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桶蚁陆
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1 热带海洋学报 JOURNAL OF TROPICAL OCEANOGRAPHY 海洋环境保护 doi: /j.issn 年第 32 卷第 3 期 : 不同环境条件下斑节对虾家系生长和免疫酶活性差异杨其彬 1, 王专伟 1,2, 周发林 1, 温为庚 1, 苏天凤 1, 邱丽华 1, 黄建华 1 1. 中国水产科学研究院南海水产研究所, 农业部南海渔业资源开发利用重点试验室, 广东广州 ; 2. 上海海洋大学, 上海摘要 : 研究了正常生长低温胁迫和高氨氮胁迫下 10 个斑节对虾家系生长特性及超氧化物歧化酶 (Superoxide Dismutase, SOD) 酸性磷酸酶(Acid Phosphatase, ACP) 酚氧化酶(Phenoloxidase, PO)3 种免疫酶活性的变化生长试验结果表明, 10 个家系特定生长率 (SGR) 呈现明显差异, 家系 077 与家系 017 和 661 的 ACP 活性存在极显著差异, 家系 4612 与家系 017 的 SOD 活性存在极显著性差异, 而其他家系的免疫酶活性无显著差异斑节对虾在 48h 低温胁迫下, ACP 和 SOD 活性先升高后降低, PO 活性则不断降低, 而对照组的 3 种酶活性呈无规律轻微变化斑节对虾在 48h 高氨氮胁迫下, ACP 活性不断升高, SOD 在 0 8h 活性上升, 8 48h 活性快速降低, PO 活性不断下降, 而对照组的 3 种酶活性呈无规律轻微变化 ; 一些家系间的 3 种免疫酶活性存在显著性差异, 其中家系 4612 的 3 种酶活性均高于其他家系 3 个试验中, 家系的特定生长率与免疫酶活性均呈负相关关键词 : 斑节对虾 ; 家系 ; 氨氮 ; 低温 ; 免疫酶中图分类号 : S ; P735 文献标识码 : A 文章编号 : (2013) Analysis on growth and characteristic of immune enzymes activity of Penaeus monodon family under environment-stress YANG Qi-bin 1, WANG Zhuan-wei 1,2, ZHOU Fa-lin 1, WEN Wei-geng 1, SU Tian-feng 1, QIU Li-hua 1, HUANG Jian-hua 1 1. South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Key Laboratory of South China Sea Fishery Resources Utilization, Ministry of Agriculture, Guangzhou , China; 2. Shanghai Ocean University, Shanghai , China Abstract: The response of Superoxide Dismutase (SOD), Acid Phosphatase (ACP), and Phenoloxidase (PO) in Penaeus monodon families to normal growth, low temperature stress and high ammonia stress was studied under laboratory condition. Growth in terms of specific growth rate (SGR) was significant difference among the selected families (p<0.05). The activities of ACP were significant difference among family 077, 017 and 661. The activities of SOD were significant difference between family 4612 and family 017. When the rearing temperature decreased from 27 to 20, the activities of ACP and SOD first increased and then decreased, the activities of PO reduced prolonged according to the low temperature stress, and the minor changes of control trial were not regular. Under the high ammonia stress, the activities of ACP increased prolonged, the activities of SOD increased in 0 8 h, then rapidly decreased in 8 48 h, the activities of PO reduced in 0 48 h, and the minor changes of control trial were not regular. The activities of immune enzymes of some families were significant differences, and three immune enzymes activities of family 4612 higher than that of other families under the high ammonia stress. A negative correlation was found between the specific growth rate and the activities of ACP, SOD and PO of ten families in three trials. Key words: Penaeus monodon; family; low temperature; ammonia; immunity enzymes activity 收稿日期 : ; 修订日期 : 卢冰殷波编辑基金项目 : 国家高技术研究发展 ( 863 ) 计划项目 (2012AA10A409-02); 广东省科技计划项目 (2009B ); 广东省自然科学基金项目 ( ); 广东省海洋渔业推广专项 (A201101B03 A201201C01); 海南省重点科技计划项目 (ZDXM ) 作者简介 : 杨其彬 (1972 ), 男, 广东省高州市人, 助理研究员, 主要从事水产动物繁育与遗传育种研究 yangqibin1208@163.com 通信作者 : 黄建华 hjh210440@sina.com.cn

2 杨其彬等 : 不同环境条件下斑节对虾家系生长和免疫酶活性差异 79 在对虾养殖过程中, 养殖环境中不良水质因子 ( 如异常的温度盐度氨氮含量 ph 值亚硝酸盐等 ) 对海水养殖动物的生长和抗病力以及病原微生物的致病力影响均十分显著温度是重要的影响因素之一, 它可以直接影响对虾的新陈代谢脱壳生长率耗氧量存活率等, 同时可通过影响盐度微藻生长等环境因素间接地影响对虾的生长 [1] ; 此外, 温度显著影响对虾血细胞密度 [2-3] [4] 吞噬活性 [5] 和体液酚氧化酶活性等指标, 从而对对虾的抗病力产生影响氨氮是对虾养殖过程中重要的胁迫因子, 主要由投喂的饲料对虾粪便和一些有机肥水肥料的氨化作用而产生的水体氨氮指的是非离子氨和离子氨的总和, 受水体 ph 和温度的影响 [6-8] 非离子氨毒性很大, 离子氨主要在高浓度下才能表现出毒性水体氨氮能影响对虾的一系列指标, 其中包括生长速度脱皮血蓝蛋白含量和渗透压等高氨氮环境能增加对虾的耗氧量, 降低非特异性免疫酶的活性 [6,9], 从而影响对虾的抗病力目前开展的对虾养殖水质环境方面的研究工作, 主要是针对有关水体理化因子包括温度 [2-5] 盐度 [10-11] ph 值 [12-14] [6-9] 氨氮及亚硝酸盐含量等的变化对养殖对虾生长存活摄食及非特异性免疫因子等方面影响的研究, 将水质环境作为选育评价指标的研究工作较少 [15] 本研究目的是通过比较各家系高氨氮和低温胁迫下的免疫酶活性变化, 筛选抗逆性强的家系进行保种和传代, 通过连续选育提高家系内斑节对虾抵抗不良环境的能力, 为培育斑节对虾抗逆品系奠定基础 1 材料与方法 1.1 试验家系构建试验在南海水产研究所三亚热带水产研究开发中心进行试验家系的建立与苗种培育方法参照杨其 [16] [17] 彬和黄忠等人的方法以 1 尾雌虾对 1 尾雄虾, 采用人工授精技术建立全同胞家系 10 个, 编号为 : 每个家系 3 个重复, 幼体单独培育至仔虾 1.2 生长试验生长试验在长方形水泥池中进行, 用围网将水泥池隔成水流互通大小相同的水体 (100cm 120cm 80cm) 每个家系苗种培育到仔虾 15d 后, 分别取 250 尾放于上述围隔中, 在近似相同的环境下, 标粗生长 1 个月挑选大小均匀 ( 体重 0.36±0.01g) 活力旺盛的幼虾置于围隔中进行生长试验 : 设三个平行组, 每组 30 尾, 每天投喂 3 次 ( 时间分别为 8: 00 16: 00 和 22: 00), 日投饵量为虾体重的 6% 8%, 并根据天气和摄食情况适当调节投喂量试验所用饲料为湛江粤海牌斑节对虾 1 号料, 养殖用水经沉淀后砂滤, 每天换水 50%, 清污一次, 养殖周期 30d 试验期间, 以室内蓄水的方式控制水温 27 30, 盐度 30 32, ph , 溶氧 mg L 1 试验结束时测量每尾虾的体长体重并计算成活率 1.3 低温胁迫试验低温胁迫试验在体积为 500L 的玻璃钢桶中进行, 将养殖在正常水温 (27 ) 下的斑节对虾家系移至水温 20 的试验桶 10 个家系每个家系设 3 个平行, 每个平行 30 尾 ( 体重 3.96±0.82g), 在试验前及试验 48h 后每个家系取 6 尾虾, 从第二腹节用 1mL 无菌注射器采集血液 ; 另设 3 个平行的低温胁迫组, 和 3 个平行的正常水温对照组, 每个平行 30 尾斑节对虾, 在和 48h 分别取 4 尾虾, 从第二腹节用 1mL 无菌注射器采集血液血液采集后 4 保存过夜, 第二天 5000r min 1 离心 20min, 取上层血清 20 冷冻保存用于免疫酶活性分析试验期间, 盐度 30 32, ph , 溶氧 mg L 高氨氮胁迫试验高氨氮胁迫试验在体积为 500L 的玻璃钢桶中进行, 氨氮浓度设为 32mg L 1, 氨氮浓度用氯化铵 ( 分析纯 ) 来调节, 试验桶氨氮浓度每隔 6h 用次溴酸盐法测定一次, 并及时调节试验用水的氨氮浓度设置 3 个高氨氮胁迫试验组和 3 个正常养殖环境的对照组, 每个平行 30 尾斑节对虾 ( 体重 3.96±0.82g), 在和 48h 分别取 4 尾虾, 从第二腹节用 1mL 无菌注射器采集血液, 用于分析高氨氮胁迫下不同时间段斑节对虾血液免疫酶活性变化另外, 为了测试家系在高氨氮胁迫下的免疫反应, 设 3 个平行, 每个家系每个平行 30 尾虾, 试验持续 48h, 在试验 48h 后每个家系取 6 尾虾, 从第二腹节用 1mL 无菌注射器采集血液血液采集后 4 保存过夜, 第二天离心取血清后进行免疫酶活性分析试验期间, 水温 27 30, 盐度 30 32, ph , 溶氧 mg L 免疫酶活性检测酚氧化酶 (Phenoloxidase, PO) 活性检测以左旋多巴胺 (L-dopa) 为底物, 采用改进的

3 80 热带海洋学报 Vol. 32, No. 3 / May, 2013 Ashida 方法 [10], 按以下步骤进行测定 : 1) 配制 0.01mol L 1 的 L-dopa 溶液 50mL [L-dopa g, 双蒸馏水 (ddh 2 O)50mL] 和 0.1mol L 1 ph 6.0 的磷酸钾盐缓冲液 (1mol L 1 的 K 2 HPO mL, 1mol L 1 的 KH 2 PO mL, 稀释至 1L); 2) 在 96 孔酶标板中, 每孔加 0.1mol L 1 ph 6.0 的磷酸钾盐缓冲液 200μL; 3) 每孔再加入 10μL 血清和 10μL 0.01mol L 1 的 L-dopa, 室温下混匀 ; 4) 置于酶标仪中, 室温 28 左右, 固定吸收波长 490nm, 每隔 2min 测量 1 次, 连续测量 10 次, 测其光密度值 (optical density, OD); 5) 以 OD 490 对反应时间作图, 以试验条件下每分钟 OD 值增加定义为一个酶活性单位 (U ml 1 ) 酸性磷酸酶 (Acid Phosphatase, ACP) 活性检测参照南京建成生物工程研究所 ACP 试剂盒说明书进行操作, 采用磷酸苯二钠法测定 100mL 血清在 37 条件下与基质作用 30min 产生 1mg 酚为 1 个金氏单位 (U ml 1 ) 超氧化物歧化酶 (Superoxide Dismutase, SOD) 活性检测参照南京建成生物工程研究所的 SOD 试剂盒说明书进行操作, 采用黄嘌呤氧化酶法测定每毫升反应液中 SOD 抑制率达 50% 时所对应的 SOD 量为一个 SOD 活性单位 (U ml 1 ) 1.6 数据处理用 SPSS16.0 对家系特定生长率 (Specific Growth Rate, SGR) 和 3 种免疫酶的活性进行单因素方差分析, 并做 Ducan 多重比较, 结果以平均数 ± 标准差来表示特定生长率 (%)=100 (ln 终末重 -ln 初始重 )/ 生长天数 2 结果 2.1 家系的生长比较经 30d 生长试验, 10 个家系特定生长率出现了明显的差别 ( 图 1) 部分家系间出现极显著差异 (p<0.01) 家系 3941 生长速度较快, 除与家系 370 没有极显著差异外, 与其他 8 个家系出现极显著差异 (p<0.01); 家系 077 和家系 4822 生长速度较慢, 除与家系 4612 没有极显著差异外, 与其他 7 个家系均有极显著差异 (p<0.01) 图 1 家系 30d 平均特定生长率 Fig. 1 The mean specific growth rates of Penaeus monodon family in 30 days. Different letter are significantly different p< 家系的特定生长率与免疫酶活性关系在正常养殖环境下, 10 个家系中仅 077 与 017 和 661 的 ACP 活性有极显著差异 (p<0.01), 仅 4612 和 017 的 SOD 活性存在极显著差异 10 个家系的 PO 活性没有极显著性差异, 家系 017 的 PO 酶活性最低 ( 表 1) 表 1 10 个斑节对虾家系特定生长率和 3 种酶活性比较 Tab. 1 Comparison of special growth rate and three kinds of immunity enzymes activities of among different P. monodon families 家系编号特定生长率 /% ACP/(U ml 1 ) SOD/(U ml 1 ) PO/(U ml 1 ) ±0.34 BC 5.34±0.13 Bc ±9.14 Bb 4.59±0.25 Ac ±0.51 E 5.67±0.29 Aa ±2.59 ABa 4.99±0.17 Aab ±0.15 C 5.41±0.09 ABbc ±2.7 ABab 4.66±0.05 Abc ±0.29 AB 5.63±0.27 ABab ±4.17 ABab 4.85±0.13 Aabc ±0.14 BC 5.31±0.07 Bc ±4.46 ABab 4.77±0.07 Aabc ±0.37 A 5.40±0.11 ABbc ±8.51 ABb 4.67±0.15 Abc ±0.31 CD 5.51±0.06 ABabc ±8.71 ABab 4.66±0.11 Abc ±0.31 DE 5.63±0.17 ABab ±3.07 Aa 5.03±0.18 Aa ±0.16 CD 5.45±0.13 ABabc ±5.49 ABab 4.76±0.14 Aabc ±0.30 E 5.60±0.16 ABab ±10.22 ABa 4.68±0.35 Abc 注 : 同列数据中不同英文小写字母表示在 p<0.05 水平上的差异显著性, 不同英文大写字母表示在 p<0.01 水平上的差异显著性

4 81 杨其彬等: 不同环境条件下斑节对虾家系生长和免疫酶活性差异对家系特定生长率与 ACP SOD 和 PO 酶活性随低温胁迫时间延长, 试验组斑节对虾的 PO 进行相关性分析发现, 特定生长率与 3 种酶的酶活活性持续下降, 48h 时比 0h 时下降了 63.22% 对照性均成负相关其中特定生长率与 ACP 活性弱相关组斑节对虾的 PO 活性 48h 内变化不明显(图 4) (p<0.05), 相关系数为与 SOD 活性中等相关 (p<0.01), 相关系数为与 PO 活性不相关 (p<0.01), 相关系数为低温胁迫下斑节对虾与家系的免疫酶活性变化特征当水温降低到 20, 低温胁迫试验组斑节对虾的 ACP 活性在 6h 时略微升高, 6 48h 酶活性下降, 下降趋势逐渐减弱, 低温胁迫 48h 时斑节对虾的 ACP 活性与 0h 相比下降了 20.36% 对照组斑节对虾的 ACP 活性 48h 内也有轻微变化, 但其变化没有规律性(图 2) 图4 低温胁迫下斑节对虾血液 PO 活性 0 48h 变化规律 Fig. 4 Changes of PO activities of P. monodon under low temperature stress in 48 hours 10 个家系低温胁迫 48h 后, 家系间血液免疫酶活性出现较大差异, 部分家系间出现极显著差异 (p<0.01) 家系和 4822 与家系之间 ACP 活性存在极显著差异, 差异最大为(1.56±0.32)U ml 1, 相比于正常养殖情况下差异增大 333.3%(图 5) 家系 017 和 3941 与其他 8 个家系 SOD 活性呈现极显著差异(p<0.01), 差异最图2 低温胁迫下斑节对虾血液 ACP 活性 0 48h 变化规律 Fig. 2 Changes of ACP activities of P. monodon under low temperature stress in 48 hours 低温胁迫试验组斑节对虾的 SOD 活性在 0 12h 缓慢升高, 12h 时比 0h 的 SOD 活性升高了 10.04%; 12 48h 迅速下降, 48h 时的 SOD 活性相比 0h 时下降了 13.93% 对照组斑节对虾的SOD 活性48h 内变化不大(图大为(62.09±22.51)U ml 1, 相比于正常养殖情况下差异增大 740.2%(图 6) 家系与家系和 3941 的 PO 活性存在极显著差异, 差异最大为(0.84±0.55)U ml 1, 相比于正常养殖情况下差异增大 90.9%(图 7) 比较各家系在正常养殖情况下 ACP SOD PO 3 种酶活性大小及各家系的特定生长率 (表 1)和 3) 图5 图3 低温胁迫下斑节对虾血液 SOD 活性 0 48h 变化规律 Fig. 3 Changes of SOD activities of P. monodon under low temperature stress in 48 hours 10 个家系低温胁迫 48 h 后平均 ACP 活性 Fig. 5 The mean ACP activities of 10 family groups under low temperature stress 48 hours. Different letter are

5 82 热带海洋学报 Vol. 32, No. 3 / May, ) 图6 10 个家系低温胁迫 48h 后平均 SOD 活性 Fig. 6 The mean SOD activities of 10 family groups under low temperature stress 48 hours. Different letter are 图7 10 个家系低温胁迫 48h 后平均 PO 活性 Fig. 7 The mean PO activities of 10 family groups under low temperature stress 48 hours. Different letter are 图8 高氨氮胁迫下斑节对虾血液 ACP 活性 0 48 小时变化规律 Fig. 8 Changes of ACP activities of P. monodon under high ammonia-n stresses in 48 hours 图9 高氨氮胁迫下斑节对虾血液 SOD 活性 0 48h 变化规律 Fig. 9 Changes of SOD activities of P. monodon under high ammonia-n stresses in 48 hours. 低温胁迫 48h 后 3 种酶的活性(图 5 7)发现, 家系的特定生长率与低温胁迫下各家系的免疫酶活性也呈负相关, 相关系数分别为 , 与正常养殖环境下相比, 相关性增大 2.4 高氨氮胁迫下斑节对虾及家系免疫酶变化特征高氨氮胁迫开始后, 试验组斑节对虾的 ACP 活性在 0 48h 随时间延长逐渐升高, 48h 时 ACP 活性上升 59.80% 对照组 48h 内斑节对虾的 ACP 活性轻微变化, 无规律性, 且低于试验组(图 8) 试验组斑节对虾的 SOD 活性在 0 6h 迅速升高, 6h 时比 0h 图 10 时升高 21.26%, 6 48h 开始迅速下降, 48h 时比 0h 规律时下降 18.5% 对照组斑节对虾的 SOD 活性变化不 Fig. 10 Changes of PO activities of P. monodon under high ammonia-n stresses in 48 hours 明显, 平均 SOD 活性高于试验组(图 9) 试验组斑高氨氮胁迫下斑节对虾血液 PO 活性 0 48h 变化节对虾的 PO 活性随高氨氮胁迫时间的延长, 酶活高氨氮胁迫 48h 后, 10 个家系中家系和性逐渐下降, 48h 时下降 17.06% 对照组斑节对虾的家系 4822 的 ACP 活性没有极显著差异, 与其他 7 PO 酶活性 48h 内变化不大, PO 活性高于试验组(图个家系均呈现极显著差异(p<0.01), 最大差异范围

6 杨其彬等 : 不同环境条件下斑节对虾家系生长和免疫酶活性差异 83 在 (3.45±1.05)U ml 1, 相比正常养殖环境中的, 差异增大 858.3%( 图 11);10 个家系的 SOD 活性均出现明显下降, 4612 与呈现极显著差异 (p<0.01), 最大差异为 (36.42±8.03)U ml 1, 家系间差异相比正常养殖环境增大 392.8%( 图 12);10 个家系的 PO 活性也出现明显下降, 4612 与出现极显著差异 (p<0.01), 差异最大范围在 (2.46±0.57) U ml 1, 家系间 PO 活性差异相比正常养殖环境增大 459.1%( 图 13) 比较各家系正常养殖情况下 ACP SOD PO 3 种酶活性大小及各家系的特定生长率 ( 表 1) 和高氨氮胁迫 48h 后 3 种酶的活性 ( 图 8 10) 发现, 特定生长率与高氨氮胁迫下各家系的免疫酶活性也呈负相关, 相关系数分别为 : , 与正常养殖环境下相比, 特定成长率与 ACP 相关性降低, 与 SOD 和 PO 的相关性增大图个家系高氨氮胁迫 48 h 后平均 ACP 活性 Fig. 11 The mean ACP activities of 10 family groups under high ammonia-n stresses 48 hours. Different letter are 图个家系高氨氮胁迫 48 h 后平均 SOD 活性 Fig. 12 The mean SOD activities of 10 family groups under high ammonia-n stresses 48 hours. Different letter are 图个家系高氨氮胁迫 48 h 后平均 PO 活性 Fig. 13 The mean PO activities of 10 family groups under high ammonia-n stresses 48 hours. Different letter are 3 讨论 3.1 斑节对虾家系的生长比较对虾生长速度受环境因素和遗传因素两方面的影响 Hetzel [18] Goyard [19] Finley [20] 和 Lester [21] 等人分别对日本对虾 (Penaeus japonicus) 红额角对虾 (Penaeus stylirostris) 美洲鳌龙虾(Homarus amerucanus) 和凡纳滨对虾 (Litopenaeus vannamei) 的生长性状现实遗传力进行了研究, 证明了生长性状 [17] 的可遗传性黄忠等研究发现在不同养殖条件下, 不同斑节对虾的家系间成活率增重率和饲料系数 [22] 差异显著孙苗苗等研究表明在相同养殖条件下, 13 个斑节对虾全同胞家系和半同胞家系的生长与抗氨氮特性存在显著差异, 并存在母体效应, 认为这种差异主要由遗传因素决定本试验在基本相同条件下对 10 个家系进行生长测试, 结果表明家系生长速度显著高于 , 说明通过家系选育的方法选育斑节对虾快速生长品系的方法具有可行性 3.2 低温胁迫下免疫酶特征当试验温度由 27 降到 20 后, 试验组斑节对 [23] 虾的 SOD 活性先上升后明显下降, 这与周鲜娇等 [24] 和孙金辉等的结果相一致试验组 48h 后斑节对虾的 ACP 活性和 PO 活性相对于正常养殖状态有显 [24] [25] 著下降, 这一结果与孙金辉等和赵丙辰等研究结果相同当水温降低时, 短时间内刺激对虾产生应激反应, SOD ACP 活性分别在 12h 和 6h 内上升, 可以认为是对虾的一种自我保护反应而 PO 来自于酚氧化物酶原激活系统, 仅当异物入侵时, 会刺激血细胞释放 PO, 而单纯的温度急降导致对虾机

7 84 热带海洋学报 Vol. 32, No. 3 / May, 2013 体活力变差, 酚氧化物酶原激活系统的功能随温度而降低, 不能诱发 PO 的大量释放因此, 低温刺激 48h 后, 斑节对虾的 ACP SOD PO 3 种酶活性均大幅降低, 从而导致机体免疫力降低代谢紊乱, 使对虾易于患病 [26] 3.3 高氨氮胁迫与免疫酶在高氨氮胁迫下, 斑节对虾 ACP 活性明显上升, [27] SOD 和 PO 活性下降, 这与哈承旭等研究氨氮对中国对虾 (Fenneropenaeus chinensis) 的影响时结果相似, [28] 也与王明等研究氨态氮对罗氏沼虾 (Macrobrachium rosenbergii) 免疫酶活性的结果相类 [29] [6] 似其中 PO 活性的变化还与林林和孙舰军报道的有机污染和氨态氮对中国对虾酚氧化酶活性的降低作用基本一致 ACP 活性升高, 可能是由于斑节对虾高氨氮中毒, 部分血细胞破裂, 溶酶体酶解体导致的一种病理反应 [27], 高氨氮胁迫下 SOD 在 6h 内明显升高可能是一种抵御恶劣环境的应激行为, 但由于氨氮浓度过高, 超出了斑节对虾的耐受范围, 故 48h [28] SOD 酶活性明显下降, 这一结果也与孙舰军相类似有报道称低氨氮浓度 ( mg L 1 ) 可以短时间刺激 PO 活性的升高 [30] 3.4 斑节对虾家系的生长性状与免疫酶活性关系家系生长试验后的特定生长率和 3 种免疫酶活性相关性分析表明, 生长速度快的家系的免疫酶活性较低, 两者呈中等负相关这一结果与报道的凡纳滨对虾抗 TSV 成活率与生长呈负相关相类似 [31] 从遗传学角度上分析, 当某一性状的基因表达强烈时, 其他基因的表达就受到影响从能量平衡的角度考虑, 当生长消耗大量能量的情况下, 势必会影响能量在免疫方面的消耗分配家系的特定生长率与家系低温胁迫试验 48h 后 3 种免疫酶活性相关性分析表明, 生长速度快慢与抗低温胁迫能力负相关家系 3941 和 017 特定生长率高, 免疫酶活性却低 ;077 和 4822 的特定生长率较低, 3 种酶的免疫酶活性却较高而家系 370 在特定生长率以及免疫酶活性两方面均较高, 是一个优势家系家系的特定生长率与家系高氨氮胁迫试验 48h 后 3 种免疫酶活性相关性分析表明, 家系的特定生长率与免疫酶活性呈负相关不同斑节对虾家系对氨氮胁迫做出的反应程度不同, 反应出不同家系抗 [21] 氨氮胁迫能力的差异孙苗苗等研究发现斑节对虾家系在高氨氮胁迫 48h 后, 免疫酶活性水平在不同家系中表现不同, 并且在同一父本不同母本的半同胞家系内, 免疫酶活性也存在差异性, 其结果表明斑节对虾家系的成活率与血细胞数量呈正相关, 而与 SOD ACP 活性呈负相关 4 结论对 10 个斑节对虾家系的生长试验及低温和氨氮胁迫试验结果表明, 家系间的生长抗低温和耐高氨氮能力存在较大差异在低温胁迫下, 斑节对虾血清 ACP 活性呈先升高后降低的变化规律, 而在高氨氮胁迫下, ACP 活性呈不断升高的变化规律在低温和高氨氮胁迫下, SOD 活性均表现为先升高后降低的变化规律, PO 活性则表现为持续下降的趋势试验中家系的特定生长率与免疫酶活性均呈负相关, 表明在选育过程中要针对不同目标性状进行选择试验结果为下一步构建家系抗低温和耐高氨氮评估模型提供了依据参考文献 [1] LE MOULLAC G, HAFFNER P. Environmental factors affecting immune responses in Crustacea[J]. Aquaculture, 2000, 191(1-3): [2] CHENG W, CHEN J C. Effects of intrinsic and extrinsic factors on the haemocytes profiles of the prawn, Macrobrachium rosenbergii[j]. Fish Shellfish Immunol, 2001, 11(1): [3] GOMEZ-JIMENEZ S, UGLOW R F, GOLLAS-GALVAN T. The effects of cooling and emersion on total haemocyte count and phenoloxidase activity of the spiny lobster Paulitrus interruptus[j]. Fish Shellfish Immunol, 2000, 10(7): [4] STEENBERGEN J F, STEENBERGEN S M, SCHAPIRO H C. Effects of temperature on phagocytosis in Homarus americanus[j]. Aquaculture, 1978, 14(1): [5] VARGAS-ALBORES F, HINOJOSA-BALTAZAR P, POTTILLO-CLARK G, et al. Influence of temperature and salinity on the yellowlegs shrimp Penaeus californiensis Holmes, prophenoloxidase system[j]. Aquac Res, 1998, 29(8): [6] 孙舰军, 丁美丽. 氨氮对中国对虾抗病力的影响 [J]. 海洋与湖沼, 1999, 30(3): [7] 王克行. 虾蟹类增养殖学 [M]. 北京 : 中国农业出版社, 1997: 91, 218. [8] ARMSTRONG D A, CHIPPENDALE D, KNIGHT A W, et al. Interaction of ionized and un-ionized ammonia on shortterm survival and growth of prawn larvae, Macrobrachium rosenbergii[j]. Biol Bull, 1978, 154(1):

8 杨其彬等 : 不同环境条件下斑节对虾家系生长和免疫酶活性差异 85 [9] CHENG W, CHEN J C. The virulence of Enterococcus to freshwater prawn Macrobrachium rosenbergii and its immune resistance under ammonia stress[j]. Fish Shellfish Immunol, 2002, 12(2): [10] 王兴强, 马甡, 董双林. 盐度和蛋白质水平对凡纳滨对虾存活生长和能量转换的影响 [J]. 中国海洋大学学报 : 自然科学版, 2005, 35 (1): [11] 潘鲁青, 姜令绪. 盐度和 ph 突变对 2 种养殖对虾免疫力的影响 [J]. 中国海洋大学学报 : 自然科学版, 2002, 32 (6): [12] 房文红, 王慧, 来琪芳. 碳酸盐碱度 ph 对中国对虾幼虾的致毒效应 [J]. 中国水产科学, 2001, 7 (4) : [13] 杨富亿, 李秀军, 杨欣乔. 日本沼虾幼虾对碱度和 ph 的适应性 [J]. 动物学杂志, 2005, 40 (6): [14] 沈文英, 胡洪国, 潘雅娟. 温度和 ph 值对南美白对虾 (Penaeus vannmei) 消化酶活性的影响 [J]. 海洋与湖沼, 2004, 35 (6): [15] 王专伟. 斑节对虾家系生长抗病抗逆性状与免疫酶活性的相关分析 [D]. 上海 : 上海海洋大学, 2011: [16] 杨其彬, 温为庚, 黄建华, 等. 斑节对虾 4 个不同地理群体建立家系的生长及成活 [J]. 南方水产, 2010, 6(3): [17] 黄忠, 林黑着, 黄建华, 等. 斑节对虾 6 个家系生长饲料利用和全虾营养成分的比较 [J]. 南方水产, 2009, 5 (1): [18] HETZEL D J S, CROCOS P J, GERARD P D, et al. Response to selection and heritability for growth in the Kuruma prawn Penaeus japonicus[j]. Aquaculture, 2000, 181(1-2): [19] GOYARD E, PATROIS J, PEIGNON J M, et al. Selection for better growth of Penaeus stylirostris in Tahiti and New Caledonia[J]. Aquaculture, 2002, 204(3-4): [20] FINLEY L M, HALEY L. The genetic of aggression in the juvenile American lobers, Homarus amerucanus[j]. Aquaculture, 1983, 33(1-4): [21] LESTER L J. Differences in larval growth among families of Penaeus stylirostris Stimpson and P.vannamei Boone[J]. Aquac Res, 1988, 19(3): [22] 孙苗苗, 黄建华, 杨其彬, 等. 13 个斑节对虾家系的生长及抗氨氮特性比较 [J]. 上海海洋大学学报, 2011, 20(4): [23] 周鲜娇, 邱德全, 刘文珍. 温度变化对凡纳滨对虾心率和肝胰腺抗氧化酶活性的影响 [J]. 渔业现代化, 2007, 34(5): 5 7. [24] 孙金辉, 徐赞霞, 季延滨, 等. 温度骤降对南美白对虾仔虾抗氧化机能的影响 [J]. 天津农学院学报, 2008, 3(15): [25] 赵丙辰, 倪天崎, 李伟. 南美白对虾血细胞酚氧化酶活性的研究 [J]. 青岛理工大学学报, 2006, 3(27): [26] 刘昌彬, 王金星, 刘存仁, 等. 非生物环境因子对暴发性流行病病原感染的中国对虾发病的影响 [J]. 水产学报, 2001, 25(1): [27] 哈承旭, 刘萍, 何玉英, 等. 氯化铵对黄海 1 号中国对虾免疫相关酶类的影响 [J]. 渔业科学进展, 2009, 1(30): [28] 王明, 胡义波, 姜乃澄. 氨态氮亚硝态氮对罗氏沼虾免疫相关酶类的影响 [J]. 浙江大学学报 : 理学版, 2005, 6(32): [29] 林林, 丁美丽, 孙舰军, 等. 有机污染提高对虾对病原菌易感性研究 [J]. 海洋学报, 1998, 20(1): [30] 姜令绪, 潘鲁青, 肖国强. 氨氮对凡纳对虾免疫指标的影响 [J]. 中国水产科学, 2004, 6(11): [31] ARGUE B J. ARCE S M, LOTZ J M, et al. Selective breeding of pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) for growth and resistance to Taura Syndopme Vius[J]. Aquaculture, 2002, 204(3-4):

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Microsoft Word - 张立田_news_.doc Ca 2+ Mg 2+ 及盐度对凡纳滨对虾体内代谢酶的影响张立田 1,2, 戴习林 1 1, 臧维玲 ( 1., 201306; 2., 200090) 摘要 : 为探讨 Ca 2+ Mg 2+ 盐度对凡纳滨对虾体内代谢酶的相对独立作用和相互影响, 进而为提高凡纳滨对虾生长力和免疫力提供理论依据, 本实验采取 L49(7 8 ) 安排 7 水平 Ca 2+ Mg 2+ 盐度, L8(2 7 ) 安排