标题
|
|
|
- 轰 喻
- 5 years ago
- Views:
Transcription
1 第 37 卷第 4 期 2018 年 7 月 华中农业大学学报 JuHuzhgAguuUvy V.37 N.4 Juy2018,70~77 人表皮生长因子融合蛋白在干酪乳杆菌中的表达 汪舒庆葛向阳陈正军 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室, 武汉 摘要 以干酪乳杆菌作为传递载体, 构建表达人表皮生长因子的重组干酪乳杆菌, 探讨原位表达特定蛋白 的可行性. 采用 SOEPCR 合成人表皮生长因子序列, 克隆到干酪乳杆菌表达载体 pelwh, 构建 pelwhg heg 重组质粒, 将该质粒电转化干酪乳杆菌宿主, 采用 Wb 及间接免疫荧光检测目的蛋白的表达, 并通过细胞增殖实验验证目的蛋白的生物学活性. 结果表明 : 在重组菌的细胞表面及培养液上清中均检测到 SG pagheg 融合蛋白, 分子质量约 55ku; 细胞增殖实验显示 SpAGhEG 融合蛋白及干酪乳杆菌上清均能显著促进 NIH/3T3 细胞的增殖. 关键词 干酪乳杆菌 ; 人表皮生长因子 ;SpAGhEG 融合蛋白 ; 细胞增殖 中图分类号 Q939.9 文献标识码 A 文章编号 1000G2421(2018)04G0070G08 肠道微生物群在调控营养吸收 抑制病原菌定 植及刺激粘膜免疫等方面对宿主健康有重要影响. 作为人及哺乳动物胃肠道的优势菌群, 乳酸菌 (LAB) 能抑制病原菌对肠道上皮的粘附, 预防炎 症 [1], 因此能有效预防肠道疾病. 乳酸菌能降低患 某些感染性疾病的风险, 如腹泻及呼吸道感染 [2G3]. 研究表明干酪乳杆菌可刺激动物天然免疫 [4], 或作 为佐剂以增强疫苗的免疫效果 [5]. 干酪乳杆菌群有 3 类 : 干酪乳杆菌 副干酪乳杆 菌及鼠李糖乳杆菌 [6]. 大量的临床研究证实, 对于 肠道功能紊乱的病人, 饮用含干酪乳杆菌的饮品后, 能带来显著的益生效果, 如预防抗生素相关性腹泻 (AAD) 及艰难梭菌所引起的感染 [7G9]. 此外, 对于 主要由轮状病毒引起的儿童急性腹泻, 干酪乳杆菌 处理组能显著缩短恢复时间 [10]. 干酪乳杆菌具有 耐受胃酸及胆汁 能通过消化道到达肠道并定植存 [11] 活的特性, 因此, 是肠道蛋白原位表达的理想 载体 [12]. 以乳酸菌作为宿主的蛋白表达系统是近年来的 研究热点, 包括乳酸乳球菌的 NICE 系统 [13], 植物 乳杆菌 [14] 干酪乳杆菌的整合表达系统 [15]. 某些 病毒抗原已在乳酸菌中成功表达, 如轮状病毒 VP8 [16] [17] 蛋白 乳头瘤病毒 16 型 E7 抗原, 这些重组抗原能有效刺激免疫反应. 乳酸菌在传递病原抗原 小分子活性肽等方面展现出重要研究意义和应用价值. 笔者所在实验室前期构建的干酪乳杆菌窄宿主表达系统 pelx 质粒因其特定的宿主范围, 如干酪乳杆菌及副干酪乳杆菌, 保证了目标基因表达的定 [18] 向性和良好的基因安全性, 因此, 可通过该表达系统表达特定蛋白以增强粘膜免疫的治疗效果. 表皮生长因子是一种广泛存在于人或其他动物体内的小分子多肽, 在调控细胞生长 增殖及分化方 [19] 面发挥着重要作用 ; 应用于外伤治疗及辅助肠道 [20] 感染修复中, 效果显著. 随着基因工程技术的发展, 表皮生长因子已经在多种宿主菌中得到表达. 目前研究较多的是大肠杆菌表达系统和巴斯德毕赤酵母表达系统, 但大肠杆菌表达系统易形成包涵体 内毒素去除困难, 巴斯 [21] 德毕赤酵母不是肠道定植菌, 乳酸菌表达系统的 [22] 优势逐渐显现出来. 本研究将 heg 基因克隆到 pelwh 中, 该载体以 pelx 为基础, 以 SpA 蛋白作为信号进行表 [23] 面展示, 重组质粒转化干酪乳杆菌后,SpAG heg 融合蛋白在细胞表面表达并分泌到培养液上 收稿日期 :2017G05G09 基金项目 : 中央高校基本科研业务费专项 ( PY038) 汪舒庆, 硕士研究生. 研究方向 : 乳酸菌分子生物学.EGm:wgq2011@126.m 通信作者 : 陈正军, 副教授. 研究方向 : 乳酸菌基因工程.EGm:Zhgju.h@gm.m
2 第 4 期汪舒庆等 : 人表皮生长因子融合蛋白在干酪乳杆菌中的表达 71 清, 通过细胞实验验证融合蛋白的生物学活性, 旨在 为重组干酪乳杆菌应用于粘膜免疫活菌疫苗传递载 体提供依据和方法. 北京全式金生物技术有限公司 ; 小量质粒 DNA 提 取试剂盒和小量 PCR 酶切 / 产物回收试剂盒购自美 国 Omg 公司 ; 抗 EG 抗体购自 Ph 中国 1 材料与方法 1.1 材料 1) 菌株 质粒和培养基. 研究中用到的菌株和质粒见表 1. 干酪乳杆菌菌株在 MRS 培养基中 37 静置培养, 大肠杆菌在 LuGB(LB) 培养基中 37 振荡培养. 选择培养基添加 100μg/mL 的氨苄青霉素或 100μg/mL 的红霉素. 2)NIH/3T3 细胞. 来源于中国科学院武汉病毒所. 3) 主要试剂和仪器. 限制性内切酶 T4DNA 连接酶 DNA Mk 和 P Mk 购自美国 m 公司 ;Pu DNA 聚合酶和 dntp 购自 分公司 ; 抗 HGg 抗体购自碧云天生物技术研究所 ; 辣根过氧化物酶底物显色试剂盒购自美国 BG Rd 公司 ;EG 蛋白标准品购自美国 ThmhG S 公司 ;MTS 购自美国 Pmg 公司 ; 细胞电转仪购自德国 Eppd 公司, 高压细胞破碎仪购自德国 Sm 公司 ; 酶标仪购自美国 BG Tk 公司. 1.2 引物设计用 Pm5.0 软件设计 heg 基因 (GBk N.A ) 引物对, 目的基因的系列引物及载体 pelwh 的上下游引物见表 2, 目的基因采用 NⅠ KpⅠ 双酶切位点. 表 1 本研究所用的菌株和质粒 Tb1 B,pmduzdhudy 菌株或质粒 Spmd 用途 App 来源 Su 菌株 S 质粒 Pmd L. MCJΔ1 E.JM109 转化表达宿主 Tm/Exph 转化表达宿主 Tm/Exph [18] TKR pelwh 克隆表达载体 Cg/Expv [23] pelwhgheg 重组质粒 Rmbpmd 本研究 Thwk 表 2 本研究所用的引物 Tb2 Pmquuzdhudy 引物名称 Pmm 1 R1 R2 R3 ERⅠGPpAG BmHⅠGTGR 序列 Squ(5 3 ) CATGCCATGGAACTCTGATTCCGAATGTCCTTTGTCACATGACGGTTACTGTTTACACG CAGGCGTATTTGTCCAAAGCCTCGATATACATACAGACTCCATCGTGTAAACAGTAACC ACGATATTGGCATCTTTCACCAATGTAGCCGACAACGCAATTACAGGCGTATTTGTCCA GCGGGGTACCTTATCTCAACTCCCACCACTTAAGATCACGATATTGGCATCTT CCGGGAATTCAAGCGGTAGGTGAAATATTAC GGCCGGATCCAGCTTGCGTTTGATTTTC 1.3 重组质粒的构建与转化子的获得 1)hEG 基因的合成. 用 1 R1 R2 R3 引物经 3 轮 SOE PCR [24] 扩增得到 heg 片段.SOE PCR 扩增如下 : 第 1 轮 PCR, 以 1 R1 引物进行链延伸反应 ; 第 2 轮 PCR, 用 1 R2 引物, 以第 1 轮 PCR 产物为模板进行链延伸反应 ; 最后, 用 1 R3 引物, 以第 2 轮 PCR 产物为模板进行链延伸反应, 获得重组 heg 目的片段.PCR 反应条件为 :94 5m,94 30,50,30,72 1 m,30 个循环 ;72 延伸 10m. 2)pELWHGhEG 载体的构建. 用 N Ⅰ KpⅠ 双酶切 heg 片段后与同样双酶切的质粒 载体 pelwh 酶连构建重组质粒 pelwhgheg, 转化大肠杆菌 JM109 感受态细胞. 阳性克隆子抽取质粒经过测序鉴定无误后, 按照文献 [18] 的方法制备 L. MCJΔ1 感受态细胞及进行 L. MCJΔ1 的电转化. 1.4 SpAGhEG 融合蛋白在干酪乳杆菌的表达鉴定 1)W b 鉴定. 重组质粒 pelwhg
3 72 华中农业大学学报第 37 卷 heg 转化 L. MCJΔ1 感受态细胞, 挑取阳性 D 值. 克隆转接至 5 ml MRS 培养基中, 培养过夜. 以 L. MCJΔ1 及携带空载 pelwh 的重组菌 1.7 统计学分析实验数据采用 Gphpd 进行多重 检验. L./pELWH 为阴性对照, 菌体培养至相同 D600, 分别收集 2 ml 培养液用于压力破碎 提取表 2 结果与分析 [23] 层蛋白 培养液上清, 取 15μL 样品进行 SDSG [18] PAGE 和 Wb 分析.pELX 表达系统 2.1 干酪乳杆菌转化子的获得构建的 pelwhgheg 重组质粒结构如图 1 所 是低拷贝质粒表达系统, 在 SDSGPAGE 凝胶上无法直接看到目标条带. 用抗 EG 抗体及抗 HGg 抗体检测融合蛋白的表达. 2) 间接免疫荧光检测. 培养 L. MCJΔ1 示, 经测序鉴定确保无误. 重组质粒电转化干酪乳杆菌后, 转化子经 PCR 及测序鉴定确保质粒的导入后, 成功构建重组干酪乳杆菌菌株 L./pELG WHGhEG. L./pELWH L./pELWHGhEG 至 D600=3.0, 取 500μL 菌液,3000/m 离心 5m, 用无菌 PBS 洗 涤菌体沉淀,3000/m 离心 5 m, 弃上清, 重复 3 次. 用含 5%BSA 的 PBS 溶液封闭 1h, 无菌 PBS 重复洗涤菌体沉淀 3 次. 加入 2.5%BSA 稀释的抗 EG 抗体, 稀释比例为 1 200, 重悬混匀,37 水 浴 3h,3000/m 离心 5m,PBS 洗涤 3 次, 弃上 清. 加入 200μL2.5%BSA 稀释的 ITC 标记的山 羊抗兔荧光二抗, 稀释比例为 1 200, 重悬混匀后, 37 水浴 1h, 无菌 PBS 重复洗涤菌体沉淀 3 次. 菌体沉淀用 200μLPBS 溶液重悬, 取适量进行涂 片, 避光使其自然干燥, 在共聚焦显微镜下观察菌体 的荧光反应. 1.5 SpAGhEG 的最佳分泌表达量测定 收集不同生长时期的 L./pELWHGhEG 图 1 pelwhgheg 的基因图谱 培养液上清, 取 15μL 样品进行 Wb 分析. g.1 GmppELWHGhEG 1.6 融合蛋白的细胞活性测定 2.2 W b 检测 SpAGhEG 融合蛋白的 MTT 法用于测定 SpAGhEG 的生物活性. 表达 L. MCJΔ1 L./pELWH L./pELG WHGhEG 培养至 D600=3.0, 取不同稀释倍数的培养液上清用于细胞增殖实验. 样品均以 2 倍梯度稀释,EG 标品制备成 40g/mL 至 0.6g/mL 的系列浓度梯度. 培养液上清从 10 倍稀释开始, 形成 10~1280 倍的系列稀释梯度. 取对数生长期的 NIH/3T3 细胞, 用含 10% 胎牛血清的 DMEM 完全培养液配制成 /ml 的细胞悬液, 接种于 96 孔细胞培养板, 每孔 100μL, 培养 24h 后弃去上清 ; 加入 100μL 含 0.4% 胎牛血清的 DMEM 维持培养液, 培养 24h 后弃去上清 ; 依次加入用维持培养液稀释的标准品和供试品, 培养 72h 后每孔加 20μL MTS 培养 4h, 在酶标仪上于 490m 处测 在 L./pELWH 培养液上清中可检测到 [23] SpA 蛋白的特异性条带 ( 图 2A). 转化子 L.G /pelwhgheg 在细胞总蛋白 表层蛋白及培养液上清中均能检测到 SpAGhEG 融合蛋白, 分子质量约 55ku( 图 2), 表明 SpAGhEG 融合蛋白成功表达并分泌到培养液上清中. 用 HGg 抗体检测胞内总蛋白得到 2 条条带 ( 图 2A), 推测分子质量较大的蛋白条带是前体蛋白, 分子质量较小的是切除信号肽的蛋白. 用抗 EG 抗体检测胞内总蛋白, 推测分子质量较大的蛋白为杂带 ( 图 2B), 培养液上清蛋白量少但是因为蛋白种类少, 推测为目的蛋白条带. Wb 检测结果表明, 分泌蛋白表达量
4 第４期 汪舒庆 等:人表皮生长因子融合蛋白在干酪乳杆菌中的表达 随细胞的生 长 而 逐 渐 增 加,在 细 胞 D６００ ２ ５时达 到高峰,并持续到 D６００ ４ ８,到 稳 定 期 后 蛋 白 积 累 ７３ 量下 降 (图 ３),这 与 β １, ４ 甘 露 聚 糖 酶 的 表 达 模 式 相似. A:H g 抗 体 检 测. M:蛋 白 m k ; １ ３: ４ ６: pelwhheg 细 胞 总 蛋 白; ７ k pelwhheg 表层蛋白; pelwhheg 培养液上清蛋白.B:抗 EG 抗体检测. M:蛋白 m ; １ ３: ４ ６: ７ pelwhheg 细 胞 总 蛋 白; pelwhheg 表 层 蛋 白; H g bdyd M: P m k ;１ ３:Wh p pelwhheg 培养液上清蛋白.A:, ６: Su y p L Sup pelwhdpelwhheg;４ pelwhdpelwhheg;７ L, B: A EG bdyd M: P m k ;１ ３:Wh p pelwhdpelwhheg L, ６: Su y p L, Sup pelwhdpelwhheg;４ pelwhdpelwhheg;７ L, pelwhdpelwhheg 图２ H g 抗体( A)和抗 EG 抗体( B)检测 S heg 在干酪乳杆菌 MCJΔ１ 中的表达 pa ２ Exp S heg MCJΔ１/pELWH hegd dbyh g bd A) d EG bd B) g pa y( y( M:M k ;１ D６００ ０ ９, １ ３, １ ９, ２ ５, ３ ４, ４ １, ４ ８, ５ ４d６ １ 图３ S heg 在干酪乳杆菌 MCJΔ１ 的分泌表达(抗 EG 抗体) pa ３ S S heg MCJΔ１( A EG bdy) g yxp pa 2.3 间 接 免 疫 荧 光 检 测 SpAhEG 融 合 蛋 白 的 表达 在重组干酪乳杆菌 L /pelwhheg 中 细胞增殖(图 ５B),稀 释 １０ 倍 的 L /pelwh heg 上清 的 增 殖 效 果 与 １０g/mL 的 EG 标 品 效果相同. 在 MCJΔ１ 和 L /pelwh 中 也 检测到 菌 体 表 面 的 绿 色 荧 光,在 宿 主 菌 L MCJΔ１ 及空载 菌 L /pelwh 中 未 检 测 到 绿 色荧光.结果表明, S paheg 融 合 蛋 白 在 干 酪 乳 杆菌中得到表达(图 ４G, I). 2.4 融合蛋白对 NIH/3T3 细胞的增殖效果 随着 heg 标 准 品 质 量 浓 度 的 增 加,细 胞 增 殖 效果越明显,在 １０g/mL 时达到饱和,更高的质量 观察到了显著的促 细 胞 增 殖 现 象,且 两 者 没 有 差 别 (图 ５C),推 测 L MCJΔ１ 菌 株 的 代 谢 产 物 能 促进细胞的增殖. 3 讨 论 小 肠 及 结 肠 的 上 皮 细 胞 是 营 养 吸 收 主 要 场 所, 浓度下细胞数量不再继续上升(图 ５A). 也是抵御病原入侵的重要防线.肠道感染通常会造 法生长,故用维持培 养 液 以 ２ 倍 稀 释 得 到 不 同 稀 释 研 究 表 明,干 酪 乳 杆 菌 嗜 酸 乳 杆 菌 能 有 效 缓 未稀 释 的 培 养 基 酸 度 太 高,直 接 加 入 后 细 胞 无 倍数的上清液.结 果 表 明,表 达 的 融 合 蛋 白 能 促 进 成上皮细胞的损伤,是导致感染性腹泻的重要原因. 解 或 治 愈 这 类 疾 病 [２５],其 机 制 包 括 微 生 态 位 的 竞
5 ７４ 华 中 农 业 大 学 学 报 第 ３７ 卷 A, B, C:L MCJΔ１ 荧光图 明场图 叠加图;D, E, :pelwh 荧光图 明场图 叠加 图;G,H, I:pELWHhEG 荧 光 图 明 场 图 叠加图.A, B, C: u, b dv ymg L MCJΔ１;D, E, : u, b dv ymg L /pel gh gh WH;G, H, I: u, b dv ymg pelwhheg gh 图 ４ 融合蛋白间接免疫荧光图 ４ I d mmu u y u p g A: EG 标品的增殖效果;B: /pelwhheg 的增殖效果;C: MCJΔ１ 及 L /pelwh 增 殖 效 果 比 较.A: P v d dheg;b: P v L /pelwhheg;c:cmp hup L MCJΔ１dL /pelwh 图５ N I H/３T３ 的细胞增殖效果 ５ C p N I H/３T３ g
6 第 4 期汪舒庆等 : 人表皮生长因子融合蛋白在干酪乳杆菌中的表达 75 争 产生的乳酸及蛋白等代谢产物激活表皮生长因 子受体 (EGR) [26].EG 与嗜酸乳杆菌一起服用 能降低实验动物艰难梭菌感染 [20], 但过量 EG 刺 激会增加细胞癌变的风险 [27], 因此, 适量的 EG 是 配合治疗的关键. 表层蛋白 (uyp,slp) 是古菌 及革兰氏阳性菌细胞的外表面蛋白, 在革兰氏阳性 菌中, 表层蛋白还介导了细菌对宿主细胞的粘 附 [28]. 借助于 SpA 蛋白作为信号, 可以将目标蛋 白定位表达于细胞表面和上清中. 本研究在重组干 酪乳杆菌中进行了人表皮生长因子的表达, 利用 SG pa 将重组人表皮生长因子同时定位在干酪乳杆菌 细胞表面并有效分泌, 融合蛋白在体外具有良好的 [29] 生物活性.L 等将 SARSGCV S 基因通过多 聚谷氨酸合成酶 A 蛋白 (pga) 锚定到干酪乳杆菌 细胞表面进行展示表达, 在血清中产生明显的免疫 应答, 检测到高水平的抗 SARS 的特异性 IgG 抗 体. 同样的,SpAGhEG 融合蛋白显著促进细胞增 殖. 此外,L./pELWHGhEG 上清能刺激小 鼠肠道绒毛的发育 ( 数据未显示 ). 干酪乳杆菌的培养液上清也能显著促进底物细 [26] 胞的增殖.Wg 等研究表明来源于鼠李糖乳杆 菌的 p40 蛋白, 能激活肠道上皮细胞的 EGR 受 体. 除 p40 外,p75 也被证实是鼠李糖乳杆菌的益 生因子,p40 及 p75 均存在干酪乳杆菌 副干酪乳杆 菌及鼠李糖乳杆菌中 [30]. 这些细胞外蛋白有可能 对底物细胞的增殖起促进作用. 本研究结果表明嗜 酸乳杆菌表层蛋白 SpA 对调节细菌的免疫刺激活 动具有重要作用, 具有帮助宿主抵御病原菌和响应 [31] 感染的作用.Sgy 等研究了 SpA 蛋白对树突 状细胞及 T 细胞功能的调节, 证实 SpA 能够直接 或间接地消除病原体在宿主免疫系统引起的不利影 [32] 响.Shy 等报道了 SpA 蛋白能用于治疗人体 肠道紊乱. 但本研究发现干酪乳杆菌表达的 SpA 蛋白对上皮细胞的生长并没有促进作用. 笔者所在 实验室构建的 pelwh 载体有很高的分泌效率, 空 载 SpA 蛋白表达量很高, 但本研究中细胞实验的 结果表明, 高表达的 SpA 蛋白并不能刺激细胞的 生长, 这可能是因为干酪乳杆菌表达的 SpA 蛋白 结构发生了某种变化导致其益生作用减弱或消失, 或者是干酪乳杆菌缺少嗜酸乳杆菌的某种特异性因 子, 该因子能够与 SpA 蛋白结合, 发挥 SpA 的益 生作用 [33], 又或者是我们所用的干酪乳杆菌的代谢 产物对刺激细胞生长效果显著, 由于饱和效应的存 在, 掩盖了 SpA 蛋白的益生作用. 本研究中干酪乳杆菌表达的 SpA 未被证实有 益生功能, 但 SpA 有作为干酪乳杆菌表面展示传 [34] 递介质的潜能.L 等用 MB 作为报告基因 验证了 SpA 作为干酪乳杆菌表面展示传递介质的 有效性, 可能由于 MB 蛋白分子质量较大导致 SG pa 蛋白的空间结构的改变, 遭到了宿主细胞的降 解, 导致 SpAGMB 融合蛋白表达量较低. 本研究 中 SpAGhEG 融合蛋白与对照的表达量几乎相当, 说明 SpA 在介导小分子蛋白的表面展示方面可能 会更具有优势. 用 SpA 的信号肽构建的 pelsph 载体也可完成蛋白的分泌表达, 但并不高效 [34]. 有 理由推测 SpA 蛋白中还存在与蛋白识别 转运和 分泌相关的模体, 找出这个模体, 或许能实现异源蛋 白在干酪乳杆菌中的高效表达, 这是我们下一步要 研究的方向. 致谢感谢中国科学院武汉病毒研究所及华中农 业大学动物医学院对细胞实验的支持与帮助. 参考文献 [1] CARDILES,ALTERIO T,ARRIGO T,.RpbG dpbpdd[j].mvpd, 2016,68(6):487G497. [2] MARAGKOUDAKISP A,CHINGWARU W,GRADISNIK L,.LdbyphumdG mphdmmumvug [J].Ijudmbgy,2010,141 (S1):91G97. [3] MAJAMAA H,ISOLAURIE,SAXELIN M,.Ld bhmuvug[j]. Jupdggydu,1995,20 (3):333G338. [4] GALDEANO C M,PERDIGON G.Thpbbum LbuduvhgumumG muymhughmmuy[j].cdv mmugy,2006,13(2):219g226. [5] VITINIE,ALVAREZS,MEDINA M,.GumumG mumubydb[j].b:jug hsddlmd MpEG,2000,24(3):223G232. [6] SATO H,TORIMURA M,KITAHARA M,.ChG
7 76 华中农业大学学报第 37 卷 zhlbugupbdhpg bmpdds10gpgphpbg vdbymaldigto MS[J].SyAppMb,2012,35 (7):447G454. [7] DOUILLARDP,KANTR,RITARIJ,.CmpvgG mylbudm AG md Yku pduv mkd md pmmg[j].mbbhgy,2013,6 (5):576G587. [8] ALMEIDACC,LORENASLS,PAVANCR,.B ggmumppbmb Lbuhdbdbum bv Yku mypuphpyg p[j].nucp,2012,27(2):247g251. [9] MCARLAND L V.EvdGbdvw pb bgddhdcdum dg [J].Ab,2009,15(6):274G280. [10]ISOLAURIE,JUNTUNEN M,RAUTANEN T,.A hug mlbu (Lbup GG) pmvym udhhd[j].pdg,1991,88(1):90g97. [11]SEEGERSJM L.Lbvvdvyv: pgdpp[j].tdbh,2002,20(12): 508G515. [12]ADACHIK,KAWANA K,YOKOYAMA T,.OmmuG zwhlbuvxpghum ppmvu(hpv)yp16e7vgy dumuyxymphyghpv16e7[j]. V,2010,28(16):2810G2817. [13]KUIPERSOP,BEERTHUYZEN M M,DERUYTERPG,.AugubyhLuby gdu[j].thjubghmy, 1995,270(45):27299G [14]SUNZ,KONGJ,KONG W.ChzyppG mdpd403m Lbupum du huvbdp[j].mubhg gy,2010,45(1):24g33. [15]AN H Y,MIYAMOTO T.Cgdqugpmd plc494dm humlbu: uehhglbuhuv [J].Pmd,2006,55(2):128G134. [16]MARELLIB,PEREZAR,BANCHIOC,.OmmuzG whvluxpgvuvp8ubg udupmmup m[j].ju vgmhd,2011,175(1):28g37. [17]CORTESGPEREZ N G,BERMUDEZGHUMARAN L G,LE LOIRY,.Mmmuz whvdpg yguhdhpvg16e7p[j].emsmg bgy,2003,229(1):37g42. [18]CHEN Z,LIN J,MA C,.ChzpMC11, pmdwhdugpdmlbg u MCJduhuvwhh p[j].appd mbgydbhgy,2014,98 (13):5977G5989. [19]GREGORY H.IduuugdG hppdmgwh[j].nu,1975,257 (5524):325G327. [20]KAURS,VAISHNAVIC,PRASADK K,.ELG budphu & pdmgwhxpg mydudcdumd[j].thid jumdh,2011,133:434g441. [21] 钟泽民, 赖强, 余希尧, 等. 猪表皮生长因子在植物乳杆菌中的表达及其活性检测 [J]. 生物工程学报,2015,31(9):1325G [22] 王定越. 重组猪 EG 乳酸乳球菌的构建及其对早期断奶仔猪肠道健康的影响 [D]. 雅安 : 四川农业大学,2013. [23]LINJ,ZOU Y,MA C,.HguxpmG ddvpgwpgymlbg udehh[j].plso,2015,10(11): [24]HORTON R M,HUNT H D,HO S N,.EgghyG bdgwhuhuzym:gpg gbyvpx[j].g,1989,77(1):61g68. [25]GUANDALINIS.PbpvdmdG h[j].juggy,2011,45(sup): 149G153. [26]WANGL,CAO H,LIUL,.Avpdmgwh pmdmupdumudbyp40, LbuhmuGGGdvdp[J].Thju bghmy,2014,289(29):20234g [27]WANG Y,TIAN T,HU Z,.EGpmSNP,pm EGvdkb Ch wm[j]. Bhdm,2008,111(2):321G327. [28]JAKAVAGVIJANEN M,PALVA A.Iu (S) ypyglbupmpg ddhzhdhpp dhu[j].v Mb,2007,124(3/4): 264G273. [29]LEEJS,POO H,HAN DP,.Mummuzwh ugdpydvupyydmvg upkplbuduuzgg bd m[j].juvgy,2006,80(8):4079g [30]BAUERLC,PEREZGMARTINEZG,YAN,.u yhp40dp75pm Lbu BL23[J].Jumumbgydbhgy, 2010,19(4):231G241. [31]SERGEYR K,SMIDT H,DEGVOS W M,.Syp A Lbudphu NCM gummu dddtu[j].pdghng
8 第 4 期汪舒庆等 : 人表皮生长因子融合蛋白在干酪乳杆菌中的表达 77 AdmyShUdSAm, 2008,105(49):19474G [32]SAHAY B,GE Y,COLLIOU N,.Advghu LbudphuuypAhG mddhum[j].gumb,2015, 6(6):392G397. [33]BUCKBL,ALTERMANNE,SVINGERUDT,.uG ypuvdhlbug dphu NCM[J].Appddvmmbgy, 2005,71(12):8344G8351. [34]LINJ,ZOU Y,MA C,.Cudhz hpgggxpymlbu [J].EMS mbgy,2016,363(7):w041. d: /m/w041. Exphumpdmgwhu plbu WANGShuqg GEXgyg CHENZhgju SKyLbyAguuMbgy,HuzhgAguuUvy, Wuh430070,Ch Ab Lbupbhzm.Thmb L.wudxphumpdmgwh(hEG)dhbum hhpbgudvbvxpppumumug mmuy.thheg wyhzdhughpgvppgxpcr (SOE PCR), ddhlabuxhbvpelwh,ydgpelwhgheg.thpmdug dwpdl. MCJΔ1.TmwhyzdbyWbddG mmuuy.cpywudvghbvyhegxg pdl..spagheguphudhupwdd. ThmuwghhSpAGhEGupwmdbppxmy55ku.ThG upyhwdhhspaghegupdhupmug hpnih/3t3dmy.iwyhudl.hvgh pbgxvvpdvy. Kywd Lbu;hEG;SpAGhEGup;p ( 责任编辑 : 张志钰 )
材料 方法
生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
第 期 王 兴 涛 等 猪 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 种 猪 精 液 分 离 株 的 鉴 定 及 进 化 分 析 病 料 毒 株 及 细 胞 试 剂 引 物 设 计 提 取 及 基 因 克 隆 及 测 序
河 南 农 业 科 学 王 兴 涛 罗 俊 滕 蔓 樊 剑 鸣 鄂 巍 禹 斌 刘 力 张 改 平 利 用 技 术 对 河 南 省 某 规 模 化 猪 场 乙 脑 疑 似 病 例 的 种 猪 精 液 进 行 分 析 从 部 分 样 本 中 扩 增 出 与 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 基 因 和 基 因 具 有 高 度 同 源 性 的 预 期 产 物 在 日 龄 乳 鼠 脑 内 接 种 种 猪
材 料 方 法 统 计 学 分 析 体 外 作 用 对 细 胞 增 殖 的 影 响
生 物 技 术 通 报 罗 春 燕 官 涛 王 红 宁 杨 艳 姜 蓉 胡 晓 舒 华 自 森 王 建 伟 旨 在 探 讨 人 参 总 皂 苷 对 细 胞 表 达 的 影 响 法 显 示 对 细 胞 增 殖 抑 制 程 度 呈 剂 量 与 时 间 依 赖 性 增 加 且 呈 正 相 关 关 系 流 式 细 胞 术 表 明 能 阻 止 细 胞 从 期 向 期 移 行 激 光 共 聚 焦 显 微 镜 观
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
人 工 抗 原 的 鉴 定
生 物 技 术 通 报 张 海 棠 王 自 良 刘 耀 东 传 统 的 理 化 分 析 方 法 在 食 品 污 染 检 测 方 面 发 挥 了 重 要 的 作 用 但 均 存 在 一 定 的 缺 陷 急 需 建 立 快 速 高 效 的 检 测 方 法 食 品 污 染 免 疫 检 测 是 一 种 新 型 的 分 析 方 法 与 理 化 分 析 方 法 相 比 具 有 省 时 省 力 费 用 低 廉 便
生 物 技 术 通 报 相 关 载 体 及 试 剂 动 物 组 织 及 细 胞 培 养 总 的 提 取 及 反 转 录 内 蒙 古 白 绒 山 羊 基 因 的 分 子 克 隆 生 物 信 息 学 分 析
生 物 技 术 通 报 鲍 文 蕾 杨 娇 馥 李 彬 刘 俊 娥 王 潇 郭 旭 东 王 志 钢 侯 鑫 刘 东 军 旨 在 克 隆 内 蒙 古 白 绒 山 羊 血 管 内 皮 生 长 因 子 基 因 并 分 析 其 基 本 表 达 模 式 采 用 技 术 克 隆 基 因 将 得 到 的 基 因 序 列 及 其 编 码 的 氨 基 酸 序 列 进 行 生 物 信 息 学 分 析 利 用 半 定 量
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CEBFBC3232C6DAD1A7CFB0D3EBCBBCBFBCC4DAD2B3>
- 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - 做 四 个 全 面 的 宣 传 者 实 践 者 - 6 - - 7 - - 8 - - 9 - - 10 - - 11 - - 12 - - 13 - - 14 - - 15 - - 16 - - 17 - - 18 - - 19 - - 20 - 创 新 调 处 新 机 制 构 筑 稳 定 防 火 墙 - 21 - - 22 - - 23
应 用 与环 境 生 物 学 报 升 访 人 川 在 生 物 医 学 中的 应 用 研 究进 展 赵树杰 许开 天 中 国 科 学 院 成 都 生物 研 究所 摘 本 文 综 述 了 新 型 生 物 可 降解材 料 聚 材料 方 面 的 应 用 研 究进 展 和 发 展 趋势 关键 词 成都 幻 要 压轻 基 丁 酸 酷 在 用 作 药 物 缓 释 载 体 材 料 以 及 其 它 生 物 医 学 聚
大 学 化 学 第 卷 第 期 年 月 微 囊化技 术 在 生 物 医 学 中的 应 用 俞 耀 庭 陈 长 治 南 开 大学分 子 生物研 究 所 本 文 概 述 了微囊 固 定化技术基 本 应 用 原 理 摘要 的生 物 血液 相溶性 及 通透 性能 胞 在治 疗 肾 衰 肝 衰 及 清除 人体 内 中毒药物 般 性介 绍 微 囊 人 工 细 胞 的 一 般制 备方 法 各种 膜 材 料 对 人
第 期 马 海 燕 等 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 材 料 与 方 法 臭 氧 水 的 制 取 臭 氧 水 处 理 超 声 波 处 理 超 声 波 和 臭 氧 水 协 同 处 理 对 照 处 理 邻 苯 二 胺 分 光 光 度 法 测
第 卷 第 期 年 月 食 品 与 生 物 技 术 学 报 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 马 海 燕 张 慜 孙 金 才 食 品 科 学 与 技 术 国 家 重 点 实 验 室 江 南 大 学 江 苏 无 锡 海 通 食 品 集 团 股 份 有 限 公 司 浙 江 慈 溪 由 于 速 冻 蔬 菜 加 工 过 程 中 的 热 烫 处 理 对
生 水 简 称 比 比 重 物 生 一 率值 制 作血 涂 片 用 曰 用 值 分 作 染液和 染 液 染 色 在 放大 短 径 值 全 部 数据 经 生 物 统 计 学 处 理 一 记录 了 测 定 日 以 上 午 体长 幅 值 为 材 料 鱼在 采 血 前 均 进 测 定 取 鳞片 作 了 年
!! 生 水 简 称 比 比 重 物 生 一 率值 制 作血 涂 片 用 曰 用 值 分 作 染液和 染 液 染 色 在 放大 短 径 值 全 部 数据 经 生 物 统 计 学 处 理 一 记录 了 测 定 日 以 上 午 体长 幅 值 为 材 料 鱼在 采 血 前 均 进 测 定 取 鳞片 作 了 年 龄 鉴定 同 时 一 为 测 定 时 间 室 外 气 温 池 水水 温 一 值 和测 定 简称
福 建 农 业 学 报 材 料 与 方 法 药 敏 纸 片 及 药 品 培 养 基 菌 种 来 源 仪 器 检 测 抗 菌 活 性 的 测 定 数 据 处 理 结 果 与 分 析 种 抗 菌 药 物 对 临 床 分 离 鸡 大 肠 杆 菌 的 结 果
福 建 农 业 学 报 律 海 峡 刘 建 华 潘 玉 善 胡 功 政 苑 丽 许 瑞 福 建 农 业 学 报 材 料 与 方 法 药 敏 纸 片 及 药 品 培 养 基 菌 种 来 源 仪 器 检 测 抗 菌 活 性 的 测 定 数 据 处 理 结 果 与 分 析 种 抗 菌 药 物 对 临 床 分 离 鸡 大 肠 杆 菌 的 结 果 律 海 峡 等 外 排 泵 抑 制 剂 对 鸡 源 大 肠 杆
抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 % # % % % ) % % # # + #, ) +, % % % % % % % %
抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 王 红 曼 抗 战 时 期 国 民 政 府 为 适 应 战 时 经 济 金 融 的 需 要 实 行 由 财 政 部 四 联 总 处 中 央 银 行 等 多 家 机 构 先 后 共 同 参 与 的 多 元 化 银 行 监 理 体 制 对 战 时 状 态 下 的 银 行 发 展 与 经 营 安 全 进 行 了 大 规 模 的 设 计 与
华 南 师 范 大 学 学 报 自 然 科 学 版 年
年 月 华 南 师 范 大 学 学 报 自 然 科 学 版 年 第 期 赵 冬 芹 朱 莹 漫 蔡 昭 林 肖 鹏 李 楚 华 通 过 研 究 碱 性 钙 离 子 水 对 大 鼠 血 液 血 钙 浓 度 及 免 疫 功 能 的 影 响 结 果 显 示 碱 性 钙 离 子 水 对 大 鼠 血 液 和 血 钙 浓 度 无 明 显 影 响 对 大 鼠 免 疫 功 能 具 明 显 增 强 碱 性 钙 离 子
中 国 软 科 学 年 第 期!!!
山 寨 模 式 的 形 成 机 理 及 其 对 组 织 创 新 的 启 示 山 寨 模 式 的 形 成 机 理 及 其 对 组 织 创 新 的 启 示 陶 厚 永 李 燕 萍 骆 振 心 武 汉 大 学 经 济 与 管 理 学 院 武 汉 大 学 中 国 产 学 研 合 作 问 题 研 究 中 心 湖 北 武 汉 北 京 大 学 经 济 研 究 所 光 华 天 成 博 士 后 工 作 站 北 京 本
生 物 技 术 通 报 材 料 方 法 导 致 的 重 复 序 列 不 稳 定 性
生 物 技 术 通 报 赵 宏 宇 蔡 禄 赵 秀 娟 王 晶 妍 陈 元 秀 刘 水 峰 重 复 序 列 异 常 扩 增 或 删 除 会 引 起 多 种 人 类 遗 传 疾 病 目 前 其 不 稳 定 性 机 制 还 不 清 楚 为 了 探 索 化 学 药 物 对 重 复 序 列 的 作 用 采 用 甲 基 磺 酸 乙 酯 和 丝 裂 霉 素 连 续 多 次 处 理 含 重 复 序 列 质 粒 的
第 期 李 伟 等 用 方 法 对 中 国 历 史 气 温 数 据 插 值 可 行 性 讨 论
李 伟 李 庆 祥 江 志 红 使 用 插 值 方 法 对 已 经 过 质 量 控 制 和 均 一 化 的 年 月 年 月 中 国 全 部 基 本 基 准 站 气 温 资 料 逐 月 进 行 空 间 插 值 通 过 站 点 的 实 际 序 列 与 插 值 后 格 点 序 列 进 行 比 较 针 对 相 关 系 数 和 线 性 趋 势 等 多 个 量 来 检 验 方 法 对 气 候 资 料 插 值 的
# 抗 日 战 争 研 究 年 第 期, 胊 县 多, # # # # # # # # # # # # # # # # # # # # #
抗 战 时 期 根 据 地 的 疫 病 流 行 与 群 众 医 疗 卫 生 工 作 的 展 开 王 元 周 抗 日 战 争 期 间 日 本 帝 国 主 义 的 侵 略 引 起 和 加 剧 了 各 种 传 染 病 在 中 国 各 地 的 流 行 造 成 大 量 人 员 死 亡 和 生 产 力 下 降 人 多 是 中 国 坚 持 长 期 抗 战 的 基 础 而 病 灾 成 为 这 个 基 础 的 严 重
!!!!!!!!!!
有 限 理 性 动 物 精 神 及 市 场 崩 溃 对 情 绪 波 动 与 交 易 行 为 的 实 验 研 究 林 树 俞 乔 资 本 市 场 的 经 验 表 明 市 场 参 与 主 体 投 资 者 的 情 绪 波 动 对 资 产 交 易 与 价 格 决 定 产 生 了 不 可 忽 视 的 影 响 但 是 现 有 文 献 尚 缺 乏 对 这 一 重 要 因 素 的 研 究 因 此 本 文 的 目 的
陈 昌 生 陈 政 强 胡 家 才 吴 仲 庆 陈 浩 良 中 国 龙 虾 叶 状 幼 体 期 在 饥 饿 条 件 下 的 生 长 发 育 变 态 存 活 的 研 究 结 果 表 明 初 孵 叶 状 幼 体 耐 饥 饿 能 力 较 强 完 全 饥 饿 成 活 率 为 饥 饿 成 活 率 为 由 生 长 和 变 态 来 看 推 迟 投 饵 对 叶 状 幼 体 期 的 生 长 没 有 明 显 影 响 在
算 公 式 为 :G = (t 2 t 1 ) log 2 (log W 2 log W 1 ) 式 中 t 1 和 t 2 为 所 取 对 数 期 两 点 时 间,W 1 和 W 2 为 相 应 时 间 测 得 的 细 胞 含 量 或 OD 值 测 定 微 生 物 的 数 量 有 多 种 不 同
测 定 细 菌 生 长 曲 线 生 92 沈 睿 2912372 同 组 成 员 : 徐 鲁 斌 赵 磊 韦 人 杨 丹 灵 实 验 日 期 :211-5-15 一. 实 验 目 的 1. 了 解 细 菌 生 长 曲 线 特 征, 测 定 细 菌 繁 殖 的 代 时 2. 学 习 液 体 培 养 基 的 配 制 及 注 意 事 项 3. 学 习 液 体 种 子 和 固 体 种 子 的 不 同 接 种
浙 江 大 学 化 学 工 程 与 生 物 工 程 学 系 硕 士 学 位 论 文 混 合 模 式 吸 附 层 析 分 离 猪 血 免 疫 球 蛋 白 研 究 姓 名 : 庄 甜 甜 申 请 学 位 级 别 : 硕 士 专 业 : 化 学 工 程 指 导 教 师 : 林 东 强 20100101 混
价样 品 川 振 荡汉 取 叮 盛极 曲 的 示差 溶 出脉 具 体 方 法 见 有 机质 含 量 用 丘 林 法 测 定 沉积 物 的 矿 物 组 成 由 本 所 地质 室 测 数 据 由厦 门 大 学 海 洋 系 洪 家 珍 同志 提 供 三 各站 位 于表 谱 分析仪 进行 微 米膜 滤 后 分 斯 其 酿 可溶 部 分 的 含 鼠 零 用 冲测定 卷 报 分析 三 定 学 洋 海 表示 结
Microsoft Word - 工业品封面.doc
工 业 品 专 刊 浙 江 出 入 境 检 验 检 疫 局 政 策 研 究 室 (WTO 研 究 室 ) 2010 年 05 月 27 日 目 录 工 作 动 态 浙 江 检 验 检 疫 局 专 家 参 加 欧 盟 洗 衣 机 洗 碗 机 能 效 及 生 态 设 计 通 报 评 议 会 1 浙 江 检 验 检 疫 局 举 办 出 口 玩 具 检 验 监 管 工 作 研 讨 会 2 台 州 出 口 鞋
抗 日 战 争 研 究 年 第 期
田 子 渝 武 汉 抗 战 时 期 是 国 共 第 二 次 合 作 的 最 好 时 期 在 国 共 合 作 的 基 础 上 出 现 了 抗 日 救 亡 共 御 外 侮 的 局 面 这 个 大 好 局 面 的 出 现 与 中 共 长 江 局 的 丰 功 伟 绩 是 分 不 开 的 但 长 期 以 来 由 于 有 一 个 王 明 的 右 倾 错 误 直 接 影 响 了 对 它 的 全 面 科 学 准 确
福 建 农 业 学 报 科 技 示 范 和 推 广 科 技 成 果 产 生 效 益
福 建 农 业 学 报 林 梅 陈 奇 榕 农 业 科 技 创 新 模 式 绩 效 评 价 指 标 体 系 建 立 的 原 则 农 业 科 技 创 新 模 式 绩 效 评 价 指 标 体 系 基 本 框 架 福 建 农 业 学 报 科 技 示 范 和 推 广 科 技 成 果 产 生 效 益 林 梅 等 福 建 农 业 科 技 创 新 模 式 绩 效 评 价 指 标 体 系 的 研 究 编 制 专 家
1600 1000 40 50 2030 2000 采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路 2
简 略 版 本 :2015 3 10 2016 2021 全 球 卫 生 部 门 病 毒 性 肝 炎 战 略 2016 2021 2015 3 12 2012 2010 2014 2015 2016 2021 140 55% 35% 5 15% 5 20% 2.4 1.3 1.5 1 1600 1000 40 50 2030 2000 采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路
!!
梁 运 文 霍 震 刘 凯 本 文 利 用 奥 尔 多 中 心 的 调 查 数 据 从 三 个 方 面 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 状 况 进 行 了 详 细 的 实 证 分 析 首 先 刻 画 了 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 的 总 体 统 计 特 征 然 后 从 财 产 构 成 出 发 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 进 行 了 结 构 分 解 最 后 通
第 卷 第 辑 高 明 华 蔡 卫 星 曾 诚 股 权 结 构 与 信 息 披 露 质 量 来 自 证 券 分 析 师 盈 余 预 测 特 征 的 证 据!!
第 卷 第 辑 年 月 产 业 经 济 评 论 高 明 华 蔡 卫 星 曾 诚 本 文 利 用 年 中 国 股 上 市 公 司 的 相 关 数 据 使 用 证 券 分 析 师 盈 余 预 测 特 征 作 为 信 息 披 露 质 量 的 代 理 变 量 从 股 权 集 中 和 股 权 制 衡 的 角 度 探 讨 了 股 权 结 构 与 信 息 披 露 质 量 之 间 的 关 系 我 们 的 研 究 发
卢全 章等 鳗鲡 肾病病原 菌 的研 究 期 鱼 放 人 水 族箱 中 饲 养 观 察 发 病情 况 生 化试 验 采用 和 常 规 方 法 药物 敏 感 试验 用 试 管稀释 方法 步 骤 和 结果 鳗鲡 肾病 症 状 病 鳗 症 状 主 要 表 现 在 鳗 鱼 前 腹 部 区 部 位 肿 大 严
卢全 章等 鳗鲡 肾病病原 菌 的研 究 期 鱼 放 人 水 族箱 中 饲 养 观 察 发 病情 况 生 化试 验 采用 和 常 规 方 法 药物 敏 感 试验 用 试 管稀释 方法 步 骤 和 结果 鳗鲡 肾病 症 状 病 鳗 症 状 主 要 表 现 在 鳗 鱼 前 腹 部 区 部 位 肿 大 严重 时 区 腹 部 皮 肤 软 化 溃 烂 穿 孔 脏 露 出 的 粘稠 状 液 体 肾脏 部 位和
实 验 方 法 射 线 衍 射 鉴 别 差 示 扫 描 量 热 分 析 红 外 吸 收 光 谱 鉴 定 色 谱 条 件 测 定 法 结 果 与 讨 论 射 线 衍 射 鉴 别
ÖлªÈËÃñ¹²ºÍ¹úÅ©ÄÁÓæÒµ²¿²¿±ê×¼
中 华 人 民 共 和 国 农 牧 渔 业 部 部 标 准 果 汁 饮 料 总 则 NY/T 81 1988 本 标 准 适 用 于 所 有 的 含 果 汁 的 无 酒 精 饮 料 1 定 义 1.1 水 果 原 汁 Fruit juice 1.1.1 水 果 原 汁 是 用 机 械 方 法 ( 如 压 榨 法 ) 从 水 果 中 获 得 的 汁 液 它 具 有 发 酵 能 力, 但 是 没 有 发
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
刘 慧 君 利 用 卫 生 统 计 年 鉴 数 据 和 两 个 县 区 的 生 殖 健 康 调 查 数 据 从 宏 观 和 微 观 两 个 层 次 评 价 我 国 农 村 生 殖 健 康 现 状 揭 示 农 村 育 龄 人 群 在 生 殖 健 康 风 险 模 式 中 的 性 别 差 异 及 其 社 会 性 别 渊 源 结 果 显 示 农 村 生 殖 健 康 状 态 有 所 改 善 但 总 体 仍 然
生 命 科 学 研 究 侯 亚 义 韩 晓 冬 潘 爱 虎 用 酶 法 和 过 碘 酸 硫 代 巴 比 妥 酸 法 对 正 常 男 性 和 异 常 男 性 患 者 精 浆 甘 油 磷 酸 胆 碱 总 唾 液 酸 量 进 行 了 测 定 通 过 电 感 耦 合 等 离 子 直 读 光 谱 仪 测 定 精 浆 中 多 种 化 学 元 素 的 含 量 结 果 表 明 正 常 男 性 与 异 常 男 性 患
检 验 医 学 年 月 第 卷 第 期 :..+*;) (") 4)) / $."!)"+!+4+*(." ((1 " ")2 " "."+!2+ " 2))3!!+4.((".+ ")2 " "."+!.*" + )!( ))") 2+ " 2))3!/ 2",4.((".+ ".,."!+ ).
检 验 医 学 年 月 第 卷 第 期 :..+*;) (") 4)) / 文 章 编 号 中 图 分 类 号 文 献 标 志 码!" 乙 肝 疫 苗 接 种 后 新 生 儿 乙 型 肝 炎 表 面 抗 原 一 过 性 阳 性 的 研 究 刘 华 王 颖 智 沈 云 岳 庄 亦 晖 康 懿 王 雯 静 吴 树 英 蒋 炜 高 锋 上 海 交 通 大 学 附 属 第 六 人 民 医 院 检 验 科 上
所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 具 有 肉 品 科 学 与 技 术 食 品 科 学 专 业 背 景, 熟 悉 畜 禽 屠 宰 副 产 物 加 工 领 域 科 学 发 展 前 沿, 在 海 外 取 得 博 士 学 位 或 有 3 年 以 上 国 外 博 士 后 科 研 工
中 国 农 业 科 学 院 农 产 品 加 工 研 究 所 2016 年 青 年 英 才 计 划 人 才 招 聘 岗 位 和 应 聘 条 件 所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 熟 悉 粮 油 加 工 品 质 学 植 物 蛋 白 质 工 程 活 性 短 肽 与 多 糖 等 研 究 领 域, 在 海 外 获 得 博 士 学 位 或 获 得 博 油 料 加 工 与 品 粮 油 加
生 命 科 学 研 究 王 英 夏 家 辉 血 友 病 是 由 于 编 码 凝 血 因 子 简 称 的 基 因 先 天 性 异 常 而 导 致 的 机 体 出 血 紊 乱 性 遗 传 病 基 因 治 疗 是 彻 底 治 愈 血 友 病 的 一 种 最 为 理 想 的 治 疗 措 施 就 基 因 及 其 蛋 白 质 分 子 的 结 构 与 性 质 基 因 治 疗 载 体 构 建 靶 细 胞 动 物 模
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
第 卷第 期 月 年 电 压 与 声 光 邑 夹 心 式 压 电超 声 复 频 换 能 器 的 研 究 林 书 玉 陕西 师 范 大 学 应 用 声 学 研 究 所 西 安 摘要 对 具 有 多个 共 振 频 率 的 纵 向振 动 夹 心 式 压 电 超 吉 换 能 器 进 行 了 研 究 该 换 能 器 由 多 组 压 电陶 瓷 片及 金 属 棒 组 成 在 一 维 纵 向振 动 理 论 及 等
一 从 分 封 制 到 郡 县 制 一 从 打 虎 亭 汉 墓 说 起
县 乡 两 级 的 政 治 体 制 改 革 如 何 建 立 民 主 的 合 作 新 体 制 县 乡 人 大 运 行 机 制 研 究 课 题 组 引 言 一 从 分 封 制 到 郡 县 制 一 从 打 虎 亭 汉 墓 说 起 二 密 县 在 周 初 是 两 个 小 国 密 国 和 郐 国 三 密 县 的 第 一 任 县 令 卓 茂 四 明 清 时 代 的 密 县 二 从 集 中 的 动 员 体
结 果 与 讨 论
倪 卓 杜 学 晓 王 帅 邢 锋 以 脲 醛 树 脂 为 囊 壁 双 酚 型 环 氧 树 脂 为 囊 芯 采 用 原 位 聚 合 法 合 成 环 氧 树 脂 微 胶 囊 根 据 化 学 反 应 动 力 学 得 到 脲 醛 树 脂 预 聚 体 及 微 胶 囊 囊 壁 合 成 反 应 过 程 中 的 速 率 方 程 测 定 不 同 温 度 下 甲 醛 浓 度 随 时 间 变 化 的 曲 线 确 定 不
王 桂 华 黄 韦 艮 王 辉 基 于 第 二 版 本 潜 热 感 热 和 海 表 温 度 个 参 量 的 年 逐 月 平 均 资 料 利 用 经 验 正 交 方 法 分 解 分 析 了 这 个 参 量 在 南 海 的 时 空 分 布 结 果 表 明 在 夏 季 模 态 潜 热 表 现 为 南 高 北 低 感 热 表 现 为 中 间 低 两 边 高 两 者 主 要 都 是 海 洋 向 大 气 输 送
福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析
福建农业学报 林 甦 朱春华 陈 珍 刘斌琼 施少华 江 斌 蔡国漳 林 羽 黄 瑜 甦 男 硕士 助理研究员 主要从事病毒学和动物传染病学研究 福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 福建农业学报 讨 论 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 责任编辑
六 业 年 限 四 年 制 本 科,3~6 年 弹 性 制 七 授 予 位 工 士 八 毕 业 分 要 求 生 物 工 程 专 业 分 及 比 例 分 配 总 计 通 识 必 科 基 础 必 专 业 必 必 选 践 专 业 公 共 小 计 理 论 其 他 小 计 理 论 验 小 计 理 论 验 选
2. 生 物 工 程 专 业 本 科 培 养 方 案 2.1 生 物 工 程 专 业 简 介 一 专 业 培 养 目 标 培 养 德 智 体 全 面 发 展, 系 统 掌 握 生 物 工 程 技 术 及 其 产 业 化 的 科 原 理 工 艺 技 术 过 程 等 基 本 理 论 和 基 本 技 能, 能 够 在 科 研 机 构 高 等 院 校 从 事 科 研 究 或 教 工 作, 在 生 物 工 程
第 卷 第 期 年 月 水 生 生 物 学 报 肠 丫 搔蒸霎 原 位杂 交 和 原 位 技 术在 鱼 类基 因 定位 中 的 应 用 黄 袁仕 取 梅 朱作言 中 国科 学 院 水 生 生 物 研 究 所 淡 水 生 态 与 生 物 技 术 国 家 重 点 实验 室 武 汉 陕 西 师 范 大学 生 命 科 学 院 西 安 # 万 尸 了夭 如 趾 郑 人 扭寿 卿 关 键词 艺 只 妙 毛山知
中 国 投 资 率 波 动 的 度 量 与 变 化 的 分 解 年 经 济 发 展 水 平
数 量 经 济 技 术 经 济 研 究 年 第 期 中 国 投 资 率 波 动 的 度 量 与 变 化 的 分 解 年 方 红 生 楼 琳 琳 郭 林 浙 江 大 学 金 融 研 究 院 浙 江 财 经 学 院 经 贸 学 院 本 文 从 产 业 角 度 对 中 国 投 资 率 的 波 动 和 变 化 进 行 了 度 量 和 分 解 表 明 年 产 业 内 效 应 解 释 了 中 国 投 资 率 波
龚 亚 夫 在 重 新 思 考 基 础 教 育 英 语 教 学 的 理 念 一 文 中 援 引 的 观 点 认 为 当 跳 出 本 族 语 主 义 的 思 维 定 式 后 需 要 重 新 思 考 许 多 相 连 带 的 问 题 比 如 许 多 发 音 的 细 微 区 别 并 不 影 响 理 解 和
语 音 语 篇 语 感 语 域 林 大 津 毛 浩 然 改 革 开 放 以 来 的 英 语 热 引 发 了 大 中 小 学 英 语 教 育 整 体 规 划 问 题 在 充 分 考 虑 地 区 学 校 和 个 体 差 异 以 及 各 家 观 点 的 基 础 上 遵 循 实 事 求 是 逐 级 定 位 逐 层 分 流 因 材 施 教 的 原 则 本 研 究 所 倡 导 的 语 音 语 篇 语 感 语 域
石 和 荣 张 为 民 刘 晓 春 柯 浩 林 浩 然 研 究 了 生 长 抑 素 抑 制 剂 半 胱 胺 盐 酸 盐 和 促 黄 体 素 释 放 激 素 类 似 物 对 黄 鳍 鲷 生 长 激 素 分 泌 的 影 响 黄 鳍 鲷 垂 体 后 均 显 著 提 高 注 射 后 恢 复 正 常 黄 鳍 鲷 血 清 中 含 量 在 单 独 注 射 不 同 剂 量 水 平 在 注 射 后 和 后 均 明 显
第一章 图 １ １ 传染病的特征 ９ Ｔ ｈ１ Ｔ ｈ２ 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 Ｔ Ｎ Ｆα 和 ＩＦＮγ 可抑制放线菌的生长而 ＩＬ ６ 的作用则 反之 ＩＬ １ ２ 和 ＧＭ ＣＳＦ 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 ＩＬ １ｒａ 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与
朱 丽 明 柯 美 云 周 丽 雅 袁 耀 宗 罗 金 燕 候 晓 华 陈 旻 湖 滥 用 安 非 他 命 会 增 加 得 心 脏 病 的 风 险 据 美 国 科 技 新 闻 网 报 道 根 据 纽 约 路 透 社 报 道 一 份 新 的 研 究 显 示 青 年 及 成 年 人 若 滥 用 安 非 他 命 会 增 加 得 心 脏 病 的 风 险 美 国 德 州 大 学 西 南 医 学 中 心
三 需 要 办 理 检 疫 审 批 手 续 的 进 口 乳 品 ( 见 附 件 1), 应 当 按 照 进 境 动 植 物 检 疫 审 批 管 理 办 法 ( 国 家 质 检 总 局 令 第 25 号 ) 规 定 办 理 检 疫 审 批 手 续 国 家 质 检 总 局 可 以 确 定 调 整 需 要
质 检 总 局 关 于 实 施 进 出 口 乳 品 检 验 检 疫 监 督 管 理 办 法 有 关 要 求 的 公 告 国 家 质 检 总 局 2013 年 1 月 24 日 公 布 的 进 出 口 乳 品 检 验 检 疫 监 督 管 理 办 法 ( 国 家 质 检 总 局 令 第 152 号, 以 下 简 称 办 法 ), 将 于 2013 年 5 月 1 日 起 实 施 为 进 一 步 明 确
ETF、分级基金规模、份额变化统计20130816
ETF 分 级 基 金 规 模 份 额 变 化 统 计 截 至 上 周 末, 全 市 场 股 票 型 ETF 规 模 约 1451 亿, 份 额 约 1215 亿,ETF 总 份 额 及 规 模 的 周 变 动 值 分 别 为 -23-44 亿, 份 额 与 规 模 均 下 降 ; 分 级 基 金 规 模 约 438 亿, 份 额 572 亿, 总 份 额 及 规 模 的 周 变 动 值 分 别 为
!!
药学 实践 杂志 药理 年第 卷第 期 生 物 技 术 药 品 近年 来 的 发 展 杨玉 龙 任海 祥 南 京军 区 南京 总 医 院 南京 本 文 概 述 了 近 年 来 国 内 外 生 物 技 术 药 品 与 生 化 药 品 的 研 究 与 发 展 论 述 了生 物 技 术与 生 物 药 品 摘要 间 的 关 系 介 绍 了 近 代 生物 技 术 在某 些 生 物 药 品 生 产 中 的应 用
西 南 民 族 学 院 学 报 哲 学 社 会 科 学 版 第 卷 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 年 年 新 中 国 五 十 年 统 计 资 料 汇 编 中 国 人 口 统 计 年 鉴 年 数 据 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 中 国 统 计 出 版 社 年 版 资 料 来 源
郑 长 德 教 育 的 发 展 人 力 资 源 的 开 发 是 决 定 西 部 民 族 地 区 未 来 发 展 的 关 键 因 素 之 一 是 实 施 西 部 大 开 发 战 略 提 高 其 经 济 竞 争 力 和 综 合 实 力 的 重 要 保 障 本 文 从 西 部 民 族 地 区 教 育 发 展 的 现 状 入 手 指 出 中 华 人 民 共 和 国 成 立 多 年 来 西 部 民 族 地 区
中 日 信 息 化 的 比 较 与 合 作 一 中 日 信 息 化 的 规 模 比 较
中 日 信 息 化 的 比 较 与 合 作 冯 昭 奎 信 息 化 或 信 息 技 术 革 命 正 进 入 一 个 新 阶 段 与 日 本 相 比 中 国 的 信 息 化 与 信 息 产 业 存 在 着 互 联 网 和 手 机 用 户 数 量 大 与 普 及 率 低 的 不 平 衡 硬 件 与 软 件 发 展 的 不 平 衡 信 息 产 业 的 生 产 规 模 与 出 口 规 模 的 不 平 衡 国
untitled
动 物 营 养 学 教 学 大 纲 (2006 版 ) 四 川 农 业 大 学 动 物 营 养 研 究 所 动 物 营 养 学 课 程 组 课 程 教 学 大 纲 课 程 名 称 : 动 物 营 养 学 总 学 时 ( 学 分 ):56 学 时 3 分, 其 中 讲 授 56 学 时, 实 践 0 学 时 面 向 专 业 : 动 物 科 学, 野 生 动 物 保 护, 动 物 医 学, 生 物 技
李 培 邓 慧 慧 本 文 描 述 了 年 以 来 京 津 冀 地 区 在 人 口 迁 移 的 活 跃 程 度 和 空 间 分 布 的 新 特 征 通 过 建 立 计 量 模 型 对 年 和 年 影 响 京 津 冀 地 区 人 口 迁 移 的 综 合 因 素 进 行 了 比 较 分 析 结 论 显 示 人 均 差 距 已 经 成 为 影 响 人 口 迁 移 的 首 要 因 素 市 场 化 水 平 产
课程类 别
美 声 演 唱 方 向 培 养 方 案 一 培 养 目 标 本 方 向 要 求 学 生 德 智 体 美 全 面 发 展, 培 养 能 在 文 艺 团 体 从 事 声 乐 演 唱 及 能 在 艺 术 院 校 从 事 本 方 向 教 学 的 高 级 门 人 才 二 培 养 规 格 本 方 向 学 生 应 系 统 掌 握 声 乐 演 唱 方 面 的 理 论 和 技 能, 具 备 较 高 的 声 乐 演 唱
科 学 出 版 社 科 学 出 版 社 前 言 本 书 是 针 对 普 通 高 等 院 校 经 济 类 和 工 商 管 理 类 本 科 专 业 财 务 管 理 学 的 教 学 需 求, 结 合 教 育 部 经 济 管 理 类 本 科 财 务 管 理 学 课 程 教 学 大 纲 编 写 而 成 的 本 书 执 笔 者 都 是 长 期 工 作 在 财 务 管 理 教 学 一 线 的 专 业 教 师,
金 不 少 于 800 万 元, 净 资 产 不 少 于 960 万 元 ; (3) 近 五 年 独 立 承 担 过 单 项 合 同 额 不 少 于 1000 万 元 的 智 能 化 工 程 ( 设 计 或 施 工 或 设 计 施 工 一 体 ) 不 少 于 2 项 ; (4) 近 三 年 每 年
工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 一 总 则 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 ( 一 ) 为 了 加 强 对 从 事 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 企 业 的 管 理, 维 护 建 筑 市 场 秩 序, 保 证 工 程 质 量 和 安 全, 促 进 行 业 健 康 发 展, 结 合 建 筑 智 能 化 工 程 的 特 点, 制 定 本 标
7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0
论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0 ".. " - 23 )"." ( ).)") 4. " ' $ 7 " #$%"$8 &' + +." 0"3 / 3 3( 0 ) %.% "(% 2). +.) ")( ) (
100566035515613 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566035715658 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566037615926 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000100357 101 思 想
2016 年 天 津 大 学 硕 士 学 位 研 究 生 考 试 初 试 成 绩 复 核 结 果 公 示 考 生 编 号 科 目 码 科 目 名 称 复 核 结 果 100566000100858 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000101151 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000101348 101 思 想 政 治 理 论 经
简 报 要 点 ESI 共 有 22 个 学 科 门 类, 江 苏 高 校 目 前 只 有 16 个 学 科 门 类 进 入 了 世 界 1%, 分 别 是 一 般 社 会 科 学 临 床 医 学 农 业 科 学 分 子 生 物 学 和 遗 传 学 动 植 物 科 学 化 学 地 球 科 学 工 程
江 苏 高 等 院 校 ESI 学 科 评 估 简 讯 2016 年 第 2 期 2016-03-17 ESI(Essential Science Indicators, 基 本 科 学 指 标 ) 是 基 于 Web of Science 权 威 数 据 建 立 的 分 析 型 数 据 库, 将 全 球 学 科 分 成 22 个 大 学 科, 来 自 于 Web of Science 的 10 年
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B8BDBCFE34A3BAD2A9C6B7B2B9B3E4C9EAC7EBD7A2B2E1CAC2CFEEBCB0C9EAB1A8D7CAC1CFD2AAC7F32E646F63>
附 件 4: 药 品 补 充 申 请 注 册 事 项 及 申 报 资 料 要 求 一 注 册 事 项 ( 一 ) 国 家 食 品 药 品 监 督 管 理 局 审 批 的 补 充 申 请 事 项 : 1. 持 有 新 药 证 书 的 药 品 生 产 企 业 申 请 该 药 品 的 批 准 文 号 2. 使 用 药 品 商 品 名 称 3. 增 加 中 药 的 功 能 主 治 天 然 药 物 适 应 症
!!!!!
美 国 旧 金 山 湾 区 田 野 调 查 札 记 !!!!! ! 个 案 一 男 士 年 龄 岁 籍 贯 沈 阳! !! 个 案 二 女 士 年 龄 岁 籍 贯 沈 阳!! !!! 一 新 古 典 经 济 学 移 民 理 论 的 解 释!! 二 制 度 层 面 的 原 因! 三 社 会 资 本 理 论 与 东 北 人 移 民 网 络 !!!!!! 四 社 会 关 系 网 络 资 源 配 置 理 论
古 地 理 学 报 年 月
第 卷 第 期 年 月 古 地 理 学 报 胡 广 成 鲍 志 东 张 震 罗 小 玉 蔡 雨 刘 丽 中 国 石 油 大 学 北 京 资 源 与 信 息 学 院 北 京 贵 州 桐 梓 松 坎 剖 面 中 下 三 叠 统 发 育 齐 全 化 石 丰 富 出 露 良 好 是 研 究 上 扬 子 地 区 海 相 地 层 的 理 想 剖 面 之 一 根 据 地 层 划 分 与 对 比 将 其 分 为 下
! # % & ( )
第 第 卷 海 欺 环 洋 科 境 学 月 年 铜 锌 镐 汞 锰 铬 对 斑 节 对 虾仔虾 急性 致毒 的研 究 高淑 英 邹栋梁 厦 门 大学 海洋 系 厦 门 摘 仔虾 的 急 性 致 毒 效 应 土 本文在恒温 要 结果 表 明 值 分别 为 充 气条 件下 研 究 了 值分 别为 十 对斑节对虾 对 斑 节对 虾 仔 虾 值分 别 为 值 分别 为 六 种重 金 属 的 毒性 顺 序 为
为 了 改 进 SEC 色 谱 柱 的 分 离 表 现 - 色 谱 填 料 - 1. 更 小 的 粒 径 更 高 的 理 论 塔 板 数 更 高 的 反 压, 更 小 的 孔 隙 容 量. 更 大 的 孔 隙 容 量 ( 校 准 曲 线 的 斜 率 更 为 平 缓 ) 分 离 系 数 ; 需 要 被
新 款 适 用 于 UHPLC/HPLC 的 SEC 色 谱 柱 的 介 绍 东 曹 ( 上 海 ) 生 物 科 技 有 限 公 司 Jan, 015 为 了 改 进 SEC 色 谱 柱 的 分 离 表 现 - 色 谱 填 料 - 1. 更 小 的 粒 径 更 高 的 理 论 塔 板 数 更 高 的 反 压, 更 小 的 孔 隙 容 量. 更 大 的 孔 隙 容 量 ( 校 准 曲 线 的 斜 率
作 为 生 产 者 式 文 本 的 女 性 主 义 通 俗 小 说 梅 丽 本 文 借 鉴 文 化 研 究 理 论 家 约 翰 费 斯 克 的 生 产 者 式 文 本 这 一 概 念 考 察 女 性 主 义 通 俗 小 说 的 文 本 特 征 写 作 策 略 和 微 观 政 治 意 义 女 性 主 义 通 俗 小 说 通 过 对 传 统 通 俗 小 说 的 挪 用 和 戏 仿 传 播 女 性 主 义
中 国 抗 癌 协 会 乳 腺 癌 诊 治 指 南 与 规 范 (2008 版 ) 作 者 : 中 国 抗 癌 协 会 乳 腺 癌 专 业 委 员 会 作 者 单 位 : 刊 名 : 中 国 癌 症 杂 志 英 文 刊 名 : CHINA ONCOLOGY 年, 卷 ( 期 ): 2009,19(6) 被 引 用 次 数 : 4 次 引 证 文 献 (4 条 ) 1. 席 晨 辉. 范 子 义. 庄
¹ º ¹ º 农 业 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 农 业 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个 月 及 以 上 的 流 动 人 口 非 农 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 非 农 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个
¹ 改 革 开 放 年 来 人 口 流 动 规 模 持 续 增 加 对 我 国 社 会 经 济 的 持 续 发 展 起 到 了 重 要 作 用 为 全 面 了 解 我 国 流 动 人 口 生 存 状 况 准 确 把 握 流 动 人 口 发 展 规 律 和 趋 势 不 断 加 强 流 动 人 口 服 务 管 理 引 导 人 口 有 序 流 动 合 理 分 布 国 家 人 口 计 生 委 于 年 月 启
24 680 雷 贝 拉 唑 肠 溶 胶 囊 10mg*7 25 680 雷 贝 拉 唑 肠 溶 胶 囊 10mg*12 26 680 雷 贝 拉 唑 肠 溶 胶 囊 10mg*14 27 680 雷 贝 拉 唑 肠 溶 胶 囊 10mg*18 28 680 雷 贝 拉 唑 肠 溶 胶 囊 20mg
附 表 二 : 统 一 药 品 金 额 : 元 1 670 硫 糖 铝 混 悬 凝 胶 剂 1g:5ml 3.3 * 2 672 瑞 巴 派 特 片 剂 100mg*12 3 672 瑞 巴 派 特 片 剂 100mg*24 4 677 奥 美 拉 唑 注 射 剂 40mg( 冻 干 粉 ) 5 677 奥 美 拉 唑 注 射 剂 20mg( 冻 干 粉 ) 6 677 奥 美 拉 唑 注 射 剂
中 国 社 会 科 学 年 第 期!!!! ( ( ) % ) ) ) % % % %
转 变 外 贸 发 展 方 式 的 经 验 与 理 论 分 析 中 国 应 对 国 际 金 融 危 机 冲 击 的 一 种 总 结 裴 长 洪 彭 磊 郑 文 在 应 对 国 际 金 融 危 机 冲 击 中 中 国 各 级 政 府 和 外 贸 企 业 不 仅 创 造 了 新 的 实 践 而 且 实 现 了 从 转 变 外 贸 增 长 方 式! 到 转 变 外 贸 发 展 方 式! 的 认 识 飞 跃
目 录 1 全 国 水 泥 制 造 行 业 分 析... 5 1.1 行 业 基 本 面 分 析... 5 1.1.1 行 业 规 模 分 析... 5 1.1.2 行 业 成 长 能 力 分 析... 5 1.1.3 行 业 盈 利 能 力 分 析... 6 1.1.4 行 业 偿 债 能 力 分
全 国 水 泥 制 造 业 (C3111) 标 准 化 行 业 数 据 报 告 (2008-2009) 目 录 1 全 国 水 泥 制 造 行 业 分 析... 5 1.1 行 业 基 本 面 分 析... 5 1.1.1 行 业 规 模 分 析... 5 1.1.2 行 业 成 长 能 力 分 析... 5 1.1.3 行 业 盈 利 能 力 分 析... 6 1.1.4 行 业 偿 债 能 力
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
附件1：
附 件 5 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 申 请 表 硕 士 专 业 学 位 类 别 ( 工 程 领 域 ): 工 程 硕 士 ( 控 制 工 程 领 域 ) 申 报 单 位 名 称 : 上 海 工 程 技 术 大 学 一 申 请 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 论 证 报 告 申 请 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 论 证 报 告 一 专 业 人 才 需 求
国 外 药 事 李 非 马 艳 彬 迟 戈 比 较 研 究 欧 美 导 尿 管 产 品 有 关 技 术 法 规 的 具 体 要 求 以 合 理 制 定 并 提 高 我 国 的 导 尿 管 产 品 的 安 全 性 对 美 国 欧 盟 等 国 家 和 地 区 的 一 次 性 使 用 导 尿 管 产 品 安 全 性 和 有 效 性 技 术 要 求 进 行 标 准 和 法 规 的 具 体 比 较 并 与 我
何 秋 琳 张 立 春 视 觉 学 习 研 究 进 展 视 觉 注 意 视 觉 感 知
第 卷 第 期 年 月 开 放 教 育 研 究 何 秋 琳 张 立 春 华 南 师 范 大 学 未 来 教 育 研 究 中 心 广 东 广 州 随 着 图 像 化 技 术 和 电 子 媒 体 的 发 展 视 觉 学 习 也 逐 步 发 展 为 学 习 科 学 的 一 个 研 究 分 支 得 到 研 究 人 员 和 教 育 工 作 者 的 广 泛 关 注 基 于 此 作 者 试 图 对 视 觉 学 习
中 南 大 学 学 报 医 学 版! -. (! (!!( +,+, +(!! (, 良 性 前 列 腺 增 生 症 87. 是 中 老 年 男 性 常 见 的 前 列 腺 疾 病 约 $ H 的 前 列 腺 增 生 标 本 中 证 实 有 炎 症 浸 润 病 灶 许 多 研 究 也 显 示 炎 症
中 南 大 学 学 报 医 学 版! 合 并 前 列 腺 炎 的 良 性 前 列 腺 增 生 症 的 临 床 分 析 龙 智 何 乐 业 钟 狂 飚 张 一 川 岳 栋 中 南 大 学 湘 雅 三 医 院 泌 尿 外 科 长 沙 摘 要 目 的 分 析 前 列 腺 炎 与 前 列 腺 增 生 症 87. 的 关 系 探 讨 前 列 腺 炎 在 87. 病 程 中 可 能 起 的 作 用 方 法 对
马 克 思 主 义 公 正 观 的 基 本 向 度 及 方 法 论 原 则!! # #
马 克 思 主 义 公 正 观 的 基 本 向 度 及 方 法 论 原 则 马 俊 峰 在 社 会 公 正 问 题 的 大 讨 论 中 罗 尔 斯 诺 齐 克 哈 耶 克 麦 金 泰 尔 等 当 代 西 方 思 想 家 的 论 述 被 反 复 引 用 和 申 说 而 将 马 克 思 恩 格 斯 等 经 典 作 家 的 观 点 置 于 一 种 被 忽 视 甚 至 被 忘 却 的 状 态 形 成 这 种
2014年中央财经大学研究生招生录取工作简报
2015 年 中 央 财 经 大 学 研 究 生 招 生 录 取 工 作 简 报 一 硕 士 研 究 生 招 生 录 取 情 况 2015 年 共 有 8705 人 报 考 我 校 硕 士 研 究 生, 其 中 学 术 型 研 究 生 报 考 3657 人, 专 业 硕 士 研 究 生 报 考 5048 人 ; 总 报 考 人 数 较 2014 年 增 长 1.4%, 学 术 型 报 考 人 数 较
3. 稀 释 样 本 通 常 在 送 检 的 样 本 中, 各 种 细 胞 相 互 重 叠 分 析 仪 无 法 在 此 情 况 下 准 确 地 计 算 血 细 胞 的 数 目 或 统 计 血 细 胞 的 体 积 分 布 因 此, 在 分 析 仪 计 数 或 统 计 体 积 分 布 之 前, 需 要
1. 概 述 本 分 析 仪 采 用 电 阻 抗 法 检 测 红 细 胞 白 细 胞 和 血 小 板 的 数 目 以 及 体 积 分 布, 采 用 比 色 法 测 量 血 红 蛋 白 浓 度 在 此 基 础 之 上, 分 析 仪 计 算 出 其 余 参 数 的 结 果 2. 吸 取 样 本 在 全 血 工 作 模 式 下, 操 作 者 可 直 接 将 全 血 样 本 送 至 分 析 仪 进 行 采
天 然 沸 石 对 氨 氮 的 吸 附 特 性 研 究 邹 娟 郭 雪 松 李 琳 刘 俊 新 从 天 然 沸 石 对 氨 氮 的 吸 附 动 力 学 吸 附 平 衡 对 吸 附 的 影 响 及 其 作 为 垂 直 流 人 工 湿 地 的 填 料 处 理 生 活 污 水 的 效 果 进 行 了 研 究 结 果 表 明 该 沸 石 对 氨 氮 的 吸 附 行 为 符 合 和 吸 附 等 温 式 最 大
刘 宏 明 连 传 宝 综 述 肠 道 细 胞 色 素 和 糖 蛋 白 对 口 服 药 物 生 物 利 用 度 的 影 响 包 括 的 作 用 及 与 的 联 合 作 用 收 集 阅 读 并 分 析 近 十 年 来 关 于 肠 道 细 胞 和 影 响 口 服 药 物 生 物 利 用 度 的 文 献 和 在 胃 肠 道 均 具 有 高 表 达 且 两 者 的 底 物 具 有 显 著 的 重 叠 性 所
Microsoft Word - 第13期封面.doc
第 2 期 ( 总 第 13 期 ) 浙 江 出 入 境 检 验 检 疫 局 政 策 研 究 室 (WTO 研 究 室 ) 2010 年 01 月 22 日 目 录 工 作 动 态 帮 扶 企 业 应 对 壁 垒 嘉 兴 对 美 出 口 茶 叶 实 现 大 幅 增 长 1 早 部 署 建 体 系 积 极 应 对 韩 国 对 进 口 水 产 品 的 特 别 检 查 计 划 2 温 州 检 验 检 疫
<4D F736F F D D323630D6D0B9FAD3A6B6D4C6F8BAF2B1E4BBAFB5C4D5FEB2DFD3EBD0D0B6AF C4EAB6C8B1A8B8E6>
中 国 应 对 气 候 变 化 的 政 策 与 行 动 2013 年 度 报 告 国 家 发 展 和 改 革 委 员 会 二 〇 一 三 年 十 一 月 100% 再 生 纸 资 源 目 录 前 言... 1 一 应 对 气 候 变 化 面 临 的 形 势... 3 二 完 善 顶 层 设 计 和 体 制 机 制... 4 三 减 缓 气 候 变 化... 8 四 适 应 气 候 变 化... 20
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B3D6B2D6CFDEB6EEB1EDB8F1D7EED6D52E646F63>
国 内 各 期 货 交 易 所 关 于 合 约 限 仓 方 面 的 规 定 上 海 期 货 交 易 所 经 纪 会 员 非 经 纪 会 员 和 客 户 的 期 货 合 约 在 不 同 时 期 限 仓 的 具 体 比 例 和 数 额 如 下 : ( 单 位 : ) 合 约 挂 牌 至 交 割 月 前 第 二 月 的 最 后 一 个 交 易 日 交 割 月 前 第 一 月 交 割 月 份 某 一 期 货
<B4FACFFABBF9BDF0C3FBB5A5A3A83230313130333039A3A92E786C73>
基 金 公 司 基 金 代 码 基 金 名 称 基 金 类 型 162201 泰 达 宏 利 价 值 优 化 型 成 长 类 行 业 证 券 投 资 基 金 股 票 162202 泰 达 宏 利 价 值 优 化 型 周 期 类 行 业 证 券 投 资 基 金 股 票 162203 泰 达 宏 利 价 值 优 化 型 稳 定 类 行 业 证 券 投 资 基 金 股 票 162204 泰 达 宏 利 行
<433A5C55736572735C6B73625C4465736B746F705CB9FABCCAD6D0D2BDD2A9D7A8D2B5B8DFBCB6BCBCCAF5D6B0B3C6C6C0C9F3C9EAC7EBD6B8C4CFA3A832303136CDA8D3C3B0E6A3A92E646F63>
附 件 1 国 际 中 药 专 业 高 级 技 术 职 称 评 审 条 件 及 报 名 材 料 一 系 列 ( 一 ) 中 1 高 级 专 科 ( 副 ) 高 级 专 科 ( 副 ) 1 取 得 中 专 科 职 称 后, 独 立 从 事 中 临 床 实 践 5 年 以 上 2 取 得 中 博 士 学 位 后, 临 床 实 践 2 年 以 上 3 取 得 中 硕 士 学 位 后, 临 床 实 践 7
在2012年工作会议结束时的讲话
王 文 沧 2012 年 1 月 13 日 1 2 3 在 基 层 建 设 方 面, 在 基 础 工 作 方 面, 4 在 员 工 基 本 素 质 方 面, 首 先 是 基 层 建 设 规 范 化 其 5 次 是 基 础 工 作 精 细 化 第 三 是 基 本 功 训 练 体 系 化 6 7 一 是 领 导 干 部 要 敢 于 担 当, 勇 于 负 责 不 惹 事, 不 生 事, 也 不 能 怕 事
北 京 市 顺 义 区 仁 和 镇 05-02-15-1 地 块 R2 二 类 居 住 用 地 05-02-17 地 块 A33 基 础 教 育 用 地 限 价 商 品 住 房 项 目 ( 居 住 ) 2
11.23-11.29 北 京 房 地 产 市 场 周 报 编 号 1 一 土 地 供 应 分 析 宗 地 名 称 北 京 市 顺 义 区 仁 和 镇 05-02-15-1 地 块 R2 二 类 居 住 用 地 05-02-17 地 块 A33 基 础 教 育 用 地 限 价 商 品 住 房 项 目 宗 地 位 置 用 地 性 质 建 设 用 地 面 积 (m 2 ) 规 划 建 筑 面 积 (m
福建农业学报 材料与方法 外植体无菌株系的建立 启动培养 增殖培养 继代培养 生根培养 瘤状苗的细胞学观察
福建农业学报 邓素芳 杨 旸 赖钟雄 福建农业学报 材料与方法 外植体无菌株系的建立 启动培养 增殖培养 继代培养 生根培养 瘤状苗的细胞学观察 邓素芳等 朱砂根成年茎段的离体培养研究 结果与分析 福建农业学报 第3期 邓素芳等: 朱砂根成年茎段的离体培养研究 带空洞, 无法观察 图1 朱砂根成年茎段的离体繁殖 Fig 1 I n vitro propagation of A crenata 图 2
论 三 青 团 对 浙 江 地 方 基 层 政 治 的 影 响 竑 浙 江 战 时 政 治 工 作 人 员 训 练 团 的 做 法 在 丽 竑 出 面 呈 请 中 央 停 办 自 治 厉 ) ) ) % % % % ) ) % % % % )
论 三 青 团 对 浙 江 地 方 基 层 政 治 的 影 响 杨 焕 鹏 三 民 主 义 青 年 团 是 战 时 国 民 党 成 立 的 一 个 极 其 重 要 的 政 治 团 体 其 存 在 时 间 极 为 短 暂 却 对 国 民 党 的 政 治 党 派 关 系 等 产 生 了 很 大 的 影 响 加 强 对 基 层 政 权 的 渗 透 与 控 制 是 战 时 国 民 政 府 加 强 中 央 集
中 国 农 业 大 学 硕 士 学 位 论 文 温 州 市 人 口 老 龄 化 现 状 及 对 策 研 究 姓 名 : 丁 海 英 申 请 学 位 级 别 : 硕 士 专 业 : 公 共 管 理 指 导 教 师 : 张 大 勇 20060501 温 州 市 人 口 老 龄 化 现 状 及 对 策 研 究 作