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- 牟凶 元
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1 Chemical Biology Course 13 细胞信号转导与化学调控 China Pharmaceutical University it School of Pharmacy 1
2 本章目录 一 细胞通讯与信号转导 二 信号转导的主要通路 三 基于信号转导通路的药物设计 2
3 一 细胞通讯与信号转导 高等生物所处的环境无时无刻不在变化, 机体功能上的协调 统一要求有一个完善的细胞间相互识别 相互反应和相互作 用的机制, 这个机制对于生物体的生长发育分化 组织器官 形成 组织维持以及它们各种生理活动协调是必须的 细胞通讯 (cell communication) : 多细胞生物中细胞与细胞间 识别 联络和相互作用的过程, 这个过程是通过各种信号分 子之间的相互作用实现的 3
4 膜表面分子接触通讯 (Contact-dependent signaling) : 蛋白 糖蛋白 糖脂, 直接通讯 细胞间隙连接 (gap junction): 连接蛋白, 直接通讯, 可共享小分子物质 (1500D) 化学信号通讯 (chemical signaling ): 以化学信号为介质, 间接通讯 细胞通讯的方式 4
5 信号转导 信号转导 (signal transduction) : 指细胞外因子通过与受体 ( 膜受体或核受体 ) 结合, 引发细胞内的一系列生物化学反 应以及蛋白间相互作用, 直至细胞生理反应所需基因开始 表达 各种生物学效应形成的过程 5
6 信号转导过程 1955 年,Sutherland,cAMP 第二信使学说, 获 1971 年诺贝尔生理和医学奖 1963 年, cgmp 作为胞内信使的发现 1978 年,Rasmussen,Ca2+ 第二信使学说 1983 年,IP3 和 DG 作为胞内信使的发现 80 年代,Gilman 和 Rodbell,G 蛋白的研究, 获 1994 年诺贝尔生理和医学奖 年代, 酪氨酸蛋白激酶与信号转导的 研究 6
7 化学信号分子 脂溶性 (lipophilic) 与水溶性 (water-soluble) 根据其作用距离范围 内分泌 (endocrine) 系统的化学信号 : 激素 (hormone), 作用距离最远 (m), 膜受体或胞内受体 神经系统的化学信号 : 神经递质 (neural transmitter), 如乙酰胆碱 (acetyl-choline), 作用距离最短 (nm), 膜受体 旁分泌 (paracrine) 系统的化学信号 : 细胞因子, 作用于周围细胞 (μm), 膜受体 自分泌 (autocrine) 的化学信号 : 作用于自身, 仅限于病理条件, 如肿瘤 7
8 化学信号分子 旁分泌 神经系统 细胞因子, 作用于周围细胞 (μm) 内分泌 作用距离最短 (nm) 自分泌 激素 (hormone), 作用距离最远 (m), 膜受体或胞内受体 作用于自身 8
9 信号分子的接收 受体 信息分子的接收分子, 位于细胞表面或细胞内, 化学本质是蛋白质 作用 识别外源信息分子 ( 配体 ligand); 信号转换 特点 高度特异性 ; 高亲和力,Kd:10-8 mol/l; 可饱和性 ; 可逆性 分类 : 细胞表面受体 ( 膜受体 ): 分离子通道受体 G 蛋白偶联受体 单次跨膜受体 细胞内受体 9
10 灭活 : 信号分子须在靶 细胞膜上或在靶细胞内 起作用后被灭活而将信 号消除 信号分子的灭活 内分泌激素还可在肝脏 血液中被降解, 通过氧 化还原 脱氨基 脱羧 基方式被清除 10
11 配体 - 受体相互作用 一般表达为 : k l L+R LR E k 2 L 代表配体,R 代表受体,LR 代表配体 - 受体 复合物, 经过系列连锁反应产生效应 (E),k l k 2 分别为结合与解离常数 11
12 G-protien-coupled receptor,gpc Receptor tyrosinekinase,rtk 膜受体 细胞因子受体超家族丝 / 苏氨酸蛋白激酶型受体家族死亡受体家族 (TNFR,Fas) 离子通道型受体以及黏附分子等 胞内受体 类固醇激素受体家族 甲状腺素受体家族 孤儿受体 12
13 细胞表面受体 (cell-surface receptors) N 型乙酰胆碱受体含钠离子通道, 脑中的 γ- 氨基丁酸 (GABA) 受体情况 如肾上腺素 多巴胺 5 羟色胺 M 型乙酰胆碱 前列腺素及一些多肽激素等的受体 胰岛素 胰岛素样生长因子 上皮生长因子的受体 13
14 离子通道受体 (Ion channel receptors) 14
15 G- 蛋白偶联受体 (G-protein-coupled receptors) Extracellular e1 Binding of ligands -NH2 e2 e3 TM1 TM2 TM3 TM4 TM5 TM6 TM7 i1 i2 Cytoplasmic i3 Location of G -S-S- COOH- 15
16 16
17 G 蛋白作用机制 17
18 酶偶联受体 (Enzyme-linked receptors) 18
19 19
20 胞内受体 (intracellular receptor) 20
21 胞内受体 甾体激素受体 甲状腺受体等 胞内受体多为 DNA 结合蛋白, 存在于细胞质或细胞核中, 能调节基因的转录, 从而控制相应蛋白质的表达 此型受体结合的物质有类固醇激素 甲状腺素等, 这些激素都是脂溶性激素 21
22 二 信号转导通路 1 G- 蛋白偶联受体介导的信号转导通路 2 酶偶联受体介导的信号转导 22
23 1 G- 蛋白偶联受体介导的信号转导通路 1)cAMP 信号转导途径 腺苷酸环化酶 (adenylyl cyclase,ac) 是位于细胞膜上的 G 蛋白效应蛋白之一, 组成 AC 的多肽链具有两个大的疏水区, 即 M1 M2 还有两个大的细胞质区域, 即 C1 C2 AC 催化 ATP 分解形成 camp 作为第二信使在嗅觉上皮细胞可调控离子 通道的通透性 ; 而在绝大多数细胞,cAMP 再进一步特异地活 化 camp 依赖性蛋白激酶 A(PKA PKA) 来调节细胞的新陈代谢 23
24 camp 蛋白激酶信号转导途径 药物设计 : camp 模拟物 PDE 抑制剂 最后一步为蛋白磷酸化 24
25 camp 的作用机理 25
26 依赖 camp 的蛋白激酶 26
27 27
28 28
29 2). DAG IP3 Ca2+- 钙调蛋白激酶途径 这一信号系统是膜受体与其相应的配体分子结合后, 通过膜上的 G 蛋白活化磷脂酶 C(PLC), 催化细胞膜上 的 4,5- 二磷酸酯酰肌醇 (PIP PIP2) 分解为两个重要的细 胞内第二信使 :DAG 和 IP3 29
30 DAG 和 IP3- 蛋白激酶信号转导途径 最后一步为蛋白磷酸化 30
31 31
32 A. DAG 活化蛋白激酶 C(PLC) 在细胞膜上 PLC 水解 PIP 2 生成的产物之一是脂溶性的 DAG 它与 细胞膜结合, 可活化 C 膜中的蛋白激酶 C(PKC) B. 三磷酸肌醇 (IP 3 ) 可以动员细胞内 Ca 2+ 释放 IP 3 是由 PIP 2 水解产生的水溶性产物, 它从细胞膜扩散到细胞 质, 与内质网膜上的 IP 3 受体结合, 动员 Ca 2+ 库中 Ca 2+ 转移到细 胞浆中, 提高游离 Ca 2+ 浓度 各种蛋白激酶的激活使底物蛋白磷酸化, 产生各种生物学变化, 包括基因表达的调节 32
33 33
34 2 酶偶联受体介导的信号转导通路 34
35 3) 受体 - 蛋白激酶信号转导途径 Protein Kinase Protein OH + ATP Protein O P P i Protein Phosphatase H 2 O O O O + ADP A protein kinase transfers the terminal phosphate of ATP to a hydroxyl group on a protein. A protein phosphatase catalyzes removal of the P i by hydrolysis. 35
36 受体酪氨酸蛋白激酶途径 36
37 4) 受体 -cgmp 信号转导途径 鸟苷酸环化酶 (guanylyl l cyclase,gc) 信号转导途径 存在于心血管系统和脑内, 一氧化氮 ( NO 合酶 ) 激活胞 浆可溶性 GC, 增加 cgmp 生成, 再经激活蛋白激酶 G(protein kinase G,PKG) 磷酸化靶蛋白发挥生物学作用 37
38 NO-cGMP- 蛋白激酶信号转导途径 ( 此途径多存在于心血管和脑组织中 ) 心钠素 脑钠素受体 cgmp PDE-5 PDE 5'GMP 最后一步为蛋白磷酸化 NO PKG Ca 2+ 38
39 NO-cGMP- 蛋白激酶信号转导途径 ( 此途径多存在于心血管和脑组织中 ) 心钠素 脑钠素受体 cgmp PDE-5 PDE 5'GMP 最后一步为蛋白磷酸化 NO PKG Ca 2+ 39
40 3 基于信号转导过程的药物设计 Receptor: 一般受体 离子通道受体 第一信使 : 化学信号分子 第二信使 :camp, cgmp, Ca ++, DG 等 药物设计 : 调节第一信使 调节第二信使 调节第三信使 第三信使 :DNA 结合蛋白 40
41 基于调节第一信使的药物设计 主要是针对内源性信号分子和外源性调节物质 内源性信号分子 : 神经递质, 前列腺素, 胰岛素, 激素, 细胞因子, 等等 外源性调节物质 : 信号分子衍生物 信号分子代谢酶抑制剂 神经递质抑制剂 离子转运体抑制剂 受体拮抗剂和激动剂 离子通道开放和拮抗剂 41
42 接受第一信使的受体 G-protien-coupled receptor,gpc Receptor tyrosinekinase, RTK 膜受体 细胞因子受体超家族丝 / 苏氨酸蛋白激酶型受体家族死亡受体家族 (TNFR,Fas), 离子通道型受体以及黏附分子等 类固醇激素受体家族 胞内受体 甲状腺素受体家族 孤儿受体 42
43 Me 3 N OAc HO OH NH 2 N NH 2 HO O N H H O H H OH OH O O HO OH OH N N Cl - N + NH 2 S OH 43
44 基于调节第二信使的药物设计 第二信使 (second messenger) 包括 : 环磷腺苷 (camp) 环磷鸟苷 (cgmp) 1,2- 二酰甘油 (DAG DAG) 和磷酸肌醇 (IP3 IP3) 其他 : 钙离子 廿碳烯酸类 NO 等 44
45 1) 基于 camp 信号转导途径的药物设计 药物设计 : camp 模拟物 PDE 抑制剂 最后一步为蛋白磷酸化 45
46 2) 基于 DAG IP3 信号转导通路的药物设计 46
47 3) 基于 NO-cGMP 信号转导途径的药物设计 H 3 C N O O S N HN O O N CH 3 N N CH 3 PDE-5 抑制剂 cgmp PDE-5 PDE 5'GMP 最后一步为蛋白磷酸化 NO PKG Ca 2+ 47
48 4) 基于受体酪氨酸蛋白激酶信号转导途径的药物设计 最后一步为蛋白磷酸化 48
49 作用于 EGFR 的激酶抑制剂
50 格列卫 : 作用机制 伊马替尼占据了 ATP 在 KIT 激酶区的结合位点 从而阻止了底物磷酸化及信号转导 信号缺失抑制了细胞的增殖和存活 激酶区 P ATP P P P 伊马替尼 表达 Savage and Antman. N Engl J Med. 2002;346:683. Scheijen and Griffin. Oncogene. 2002;21:3314.
51 代表药物 格列卫 : 小分子化合物, 苯氨嘧啶的衍生物 易瑞沙 : 小分子化合物,C 22 H 24 ClFN 4 O 3 特罗凯 : 厄罗替尼 /Tarceva 小分子化合物, C 22 H 23 N 3 O 4 多吉美 : 索拉非尼 / 小分子化合物
52 作用于 VEGFR 的激酶抑制剂 血管生成 (VEGFR 参与 )
53 Ras/MAPK PIk3/Akt Other
54 代表药物 索拉非尼 (Bayer) 肝 肾 甲状腺肿瘤 舒尼替尼 (Pfizer) 胃肠间质瘤 (GIST), 晚期肾细胞癌 (RCC), 不可切除的, 转移性高分化进展期胰腺神经内分泌瘤 (pnet) 帕唑帕尼 (GSK) 晚期肾细胞癌患者
55 基于调节第三信使的药物设计 包括 : 维 A 酸受体和类维 A 酸受体配体的药物设计 过氧化物媒体增值因子活化受体配基的药物设计 维生素 D 受体配体的药物设计 55
56 调节第三信使的药物设计 包括 : 维 A 酸受体和类维 A 酸受体配体的药物设计 过氧化物媒体增值因子活化受体配基的药物设计 维生素 D 受体配体的药物设计 56
1. 细胞概述
第二节细胞通讯与信号传递 1 细胞通讯的一般过程 信号分子的产生本节内容 : 信号分子 细胞的通讯与细胞识别 细胞识别 (Cell recognition) 信号传递受体蛋白 信号传递网络 信号转导 (Signal transduction) 胞内信号 特定基因表达 应答反应 细胞通讯与信号传递引起的反应 酶活性的变化 基因表达的变化 细胞骨架构型 通透性的变化 DNA 合成活性的变化 细胞死亡程序的变化等
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