Applitech 艾贝泰, 您身边的生物制药专业团队 我们致力于使生物工艺变得 更智能 更环保 更高效

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1 2013/2014 生物制药 Biopharmaceutical Catalog

2 Applitech 艾贝泰, 您身边的生物制药专业团队 我们致力于使生物工艺变得 更智能 更环保 更高效

3 ABOUT 公司简介 艾贝泰制药设备科技有限公司 (Applitech Pharmaceutical Equipment Technology Co.Ltd) 成立于 2009 年, 是华粤企业集团有限公司旗下的全资子公司, 同时也是荷兰 Applikon Biotechnology BV. 中国办事处 Applikon 公司是全球生物反应器最顶尖的品牌生产商之一, 具有极其强大的生物技术应用研究和开发能力, 其产品一直以其高品质 高质量 高服务水准而闻名世界, 其蒸汽锅灭菌的生物反应器是世界生物制药工业的标准, 从实验室到中试规模的生物反应器一直都是行业的领导者 艾贝泰立足于生物工艺的优化 放大及产业化, 为了在生物医药领域有更加完善的产品线, 艾贝泰还引进了国外最先进的技术和产品, 如美国 Nova 生化分析仪 美国 InDevR ViroCyt 2100 病毒计数仪 丹麦 ChemoMetec NucleoCounter 细胞活力分析仪和高级细胞分析仪 美国 Flownamincs 在线取样器 英国 Constant Systems 高压细胞破碎仪 美国 Wheaton 细胞培养装置和滚瓶培养装置等, 为用户提供全方位的专业产品解决方案 艾贝泰在全国拥有经验丰富的技术支持队伍和即时响应的售后服务团 队 用户可通过售后服务电话 咨询有关技术问题及故障报 修, 我们将在第一时间为您提供专业的服务

4 专业全方位解决方案 InDevR 病毒计数仪 Nova 多参数生化分析仪 Flownamics 在线过滤探头 Flownamics 全自动在线取样器 Applikon 生物反应器 Wheaton 细胞培养装置 Applikon 玻璃罐生物反应器 Constant 高压细胞破碎仪 ChemoMetec 高级细胞分析系统 ChemoMetec 细胞活力分析仪

5 目录 CONTENTS 生物反应器荷兰 Applikon mini 生物反应器荷兰 Applikon 玻璃罐体蒸气锅灭菌生物反应器荷兰 Applikon 一次性生物反应器荷兰 Applikon 台式不锈钢原位灭菌生物反应器荷兰 Applikon 中试规模生物反应器荷兰 Applikon 工程规模生物反应器荷兰 Applikon Biosep 声学细胞截留系统 ( 灌流培养 ) 荷兰 Applikon 微型生物反应器荷兰 Applikon RAM 声波共振摇床荷兰 Applikon 光照生物反应器荷兰 Applikon 酒精发酵监测仪多参数生化分析仪美国 Nova BioProfile 多参数生化分析仪美国 Nova BioProfile Flex 多功能过程参数分析仪美国 Nova BioProfile CDV 自动化细胞活力分析仪病毒计数仪美国 InDevR 病毒计数仪全自动在线取样器美国 Flownamics FISP 取样探头美国 Flownamics 全自动在线取样器细胞活力计数仪和高级细胞分析系统丹麦 ChemoMetec 细胞活力分析仪丹麦 ChemoMetec 细胞计数与活力分析仪丹麦 ChemoMetec 细胞健康评估仪丹麦 ChemoMetec NC-3000 高级细胞分析系统高压细胞破碎仪英国 Constant Systems 高压细胞破碎仪细胞培养装置美国 Wheaton 细胞培养优化系统冻干机西班牙 Telstar 中试型冻干机其他常用仪器

6 微型反应器实验室规模中试规模大项目和工程规模 Applikon µ-flask 生物反应器 Applikon Project 工程规模生物反应器 ( 270~20000L ) Applikon sensored µ-flask 生物反应器 为您提供 Applikon RAM 声波共振摇床 最全面的 Applikon Pilot Plant 系列 ( 微生物发酵系列 : 20~ 270L 细胞培养生物反应器系列 : 30~130L ) 1

7 Applikon PhotoBio 光照生物反应器 Applikon AppliFlex 一次性生物反应器系列 10~50L Applikon Mini 生物反应器 生物反应器 选择更好的工具 + 最专业的服务团队 = 做最好的决定 生物反应器 BioBundle Autoclavable 玻璃罐系列 2~15L 带夹套罐体和 1-20L 单壁罐体 Applikon BioSep 声学截留系统 Applikon BioBench 原位灭菌不锈钢罐系列 7~30L 2

8 Applikon Biotechnology 公司是全球生物反应器最顶尖的品牌生产商之一, 专业开发 生产 供应研究和生产级的反应器系统 公司总部位于荷兰, 其蒸汽锅灭菌的生物反应器是世界工业标准, 从实验室 中试到生产规模的生物反应器一直都是行业的领导者 Applikon Biotechnology 能为用户提供从微型 一次性 实验室规模 中试规模到生产型的全系列生物反应器 ( L), 适用于微生物 动物细胞和植物细胞培养 长久以来,Applikon 公司与众多国际知名的研究机构 制药企业进行紧密合作, 将行业内各种工艺及高端技术精髓融入到产品的设计中, 使产品可以满足用户最复杂的工艺需求 同时, Applikon 采取高标准的质控标准, 确保提供给客户品质最好的生物反应器 Applikon 通过与专业的工程公司合作, 可为用户提供交钥匙大工程项目 近 40 年生物反应器设计 生产经验,Applikon 一直专注于 : 生物反应器 发酵技术 细胞培养技术 过程工程 无菌和清洗工程 验证程序 机械和电子工程 检测和控制工程 软件开发和自动化 i-control 控制器 PLC 1 控 4 平台 符合 ISAS88 GAMP cgamp 等标准 功能强大 高度灵活 可灵活增减硬件模块 过程工艺设计可客户定制 更容易实现放大和缩小 ez-control 控制器 自适应性 PID 控制 四级级联控制 细胞密度模块 可控制不同系列 品牌的生物反应器 独特 领先的开发能力 唯一 独特设计的电极 Applikon 原厂设计生产 精准 寿命长 低维护 Applikon A STEP AHEAD 科技领先一步 Biosep 声频细胞截留设备 RAM 声波振荡摇床 经验 + 专业 20 年经验的发酵或细胞培养工艺设计工程师 专业化的艾贝泰技术团队 高洁净度罐体 316L 不锈钢材质 内表面经电抛光 :Ra<0.4μm 外表明镜面抛光 高度可信赖 著名欧美制药大公司用户群 售后技术服务 提供 DQ OQ IQ FAT SAT 验证服务 迅速响应 3

9 Applikon mini 生物反应器 Applikon mini 生物反应器 (250m L,500m L and 1000m L总体积 ) 可以实现实验室规模反应器 (1 到 15L) 的缩小培养, 而且 Applikon mini 生物 反应器和实验室规模的反应器具有相同的灵活性 适应性 Applikon mini 反应器的特性 平行控制培养, 每个罐子独立监控在线自动检测控制参数 : ph 温度 DO 搅拌 液位 泡沫等可用于批次培养 流加培养 灌流培养 连续培养培养所需的空间少,5 联罐所占空间不到 1m2 基于 Autoclave 生物反应器设计, 参数可放大培养基消耗少, 最少只需 50mL 用户可自由选择系统数量 :1~32 应用于工艺开发, 培养基优化, 表达优化等面板可选择颜色补料控制 ( 选配 ): 将天平和补料泵关联, PID 控制, 实现精确补料 my-control 控制器 my-control 是小规模生物反应器的专用控制系统, 适用以下规模的反应器 : 250mL~1000mL 的 mini 反应器 1L~3L 的 Autoclavable 玻璃罐生物反应器 3L Cellready 搅拌式一次性生物反应器 自适应 PID 控制通过 webbrowser ipod 或 ipad 显示操作界面 实现参数的设定 开始 / 停止控制回路 校正数据等多达 32 个 my-control 控制器组成平行反应器网络具有 ph DO 温度 搅拌 泡沫 液位等六个控制回路最多可配置 6 个变速泵可选配微阀进行精确补料可选配质量流量控制器 (3 通道 ), 进行气体补加量的监控可额外提供 8 个数字信号输出 4 个模拟信号输入 4 个模拟信号输出细胞密度模块 荧光 ph/ 溶氧电极 天平等参数可通过 USB 接口进行通讯 生物反应器 4

10 MiniBio 生物反应器 MiniBio 生物反应器是目前国内市场上搅拌式反应器中, 工作体积最小的生物反应器 MiniBio 生物反应器是根据 Autoclavable 生物反应器设计的, 采用真正一对一控制, 并且其最小工作体积只需 50mL, 降低了培养成本 MiniBio 系统可以客户定制化, 以满足任何需求 MiniBio 生物反应器的规格 总体积 250mL, 工作体积 50mL~200mL 总体积 500mL, 工作体积 100mL~400mL 总体积 1000mL, 工作体积 200mL~800mL 微阀微量补料, 每滴体积从 500nL 到 50µL 流速从 1.8mL/hour~200mL/hour 可实现连续补料适用于微量营养物质的添加 MiniBio 生物反应器的特点单壁罐体温度控制采用 Peltier 或加热毯 Lipseal 马达, 噪音低, 范围为 0~2000rpm, 进气可选择 L-Sparger 或 Porous Sparger ph,do 采用 AppliSen 电极, 反应灵敏, 测量准确 Peltier 尾气冷凝 生物反应器 5

11 ez-control 控制器 Biomass 模块 ( 选配 ) 除 ph DO 温度 搅拌 泡沫 / 液位控制回路外, 可增配 Biomass 模块, 实现细胞密度的在线测量及反馈补料等操作 从 R&D 到 cgmp 从实验室规模到产业化 彩色的触摸屏, 界面直观, 操作简单 通过 Ethernet 和电脑连接, 配上 Applikon BioXpert 软件 ( 可选 OPC), 可从网络的任何地方采集和处理数据 E z - c o n t r o l 有四级水平操作 (4 级密码保护 ):View operator system engineer service engineer 高度模块化设计, 用户可根据工艺需要方便地增减功能模块 自适应 PID 控制 自动调整 PID 设定值, 实现 ph 溶氧温度等参数的最优化控制 缩短工艺优化时间, 尤其适用于第一次操作或新项目的开展 级联控制, 如溶氧四级级联控制 : 将溶氧与空气 氧气 氮气和搅拌转速关联, 并可实现自动序列 ADDA 板 ( 选配 ) 可额外提供 28 种输入输出信号 可根据客户需求增减不同控制模块 补料控制 ( 选配 ) 将天平和补料泵关联,PID 控制, 实现精确补料 生物反应器 通用性好 ez-control 可控制不同大小的生物反应器, 也可支持 Hyclone 或其他品牌的罐体 6

12 Applikon BioBundle Autoclavable 玻璃罐生物反应器 ( 1-20L ) Applikon 实验规模生物反应器一直是全球市场的领导者,Applikon 实验室规模生物反应器由于功能强大 配置灵活 操作方便 易升级扩展等特点而深受广大用户的青睐 Applikon 实验室规模生物反应器有 BioBundle 一次性生物反应器 Bio Bench 系列, 其中 Applikon BioBundle 玻璃罐系列生物反应器功能强大, 又易于工艺放大, 是开展动物细胞培养和微生物发酵研发项目的最佳选择, 可用于动物细胞 大肠杆菌 酵母 真菌 昆虫细胞和植物细胞培养等 Applikon BioBundle 玻璃罐有夹套罐体和单壁罐体两种类型 单壁罐体 ( 加热毯控温 ) 夹套罐体 1L 2L 3L 5L 7L 15L 20L 2L 3L 5L 7L 15L BioBundle Autoclave 玻璃罐生物反应器特点 : 生物反应器 简单 经典功能模块化 : 可根据客户的应用需求, 增减各种功能模块灵活性 : 系统可根据工艺要求调整配置, 从而满足工艺变化需求标配控制器为 ez-control, 可选配 i-control( 详见第 8 页 ) 用于实验室级别的微生物发酵和动物细胞培养最多可选配 4 个 MFC 可选配 Biomass 模块可选配 Biosep 声频灌流装置 7

13 Applikon 一次性生物反应器 一次性反应器因其初次投入少 操作简单的特点越来越被青睐 许多以哺乳动物细胞培养为基础的生物制品的生产商正在转向预先消毒的, 且符合法规要求的一次性生物反应器 AppliFlex 袋式一次性生物反应器 有 10L 20L 50L 三种规格 标配控制器为 ez-control, 可选配 i-control( 详见第 8 页 ) 实时监测和精确控制 ph DO 温度 混合 波浪式振荡混匀, 对细胞更温和 无需消毒 无交叉无染, 无需反复验证 压力调节阀控制反应袋内压力 ph DO 温度电极均为一次性设计, 也可选配可反复使用的 ph 和 DO 电极 可选数据 Logging 和 SCADA 软件 可与玻璃罐生物反应器共用控制器 适合实验室规模动物细胞培养和中试规模 cgmp 应用 Reference 1. Regine Eibl, Sören Werner, Dieter Eibl. Disposable bioreactors for plant liquid cultures at Litre-scale. Engineering in Life Sciences, Vol 9(3): Christoph Ries, Gernot John, Corinne John, Regine Eibl, Dieter Eibl. A shaken disposable bioreactor system for controlled insect cell cultivations at milliliter-scale. Engineering in Life Sciences, Vol 10(1): Regine Eibl and Dieter Eibl. Design of bioreactors suitable for plant cell and tissue cultures. Phytochemistry Reviews, Vol 7(3): Angelo DePalma. Disposable Use Proliferates in Production. Genetic Engineering & Biotechnology News, Vol 28 (16): Regine Eibl and Dieter Eibl. Disposable Bioreactors in Cell Culture-Based Upstream Processing. BioProcess International, Vol 7 (S1): Regine Eibl, Stephan Kaiser, Renate Lombriser and Dieter Eibl. Disposable bioreactors: the current state-of-the-art and recommended applications in biotechnology. Applied Microbiology and Biotechnology, Vol 86(1): Cellready 3L 搅拌式一次性生物反应器多色系列, 可供选择标配控制器为 ez-control ( 详见第 4 页 ) 完全模拟 3L 玻璃罐生物反应器培养条件搅拌式混合, 混合效果好 ph DO 温度 泡沫 搅拌控制回路可与玻璃罐生物反应器共用控制器适合实验室规模动物细胞培养 生物反应器 Reference 1. Regine Eibl, Stephan Kaiser, Renate Lombriser and Dieter Eibl. Disposable bioreactors: the current state-of-the-art and recommended applications in biotechnology. Applied Microbiology and Biotechnology, Vol 86(1): Christine Valle. Biotechnology drugs: Integrated single-use technologies for biopharmaceuticals. Filtration & Separation, Vol 46(6):

14 Applikon 原位灭菌不锈钢罐生物反应器 原位灭菌 (Steam-In-Place, SIP) 生物反应器, 适合细胞培养和微生物发酵 磁力耦合搅拌 带有可视窗口的 316L 不锈钢罐体, 不锈钢顶盖 罐体的上侧部 下侧部及底部配有相应的端口分别用于通气 补料 连接电极 取样和排液等 罐体配有压力表及压力安全保护装置 ( 爆破片 ) 罐体外表面镜面抛光, 罐体及管道内表面经电抛光 :Ra< 0.4μm, 确保罐体和管道组件可靠的洁净, 可选配在位清洗功能 (Clean-In-Place,CIP) 触屏操作的 ez-control 控制器具有 ph DO 温度 细胞密度 ( 选配 ) 搅拌 泡沫等控制回路 ; 可选配 i-control 控制器 ( 详见第 8 页 ) 模块式设计和系统的灵活性, 方便用户根据工艺的要求增减功能模块 BioBench 实验室规模原位灭菌不锈钢 罐生物反应器 (7-30L) 台式生物反应器 有 7L 15L 20L 和 30L 四个型号 标配控制器为 ez-control, 可选配 i-control ( 详见第 8 页 ) 生物反应器 Applikon Pilot Plant 中试规模原位灭菌不 锈钢罐生物反应器 ( L) Applikon Pilot Plant 带支架原位灭菌生物反应器分为微生物发酵罐和细胞培养生物反应器 140L 以下标配 ez-control, 可选配 i-control( 详见第 8 页 ), 大于 140L 标配控制器为 i- Control 微生物发酵罐 20L 40L 70L 140L 270L 顶部或底部磁力耦合搅拌 细胞培养生物反应器 30L 60L 130L 顶部磁力耦合搅拌 9

15 i-control 控制器 Applikon i-control 是一种现成的控制解决方案, 它采用公共控制台安置的现场总线输入 / 输出式设计 由 于采用现场总线作为控制器的核心, Applikon 公司可以设计应用于各种工业标准的控制器系统, 如 Allen Bradley Delta V Siemens AB 等 i-control 特点 触屏操作的人机界面, 界面直观, 操作简单 PLC 工艺控制平台 多种工业控制平台可选 :Siemens/Allen Bradley/Delta V 工业标准 Fieldbus 的 I/O 设计, 便于维护和拓展功能 无限扩展性和灵活性, 优越的可靠性 中试级和工业级应用, 开放的平台 - 例如链接 Pi 数据记录 符合 ISAS88 GAMP cgamp 等标准 全自动 SIP 和 CIP 功能 测量与控制参数 ph( 可双 ph) 溶氧 ( 可双 DO) 温度 ( 可多达 10 个温度探头 ) 泡沫 液位 搅拌 称重 Biomass 光密度 OD 值等 可控制多达 8 路气体 ( 可选 8 个 MFC's) 天平 ( 可多达 6 个天平 ) 8 个内置泵 ( 变速或恒速泵 ) 8 个外置泵 ( 变速或恒速泵 ) 可以同时控制多个不同大小生物反应器, 利于放大 Local Human Interface (option) inch LCD/TFT Gas compartment: max.8*rotameter or MFC gas mixing/selection sparge/overlay internal I/O bus Electrical compartment: internal I/O bus (confgurable) optional third party PLC sensor connectors stirrer speed controller emergency stop Utilities compartment: max.4*pumps water bath or cold water / heating blanket heating blanket water for condenser 生物反应器 10

16 Applikon Project 工程规模生物反应器 中试规模以上的反应器, 最高可达 20000L, 属顾客定制型反应器 采用标准工业控制平台 (Simens A llen Bradley DeltaV) 的 i-control 控制器 ( 详见第 8 页 ) 具有 CIP 自控程序 按照 cgmp 标准设计和制造, 提供交钥匙工程 专业的项目管理 : 在设计 制造的整个过程, 始终保持与用户保持沟通, P r o j e c t management 网站使客户可全程跟踪项目的信息和进度 完善的验证体系 :DQ OQ IQ FAT 和 SAT 验证等 从设计到生产 生物反应器 11

17 BioXpert 控制软件 BioXpert 软件是专门为生物工艺研究人员和生产操作人员设计的, 是控制生物工艺和储存工艺数据的软件工具 程序的逻辑结构及用户友好的界面使任何人都可使用该软件 该软件操作简单, 功能强大 : 监控 收集 储存数据和控制培养过程参数 通过 Applikon 软件可方便对任何生物工艺过程进行优化和控制 Applikon 按照国际标准开发了三种版本 BioXpert 软件用于研究 中试或生产 :BioXpert Lite BioXpert V2 BioXpert XP BioXpert Lite 主要用于数据的收集 储存和数据报告,BioXpert V2 提供最大的灵活性, 便于工艺参数的优化, 而 BioXpert XP 侧重过程的重现性和数据的安全性 BioXpert Lite 软件 : 数据获取软件 控制器过程参数的测量 可进行在线 / 离线数据的收集 具有专利的文件格式的数据储存系统, 可以 EXEL BMP 图形的格式输出数据报告 趋势图 柱图 概况图显示数据, 一个图中最多显示 10 个参数曲线图 在图中可将当前和历史的数据进行组合, 也可将目前操作不同批次的组合 可通过表格和散点图形式显示测量数据, 也可储存预设的图形设置 ; 图形的 X 轴可以是任何选择的参数, 可选一个参数对另一个参数进行作图, 如细胞密度 ( 生物量 ) 对光密度, 通过这种方式, 用户可轻易发现两个参数之间的关联 BioXpert V2 软件 (SCADA) 控制器过程参数的测量, 可与天平 质谱仪 ADDA 板 尾气分析仪等进行通讯 可对参数进行设定和控制, 可启动和停止控制循环 可实现时间或事件的编程控制 可以图形形式进行控制参数的设定, 手动设置控制参数 可进行在线 / 离线数据的收集 可利用在线 / 离线数据进行在线计算 具有专利的文件格式的数据储存系统, 可以 EXEL BMP 图形的格式输出数据报告 趋势图 柱图 概况图显示数据, 一个图中最多显示 10 个参数曲线图 在图中可将当前和历史的数据进行组合, 也可将当前操做不同批次的组合分析 可通过表格和散点图形式显示测量数据, 也可储存预设的图形设置 ; 图形的 X 轴可以是任何选择的参 数, 可选一个参数对另一个参数进行作图, 如细胞密度 ( 生物量 ) 对光密度, 通过这种方式, 用户可轻易发现两个参数之间的关联 符合 GAMP 标准 BioXpert W7 软件 (SCADA) 控制器过程参数的测量, 可与天平 质谱仪 ADDA 板 尾气分析仪等进行通讯 可对参数进行设定和控制, 可启动和停止控制循环 可实现时间或事件的编程控制, 具有 Recipe 功能 可对控制器进行编程, 并可读取校正数据 具有密码保护, 用户定义访问权限 停电后自动重启 可以图形形式进行控制参数的设定, 手动设置控制参数 可进行在线 / 离线数据的收集 可利用在线 / 离线数据进行在线计算 SQL 的数据储存系统, 可以 EXEL BMP 图形的格式输出数据报告 可选择每个参数的采集频率 趋势图 柱图 概况图显示数据, 一个图中最多显示 10 个参数曲线图, 也可显示工艺流程图 在图中可将当前和历史的数据进行组合, 也可将当前操做不同批次的组合分析 可通过表格和散点图形式显示测量数据, 也可储存预设的图形设置 ; 图形的 X 轴可以是任何选择的参数, 可选一个参数对另一个参数进行作图, 如细胞密度 ( 生物量 ) 对光密度, 通过这种方式, 用户可轻易发现两个参数之间的关联 可实现远程访问和输出数据报告 符合 GAMP,ISA S88 标准,FDA 21CFR Part 11 生物反应器 12

18 Applikon BioSep 细胞声学截留系统 ( 灌流培养 ) 目前动物细胞培养灌流工艺主要截留设备为中空纤维柱和旋转过滤器等, 它们共同的缺点是容易堵塞 清洗困难 批间差异大等 Applikon 公司开发的 Biosep 细胞声学截留系统是用声频能量构成一个 虚拟网 截留细胞,Biosep 不仅截留效率高, 而且不易堵塞, 易于清洗和在线灭菌, 在灌流培养领域具有开拓性意义 灌流培养与批次培养 流加培养在生产抗体应用上的比较 相当于 350L 批次培养 生物反应器 MAb conc.[ g/ml] 180 Batch 160 Perfusion Time (h) BioSep 细胞声学截留工作原理 Cumulative Monoclonal Antibody (g) 利用 50L BioSep 灌流,CHO 细胞生长状况 Time (h) Perfusion Successive Batch Cultures A. 蠕动泵将细胞培养液泵入 Biosep 腔体 B. Biosep 高频率超声波使细胞聚集, ( 在图像上 ) 形成 竖线样 的细胞团 ( 如图右侧 ), 聚集成团的细胞在重力作用下沉降到底部, 细胞与培养基分离 C. 泵出培养基, 收获产物 D. 底部沉积的细胞回收到生物反应器 13

19 BioSep 声学细胞截留系统的优势 BioSep 声学截留系统 传统过滤器截留系统 低剪切力 剪切力大, 易对细胞和产物造成机械损伤 无堵塞 易堵塞 细胞不易流失,90-99% 回收率 细胞损失最多达 40% 使用寿命长 多次反复清洗后, 更容易堵塞, 截留效率降低 易于 CIP 和 SIP 不利于 CIP 和 SIP 利于工艺验证 不利于工艺验证 BioSep 细胞声学截留效率 MiniBiosep Biosep 10L Biosep 50L Biosep 200L Biosep 1000L 生物反应器 型号 1L MiniBiosep 10L Biosep 50L Biosep 200L Biosep 1000L Biosep 灌注速率 0~1 L/day 1~10L/day 5~50L/day 20~200L/day 100~1000L/day BioSep 安装示意图 14

20 生物反应器 Reference 1. Miller,A.O.A. Combing cell culture & process operation. Sonoperfusion allows direct feed with expanded-bed chromatography.genetic engineering news Vol 21,p29, Ryll,T,Dutina,G,Reyes,A,Gunson,J,Krummen,L,Etcheverry,T,Performance of small-scale CHO perfusion cultures using an acoustic cell fltration device for cell retention; Characterization of separation effciency and impact of perfusion on product quality, Biotechnol Bioeng 69; , Trampler,F,Sonderhoff,S.A,Pui,P.W.S,Kilburn,D.G.and Piret,J.M.. Acoustic Cell Filter for High Density Perfusion Culture of Hybridoma Cells. Bio/Technol.12: , Zhang,F,A.Collins,M.Chen,I.Knyazev and R.Gentz. High-density perfusion culture of insect cells with a BioSep ultrasonic filter, Biotechnol Bioeng 59: , M.C.F.Dalm,S.M.R.Cuijten,W.M.J.van Grunsven,J.Tramper,D.E.Martens.Effect of feed and bleed rate on hybridoma cells in an acoustic perfusion bioreactor:part I.Cell density,viability and cell-cycle distribution.biotechnology and bioengineering,vol.88 no.5, J.Crowley. Using sound waves for cgmp manufacturing of a fusion protein with mammalian cells. Bioprocess International.46-49,

21 Applisens 电极 Applisens ph 电极 Applisens ph 电极采用 固定袖套隔膜 作为离子交换通道, 相对于市场上其它的隔膜电极, 袖套隔膜 电极增加了测量准确度和精度, 有着优异的性能 : 无交叉污染 精确的校准 对污垢不敏感 不需要重复校正 低的稳定的补偿 长时间信号稳定 电极由符合 FDA 要求的材料制造, 无毒性固体胶电极, 有 内部压力 保护减少交叉污染, 保证重复灭菌 AppliSens 的电极头部有长寿命的编码打印 ( 刻录系列号 ), 附有证书 ( 有利于验证,FAD/GLP) Applisens 溶氧电极 Applikon 公司开发了自己的低漂移 长寿命的溶氧电极, 是专门为细胞培养和发酵工艺设计的, 其基于 CLARK 测量池原理的溶氧电极在设计上由小阴电极和电极膜组成, 溶氧电极膜上加有一层高渗透性的强化硅胶膜, 赋予溶氧电极如下特性 : 最佳的清洁性 ( 全电极表面电抛光 Ra< 0.4μm) 流体流动依赖性低 良好的响应时间 高的机械强度 连续几个月操作而不需要维护 维护简单 生物反应器 电极头部有长寿命的编码打印 ( 刻录系列号 ), 附有材料和测试证书 ( 有利于验证 FAD/GLP) 16

22 Applikon 尾气分析装置 Applikon 尾气分析装置适用于各种大小的生物反应器的尾气分析 Applikon CO 2 尾气分析 检测原理 : 分光光度法, 通过测量两个波长的红外光吸收来测量 CO 2 的绝对浓度 意义 : 控制生物过程 评价培养的生长过程 Applikon O 2 尾气分析 检测原理 : 氧探头的核心部分是二氧化锆 (ZrO 2 ) 和氧汞池 当 ZrO 2 加热到 560 o C, 给氧泵池通上电压和电流, 氧泵池有限的电流与样品中氧的浓度成正比 意义 : 用来计算 OUR( 氧摄取速率 ) 尾气分析装置特点 专利技术对湿度不敏感与温度无关 生物反应器 尾气分析装置技术参数 17

23 Applikon μ -Flask/Sensored μ -Flask 微型生物反应器 大量数据表明 Applikon μ-flask/sensored μ-flask 微型生物反应器较一般培养方法在时间上节省 10 倍以上, 是 大规模菌种 / 细胞株筛选 培养条件优化研究的最佳工具 Applikon μ-flask 微型生物反应器 结果稳定至 μ L 级! 微孔板规格 24 方底深孔板 (2.5-4 ml) 96 方底深孔板 (0.5-1ml ) 24 圆底浅孔板 ( ml) 96 圆底浅孔板 ( ml) 三明治盖子 使每个深孔板上的微孔形成一个独立的微型生物反应器 五层三明治材料设计 独一无二 限制培养基蒸发, 减少孔与孔之间的差异 增加氧气传质速率, 气体交换率高达 1-2VVM 确保孔与孔之见无交叉污染 细胞浓度能达到 10g 菌体干重 /L 摇床固定夹具 将 μ-flask 固定在摇床上 生物反应器 每个固定夹可固定 1 块深孔板或 4 块浅孔板 每个摇床最多可进行 1536 或 6144 个微型培养实验 Cyro 接种器 有 96 根接种针, 可直接从冻存的甘油种子库取种, 不需要融化种子样品, 从而使种子库能保持几年的活性 18

24 Applikon Sensored μ-flask 微型生物反应器 更精细的大规模菌种 / 细胞株筛选 培养条件优化工具 Sensored μ-flask 多孔板的每个微孔底部固定了一个微小的电极点 (ph 或 DO), 它含有发光的染料, 通过 SensorDish Reader( 读板器 ) 上发出的激发光激发该染料发光, 它通过非接触式方法可检测染料所发光的寿命 ( 如右图 ), 染料发出光的寿命取决于溶液 ( 样品 ) 中的氧的分压和 ph, 通过软件得出每孔的溶氧和 ph 值, 从而实现对每个微孔中培养液 ph 值和溶氧的测量 微孔板规格 :6 孔板和 24 孔板 配套有三明治盖子 固定夹具和接种器 非接触式检测每个微孔的 ph 或 DO 提高过程的监控和安全 提高培养的质量和效率 优化培养参数 实时获取培养数据, 可即时提示需更换培养基 可用时检测多达 240 个样本 还可特殊应用于大规模厌氧 ( 或嗜氧 ) 培养研究 生物反应器 微型生物反应器 Reference 1. Brooks S.J., Doyle E.M., Hewage C., Malthouse J.P.G., Duetz W., O'Connor K.E.. Biotransformation of halophenols using crude cell extracts of Pseudomonas putida F6. Applied Microbiology and Biotechnology, Vol64: Duetz, W.A., Withol t, B., Oxygen transfer by orbital shaking of square vessels and deepwell microtiter plates of various dimensions. Biochemical engineering Journal, Vol 17: van Beilen J.B., Li Z, Duetz W.A., Smits T.H.M., Witholt B.. Diversity of alkane hydroxylase systems in the environment. Oil & Gas Science and Technology-revue del institute francais du petrole Vol 58 (4): Spain J.C.,Nishino S.F., Witholt B,. Tan L.S., Duetz W.A.. Production of 6-phenylacetylene picolinic acid from diphenylacetylene by a toluenedegrading Acinetobacter strain. Applied and Environmental Microbiology, Vol 69 : Duetz W.A., Bouwmeester H., van Beilen J.B., Witholt B., Biotransformation of limonene by bacteria, fungi, yeasts, and plants. Applied Microbiology and Biotechnology, Vol61: Van Beilen J.B., Duetz W.A., Schmid A., Witholt B.. Practical issues in the application of oxygenases. Trends in Biotechnology, Vol 21: O'Leary N.D., Duetz W.A., Dobson A.D.W., O'Connor K.E.. Induction and repression of the sty operon in Pseudomonas putida CA-3 during growth on phenylacetic acid under organic and inorganic nutrient-limiting continuous culture conditions. Fems Microbiology Letters, Vol 208: Li Z., et al.. Oxidative biotransformations using oxygenases. Current Opinion In Chemical Biology, Vol 6 (2):

25 Applikon RAM 声波共振摇床 摇瓶培养的革新技术 Applikon RAM 声波共振摇床是利用声波共振技术, 用低频 高强度的声能使微生物培养液上下震动 Applikon RAM 摇床是传统的轨道摇床的高效替代品, 它大幅度地提高了细菌和真菌培养中氧的传质速率和培养基的混合力度 配合专利技术的 Oxy-pump Stopper 盖子使用,Applikon RAM 摇床的氧传质速率比轨道摇床高 6 倍 与轨道摇床相比,Applikon RAM 声波共振摇床的优势 : 有氧培养中, 氧传质速率 (OTR) 提高 6 倍能加快气体混匀速度可用高浓度的培养基配方细胞密度可提高 2~6 倍产物表达可提高 10 倍混匀力度大幅度增加, 对高粘度培养特别适用摇瓶的液体装载量达到 50%, 而轨道摇床只能装 20% 恒温控制 环境温度 +5 ~ 60 Applikon Oxy-pump Stopper 盖子 ( 专利设计 ) 独特设计, 由过滤帽 防倒吸组件和防溅出组件组成可随着共振的声波上下震荡, 增加气体交换, 而内部液体保证不会溅出气体交换速度快 : 每 30 秒顶部气体彻底交换一次, 而轨道摇床需要 4 分钟适用于所有摇瓶可蒸汽锅灭菌无菌过滤帽可更换 固定盘 将摇瓶底部固定住 生物反应器 应用举例 : Applikon RAM 摇床培养 E. coli 表达 GFP 蛋白 加入 62.5 ml 含阿拉伯糖和氨苄青霉素的 H15 培养基和表达 GFP 荧光蛋白的 E. coli HB101 菌株到 250ml 的锥形摇瓶 (Pyrex 4442) 中, 分别盖上 Applikon OxyPump 盖子和 Whatman Bugstopper 盖子, 分别置于传统摇床和 Applikon RAM 声波共振摇床培养 放入 Applikon RAM 声频共振波摇床的摇瓶盖上 OxyPump 盖子,Applikon RAM 摇床设置为 12g 放入传统摇床的摇瓶盖上 Whatman Bugstopper 盖子, 传统摇床 (3/4" orbit) 的设置为 400rpm 最后实验结果表明, 培养 9 小时后, 用 Applikon RAM 声频共振摇床培养的 E. coli HB101 的浓度较传统摇床高 3-4 倍, 其 GFP 蛋白表达量较普通摇床高 10 倍以上 7 20

26 Applikon Photobio 光照生物反应器 Applikon 发展和创新了 LED 光面板作为标准搅拌式反应器和一次性反应器生物反应器的选配模块, 为利用光 合作用生长的微生物培养提供了最大的灵活性和经济建立 3L 到 20L 蒸气锅灭菌生物反应器和 10L 到 50L 一次性 生物反应器可选择光照系统 PhotoBio 光照生物反应器有以下型号可选择 型号 描述 光面板 PhotoBioSTR2 PhotoBioSTR3 PhotoBioSTR5 PhotoBioSTR7 PhotoBioSTR15 PhotoBioSTR20 PhotoBioSU10 PhotoBioSU20 PhotoBioSU50 2L 单壁罐体玻璃罐生物反应器 3L 单壁罐体玻璃罐生物反应器 5L 单壁罐体玻璃罐生物反应器 7L 单壁罐体玻璃罐生物反应器 15L 单壁罐体玻璃罐生物反应器 20L 单壁罐体玻璃罐生物反应器 10L appliflex 一次性反应器 20L appliflex 一次性反应器 50L appliflex 一次性反应器 40Watt 光面板 40Watt 光面板 60Watt 光面板 60Watt 光面板 120Watt 光面板 120Watt 光面板 40Watt 光面板 60Watt 光面板 120Watt 光面板 技术固态灯 (SSL) 具有非常独特的特点, 可应用于植物生长 一个重要的特点是在 450~500nm 和 630~700nm 波长区域的光谱分布, 这些频段是正常的植物生长的关键, 是植物进行光合作用的有效辐射范围 创新的固态植物生长照明, 全光谱模拟自然光, 在 470nm 和 630nm 有特征峰, 没有非分光红外和紫外光谱成分 生物反应器 应用所有对光合作用生物 ( 植物, 藻类, 细菌 ) 培养感兴趣的商业和科学领域 特征 被证明的生物反应器设计光面板寿命长 ( 小时 ) 好维护低电压运行 无电磁辐射 超过 90% 的效率定向光输出和光线均匀分布在寒冷的环境中有很好的性能没有热量产生环境友好和耐冲击 / 耐振动光合作用有效辐射,PAR,(400~700) 有利于植物生长, 植物响应有更好的效率优良的波长稳定性, 一致性, 可靠性波长蓝色 (470nm) 和红色 (630nm) 可用于植物生长实时 0 到 100% 的光强度 (0 至 20000lux) 调节 21

27 Applikon 酒精发酵监测仪 酒精发酵监测仪是一款监测厌氧发酵过程中碳转化率的仪器, 包括 6 个平行的系统, 通过测量各个系统中发酵过程产生的二氧化 碳来计算和比较碳转化率 ( 得率 ) 和酒精等产物的产量 酒精发酵监测仪特性适用于监测酒精生产过程中酵母的代谢 6 个独立系统可同时工作可通过软件设定转速和温度各个系统可单独控制条件, 如 : 菌种, 温度, 碳源等 磁力偶合搅拌, 对于浓度高 粘度大的培养同样适用软件可自动生成报告, 包括所测量的数据 数据分析结果 及相应的图片 应用测量生物能源的产率不同酵母菌株 不同的底料相互比较酿酒工业生物酒精的研究及工业化生产 基本参数 总体积工作体积最小工作体积搅拌系统最大转速温度体积净重 250mL 500mL 200mL(250mL) 400mL ( 500mL ) 50mL ( 250mL ) 500mL ( 400mL ) 磁力耦合 50~500 测量 : Pt-100 电极, 位于搅拌桨中央控制 : 加热, 通过搅拌桨中央内置加热器 cm 75kg 酒精发酵监测仪 22

28 Nova Biomedical 是一家生物传感器的专业制造商, 拥有世界最领先的生物传感器专利技术 公司总部设在美国麻省, 具有遍布世界各地的销售和服务网络, 产品销往 100 多个国家和地区 Nova Biomedical 在生物领域的生化分析仪的市场占有率达到 90% 以上, 世界上许多著名的医药公司, 如 Genentech Novonordisk Eli Lilly Merck Amgen Pfizer Roche Johnson & Johnson Dade Behring Baxter Renal & Fenwai Division Abbott Labs 等, 均是 Nova Biomedical 生化分析仪的忠实用户 Nova BioProfile 多参数生化分析仪 Nova 多参数生化分析仪可在线或离线检测动物细胞培养和发酵液中的营养成分 代谢产物 ph 值 电解 质 细胞密度 细胞活力 细胞直径等, 共有 22 种参数 测量参数 : 谷氨酰胺 谷氨酸 葡萄糖 乳酸 铵 ph po 2 pco 2 Na K Ca 细胞密度 细胞活力 渗透 压 磷酸盐 甘油 乙酸 IgG 等 计算参数 : - 空气饱和度 CO 2饱和度 HCO 3 总 CO2 Nova BioProfile 多参数生化分析仪的独特优势 多参数生化分析仪 历史悠久,30 多年的经验拥有世界上最领先的生物传感器技术, 很多划时代意义的探头都是 Nova 第一个推出的可检测参数种类最多, 能同时分析的参数多达 15 种 3 分钟内能够获得所有测试结果 (BioProfile FLEX 需 6 分钟 ) 直接分析乙酸 (BioProfile 300) 生化参数与细胞密度 细胞活力 IgG 同时分析 (BioProfle FLEX) 内置智能机械臂, 全自动化样品前处理 (BioProfle FLEX) 操作简单, 一键式自动完成软件界面友好, 数据收集和管理简单可实现全自动在线无菌取样检测, 支持 OPC 协议, 与 21 CFR Part 11 兼容完整的验证文件 (IQ/OQ) 发酵和基因工程领域应用 监控生物反应器过程 校 正生物反应器监测结果 监测营养成分消耗和代谢 废物浓度, 设计补料策 略 流加 / 灌流培养策略 测定产物产量 监测细胞培养过程中细胞 浓度 活力和直径 限制性生长过程的营 养监测 细胞呼吸量测量 调节电解质平衡 23

29 Nova BioProfile 系列多参数生化分析仪功能和特点 型号 应用 检测参数 营养 / 代谢产物 ph/ 气体参数电解质参数计算参数其他参数 特点 BioProfile FLEX 细胞培养 谷氨酰胺谷氨酸葡糖糖乳酸铵 ph po 2 pco 2 钠离子 钾离子 钙离子 细胞直径 实际渗透压细胞密度细胞活力 IgG 复合型 模块化 灵 活 功能最强大 BioProfile 400 细胞培养 谷氨酰胺谷氨酸葡糖糖乳酸铵 ph po 2 pco 2 钠离子 钾离子 渗透压 空气饱和度 CO 2 饱和度 HCO 3 - 在 BP100 Plus 基础上增加了呼吸参数 po 2 pco 2 测量, 为进一步研究细胞代谢状况提供了重要信息 直接测量的参数多达 10 个 BioProfile 300A/300B 微生物发酵 葡糖糖乳酸铵乙酸 300A 型 : 磷酸盐 300B 型 : 甘油 ph 钠离子 钾离子 渗透压 可提供乙酸的直接测量, 转换模块可轻松实现 300A 和 300B 型之间转换 BioProfile 100 Plus BioProfile phox 细胞培养 细胞培养 微生物发酵 谷氨酰胺谷氨酸葡糖糖乳酸铵 ph ph po 2 pco 2 钠离子 钾离子 渗透压 空气饱和度 CO 2 饱和度 HCO 3 总 CO 2 - 快速分析动物细胞培养过程中 9 个重要参数, 可使客户提高工作效率, 优化过程开发专为检测酸碱度和呼吸参数设计 多参数生化分析仪 BioProfile Basic 细胞培养 谷氨酰胺谷氨酸葡糖糖乳酸 低成本 经济型 同时测量动物细胞培养过程中四个最常检测的参数 24

30 BioProfile FLEX The Power of One 多功能过程参数分析仪 Nova BioProfile FLEX 是 Nova Biomedical 公司开发的第一款高端多功能细胞培养过程参数分析仪, 功 能极其强大, 而且使用起来很方便 BioProfile FLEX 既能同时分析谷氨酰胺 谷氨酸 葡萄糖 乳酸 铵 ph po 2 pco 2 Na K Ca 细胞密度 细胞活力 渗透压 IgG 等 15 个参数, 也能选择性分析其中 部分参数 多参数生化分析仪 Nova BioProfile FLEX 主要特点 测量参数最多, 能同时检测 15 种参数 能直接测量细胞密度和细胞活力 能测量产物 IgG 的产量 独特 唯一 一站式智能工作站, 相当于多参数生化仪 + 细胞活力计数仪 + 渗透压计 +IgG 光度计高度灵活能一次同时检测 15 种参数, 也可选择性检测部分参数可根据需要选择性配置 1~4 个模块, 也可以随时增加 / 减少模块样本消耗量低 :1ml 分析速度快支持单个 批量和在线取样等上样模式体积小, 节省空间, 简化验证过程触屏数据整理, 所有参数数据整合在一起, 分析报告直观可实现全自动在线无菌分析, 支持 OPC 协议, 符合 21 CFR Part 11, 可实现自动化 PAT(Process Analytic Technology) 25

31 Nova BioProfile FLEX 灵活的模块系统 Nova BioProfile FLEX 采用模块式设计 ( 如下图 ), 可根据需要配置化学气体模块 细胞密度 / 细胞活力 模块 渗透压模块 IgG 模块中的 1 到 4 个模块, 每个模块达到国际最先进的测量水准 化学 / 气体模块 ( 电化学原理 ) 葡萄糖谷氨酰胺铵 po 2 + Na 2+ Ca 乳酸谷氨酸 ph pco 2 + Na + K 细胞密度 / 细胞活力模块 ( 数字成像 ) 细胞密度细胞活力细胞直径 渗透压模块 ( 冰点法 ) IgG 模块 ( 光度法 ) Nova BioProfile FLEX IgG 测量 Nova BioProfile FLEX IgG 检测技术是利用在溶液中 胶体金颗粒与 IgG 有强的亲和力, 形成螯合物, 用内置的 光度计对螯合物进行定量检测, 从而测定人源性或治疗性 IgG 总蛋白 ( 包含所有 IgG 亚型 ) 的含量, 整个过程全自 动化完成 5 分钟之内完成 IgG 总蛋白测定 6 分钟即可得到生化 渗透压 细胞计数等综合分析 报告 结果与 ELISA 方法一致 Nova BioProfile FLEX 细胞密度 细胞活力 细胞大小分析 BP FLEX IgG (mg/ml) BioProfile FLEX IgG Method Comparison Study y = x R2 = N = ELISA IgG (g/l) BioProfile FLEX IgG 检测结果与 ELISA 方法对比 多参数生化分析仪 Nova BioProfile FLEX 细胞密度 细胞活力和细胞大小的检测原理是利用 Trypan Blue 染色法结合高分辨率数字成像技术, 再用多功能软件进行处理和分析 内置机械臂可以自动进行样本前处理, 包括染色 稀释和混匀等等 40 位视野成像计数, 所计细胞数量相当于人工计数的 30 倍, 显著提高细胞计数的精度和真实性检测多种细胞, 如 CHO 杂交瘤和肿瘤细胞等可视化功能, 在图像上能将活细胞与死细胞区分开图像能保存 30 天 Total Cell Density BioProfile FLEX Total Cell Density Method Comparison Study 6.00E E E E E E+06 BioProfile FLEX R2 = E E E E E E+06 Total Cell Density FLEX Cedex BioProfile FLEX 细胞密度检测与 Cedex 对比 26

32 Nova 全自动在线取样器 Nova 全自动在线取样器是专为 Nova BioProfile FLEX 开发的全自动取样系统 Nova 全自动在线取样器能最多同时将 10 台生物反应器样品输送到 1 台生化分析仪 可根据需要设定取样频率反馈控制与生物反应器连接, 实现直接反馈控制, 可提供八个反馈控制回路全自动无菌操作支持 OPC 协议, 使在线取样器能和多参数生化分析仪与生物反应器控制器之间的信号交流与多参数生化分析仪 生物反应器形成 PAT 系统,24 小时自动取样可将样品输送到 Nova 样品收集器, 可选择低至 3 保存样品完整的 IQ/OQ 等验证文件, 符合 FDA 21 CFR Part 11 Data Historian Controller OPC Data Auto- Sampling Bioreactors (Up to 10) BioProfile FLEX with On-Line Autosampler and Sample Retain Collection System Feedback Control 多参数生化分析仪 研发 工艺优化和生产应用 全球 PAT 执行的分析标准 27

33 Nova BioProfile CDV 自动化细胞活力分析仪 Nova CDV 是从 Nova BioProfile FLEX 中 Cell Density and Viability 模块独立出来的专门用于细胞密度 细 胞活力分析的全自动细胞活力分析仪 该设备采用经典的台盼蓝染色法, 能一次性分析 20 个样品 应用 能用于哺乳动物细胞如 CHO 细胞 Vero 细胞 293 细胞 MDCK 细胞 杂交瘤细胞 干细胞的细胞密度 细胞活力 细胞直径的分析, 检 7 测的细胞范围广, 能达到 8 10 cells/ml : 生物制药 细胞毒理研究 细胞增殖研究 癌症研究 新药筛选 细胞治疗 全自动化自动化进行样品的吸取 染色 混匀 稀释 仪器的清洗确保易碎细胞结构的完整性和样品的均一性 消除了手动台盼蓝染色法中样品吸取 染色 计数的的人为误差 测量结果精度高 高分辨率的光学器件 40 个光学检测视野专利的计算法则能将活细胞区分于细胞碎片, 且能检测聚集细胞中的单个细胞直径 (4~70um) 以直方图显示 通过了解细胞的直径变化, 可以监控细胞的生长状态, 特别适合监控病毒感染的细胞生长状态 多参数生化分析仪 实时在线分析功能与 NOVA 在线取样器的配合使用, 可以实现实时在线分析细胞密度 细胞活力, 有助于保持培养中的细胞活力和培养物产量的提高, 减少废弃物的产生 实现数据可追溯性符合 21 CFR part11, 只有获取密码授权的研究人员才能对电子数据进行修改系统能保存原始的和修改后的数据, 保证了数据的真实性 28

34 InDevR 是美国丹佛一家专业研制和生产病原微生物检测设备的公司, 开发的病毒计数仪能在 15min 内快速 精确测定病毒的总浓度, 能极大的缩短疫苗研发和生产 病毒载体研究和蛋白表达 抗病毒研究的周期, 因此, 受到广大病毒研究和生产者的青睐, 如 Medimmune Sanofi Pasteur Merck PSC 等著名企业已成为病毒计数仪的用户 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪是 InDevR 公司按照 美国国立卫生研究院 NIH 研发需求并由 NIH 赞助生产 TM 的 ViroCyt 2100 突破传统的病毒检测技术, 结合 流式细胞仪的经典优势和病毒颗粒荧光信号弱的原 理, 通过独特的软硬件设计并使用专利的荧光染 料, 使检测灵敏度大幅升级, 能快速 精确测定病 毒的总浓度 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪的检测系统 检测原理 病毒计数仪 用专利性的混合荧光染料 ( 含两种染料 ) 分别染病毒的衣壳蛋白和核酸, 染色的病毒样品在水压聚焦下排 列成单列, 通过流动室时被激光激发后, 标记的蛋白和核酸分别产生的荧光信号同 时通过不同的荧光通道, 被光电倍增管捕 捉处理, 最后通过 ViroCyt 专业软件分析处 理计算为一个完整的病毒颗粒, 如果只有 蛋白荧光信号或者只有核酸荧光信号的颗 粒不被计算为病毒颗粒 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪的技术特点 分析快速,< 15min!!! 相比于常规的噬斑滴度计数法 (plaque titer assay) 存在时间长 (> TM 6 天 ), 重复性差等弊端,ViroCyt 2100 病毒计数仪检测速度快, 能通过 简单的病毒核酸 蛋白双染后, 在 < 15min 的时间内即可获取总病毒浓 度, 比传统检测方法要快 200 倍, 极大的缩短了疫苗研发和生产 病毒载体 研究和蛋白表达 抗病毒研究的周期 高性价比 分析成本低 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪采用通用的核酸和蛋白染料对病毒染色, 整 个分析过程耗费少, 无需免疫法中昂贵的抗体费用, 每个样品的分析成本 是免疫法的 1/

35 自动化高 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪能自动进行上样检测, 检测完后能 实现自动除污和清洗功能, 为样品间的清洗程序提供了独特的解决 方案, 极大程度地避免了样品间的交叉污染 简单的样品制备 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪无复杂的样品准备过程, 采用结合 了靶标才产生荧光的混合染料对病毒衣壳蛋白和核酸分别染色分 析, 无需洗涤步骤消除游离的荧光染料, 无背景信号的干扰, 简化 了样品的制备过程 灵敏度高 结果精确 常规的病毒滴度法如噬斑计数法 免疫法 PCR 法都是采用间 接的方法来反应原始的病毒的滴度, 且操作流程长, 检测结果易受 TM 到多种因素影响 ViroCyt 2100 病毒计数仪能对每一个病毒颗粒 直接进行分析, 简单的软件操作, 无传统流式细胞仪的复杂参数设 置, 使分析结果更精确 实现病毒浓度的实时监测 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪的软件界面直观 易操作, 能实现 病毒细胞培养中病毒浓度的实时监测 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪的应用 广泛适用于各种病毒 TM ViroCyt 2100 能应用于各种病毒的快速检测, 既能检测 DNA 病毒, 也能分析 RNA 病毒 : 基因组 >9000 nt, bp, 病毒大小 >25 nm, 病毒滴 6 度 Titer : >10 pfu/ml 流感病毒 狂犬病毒 轮状病毒 腺病毒 风疹病毒 呼吸合胞体病毒 慢病毒 登革热病毒 单纯性疱疹病毒 牛痘 巨细胞病毒 呼吸肠道病毒 丙肝病毒 病毒计数仪 应用领域广泛 病毒株克隆筛选抗病毒效应评估病毒生产过程优化缺损性病毒颗粒浓度检测细胞培养中病毒实时监测 病毒载体研究和蛋白表达储存的病毒稳定性评估病毒抗原表型鉴定病毒诊断标准鉴定病毒为基础的基因治疗 30

36 TM ViroCyt 2100 病毒计数仪的应用举例 流感病毒 (influenza virus) 呼吸道合胞体病毒 (Respiratory Syncytial Virus,RSV) 杆状病毒 H1N1 流感病毒样品 (~4 x 108 vp/ml) 浓度 原始的 PMT 接收到核酸信号 ( 蓝色峰 ) 和蛋白信号 ( 红色峰 ) 5 9 在 10 ~ 10 vp/ml 范围内, 病毒计数仪检测结果与 TEM 检测结果成良好的线性关系 双盲实验分析杆状病毒滴度, 病毒计数仪检测结果更精确! 实时检测病毒细胞培养中病毒滴度 病毒计数仪 批次发酵生产流感病毒抗原蛋白 HA 过程中病毒滴度与细胞活力关系 : TM ViroCyt 2100 病毒计数仪检测病毒的浓度 ( 蓝色 ), 细胞活力分析仪检测宿主细胞活力 ( 红色 ) 随着发酵的进程, 宿主细胞活力逐渐降低, 病毒浓度逐渐上升, 且病毒滴度与细胞活力呈现明显的负相关 用 SRID 法检测了 HA 蛋白的产量为 20 ± 4 mg/l 参考文献 1. Evaluation of the virus counter for rapid baculovirus quantitation Journal of Virological Methods 2010,by M.M.Ferrisetal.,P.C.Steppa. 2. Design and Characterization of a Compact Dual Channel Virus Counter Cytometry A 2005, 65A, , by Stoffel, C. L., Rowlen, K. L. 3. Data Analysis for a Dual-Channel Virus Counter Analytical Chemistry 2005, 77(7), , by Stoffel, C. L., Rowlen, K. L. 4. Rapid Determination of Baculovirus Titer by a Dual Channel Virus Counter American Biotechnology Laboratory (22), 24-25, by Stoffel, C.L.; Finch, R.; Christensen, K.; Edwards, D. 5. Rapid Enumeration of Respiratory Viruses Analytical Chemistry 2002, 74(8), , by Ferris, M.M, Stoffel, C.L., Maurer, T.T. Rowlen, K.L. Ferris, M.M., McCabe, M.O., Doan, L.G 6. Quantitative Intercomparison of Transmission Electron Microscopy, Flow Cytometry and Epifluorescence Microscopy for Nanometric Particle Analysis Analytical Biochemistry 2002, 304, , by Ferris, M.M, Stoffel, C.L., Maurer, T.T. Rowlen, K.L. 7. Detection and Enumeration of Single Nanometric Particles: A Confocal Optical Design for Fluorescence Flow Cytometry Review of Scientific Instruments 2002, 73, ; also selected for publication in the Virtual Journal of Biological Physics Research, by Ferris, M. M., Maurer, T.T., Rowlen. K. L. 31

37 Flownamics 公司是一家位于美国威斯康星州的专业化生物技术公司, 主要致力于发酵和细胞培养自动取样设 备的研究和生产, 其中包括 Seg-Flow 自动取样器,FISP 取样探头和 Flow Fraction 样品收集器等系列产品, 在 同行业中处于世界领先地位, 特别是无细胞取样探头, 已成为行业标准 Flownamics FISP 取样探头 Flownamics FISP 取样探头主要为不需细胞的检测项目采集样品, 如生化参数 目的产物含量等检测, 利用 0.2μm 膜截留细胞, 能有效阻断外界微生物污染源进入培养罐内 产品主要有 C D 和 F 三种系列, 能满足从小 试, 中式到大规模生产不同应用需求 Flownamics FISP 取样探头的特性 离线或者在线取样, 多种规格接口实现从不同规模生物反应器中无细胞取样可在线或离线灭菌应用于好氧菌 厌氧菌 酵母 藻类 昆虫和动物细胞培养死体积小, 取样量精确没有采用旁路排空滤器, 样品不会返流进培养罐内不受发酵条件下的温度 压力 粘度 剪切力和化学成分影响可与生化分析仪, 生物传感器,HPLC, 甲醇分析仪, 离子交换色谱, 质谱和分光光度计等检测设备相连 材料探头 :316L 不锈钢 O-ring: 三元乙丙橡胶 (EPDM) 过滤膜 : 聚苯烯 (PP) 或陶瓷 FISP 取样原理 FISP 插入反应器侧口或顶口, 浸入发酵液或细胞培养液中消毒, 蠕动泵 ( 或反应器本身静压 ) 吸取样品通过 管状膜, 进入探头不锈钢槽网, 样品通过槽网进入中央通路, 无细胞样品可直接进入在线分析仪 流分收集器或 样品容器, 流速取决于培养液的粘度 DIRECTED TO A DETECTOR OR COLLECTOR PLUG VALVE 全自动在线取样器 BROTH (FLUID) PORT VESSEL WALL 0.2μFILTER 32

38 FISP 取样探头应用 微生物 酵母 生物体 发酵周期 (hr) 流速 (ml/min) E. Coli K12 E. Coli Recomb. 24 to Strepto coccus Pheu. Sacch. cerevisiae Sacch. cerevisiae 24 to 真菌 Acremonium chrysogenum 细胞培养 BHK 21, CHO NSO 42(Days) 37(Days) C 系列 可与 19mm 和 25mm 接口相配可插入发酵罐 / 生物反应器侧口过滤膜 :1.875 英寸长, 聚乙烯 ( 管状 ), 孔径约 0.2μm 死体积 : 约 0.19ml 流速 : 可达 2ml/min 插入深度 : 90mm(3.5 英寸 ) 主要用于细菌 酵母 真菌等微生物发酵 全自动在线取样器 D 系列 可与 19mm 和 25mm 接口相配可插入发酵罐 / 生物反应器侧口过滤膜 :1.850 英寸长, 陶瓷 ( 管状 ), 孔径约 0.2μm 死体积 : 约 0.19ml 流速 : 可达 2ml/min 插入深度 : 90mm 和 110mm 用于微生物发酵和细胞培养 F 系列 可与 12mm 和 19mm 接口相配可插入发酵罐 / 生物反应器顶口过滤膜 :1.850 英寸长, 陶瓷 ( 管状 ), 孔径约 0.2μm 死体积 : 约 0.24ml-0.44ml 流速 : 可达 2ml/min 插入深度 : 150mm 200mm 310mm 和 410mm 用于微生物发酵和细胞培养 33

39 Flownamics Seg-Flow 自动在线取样器 Seg-Flow 4800 从 4 台生物反应器取样 ( 配置 Reagent Module 可扩展为从 8 台生物反应器取样 ) 将样品输送至 2 台分析仪器或样品收集器 ( 配置 Sample Module 可扩展为输送至 4 台分析仪器或样品收集器 ) Flownamics Seg-Flow 全自动在线取样器特点 全自动在线取样 灵活性 用户定义取样体积 (0.25mL~ 15mL) 快速精确消毒液 清洁剂消耗少内部网络服务器系统由 Flow-Web 软件控制可通过互联网远程控制 同时可从 1~8 个罐体取样可取样含细胞样品, 配合 FISP 取样探头取无细胞样品用户自主设置取样频率和取样量记录每个罐数据信息补料和信号传递控制补料泵或其它补料系统 8 个模拟输入 21 个模拟输出 TCP/IP 协议 全自动在线取样器 维护简便, 操作简单 每 3~4 周换泵管 自动清洗循环 占用空间小 尺寸 : in (W H D) 34

40 生物反应器 / Seg-Flow 4800/Nova Bioprofile 多参数生化分析仪补料控制 通过 OPC 协议,Seg-Flow 全自动在线取样器将 Applikon 生物反应器和 Nova 多参数生化分析仪等检测仪器整合在一起, 形成一套全自动闭环系统 Seg-Flow 自动在线取样器从 Applikon 生物反应器中取样, 再将样品分配给 Nova 生化分析仪 Waters UPLC 等, 并且指令其分析, Seg-Flow 4800 收集分析数据 ( 葡萄糖和氨基酸等的浓度 ) 并通过 OPC 将数据传送给 Applikon 生物反应器控制系统,Applikon 控制系统根据检测到的数据进行实时的反馈控制 ( 控制氨基酸和葡萄糖等的浓度 ), 整个过程全自动化完成 Flownamics FLOW-WEB 控制软件 全自动在线取样器 设置简单反应器编号系统和反应器设置数据以表格形式收集可以图表或趋势图形式显示数据维护和任务提醒软件提示用户更换泵管, 填充清洗液, 或执行其他任务系统能通过电子邮件通知警告或错误信息 自动冲洗 / 灭菌每次取样之后样品管路可清洁或消毒可在线完成软件升级灵活性可用 PC 或者智能手机通过互联网监控设备运行状态以 Excel 格式保存数据, 或将数据导出到其他程序可根据用户需求定制软件 35

41 Flownamics Seg-Flow 在线取样技术 ( 专利 ) SEG-MOD 安装在反应器上, 并由 SEG-FLOW 取样器控制 1 个小支架锁在生物反应器接口上, 当生物反应器高压灭菌或者 SIP 后, 将 SEG-MOD 推入支架而放置在反应器上 Flownamics Seg-Flow 分段在线取样技术原理如下 : Stage 1: 打开 SEg-MOD 阀门 1,Seg-FLOW 自动在线取样器蠕动泵开始启动, 样品从生物反应器中输出, 当 样品到达样品指示器 (Sample Indicator) 时, 取样器可计算样品从生物反应器到指示器的时间, 从而可精确抽 出客户所需的样品量 Stage 2: 关闭 SEG-MOD 阀门 1, 打开阀门 2, 无菌空气进入样品管路中, 将样品送往 SEG-FLOW 取样器 如 果先前在 Stage1 流速设定为低流速时, 这时可提高取样器内的泵流速 ( 这是因为通过 FISP 取样探头取样时要求 低流速, 一般最大流速是 2ml/min), 将样品快速输送至分析仪分析, 从而可实现反应器更为精确的补料控制 全自动在线取样器 Stage 3: 关闭 SEG-MOD 阀门 2( 同时阀门 1 也关闭 ), 打开阀门 3, 将清洁剂或者消毒剂泵入到取样管路中, 最后通到 Seg-Flow 的废液中, 用于每次取样后或者按需清洗 36

42 丹麦 ChemoMetec A/S 公司是高性价比细胞分析仪器的世界领先制造商, 已经拥有 16 年的专业开发细胞计数分析技术的经验, 利用荧光显微镜和先进的数字成像的专利技术, 开发有一系列高质量的产品, 包括细胞快速自动计数的系列细胞活力分析仪 NucleoCounter NC-100 NC-200 细胞健康评估仪 NC-250 和多功能应用的高级细胞分析仪 NucleoCounter NC NucleoCounter NC-100/NC-100 细胞活力分析仪 NucleoCounter 细胞活力分析仪检测原理 细胞活力分析仪 NucleoCassette 计数板中预包被有 PI 染料, 细胞被吸入后在回路流动过程中被 PI 染料染色 ; 在回路的终路 chamber 中, 细胞呈单层平铺, 并被激发光激发, 通过荧光显微镜结合数字成像技术, 得到 PI 染色阳性细胞的数目 死细胞胞膜的通透性增加, 可直接被 PI 染料透过, 细胞无需处理直接上样, 可得到死细胞的数量 ; 正常的活细胞, 胞膜结构完整, 无法透过 PI 染料, 经过通透处理后上样, 得到总细胞的数目 ; 最后用 NucleoView 软件计算出细胞存活率 37

43 NucleoCounter 细胞活力分析仪的特点 PI 直接染细胞核稳定性高, 不会随染色时间延长而影响测量结果灵敏度高, 能在短时间内检测低浓度药物引起的细胞活率变化相比于台盼蓝和 MTT 实验,PI 染色能检测的药物浓度线性范围更宽无细胞碎片和气泡的干扰精确度高, 重复性好生物安全性高染料 PI 固定在 cassette 中, 无需独立染色操作, 减少对人体污染专利的 Cassette: 全封闭式的设计避免了操作者与分析样品的接触, 减少了样品对人体的伤害操作简单, 三步法一键式按钮即可获取计数结果分析快速 (30 秒分析时间 ) 无需校正无需清洗无需维护和保养上样体积小, 只需 50ul 体积小, 方便便捷 应用领域能快速分析哺乳动物细胞 鸟类细胞 水产鱼类细胞 昆虫细胞等的总细胞数 ( 浓度 ) 死细胞数( 浓度 ) 活细胞数( 浓度 ) 细胞存活率 细胞毒理增殖曲线, 尤其适用于常规实验室的细胞培养 病毒研究 工业中的微载体培养和病毒疫苗开发等方面的细胞计数和药理分析中的细胞毒理增殖分析 参考文献 1. NucleoCounter An efficient technique for the determination of cell number and viability in animal cell culture processes. Dimpalkumar Shah, Mariam Naciri, Paul Clee, Mohamed Al-Rubeai. Cytotechnology (2006) 51: Age-dependent cell death and the role of ATP in hydrogen peroxide-induced apoptosis and necrosis. Noriyuki Miyoshi, Hammou Oubrahim, P. Boon Chock, and Earl R. Stadtman. PNAS 2006;103; 细胞活力分析仪 3. Caspase-6-mediated cleavage of guanylate cyclase alpha 1 during deoxycholate-induced apoptosis: Protective role of the nitric oxide signaling module. Payne C.M., et al.. Cell Biology and Toxicology, 2003, 19, Augmentation of the migration ability of DC-based vaccine into regional lymph nodes by efficient CCR7 gene transduction.okada N, Mori N, Koretomo R, Okada Y, et al.. Gene Therapy (2004), Assessment of Viability and Osteogenic Ability of Human Mesenchymal Stem Cells After Being Stored in Suspension for Clinical Transplantation. KAORI MURAKI, et al.. TISSUE ENGINEERING Volume 12, Number 6, Drug uptake and pharmacological modulation of drug sensitivity in leukemia by AQP9. Bhattacharjee Hiranmoy, et al.. Biochemical and Biophysical Research Communications 332 (2004) Proteasome-dependent Degradation of Cyclin D1 in 1-Methyl-4-phenylpyridinium Ion (MPP+)-induced Cell Cycle Arrest. Bai Jie, et al.. J Biol. Chem.,Vol. 279, Issue 37, , Sept.10, Suppression of Tumor Development and Metastasis Formation in Mice Lacking the S100A4 (mts1) Gene. Grum-Schwensen Birgitte, et al.. Cancer Research 65, , May 1,

44 TM NucleoCounter NC-200 细胞计数与活力分析仪 NC-200 的主要特点一步操作获得 : 总细胞数活细胞数细胞活力细胞直径结团细胞的百分比细胞无需任何预处理快速, 50sec, 操作简单无需清洗和维护安全性高, 无需染色精度高, 重现性好用户可自定义 Protocol 分析 DNA 含量低的细胞符合 21CFR Part11 NC-200 的工作原理 细胞计数与活力分析仪 NucleoCounter NC-200 是一台配备有 2 个激发光源 / 荧光通道且整合高像素 CCD 相机的荧光显微镜, 能快速检测染色细胞的荧光信号, 结合专业的软件将荧光信号转化成数字信号, 以直观的方式显示细胞浓度 细胞活力 细胞直径等信息 操作简单, 细胞无需任何预处理上样检测 细胞样品无需经过任何处理, 只需将 Vial-cassette 浸入细胞中, 按下活塞, 细胞即进入 via1-cassette 的回 路中, 并被内置化的两种染料充分染色 通过回路进入腔体的过程, 也就是细胞染色的过程 39

45 快速, 自动计算结果 50 秒!! 将上样后的 Via1-cassette 插入 NucleoCounter NC-200 卡槽内, 按 run 键,NC200 自动选择和切换光源激发染色的细胞样品,50 秒即可获得总细胞浓度 死细胞浓度 活细胞浓度 细胞直径 细胞结团等信息 细胞直径的变化, 对于病毒疫苗生产中了解病毒的感染和增殖具有重要意义 此外, 客户可根据细胞结团信息优化培养条件控制培养质量或者优化细胞消化条件 精确度高, 重复性好 Via1-cassette 中内置化两种荧光染料, 无需客户额外对细胞染色, 减少操作过程中人为的影响 Via1- cassette 的腔体在出厂时经过严密的监控和校正, 所以每次测量的细胞体积都能保持高度的一致, 确保了分析结果的精确性 UV+ Green Light source Calibrated volume for high Precision DAPI Acridine orange One Step Analysis Via1-Cassette 中预包埋有吖啶橙和 DAPI 染料 吖啶橙能穿透完整细胞膜, 被绿色光源激发产生荧光信号, 获得总细胞浓度 DAPI 只能穿透已经通透的死细胞膜, 染上 DNA 后被 UV 光源激发, 产生蓝色荧光信号, 获得死细胞浓度 细胞计数与活力分析仪 NucleoCounter NC-200 整个系统无需校正, 上样后系统自动完成全程的分析, 整个操作过程无需设置任何 参数, 无人为因素的干扰, 所以检测结果稳定性高, 重复性好 40

46 直观的软件界面 NucleoCounter NC-200 包含一套优化的软件, 能直观呈现分析数据, 轻松实现诸多功能 : 细胞荧光图像可视化, 可排除细胞碎片的干扰自动补偿细胞稀释倍数数据轻松导出到 Excel Word PowerPoint txt 等文件浏览以前的分析数据 P l o t M a n a g e r 可实现自定义分析 Protocol, 分析低 DNA 含量的细胞荧光强度快速选择用户保存的分析 Protocol 技术参数 细胞计数与活力分析仪 型号光源耗材上样体积分析时间细胞类型最佳细胞浓度 (cells/ml) 数据形式数据输出格式细胞活力规格重量 NucleCounter NC-200TM 紫外 (365nm) 绿光 (505nm) 暗场 Via1-cassette 60µl 50sec 哺乳动物细胞 鸟类细胞 昆虫细胞 ~5 10 直方图, 散点图,txt 文本 Excel Word Powerpoint txt pdf 0~100% cm(W H D) 3kg 41

47 TM NucleCounter NC-250 细胞健康评估仪 操作系统特点 操作简单, 三步法一键式按钮即可获取结果分析快速无需校正 无需清洗 无需维护和保养上样体积小, 只需 10µl 友好界面设计, 即插即用型, 无需预热, 随时随地开机使用体积小, 节省空间, 可放置实验室任何地方 染色上样分析 3min 获取 8 个样品分析结果 细胞健康评估三部曲 Viability and Cell Count Assay 实时了解细胞的状态 NC-250 能在 3min 内获得 8 个样品的多个参数 : 总细胞浓度 / 活细胞浓度死细胞浓度 / 细胞活率细胞结团比例 / 细胞直径 细胞健康评估仪 这些信息对于了解细胞健康状态, 及时调整细胞 培养条件改善细胞健康状态, 提高研究和生产效率具 有非常重要的意义 42

48 Vitality assay 细胞排毒能力的监测还原型的 GSH 能通过细胞的平衡机制将细胞内的自由基等毒副产物排除细胞外, 达到细胞排毒的目的 NC-250 采用了只有结合细胞内还原性的 GSH 后才产生蓝色荧光信号的染料染色, 利用荧光信号的强弱来判断细胞内还原性的 GSH 浓度, 荧光越强代表还原性的 GSH 浓度高, 细胞排毒能力强, 细胞健康程度高 ; 反之, 荧光越弱, 细胞排毒能力弱, 细胞可能进入早期凋亡 Cell Cyc le Assay 掌握细胞的生长周期 NC-250 只需将细胞与试剂温育 5min, 无需酒精固定, 无需 RNA 酶的处理, 就能了解细胞周期时相 (G0/G1,S,G2/M) 的比例情况, 能了解细胞生长所处的时期, 大大简化了实验流程 应用领域 NC-250 能快速评估细胞的排毒能力, 细胞的生长状态和生长周期, 适于生物制药 病毒研究与生产 细胞生物学 分子生物学 肿瘤学 细胞毒理学 免疫学 干细胞等多种研究和生产前期的细胞健康状态的评估, 了解细胞真实的健康状况, 为下游的研究和生产提供强大的保障和基础, 提高研究和生产的效率, 减少反复实验和摸索的周期和成本 细胞健康评估仪 技术参数 型号光源上样方式上样体积分析时间 TM NucleCounter NC-250 紫外 (365nm) 绿光 (505nm) 暗场 A2-slides, A8-slides A2-slides: 30μl, A8-slides: 10μl 3 min /8 samples 细胞类型细胞浓度 (cells/ml) 数据形式数据输出格式规格重量 各种类型的哺乳动物细胞如 CHO Vero HEK293 Hela HepG2 MCF Jurkat Embryonic stem cells BSC-1 COS-7 等鸡胚细胞 :CEF 昆虫细胞 :Sf ~1 10 直方图, 散点图, 细胞荧光图 Excel Word Powerpoint txt pdf cm(W H D) 9kg 43

49 TM NucleoCounter NC-3000 自动化荧光定量细胞成像分析系统 NucleoCounter NC-300 分析系统具有全光谱 ( 红外到紫外 ) 荧光分析系统 高度自动化 多功能荧光参数分析 细胞图像可视化 友好的用户界面等特点, 通过 一键式按钮 即能快速 精确 自动 定量分析单细胞水平和成团细胞的荧光强度,Nucleoview 软件综合收集, 分析和报告数据, 提供一系列可靠的细胞分析结果 全光谱荧光分析系统 激发光光源 365nm 405nm 455nm 475nm 500nm 525nm 590nm 630nm 发射光检测通道 nm nm nm nm nm nm nm nm NucleoCounter NC-3000 系统标准配置有 8 个可自动切换的激发光源和 8 个可自动切换的荧光染料发射光滤 片, 覆盖了从紫外到红外的全光谱范围, 这为细胞生物研究工作提供了更多的荧光染料的选择机会和更大的多荧 光分析可能性 超强大分析软件, 满足不同客户需求 Fixed assay 智能模块式系统, 助您轻松分析经典实验 高级细胞分析系统 Fixed assay 智能模块系统为细胞周期 细胞凋亡 细胞计数及活力分析 GFP 转染效率等应用分别制定了实验模板, 每个应用模块采用内嵌型参数设置, 用户无需绘制模板, 无需调节电压 阈值和荧光补偿等, 减少人为因素影响 分析时只需选择相应的分析应用模块, 系统将自动地选择激发光源和发射光滤片一键式按钮 run 操作 NucleoviewTM 软件智能地记录和处理实验结果, 并且自动保存备份数据多重数据输出形式 : 可以获得扫描的细胞荧光图像, 又能获得流式统计数据形式的散点图 直方图 44

50 FlexiCyte 软件 创造您需要的任何应用程序 FlexiCyte 系统配有蓝 绿 橙 红四大荧光通道, 可选择具有高亮度荧光 光学稳定性强 发射光谱窄等特点的 AlexaFluor 系列 DyLight 系列染料用于分析, 获得良好的分析结果, 避免了流式细胞仪常用染料 FITC PE APC 等荧光易淬灭 光谱范围广需大量荧光补偿设置等问题 蓝色通道绿色通道橙色通道红色通道 激发光源发散滤片 365nm 470/55nm 475nm 560/35nm 530nm 675/75nm 630nm 740/60nm Non-Fixed cells Hoechst Biomarker 1 Biomarker 2 Biomarker 3 Fixed cells DAPI Biomarker 1 Biomarker 2 Biomarker 3 推荐染料 NA AlexaFluor488, Atto488, DyLight488, FluoProbes488, CF488a AlexaFluor568, Cy3, atto565, DyLight549, FluoProbes547H, CF568 AlexaFluor647, Cy5, atto647n, DyLight649, FluoProbes647H, CF647 核酸染料 NA e.g. AO e.g. PI, 7-AAD, EtBr e.g. Draq5, Draq7 荧光蛋白 NA GFP and green and yellow variants DsRed, RFP and orange/red variants FlexiCyte 系统采用开放式设计, 用户可以采用 Protocol Adaption Editor 自行设定修改应用程序, 保存应用程 序以供下次分析时直接选用, 节省时间 : 高级细胞分析系统 内置化的蓝色荧光通道, 标记带核的细胞 :Fixed- 细胞 DAPI 染色, Non-fixed 细胞 Hoechst 染色根据染料光谱学选择染料的最佳激发波长与发散滤片针对弱表达的蛋白可以设定较长的激发时间与曝光时间, 获取最佳的荧光分析结果用户还能根据需要决定是否要分析结团细胞设定最小的细胞分析数量保存自创的应用程序以便下次选用 荧光定量和细胞图象的同步分析 NucleoCounter NC-3000 分析系统分析时, 既可以获得细胞的荧光染色情况, 了解细胞的荧光强弱, 又能同时对这些阳性细胞进行定量, 解决了流式细胞仪只能定量不能观察细胞荧光, 荧光显微镜只能观察荧光不能定量的弊端 此外,NC3000 的软件系统还能实现将定量的阳性细胞还原到细胞荧光图像上, 找到对应的阳性细胞的荧光情况, 实现真正的可视化分析 45

51 简单的标准操作流程 专利技术上样 Cassette 预包埋染料, 细胞自动染色, 生物安全性高 2-8 通量玻片 无需清洗 无需维护 免除堵塞烦恼 统一的分析标准 无需校正, 出厂时统一校正 模块化设计 一键式操作, 新手 5 分钟内上手 更客观, 无人为因素影响 重复性高 强大的分析软件 荧光显微图像, 实现可视化分析 流式分析方法统计数据 marker 设门具有记忆功能, 减少人为设门的主观影响 友好界面设计, 简单易用即插即用型, 无需预热, 随时随地开机使用体积小巧, 29cm 高 29cm 宽 31cm 长, 节省空间重量轻, 14kg, 便于搬动可放置于实验室任何地方 计数结果精确 自动多位视野扫描, 多达 20 位 多平面聚焦扫描 确保数据精确 无尽应用可能 NucleoCounter NC-3000 细胞分析仪因其全光谱荧光参数配置, 简单的操作流程, 无可比拟的分析速度 和精度, 使其具有极宽的应用拓展可能性 高端全光谱配置, 高达 9 个荧光通道细胞凋亡, 覆盖红外到紫外的全光谱分析系统 干细胞研究 分析 生物制药 细胞毒理学 高级细胞分析系统 细胞活力计数 TM NucleoCounter NC-3000 主要应用领域 细胞表型分析 (CD3/ CD4/CD8 等 ) 组织工程 病毒疫苗开发 药物筛选 肿瘤标志物分析 46

52 NucleoCounter NC-3000 TM 应用举例 在干细胞与再生医学中的应用干细胞计数与 Quality control 利用干细胞治疗疾病已经成为干细胞研究的热点 NucleoCounter NC-3000 系统在干细胞中的研究中也得到了广泛的应用 :NC3000 可以精确地进行细胞计数和活细胞 死细胞浓度的分析, 所以经常用于骨移植和骨缺陷重建时 Human Adipose-Derived Cells 的 QC 造血干细胞的冻存前后的增殖能力评估 以及脐带血建库入库前造血干细胞的 QC 与确认等 Counting of Adipose Tissue Deriver Cells (University Hospital Basel, Switzerland) A.Scherberich, S. Güvan, P. Studer, I. Mertin 干细胞的表型分析在干细胞表型分析时,NC3000 系统可以获得阳性细胞的比例的同时, 还可以直观观察细胞样品中的阳性细胞的荧光情况, 只有目标荧光信号和蓝色的核染料荧光信号共定位的细胞, 才被确认为真实的阳性细胞, 去除了假阳性的细胞, 提高了分析的精度 Hoechst/anti-CD34-APC staining 高级细胞分析系统 在蛋白表达 / 细胞因子检测中的应用 NucleoCounter NC-3000 系统能检测细胞中多个蛋白的同时表达, 获得阳性细胞表达目的蛋白的比例同时, 还可以观察细胞中蛋白表达的强弱, 更能将这些细胞图像进行叠加, 获得多蛋白同时表达的细胞荧光图, 这为蛋白表达研究以及药物筛选等应用提供了强大的分析工具 Co-staining of Oct3/4 and Sox2 in MCF-7 cells 47

53 在抗肿瘤药物研究中的应用在抗肿瘤药物筛选和研究中, 大多数都是通过抑制细胞周期的某一个时相, 阻止细胞的分裂, 抑制细胞的生长或者通过诱导细胞发生凋亡来达到抗肿瘤的效果 NC3000 系统因其简易的操作和精确的分析结果使其在抗肿瘤药物研究中得到了著名的生物制药企业和大学研究结构的青睐, 如诺和诺德 GSK 牛津大学 加利福利亚大学等 细胞周期分析 目前普遍认为肿瘤的发生是细胞周期紊乱的表现, 通过药物干扰细胞周期的某一个阶段, 阻滞细胞周期进 程, 可以达到抑制细胞生长和肿瘤治疗的目的 无需进行细胞固定, 两步法即可完成细胞周期检测快速, 样品准备到分析全过程只需 6min Control 和 treatment 组样品直方图可叠加, 易于比较药物作用效果 Control Treatment Merged U2OS 细胞在 Etposide 370C 处理 5h 后, 用 NC3000 的 Two-step cell cycle protocol 测定细胞周期 Merged : Control 和 Treatment 叠加图 Annexin V/PI assay Hoechst33342 染料设定分析含核的细胞, 排除 了无核的细胞碎片 无需固定细胞, 分析结果客观可靠 预设分析模块, 一步分析, 批数据处理 camptothecin(cpt) 处理 Jurkat 细胞后, 用 Hoechst33342 AnnexinV-FITC PI 染色, 选择 NC3000 的 AnnexinV/PI assay 分析早期凋亡细胞 PS 的膜外翻 高级细胞分析系统 线粒体凋亡 线粒体膜通透性的变化导致跨膜电位的下降, 被 认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件 线 粒体凋亡分析在研究一些肿瘤发病机理和筛选抗肿瘤 药物中具有非常重要的意义 参考文献 :A receptor tyrosine kinase inhibitor, Tyrphostin A9 induces cancer cell death through Drp1 dependent mitochondria fragmentation(2010) 48

54 部分客户名单 Company/University University of Oxford( 牛津大学 ) UCLA( 加利福尼亚大学洛杉矶分校 ) Lunds Universitet( 隆德大学 ) Århus University Hospital( 奥尔胡斯大学医学院 ) The Danish Cancer Society( 丹麦癌症研究所 ) Danish State Serum Institute( 丹麦血液研究所 ) Astra Zenica( 阿斯利康 ) Novo Nordisk A/S( 诺和诺德 ) GSK( 葛兰素史克 ) Food DTU/ The National Food Institute STEM CENTER, S.L,( 西班牙干细胞中心 ) ZHAW( 苏黎世大学 ) Universidad Metropolitana( 亚松森大都会大学 ) Takeda( 日本武田制药 ) Aastrom Biosciences Bavarian Nordic Oroxcell StemCare Tor Vergata University Department R&D Molecular and Medical Pharmacology Molecular Tumor Biology Cancer cytogenic Apoptosis Lab R&D Department of Molecular and Medical, Pharmacology Biopharmaceutical R&D Invitro, discovery, biology, respiratory, CEDD Food Molecular Tumor Biology Core Facility Chemical, Environmental and Molecular, Toxicology Lab Biopharmaceutical R&D Stem cell therapies Vaccine production Pharmaceutical, cosmetic, food QC department Stem cell Application Viablity and cell count Cancer research Cancer research Cancer research Cancer research Infectious Diseases Cancer research Inflammation Disease control, lung, diseases Toxicology stem cell Cancer research Toxicology Viablity and cell count stem cell therapies Infectious diseases Toxicology Stem cell QC Stem cell QC 高级细胞分析系统 参考文献 1. LEDGF (p75) promotes DNA-end resection and homologous recombination Mads Daugaard, Annika Baude, Kasper Fugger, Lou Klitgaard Povlsen, Halfdan Beck,et.al Nature structural & molecular biology,2012,19( 8) Proteomics Reveals that Redox Regulation Is Disrupted in Patients with Ethylmalonic Encephalopathy Johan Palmfeldt, Søren Vang, Vibeke Stenbroen, Evangelos Pavlou, Mila Baycheva, Gebhard Buchal, Ardeshir Ahmad Monavari, Persephone Augoustides-Savvopoulou, z Hanna Mandel, b and Niels Gregersen J. Proteome Res., 2011, 10 (5), pp Dnmt1/Transcription Factor Interactions An Alternative Mechanism of DNA Methylation Inheritance Eric Hervouet, François M. Vallette, Pierre-François Cartron Genes & Cancer, 2010, 1(5) A receptor tyrosine kinase inhibitor, Tyrphostin A9 induces cancer cell death through Drp1 dependent mitochondria fragmentation So Jung Park, Young Jun Park, Ji Hyun Shin, Eun Sung Kim, Jung Jin Hwang, Dong-Hoon Jin, Jin Cheon Kim, Dong-Hyung Cho Biochemical and Biophysical Research Communications 408 (2011) Serum Response Factor Controls CYLD Expression via MAPK Signaling Pathway Gang Liang., Kristofer Ahlqvist., Rajeswararao Pannem, Guido Posern, Ramin Massoumi PLoS ONE, 2011,6 (5) 6. Proximity ligation in situ assay for monitoring the global DNA methylation in cells Eric Hervouet, Philippe Hulin, François M Vallette2 and Pierre-François Cartron BMC Biotechnology, 2011,11 :31 7. MicroRNA-15b is induced with E2F-controlled genes in HPV-related cancer M P Myklebust, O Bruland, Ø Fluge, A Skarstein, L Balteskard and O Dahl British Journal of Cancer 105, (2011) 49

55 Constant Systems 是一家专业生产高压细胞破碎仪的英国公司, 一直致力于高压破碎仪的开发和生产, 为全球制药和生物技术公司 大学和研究机构提供性能卓越的高压细胞破碎仪和良好的服务 Constant Systems 高压细胞破碎仪最大压力能达到 40000PSI(2700 巴 ), 能够破碎微生物 动物细胞 植物细胞 组织及均质, 一次破碎就能达到非常好的破碎效果 Constant Systems 高压细胞破碎仪 Constant Systems 高压破碎原理高压活塞往下运动, 由于重力作用, 样品吸入高压套筒一旦样品进入高压腔, 活塞高速加速将进口阀关闭, 并使样品高速通过固定喷嘴, 样品压力可达 40kpsi (2700 巴 ), 样品快速从高压区转至低压区而使细胞破碎样品击中撞击靶, 流经冷却表面, 冷却的样品由于重力的作用经出口流出, 进入下一个循环 Constant Systems 高压细胞破碎仪特点 能产生高达 40Kpsi(2700 巴 ) 的压力 一次破碎就能达到非常高的破碎效率, 避免多次破碎造成碎片太细和使活性物质变性失活 破碎头带冷却夹套 (One Shot 型号除外 ) 能够很好地控制破碎样品温度, 避免温升引起的样品失活 高压细胞破碎仪 固定喷嘴设计液压系统产生高压蠕动泵自动的进样和全密闭操作 (One Shot 型号 TS 0.75KW 除外 ) B&C 系列可选特定的 CIP 和 SIP 设计数字显示操作压力 ( 所有型号 ) 及样品温度 (TS 0.75KW 和 One Shot 型号除外 ) 阀式设计靠调节阀来调节破碎压力, 易在破碎过程中压力不稳定 重现性差, 且阀容易坏压力稳定 重现性好避免影响环境或受环境的影响符合 GMP 和 FDA 标准并可选用数据获取包, 显示和记录整个破碎过程的操作压力和样品温度, 为 GMP 提供有用信息 50

56 Constant Systems 高压细胞破碎仪的应用 Constant Systems 细胞破碎仪应用极其广泛, 可用于细胞破碎 蛋白质和 DNA 提取 酶的释放 DNA 操 纵选择性破碎 单细胞分离 组织破碎等, 例如 : 藻类微生物真菌 ( 包酵母 ) 哺乳动物细胞和组织昆虫植物细胞和组织病毒环境样品 破碎各种项圈藻破碎重组大肠杆菌 分支杆菌啤酒酵母 毕赤酵母可获得 99% 的重组蛋白的释放, 从曲霉获得高比活性的酶破碎马肝细胞和细胞内质膜, 从牛脾脏和淋巴结中分离单活细胞破碎人细胞核中巨细胞病毒提取香蕉果胶, 提取草莓叶子 DNA 分离弓形虫的膜抗原, 分离羊膜细胞的核和膜从土壤微生物中提取 DNA One Shot 型号适合研究级小量样品的破碎能够处理流动 粘性或不能流动的样品如糊状物或树叶破碎处理量易放大死体积不到 0.1ml 可在 -7 低温房间进行操作标配含一个样品杯 高压细胞破碎仪 40KPSI(2700 巴 ) 30KPSI(2000 巴 ) 20KPSI(1350 巴 ) 15KPSI(1000 巴 ) 最大压力头 最大压力头 最大压力头 最大压力头 处理量 /Shot 1-8ml ml 2-16ml ml One Shot 转换头 One Shot 转换头将 One Shot 独特的破碎能力整合到连续流破碎仪, 可将连续流破碎仪转换成 One Shot 来破碎粘性或不流动的样品 One Shot 转换头可与所有连续流型号的仪器相配 处理量 /Shot 40KPSI(2700 巴 ) 最大压力头 1-10ml 30KPSI(2000 巴 ) 最大压力头 ml 51

57 TS 型号连续流细胞破碎仪, 可选配 Oneshot 转换头破碎不流动样品细胞破碎仪控制的蠕动泵可进行自动加样 ( 可选配蠕动泵,TS 0.75KW 除外 ) 破碎头安在不锈钢盘上避免泄漏部分封闭和简单的外部控制的在位清洗内部减压阀适合清洗液反流冲洗选配不同最大压力头样品处理速度不同在破碎的过程中压力一致性和稳定性可选配全密闭的进口和出口温度控制 : 在破碎头周围设计有冷却夹套, 可用循环水浴或冷却剂进行冷却 最大的压力头 PSI( 巴 ) 功率 40KPSI(2700 巴 ) 30KPSI(2000 巴 ) 20KPSI(1350 巴 ) 15KPSI(1000 巴 ) 0.75 KW 40ml/min(2.4/hr) 55ml/min(3.3L/hr) 80ml/min(4.8L/hr) 115ml/min(6.9L/hr) 1.1 KW 100ml/min (6.0L/hr) 120ml/min (7.2L/hr) 180ml/min (10.8L/hr) 255ml/min (15.3L/hr) 2.2 KW 190ml/min (11.4L/hr) 240ml/min (14.4L/hr) 300ml/min (18.0L/hr) 310ml/min (18.6L/hr) 4 KW 405ml/min(24.3L/hr) 430ml/min(25.8L/hr) 440ml/min(26.4L/hr) 565ml/min(33.9L/hr) 注 : TS 0.75KW 既可连续处理样品, 也可适合小规模实验研究 TS 1.1KW 主要适合中试研究, 也适合小公司和大学的小规模的生产应用 TS 2.2kW 和 4kW 主要用于大规模中试和产业化的生物制药公司 HAIVA 型号 ( 大面积的进口阀 ): 可用来处理大的样品或流动性差的样品 ( 如丝状细胞 ), 可用作 TS 1.1KW 和 2.2KW 的替代进口阀, 其进口阀的面积比标准阀要大五倍 B & C 型号适合于工业生产级别 B & C 型号具有 TS 系列的所有优点, 改进了清洗和灭菌功能 B 型号是手动 CIP 和 SIP C 型号是自动 CIP 和 SIP 高压细胞破碎仪 最大的压力头 PSI( 巴 ) 功率 40KPSI(2700 巴 ) 30KPSI(2000 巴 ) 20KPSI(1350 巴 ) 15KPSI(1000 巴 ) 1.1 KW 100ml/min (6.0L/hr) 120ml/min (7.2L/hr) 180ml/min (10.8L/hr) 255ml/min (15.3L/hr) 2.2 KW 190ml/min (11.4L/hr) 240ml/min (14.4L/hr) 300ml/min (18.0L/hr) 310ml/min (18.6L/hr) 4 KW 405ml/min(24.3L/hr) 430ml/min(25.8L/hr) 440ml/min(26.4L/hr) 565ml/min(33.9L/hr) 52

58 Wheaton 公司是一家专门生产细胞培养相关产品的美国公司, 由于其具有 50 多年生产实验室仪器历史, Wheaton 公司的小型细胞培养反应器 转瓶机和细胞培养瓶一直都倍受用户青睐 Wheaton 细胞培养装置 细胞培养优化系统 细胞培养装置 为小型的细胞培养生物反应器, 可以对细胞培养 的参数进行快速优化, 可用于细胞培养过程优 化 昆虫细胞培养 杂交瘤细胞培养 病毒感染 研究 发酵等方面 有 250ml 500ml 1 升或 3 升体积可供选择 优化系统包括 :Control Tower 数字控制系统 Control Tower 支持单元和 Micro-stir 磁力搅拌 器 Control Tower 数字控制系统和 Control Tower 支持单元自动通过添加碱或 CO 来控制 ph 值 ; 2 通过空气 O 和 N 来控制溶氧 ; 温度由加热垫 2 2 来维持, 故系统不需培养箱 搅拌速度可通过 Micro-stir 磁力搅拌器设定 可选配部件, 进行泡沫和补料控制 可选 BIOPRO PC 软件进行联网, 方便记录和监 控多达 32 台细胞优化器的设定 Mini-Pilot Plant 大体积细胞培养反应器 大体积细胞培养反应器, 可用于疫苗 抗体 蛋 白质 病毒及其他细胞产品的生产或中试研究以 及微生物发酵 完备的系统包括 : Control Tower 数字控制系 统 Control Tower 支持单元 Overdrive 系统 加热套 喷气头及 10,19 或 45 升反应罐 用 C o n t r o l T o w e r 数字控制系统和 C o n t r o l Tower 支持单元自动通过添加碱或 CO 来控制 2 ph 值 ; 通过空气 O 和 N 来控制溶氧 ; 温度由 2 2 加热套来维持, 故系统不需培养箱 搅拌速度可由 Overdrive 系统控制 可选配部件, 进行泡沫和补料控制 53

59 Micro-Stir 低速磁力搅拌器 Micro-Stir 低速磁力搅拌器转速低 (5-175rpm), 混合温和, 传热量低, 是专门为动物细胞培养设计的 Micro-Stir 能在有 CO 和湿度不高的环境下使用, 可在温度达 50 下使用 Micro-Stir 磁力搅拌器有一位 Micro- 2 Stir 和四位 Micro-Stir 磁力搅拌器两种型号, 瓶子最大体积为 3L 其特点 : 符合 UL CSA 和 CE 标准 数字显示转速, 可使结果的一致性 混合温和与低的热量交换 可预先设定细胞粘附操作模式 可进行远程控制 ( 选配 ) 具有多种操作模式, 适合悬浮或微载体培养 恒速模式 : 缓慢启动到恒定的搅拌速度, 适合悬浮培养 间隙启动模式 : 通过控制磁力搅拌器开和关, 使搅拌器经过许多次缓慢启动和停止循环后, 磁力搅拌器在不同 于细胞粘附的速度下恒速旋转 这种模式对微载体贴壁培养非常有用 两种转速搅拌模式 : 磁力搅拌器缓慢启动到设定速度, 维持一段时间后 ( 用户设定 ), 然后搅拌器缓慢变化到 最终的恒定速度 这种模式对微载体培养也非常有用 这些模式都可控制循环数量和搅拌速度 因为所有模式都是在计算机的控制下, 它们每次都在相同的方式 下运行, 保证结果的一致性 Bio-stir 磁力搅拌器 Bio-stir 磁力搅拌器是专门为悬浮培养瓶设计的 DC 马达提供一致的转速 ( rpm), 适合微生物 发酵或细胞培养 Bio-Stir 磁力搅拌器有一位 Bio-Stir 和四位 Bio-Stir 两种型号, 瓶子最大体积为 3L 能在有 CO 和湿度不高的环境下使用, 可在温度达 50 下使用 特点同上 2 细胞培养装置 54

60 TM R2P 转瓶机 TM R2P 转瓶机 6 英寸的层距可充分利用培养箱的空间 Wheaton 公司的 TM R2P 转瓶机可使用户不需更换设备和条件, 就能从研究规模细胞培养放大到 产业化规模 ; 可选用一层层架 (5 个瓶位 ), 最多可放置 11 个层架 (55 个瓶 位 ) 组件式, 可随用户需求的变化而增加容量和选配件 2 每台装置有 5 至 55 个瓶位 ( 放置 10 到 110 个 850 cm 的培养瓶 ) 当输入转瓶直径时可精确显示相应 RPM 值 宽转速范围无碳刷马达, 从 0.25 到 8.75 rpm( 基于 110mm 直径瓶子 ) 内置式转动报警系统 ( 可视 声音 带外接插座 ) 可编辑转动方向, 固定或反向 可编程的缓慢启动和停止 可贮存 10 个程序 符合 UL CSA CE 标准 可选温度监测, 每台 1-4 个感应器 可选电池后备系统, 可提供长达 18 个小时电力供应 TM 可选 CART2 计算机控制软件, 可监测 控制并记录多达 2047 台 R P 转 瓶机 2 标准功能全瓶位的驱动系统, 每个转子都可转动, 既可使用玻璃瓶, 也可使用轻质塑料培养瓶用户友好的控制界面, 大的数字式显示屏和按键可让用户方便地输入和监控设置参数, 仪器可连续不间断地显示转瓶转速设置值和实际转速 (rpm) 只要输入瓶子直径, 对任何尺寸的瓶子 ( mm) 都能显示精确的数值 转瓶机可编程进行正转和反转, 可输入时间间隔自动进行反转 可编辑缓慢启动和停止防止不成熟的细胞脱落 这个设置可存于 10 个内存地址之一, 方便以后调用 细胞培养装置 CO2 培养箱 Wheaton CO 培养箱使用方便, 节省空间, 对研究或小规模生产而言, 2 是比采用培养室更经济的一种选择 用于放置全尺寸的转瓶培养装置, 也可选 配隔板, 放置磁力搅拌培养装置和其他许多应用 双层壁的结构, 既能提供温 度的稳定性, 又容易清洗 有斜坡便于推入转瓶培养装置 大于 38 立方英尺的空间 四个内置式电源插口 独立过温保护, 前门有观察窗 CO 浓度范围 0-20%, 调节精度为 0.1% 2 强制式循环空气加热, 数字温度控制 55

61 西班牙泰事达 (Telstar) 公司是欧洲著名的仪器设备生产商, 主要致力于生物工程 制药等领域仪器的研发及 生产制造 他们生产的冻干机系列产品型号齐全 品质优越 从实验室用的小型机到适用于生产企业用的 中 大型冻干机能满足不同用户需求, 用户遍及欧洲知名大学 研究所 大规模实验室 制药和食品企业 Telstar LyoBeta 中试型冻干机 LyoBeta 系列 可靠的选择研发中心对冻干机新的要求为冻干工艺中试放大的可行性与可靠性 结合 TELSTAR 40 多年工业型冻干机生产经验,LyoBeta 系列采用与工业型冻干机相同的设计理念, 产品结构 温度控制系统及冻干工艺优化软件都和工业型冻干机尽可能一致 同时 LyoBeta 系列产品以 GMP 规范作为质量监督标准, 所有产品符合实验室 cgmp 规范 设计特点 LyoBeta 系列产品设计机构紧凑, 所有组件集成 于箱体内, 并配有脚轮, 方便移动 先进的设计理念此系列产品为研发中心冻干工艺摸索提供了最佳解决方案 样品腔与冷凝器间的阀门用于压力升测试和热控制, 使得冻干工艺优化得以轻松实现 此阀门还可在冷凝器未满载时不进行除霜, 直接装卸产品 制冷系统可使冷凝器温度达到 -85, 层板温度达到 -65 仅适用 HFC 环保制冷剂, 使得环境不受到污染, 同时可长期使用 灵活的应用通过使用压盖装置, 层板间距可轻松调节, 适用于各种不同容量 尺寸 类型的瓶子 另外, 冻干机侧面留有一个接口, 用于连接 6 口多歧管, 可冻干 CN29/32 的敞口冻干瓶 为高级研发中心提供的最佳解决方案极佳的品质, 出众的工艺冷凝器也为 316L 不锈钢材质, 配有电加热快速除霜装置 控制精准, 温度均一三明治式层板, 内有导热硅油循环通道 此结构使得产品可实现原位预冻及升华阶段加热时, 产品温度的精准控制 最上面一层热辐射层板用来保证所有层板上的样品都受热均一 通常, 研发用冻干机的真空传感器安装在真空通道上, 用来反映腔体内的真空度 LyoBeta 设备, 真空传感器位于腔体内, 直接反映了样品所在环境的实际真空度 这使得中试研究可获得最好的放大效果 冻干机 56

62 控制系统基于 PLC 控制, 最大程度保证工艺的可靠性和可重复性友好操作界面的,6 英寸触摸屏操控系统本机也可以接入不同的外设, 如图表记录仪 打印机 PC Lyologger 数据采集软件, 通过串口采集图表 事件 报警和历史记录 (ASCII 码文件 ) 等 LyoStar/Lab 专门为研发而设计的 SCADA 程序软件 可以设计, 载入和存储工艺程序实时记录冻干过程, 绘制冻干曲线, 生成报告 历史记录 报警等 技术参数 冻干机 可选配件排气过滤器层板间距调节装置自动取样装置洁净室配置 6 口多歧管共晶点测试装置湿度分析仪 BARATRON 电容真空计 参气装置额外的产品温度探头产品托盘图表记录仪 SCADA 研发冻干软件 (LyoStar/Lab) DPE 研发软件 IQ/OQ 记录文件 标配 LyoBeta 系列包含 : 腔体和冷凝器间的隔离阀自动压盖装置数据采集软件 Lyologger 57

63 英国 Planer 从 1952 年起研究和开发生物样品冷冻保存方法, 是世界上最早研制及生产程序冷冻仪的专业公司 多年的生产研发和销售经验, 令 Planer 公司产品一直在生物样品长期冷冻保存领域处于领先地位 Planer 公司 生产各种应用范围的程序冷冻仪, 包括了从 1.7 升至 380 升各种大小内膛的程序冷冻仪 Kryo 及 Kryo 程序冷冻仪 冷冻内膛为 16 升, 可根据不同的样品选配置不同的内置层架 ( 用于血袋, 低温冻存管, 样品篮及特定不同体积容器 ) 的冷冻 Kryo 随机配有 Delta Tlight 软件,Kryo 标配 MRV 控制器, 另购外接电脑相连, 通 过电脑软件编制及储存多种程序 也可以另外购买 IVF 内置盖 (IVF Lid ) 压力泵 液氮罐 需配 LNP4-C 压力泵与 LAB30 液氮罐 Kryo 及 Kryo 程序冷冻仪 大型冷冻内膛, 用于血库 疫苗 制药厂 种子库存等中型至大量样品的冷冻步骤 要根据不同的样品选配置不同的样品架 这类程序冷冻仪随机配有 Delta T 软件, 另购外接电脑相连, 可通过电脑软件编制及储存多种程序 大型生物制品适用 Planer 程序冷冻仪各型号一览表 型号 主机容量 冻存管容量 样品支架 血袋容量 降温范围 降温速度 系统控制器 制冷泵 液氮罐 Delta T 软件 MRV 选配 内置样品架和附件信息请与本公司联系 ml ml to -50 / min to -50 / min LNP4-C LAB ml or ml 另选购样品架 / 篮子另选购样品架 / 篮子另选购样品架 / 篮子 /500 ml 30 至 -180 需配低压液氮供给罐 Kryo Kryo Kryo Kryo 升 30 升 180 升 PC / Delta T 标配 /500 ml 100 至 至 -100 PC / Delta T Cylinder / 22 PSI 至 -5 /min PC / Delta T Cylinder / 22 PSI - - 标配 - 标配 其它常用仪器 58

64 法国 AES Chemunex 公司是全世界最大的生产食品安全检测产品的公司之一, 其产品集优良的品质及富有灵感 的设计于一身, 享誉全球, 是建设现代微生物实验室的首选 ChemScan RDI 微生物快速检测仪 其它常用仪器 AES Chemunex 公司将激光扫描合成成像技术与活细胞荧光酶标记相结合, 推出的 C h e m S c a n RDI 微生物快速检测仪 可在 1 个半小时内对可过滤样品中的微生物及原生虫进行快速计数, 适于食品 化妆品及药品行业. 产品特点只检测活细胞数, 激光对整张滤膜扫描后自动读数速度极快, 无需增菌, 可在 分钟内出结果灵敏度 : 可检测出 1 个微生物或原生虫检测范围 :1-5,000 个细胞可选配荧光显微镜与仪器连接, 自动定位对可疑微生物进行确认观察符合美国 FDA 21CFR 11 compliant 美国部分药厂使用 chemscan RDI 已经通过美国 FDA 认可主要应用领域国家水质监测中心 自来水厂 直饮水质量控制实验室蒸馏水 纯水 澄清饮料生产企业啤酒企业进行啤酒污染菌快速检测食品 化妆品 药品生产企业用于生产过程用水在线快速检测半导体生产企业用于水质快速在线检测 步骤 1 : 直接取 100mL 可过滤样品, 用 25mm 滤膜 ( 孔径 0.45 μ m ) 真空抽滤 步骤 2 : 30 分钟预标记 ( 将微生物酶激活, 细胞壁通透性增加 ), 60 分钟荧光酶标记 应用项目 可过滤样品中总活菌数 TVC( 细菌 酵母和霉菌 ), 也叫生物负载量可过滤样品中酵母和霉菌检测可过滤样品中大肠杆菌和大肠菌群快速检测 ( 目前仅用于研究领域 ) 直饮水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫检测啤酒中污染菌定量检测, 包括乳酸菌 片球菌 果胶杆菌和巨球菌等 步骤 3 : 将滤膜放置在激光扫描仪中进行 3 分钟扫描, 仪器自动显示滤膜上的微生物数量 59

65 美国 BIOLOG 公司致力于微生物鉴定领域新技术新产品的开发 生产和销售, 是全球高新技术百强之一, 其 独创的碳源利用方法已获美国 FDA 认可 BIOLOG 鉴定系统可鉴定包括细菌 酵母和真菌在内约 2000 种微生 物, 用于各领域的微生物实验室对微生物的鉴定 Phenotype Microassays(PMs)- 表型芯片技术 美国 Biolog 公司针对全自动系统开发了一种全新的专利技术 表型芯片技术 ( PMs ), 可用来测定细胞表型, 是与 DNA 芯片和蛋白质组技术并列的 应用在基因组研究和药物开发的三大技术之一 在 96 孔微孔板的每个孔里固定一种干化的细胞培养基质和显色物质, 当加入微生物细胞悬液并培养后, 细胞显型就可以通过颜色变化表现出来 如果表型反应为阳性, 那么产生的还原酶就可以将显色剂从无色的氧化态还原为紫色的还原态 ; 如果表型反应为阴性, 则无颜色变化 微孔板的培养和读数由 OmniLog 完成, 系统可定时测定颜色变化值, 最后得到表型反应的动力学图, 从而定量测定表型反应的强弱 PMs 技术使生物学家历史上第一次可以迅速 简单 高效地同时测试成千上万的细胞的显型, 特别适用于新药和菌种的筛选, 可以广泛地应用于以下方面 : 确定重要基因 ( 功能基因 ) 的功能发现新药的靶基因新药评估毒性测试最优化细胞的培养条件最优化孢子形成和萌发的条件最优化二级代谢产物, 如抗生素的产生条件寻找有特定活性的酶 PMs 可直接或间接测定细胞大部分已知的表型或功能 : 细胞表面结构与运转功能碳 氮 磷 硫的代谢小分子生物合成大分子合成及细胞器功能细胞呼吸功能细胞应力和修复功能其它细胞特性 其它常用仪器 60

66 PMs 技术的应用 测试经药物或其它化学物质处理后细胞表型发生的变化新药研发现在的药物开发存在周期长 (15 年 ) 费用昂贵(8 亿美元 ) 及成功率低 (1/10,000) 的问题, 应用 PMs 就可有效解决这三大问题,PMs 在药物开发中可用来 : 发现致病菌独有基因从而确定新药物的靶位点确定药物作用机制评估潜在药物评估新药副作用新药与其他已知药物的增益作用或有害相互作用毒理测试 PMs 代替动物实验更经济 更人道 更准确快速 测试具有基因差异的细胞确定功能基因组的功能发现编码特点靶物的基因细胞系改进细胞表型稳定性测试 细胞系直接测试 其它常用仪器 最优化细胞培养条件最优化孢子形成和萌发的条件最优化二级代谢产物如抗生素的产生发现有用的酶活性其他细胞水平上的分析在基础研究和药物靶物研究中比较细胞的表型 比较正常与不正常或病理细胞比较肿瘤与非肿瘤细胞比较病毒感染与非病毒感染的细胞比较来自不同组织的细胞比较在不同状态或发展阶段的细胞确定细胞在衰老或老化时发生的变化确定细胞代谢特性确定并优化培养条件对细胞的影响发现导致或抑制细胞分化的条件 61

67 其它常用仪器 法国 AES 浮游菌采样器 法国 AES 培养基自动制备分装仪 英国 DWS 厌氧工作站 型号 :Sampl'air Lite/Pro 采样菌落大小 :>0.2μm 采样标准 : 符合 IISO CD14698 标准采样速度 :100L/min 采样板 : φ90mm 培养皿用途 : 实验室 车间 医院的浮游菌采样 型号 :Masterclave09+APS320 容积 :1 ~ 9 升出液速度 :5 ~ 8 升 / 分钟培养基分装速度 :750 皿 / 小时用途 : 用于批量制备和分装培养基 型号 :DG250 容量 :240 个 90mm 平皿特点 : 设计紧凑, 经济实用, 外形美观用途 : 用于厌氧微生物培养 分离和接种 英国 Synbiosis 全自动菌落分析仪 型号 :ProtoCOL 3 特性 :0.6 秒 / 板分辨率 :0.043mm 用途 : 微生物自动菌落计数和抑菌圈测量 英国 Synbiosis 自动菌落计数仪 型号 :acolyte 计数时间 :500cfu/ 秒分辨率 : 最小可测菌落 0.3mm 用途 : 微生物菌落自动计数 英国 Matrix 致病菌和病毒磁分离快速纯化系统 型号 :Pathatrix Auto 检测项目 : 大肠杆菌 O157 沙门氏菌 李斯特菌 弯曲菌 阪崎肠杆菌 副结核分枝杆菌及病毒广谱分离浓缩特点 :10~60mL 大样循环捕获, 全自动闭管操作,15 分钟完成捕获, 提高灵敏度, 减少假阴性 ; 与定量 PCR 结合, 可以 8 小时内获得初筛结果 其它常用仪器 英国 DWS 螺旋接种仪 型号 :WASP2 适用平皿 :9cm 或 15cm 接种体积 :10~400μL, 有多种选择接种模式 : 线性模式或对数模式用途 : 取代系列稀释, 对菌含量从 30~4 105cfu/mL 的样品进行定量分析, 节约平板培养基, 快速方便 日本 Hirayama 高压灭菌器 型号 :HV 系列容积 :25~110L 灭菌温度 :105~135 特点 : 有四个预置灭菌模式可选用途 : 微生物灭菌 德国 Hettich 通用型台式冷冻离心机 型号 :Universal 320/320R 最大转速 : 角转子 15000rpm( 最大离心力 21382g); 水平转子 5000rpm( 最大离心力 4193g) 容量 : 角转子 :6 个 50ml 离心管 ( 最大转速 9000rpm) 水平转子 :4 个 50ml 离心管或 32 个 15ml 离心管温度范围 :-20~40 62

68 其它常用仪器 其它常用仪器 63 美国 BioSpherix 可编程的三气培养系统 美国 BioSpherix 带气体控制的细胞工作台 美国 BioSpherix 带气体控制的高级细胞工作站 型号 OxyCycler A & A-Chamber (动物实验用) OxyCycler C & C-Chamber (细胞培养用) 特点 业内最先进的气体控制器 可轻松地创建 全套氧气控制 0.1 至 99.9 和/或二 氧化碳控制 0.1 至20.0 可编程 轻松进行间断性氧浓度实验 应用 在研究室再现某些生理条件 如肿瘤微环 境 心脏病 中风 癫痫 睡眠呼吸暂停 综合征 Sleep Apnea Syndrome - SAS) 等 模拟体内气体变化对细胞的影响 型号 C-shuttle Glove Box 特点 带O2控制 0.1~99.9% 的细胞工 作台 宽敞的工作区 CO 2 控制 紫外灯除菌功能可选 应用 与Biospherix Sub-chamber系统配 合使用 可为细胞的培养 传代 操作提供一致性的环境 亦可与其 它Chamber系统配合使用 型号 Xvivo 特点 独一无二的设计 提供用户定制服务 美国 Bio-Tek 通用酶标仪 美国 Biolog 自动微生物鉴定系统 德国 Labotect CO 2 培养箱 型号 ELx808 波长 mm 吸光度范围 ABS 用途 ELISA测试 荧光 化学发光 DNA探针和细胞检测等 型号 Gen III MicroStation 微生物鉴定种类 2650种 操作步骤 只需4步 原理 碳源图谱利用方法 用途 细菌 酵母和真菌的快速鉴定 型号 Incubator C 升 温度控制范围 28~42 温度控制范围 60~98% 特点 双光束红外传感器 活性温度控制 德国 Biometra 高性能 PCR 仪 日本 NEPA GENE 高效基因转染系统 美国 MVE 液氮罐 型号 TProfessional standard 特点 卓越的升降温速度 升温6 /S 降温4.5 /S 温度均一性及温控 精度 人性化的软件设计 极低噪 音 用途 追求卓越性能和稳定性的实验应用 型号 NEPA21 特点 全新设计的电转程序 高转染效率 高 型号 CryoSytem 液氮容积 61L 121L 175L 正常维持时间 天 样品 低温冻存管1.2ml或2.0ml biotech@applitechpharma.com 细胞存活率 电转程序的各项参数可 见 可调 适用性广 不需要特殊的转 染试剂盒辅助 运维成本低 应用 特别适用于难转染细胞 如原代细胞 干细胞 免疫细胞 神经细胞等 可进 行离体组织或动物活体的转染 可选择细胞培养 观察和操作等模块 可内置培养箱或显微镜 温度 湿度 CO2或O2浓度可调控 O2范围 0.1%~99.9% 应用 最专业的干细胞培养工作站 可替代传 统的细胞房或层流间 适用于细胞培 养 操作量大 且对气体控制有较高要 求的科研院所 医院 干细胞中心等

69 尊敬的用户 : 您好! 非常感谢您对艾贝泰的大力支持和信任! 如需了解目录中各产品的详情, 请您联系当地销售员, 或通过以下方式与我们联系, 谢谢! 为了给您提供更好的产品, 保证我们能提供给您更专业的服务, 请您抽出宝贵的时间认真填写背面的客户调查表, 沿虚线处剪开, 并寄回给我们公司 如果方便, 您也可以传真给我们或交给负责本地的销售员带回 我们将有 1 份小礼物回馈给您 对于我们, 您的任何有价值的意见和建议都是艾贝泰的宝贵财富, 并将激励着我们不断地努力和改进, 为您提供更满意 更完善 更全面的服务 十分感谢! 敬礼! 我们的联系方式是 : 电话 : 传真 : 网址 : biotech@applitechpharma.com 邮寄地址 : 广州市番禺区兴南大道 483 号华粤大厦邮编 : 请您注明艾贝泰市场部 ( 收 ) 此致 艾贝泰市场部

70 艾贝泰资料索取卡 姓名 : 性别 : 工作单位及部分职务或职称 : 地址 : 邮编 : 固定电话 : 手机 : 传真 : 您的应用领域是 抗体工程 发酵工程 生化工程 过程工程 疫苗 融合蛋白 基因治疗 兽用生物制品 微生物学 组织工程 细胞生物学 干细胞 生物能源 传感技术 其他 如果是发酵或者细胞培养, 您可能对以下技术感兴趣的是 细菌发酵 真菌发酵 酵母发酵 植物细胞培养 动物细胞培养 悬浮细胞培养 微载体培养 贴壁细胞培养 微孔板培养 摇瓶培养 实验室研究 中试生产 工程项目和特殊大项目 批次培养 流加培养 灌流培养 重组蛋白 抗生素 酶制剂 生物燃料 生化参数检测 多联发酵培养 多联细胞培养 自动化在线取样 在线活细胞浓度检测 细胞计数 其他 如果是细胞生物学, 您可能对以下技术感兴趣的是 凋亡 GFP 蛋白转染 细胞周期 细胞计数 细胞生长状态 药理毒理 药物筛选 肿瘤 重组蛋白表达 其他 请您选择您希望得到的资料 艾贝泰生物制药产品目录 Applikon 实验室级别生物反应器 Applikon Sensored 微型生物反应器 Applikon RAM 声波共振摇床 Fogale 多联生物反应器 Applikon Biosep 声频截流设备 ChemoMetec NC-3000 高级细胞分析系统 英文原版资料 其他资料 ( 请注明 ): 您希望得到本公司的其他活动信息有 特价信息 讲座邀请 演示实验和学习班 展会及研讨会信息 我还有些建议

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