CCMP97-RD-043

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1 編 號 :CCMP97-RD-043 紅 麴 加 上 益 生 菌 對 降 血 脂 作 用 之 評 估 李 建 瑩 魏 正 宗 中 山 醫 學 大 學 附 設 醫 院 摘 要 研 究 目 的 : 本 研 究 將 使 用 抑 制 肝 臟 合 成 膽 固 醇 (cholesterol) 的 紅 麴 與 乳 酸 菌 桿 菌 屬 中 的 Lactobacillus casei 經 由 胃 腸 道 作 用, 兩 者 合 併 使 用, 觀 察 同 時 抑 制 肝 臟 合 成 膽 固 醇 的 合 成 與 經 由 胃 腸 道 作 用 降 低 膽 固 醇 的 機 制 與 協 同 效 果 研 究 方 法 : 收 集 原 發 性 高 血 脂 症 患 者 共 60 位 納 入 條 件 :(1)18 歲 以 上 之 成 年 人 (2) 病 人 低 密 度 脂 蛋 白 (LDL) 大 於 160mg/dl 或 三 酸 甘 油 脂 (TG)>200mg/dl 排 除 條 件 :(1) 懷 孕 或 正 授 乳 的 婦 女 (2) 進 入 篩 選 期 前 需 Washout 30 day: 如 HMG-CoA 還 原 酵 素 抑 制 劑 (HMG-CoA reductase inhibitor) 膽 酸 結 合 劑 (bile acid binding resins) 菸 鹼 酸 (nicotinic acid 或 niacin) Fibrate 類 衍 生 物 (fibrate derivatives) 或 膽 固 醇 吸 收 抑 制 劑 (cholesterol absorption inhibitor)(3) 進 入 篩 選 期 前 30 天 內 有 改 變 西 藥 降 血 糖 之 用 藥 : 如 有 服 用 α-glucosidase inhibitor Sulfonylurea Biguanide Meglitinide 或 PPAR agonists(4) 進 入 篩 選 期 前 30 天 內 有 服 用 其 他 保 健 食 品 (5) 生 化 值 異 常 : 血 清 肌 肝 酸 3.0 mg/dl;gpt 超 過 正 常 數 值 5 倍 符 合 收 案 條 件 之 受 試 者 於 簽 署 同 意 書 後, 隨 機 分 派 為 治 療 組 ( 壽 美 降 脂 一 號 加 Lactobacillus casei) 或 對 照 組 壽 美 降 脂 一 號 加 安 慰 劑, 治 療 期 8 週, 延 伸 追 蹤 期 4 週 受 試 者 於 第 週 回 診 接 受 低 密 度 脂 蛋 白 (LDL-cholesterol) 高 密 度 脂 蛋 白 (HDL-cholesterol) 血 中 總 膽 固 醇 值 (total cholesterol) 三 酸 甘 油 脂 (TG) 血 糖 (glucose) 尿 酸 (uric acid) 高 敏 感 性 C 反 應 蛋 白 (Hs-CRP) 結 果 與 討 論 : 共 60 位 受 試 者 被 納 入 於 研 究, 並 隨 機 分 派 於 治 療 組 (n=30) 與 控 制 組 (n=30) 受 試 者 第 0 週 之 人 口 學 基 本 特 徵, 未 達 到 統 計 上 之 顯 著 差 異 第 八 週 時 兩 組 之 低 109

2 密 度 脂 蛋 白 均 較 第 0 週 降 低, 治 療 組 降 低 33.9±26.7 mg/dl, 控 制 組 降 低 38.1±30.6 mg/dl, 但 兩 組 之 間 未 達 統 計 上 差 異 (p=0.58) 兩 組 之 總 膽 固 醇 均 較 第 0 週 降 低, 但 兩 組 之 間 未 達 統 計 上 差 異 (-46.6 ±31.1 vs -44.5± 27.5 mg/dl, p=0.79) 兩 組 之 指 標 達 統 計 上 顯 著 差 異 者 為 第 十 二 週 治 療 組 平 均 舒 張 壓 降 低 2.7 安 慰 劑 組 平 均 舒 張 壓 增 加 4.4 mmhg (p=0.021) 結 論 : 紅 麴 膠 囊 壽 美 降 脂 一 號 可 有 效 降 低 總 膽 固 醇 及 低 密 度 脂 蛋 白 但 加 上 益 生 菌 Lactobacillus casei 並 無 加 乘 作 用 關 鍵 詞 : 紅 麴 益 生 菌 降 血 脂 110

3 Number: CCMP97-RD-043 The Cholesterol-Lowering Effect of LipoCol Forte Combined Lactobacillus Casei Chien-Ying Lee, James Cheng-Chung Wei Chung Shan Medical University Hospital ABSTRACT Aim: To compare the cholesterol-lowering effect of red yeast rice (LipoCol Forte) plus probiotic (Lactobacillus casei) and red yeast rice (LipoCol Forte) plus placebo. Method: The study was a 12-weeks double-blinded placebo-controlled study. After at least 4-week washout /diet control period, sixty patients with primary dyslipidemia defined by LDL more than 160 mg/dl or triglyceride more than 200 were randomized to a 8-week treatment of red yeast rice plus probiotic or red yeast rice plus placebo, then shifted to the second 4-week washout /diet control period. Lipid parameters and safety assessments were done at week 0, 4 and 8. The primary endpoint was the mean percent change of LDL-cholesterol from baseline to week 8. The secondary endpoints were the mean percent changes from baseline in total cholesterol, triglycerides and safety issues. In year 2, we ll investigate the pathogenesis of red yeast rice plus probiotic by testing biomarkers including fibrinogen, platelet aggregation function, hs-crp, cytokines, homocysteine. Results & Discussion: The is a 2-years study. At the end of year 1 (Nov., 2009), we had enrolled and randomized 60 subjects. The baseline characteristics were comparable between two groups. At week 8, both groups achieved significant reduction of serum LDL (33.9±26.7 vs 38.1±30.6 mg/dl, p=0.58 )and total cholesterol (46.6 ±31.1 vs -44.5± 27.5 mg/dl, p=0.79) compared to baseline. There were no statistical significance between two groups regarding reduction of LDL and total cholesterol. 111

4 Conclusions: Red yeast rice capsule (ipocol Forte) can reduce LDL and total cholesterol in patients with hyperlipidemia. But the add-on of probiotic (Lactobacillus casei) had no additional effect. Keywords: Red yeast rice, Probiotic, Hyperlipidemia 112

5 壹 前 言 由 於 高 膽 固 醇 血 症 剛 開 始 通 常 沒 有 症 狀, 而 治 療 上 卻 又 需 要 長 時 間 服 藥, 患 者 的 順 應 性 便 是 一 項 很 大 的 挑 戰 原 發 性 高 血 脂 症 患 者 若 因 使 用 此 試 驗 用 藥 方 法 得 到 適 當 的 控 制, 病 患 能 預 防 疾 病 產 生, 降 低 醫 療 費 用 支 出, 減 少 因 原 發 性 高 血 脂 症 的 併 發 症, 提 升 患 者 生 活 品 質 及 身 體 心 像, 亦 可 提 升 高 血 壓 腎 臟 病 糖 尿 病 心 臟 冠 狀 動 脈 等 疾 病 預 防 保 健 工 作 之 成 效, 進 而 降 低 醫 療 費 用 的 支 出, 讓 國 內 的 衛 生 政 策 邁 向 另 一 新 的 里 程 碑 一 政 策 或 法 令 依 據 中 藥 之 療 效 雖 有 數 千 年 歷 史 為 依 據, 由 於 其 理 論 基 礎 與 西 方 醫 學 不 同, 又 缺 乏 明 確 的 評 估 指 標 (End-point) 與 科 學 化 數 據 之 支 持, 使 得 中 草 藥 至 今 仍 無 法 獲 得 國 際 醫 藥 主 流 市 場 的 認 可 ; 雖 然 我 國 中 藥 製 藥 技 術 已 向 科 學 化 邁 進, 但 如 何 結 合 科 學 實 證 方 法, 確 認 固 有 典 籍 中 藥 處 方 之 新 療 效, 以 及 利 用 天 然 中 藥 材 開 發 新 藥, 關 鍵 在 於 嚴 謹 可 信 的 臨 床 試 驗 二 問 題 狀 況 或 發 展 需 求 目 前 全 球 有 一 半 的 人 口 仰 賴 傳 統 醫 學 的 醫 療, 而 歐 美 近 年 來 對 於 傳 統 醫 學 的 態 度 逐 漸 開 放, 世 界 衛 生 組 織 (WHO) 估 計 全 球 的 傳 統 醫 藥 每 年 產 值 達 六 百 億 美 元, 而 且 仍 不 斷 增 加 中 醫 藥 為 我 國 醫 藥 文 化 重 要 資 源, 歷 經 數 千 年 而 不 衰, 無 論 在 臨 床 實 際 應 用 經 驗 或 典 籍 文 獻 均 累 積 豐 富 的 成 果, 這 是 其 他 國 家 研 究 中 草 藥 者 所 不 能 及 的, 也 是 我 國 發 展 中 草 藥 產 業 最 大 的 優 勢 近 年 來, 中 草 藥 養 生 與 自 然 保 健 蔚 為 風 潮, 根 據 經 濟 部 技 術 處 中 草 藥 產 業 技 術 推 動 辦 公 室 統 計 1999 年 全 球 草 藥 市 場 產 值 達 194 億 美 元, 預 估 在 公 元 2005 年 全 球 市 場 將 擴 大 到 267 億 美 元 究 其 原 因, 主 要 是 在 追 求 自 然 的 世 界 潮 流 及 人 口 逐 漸 老 化 的 影 響 下, 對 於 藥 性 溫 和 的 中 草 藥 及 天 然 物 的 需 求 日 漸 增 加, 生 物 科 技 是 繼 資 訊 產 業 之 後 未 來 的 主 要 潮 流, 生 技 製 藥 產 業 成 為 二 十 一 世 紀 的 明 星 產 業 但 中 藥 之 療 效 雖 有 數 千 年 歷 史 為 依 據, 由 於 其 理 論 基 礎 與 西 方 醫 學 不 同, 又 缺 乏 明 確 的 評 估 指 標 (End-point) 與 科 學 化 數 據 之 支 持, 使 得 中 草 藥 至 今 仍 無 法 獲 得 國 際 醫 藥 主 流 市 場 的 認 可 ; 雖 然 我 國 中 藥 製 藥 技 術 已 向 科 學 化 邁 進, 但 如 何 結 合 科 學 實 證 方 法, 確 認 固 有 典 籍 中 藥 處 方 之 新 療 效, 以 及 利 用 天 然 中 藥 材 開 發 新 藥, 關 鍵 在 於 嚴 謹 可 信 的 臨 床 試 驗 但 中 藥 臨 床 試 驗 過 程, 尚 包 括 重 要 的 人 體 試 驗 及 臨 床 療 效 評 估, 須 有 嚴 謹 的 中 醫 人 才 及 中 醫 研 究 相 互 配 合 ( 例 如 : 建 立 中 醫 診 斷 量 化 指 標 各 科 臨 床 治 療 指 引 及 證 型 資 料 庫 ), 為 因 應 此 問 題, 應 儘 速 協 助 中 醫 藥 界 建 立 臨 床 試 驗 環 境 113

6 國 內 的 中 藥 臨 床 試 驗 不 論 在 法 規 臨 床 試 驗 環 境 及 相 關 人 才 都 還 處 於 建 立 和 培 育 階 段, 許 多 法 規 及 臨 床 試 驗, 目 前 皆 為 參 考 西 藥 的 模 式 來 建 立 但 是, 中 醫 的 理 論 中 藥 的 實 際 應 用 都 與 西 醫 不 同, 若 完 全 套 用 西 藥 的 方 法 及 模 式 來 驗 證 中 藥 的 療 效, 恐 怕 窒 礙 難 行 況 且 許 多 中 藥 都 有 人 類 長 期 的 人 體 使 用 經 驗, 甚 至 於 日 常 食 物 難 以 劃 分, 對 其 毒 性 方 面 的 考 量, 應 有 別 於 西 藥 開 發 時 的 要 求 其 中, 建 立 完 善 臨 床 試 驗 環 境, 進 行 中 藥 製 劑 臨 床 應 用 之 評 估, 藉 以 建 立 中 藥 臨 床 試 驗 機 制, 提 供 法 規 制 定 之 參 考, 並 持 續 培 育 執 行 臨 床 試 驗 所 需 之 中 西 醫 師 及 相 關 人 才, 進 而 能 與 中 草 藥 品 質 管 制 及 業 界 發 展 接 軌, 創 造 臺 灣 中 草 藥 第 二 春, 實 為 國 內 未 來 發 展 應 首 要 努 力 之 目 標 23 隨 著 人 口 的 老 化, 慢 性 病 已 成 為 國 人 主 要 的 死 亡 原 因, 心 血 管 病 變 相 關 疾 病 更 是 名 列 前 茅, 而 高 脂 血 症 便 是 導 致 心 血 管 疾 病 的 一 個 重 要 因 素 由 於 高 膽 固 醇 血 症 剛 開 始 通 常 沒 有 症 狀, 而 治 療 上 卻 又 需 要 長 時 間 服 藥, 患 者 的 順 應 性 便 是 一 項 很 大 的 挑 戰 最 近 幾 年 來, 由 於 國 人 飲 食 習 慣 改 變, 使 得 心 臟 血 管 病 變, 如 中 風 冠 狀 動 脈 硬 化 性 心 臟 病 高 血 壓, 造 成 之 死 亡 率 有 逐 漸 增 加 的 趨 勢, 而 主 要 病 因 為 高 膽 固 醇 血 症 (hypercholesteremia) 由 於 高 膽 固 醇 易 導 致 動 脈 血 管 硬 化 (atherosclerosis) 及 心 管 疾 病 (coronary heart disease) 等 疾 病, 因 此 如 何 預 防 以 及 治 療 高 血 脂 症 將 是 首 要 三 國 內 外 相 關 研 究 之 文 獻 探 討 研 究 指 出, 血 中 低 密 度 脂 蛋 白 (low density lipoprotein, LDL) 濃 度 與 冠 狀 動 脈 粥 狀 硬 化 症 有 正 性 相 關 外, 可 能 也 和 LDL 被 氧 化 有 關 1 大 部 分 的 LDL 由 極 低 密 度 脂 蛋 白 (VLDL) 轉 變 而 來, 少 部 分 由 肝 臟 合 成 當 血 中 含 有 高 濃 度 的 LDL 時,LDL 容 易 穿 透 細 胞 膜 而 進 入 內 皮 下 空 隙 並 受 內 皮 細 胞 平 滑 肌 細 胞 及 巨 噬 細 胞 氧 化 修 飾 成 氧 化 型 低 密 度 脂 蛋 白 (oxidized LDL) 氧 化 型 低 密 度 脂 蛋 白 不 斷 被 巨 噬 細 胞 (macrophage) 吞 噬, 繼 而 轉 變 成 泡 沫 細 胞 (formed cells) 累 積 於 動 脈 管 內 膜, 最 後 導 致 動 脈 管 內 皮 細 胞 受 傷, 造 成 血 小 板 的 吸 附 而 釋 放 PDGF (platelet-derived growth factor), 於 是 細 胞 增 生 而 使 動 脈 粥 瘤 增 厚, 最 後 形 成 動 脈 粥 狀 硬 塊, 即 為 動 脈 粥 狀 硬 化 (atherosclerosis) 許 多 科 學 家 乃 致 力 尋 找 能 減 少 人 體 內 膽 固 醇 的 方 法 和 物 質, 其 中 之 一 即 是 抑 制 人 體 內 合 成 膽 固 醇 的 能 力 如 能 以 天 然 健 康 食 品, 融 入 患 者 的 生 活, 作 為 預 防 及 早 期 治 療 的 替 代 方 案, 以 預 防 心 血 管 疾 病 的 發 生, 不 失 為 可 行 之 法 過 去 使 用 降 血 脂 藥 物 的 經 驗 顯 示, 降 低 血 脂 可 以 改 善 冠 狀 動 脈 及 周 邊 血 管 的 內 皮 功 能 失 調, 許 多 臨 床 研 究 發 現 使 用 降 血 脂 藥 物 無 論 是 從 事 初 級 或 次 級 預 防, 對 於 降 低 心 血 管 疾 病 的 罹 病 率 及 死 亡 率 皆 具 有 正 面 療 效 結 果 114

7 紅 麴 在 我 國 食 用 上 已 有 千 年 的 歷 史, 被 廣 泛 的 用 於 食 品 及 醫 藥 上, 明 代 李 時 珍 所 著 < 本 草 綱 目 > 對 紅 麴 有 以 下 描 述 : 紅 麴 主 治 消 食 活 血, 健 脾 燥 胃 而 其 中 活 血 部 分, 與 近 來 研 究 發 現 紅 麴 其 二 次 代 謝 物 中 有 monacolin K 具 有 降 血 脂 之 功 能 γ- 胺 基 酪 酸 (γ-amino-n-butyric acid;gaba) 為 中 樞 神 經 系 統 中 主 要 抑 制 神 經 傳 導 之 物 質, 擁 有 降 血 壓 之 功 效 2 因 此 在 人 類 罹 患 心 血 管 疾 病 日 益 嚴 重 的 趨 勢 下, 紅 麴 成 為 一 項 極 被 矚 目 之 機 能 性 食 品 紅 麴 (Anka; Red mold rice; Red rice) 是 中 國 傳 統 食 品 添 加 物 與 中 藥, 其 功 效 有 促 進 血 液 循 環 及 加 速 代 謝 之 功 能, 紅 麴 是 由 紅 麴 菌 與 米 發 酵 而 成, 先 前 有 研 究 指 出 紅 麴 菌 的 二 次 代 謝 產 物 monacolin (K, J, M,X and dihydromonacolin L) 是 HMG-CoA reductase 的 抑 制 劑, 可 以 抑 制 膽 固 醇 (cholesterol) 的 合 成 3, 其 中 monacolin K (lovastatin) 已 是 廣 泛 被 使 用 的 臨 床 用 藥 4,5 因 此 我 們 利 用 動 物 實 驗 來 瞭 解 紅 麴 降 血 脂 的 功 效 結 果 顯 示, 紅 麴 (2%) 無 論 在 有 否 引 發 高 血 脂 老 鼠 的 實 驗 中, 皆 可 降 低 血 中 三 酸 甘 油 脂 (triglyceride) 總 膽 固 醇 (total cholesterol) 非 常 低 密 度 脂 蛋 白 -C (VLDL-C) 低 密 度 脂 蛋 白 -C (LDL-C) 另 外, 紅 麴 亦 能 抑 制 已 有 高 三 酸 甘 油 脂 症 (hypertriglyceridemia) 的 老 鼠 血 中 三 酸 甘 油 脂 濃 度 的 持 續 增 加 這 些 實 驗 結 果 顯 示 紅 麴 有 抑 制 高 三 酸 甘 油 脂 血 症 (hypertriglyceridemia) 和 高 血 脂 症 (hyperlipidemia) 的 效 果 Monacolin K 之 商 品 名 為 lovastatin Endo 學 者 於 1979 年, 從 紅 麴 培 養 液 中 分 離 萃 取 得 到 膽 固 醇 抑 制 劑 monacolin K 此 種 物 質, 之 後 於 Aspergillus terreus 分 離 出 相 同 的 化 學 物 質 又 進 一 步 發 現 紅 麴 可 以 產 生 monacolin J L X M 以 及 dihydromonacolin K L 等 物 質, 這 些 物 質 皆 為 膽 固 醇 抑 制 劑, 而 其 中 monacolin J 是 由 monacolin L 經 過 monooxygenase 加 一 個 氧 分 子 後 所 得,Monacolin k 則 是 由 monacolin J 轉 變 而 來 6 美 國 Merck Sharp & Dohme 藥 廠 的 mevacor 藥 劑 所 含 有 效 成 分 lovastatin 即 是 以 monacolin K 為 主 的 降 低 血 膽 固 醇 製 劑 產 品 日 本 三 共 藥 廠 的 mevalotin 為 1994 年 全 日 本 第 一 大 暢 銷 藥 品, 其 中 所 含 有 效 成 分 pravastatin 即 是 monacolin K 的 構 造 類 似 物 益 生 菌 是 指 具 有 改 善 宿 主 體 內 內 生 性 微 生 物 相 平 衡, 並 有 益 於 宿 主 健 康 的 單 一 或 數 種 微 生 物 一 般 而 言, 益 生 菌 被 認 定 為 活 菌 本 身, 但 是, 近 年 發 現 某 類 益 生 菌 所 衍 生 之 活 性 物 質, 也 具 有 促 進 宿 主 健 康 的 功 效, 因 此 目 前 已 把 活 菌 體 死 菌 體 菌 體 的 萃 取 物, 甚 至 其 代 謝 產 物 等, 都 歸 屬 於 益 生 菌 的 範 疇 乳 酸 菌 的 益 生 形 象 已 為 一 般 消 費 者 所 接 納 近 年 有 關 乳 酸 菌 的 應 用 研 究 更 是 突 飛 猛 進 且 多 元 化, 其 健 康 訴 求 除 了 整 腸 和 抑 制 致 病 菌 外, 還 有 降 低 膽 固 醇 活 化 免 疫 系 統 抑 制 腫 瘤 調 節 血 壓 減 緩 過 115

8 敏 反 應 等 功 效, 對 於 許 多 文 明 病 的 預 防 與 醫 療 輔 助 均 有 顯 著 的 效 果 Prebiotics- 益 生 質, 不 能 消 化 的 食 物 原 料, 幾 乎 100% 通 過 上 消 化 道, 直 到 消 化 道 後 段 才 被 選 擇 性 發 酵 可 選 擇 性 刺 激 腸 道 內 一 種 或 數 種 益 菌 的 生 長 及 活 性, 進 而 對 宿 主 產 生 有 力 的 效 用, 以 改 善 宿 主 健 康 對 存 在 腸 道 內 之 一 種 或 數 種 益 菌 為 一 選 擇 性 受 質, 可 刺 激 生 長 或 活 化 代 謝 目 前 為 果 寡 糖 異 麥 芽 寡 糖 異 構 乳 糖 lactulose 屬 之 Synbiotics: 故 需 同 時 符 合 probiotics 及 prebiotics 之 要 件 才 可 算 作 Synbiotics 乳 酸 菌 是 相 當 龐 雜 的 菌 群, 一 般 指 為 能 利 用 碳 水 化 合 物 進 行 醱 酵, 產 生 多 量 乳 酸 之 細 菌 均 稱 為 乳 酸 菌, 通 常 需 碳 水 化 合 物 氨 基 酸 核 酸 衍 生 物 維 生 素 及 多 種 生 長 素 等 養 分 方 可 生 長 乳 酸 菌 菌 種 簡 介 : 目 前 已 知 有 二 百 多 種 乳 酸 菌 菌 株, 最 有 名 的 是 保 加 利 亞 乳 酸 菌 (Lactobacillus bulgaricus) 比 菲 德 氏 菌 Lactobacillus bifidus Bifidobacterium bifidum 嗜 酸 乳 桿 菌 (Lactobacillus acidophilus) 嗜 熱 鏈 球 菌 (Streptococcus thermophilus, 四 種 乳 酸 菌 都 是 培 養 優 酪 乳 的 主 要 菌 種, 其 他 對 人 體 有 益 的 乳 酸 菌 尚 有 Lactobacillus fermentum Lactobacillus casei Lactobacillus salivores Lactobacillus plantarum 等 乳 酸 菌 具 有 降 低 膽 固 醇 的 功 效 : 乳 酸 菌 降 膽 固 醇 的 可 能 機 制 有 多 種 方 式, 一 方 面 是 為 乳 酸 菌 本 身 具 有 的 膽 鹽 水 解 酵 素 活 性, 使 膽 固 醇 在 代 謝 過 程 中 產 生 去 結 合 型 態 的 膽 鹽, 若 乳 酸 菌 體 對 膽 鹽 共 軛 活 性 的 增 加, 使 膽 固 醇 與 去 結 合 型 膽 鹽 產 生 共 同 沉 澱 作 用, 從 而 有 更 多 的 膽 固 醇 量 被 沉 澱 下 來, 達 到 降 低 膽 固 醇 的 效 果 另 一 方 面, 乳 酸 菌 細 胞 膜 可 鍵 結 膽 固 醇, 甚 至 可 將 吸 附 的 膽 固 醇 進 行 同 化 作 用, 而 代 謝 成 細 胞 所 需 物 質, 其 中 以 乳 酸 桿 菌 的 降 膽 固 醇 的 能 力 較 佳 7,8 Lactobacillus casei 在 實 驗 室 培 養 基 生 長 時 可 移 除 膽 固 醇 9,Lactobacillus acidophilus 及 Lactobacillus casei 在 生 長 時 可 藉 由 產 生 bile acid hydrolase 將 膽 酸 去 結 合 (deconjugate) 10,11 Lactobacillus casei 在 改 善 肝 功 能, 抗 膽 固 醇 血 症 的 特 性 和 保 護 受 感 染 的 腸 道 上, 比 Lactobacillus acidophilus 佳 HMG-CoA 還 原 酵 素 抑 制 劑 (HMG-CoA reductase inhibitor): 這 類 藥 物 主 要 是 statin 類 藥 品, 其 主 要 的 作 用 機 轉 是 抑 制 膽 固 醇 合 成 的 最 後 一 個 酵 素 HMG-CoA 還 原 酵 素 的 合 成 12, 作 用 機 轉 :(1) 抑 制 HMG-CoA 還 原 酵 素 而 降 低 膽 固 醇,(2) 增 加 肝 臟 LDL 受 器 的 數 目 而 促 進 LDL IDL 及 VLDL remnant 之 移 除,(3) 抑 制 脂 蛋 白 之 合 成 而 降 低 TG Statin 類 藥 物 是 現 116

9 今 常 用 之 降 血 脂 藥 物, 適 用 於 原 發 性 膽 固 醇 血 症 患 者, 不 僅 能 有 效 降 低 LDL-C, 且 可 稍 微 降 低 TG, 並 增 加 HDL-C Statin 類 藥 物 的 降 血 脂 肪 的 效 能 和 劑 量 之 間 的 關 係, 並 未 呈 現 直 線 關 係, 而 是 曲 線 關 係 13 最 常 見 的 副 作 用 有 腸 胃 不 適 肌 肉 痛 及 肝 炎, 比 較 少 見 的 副 作 用 是 肌 肉 病 變 (myopathy), 曾 有 病 人 (<1%) 於 高 劑 量 時 出 現 肝 毒 性 且 當 lovastatin 與 nicotinic acid 或 纖 維 鹽 類 衍 生 物 (fibric acid derivatives) 併 用 時, 有 大 約 1% 的 病 人 會 發 生 肌 炎 或 肌 肉 病 變 14 Ezetimibe 為 新 一 類 之 降 血 脂 藥 物 - 膽 固 醇 吸 收 抑 制 劑 (cholesterol absorption inhibitor), 選 擇 性 抑 制 食 物 及 膽 汁 排 出 之 膽 固 醇 在 小 腸 絨 毛 之 吸 收, 不 影 響 三 酸 甘 油 脂 膽 鹽 及 脂 溶 性 維 生 素 的 吸 收 15, 單 一 使 用 ezetimibe, 每 天 服 用 一 次, 一 次 服 用 10mg, 可 降 低 LDL-C 約 16-20%; 與 statin 類 藥 物 併 用, 可 提 供 更 強 的 LDL-C 下 降 率 約 25%, 且 可 降 低 三 酸 甘 油 酯 (TG) 10-15% 及 增 加 HDL-C 2-3% 目 前, 血 管 內 皮 功 能 的 失 調 一 般 認 為 是 動 脈 粥 狀 硬 化 的 先 驅 病 變 如 能 以 天 然 健 康 食 品, 融 入 患 者 的 生 活, 作 為 預 防 及 早 期 治 療 的 替 代 方 案, 以 預 防 心 血 管 疾 病 的 發 生, 不 失 為 可 行 之 法 以 通 過 我 國 臨 床 試 驗 確 認 療 效 的 中 藥 新 藥 壽 美 降 脂 一 號, 其 主 成 份 是 紅 麴 Lactobacillus casei 則 使 用 由 法 國 進 口 之 Antibiophilus 250mg/cap, 主 成 分 為 Lactobacillus casei Variety rhamnosus 四 本 計 畫 與 醫 療 保 健 之 相 關 性 等 由 於 高 膽 固 醇 血 症 剛 開 始 通 常 沒 有 症 狀, 而 治 療 上 卻 又 需 要 長 時 間 服 藥, 患 者 的 順 應 性 便 是 一 項 很 大 的 挑 戰 原 發 性 高 血 脂 症 患 者 若 因 使 用 此 試 驗 用 藥 方 法 得 到 適 當 的 控 制, 病 患 能 預 防 疾 病 產 生, 降 低 醫 療 費 用 支 出, 減 少 因 原 發 性 高 血 脂 症 的 併 發 症, 提 升 患 者 生 活 品 質 及 身 體 心 像, 亦 可 提 升 高 血 壓 腎 臟 病 糖 尿 病 心 臟 冠 狀 動 脈 等 疾 病 預 防 保 健 工 作 之 成 效, 進 而 降 低 醫 療 費 用 的 支 出, 讓 國 內 的 衛 生 政 策 邁 向 另 一 新 的 里 程 碑 117

10 貳 材 料 與 方 法 一 收 案 條 件 本 研 究 將 收 集 原 發 性 高 血 脂 症 患 者 共 60 位 ( 一 ) 納 入 條 件 : 歲 以 上 之 成 年 人 2. 病 人 低 密 度 脂 蛋 白 (LDL) 大 於 160mg/dl 或 三 酸 甘 油 脂 (TG) 大 於 200mg/dl ( 二 ) 排 除 條 件 : 1. 懷 孕 或 正 授 乳 的 婦 女 2. 進 入 篩 選 期 前 需 Washout 30 day: 如 HMG-CoA 還 原 酵 素 抑 制 劑 (HMG-CoA reductase inhibitor) 膽 酸 結 合 劑 (bile acid binding resins) 菸 鹼 酸 (nicotinic acid 或 niacin) Fibrate 類 衍 生 物 (fibrate derivatives) 或 膽 固 醇 吸 收 抑 制 劑 (cholesterol absorption inhibitor) 3. 進 入 篩 選 期 前 30 天 內 有 改 變 西 藥 降 血 糖 之 用 藥 : 如 有 服 用 α-glucosidase inhibitor Sulfonylurea Biguanide Meglitinide 或 PPAR agonists 4. 進 入 篩 選 期 前 30 天 內 有 服 用 其 他 保 健 食 品 5. 生 化 值 異 常 : 血 清 肌 肝 酸 3.0 mg/dl;gpt 超 過 正 常 數 值 5 倍 二 試 驗 藥 品 : ( 一 ) 研 究 用 藥 及 對 照 劑 (Placebo) 之 製 備 : 由 GMP 藥 廠 專 門 製 造 ( 二 ) 研 究 用 藥 : 1. 壽 美 降 脂 一 號 使 用 由 原 製 造 此 藥 品 之 中 藥 廠 商 產 品 臺 灣 第 一 個 通 過 臨 床 試 驗 的 中 藥 新 藥 壽 美 降 脂 一 號 已 上 市, 衛 生 署 認 可 的 適 應 症 是 降 低 高 膽 固 醇 血 症 高 三 酸 甘 油 脂 血 症, 效 能 為 消 食 活 血 健 脾 燥 胃 衛 生 署 中 醫 藥 委 員 會 表 示, 壽 美 降 脂 一 號 主 成 份 是 紅 麴, 對 於 心 血 管 患 者 具 有 功 效, 是 臺 灣 第 一 個 依 照 西 藥 研 發 原 則, 通 過 臨 床 試 驗 確 認 療 效 的 中 藥 新 藥, 代 表 中 藥 研 發 進 入 新 領 域 壽 美 降 脂 一 號 衛 署 藥 製 第 號 Lactobacillus casei 則 使 用 由 一 成 藥 品 股 份 有 限 公 司 代 理 進 口 法 國 Antibiophilus 250mg/cap, 主 成 分 為 Lactobacillus casei Variety rhamnosus, 衛 署 藥 輸 字 第 號 2. 對 照 組 用 藥 (Lactobacillus casei 安 慰 劑 ): 以 澱 粉 代 替 118

11 3. 劑 量 劑 型 : 3.1 壽 美 降 脂 一 號 膠 囊 : 每 天 2 次 ( 早 晚 飯 後 30 分 鐘 內 服 用 各 一 次 ), 每 次 各 1 顆 3.2 Lactobacillus casei 膠 囊 : 每 天 2 次 ( 早 晚 飯 後 30 分 鐘 內 服 用 各 一 次 ), 每 次 各 2 顆 4. 服 用 方 法 : 配 溫 開 水 口 服 5. 治 療 期 :8 週 6. 延 伸 追 蹤 期 :4 週 三 步 驟 : 符 合 收 案 條 件 之 60 位 受 試 者 於 簽 署 同 意 書 後, 隨 機 分 派 為 治 療 組 (30 名 ) 或 對 照 組 (30 名 ), 受 試 者 需 於 第 週 返 回 門 診 追 蹤 在 第 週 的 回 診, 除 身 體 例 行 性 檢 查 ( 血 壓 身 高 體 重 ) 外, 還 需 要 接 受 生 活 品 質 量 表 (short form [SF-36]) 排 便 功 能 之 評 估 亦 需 進 行 肝 腎 功 能 安 全 (creatinine GPT) 低 密 度 脂 蛋 白 (LDL-cholesterol) 高 密 度 脂 蛋 白 (HDL-cholesterol) 血 中 總 膽 固 醇 值 (total cholesterol) 三 酸 甘 油 脂 (TG) 血 糖 (glucose) 尿 酸 (uric acid) 高 敏 感 性 C 反 應 蛋 白 (Hs-CRP) 評 估, 在 第 0 及 8 週 的 回 診, 還 需 接 受 血 小 板 聚 集 功 能 試 驗 (platelet aggregation function tes) 及 中 醫 溼 熱 證 問 卷 評 估 因 此, 受 試 者 於 三 個 月 的 試 驗 中, 總 共 需 抽 血 4 次, 每 次 抽 血 約 20 c.c. ( 包 含 5c.c. 的 stock serum 研 究 用 血 ) 以 及 評 估 副 作 用 及 不 良 事 件 (Adverse Event,AE) 嚴 重 不 良 事 件 (Serious Adverse Event,SAE) 四 樣 本 數 評 估 及 統 計 分 析 : 本 研 究 的 分 析 族 群 將 採 intend-to-treat analysis, 因 此, 分 析 族 群 的 定 義 以 隨 機 分 配 之 治 療 為 主 (based on their assigned treatment), 而 不 論 其 醫 囑 性 (compliance), 此 方 法 的 優 點 為 較 不 會 有 高 估 療 效 的 情 形, 較 無 未 遵 醫 囑 的 誤 差 (non-compliance bias) 未 遵 醫 囑 通 常 為 非 隨 機 的, 其 發 生 情 況 通 常 在 研 究 進 行 中, 病 人 因 獲 得 介 入 有 效 的 訊 息 而 改 採 用 介 入 之 治 療, 若 將 此 類 病 人 排 除, 將 導 致 無 法 偵 測 有 效 介 入 之 療 效, 若 以 實 際 接 受 治 療 (actual treatment) 為 分 析 的 分 組, 則 將 高 估 療 效 而 採 用 intend-to-treat analysis 的 方 式 下, 若 能 偵 測 介 入 的 療 效, 表 示 此 介 入 至 少 有 此 研 究 所 偵 測 到 的 效 應, 此 方 法 亦 為 臨 床 試 驗 分 析 中 最 常 被 使 用 的 ( 一 ) 評 估 各 組 病 人 研 究 起 始 點 疾 病 相 關 變 項 的 可 比 較 性 (baseline characteristics comparison), 當 療 效 指 標 變 項 為 連 續 時, 如 症 狀 量 表 分 數, 將 採 t 檢 定 或 Wilcoxon rank-sum 檢 定 ( 將 視 變 項 的 分 布 情 形 ), 若 療 效 指 標 為 類 別 變 項, 則 將 採 用 卡 方 檢 定 或 Fisher s exact 119

12 test ( 當 沒 有 超 過 百 分 之 二 十 格 子 的 期 望 值 小 於 5 時 將 採 用 卡 方 檢 定, 但 當 有 超 過 百 分 之 二 十 格 子 的 期 望 值 小 於 5 時 將 採 用 Fisher s exact test) ( 二 ) 評 估 不 同 時 間 點 各 組 療 效 指 標 的 差 異, 當 療 效 指 標 變 項 為 連 續 時, 將 採 共 變 數 分 析 或 複 回 歸 ( 當 只 有 一 個 連 續 的 干 擾 因 子 時 使 用 共 變 數 分 析 ) ( 三 ) 樣 本 數 之 估 算 (Samples size estimation): 本 研 究 之 第 一 誤 差 設 定 為 0.05, 第 二 誤 差 設 定 為 0.1, 即 本 研 究 之 檢 力 為 0.8, 主 要 療 效 指 標 為 低 密 度 膽 固 醇 (LDL), 治 療 組 (μ1) 預 期 由 200mg/dl 降 至 160mg/dl, 對 照 組 (μ2) 預 期 由 200mg/dl 降 至 190mg/dl, 標 準 差 (SD) 設 定 為 35mg/dl, 則 (μ1-μ2)/sd+ 預 估 退 出 率 25% 的 樣 本 數, 計 算 出 所 需 的 總 樣 本 數 為 60 人 本 研 究 預 定 收 集 60 位 病 人, 第 一 年 底 期 中 分 析 再 評 估 第 二 年 之 樣 本 數, 樣 本 數 應 有 充 分 的 統 計 檢 力 來 偵 測 此 效 應 上 述 評 估 資 料 以 SPSS 10.0 套 裝 軟 體 計 算 p 值,p 值 小 於 0.05 者 為 具 統 計 學 上 意 義 120

13 參 結 果 圖 1 為 研 究 收 案 流 程 圖, 在 試 驗 期 間 中, 總 共 篩 選 了 60 位 受 試 者, 因 此 總 共 有 60 位 受 試 者 被 納 入 於 研 究, 並 隨 機 分 派 於 治 療 組 (n = 30) 與 安 慰 劑 組 (n = 30) 經 過 12 週 後, 完 成 全 部 試 驗 程 序 (completed study) 者, 治 療 組 為 25 位, 安 慰 劑 組 為 24 位 治 療 組 因 故 退 出 試 驗 者 為 5 位, 原 因 分 別 為 : 3 位 因 不 良 事 件 (Adverse Event,AE;3 位 GI-upset) 及 2 位 撤 回 同 意 (withdrew consent) 而 退 出 試 驗 ; 安 慰 劑 組 方 面 因 故 退 出 試 驗 者 為 6 位, 原 因 分 別 為 :3 位 因 不 良 事 件 (Adverse Event,AE;GI-upset Hepatitis Palpitations) 2 位 撤 回 同 意 (withdrew consent) 及 1 位 因 失 去 追 蹤, 而 退 出 試 驗 經 採 用 LOCF 法 ( 使 用 最 後 一 筆 測 量 值 替 代 ;last observation carried forward) 插 補 遺 漏 值, 最 後 本 研 究 實 際 分 析 人 數 為 55 位 表 一 為 所 有 受 試 者 第 0 週 之 人 口 學 基 本 特 徵 身 體 測 量 值 生 化 檢 驗 值 排 便 功 能 評 估 與 SF-36 生 活 品 質 量 表 之 分 佈 情 形 在 人 口 學 基 本 特 徵 部 分, 治 療 組 平 均 年 齡 為 48.8 歲, 安 慰 劑 組 平 均 年 齡 為 45.6 歲, 未 達 到 統 計 上 之 顯 著 差 異 (p = 0.287) 兩 組 男 性 比 例 為 治 療 組 22 位, 安 慰 劑 組 19 位, 未 達 到 統 計 上 顯 著 之 差 異 (81.5% versus 67.9%, χ 2 test, p = 0.246) 在 身 體 測 量 值 部 分, 治 療 組 平 均 體 重 為 72.5 公 斤 BMI 為 27.7 平 均 收 縮 壓 為 mmhg 平 均 舒 張 壓 85.6 mmhg 平 均 血 壓 mmhg; 而 安 慰 劑 組 平 均 體 重 為 70.3 公 斤 BMI 為 27.6 平 均 收 縮 壓 為 mmhg 平 均 舒 張 壓 79.1 mmhg 平 均 血 壓 97.5 mmhg, 兩 組 在 以 上 數 值 部 分 皆 未 達 統 計 上 顯 著 差 異 (p = ) 治 療 組 低 密 度 脂 蛋 白 為 mg/dl 高 密 度 脂 蛋 白 為 41.0 mg/dl 三 酸 甘 油 脂 mg/dl; 而 安 慰 劑 組 低 密 度 脂 蛋 白 為 mg/dl 高 密 度 脂 蛋 白 為 40.5 mg/dl 三 酸 甘 油 脂 mg/dl, 兩 組 在 以 上 數 值 部 分 皆 未 達 統 計 上 顯 著 差 異 (p = ) 其 他 實 驗 室 生 化 值 檢 驗 數 值 如 表 一 呈 現 表 二 加 入 試 驗 前 ( 第 0 週 ) 與 接 受 試 驗 第 4 週 後 二 組 差 異 比 較, 以 第 4 週 分 別 減 去 第 0 週 之 平 均 差 異 顯 示, 正 值 代 表 相 較 於 第 0 週 數 據 為 增 加, 負 值 代 表 相 較 於 第 0 週 數 據 為 減 少 ; 低 密 度 脂 蛋 白 (LDL-cholesterol) 總 膽 固 醇 值 (total cholesterol) 及 三 酸 甘 油 脂 (TG) 均 有 降 低, 但 無 顯 著 差 異 ; 其 治 療 組 之 指 標 相 較 於 安 慰 劑 組 可 見 其 分 數 降 低 之 趨 勢, 兩 組 之 指 標 皆 未 達 統 計 上 之 顯 著 差 異 表 三 加 入 試 驗 前 ( 第 0 週 ) 與 接 受 試 驗 第 8 週 後 二 組 差 異 比 較, 以 第 8 週 分 別 減 去 第 0 週 之 平 均 差 異 顯 示, 正 值 代 表 相 較 於 第 0 週 數 據 為 增 加, 負 值 代 表 相 較 於 第 0 週 數 據 為 減 少 ; 總 膽 固 醇 值 (total cholesterol) 及 三 酸 甘 油 121

14 脂 (TG) 均 有 降 低, 雖 無 顯 著 差 異, 但 可 見 其 趨 勢 ; 其 治 療 組 之 指 標 相 較 於 安 慰 劑 組 可 見 其 分 數 降 低 之 趨 勢, 兩 組 之 指 標 皆 未 達 統 計 上 之 顯 著 差 異 表 四 為 加 入 試 驗 前 ( 第 0 週 ) 與 接 受 試 驗 第 12 週 後 二 組 差 異 比 較, 以 第 12 週 分 別 減 去 第 0 週 之 平 均 差 異 顯 示, 正 值 代 表 相 較 於 第 0 週 數 據 為 增 加, 負 值 代 表 相 較 於 第 0 週 數 據 為 減 少 ; 治 療 組 之 指 標 相 較 於 安 慰 劑 組 可 見 其 分 數 降 低 之 趨 勢 兩 組 之 指 標 達 統 計 上 顯 著 差 異 者 為 第 十 二 週 治 療 組 平 均 舒 張 壓 降 低 2.7 mmhg 安 慰 劑 組 平 均 舒 張 壓 增 加 4.4 mmhg, 在 二 組 統 計 上 達 顯 著 差 異 (p = 0.021) 其 他 實 驗 室 生 化 值 檢 驗 如 表 二 呈 現 ; 在 二 組 中 皆 無 顯 著 增 加 或 降 低 之 差 異 存 在 122

15 肆 討 論 將 進 入 試 驗 前 分 析 結 果 呈 現 如 表 一 及 表 二, 治 療 組 與 安 慰 劑 兩 組 之 指 標 達 統 計 上 顯 著 差 異 者 為 第 十 二 週 治 療 組 平 均 舒 張 壓 降 低 2.7 mmhg 安 慰 劑 組 平 均 舒 張 壓 增 加 4.4 mmhg, 在 二 組 統 計 上 達 顯 著 差 異 (p = 0.021) 伍 結 論 與 建 議 此 計 畫 為 二 年 期 之 連 續 性 計 畫, 表 一 至 表 四 呈 現 試 驗 前 後 分 析 結 果, 治 療 組 與 安 慰 劑 組 於 降 血 脂 皆 無 顯 著 差 異, 待 進 一 步 分 析 其 機 轉 作 用 將 於 第 二 年 做 分 析, 目 前 試 驗 皆 在 進 行 統 計 分 析, 將 於 期 末 成 果 報 告 審 查 會 議 中 詳 細 說 明 誌 謝 本 研 究 計 畫 承 蒙 行 政 院 衛 生 署 中 醫 藥 委 員 會 計 畫 編 號 CCMP97-RD-043 提 供 經 費 贊 助, 使 本 計 畫 得 以 順 利 完 成, 特 此 誌 謝 123

16 陸 參 考 文 獻 1. Steinberg D. Lipoprotein and atherosclerosis: a look back and alook ahead. Arteriosclerosis. 1983;3: Santosh, K. and Narayan, S. P The metabolism of γ-amino-butyrate(gaba) in fungi. Mycological Res. 1997;101: Endo A., Komagata D., Shimada H. Monacolin M, a new inhibitor of cholesterol biospthesis. J. Antibiotics 1986, 39, Endo A., Hasumi K., Nakamura T., Kunishima M., Masuda M. Dihydromonacolin L and monacolin Y new metabolites those inhibit cholesterol biosynthesis. J. Antibiotics 1985a, 38, Endo A., Hasumi K., Negishi S. Monacolins J and L, new inhibitors of cholesterol biosynthesis produced by Monascus ruber. J. Antibiotics 1985b, 38, Endo, A., Nigishi, S. Monacolins J and L, new inhibitors ofcholesterol biosynthsis produced by Monascus rubber. J. Antibiot. 1985;38: Parvez1 S., Malik K.A., S. Kang Ah, et al. Probiotics and their fermented food products are beneficial for health. Journal of Applied Microbiology. 2006;100: Ouwehand, A.C., Salminen, S.,Isolauri, E. Probiotics: an overview of beneficial effects. Antonie Van Leeuwenhoek 2002;82: Nielson, J. W., and S. E. Gilliland. Variations in cholesterol assimilation by individual strains of Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus casei from human intestines. J.Dairy Sci. 1985;68(Suppl. 1): Kobashi, K., I. Nishizawa, T. Yamada, and J. Hase.. A new hydrolase specific for taurine conjugates of bile acids. J.Biochem.1978 ;84: Lipid Research Clinics Program The lipid research clinics coronary primary prevention trial results. II. The relationship of reduction in incidence of coronary heart disease to cholesterol lowering. JAMA 1984;251: Davignon J, Montigny M, Dufour R. HMG-CoA reductase inhibitors: a look back and a look ahead. Can J Cardiol 1992; 8: Comparative efficacy and safety of pravastatin and cholestyramine alone and combined in patients with hypercholesterolemia. Arch Intern Med 1993; 153: Illingworth DR, Tobert JA. A review of clinical trials comparing HMG-CoA 124

17 reductase inhibitors. Clin ther 1994; 16: Van Heek M, Farley C, Compton DS, et.al: Comparison of the activity and disposition of the novel cholesterol absorption inhibitor, SCH58235, and its glucuronide, SCH Br J Pharm. 2000; 129: Decrease in fibrinogen and LDL-cholesterol levels upon supplementation of diet with Lactobacillus plantarum in subjects with moderately elevated cholesterol. Atherosclerosis Apr;137(2): No abstract available. 17. Effect of fermented milk (yogurt) containing Lactobacillus acidophilus L1 on serum cholesterol in hypercholesterolemic humans. J Am Coll Nutr Feb;18(1): Effects of dietary arabinogalactan on gastrointestinal and blood parameters in healthy human subjects. J Am Coll Nutr Aug;20(4): Effects of milk products fermented by Bifidobacterium longum on blood lipids in rats and healthy adult male volunteers. J Dairy Sci Jul;86(7): A double-blind placebo-controlled study of the effects of Lactobacillus acidophilus on plasma lipids. Eur J Clin Nutr Jun;59(6): Effect of Lactobacillus fermentum on serum lipids in subjects with elevated serum cholesterol. Nutr Metab Cardiovasc Dis Dec;16(8): Epub 2006 Jan Probiotic capsules do not lower plasma lipids in young women and men. Eur J Clin Nutr Feb;62(2): Epub 2007 Mar 林 宜 信, 2005, 行 政 院 衛 生 署 中 醫 藥 委 員 會 委 託 研 究 成 果 分 析 ( ), 中 醫 藥 發 展 系 列 叢 書 - 九 十 三 年 度 委 辦 研 究 計 畫 成 果 發 表 會 暨 中 醫 藥 科 技 研 討 會 專 書, 頁

18 柒 圖 表 60 patients assessed for eligibility Randomized 60 patients to 2 groups 30 patients assigned to Monascaceae + Lactobacillus casei 30 patients assigned to Monascaceae + Placebo 25 patients completed study 5 patients dropout 3 due to adverse event 2 withdrew consent 24 patients completed study 6 patients dropout 3 due to adverse event 2 withdrew consent 1 lost follow-up Figure 1 Flow chart of participants. 126

19 Table 1 Baseline demographics characteristics. Monascaceae + Lactobacillus casei (n = 30) Monascaceae + Placebo (n = 30) p value Age (years) a 48.8 ± ± Gender (male %) 22 (81.5%) 19 (67.9%) Weight (kg) b 72.5 (17.0) 70.3 (17.5) Height (cm) a ± ± BMI (kg/m 2 ) a 27.7 ± ± Systolic blood pressure (mmhg) a ± ± Diastolic blood pressure (mmhg) a 85.6 ± ± Mean blood pressure (mmhg) a ± ± WBC (mm 3 ) a,c ± ± RBC (mm) b (75.0) (96.0) Hb (gm/dl) a 15.1 ± ± Ht (%) a 45.4 ± ± MCV (fl) b 89.0 (4.7) 89.3 (8.5) MCH (g/dl) b 29.7 (1.4) 29.6 (2.8) MCHC (g/dl) b 33.4 (1.8) 33.3 (1.1) Platelet (mm 3 ) b,c (82.0) (58.0) GPT (IU/l) b 30.0 (26.0) 34.5 (43.0) Creatinine (mg/dl) a 1.1 ± ± Glucose ac (mg/dl) b (11.0) (13.0) Uric acid (mg/dl) a 6.5 ± ± LDL-C (mg/dl) a ± ± HDL-C (mg/dl) b 41.0 (13.0) 40.5 (9.0) Total cholesterol (mg/dl) a ± ± TG (mg/dl) b (178.0) (151.0) Hs-CRP (mg/ml 3 ) b 0.2 (0.4) 0.3 (0.4) Col/Epi (sec) b (43.0) (37.5) Col/ADP (sec) b 78.0 (30.0) 78.5 (28.0) a mean ± SD, b median (IQR), c *

20 Table 2 Endpoints at week 4. Monascaceae + Lactobacillus casei (n = 27) Monascaceae + Placebo (n = 28) p value Demographics Diastolic blood pressure (mmhg) a -1.3 ± ± LDL-C (mg/dl) a ± ± HDL-C (mg/dl) b 1.0 (4.0) 0.0 (5.0) Total cholesterol (mg/dl) a ± ± TG (mg/dl) b (70.0) -1.5 (96.5) Difference between week 4-0 in a mean ± SD, b p value. Table 3 Endpoints at week 8. Monascaceae + Lactobacillus casei (n = 27) Monascaceae + Placebo (n = 28) p value Demographics Diastolic blood pressure (mmhg) a -4.0 ± ± LDL-C (mg/dl) a ± ± HDL-C (mg/dl) b 0.0 (5.0) -1.0 (7.5) Total cholesterol (mg/dl) a ± ± TG (mg/dl) b (109.0) -2.0 (79.5) Difference between week 8-0 in a mean ± SD, b p value. 128

21 Table 4 Endpoints at week 12. Monascaceae + Lactobacillus casei (n = 27) Monascaceae + Placebo (n = 28) p value Weight (kg) b -1.0 (2.5) -0.8 (2.5) BMI (kg/m 2 ) a -0.3 ± ± Systolic blood pressure (mmhg) a -5.0 ± ± Diastolic blood pressure (mmhg) a -2.7 ± ± * Mean blood pressure (mmhg) a ± ± WBC (mm 3 ) a,c 3.9 ± ± RBC (mm) b -1.0 (40.0) (30.0) Hb (gm/dl) a 0.1 ± ± Ht (%) a -0.0 ± ± MCV (fl) b 0.8 (1.5) 0.1 (2.0) MCH (g/dl) b 0.3 (0.5) 0.3 (0.7) MCHC (g/dl) b 0.3 (0.9) 0.2 (0.7) Platelet (mm 3 ) b,c 2.0 (30.0) -5.0 (24.0) GPT (IU/l) b 0.0 (20.0) 0.5 (16.0) Creatinine (mg/dl) a 0.0 ± ± Glucose ac (mg/dl) b 0.0 (9.0) 1.5 (6.0) Uric acid (mg/dl) a 0.3 ± ± LDL-C (mg/dl) a ± ± HDL-C (mg/dl) b -1.0 (8.0) -2.5 (7.0) Total cholesterol (mg/dl) a ± ± TG (mg/dl) b -2.0 (108.0) -2.0 (67.0) Hs-CRP (mg/ml 3 ) b 0.0 (0.1) -0.0 (0.1) Difference between week 12-0 in a mean ± SD, b p value from Chi-square test, c *