淺 談 實 驗 動 物 麻 醉 臺 灣 大 學 獸 醫 系 82 年 班 美 國 克 里 福 蘭 州 立 大 學 碩 士 曾 任 臺 灣 動 物 科 技 研 究 所 人 工 器 官 中 心 獸 醫 師 台 大 醫 學 院 動 物 中 心 繁 殖 組 獸 醫 師 捷 懿 企 業 有 限 公 司 獸 醫 師 歐 易 企 業 股 份 有 限 公 司 獸 醫 師 邦 進 企 業 有 限 公 司 獸 醫 師 陳 序 宸 麻 醉 實 驗 動 物 ( 動 物 保 護 法 ) 第 3 條 : 實 驗 動 物 : 指 為 科 學 應 用 目 的 而 飼 養 或 管 領 之 動 物 第 15 條 : 使 用 動 物 進 行 科 學 應 用, 應 儘 量 避 免 使 用 活 體 動 物, 有 使 用 之 必 要 時, 應 以 最 少 數 目 為 之, 並 以 使 動 物 產 生 最 少 痛 苦 及 傷 害 之 方 式 為 之 第 16 條 : 進 行 動 物 科 學 應 用 之 機 構, 應 設 置 實 驗 動 物 照 護 及 使 用 委 員 會 或 小 組, 以 督 導 該 機 構 進 行 實 驗 動 物 之 科 學 應 用 1
麻 醉 實 驗 動 物 ( 動 物 保 護 法 罰 則 ) 第 29 條 : 有 下 列 情 事 之 一 者, 處 新 臺 幣 三 萬 元 以 上 十 五 萬 元 以 下 罰 鍰 : 二 違 反 第 十 五 條 第 一 項 第 十 七 條 或 第 十 八 條 規 定, 未 依 第 二 十 四 條 規 定 限 期 改 善 或 為 必 要 之 處 置 三 違 反 第 十 六 條 第 一 項 規 定, 未 成 立 實 驗 動 物 照 護 及 使 用 委 員 會 或 小 組 麻 醉 實 驗 動 物 ( 實 驗 動 物 使 用 指 南 ) Procedures that may cause more than momentary or slight pain or distress to the animals will be performed with appropriate sedation, analgesia, or anesthesia unless the procedure is justified for scientific reasons in writing by the investigator PHS Policy on Humane Care and Use of Laboratory Animal 2
實 驗 動 物 麻 醉 對 象 : 小 鼠 大 鼠 兔 豬 計 畫 : 制 訂 麻 醉 計 畫 ( 實 驗 計 畫 ) 操 作 : 動 物 保 定 施 予 藥 物 麻 醉 進 行 實 驗 操 作 實 驗 動 物 保 定 ( 基 本 原 則 ) 保 定 : 保 護 並 且 固 定 動 物 維 持 實 驗 動 物 的 安 全 和 舒 適 保 定 任 何 實 驗 動 物, 操 作 人 員 應 該 要 脾 氣 溫 和, 但 手 勢 堅 決 穩 定 不 可 無 故 騷 擾 動 物 3
實 驗 動 物 保 定 ( 小 鼠 ) 從 尾 部 從 籠 內 提 起 小 鼠, 將 小 鼠 放 置 可 攀 附 的 網 上 用 拇 指 和 食 指 收 攏 頸 部 皮 膚, 其 餘 三 指 和 手 掌 固 定 小 鼠 背 部 皮 膚 放 回 動 物 時, 請 盡 量 讓 動 物 接 近 籠 底 實 驗 動 物 保 定 ( 小 鼠 ) 4
實 驗 動 物 保 定 ( 大 鼠 ) 由 尾 基 部 提 起 大 鼠 用 手 掌 穩 定 的 抓 住 大 鼠 的 背, 拇 指 和 食 指 扣 住 大 鼠 的 頸 部, 其 餘 三 指 環 繞 大 鼠 身 軀 注 意 手 勁, 避 免 造 成 窒 息 適 用 於 短 期 操 作, 如 管 餵 或 注 射 藥 物 實 驗 動 物 保 定 ( 大 鼠 ) 5
實 驗 動 物 保 定 ( 天 竺 鼠 ) 和 大 鼠 保 定 方 式 相 同 實 驗 動 物 保 定 ( 兔 子 ) 一 隻 手 抓 住 兔 子 頸 背, 另 一 隻 手 托 住 兔 子 後 軀 或 者 使 用 大 毛 巾 裹 住 兔 子 兔 子 強 踢 後 腿, 將 可 能 造 成 脊 椎 損 傷, 一 定 要 避 免 兔 子 懸 空 蹬 跳 切 勿 僅 僅 握 住 耳 朵, 將 會 使 耳 朵 軟 骨 骨 折 出 血 6
實 驗 動 物 保 定 ( 兔 子 ) 實 驗 動 物 保 定 ( 豬 ) 以 鋼 索 或 繩 子 做 成 套 繩, 由 後 端 套 住 豬 口 鼻 部, 繩 圈 需 為 於 犬 齒 後 方 拉 緊 後, 將 一 端 固 定 於 欄 杆 小 豬 保 定, 可 用 粗 繩 或 彈 力 繩 結 網, 將 豬 放 於 網 上, 四 腳 穿 過 網 目, 豬 懸 空 不 易 掙 扎 移 動, 也 可 前 二 腳 或 後 二 腳 綁 在 一 起, 豬 隻 更 無 法 動 彈 7
實 驗 動 物 保 定 ( 豬 ) 動 物 施 予 藥 物 方 式 SC- Subcutaneous 皮 下 注 射 IM- Intramuscular 肌 肉 注 射 IP- Intraperitoneal 腹 腔 注 射 IV- Intravenous 血 管 注 射 8
注 射 -SC 讓 小 鼠 趴 在 鐵 蓋 上, 右 手 拉 尾 巴, 左 手 抓 起 皮 層 保 定 插 入 皮 層, 回 抽 後, 打 入, 完 成 注 射 -IM 小 方 巾 蓋 住 上 半 身 露 出 右 小 腿 1 2 食 指. 中 指 夾 住 右 小 腿 插 入. 回 抽. 打 入. 完 成 3 4 9
注 射 -IP 注 射 -IV 50ml 離 心 管 打 洞, 前 端 塞 紗 布 照 燈, 烤 熱 保 定 小 鼠 靜 脈 擴 張, 清 晰 可 見 平 行 下 針 回 血 打 入, 完 成 10
最 大 注 射 量 注 射 方 式 Mice Rats 皮 下 注 射 SC 2-3ml 頸 背 5-10ml 頸 背 腹 脇 肌 肉 注 射 IM 0.05ml 四 頭 肌 0.3ml 四 頭 肌 腹 腔 注 射 IP 2-3ml 10-15ml 血 管 注 射 IV 0.2ml 尾 靜 脈 0.5ml 尾 靜 脈 11
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實 驗 動 物 麻 醉 小 鼠 大 鼠 兔 猪 麻 醉 (1) 鎮 痛 (2) 意 識 喪 失 (3) 肌 肉 鬆 弛 (4) 降 低 反 射 作 用 迅 速 及 排 泄, 無 副 作 用 目 前 無 理 想 的 麻 醉 藥, 臨 床 上 大 多 併 用 數 種 藥 物 -- 平 衡 麻 醉 法 麻 醉 前 是 否 禁 食? 狗, 貓, 靈 長 類 : 8-12 hours 猪 : 12-1818 hours 反 芻 動 物 ( 牛, 羊 ): 24-4848 hours 兔 子 : 0-6 hours 小 鼠 不 可 禁 食 超 過 3-4 hours, 可 能 會 低 血 糖 兔 子, 囓 齒 類 因 為 不 嘔 吐, 所 以 食 物 和 水 不 會 反 溺 至 呼 吸 道, 所 以 通 常 沒 有 必 要 禁 食 13
實 驗 動 物 麻 醉 基 本 原 則 不 可 能 有 單 一 的 麻 醉 劑 量 可 以 適 用 所 有 動 物 品 種 變 化 甚 至 同 品 系, 不 同 大 小, 年 齡, 性 別 差 異 都 可 能 造 成 麻 醉 的 差 異 動 物 所 處 的 生 理 狀 態 也 會 影 響 麻 醉 的 效 果, 動 物 興 奮, 麻 醉 效 果 較 差 動 物 過 胖, 脂 肪 將 作 為 麻 醉 劑 的 儲 存 庫, 延 長 恢 復 動 物 生 理 狀 況 : 體 溫 脫 水 肺 肝 腎 功 能 異 常 麻 醉 可 分 為 4 期 動 物 麻 醉 分 期 第 一 期 無 痛 期 : 抑 制 大 腦 皮 質 知 覺 中 樞, 痛 覺 消 失, 知 覺 障 礙 類 似 幻 覺, 意 識 清 楚, 反 射 依 然 存 在 第 二 期 興 奮 期 : 呼 吸 急 促, 狂 亂 或 發 出 叫 聲, 對 外 界 刺 激 敏 感 第 三 期 手 術 麻 醉 期 : 適 合 進 行 手 術 操 作 第 四 期 呼 吸 麻 痺 期 : 呼 吸 心 跳 停 止, 動 物 瀕 於 死 亡, 需 急 救 14
動 物 麻 醉 生 理 觀 察 指 標 呼 吸 : 輕 度 麻 醉 為 胸 式 呼 吸, 麻 醉 越 深, 越 接 近 腹 式 呼 吸 呼 吸 頻 率 異 常 時 表 示 麻 醉 不 穩 定 黏 膜 顏 色 : 正 常 黏 膜 顏 色 為 粉 紅 色, 缺 氧 時, 組 織 呈 現 深 紫 暗 紅 色 微 血 管 再 充 血 時 間 (CRT): 手 壓 牙 齦 後 放 開, 應 於 2 秒 內 回 復 正 常 顏 色, 否 則 心 輸 出 功 能 不 佳 脈 搏 : 頻 率 穩 定, 無 雜 音 反 射 : 眼 瞼 反 射, 趾 間 痛 覺 反 射 可 作 為 麻 醉 指 標, 口 咽 吞 嚥 反 射 可 為 呼 吸 麻 醉 甦 醒 指 標 降 低 麻 醉 風 險 四 要 素 術 前 掌 控 生 理 狀 況 防 止 低 體 溫 良 好 的 麻 醉 監 控 良 好 的 藥 物 使 用 ~ 對 任 何 動 物 的 麻 醉 都 適 用 15
囓 齒 動 物 麻 醉 小 鼠 大 鼠 防 止 低 體 溫 ( 術 中 + 術 後 恢 復 期 ) 小 體 型 動 物 易 失 溫 ( 代 謝 快 代 謝 快 + 體 表 面 積 大 + 麻 醉 中 不 活 動 + 剃 毛 + 酒 精 消 毒 ) 各 種 方 式 保 溫 ( 熱 風 墊 溫 水 毯 電 毯 ) 各 種 方 式 防 止 散 熱 體 溫 監 控 16
良 好 的 藥 物 使 用 良 好 術 前 鎮 靜 可 減 少 麻 醉 劑 量 良 好 的 麻 醉 劑 與 給 予 方 式 給 予 止 痛 劑 ( 縮 短 恢 復 期 + 減 少 術 後 厭 食 ) 麻 醉 劑 的 選 擇 希 望 的 麻 醉 時 間 與 深 度 給 予 方 式 : 吸 入 型 麻 醉 注 射 型 麻 醉 全 身 性 局 部 麻 醉 ( 外 加 ) 17
麻 醉 方 式 選 擇 原 則 : 希 望 能 快 速 達 到 效 果 及 快 速 調 整 深 度 ( 不 過 量 / 麻 過 深 ) 吸 入 型 麻 醉 注 射 型 麻 醉 首 選 IV 血 管 注 射 IM, IP SC 鎮 靜 ( 可 減 少 麻 醉 劑 量 ) Acepromazine Diazepam Midazolam Mice Rats Guinea Pig 2-5mg/kg sc, ip 5mg/kg im 5mg/kg im 0.1-0.3mg/kg im, ip 30-100ug/kg sc 5-10mg/kg ip 2.5mg/kg im, ip 2.5-5mg/kg im, ip 2.5mg/kg ip 0.2-0.5mg/kg im 30-100ug/kg sc 0.5-1 mg/kg im 2.5mg/kg im, ip 5mg/kg im 0.5mg/kg im Rabbit 0.1-0.5mg/kg im 1-2mg/kg im, ip 2mg/kg iv, im, ip x Fentanyl/ 0103mg/kg 0205mg/kg 05mg/kg x fluanisone Medetomidine x Xylazine = 管 制 藥 品 1-5mg/kg im, ip x 0.1-0.5mg/kg im, sc 5mg/kg im 18
注 射 型 麻 醉 ( 鎮 靜 + 麻 醉 併 用 ) Mice Rats Guinea Pig Rabbit Fentanyl 0.3mg/kg g im 0.3mg/kg g im 1mg/kg g im 0.3mg/kg g im +Diazepam +5mg/kg ip +2.5mg/kg ip +2.5mg/kg ip +2mg/kg ip, iv Ketamine +Medetomidine 75mg/kg +1mg/kg ip 75mg/kg +0.5mg/kg ip 40mg/kg +0.5mg/kg ip 15mg/kg sc +0.25mg/kg sc Ketamine +Xylazine Ketamine +dizepam 80-100mg/kg +10mg/kg ip 75-100mg/kg +10mg/kg ip 40mg/kg +5mg/kg ip 35mg/kg im +5mg/kg im 25mg/kg im +5mg/kg im Propofol 26mg/kg iv 10mg/kg iv 10mg/kg iv 10mg/kg iv = 管 制 藥 品 管 制 藥 品 係 指 成 癮 性 麻 醉 藥 品 影 響 精 神 藥 品 其 他 認 為 有 加 強 管 理 必 要 之 藥 品 依 習 慣 性 依 賴 性 濫 用 性 及 社 會 危 害 性 之 程 度, 分 四 級 管 理 * 限 供 醫 藥 及 科 學 上 之 需 用 主 管 機 關 : 衛 生 福 利 部 ( 食 品 藥 物 管 理 署 ) 須 申 請 管 制 藥 品 使 用 執 照 才 可 使 用 購 買 及 每 次 使 用 皆 需 記 錄 每 年 度 申 報 19
麻 醉 量 - 管 制 藥 (Mice) Pentobarbitol + Saline: 0.1+0.5= 0.6 ml 每 隻 給 予 0.1ml (IP) Ketamine + Xylazine (Ropum) 原 始 濃 度 (50mg/ml) (20mg/ml) IP ( 100 mg/kg ketamine and 10 mg/kg xylazine ) 1. 取 2 ml Ketamine + 0.5 ml Xylazine, 加 滅 菌 水 至 10ml, 混 勻 2. 標 明 於 管 上 (Ketamine+Xylazine), 0.1 ml/ 10g, 配 藥 時 間, 有 效 期 間 ( 以 最 早 過 期 的 藥 為 基 準, 最 久 不 超 過 3 個 月 ) 3. 避 光, 放 冰 箱 4. 給 予 0.1ml/ 10g, IP; 需 要 追 加 時, 給 予 1/3-1/2 劑 量 5. 避 免 失 溫, 可 使 用 檯 燈, 照 燈 或 小 面 巾 P.S. ( 紅 單 57088: 10CC 滅 菌 空 瓶 ; 57089: 20 滅 菌 空 瓶 ) Barbiturates Duration Phenobartial 6-12 hours Pentobarbital 1-2 hours Thiamylal 10-20 minutes Severe cardiovascular and respiratory depression Slow IV injection will be safely Too fast IP injection often associated with high mortality Dosage, diluted to 10 mg/ml first rat, 25-40 mg/kg, IP, IV mouse, 40-80 mg/kg, IP, IV rabbit, 25-40 mg/kg, IP hamster, 50-90 mg/kg, IP 20
Ketamine Dissociative anesthetic May cause respiratory depression and seizures (controllable with diazepam or xylazine) Anesthetic for minor procedures Increased skeletal muscle tone Incomplete anesthesia and muscle rigidity Dosage rodents 100 mg/kg IM cats and dogs, 11-22 mg/kg IM, usually mix equal volumes of diazepam (5mg/ml) to effect cats and dogs 2.2-2 4.4 mg/kg IV, if BW >30kg, be careful to use ketamine alone Ketamine + Xylazine(Ropum)=10:1 (50mg/ml) (20mg/ml) 1. 取 2 ml Ketamine + 0.5 ml Xylazine, 加 滅 菌 水 至 10ml, 混 勻 2. 標 明 於 管 上 (Ketamine+Xylazine), 0.1 ml/ 10g, 配 藥 時 間, 有 效 期 間 ( 以 最 早 過 期 的 藥 為 基 準, 最 久 不 超 過 3 個 月 ) 3. 避 光, 放 冰 箱 4. 給 予 0.1ml/ 10g, IP ( 100 mg/kg ketamine and 10 mg/kg xylazine!!) 5. 需 要 追 加 時, 給 予 1/2 劑 量 6. 避 免 失 溫, 可 使 用 檯 燈, 照 燈 或 小 面 巾 21
Propofol 奶 白 色 含 油 乳 劑 今 年 變 管 制 藥 平 穩 迅 速 達 到 麻 醉 深 度 短 效 清 醒 快 又 平 穩 少 肌 肉 強 直 少 噁 心 嘔 吐 肝 腎 毒 性 小 只 能 靜 脈 給 予 注 意 呼 吸 抑 制 ( 須 主 動 供 氧 ) Propofol Mice Rats Rabbit Dog 26mg/kg 10mg/kg 10mg/kg 只 能 靜 脈 給 予 注 意 呼 吸 抑 制 ( 須 主 動 供 氧 ) 22
麻 醉 量 - 非 管 制 藥 舒 泰 Zoletil 50: (50mg/ml) 與 鎮 靜 劑 Xylazine(Ropum) 混 合 使 用 Rat: 0.1ml 舒 泰 50/ 100g BW IP 0.05ml Rompun/ 100g BW IP Mice( 約 20g): 上 述 劑 量, 稀 釋 5 倍 再 使 用 0.1ml 舒 泰 50/ 隻 IP 0.05ml Rompun/ 隻 IP Rabbit: 1 ml/3kg 舒 泰 50 IV 0.2~0.3 ml/kg 舒 泰 50 IM Swine: 1.2ml/10kg Zoletil 舒 泰 50 Tiletamine i & Zolazepam 1:1 11 乾 粉 + 蒸 餾 水 使 用 前 混 勻 = 50mg/ml 非 管 制 藥 可 肌 肉 或 靜 脈 給 予 避 免 過 度 分 泌 唾 液 ( 麻 醉 前 15 分 給 予 atropine) 較 易 誘 發 嘔 吐 與 肌 肉 強 直 23
Zoletil 舒 泰 50 麻 醉 前 15 分 給 予 atropine 0.05 肌 肉 IM 注 射 (3 (3-6 分 進 入 麻 醉 ) 0.05-0.1mg/kg0.1mg/kg Mice Rats G P Rabbit Dog 100-160 mg/kg 20-40 mg/kg 靜 脈 IV 注 射 (1 10-25 mg/kg (1 分 內 進 入 麻 醉 ) 10-15mg/kg +5mg/kg xylazine 7-25mg/kg Mice Rats G P Rabbit Dog 10-15mg/kg Zoletil 舒 泰 50(50mg/cc( 50mg/cc) ) 麻 醉 前 15 分 給 予 atropine 0.05 0.05-0.1mg/kg) 0.1mg/kg) 肌 肉 IM 注 射 (3-6 分 進 入 麻 醉 ) 舉 例 : 小 鼠 體 重 20g ( 劑 量 : 劑 量 :100mg/kg) 應 給 予 劑 量 :2mg=0 0.04cc 04cc IM 或 稀 釋 10 倍, 變 成 0.4cc IP 24
Tribromoethanol(Avertin) 是 一 種 短 效 的 麻 醉 劑, 一 般 用 於 齧 齒 類 的 手 術 它 有 快 速 的 誘 導 期 和 恢 復 期 (15 分 鐘 手 術 麻 醉 和 90 分 鐘 完 全 恢 復 ), 不 是 商 品 化 藥 物 必 須 自 行 配 製 只 有 經 IACUC 同 意 才 能 使 用 若 不 依 照 規 範 操 作, 可 能 造 成 藥 力 降 低 及 因 為 效 力 下 降 而 造 成 注 射 部 位 的 壞 死 和 可 能 導 致 動 物 的 死 亡 另 外 重 複 腹 腔 注 射 可 能 導 致 發 炎 反 應 局 部 刺 激 內 臟 粘 連 和 動 物 死 亡 Avertin 只 能 使 用 在 小 鼠 Avertin 配 製 和 儲 存 使 用 的 規 範 : 1. 使 用 0.2 micron filter 過 濾 滅 菌 2. 必 須 在 滅 菌 狀 態 下 儲 存 和 使 用 3. 儲 存 在 深 色 瓶 子 或 錫 箔 紙 包 覆 的 容 器 內 4.stock 和 working stock solutions 必 須 儲 存 在 4 環 境 下 5. 假 如 溶 液 變 成 無 色 或 有 沉 澱 時, 不 可 使 用 6. 每 次 使 用 時 都 必 須 測 PH 值, 且 要 在 PH 5 以 上 才 能 使 用 7. 所 有 溶 液 包 括 stock solution, 在 4 個 月 後 都 要 拋 棄 8. 所 有 容 器 都 須 標 示 包 括 藥 品 的 名 稱 和 濃 度 配 製 日 期 和 誰 泡 的 25
Dexdomitor 得 麻 效 Dexmedetomidine 非 管 制 藥 可 肌 肉 或 靜 脈 給 予 單 獨 使 用 或 與 Zoletil 舒 泰 合 併 使 用 Antisedan 安 醒 順 atipamezole 為 得 麻 效 的 專 屬 解 劑 肌 肉 注 射 十 分 鐘 左 右 清 醒 26
吸 入 型 麻 醉 劑 麻 醉 氣 體 : 乙 醚 笑 氣 N2O 揮 發 性 麻 醉 劑 : Halothane Isoflurane Sevoflurane Isoflurane 吸 入 性 麻 醉 劑 非 管 制 藥 平 穩 達 到 麻 醉 深 度 可 控 制 麻 醉 深 度 吸 多 久 麻 多 久 呼 吸 排 出 肝 腎 毒 性 小 需 專 用 氣 化 瓶 及 麻 醉 機 設 備 27
Isoflurane 專 用 氣 化 瓶 及 麻 醉 機 設 備 小 動 物 麻 醉 機 空 氣 流 量 建 議 對 照 表 體 重 範 圍 (g) 每 分 鐘 空 氣 需 求 量 (CC./PM) 建 議 值 (CC./PM) 小 鼠 大 鼠 0 25 36 100 25 50 72 100 200 300 288 300 300 400 384 400 400 500 480 500 500 600 576 600 600 700 672 700 700 800 768 800 800 900 864 900 900 1000 960 1000 氣 體 維 持 麻 醉 濃 度 參 考 值 小 鼠 2~2.5% 大 鼠 2% 28
小 動 物 用 氣 體 麻 醉 機 氣 體 麻 醉 機 大 動 物 用 氣 體 麻 醉 機 29
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嚙 齒 類 使 用 二 氧 化 碳 施 行 安 樂 死 嚙 齒 類 必 須 由 受 過 訓 練 的 人 員 使 用 適 當 的 技 術 設 備 和 藥 劑 進 行 安 樂 死 動 物 死 亡 應 該 儘 可 能 無 痛 和 快 速 上 述 過 程 的 評 估, 死 亡 必 須 被 適 當 的 方 法 如 心 跳 停 止 呼 吸 停 止 瞳 孔 散 大 等 確 認 安 樂 死 不 可 在 動 物 房 操 作 二 氧 化 碳 在 小 鼠 大 鼠 天 竺 鼠 和 倉 鼠 是 最 普 遍 使 用 的 安 樂 死 方 式 31
嚙 齒 類 使 用 二 氧 化 碳 施 行 安 樂 死 重 要 的 事 項 : 1. 初 生 的 動 物 ( 最 多 10 天 ) 對 CO2 的 作 用 是 有 抵 抗 性 的 2. 不 同 種 類 的 動 物 不 可 混 雜 3. 具 有 CO2 氣 體 壓 力 閥 的 鋼 瓶 是 唯 一 被 認 可 的 來 源 4. 不 能 預 先 充 氣 在 二 氧 化 碳 容 器 內, 動 物 放 入 容 器 內 後, 開 始 注 入 二 氧 化 碳 至 濃 度 100% 充 氣 的 速 率 必 須 設 在 每 分 鐘 充 滿 容 器 體 積 的 20%,, 一 直 增 加 到 在 容 器 內 存 在 的 氣 體 使 動 物 在 無 痛 的 狀 態 下 快 速 失 去 意 識 ( 如 10L 體 積 的 容 器, 每 分 鐘 流 速 為 2L) 突 然 將 有 意 識 的 動 物 曝 露 在 70% 或 以 上 濃 度 的 CO2,, 已 經 顯 示 是 痛 苦 的 5. 失 去 意 識 的 時 間 通 常 在 2-3 分 鐘 之 間 當 呼 吸 停 止 時, CO2 的 流 速 至 少 需 維 持 1 分 鐘 6. 一 般 針 對 一 群 動 物 進 行 安 樂 死 時, 必 須 讓 每 隻 動 物 都 能 表 現 出 正 常 的 姿 勢 且 盡 可 能 在 牠 們 的 飼 育 盒 中 7. 二 氧 化 碳 的 psi(pound per square inch) 不 可 超 過 5 psi 32