中的黄酮类化合物研究 时珍国医国药 %% ))*)# " 庄玲玲 夏枯草药理作用研究进展 中国中医药信息杂志 () "*( ( 陈颢 李丽娟 李良 等 中药材中黄酮类化合物的提取及药理作用研究进展 云南化工 &%" (*( )+,-./> 4 5 <;1 165 ;2-7.10*-7* 717;5 59;2-0;1. -.1 7 2 -. 5 - -;1. -.;191 -.;-0;1 1;157.. -;1 5= 015.05-. 52/1./ 50,./157 %*( # 熊双丽 李安林 夏枯草总黄酮的提取分离与自由基清除活性研究 食品科学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马小媛 钱卫平 抗氧化能力评价方法 化学进展 &% #&#*#") ) - - >.A- 57 -B= =-.1 7;;-<,5.107-. -.;191 -.;0-<-01;8 <-217. 5; 55.0 5201-/255.;5-<25<-2-* ;1.7 1C.01-5 50./1-5 1 5.;7 &" ##*% # 吴晓宁 余陈欢 徐静红 乌蕨总黄酮体外抗氧化活性的研究 医药导报 & *" % 52/ -. 525 -. 1.738+0-5.* /1./ 25-0;1 598/5.7<50157 8-. 5/ 0 21.-;* 5 -.1 -.;191 -.;17-;5 -. < 21 15 2 7<1.-0,,8;0,5 17;28&) #(&*#) 王川 钟伟 倪青 夏枯草黄酮对猪油抗氧化作用的研究 现代食品科技 ) &*&&&
草 业 科 学 第 卷 期 *#$& #$ $$%&' " $ $ "% + > 1- > -*B1./ =-./ + 5 & 5/5 1 5015.052;, 57; D =.1 5271;8@-./1./#,1.- 5/5 /2. 82;, 57; D =.1 5271;8@-./1./#,1.- & 5/5 015.052;, 57; D =.1 5271;8@-./1./#,1.- *+$ $.;,5<2575.;7; 8 5-1 5 ;1. 57;1/-;5;,5-.;191 -.;-0;1 1;157 1. 1 525.;59;2-0;7,10, <2 1 5;,525;10- -717 2 2;,522575-20,,5< 52 $ -759;2-0;5 1;,#' 5;,-.1. -;52 71./ ;2-7.1059;2-0;1.-. ;,5.;,5 1;2-;5-7 59;2-0;5 5 1;,5;,8-05;-;5.* ;-.-. -;52-;5E - 5,5-.;191 -.;-0;1 1;157 1 525.;59;2-0;7 5255 - -;5 -. -7 75-7-<71;1 50.;2,5257 ;77, 5 ;,-;;,5 59;2-0;7 $,- 5/25-;-.;191 -.;-0;1 1;80-5./1./- 11;157. ;,559;2-0;7-. 5251. 5705. 1./2 52 5;,8-05;-;5.* ;-. -;520-5./1./- 11;157. ;,559;2-0;7-. 5251. 5705. 1./2 52 5;,8-05;-;5.* ;-. -;520-5./1./- 1* 1;157. $ ;,559;2-0;7-. 5251. 5705. 1./2 52 5;,8-05;-;5 -;52.* ;-. 5 01./< 52 ;,559;2-0;7 5251. 5705. 1./2 52 5;,8-05;-;5.* ;-. -;52,5 5;,8-05;-;559;2-0; $,- -7;2./-.;191 -.;-0;1 1;8,"%)& -.;191 -.;-0;1 1;8 2552-10- 2257<. 1./- ;,2 =-./ * -1 1- -./ )&0 欢迎投稿 草业学报 欢迎订阅 草业学报 由中国草学会 兰州大学草地农业科技学院共同主办 是国内外公开发行的高级学术期刊 年 草业学报 的影响因子为 % 在全国被统计的 % 种期刊中排名第 位 在畜牧兽医类期刊中排名第 位 现入编全国中文核心期刊 荣获 百种中国杰出学术期刊 中国精品科技期刊 中国科技论文在线优秀期刊一等奖 草业学报 主要报道国内外草业科学及其相关领域 如畜牧学 农学 林学 经济学等领域的高水平理论研究和技术创新成果 发表国内外草业领域创新性的研究论文 刊载学术价值较高的草业科学专论 综述 评论等 探讨草业发展的新理论与新构思 是草业新秀成长的园地 推动草业科学发展的论坛 其读者对象主要是从事农林牧渔 园林绿化 生态环境 国土资源等领域的科研管理及教学等专业人员 本刊为 中国科学引文数据库 核心期刊 中国科技论文统计源期刊 英国 文摘数据库来源期刊 中国生物学文摘 中国生物学文摘数据库收录期刊 中国核心期刊 遴选 数据库收录期刊 中国学术期刊 光盘版 全文收录期刊 万方数据 $ 数字化期刊群 入网期刊 草业学报 为双月刊 全铜版印刷 逢双月 日出版 大 ) 开本 ( 页 定价 ( 元 全年 ( 元 国内邮发代号 ("*%" 全国各地邮局均可订阅 若错过订期 可在本编辑部直接办理订阅 地址 兰州市嘉峪关西路 #)% 号 草业学报 编辑部 邮编 #& 电话 传真 &*%&""-. 089 6 5 0. 网址,;< 089 6 5 0.