壹摘要本研究以簡易的天然物或食品 ( 馬鈴薯阿華田 ) 為培養基, 來培養松杉靈芝鮑魚菇杏鮑菇金針菇松茸菇白松茸菇蠔菇香菇等 8 種菇類菌絲體, 篩選出菌絲體產量較高的菌種 : 松杉靈芝蠔菇, 並研究影響菌絲多醣體生成的不同培養條件結果如下 :1. 不同菇類的菌絲體各有其適合

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1 中華民國第四十八屆中小學科學展覽會作品說明書高職組農業及生物科技科第二名最佳團隊合作獎影響菇類菌絲多醣體生成的培養條件研究學校名稱 : 國立淡水高級商工職業學校作者 : 指導老師 : 職二吳靜宜蕭緯世職二邱金如職二黃思恩職二蘇欣渝關鍵詞 : 菌絲體多醣體培養條件

2 壹摘要本研究以簡易的天然物或食品 ( 馬鈴薯阿華田 ) 為培養基, 來培養松杉靈芝鮑魚菇杏鮑菇金針菇松茸菇白松茸菇蠔菇香菇等 8 種菇類菌絲體, 篩選出菌絲體產量較高的菌種 : 松杉靈芝蠔菇, 並研究影響菌絲多醣體生成的不同培養條件結果如下 :1. 不同菇類的菌絲體各有其適合的生長溫度, 菌絲體的產量與多醣體的產量, 並不成正相關 2. 菌絲多醣體的生成受培養基種類培養溫度培養基起始 ph 值培養天數及培養容器通氣與否影響 3. 松杉靈芝菌絲多醣體生成的較佳培養條件為 :PSB 培養基起始 ph6~8 溫度 26~30 C 培養 13 天 4. 蠔菇菌絲多醣體生成的較佳培養條件為 : 含 0.3% 啤酒酵母之 PSB 培養基起始 ph5~8 溫度 16~20 C 貳研究動機一動機 ( 一 ) 廣為開發利用的食藥用真菌多醣體, 是一種很重要的免疫調節劑, 現今已有商品化的保健食品以太空包栽培靈芝子實體為例, 需要很多繁雜的操作過程, 而且約需 90~120 天才能採收利用, 若使用液態培養菌絲體, 則只需 6~12 天左右, 即可從菌絲體及其發酵液中獲得比子實體更多量的多醣體, 不但經濟效益高, 且可免除子實體受農藥及重金屬污染的缺點 ( 二 ) 很多食藥用菇類屬於白腐真菌, 大量栽培生產子實體, 必須使用很多木材, 可能造成林木的危害, 破壞生態二文獻回顧 ( 一 ) 多醣體的分子量很大, 由數十萬至數百萬個以上的單醣所組成在真菌界中, 常以 β-glucan( 葡聚醣 ) 的形式大量存在, 是一種無法人工合成的天然物目前已知富含機能性多醣體的菇類有 : 靈芝樟芝冬蟲夏草巴西洋菇松茸菇香菇等 1

3 ( 二 )β-d- glucan 是一串由葡萄糖分子組成的碳水化合物, 而具有 β(1,3) 主鏈和 β(1,6) 支鏈的葡聚醣, 才是有效的活性多醣體其功用有 : 抗腫瘤增加人體的自然免疫力抗氧化抗過敏抗輻射降血脂降血糖消炎等作用 ( 三 ) 菌絲多醣體除了作為保健食品以外, 亦是天然的植物性保濕劑, 同時具有玻尿酸及膠原蛋白的優點, 且溫和不具刺激性, 可應用於化妝品中 ( 四 ) 多醣體可溶於熱水, 但不溶於高濃度的酒精 ( 五 ) 菌絲多醣體生成條件的研究文獻大多以研究靈芝 (Ganoderma lucidium) 為主, 而有關松杉靈芝 (Ganoderma tsugae) 及一般食用菇類的研究較少, 且大多為生技公司的商業機密參研究目的一市售的多醣體保健產品, 大多是由赤芝 (Ganderma luciduim) 製成的產品本研究的目的為利用容易取得的天然物或食品, 來培養一般常見的菇類菌絲體, 避免因使用化學培養基培養菌絲體, 造成消費者的疑慮二尋找菌絲體培養容易生長快速, 且菌絲多醣體產量高的菇類菌種, 並研究其產生多醣體的較佳培養條件肆研究設備及器材一生長箱抽氣過濾裝置循環式烘箱無菌操作檯高溫高壓殺菌釜振盪培養器 ph 測定器電子天秤電磁攪拌器數位相機二接種器鑷子酒精燈培養皿試管廣口瓶三角瓶發酵槽量筒玻棒滴管濾網濾紙瓦斯爐鋁箔紙三菇類 : 香菇 (Lentinus edodes) 鮑魚菇(Pleurotus cystidiosus) 蠔菇(Pleurotus ostreatus) 杏鮑菇(Pleurotus eryngiig) 金針菇(Flammulina velutipes) 松茸菇(Hypsizygus marmoreus) 白松茸菇(Hypsizygus marmoreus) 以上為一般市售新鮮子實體松杉 2

4 靈芝 (Ganoderma tsugae BCRC 36203) 菌種, 購自生物資源保存及研究中心四培養基材料 : 馬鈴薯蔗糖 ( 台糖公司製造 ) 洋菜阿華田( 營養成分如附錄 1 所示 ) 製造商: 英聯食品飲料 ( 泰國 ) 公司代理商 : 欣臨企業公司啤酒酵母 ( 營養成分如附錄 2 所示 ) 製造商: 荷蘭 PRINSEN B.V., 進口商 : 三多士公司 ( 照片 1) 五酒精 (95%), 購自台灣菸酒公司伍研究過程或方法一培養基製作 ( 一 ) 馬鈴薯蔗糖洋菜培養基 (potato sucrose agar, 簡稱 PSA) 1. 馬鈴薯削皮切丁, 取 200 克置於鍋中, 加入 800ml 的水, 煮沸後再沸騰 40 分鐘 2. 過濾出汁液, 加入 30 克蔗糖及 20 克洋菜, 加熱將洋菜溶解, 加水定量成 1 公升 3. 將培養基分裝於試管及培養皿中, 置於高溫高壓殺菌釜, 殺菌 (121 C)20 分鐘 ( 二 ) 馬鈴薯蔗糖液體培養基 (potato sucrose broth, 簡稱 PSB) 做法與 PSA 相同, 但不加洋菜, 分裝於培養瓶中 ( 三 ) 阿華田液體培養基 (Ovomaltine broth, 簡稱 OVB) 取阿華田 30 克加水配成 1 公升溶液, 分裝於培養瓶中, 置於高溫高壓殺菌釜, 殺菌 (121 C)20 分鐘二菇類菌絲體的純培養 (pure culture) ( 一 ) 在無菌操作檯內, 將香菇鮑魚菇蠔菇杏鮑菇金針菇松茸菇白松茸菇等的子實體撕開, 以鑷子夾取內部乾淨無菌之菇肉, 接種於 PSA 培養基上, 於常溫下培養 ( 照片 2) ( 二 ) 在無菌操作檯內, 以鑷子夾取松杉靈芝菌種之菌絲體, 接種於 PSA 培養基上, 於常溫下培養三不同菇類菌絲體於不同溫度下培養, 多醣體產量之比較 3

5 ( 一 ) 以自製的接種器 ( 照片 3), 切取培養皿中直徑 0.5 公分經純培養的菇類 ( 松杉靈芝鮑魚菇杏鮑菇金針菇松茸菇白松茸菇蠔菇香菇等 8 種 ) 菌絲體, 接種於裝有 75 ml PSB 培養基的 250 ml 廣口瓶 ( 二 ) 置於轉速 160 rpm 之振盪培養器 ( 照片 4) ( 三 ) 分別置於 18±2 C 及 28±2 C 的生長箱中培養 ( 四 ) 每個處理有三重複 ( 五 ) 經 14 天及 8 天後, 取培養物 ( 包含菌絲體與經發酵後的培養液 ) 測量多醣體含量, 方法如下 : 1. 將含培養物的培養瓶置於高溫高壓殺菌釜中加熱 (121 )1 小時, 重複 5 次 2. 以抽氣過濾裝置 ( 照片 5) 過濾出菌絲體 3. 菌絲體置於 65 的循環式烘箱中烘乾 4. 濾液加入 4 倍體積的 95% 酒精 5. 懸浮沉澱物即為多醣體 6. 過濾出多醣體 7. 烘乾後秤重四不同培養基對松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 切取直徑 0.5 公分經純培養的松杉靈芝及蠔菇菌絲體, 分別接種於裝有 75 ml 不同培養基的 125ml 三角瓶中 ( 二 ) 培養基分別為 PSB PSB+0.3%yeast OVB OVB+0.3%yeast, 其中 yeast 為啤酒酵母 ( 三 ) 於 28 C 振盪培養 (160 rpm)6 天 ( 四 ) 每個處理有三重複 ( 五 ) 測量多醣體含量五培養基中不同濃度蔗糖對松杉靈芝菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 切取直徑 0.5 公分經純培養的松杉靈芝菌絲體為接種源 4

6 ( 二 ) 分別接種於裝有 75 ml 不同蔗糖濃度 PSB 的 250ml 廣口瓶中 ( 三 ) 蔗糖濃度分別為 1% 2% 3% ( 四 ) 於 28 C 振盪培養 (160 rpm)12 天 ( 五 ) 每個處理有三重複 ( 六 ) 測量多醣體含量六不同濃度 OVB 對松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 切取直徑 0.5 公分經純培養的松杉靈芝及蠔菇菌絲體為接種源 ( 二 ) 分別接種於裝有 75ml 不同濃度 OVB 的 250ml 廣口瓶中 ( 三 ) 不同濃度 OVB 分別為 1% 2% 3% ( 四 ) 於 28 C 振盪培養 (160 rpm)10 天 ( 五 ) 每個處理有三重複 ( 六 ) 測量多醣體含量七培養基的起始 ph 值對松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 不同起始 ph 值之 PSB 1. 切取直徑 0.5 公分經純培養的松杉靈芝及蠔菇菌絲體為接種源 2. 分別接種於調整過 ph 值 (ph3~9) 的 75ml PSB 中 3. 於 28 C 振盪培養 14 天 4. 每個處理有三重複 5. 測量多醣體含量 ( 二 ) 不同起始 ph 值之 OVB 1. 方法同上述 ( 一 ), 僅培養基換成 OVB 2. 培養 12 天八不同培養天數對松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 切取直徑 0.5 公分經純培養的松杉靈芝及蠔菇菌絲體為接種源, 分別接種於裝 5

7 有 75ml PSB 的 125ml 三角瓶中 ( 二 ) 於 28 C 振盪培養 (160 rpm)7 天 10 天 13 天 19 天 ( 三 ) 每個處理有三重複 ( 四 ) 測量多醣體含量九培養容器通氣與否對松杉靈芝菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 切取 10 個直徑 0.5 公分經純培養的松杉靈芝菌絲體為接種源, 接種於裝有 1000ml OVB 培養基的通氣 (300 c.c/min) 小型發酵槽中 ; 對照組為不通氣處理 ( 二 ) 於 25 ~ 30 C 攪拌培養 14 天 ( 三 ) 測量多醣體含量陸研究結果一培養基製作培養基成品如照片 6 所示二菇類菌絲體的純培養 (pure culture) ( 一 ) 在 PSA 平板上, 由香菇菇肉所生成的菌絲體較少較薄較易褐化 ( 老化 ); 而蠔菇鮑魚菇杏鮑菇松杉靈芝等的菌絲體則較多較厚無褐化現象 ( 二 ) 香菇的菌絲體適於在一般室溫生長 ( 約 24 ); 松杉靈芝的菌絲體適於在較高溫生長 ( 約 28~30 ); 松茸菇白松茸菇金針菇的菌絲體適合在較低溫生長 ( 約 18~20 ); 而鮑魚菇蠔菇杏鮑菇等菌絲體對溫度適應範圍較廣, 生長良好 ( 照片 7) 三不同菇類菌絲體於不同溫度下培養, 多醣體產量之比較 ( 一 ) 由表一表二顯示, 八個不同菌種, 不論是在 18±2 或 28±2 的溫度下培養, 松杉靈芝鮑魚菇蠔菇等三個菌種的菌絲體產量都是較高的 ( 照片 8) ( 二 ) 在 18±2 培養的松杉靈芝菌絲多醣體產量最高, 其次是杏鮑菇蠔菇 ( 照片 9) 6

8 ( 三 ) 在 28±2 培養的松杉靈芝菌絲多醣體產量最高, 其次是鮑魚菇松茸菇 ( 照片 10) 四不同培養基對松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 松杉靈芝 1. 由表三顯示, 添加啤酒酵母的 OVB 所生成的菌絲體產量最高 (731mg)( 照片 11 照片 12) 2. 多醣體產量以 PSB 培養基最高 (140mg); 添加啤酒酵母的 OVB 最低 (67mg) ( 二 ) 蠔菇由表三顯示, 添加啤酒酵母的 OVB 所生成的菌絲體產量最高 (729mg), 多醣體產量則以添加啤酒酵母的 PSB 為最高 (40mg)( 照片 13 照片 14) 五培養基中不同濃度蔗糖對松杉靈芝菌絲多醣體產量的影響由表四顯示, 含 3% 蔗糖濃度的 PSB 所培養出的菌絲體最多 (228mg), 多醣體含量也最多 (295mg) 六不同濃度 OVB 對松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 松杉靈芝由表五顯示,3%OVB 所培養出的菌絲體最多 (680mg), 多醣體也最多 (35mg) ( 二 ) 蠔菇由表六顯示,3%OVB 所培養出的菌絲體最多 (692mg), 多醣體也最多 (27mg) 七培養基的起始 ph 值對松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 不同起始 ph 值之 PSB 1. 松杉靈芝由表七顯示,pH6~8 所生成的多醣體較多, 而以 ph8 最多 2. 蠔菇由表七顯示,pH5~8 所生成的多醣體較多, 而以 ph5 最多 7

9 ( 二 ) 不同起始 ph 值之 OVB 1. 松杉靈芝由表八顯示,pH3~5 所生成的多醣體較多, 而以 ph3 最多 ( 照片 15) 2. 蠔菇由表九顯示,pH6 所生成的多醣體最多 ( 照片 16) 八不同培養天數對松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體產量的影響 ( 一 ) 松杉靈芝由圖 1 顯示, 在 PSB 中培養 13 天的多醣體產量最多,19 天最少 ( 二 ) 蠔菇由圖 1 顯示, 在 PSB 中培養 13 天的多醣體產量最多,10 天次之,19 天最少九培養容器通氣與否對松杉靈芝菌絲多醣體產量的影響由表十顯示, 通氣培養所生成的松杉靈芝菌絲多醣體較多柒討論一菇類菌絲體培養物 ( 包含菌絲體與經發酵後的培養液 ) 為萃取多醣體的來源, 培養液中所含的多醣體, 係菌絲體分泌釋放而來在尚未進行實驗前, 我們推測, 菌絲體愈多則培養液中的多醣體含量也可能愈高 ; 但實驗結果 ( 表一二三 ) 顯示, 菌絲體的產量與多醣體的產量, 並非成正相關二本實驗結果顯示, 以 PSB 為培養基, 菌絲體培養物所含的多醣體, 以松杉靈芝為最多但因不同菇類菌絲體所產生的多醣體, 其分子量各不相同, 故彼此無從比較三不同菇類的菌絲體各有其適合生長的溫度, 由表一表二顯示, 松杉靈芝的菌絲體適於高溫生長 ; 杏鮑菇金針菇松茸菇白松茸菇, 適於低溫生長 ; 蠔菇及鮑魚菇, 對於溫度的適應性大, 在高溫低溫都能生長良好四培養溫度不僅影響菌絲體的生長, 似乎更影響多醣體的產量由實驗結果可知, 當培養溫度為高溫 (28 ) 時, 松杉靈芝鮑魚菇松茸菇白松茸菇香菇的菌絲 8

10 多醣體產量顯著地比在低溫 (18 ) 培養時高然而, 蠔菇杏鮑菇則在低溫 (18 ) 時, 有較多的多醣體生成 ( 表一表二 ) 五不同培養基影響菌絲體的生長, 亦影響多醣體的產量由實驗結果 ( 表三 ) 可知, 培養於 OVB 的松杉靈芝, 其菌絲體產量顯著地比培養於 PSB 者為高, 但多醣體則以培養於 PSB 者為高在培養基中添加 0.3% 的啤酒酵母, 雖增加了松杉靈芝菌絲體的產量, 卻降低了多醣體的產量但蠔菇卻有不同的結果六含較高濃度蔗糖 ( 碳源 ) 的 PSB 培養基可增加松杉靈芝蠔菇之菌絲體與多醣體產量 ( 表四 ); 較高濃度的 OVB 培養基亦可增加松杉靈芝蠔菇之菌絲體與多醣體產量 ( 表五表六 ) 七 PSB 培養基的起始 ph 值, 影響松杉靈芝及蠔菇的多醣體產量由實驗結果 ( 表七 ) 可知, 較酸性的 PSB 培養基不利於松杉靈芝及蠔菇菌絲多醣體的生成八 OVB 培養基的起始 ph 值, 以 ph4~8 較適於松杉靈芝及蠔菇菌絲體生長由此可推論, 松杉靈芝及蠔菇菌絲體對不同 ph 培養基的適應性大, 但是, 對松杉靈芝而言, OVB 培養基的起始 ph 偏酸性 (ph3~5) 時, 可生成較多的多醣體 ( 表八 ) 此結果相較於 PSB 培養基, 有明顯不同 (ph5~8)( 表七 ), 應再實驗探討九在實驗過程中, 我們觀察到, 培養天數愈久, 培養液的顏色會愈變淡變透明 ( 照片 17), 這似乎表示菌絲體漸漸消耗掉培養基的養分不論是松杉靈芝或蠔菇菌絲體在培養 7~13 天時, 培養液的顏色漸變淡, 多醣體的產量也漸趨向高峰十在進行發酵槽通氣實驗的過程中, 我們觀察到, 通氣的發酵槽中培養液減少了約 200ml, 而且培養液較快變色 ( 照片 18), 這似乎顯示通氣培養較有利於松杉靈芝菌絲多醣體生成十一實驗過程中我們觀察到, 振盪培養的轉速 (rpm) 培養容器大小培養液體積等, 似乎也影響菌絲體的生長, 而這些因素是否也影響多醣體的生成, 應再進一步探討十二因受限於實驗設備與經費不足, 利用本實驗的方法所分離出來的菌絲多醣體, 僅能稱為粗多醣體, 應利用較精密的儀器再進一步純化, 使實驗結果更具參考價值捌結論與建議 9

11 一不同菇類的菌絲體各有其適合的生長溫度, 菌絲體的產量與多醣體的產量, 並不成正相關二菌絲多醣體的生成受培養基種類培養溫度培養基起始 ph 值培養天數及培養容器通氣與否影響三松杉靈芝菌絲多醣體生成的較佳培養條件為 :PSB 培養基起始 ph6~8 溫度 26~30 C 培養 13 天四相較於一般生技產業大多使用靈芝 (Ganoderma lucidium) 的子實體或以特別調配的化學培養基來培養菌絲體, 做為多醣體的來源, 本實驗以材料取得容易配製簡單的天然物或食品做為培養基馬鈴薯蔗糖培養基 (PSB) 阿華田培養基(OVB), 來培養一般常見的菇類菌絲體, 在現今消費者注重環保非化學有機的趨勢與訴求上, 似為一可行的方法五以 PSB 或 OVB 所培養的菌絲體發酵液, 可直接飲用, 似乎無安全上的顧慮, 而且可免除萃取多醣體所浪費的成本, 適合開發為多醣體飲品六除了靈芝 (Ganoderma lucidium) 以外, 其他食藥用菇類, 例如松杉靈芝 (Ganoderma tsugae) 鮑魚菇蠔菇杏鮑菇松茸菇等也都含有豐富的菌絲多醣體, 若能針對其生成菌絲多醣體的培養條件加以研究並應用, 將可開發出更多樣化的多醣體保健美容商品七不同菇類的菌絲體各有其適合生長與生成多醣體的溫度條件, 若能在不同季節使用不同的菌種, 似乎為一節省能源的有效方法, 值得產業上參考利用玖參考資料及其他一王伯徹 ( 民 95) 食藥用菇類的培養與應用 ( 再版 ) 新竹 : 食品工業研究所二王伯徹 (2007) 菇類多樣化的產品市場食品工業 39(5),1~10 三賴茲漢譯 ( 民 91) 生物技術基礎台中 : 富林出版社四水野卓川合正允 ( 賴慶亮譯 )( 民 86) 菇類的化學生化學台北 : 國立編譯館 10

12 五賀駿業 (2003) 靈芝多醣體最佳培養條件及對小白鼠之免疫反應研究國立台灣大學動物學研究所碩士論文, 台北六楊淑惠 (2006) 可食用的美容保養化妝品原料 - 銀耳多醣體之開發農業試驗所技術服務 65,11~14 七張曉莉薛文明李恩慈張瓊妃 (2004) 食藥用真菌產品純度及成份之鑑別高苑學報 10,73~83 11

13 表一不同菇類菌絲體於 PSB 培養基中振盪培養 14 天後菌絲體及多醣體產量菌種乾重松杉靈芝杏鮑菇金針菇鮑魚菇松茸菇白松茸菇蠔菇香菇菌絲體 (mg) 多醣體 (mg) 註培養容器為 250ml 廣口瓶其中含培養基 75ml 培養溫度 18±2 PSB 馬鈴薯蔗糖培養基表二不同菇類菌絲體於 PSB 培養基中振盪培養 8 天後菌絲體及多醣體產量菌種乾重松杉靈芝杏鮑菇金針菇鮑魚菇松茸菇白松茸菇蠔菇香菇菌絲體 (mg) 多醣體 (mg) 註培養容器為 250ml 廣口瓶其中含培養基 75ml 培養溫度 28±2 PSB 馬鈴薯蔗糖培養基 12

14 表三松杉靈芝及蠔菇菌絲體於不同培養基中振盪培養 6 天, 菌絲體及多醣體產量培養基菌種 PSB PSB + yeast OVB OVB + yeast 乾重菌絲體多醣體菌絲體多醣體菌絲體多醣體菌絲體多醣體 (mg) 松杉靈芝蠔菇註 : 培養容器為 125ml 三角瓶, 其中含培養基 75ml PSB: 馬鈴薯蔗糖培養基,OVB: 阿華田培養基,yeast: 啤酒酵母培養溫度 28 表四松杉靈芝菌絲體於含不同濃度蔗糖之 PSB 中振盪培養 12 天後菌絲體及多醣體產量蔗糖 1% 2% 3% 濃度產量菌絲體多醣體菌絲體多醣體菌絲體多醣體乾重 (mg) 註 : 培養容器為 250ml 廣口瓶, 其中含培養基 75ml PSB: 馬鈴薯蔗糖培養基培養溫度 28 13

15 表五松杉靈芝菌絲體於不同濃度 OVB 中振盪培養 10 天後菌絲體及多醣體產量 OVB 1% 2% 3% 濃度產量菌絲體多醣體菌絲體多醣體菌絲體多醣體乾重 (mg) 註 : 培養容器為 250ml 廣口瓶, 其中含培養基 75ml OVB: 阿華田培養基培養溫度 28 表六蠔菇菌絲體於不同濃度 OVB 中振盪培養 10 天後菌絲體及多醣體產量 OVB 1% 2% 3% 濃度產量菌絲體多醣體菌絲體多醣體菌絲體多醣體乾重 (mg) 註 : 培養容器為 250ml 廣口瓶, 其中含培養基 75ml OVB: 阿華田培養基培養溫度 28 14

16 表七松杉靈芝及蠔菇菌絲體於不同 ph 值的 PSB 中振盪培養 14 天後多醣體產量 ph ph3 ph 4 ph 5 ph 6 ph 7 ph 8 ph 9 松杉靈芝蠔菇乾重 (mg) 註培養容器為 250ml 廣口瓶其中含培養基 75ml 培養溫度 28 ph 值為培養基的起始酸鹼值 PSB 馬鈴薯蔗糖培養基表八松杉靈芝菌絲體於不同 ph 值的 OVB 中振盪培養 12 天後菌絲體及多醣體產量 ph 乾重 ph3 ph 4 ph 5 ph 6 ph 7 ph 8 ph 9 菌絲體 (mg) 多醣體 (mg) 註培養容器為 250ml 廣口瓶其中含培養基 75ml 培養溫度 28 ph 值為培養基的起始酸鹼值 OVB 阿華田培養基 15

17 表九蠔菇菌絲體於不同 ph 值的 OVB 中振盪培養 12 天後菌絲體及多醣體產量 ph ph3 ph 4 ph 5 ph 6 ph 7 ph 8 ph 9 乾重菌絲體 (mg) 多醣體 (mg) 註 : 培養容器為 250ml 廣口瓶, 其中含培養基 75ml 培養溫度 28 ph 值為培養基的起始酸鹼值 OVB: 阿華田培養基表十松杉靈芝菌絲體於不同通氣條件下攪拌培養 14 天後菌絲體及多醣體產量通氣不通氣乾重 (mg) 菌絲體多醣體註 : 培養容器為小型發酵槽, 其中含培養基 1000ml 培養溫度 28±2 OVB: 阿華田培養基通氣量 300 c.c/min 16

18 乾重 (mg) 圖 1 松杉靈芝及蠔菇菌絲體於 PSB 中振盪培養不同天數後多醣體產量松杉靈芝蠔菇 7 天 10 天 13 天 19 天 17

19 照片 1 左 : 阿華田右 : 啤酒酵母照片 2 菌絲體純培養, 無菌操作過程 18

20 照片 3 自製的接種器照片 4 振盪培養器 (orbital shaker) 19

21 照片 5 抽氣過濾裝置照片 6 培養基成品 20

22 照片 7 於 PSA 平板上生長的菇類菌絲體上排由左至右分別為松杉靈芝蠔菇鮑魚菇中排由左至右分別為杏鮑菇金針菇香菇下排由左至右分別為白松茸菇松茸菇 21

23 照片 8 於 PSB 中生長的菇類菌絲體左上 : 松茸菇右上 : 白松茸菇左下 : 金針菇右下 : 鮑魚菇 22

24 照片 9 松杉靈芝菌絲多醣體, 在 95% 的酒精中先懸浮 ( 上 ) 而後沉澱 ( 下 ) 23

25 照片 10 上 : 蠔菇菌絲多醣體, 在 95% 的酒精中懸浮沉澱下 : 鮑魚菇菌絲多醣體, 在 95% 的酒精中懸浮沉澱 24

26 照片 11 於不同培養基中生長的松杉靈芝菌絲體左 :PSB+yeast 右 :PSB 照片 12 於不同培養基中生長的松杉靈芝菌絲體左 :OVB+yeast 右 :OVB 25

27 照片 13 於不同培養基中生長的蠔菇菌絲體左 :PSB+yeast 右 :PSB 照片 14 於不同培養基中生長的蠔菇菌絲體左 :OVB+yeast 右 :OVB 26

28 照片 15 於不同 ph 之 OVB 培養基中生長的松杉靈芝菌絲體左 :ph3 中 :ph6 右 :ph9 照片 16 於不同 ph 之 OVB 培養基中生長的蠔菇菌絲體左 :ph3 中 :ph6 右 :ph9 27

29 照片 17 經振盪培養 13 天的松杉靈芝菌絲體 ( 右 ) 照片 18 經攪拌培養 14 天的松杉靈芝菌絲體左 : 不通氣培養右 : 通氣培養 28

30 附錄 1 阿華田營養成分表平均組成單位每 100 公克熱量 Energy 大卡 kcal 444 蛋白質 Protein 公克 g 9.44 脂肪 Fat 公克 g 碳水化合物 Carbohydrate 公克 g 膳食纖維 Dietary Fiber 公克 g 2.32 鈉 Sodium 毫克 mg 鈣 Calcium 毫克 mg 鎂 Magnesium 毫克 mg 磷 Phosphorus 毫克 mg 鐵 Iron 毫克 mg 0.53 碘 Iodine 微克 mcg 3.48 鉀 Potassium 毫克 mg 維生素 A Vitamin A 微克 mcg 維生素 B1 Vitamin B1 毫克 mg 0.35 維生素 B2 Vitamin B2 毫克 mg 0.38 維生素 B6 Vitamin B6 毫克 mg 0.09 維生素 B12 Vitamin B12 微克 mcg 0.97 維生素 C Vitamin C 毫克 mg 0.42 維生素 E Vitamin E 毫克 mg 9.97 菸鹼酸 Niacin 毫克 mg 6.87 葉酸 Folic Acid 微克 mcg 泛酸 Pantothenic Acid 毫克 mg 0.20 膽鹼 Choline 毫克 mg 肌醇 Inositol 毫克 mg

31 附錄 2 啤酒酵母營養成分表毎 100 公克熱量 266kcal 蛋白質 50g 脂肪 6g 碳水化合物 ( 膳食纖維 ) 31g(28g) 鈉 50mg 維生素 B1 45mg 維生素 B2 4.5mg 維生素 B3 3.3mg 維生素 B mcg( 微克 ) 葉酸 2.8mg 菸鹼酸 24mg 泛酸 10mg 鈣 150mg 磷 1300mg 鎂 200mg 鉀 2500mg 膽酸 450mg 硒 10mcg 鉻 10mcg 30

32 評語團隊精神及表達能力均佳 2. 實驗成果, 具產業應用潛力 3. 報告撰寫, 使用的科學單位宜一致例如 : 公克及 g 宜統一

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了類料年利立陸烈利不中華民國第四十八屆中小學科學展覽會作品說明書高職組農業及生物科技科第三名最佳 ( 鄉土 ) 教材獎 091406 黑妞狂癢曲 - 防蚊植物果真防蚊? 學校名稱 : 國立旗山高級農工職業學校作者 : 指導老師 : 職二黃冠林蔡黃敏職二江仲民職二鄭玉英職二莊雅慈關鍵詞 : 防蚊植物香草精油白腹叢蚊了類料年利立陸烈利不年殺類理殺亮了理論類了不類