Microsoft Word 章钢刚-二校 出3414、3417

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1 6 9 Vol. 6 No Journal of Food Safety and Quality Sep., 2015 * 章钢刚, 赖卫华 (, ) 摘要 :,,,,,,, 关键词 : ; ; Research progress of immunological detection methods of foodborne pathogen ZHANG Gang-Gang, LAI Wei-Hua * (National Key Laboratory of Food Science and Technology in Nanchang University, Nanchang , China) ABSTRACT: Foodborne pathogen widely exists and has drawn more and more attention as it can cause human disease even to death. Traditional detection method of foodborne pathogens is very time-consuming and cannot meet the need of rapid detection. Immunological detection methods are convenient and rapid, including enzyme-linked immunosorbent assay, immunochromatography, immunomagnetic beads separation techniques, chemiluminescence immunoassay and latex agglutination assays. In this paper, the principle, application, advantages, and disadvantages of these methods were reviewed. The future development trend of the immunological detection method was prospected. KEY WORDS: foodborne pathogens; immunological method; rapid detection 1 引言,,,, 8~18 h, 18~24 h, 18~48 h, 36~48 h,,,, 基金项目 : (SKLF-ZZB ) (2012-CYH-DW-SP-001) Fund: Supported by the Free Explore Issue of State Key Laboratory of Food Science and Technology of Nanchang University (SKLF-ZZB ), Science and Technology project of Nanchang (2012-CYH-DW-SP-001) * 通讯作者 :,,, talktolaiwh@163.com *Corresponding author: LAI Wei-Hua, Ph.D, Professor, National Key Laboratory of Food Science and Technology in Nanchang University, No.235. Nanjing East Road, Nanchang , China. talktolaiwh@163.com

2 9, : 3415,,, 2 免疫学检验方法进展 2.1 食源性致病菌 沙门氏菌 (Salmonella), 2600, A B C D E [1], [2],,,, CDC 16, 145 [3] 致病性大肠杆菌,,,, 4 : (Enteropathogenic E. coli, EPEC) 6~54% [4], EPEC [5] ; (Enterotoxigenic E. coli, ETEC) [6] ; (Enteroinvasive E.coli, EIEC) [7] ; (Enterohemorrhagic E.coli, EHEC) 2011, EHEC O157, 0~4 [8] 志贺氏菌 (Shigella), (Shigella dysenteriae) (Shigella flexneri) (Shigella sonnei) (Shigella boydii) 4 [9],,,, [10] 副溶血性弧菌 (Vibrio parahemolyticus) 和霍乱弧菌 (Vibrio cholerae), [11] 1000 MPN/g [12], [13] [14] 蜡样芽孢杆菌 (Bacillus cereus), [15] 2003, 4.0%, 4,, [16] 肉毒梭状芽孢杆菌 (Clostridium botulinum),,,,,, 0.1 μg 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus), 10-15% NaCl, [17], 2000, [18] 阪崎肠杆菌 (Cronobacter),, [19] 2007,,, [20] 1,, 40%~80% [21] 空肠弯曲杆菌 (Campylobacter jejuni) - [22] 单核增生李斯特菌 (Listeria monocytogenes),, ( ), [23], [24,25] 2.2 酶联免疫吸附法 (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA), ELISA,,, ELISA, ( ), [26],,, C1359, ELISA A B C D E,, cfu/ml,,

3 [27], InternalinA(InlA), ELISA cfu/ml Bang [28], 10 6 cfu/ml, O157, 2.3 免疫层析法 (immunochromatography, IC) 胶体金免疫层析技术 (gold immunochromatography assay, GICA), GICA, ( ),,, [29] ( CMCC NCTC CMCC ATCC ; PBS ) (, 10 5 cfu/ml; 10 6 cfu/ml) ( 6 ) [30] 16.8 μg/ml ph 8.0, PEG 20000,, T C O157:H7 ( ), O157:H7, 10 4 cfu/ml, Chalinan [31] O139, 10 4 cfu/ml,, 1 cfu/ml 碳纳米颗粒免疫层析 (carbon nanoparticles immunochromatography assay), GICA,,, ( NC ), [32,33] Martina [34], 16S rrna,, ( ), (NC) (T ), (C ) S rdna- -, 8 ng(pcr ) 荧光微球免疫层析技术 (fluorescent microsphere immunochromatographic technique),,, [35] O157:H7 NC T C O157:H7, 1.5 mg/ml, 0.75 μl/cm; O157:H7, 100 μg/mg cfu/ml, cfu/ml, ( ) Il-Hoon [36] O157:H7, 5 cfu/ml Xu [37] PEB1 T, C,, 10 6 cfu/ml 量子点免疫层析技术 (quantum dots immunochromatographic technique) (quantum dots, QD) ( 2~6 nm),, Ⅱ-VI Ⅲ-V,, [38] Chen [39] DNA, PCR DNA, QDs, cfu/ml cfu/g Bruno [40] O157, 365 nm,,

4 9, : cfu/ml 600 cfu/ml 2.4 免疫磁珠分离技术 (immunomagnetic beads separation techniques, IMS), Xiong [41] O157:H7, ( O157:H7) 98%( 0.05 mg, 10~10 6 ), 2%( 23.6%), ( 94.4% 99.8%) [42], : 0.4 mg, 50 μg/mg( ), 10 2 ~10 6 cfu/ml, 65%~82% Lin [43] 1.35T 90 T/m, 30 nm 180 nm O157, 10 2 ~10 5 cfu/ml 90%, IMS, Cui [44] O157:H7, O157:H7, cfu/ml 2.5 化学发光免疫分析法 (chemiluminescence immuno assay, CLIA) ( ),,,, 3 [45] [46], (HRP) IgG,, H 2 O 2, (Salmonella choleraesuis) (Salmonella typhimurium) (Salmonella enteritidis), cfu/ml, 97.33% Shiro [47], ( Q1, )- -,, 10 3 CFU/mL Park [48],, O157, -,, H 2 O 2, ~ cfu/ml 2.6 乳胶凝集法 (latex agglutination assays, LTA) ( ),, Medina [49] LTA (O26, O45, O103, O111, O121, O145) IgG- ( ), (O26 O103 O145 ) Fusun [50] meca, meca fema femb femx 3 结论, ;,,,, 参考文献 [1] Hoerner R, Feldpausch J, Gray RL, et al. Reveal Salmonella 2.0 Test for detection of Salmonella spp. in foods and environmental samples [J]. J AOAC Int, 2011, 94(5): [2],, 冮,. inva PCR [J]., 2013, 34(12): Du XW, Li Y, Gang J, et al. Establishment of real-time fluorescent PCR detection method of inva gene in Salmonella [J]. Sci Technol Food Ind, 2013, 34(12): [3] Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Multistate outbreaks of Salmonella infections associated with raw tomatoes eaten in restaurants-united States, [J]. MMWR, 2007, 56(35): [4],,. [N]., 2014, 11(12): Liu WD, Li MY, Xu CB. Research progress on epidemiology molecular mechanisms of the intestinal pathogenic Escherichia coli [N]. China Medical Herald, 2014, 11(12): [5] Cedric NB, Robert KS, Fernando RP, et al. Interaction of enteroaggregative Escherichia coli with salad leaves [J]. Env Microbiol Rep, 2009, 1(4): [6] Fernando RP, Rezwanul W, Christina SF, et al. Serine protease

5 autotransporters from Shigella flexneri and pathogenic Escherichia coli target a broad range of leukocyte glycoproteins [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2011, 108(31): [7] Justin M, Brooke W, Yoonjie KC, et al. The heat-resistant agglutinin family includes a novel adhesin from enteroaggregative Escherichia coli Strain 60A [J]. J Bacteriol, 2011, 193(18): [8] Koushik R, Rita K, Scott RB, et al. Adhesin degradation accelerates delivery of heat-labile toxin by enterotoxigenic Escherichia coli [J]. J Bio Chem, 2011, 286(34): [9],,. [J]., 2011, 44(9): Kang JJ, Yang YR, Liang HD. Progress in Research of Pathogenesis of Shigellosis [J]. Sci Agric Sin, 2011, 44(9): [10] Jin Q, Yuan Z, Xu J, et al. Genome sequence of Shigella flexneri 2a: insights into pathogenicity through comparison with genomes of Escherichia coli K12 and O157 [J]. Nucleic Acids Res, 2002, 30(20): [11] Angelo DP, Jessica LNo, John CB, et al. Seasonal abundance of total and pathogenic Vibrio parahaemolyticus in Alabama oysters [J]. Appl Environ Microbiol, 2003, 69: [12] GB [S]. GB Limitation of pathogenic bacteria in food [S]. [13],,. [J]., 2010, 31(S1): Zhang PP, Li J, Yu Y. Prevalence of Vibrio cholerae in aquatic products and related enviroment in Zhoushan, Zhejiang province [J]. Progress Vet Med, 2010, 31(S1): [14],. [J]., 2011, 6(2): Shen XT, Zhao XT. Advances in detection methods for Vibrio choleraein fection [J]. J Microbes Infect, 2011, 6(2): [15],,,. [J]., 2010(5): 1 4. Zhang WW, Lu F, Zhang JL, et al. Research progress of Bacillus cereus in food [J]. China Brewing, 2010(5): 1 4. [16] Schoeni JL, Wong AC. Bacillus cereus food poisoning and its toxins [J]. J Food Protect, 2005, 68(3): [17],,,. [J],, 2010, (4): Chen J, Zang HP, Zhu XG, et al. Morphological observation and pilot study on growth traits of Staphylococcus aureus under High salt Condition [J]. J Yunnan Agric Univ, 2010, (4): [18]. [J]., 2004, 14(4): Li Y. Advancement in researches of Staphylococcus aureus and its enterotoxin [J]. Chin J Health Lab Technol, 2004, 14(4): [19]. [J]., 2011, 1(17): Xiong ZL. Research progress of detection techniques of Enterobacter sakazaki [J]. China Med Pharmacy, 2011, 1(17): [20],. [J]., 2009, 20(4): Liang Y, Wang HJ. Research prograssing of Enterobacter sakazakii [J]. Chin J Microecol, 2009, 20(4): [21],,, [J]., 2014, 24(15): Zhou SJ, Deng XL, Zhu HM, et al. Survey of Enterobacter sakazakii pollution in infant food in Guangdong province [J]. Chin J Health Lab Technol, 2014, 24(15): [22] McCarthy N, Giesecke J. Incidence of Guillain-Barré syndrome following infection with Campylobacter jejuni [J]. Am J Epidemiol, 2001, 153(6): [23]. LAMP [D]. :, Xu YM. Establishment of loop-mediated isothermal amplification(lamp) methods for detection of Listeria monocytogenes and Yersinia enterocolitica [D]. Changchun: Jiling University, [24],,.. [C]., Li Y, Wei JZ, Wang GJ. Listeria monocytogenes and food safety. Theory and practice of food safety[c]. Anhui Food Safety Forum, [25],,,. [J]., 2009, 36(15): Liu Y, Wang YL, Tao Y, et al. Analysis for Listeria monocytogenes contamination statu in foods in Maanshan [J]. Mod Pre Med, 2009, 36(15): [26],,,. [J]., 2014(10): Wu YH, Niu RJ, Lai WH, et al. Detection of Salmonella by double antibody sandwich ELISA [J]. Sci Technol Food Ind, 2014(10): [27],,,. ELISA [J]., 2010, 31(24): Duan X, Huang X, Huang LF, et al. Detection of Listeria monocytogenes in food by sandwich ELISA [J]. Food Sci, 2010, 31(24): [28] Bang J, Shukla S, Kim YH, et al. Development of indirect competitive ELISA for the detection of Salmonella typhimurium [J]. Rom Biotech Lett, 2012, 17(2): [29],,,. [J],, 2014, 35(22): Xia SQ, Xu CL, Liu DF, et al. Preparation and optimization of colloidal gold strip for simultaneously detecting five typical Salmonella in foods [J]. Food Sci, 2014, 35(22): [30],,,. O157:H7 [J]., 2010, 31(24): Huang LF, Duan X, Chen Y, et al. Preparation of colloidal gold strip for the detection of Escherichia coli O157:H7[J]. Food Sci, 2010, 31(24): [31] Chalinan P, Parin C, Siwaporn L, et al. Development and evaluation of a highly sensitive immunochromatographic strip test using gold nanoparticle for direct detection of Vibrio cholerae O139 in seafoodsamples [J]. Biosens Bioelectron, 2013, 42(15): [32] Maria L, Jan C. Quantitative detection in the attomole range for immunochromatographic tests by means of a flatbed scanner [J], Anal Biochem, 2001, 293(2): [33] Noguera P, Posthuma-Trumpie GA, Van Tui M, et al. Carbon

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