第 5 期杨晓等 : 低聚肽和 VC 复合固体饮料的安全性毒理学评价 前言 海洋鱼低聚肽粉是一类以海洋鱼皮 鱼骨 或鱼肉为原料, 用酶解法生产的 相对分子质量低于 1000u 的低聚肽 ( 短肽 ) 为主要成分的粉末状产品 [1], 是一种营养价值极高的胶原蛋白 胶原蛋白因其广泛的生物活

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1 第 26 卷第 5 期 2017 年 10 月 激光生物学报 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Vol.26No.5 Oct.2017 doi: /j.isn 低聚肽和 VC 复合固体饮料的安全性毒理学评价 杨晓 1, 王畋 1,2, 刘畅 1 1, 黄莹 (1. 武汉跃莱健康产业有限公司研究院, 湖北武汉 ;2. 中国保健协会, 北京 ) 摘要 : 为了评价低聚肽和维生素 C 复合固体饮料作为功能性食品食用的毒理学安全性, 根据我国卫生部 保健食品检验与评价技术规范 (2003) 进行安全性毒理学研究 研究结果表明 : 低聚肽和维生素 C 复合固体饮料对小鼠急性经口最大耐受剂量大于 20g/kgBW, 根据急性毒性分级标准规定, 属无毒级 ; 遗传毒性试验 (Ames 试验 小鼠骨髓细胞微核试验 小鼠精子畸形试验 ) 结果为阴性 ;30 天喂养试验表明, 按人体推荐量的 和 100 倍即 2.1g/kg 4.2g/kg 8.3g/kg 为低 中 高剂量时, 各剂量组动物生长发育良好, 大鼠体重 增重 食物利用率 脏器重量 脏 / 体比 血液学指标及血生化指标与对照组比较均无显著性差异 (P>0.05); 大体解剖和组织病理学检查未见与样品有关的异常改变 通过以上的试验结果可以判定低聚肽和维生素 C 复合固体饮料具有较好的食用安全性 关键词 : 低聚肽 ; 维生素 C; 安全性 ; 毒理学 ; 评价中图分类号 :R114 文献标志码 :A 文章编号 : (2017) ToxicologicalandSafetyA sesmentofoligopeptidesandvitaminc CompoundinSolidDrink YANGXiao 1,WANGTian 1,2,LIUChang 1,HUANGYing 1 (1.WuhanTwinklifeHealthIndustryCo.,LtdResearchInstitute,Wuhan430090,Hubei,China; 2.ChinaHealthCareAsociation,Beijing100142) Abstract:InordertoevaluatethetoxicologicalsafetyofoligopeptidesandvitaminCcompoundinsoliddrink.Toxico logicalandsafetyasesmentswereconducted,accordingtothetechnicalstandardsfortestingandasesmentof HealthFoodbyHealthyMinistry2003,theresultsshowedthatthemaximumtolerateddoseofoligopeptidesandvitamin Ccompoundinsoliddrinkonmicewasmorethan20g/kg.BW.Therefore,thesamplefelintothescaleofnon toxici ty.thegenotoxicitytestsincludingamestest,bonemarowcelmicronucleus,sperm shapeabnormalitywerealnega tive.theresultsof30 daystestshowedthattheanimalsofcontrolgroupandeachdosegroupwereweldeveloped,with outdeathandabnormalclinicalsign.thebodyweight,foodintakefoodutilizationrate,organweight,organ/bodyrati os,hematologicalparametersandbloodbiochemicalindexeshadnosignificantdiference(p>0.05)betweenthecon trolgroupandthetreatmentgroups.therearenoabnormalpathologicalchangesinliver,kidney,stomach,intestine, spleen,testicleandovaryofratsintreatmentgroup.theconclusionisthattheoligopeptidesandvitaminccompoundin soliddrinkaresafewithnoevidenttoxicefect. Keywords:oligopeptides;vitaminC;safety;toxicology;asesment 收稿日期 : ; 修回日期 : 作者简介 : 杨晓 (1986-), 女 ( 汉 ), 湖北武汉人, 硕士, 主要从事食品生物技术研究 ( 手机 ) ;( 电子邮箱 )meredith.yang@twinklife.com

2 第 5 期杨晓等 : 低聚肽和 VC 复合固体饮料的安全性毒理学评价 前言 海洋鱼低聚肽粉是一类以海洋鱼皮 鱼骨 或鱼肉为原料, 用酶解法生产的 相对分子质量低于 1000u 的低聚肽 ( 短肽 ) 为主要成分的粉末状产品 [1], 是一种营养价值极高的胶原蛋白 胶原蛋白因其广泛的生物活性被称为 骨中之骨, 肤中之肤, 肉中之肉, 对人体的各个器官组织结构起着至关重要的作用, 例如 : 皮肤 : 可以滋润肌肤, 使肌肤光滑水润 [2] ; 头发 : 促使头发乌黑透亮, 柔顺美丽 ; 指甲 : 促使指甲柔软亮泽 ; 肌肉 : 能促进肌肉的生长以及生长激素的分泌, 塑造结实健美的肌肉 ; 血管 : 在人体的结缔组织与弹性蛋白等多处形成网状结构, 使血管壁充满弹性, 防止血管破裂和栓塞, 还能迅速凝血, 快速止血 ; 骨骼 : 骨骼中的的大部分有机物是骨胶原蛋白, 促进骨细胞和钙质结合, 保证钙的吸收 [3] ; 眼睛 : 眼角膜的主要成分是胶原蛋白, 以特殊的形式排列, 使光线透过, 眼角膜呈现透明 ; 同时低聚肽还能预防和治疗很多疾病的功效, 例如抗衰老 : 能够清除血液中的 DPPH 自由基 羟自由基 超氧阴离子自由基等 [4,5], 降血压 : 能够抑制血管紧张素转化酶的作用和降低胆固醇等 [6,7], 治疗骨质疏松症 [8], 抗疲 [9] 劳等 维生素 C 作为一种常见的水溶性维生素, 在蔬菜水果中含量丰富, 是人类获取维生素 C 的最佳途径 最早于 1932 年由 King 和 Waugh 分离得到, 因其显著的抗坏血酸功效, 又被称为 抗坏血酸 [10] ; 维生素 C 也是一种辅酶, 可以与自由基发生结合, 使机体免受自由基危害, 起到抗衰老的作用 [11] ; 同时维生素 C 也具有调节人体新陈代谢的作用 [12], 能够提高中性蛋白细胞和淋巴细胞的杀菌能力, 从而增强机体的免疫力 [13,14] ; 维生素 C 在临床上也有一些应用, 对 2 型糖尿病具有一定的辅助治疗作用 [15] ; 也能够治疗创伤 灼伤 牙龈出血 预防感冒 治疗慢性肝炎 动脉粥样硬化等疾病 [16,17] 以海洋鱼胶原低聚肽粉和维生素 C 为主要原料, 沙棘提取物 阿萨伊果 石榴果等为辅料制成的低聚肽和维生素 C 复合固体饮料, 不仅具有较好的抗氧化的功效, 同时还具有提高机体免疫能力 预防和抵抗疾病 维持机体正常运行的功能 ; 而且还具有生物利用率高 稳定好 卫生的优点, 并通过了国家食品药品监督管理局检测机构的检测 本文通过急性毒理学试验 骨髓细胞微核试验 小鼠精子畸形试 验 鼠伤寒沙门氏菌 / 哺乳动物微粒体酶试验 (Ames 试验 ) 30 天喂养试验共 5 项食品安全性实验研究低聚肽和维生素 C 复合固体饮料的安全性, 为低聚肽和维生素 C 复合固体饮料开发成为保健食品提供理论依据 1 材料与方法 1.1 材料与仪器实验样品 : 低聚肽和维生素 C 复合固体饮料, 维生素 C 购买于石家庄维生药业有限公司 ; 海洋鱼低聚肽粉购买于武汉天天好生物制品有限公司 小牛血清 环磷酰胺 Giemsa 染液 磷酸氢二钾 磷酸氢二钠 甲醇 伊红染色液 牛肉膏 胰蛋白胨 氯化钠 蒸馏水 琼脂粉 营养肉汤培养基 磷酸氢钠铵 柠檬酸 硫酸镁 葡萄糖 D 生物素 L 组氨酸 氨苄青霉素溶液 结晶紫溶液 四环素 二甲亚砜 氯化镁 氯化钾 辅酶 Ⅱ 葡萄糖 6 硫酸钠盐等主要实验药品与试剂 电子秤,ACS 3A ; 天平,BP310S ;Nikon 显微镜,eclipse80i50686; 电子天平, JH ; 电子天平,CP124S ; 隔水式恒温培养箱,GNP 9270 型 ; 电子天平,Sartori uscp124s ; 全自动生化仪,AU ; 血液分析仪,XT 2000i66541; 台式离心机,Mikro ; 电子天平,Bp3100s ; 切片机, HM340E15782; 脱水机,HMP ; 包埋机, AP ; 染色机,HMS 等实验主要仪器 1.2 实验动物与菌株选用 SPF 级昆明种小鼠, 由上海杰思捷实验动物有限责任公司提供 ( 生产许可证号 :SCXK( 沪 ) ), 实验动物使用许可证号 :SYXK( 沪 ) SPF 级 SD 大鼠, 由上海杰思捷实验动物有限公司提供 ( 生产许可证号 :SCXK( 沪 ) ), 实验动物使用许可证号 :SYXK( 沪 ) 动物饲料由上海福贝宠物用品有限公司, 登记证号 : 沪饲证 (2014)04002 饲养温度为 20 25, 相对湿度为 40 70% 试验菌株 TA97 TA98 TA100 TA102 由美国分子毒理学有限公司 (MOLECULAR TOXICOLOGY, INC.) 提供, 产品质量保证证书批号分别为 :4584D 4599D 4600D 4604D, 经生物学特性鉴定符合实验要求 取出一套液氮保存菌株, 制作主平板, 选择分

3 452 激光生物学报第 26 卷 离度好的单菌落悬浮于 15mL/ 瓶营养肉汤 次 /min 振荡暗培养 12h 菌液浓度在 个 /ml 1.3 实验方法参照 保健食品检验与评价技术规范 (2003 年版 ) 毒理学检验方法进行 [18] 分别进行如下试验 : 急性毒性试验 ( 最大耐受量 (MTD) 试验方法 ), 小鼠畸形试验, 骨髓细胞微核试验 (Giemsa 染色法 ), 鼠伤寒沙门氏菌 / 哺乳动物微粒体酶试验 (Ames 试验 ) ( 平板掺入法 ), 小鼠 30 天喂养试验 1.4 数据分析实验结果用 SPSS16.0 软件进行统计分析 2 结果与讨论 2.1 急性毒理学试验雌雄小鼠急性经口毒性试验结果如表 1 所示 : 试验期间各组动物活动正常, 毛色光泽度好, 未见任何症状和死亡, 到期处死动物, 大体解剖肉眼观 察各脏器情况, 未见异常 由表 1 可知, 雌性小鼠和雄性小鼠的最大耐受剂量均大于 20g/kgBW, 因此低聚肽和维生素 C 复合固体饮料对雌雄小鼠急性经口试验的最大耐受剂量 MTD 均大于 20g/kg, 属于无毒级 2.2 骨髓细胞微核试验小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率的试验结果如表 2 所示 : 由表 2 可知, 与阴性对照组相比, 阳性对照组的微核率明显高于阴性对照组, 具有显著性差异 (P< 0.01); 受试物样品各剂量组的嗜多染红细胞 (PCE) 微核数 / 成熟红细胞 (NCE) 数的比值以及微核率与阴性对照组相比均无显著性差异, 无统计学意义 (P >0.05), 表示受试样品对小鼠骨髓细胞无抑制作用, 说明了低聚肽和维生素 C 复合固体饮料对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性 2.3 小鼠精子畸形试验小鼠精子畸形试验结果如表 3 所示 : 表 1 低聚肽和维生素 C 复合固体饮料对雌雄小鼠急性经口毒性试验结果 Tab.1 AcuteoraltoxicitytestofoligopeptidesandvitaminCcompoundsoliddrinkonmaleandfemalemice 性别 剂量组 动物数 ( 只 ) animals 体重 (g)(x)±sdweight 0( 天 ) 7( 天 ) 14( 天 ) 死亡动物数 ( 只 ) dead animals 死亡率 (%) Mortality 雌性 ± ± ± 雄性 ± ± ± 表 2 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率 Tab.2 Micronucleusrateofpolychromaticerythrocytesinbonemarowofmice 剂量 性别 受检细胞数 ( 个 ) 动物数 ( 只 ) animals examinedcels 微核细胞 ( 个 ) Micronucleuscel PCE/NCE PCE/NCE 微核率 ( ) Micronucleusrate 阴性对照组雌性 ± ±0.45 阳性对照组 雄性 ± ±0.71 雌性 ± ±1.82 雄性 ± ± 雌性 ± ±0.55 雄性 ± ± 雌性 ± ±0.84 雄性 ± ± 雌性 ± ±0.71 雄性 ± ±0.45 注 : 阴性对照组 ( 蒸馏水 20mL/kg), 阳性对照组 ( 环磷酰胺 40mg/kg), 与阴性对照组相比 ( 经卡方检验 ),P<0.01 Note:negativecontrolgroup(distiledwater20mL/kg),positivecontrolgroup(cyclophosphamide40mg/kg), comparedwith negativecontrolgroup(chisquaretest),p<0.01.

4 第 5 期杨晓等 : 低聚肽和 VC 复合固体饮料的安全性毒理学评价 453 表 3 小鼠精子畸形试验结果 Tab.3 Sperm abnormalitytestinmice 剂量 动物数 ( 只 ) animals 受检精子数 ( 个 ) sperm 无 钩 畸形类型数 ( 个 )Typesofabnormalities 香蕉型 胖 头 无定型 尾折叠 双 头 双 尾 畸形精子数 ( 个 ) abnormalsperm 畸形率 ( ) X±SD Deformityrate 阴性对照组 ±1.6 阳性对照组 ± ± ± ±1.6 注 : 阴性对照组 ( 蒸馏水 20mL/kg), 阳性对照组 ( 环磷酰胺 40mL/kg), 与阴性对照组相比 ( 经卡方检验 ),P<0.01 Note:negativecontrolgroup(distiledwater20mL/kg),positivecontrolgroup(cyclophosphamide40mg/kg), comparedwith negativecontrolgroup(chisquaretest),p<0.01. 与阴性对照组相比, 阳性对照组精子的畸形率明显高于阴性对照组的精子畸形发生率, 并具有统计学差异,P<0.01; 而受试样品 3 个剂量组的精子畸形率与阴性对照组的差异无显著性,P>0.05, 说明低聚肽和维生素 C 复合固体饮料对小鼠精子畸形试验结果为阴性 2.4 鼠伤寒沙门氏菌 / 哺乳动物微粒体酶试验 (Ames 试验 ) 在本实验条件下的两次试验结果如表 4 和表 5 所示, 无论是否加入 S9 活化系统, 受试样品每皿 8μg 至 5000μg 的回复菌落数小于溶剂对照组的 2 倍, 呈阴性反应, 并且未见计量 反应关系 而各个阳性对照组的每皿平均回变菌落数均为空白对照组回变菌落数的 2 倍以上, 呈明显的阳性反应, 有强烈的诱变作用 低聚肽和维生素 C 复合固体饮料对小鼠的 Ames 试验结果为阴性 天喂养试验 对大鼠每周体重 摄食量 增重 食物利用率的影响雄性和雌性大鼠体重 增重 摄食量 食物利用率结果如表 6 所示 : 表 4 鼠伤寒沙门氏菌 / 哺乳动物微粒体酶试验第一次试验结果 Tab.4 ResultsoffirsttestinAmes 回复菌落数 ( 个 / 皿 )X±SDBacteriacolonyofreversemutation 剂量 (μg/ml) TA97 TA98 TA100 TA102 S9 +S9 S9 +S9 S9 +S9 S9 +S9 空白对照组 118±6 121±7 32±6 39±3 136±4 141±4 268±19 283±9 溶剂对照组 108±8 115±5 30±2 34±4 133±6 139±3 272±7 275±5 ICR (1μg/mL) 1444±123 对硝基喹啉 (200μg/mL) 1460±105 甲基甲烷磺酸酯 (1μg/mL) 2378± ±252 2 氨基芴 (10μg/mL) 1325± ± ±124 1,8 二羟基蒽酮 (50μg/mL) 1413± ±4 117±3 30±2 36±5 127±4 135±6 265±16 277± ±2 114±6 35±1 34±5 132±7 137±2 269±2 273± ±10 119±8 31±4 27±6 137±8 133±4 278±13 270± ±8 114±7 34±7 34±4 129±9 135±5 276±11 281± ±8 121±5 33±3 31±3 139±3 131±3 271±11 276±11

5 454 激光生物学报第 26 卷 表 5 鼠伤寒沙门氏菌 / 哺乳动物微粒体酶试验第二次试验结果 Tab.5 ResultsofsecondtestinAmes 剂量 (μg/ml) 回复菌落数 ( 个 / 皿 )X±SDBacteriacolonyofreversemutation TA97 TA98 TA100 TA102 S9 +S9 S9 +S9 S9 +S9 S9 +S9 空白对照组 118±8 116±6 31±3 38±2 135±9 144±6 255±5 277±10 溶剂对照组 113±4 109±5 33±8 35±6 136±5 139±4 273±9 275±6 ICR (1μg/mL) 1428±92 对硝基喹啉 (200μg/mL) 1448±135 甲基甲烷磺酸酯 (1μg/mL) 2433± ±243 2 氨基芴 (10μg/mL) 1315± ± ±142 1,8 二羟基蒽酮 (50μg/mL) 1349± ±8 120±3 32±2 35±8 129±7 139±5 263±11 272± ±10 116±9 29±8 38±3 133±11 140±7 273±14 276± ±2 121±6 30±1 33±3 130±7 129±5 260±5 279± ±5 119±3 30±7 33±4 132±5 136±9 268±3 282± ±4 115±7 32±4 35±2 137±5 128±2 272±13 278±18 表 6 雄性和雌性大鼠体重 增重 摄食量 食物利用率结果 (x±sd,n=10) Tab.6 Resultsofweight,weightgain,foodintakeandfoodutilizationratesinmaleandfemalerats(x±SD,n =10) 时间 ( 周 ) Time 组别 Groups 体重 (g) Weight 摄食量 (g) Foodration 增重 (g) Weightgain 食物利用率 (%) Food utilizationrate 雄性雌性雄性雌性雄性雌性雄性雌性 0 周 ± ± ± ± ± ± ± ±7.1 1 周 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±5.8 2 周 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±5.6 3 周 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±3.8 试验末 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±4.7 累积 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±3.5

6 第 5 期杨晓等 : 低聚肽和 VC 复合固体饮料的安全性毒理学评价 455 由表 6 可知, 与对照组相比, 样品各剂量组大鼠的体重 摄食量 增重以及食物利用率均无显著性差异 (P>0.05), 这表明样品各试验组大鼠生长情况基本良好 对大鼠脏器重量及脏 / 体比的影响各组动物的脏器绝对重量和脏体比值如表 7 所示 : 由表 7 可知, 样品各剂量组大鼠肝 肾 脾 睾丸或卵巢等脏器绝对重量和脏体比与对照组相比, 均无显著性差异 (P>0.05) 血液学检查大鼠的血常规测定结果由表 8 可知, 受试样品各剂量组大鼠的白细胞 红细胞 血红蛋白计数以及白细胞的分类与对照组相比均无显著性差异, 无统计学意义 (P>0.05) 对大鼠血液生化值的影响生化指标检测由表 9 可知, 受试样品各剂量组 的生化指标 ( 谷草转氨酶 谷丙转氨酶 总蛋白 白蛋白 尿素氮 肌酐 葡萄糖 甘油三酯 胆固醇 ) 检测值与对照比相比均无显著性差异 (P>0.05) 组织学病理检查大鼠喂养 30 天后, 对各组实验动物进行大体解剖, 肉眼观察各组动物脏器未发现明显的病变 ; 通过显微镜观察剂量组和对照组大鼠, 发现大鼠肝脏 肾脏 脾脏 胃肠 睾丸 ( 雄性 ) 卵巢 ( 雌性 ) 并未发生明显病理组织学改变 在本实验条件下, 以 2.1g/kg 4.2g/kg 8.3g/ kg 剂量的低聚肽和维生素 C 复合固体饮料对大鼠进行 30 天喂养实验 结果 : 各剂量组动物生长发育良好, 大鼠体重 增重 食物利用率 脏器重量 脏 / 体比 血液学指标及血生化指标与对照组比较均无显著性差异 (P>0.05); 大体解剖和组织病理学检查未见与样品有关的异常改变, 则表示受试样品 30 天喂养实验对大鼠未见明显毒作用 表 7 各组动物脏器绝对重量和脏体比值 (x±sd,n=10) Tab.7 Absoluteweightoforgansandratiooforgantobodyweighineachgroup(x±SD,n=10) 性别 组别 Groups 试验末体重 (g) Weigth 肝重 (g) 肝 / 体 (%) 肾重 (g) 肾 / 体 (%) 脾重 (g) 脾 / 体 (%) 睾丸 (g) 睾丸 / 体 (%) Liverweight Liver/ Kidney Kidney/ Spleen Spleen/ Testiculus Body Weight Body Weight Body Testiculus/ body 雄性 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.1 雌性 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.03 表 8 大鼠的血常规测定结果 (X±SD,n=10) Tab.8 Bloodroutinetestresultinrats(X±SD,n=10) 组别白细胞红细胞血红蛋白性别白细胞分类 Leukocyteclasification (10 9 个 /L) (10 12 个 /L) (g/l) Groups Leukocyte Erythrocyte Hemoglobin 淋巴 (%) 单核 (%) 中性 (%) 嗜酸 (%) 嗜碱 (%) 雄性 ± ± ±4 86.2± ± ± ± ± ± ± ±5 85.0± ± ± ± ± ± ± ±6 85.7± ± ± ± ± ± ± ±4 85.1± ± ± ± ±0.0 雌性 ± ± ±6 87.5± ± ± ± ± ± ± ±9 89.0± ± ± ± ± ± ± ±5 88.1± ± ± ± ± ± ± ±6 88.6± ± ± ± ±0.0

7 456 激光生物学报第 26 卷 表 9 生化指标检测结果 (X±SD,n=10) Tab.9 Resultsofbiochemicalindexesinrats(X±SD,n=10) 组别性别 Groups 谷草转氨酶 (U/L) AST 谷丙转氨酶 (U/L) ALT 总蛋白 (g/l) Totalprotein 白蛋白 (g/l) Albumin 尿素氮 (mmol/l) Ureanitrogen 肌酐 (μmol/l) Creatinine 葡萄糖 (mmol/l) Glucose 甘油三酯 (mmol/l) Triglyceride 胆固醇 (mmol/l) Cholesterol 雄性 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.27 雌性 ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 结论在本实验条件下, 分别从急性毒性试验 遗传毒性试验 (Ames 试验 小鼠骨髓细胞微核试验 小鼠精子畸形试验 ) 和 30 天喂养试验对低聚肽和维生素 C 复合固体饮料作为功能性食品食用的毒理学安全性进行了研究, 低聚肽和维生素 C 复合固体饮料对小鼠急性经口最大耐受剂量大于 20g/kgBW, 根据急性毒性分级标准规定, 属无毒级 ; 遗传毒性试验 (A mes 试验 小鼠骨髓细胞微核试验 小鼠精子畸形试验 ) 结果为阴性 ;30 天喂养试验表明, 以 2.1g/kg 4.2g/kg 8.3g/kg 为低 中 高剂量时, 各剂量组动物生长发育良好, 大鼠体重 增重 食物利用率 脏器重量 脏 / 体比 血液学指标及血生化指标与对照组比较均无显著性差异 (P>0.05); 大体解剖和组织病理学检查未见与样品有关的异常改变 表明在本实验条件下可以判定低聚肽和维生素 C 复合固体饮料具有较好的食用安全性 研究结果表明, 该产品使用时是安全性的, 可用于食品和保健食品加工领域, 对于满足消费者的不同需求, 预防和治疗某些疾病具有重要的意义 参考文献 [1] GB/T 海洋鱼低聚肽粉 [S]. GB/T Marinefisholigopeptidepowder[S]. [2] 王宁, 查圣华, 姜水红, 等. 胶原低聚肽改善皮肤水分的实验研究 [J]. 食品研究与开发,2015,36(4):1 3. WANGNing,CHA Shenghua,JIANG Shuihong,etal.Study ontheefectofmarinecolagenoligopeptideandhyaluronicacid onimprovingwomenskinmoisture[j].foodresearchandde velopment,2015,36(4):1 3. [3] 盛彩虹, 江芳. 海洋鱼皮胶原低聚肽促钙吸收作用研究 [J]. 科技经济导刊,2016,6(1): SHENGCaihong,JIANGFang.Studyoncalcium absorptionof colagenpeptidefromseafishskin[j].scienceandtechnology Economy,2016,6(1): [4] 刘文颖, 马永庆, 金振涛, 等. 海洋胶原低聚肽体外抗氧化活性研究 [J]. 食品工业,2010,31(6):9 12. LIUWenying,MA Yongqing,JIN Zhentao,etal.Antioxidant activityinvitroofmarinecolagenoligopeptide[j].foodindus try,2010,31(6):9 12. [5] 刘文颖, 徐姗姗, 谷瑞增, 等. 海洋胶原低聚肽中抗氧化肽的分离及鉴定 [J]. 食品工业科技,2017,38(6): LIUWenying,XU Shanshan,GU Ruizeng,etal.Separation andidentificationofantioxidantpeptidesderivedfrommarinecol lagenoligopeptides[j].scienceandtechnologyoffoodindus try,2017,38(6): [6] GURZ,LICY,LIUW Y,etal.AngiotensinI convertingen zymeinhibitoryactivityoflow molecular weightpeptidesfrom Atlanticsalmon(SalmosalarL)skin[J].FoodResearchInter national,2011,44(5): [7] 刘文颖, 林峰, 谷瑞增, 等. 海洋胶原低聚肽的血管舒张和降胆固醇作用 [J]. 食品与发酵工业,2013,39(12): LIUWenying,LIN Feng,GU Ruizeng,etal.Vasorelaxation andcholesterolreducingactivitiesofmarinecolagenoligopep tides[j].foodandfermentationindustries,2013,39(12): [8] 潘兴昌, 柳园, 戴婷婷. 海洋鱼骨胶原低聚肽改善骨质疏松的效果观察 [J]. 预防医学情报杂志,2011,27(5): PANXingchang,LIUYuan,DAITingting.Observationonthe efectofseafishbonecolagenoligopeptideonimprovingosteopo rosis[j].journalofpreventivemedicineinformation,2011,27 (5): [9] 杨少玲, 李来好. 抗疲劳肽的研究现状 [J]. 湛江海洋大学学报,2006,26(6): YANGShaoling,LILaihao.Researchstatusofantifatiguepep

8 第 5 期杨晓等 : 低聚肽和 VC 复合固体饮料的安全性毒理学评价 457 tide[j].journalofzhanjiangoceanuniversity,2006,26(6): [10] 袁瑞丽. 大口黑鲈饲料添加剂维生素 C 对其生长及抗氧化能力的影响 [D]. 广州 : 中山大学,2013. YUANRuili.EfectsofvitaminCongrowthandantioxidanta bilityoflargemouthbas(micropterussalmoide)[d].guang zhou:sunyat senuniversity,2013. [11] STEPHEN J,WEISSSJ.Tisuedestructionbyneutrophils [J].NewEnglandJournalofMedicine,1989,320(6): [12] 陈国峰, 王亚军. 维生素 C 在新陈代谢中的生理功能 [J]. 中国食品与营养,2014,20(1): CHENGuofeng,WANGYajun.Thephysiologicalfunctionof vitamincinmetabolism [J].FoodandNutritioninChina, 2014,20(1): [13] NJOKUPC.Efectofdietaryascorbicacid(vitaminC)sup plementationontheperformanceofbroilerchickensinatropical environment[j].animalfeedscienceandtechnology,1986, 16(1): [14] DAVIDSONJM,LUVALLEPA,ZOIAO,etal.Ascorbate diferentialyregulateselastinandcolagenbiosynthesisinvas cularsmoothmusclecelsandskinfibroblastsbypretranslation almechanisms[j].journalofbiologicalchemistry,1997,272 (1): [15] 李潇骁, 王新良, 魏捷, 等. 膳食维生素 C 与 2 型糖尿病的关系 [J]. 中南大学学报 : 医学版,2015,40(10): LIXiaoxiao,WANG Xinliang,WEIJie,etal.Relationship betweendietaryvitamincandtype2diabetes[j].journalof CentralSouthUniversity:MedicalEdition,2015,40(10): [16] 金峰. 认识维生素 C[J]. 中国食品与营养,2006,1(1): JINFeng.UnderstandingvitaminC[J].FoodandNutritionin China,2006,1(1): [17] 曾翔云. 维生素 C 的生理功能与膳食保障 [J]. 中国食物与营养,2005,1(4): ZENGXiangyun.Physiologicalfunctionanddietarysupportof vitaminc[j].foodandnutritioninchina,2005,1(4): [18] 中华人民共和国卫生部. 保健食品检验与评价技术规范 (2003 年版 )[M]. 北京 : 中华人民共和国卫生部,2003. MinistryofHealthofthePeople srepublicofchina.techni calstandardsfortesting&asesmentofhealthfood(2003edi tion)[m].beijing:people srepublicofchinahealthminis try, ( 上接第 457 页 ) anddilatedcardiomyopathy[j].journaloftheamericancol legeofcardiology,2004,44(11): [17] KN?LLR,HOSHIJIMAM,HOFFMANHM,etal.Thecar diacmechanicalstretchsensormachineryinvolvesazdisccom plexthatisdefectiveinasubsetofhumandilatedcardiomyopa thy[j].cel,2002,111(7): [18] KN?LLR,LINKEW A,ZOUP,etal.Telethonindeficiency isasociatedwithmaladaptationtobiomechanicalstresinthe mammalianheart[j].circulationresearch,2001,109(7): [19] MASONP,BAYOLS,LOUGHNAPT.Thenovelsarcomeric proteintelethoninexhibitsdevelopmentalandfunctionalregula tion[j].biochemical& BiophysicalResearchCommunica tions,1999,257(3): [20] MARKERTCD,NINGJ,STALEYJT,etal.TCAPknock downbyrna interferenceinhibitsmyoblastdiferentiationin culturedskeletalmusclecels[j].neuromusculardisorders, 2008,18(5): [21] TALWARPK,JHINGRANAG.InlandfishesofIndiaand adjacentcountries[m].aabalkema,1992. [22] KIKUCHIK.Dediferentiation,transdiferentiation,andprolif eration:mechanismsunderlyingcardiacmuscleregenerationin zebrafish[j].curentpathobiologyreports,2015,3(1): [23] TSURUWAKAY,KONISHIM,SHIMADAE.Losofwwox expresioninzebrafishembryoscausesedemaandaltersca(2 +)dynamics[j].peerj,2015,3(23):e727.

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