類 症 鑑 別 表 列 如 下 : 疾 病 病 原 臨 床 症 狀 病 變 鴨 病 毒 性 肝 炎 (DVH) Picornaviridae Enterovirus 潛 伏 期 1-3 天, 一 週 齡 死 亡 率 有 95 % 四 週 齡 不 常 造 成 死 亡 肝 腫 大 瀰 漫 性 出 血 肝
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1 澎 湖 縣 家 畜 疾 病 防 治 所 病 例 報 告... 正 番 鴨 感 染 鵝 小 病 毒 症 名 第 三 名 澎 湖 縣 家 畜 疾 病 防 治 所 病 例 報 告 正 番 鴨 感 染 鵝 小 病 毒 症 (Muscovy duck infection with Goose parvovirus) 李 佳 霖 白 又 文 郭 仁 政 前 言 水 禽 小 病 毒 感 染 症 (waterfowl parvovirus infection) 為 一 高 度 傳 染 性 與 致 死 性 疾 病, 引 起 纖 維 素 性 與 壞 死 性 腸 炎, 在 許 多 國 家 都 曾 發 生 並 造 成 經 濟 上 的 嚴 重 損 失 本 病 首 先 被 描 述 於 1956 年 發 生 在 中 國 的 鵝 隻,1981 年 由 Fang 和 Wang 發 表, 之 後 並 經 Zheng 等 確 認 為 鵝 小 病 毒 (goose parvovirus, GPV) 感 染 在 1960 年 代 歐 洲 地 區 許 多 國 家 先 後 發 生 鴨 鵝 高 死 亡 率 之 疾 病, 直 至 1971 年 才 由 Schettler 證 實 為 小 病 毒 (parvovirus) 感 染,1978 年 再 確 認 並 稱 之 為 鵝 小 病 毒 在 臺 灣, 首 例 鵝 小 病 毒 感 染 症 病 例 於 1983 年 被 報 告 ; 此 外, 於 1989 年 由 正 番 鴨 分 離 到 類 似 鵝 小 病 毒 感 染 症 之 另 一 型 病 毒, 稱 為 正 番 鴨 小 病 毒 (Muscovy duck parvovirus;mdpv), MDPV 在 宿 主 性 抗 原 性 及 核 酸 序 列 上 均 異 於 前 者 GPV 對 鵝 及 正 番 鴨 均 有 高 病 原 性, 主 要 病 徵 為 腸 炎, 感 染 率 及 死 亡 率 甚 高 ;MDPV 對 鵝 隻 並 無 病 原 性, 然 所 有 鴨 品 系 對 MDPV 均 有 感 受 性, 其 特 徵 為 病 鴨 軟 腳 及 癒 後 發 育 不 良 及 短 嘴, 死 亡 率 也 高 達 70 % 以 上 病 歷 本 病 歷 發 生 於 澎 湖 縣 鄉 某 養 鴨 場, 該 場 管 理 人 員 於 99 年 6 月 24 日 通 報 本 所, 本 所 隨 即 派 員 前 往 進 行 疫 情 調 查, 全 場 鴨 隻 總 數 約 1,600 隻, 發 現 死 亡 仔 鴨 平 均 約 20 日 齡, 每 日 死 亡 數 量 約 隻, 死 亡 總 數 近 300 隻, 死 亡 率 達 18 %, 現 場 可 見 鴨 隻 群 聚 在 角 落, 下 肢 癱 軟 下 痢 及 活 力 不 佳 等 症 狀, 現 場 進 行 解 剖 2 隻 小 鴨 其 中 1 隻 無 可 見 病 變, 另 1 隻 胸 腹 腔 表 面 可 見 纖 維 素 性 包 覆 及 腸 管 變 薄 次 日 再 次 前 往 該 場 採 集 3 隻 發 病 仔 鴨 後 送 至 家 畜 衛 生 試 驗 所 確 診 臨 床 症 狀 病 禽 精 神 沈 鬱 食 慾 減 退 站 立 不 穩 ( 軟 腳 ) 及 下 痢 等 症 狀 ( 圖 1.) 肉 眼 病 變 解 剖 病 鴨 於 心 包 膜 有 混 濁 及 心 藏 外 觀 呈 現 充 血 樣 ( 圖 2.), 腸 腔 內 含 大 量 稀 薄 液 體, 腸 管 呈 間 斷 性 膨 大 ( 圖 3.), 卵 黃 囊 未 完 全 吸 收 ( 圖 4.) 組 織 病 理 在 腸 管 內 有 纖 維 素 團 塊 阻 塞, 上 皮 細 胞 壞 死 脫 落 ( 圖 5.), 且 絨 毛 有 萎 縮 脫 落 消 失 ( 圖 6.), 腸 管 內 有 單 核 炎 症 細 胞 浸 潤, 腺 窩 內 有 嗜 酸 性 核 內 包 涵 體 初 步 診 斷 初 步 的 鑑 別 診 斷 : 病 毒 性 疾 病 : 鵝 小 病 毒 感 染 症 (goose parvovirus infection) 鴨 病 毒 性 腸 炎 (duck viral enteritis) 細 菌 性 疾 病 : 家 禽 霍 亂 (fowl cholera) 傳 染 性 漿 膜 炎 (infectious serositis) 其 它 細 菌 感 染 依 據 疫 情 調 查 臨 床 症 狀 及 解 剖 肉 眼 病 變, 於 幼 齡 鴨 有 高 死 亡 率, 且 呈 現 下 痢 症 狀, 可 將 家 禽 霍 亂 做 排 除, 初 步 診 斷 為 小 病 毒 感 染 19
2 類 症 鑑 別 表 列 如 下 : 疾 病 病 原 臨 床 症 狀 病 變 鴨 病 毒 性 肝 炎 (DVH) Picornaviridae Enterovirus 潛 伏 期 1-3 天, 一 週 齡 死 亡 率 有 95 % 四 週 齡 不 常 造 成 死 亡 肝 腫 大 瀰 漫 性 出 血 肝 組 織 壞 死 灶, 膽 管 上 皮 增 生 肝 細 胞 質 嗜 酸 性 染 色 性 增 加, 內 含 空 泡 及 核 濃 縮 鵝 小 病 毒 (GPV) Parvovirus 45 日 齡 以 下 之 幼 鴨 有 脫 毛 結 膜 炎 下 痢 軟 腳 及 沉 鬱, 上 述 症 狀 出 現 後 常 於 4-8 小 時 死 亡 迴 盲 部 的 腸 腔, 有 特 徵 性 之 纖 維 素 圓 柱 團 塊 有 時 可 見 心 外 膜 炎 肝 脾 腫 大, 漿 液 纖 維 素 肝 包 炎 和 腹 膜 炎 家 禽 霍 亂 (Fowl cholera) Pasteurella multocida 急 性 : 下 痢 發 紺 慢 性 : 關 節 肉 垂 眼 窩 下 竇 等 有 乾 酪 樣 物 存 在 心 表 面 肌 胃 和 腹 部 脂 肪 有 針 點 樣 出 血 及 心 包 炎 及 氣 囊 炎 傳 染 性 漿 膜 炎 (Infectious Serositis) Riemerella anatipestifer 8 週 以 下 鴨 鵝 可 經 呼 吸 道 及 腳 部 皮 膚 感 染 但 不 經 口 傳 染 5 週 以 下 常 為 急 性 致 死 型, 病 鴨 常 於 出 現 症 狀 1-2 天 後 死 亡 有 流 鼻 涕 綠 色 下 痢 便 昏 睡 和 運 動 失 調 等 症 狀 病 鴨 有 纖 維 素 性 炎 症, 纖 維 性 心 外 膜 炎 包 含 有 單 核 和 異 嗜 細 胞 為 主 的 炎 症 細 胞 實 驗 室 檢 查 1. 細 菌 分 離 培 養 : 臟 器 釣 菌 培 養, 挑 選 可 疑 菌 落 進 行 生 化 試 驗 結 果 未 分 離 出 有 意 義 之 病 原 菌 2. 分 子 生 物 學 診 斷 : 2.1 病 毒 核 酸 之 萃 取 取 培 養 的 細 胞 病 毒 液 ( 觀 察 具 有 CPE 現 象 者 ), 或 者 欲 偵 測 病 毒 核 酸 之 臟 器 乳 劑 200µL 加 上 DNAZOL 100µL, 震 盪 30 秒, 靜 置 5 分 鐘 加 Chlorfon 200µL 震 盪 30 秒 靜 置 3 分 鐘 離 心 13,000 r.p.m 10 分 鐘 抽 700µL 上 清 液 加 700µL Isopropanol 後 靜 置 可 overnight( 若 馬 上 使 用, 則 靜 置 15 分 鐘 -20 ) 離 心 13,000 r.p.m 10 分 鐘 然 後 液 體 倒 掉, 然 後 加 75 % 酒 精 200µL ( 加 在 microcentrifige tube 管 壁 上, 以 免 DNA 被 沖 掉 ), 離 心 microcentrifige tube 頭 尖 端 朝 上,13,000 r.p.m 1-2 分 鐘, 之 後 把 液 體 抽 掉 之 後 用 50 µl 二 次 滅 菌 水 充 分 混 合, 儲 存 於 -80 備 用 2.2 聚 合 鏈 鎖 反 應 及 條 件 依 據 Limn(1996) 所 發 表, 針 對 GPV 序 列 設 計 之 引 子 對 (AL18F2 及 AL18R2) 加 以 改 良 20
3 澎 湖 縣 家 畜 疾 病 防 治 所 病 例 報 告... 正 番 鴨 感 染 鵝 小 病 毒 症 之 引 子 如 下 : AL18F2N(sense):5'- CCGGGTTGCAGGAGGTTG -3' AL18R2N(antisense):5'- AGCTACAACAACCACATC -3' 上 述 引 子 可 增 幅 出 GPV 部 分 序 列, 共 806 個 鹼 基 對 進 行 PCR 詳 細 溫 度 及 時 間 為 94 3 分 鐘, 接 著 以 秒,48 90 秒,72 90 秒, 進 行 30 個 循 環, 最 後 以 分 鐘 結 束 反 應 檢 測 結 果 可 得 預 期 的 492 bp 產 物 ( 圖 7.) 最 終 診 斷 正 番 鴨 感 染 鵝 小 病 毒 症 處 理 與 預 防 首 先 在 養 禽 場 進 行 更 完 善 的 消 毒, 並 加 強 進 出 人 員 衣 物 鞋 子 的 消 毒, 本 所 提 供 消 毒 劑 Virkon 以 1: 200 的 比 例 進 行 稀 釋, 每 週 消 毒 一 次, 並 經 過 空 舍 停 養 一 個 多 月 後, 才 再 飼 養 新 一 批 家 禽 鵝 小 病 毒 在 幼 鴨 的 疾 病 中 是 具 高 度 傳 染 性 的 病 原, 疫 苗 控 制 本 疾 病 為 最 佳 的 選 擇, 利 用 種 禽 接 種 疫 苗 產 生 移 行 抗 體, 保 護 幼 禽 避 免 感 染, 引 進 有 注 射 疫 苗 種 禽 所 產 的 幼 禽, 或 無 鵝 小 病 毒 的 孵 化 場 為 預 防 疾 病 發 生 的 重 點, 可 降 低 發 病 及 死 亡 率 在 飼 養 管 理 方 面, 若 遭 受 感 染 不 建 議 繼 續 做 種, 並 且 有 疫 情 傳 出 的 養 禽 場 應 全 面 性 做 血 清 學 的 檢 驗, 對 於 檢 測 陽 性 之 鴨 鵝, 為 避 免 成 為 潛 在 帶 原 者, 必 須 撲 殺 最 好 使 用 小 病 毒 清 淨 場 來 源 之 蛋 作 為 種 原 種 禽 免 疫 : 1. 母 鵝 以 活 毒 疫 苗 接 種 免 疫, 產 生 移 行 抗 體, 可 保 護 2-3 週 齡 內 幼 禽 2. 種 禽 接 種 不 活 化 疫 苗 1-2 ml 後, 再 隔 3-4 週 補 強 接 種 一 次, 免 疫 效 果 良 好 3. 注 射 高 度 免 疫 血 清, 亦 可 降 低 幼 禽 的 死 亡 率, 血 清 以 採 自 耐 過 本 病 4-6 週 後 之 成 禽 為 宜 疫 情 追 蹤 於 2010 年 6 月 24 日 及 7 月 30 日 拜 訪 該 場, 管 理 人 員 表 示 將 幼 鴨 隔 離 及 淘 汰, 並 依 照 本 所 建 議 處 理, 疫 情 已 獲 得 控 制 討 論 parvovirus 為 病 毒 中 最 小 的 病 毒, 完 整 病 毒 顆 粒 大 小 約 nm, 形 狀 為 球 狀 正 二 十 面 體, 不 具 封 套, 含 有 一 長 約 5-6 kb 的 線 狀 單 股 負 性 DNA 鴨 鵝 之 小 病 毒 是 屬 於 小 病 毒 科 (parvoviridae) 中 之 自 發 性 小 病 毒 屬 (autonomous parvovirus) 乃 是 導 致 水 禽 類 致 死 性 病 毒 性 腸 炎 之 元 兇 鵝 小 病 毒 感 染 症 在 禽 類 除 了 鴨 鵝, 在 種 雞 及 火 雞 呈 現 無 症 狀 感 染,GPV 主 要 感 染 鵝 與 正 番 鴨, 在 野 外 野 生 鵝 種 Canada geese (Branta canadensis) 與 Snow geese (Chenhypoborea atlantica) 均 可 檢 測 出 病 毒 感 染 GPV 對 鵝 雞 鴨 兔 子 及 天 竺 鼠 的 紅 血 球 並 不 具 血 球 凝 集 作 用 鵝 小 病 毒 (GPV) 感 染 主 要 發 生 在 三 週 齡 以 下 的 幼 鵝 和 幼 鴨, 傳 播 速 度 快, 死 亡 率 高, 由 於 不 具 封 套, 所 以 對 於 環 境 抵 抗 力 強 不 易 消 除 但 是 在 0.5 % 福 馬 林 15 分 鐘 內 即 可 破 壞 感 染 力, 與 一 般 哺 乳 類 動 物 之 小 病 毒 有 所 不 同 感 受 年 齡 對 此 疾 病 很 重 要, 多 發 生 在 三 週 齡 以 下, 在 孵 化 室 一 週 齡 以 下 幼 禽 死 亡 率 可 達 100 % 三 週 齡 以 上 感 染 率 依 然 很 高, 但 死 亡 率 可 降 至 10 % 鵝 小 病 毒 症 在 鴨 或 鵝 傳 播 方 式 主 要 藉 由 糞 口 途 徑 感 受 性 高 之 幼 禽 感 染 途 徑, 主 要 為 母 禽 耐 過 之 後, 介 蛋 垂 直 感 染 耐 過 之 水 禽, 仍 潛 伏 帶 毒, 在 孵 化 舍 及 幼 禽 之 間 傳 播 疾 病 感 染 此 病 毒 之 鴨 或 鵝 會 產 生 流 鼻 水 食 慾 下 降 軟 腳 白 色 下 痢 等, 眼 瞼 紅 腫, 在 此 階 段 的 鴨 鵝, 有 些 會 觀 察 到 由 舌 到 口 腔 會 覆 蓋 一 層 纖 維 性 偽 膜 耐 過 動 物 會 生 長 遲 緩 全 身 或 局 部 脫 毛, 脫 毛 區 集 中 在 頸 之 背 後 以 下, 露 出 的 皮 膚 明 顯 變 紅, 之 後 會 慢 慢 長 出 腹 腔 內 有 腹 水 的 蓄 積, 使 病 鴨 病 鵝 形 成 企 鵝 狀 的 走 路 姿 勢 臺 灣 的 病 例 中, 小 病 毒 感 染 後, 曾 觀 察 到 鴨 喙 變 短 的 情 形 死 後 剖 檢 可 觀 察 到 的 肉 眼 病 21
4 變方面 急性死亡的病鵝常出現心尖鈍圓 肝臟 脾臟 胰臟鬱血腫脹的變化 隨著病程的 拉長 所顯現出的臟器病變會更多變 可能會見到肝包炎及心包炎 肺水腫以及卡他性的腸 炎 組織病理方面 主要出現的病灶位於心臟 平滑肌細胞 腸道以及肝臟 可見嗜酸性的 包含體分布 並出現細胞壞死及脂肪浸潤的現象 通常GPV 以10-15 日之鵝或正番鴨胚胎蛋中 培養 由尿囊腔接毒 也可在鵝或正番鴨之纖維芽母細胞 鵝胚胎肝臟或者正番鴨腎臟細胞 中生長 接毒後約3-5 日開始產生病變 圖1. 下痢症狀 圖2. 心臟外觀呈現充血樣 圖3. 腸管膨大 腸管壁變薄 圖4. 腸管潮紅 卵黃囊未完全吸收 圖5. 腸管上皮細胞壞死脫落 纖維素物質蓄積 22 圖6. 絨毛有萎縮脫落
5 澎 湖 縣 家 畜 疾 病 防 治 所 病 例 報 告... 正 番 鴨 感 染 鵝 小 病 毒 症 M M 圖 7. Lane M:marker Lane + :Positive control Lane 2 :Kidney Lane 3 :Heart Lane 4 :Liver Lane - :Negative control 參 考 文 獻 1. 朱 純 燕 水 禽 類 小 病 毒 蛋 白 基 因 之 分 子 選 殖 及 抗 原 性 分 析 中 山 大 學 博 士 論 文 高 雄 臺 灣 呂 榮 修 禽 病 診 斷 彩 色 圖 譜 中 華 民 國 養 雞 協 會 台 北, 林 茂 勇 宋 華 聰 鵝 病 毒 性 腸 炎 禽 病 診 治 許 靜 侖 台 灣 地 區 鴨 小 病 毒 與 鵝 小 病 毒 之 抗 體 力 價 調 查 與 病 毒 在 病 禽 體 內 之 分 佈 研 究 中 興 大 學 碩 士 論 文 許 媺 宜 正 番 鴨 小 病 毒 之 宿 主 範 圍 分 析 及 水 禽 小 病 毒 在 野 外 發 生 情 形 台 灣 大 學 碩 士 論 文 張 照 夫 蔡 信 雄 尤 碧 豔 肆 虐 本 省 之 鵝 病 毒 性 腸 炎 台 灣 畜 牧 獸 醫 學 會 會 報 42: 37-46, Gough RE. Goose parvovirus infection. In:B.W.Calnek, H.J. Barnes, C. W. Beard, W. M. Reidand H.W. Yoder, Jr. eds. Diseases of poutry, 10th ed. Iowa State University Press. Ames, Iowa Kisary J. Some growth characteristics of goose parvovirus strain B".Acta Vet Acad Sci Hung 24: , Limn CK, Yamada T, Nakamura M, Takehara K. Detection of Goose parvovirus genome by polymerase chain reaction: distribution of Goose parvovirus in Muscovy ducklings. Virus Res 42: , Lu YS, Lin DF, Lee YL, Liao YK, Tsai HJ. Infectious bill atrophy syndrome caused by parvovirus in a co-outbreak with duck viral hepatitis in ducklings in Taiwan. Avian Dis 37: , Schettler CH. Virus hepatitis of geese. II. Host range of goose hepatitis virus. Avian Dis 15: ,
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6-1-1極限的概念
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