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Transcription

1 立 異 臨 狀 罹 率 率 療 度 量 immunochromatography IgM ELISA IgM antibody capture assay; MAC-ELISA 臨 離 錄 reverse-transcription-polymerase chain reaction RT-PCR real-time DNA 列 DNA-microarrays 更 了 度 度 類 (Flaviviridae)(Bunyaviridae) (Alphaviridae) (Paramyxoviridae) 狀 (Rhabdoviridae) 狀 (Arenaviridae) 不 1 不 異 流行 理 1. 類 類 yellow fever YFdengue fever DEN 羅 (tick-borne encephalitis TBE Russian and central European spring-summer encephalitis) Powassan POW 羅 (West Nile encephalitis; WN) (Japanese encephalitis JE) 路易 St. louis encephalitis SLE 累 Murray valley virus encephalitis MVE California encephalitis CELa Crosse LC (Western equine encephalitis WEE) (Eastern equine encephalitis EEE) 拉 Venezuelan equine encephalitis VEE 1

2 狀 狀 拉 Hendra virus 立 Nipah virus rabies 麗 lyssavirus 拉 Lassa fever 見 Coxsackie polioecho herpes simplex virus varicella zoster cytomegaloviruseb polyomavirusb19 DNA parvovirusadenovirus 流行 influenza measlesmumps rubella 輪狀 rotavirus enterovirus 臨 列 量 例 年 不 300 路易 La Crosse 例 年 ( 利 利 ) 年 例 不 350 例 年來 陸 流行 例 1999 年 度 羅 來 累 3800 例 1962 年 羅 1966 年 羅 流行 蘭 率 來 臨 例 漏 不 年 30,000~50,000 例 年 10 ~ 30 拉 例 羅 1990~1999 年 5,225~9,427 例 例 數 都 不 不 練 來 羅 例 率 25% 率更 30% 1999 年 羅 率 6.4% 30% 數 2

3 不 異 療 療 來降 率 神 切 流行 流行 來 類 類 來 更 略 列 2. 類 2 BSL-2 麗 La Crosse 3 BSL-3 拉 羅 路易 累 4 BSL-4 羅 拉 立 年來 來 離 來 立 不 狀 聯 enzyme linked immunosorbent assay; ELISA 了 hemagglutination-inhibition; HI complement fixation; CF 數 plaque-reduction neutralization test; PRNT indirect fluorescent antibody assay; IFA IFA 3

4 PRNT 參 IgM 6 8 IgM 不 IgM 令 IgM ELISA IgM antibody capture assay; MAC-ELISA 了 類 IgG 利 ELISA 勒 類 WEEV, SLEV, LACV, CEV, VEEV, WNV EEEV, SLEV, LACV, POWV, WNV TBEV, WNV WEEV, EEEV, VEEV, SLEV, DENV DENV, WNV DENV, MVEV JEV, TBEV, DENV, WNV ELISA 3 異 異 sensitivity; Se 異 specificity; Sp PRNT 類 IgG 12 IgG IgM 量 行 復 IgG 力 4 數 IgG 不 6 TBEV IgG ELISA 例 Se 73~99% Sp 異更 14~81% 4

5 論 例 EEEV, VEEV, WEEV YFV, DENV, JEV, TBEV, SLEV, WNV 利 cerebrospinal fluid CSF 來 利 WNV SLEV ELISA epitope-blocking ELISA 來 類 度 2 13 WNV 率 66.5% 38.5~88.6%7 SLEV 率 6.5% 0~17.7% SLEV ELISA IgG IgM ELISA B 臨 列數 利 immunochromatography 度 異度 不理 ELISA 不 類 HIV Abbott 類 HIV 不 便 讀 易 Puumala 流行 IgM ELISA IFA Puumala 度 異度 97.1% 96.2% MAC-Dot IgM dot-blot 不 便 MAC-Dot IgM 60 例 119 例 粒 龍 粒 5

6 hydroxyapatite 力 來 行 IgG 例數量不 HI PRNT ELISA 流行 行 ELISA 離 Vero 離 TBEV 猪 離 神 CPE 利 不 理 異 來 率 不 錄 reverse-transcription-polymerase chain reaction RT-PCR 3 來 WEEV SLEV 率 RT-PCR 不 來 不 例 不 冷 RT-PCR RT-PCR 不 1999 年 紐 WNV 流行 CSF RNA CSF IgM 不 RNA 更 若 CSF RNA 不 來說 TBEV 神 狀 10 來 不 類 來 來 了 臨 度 4 6

7 4. 臨 來 JEV TBEV EEEV 度 類 度 臨 JEV RT-PCR CSF 行 RT-PCR TBEV Nested RT-PCR real-time PCR TaqMan/ABI 參 Schwaiger & Cassinotti, 2003 HI 14 例 例 Vernet, copies CSF 1 CSF PRISM 7700 VEEV Nested RT-PCR 30 copies 8 Meiyu et al., 1997 Linssen et al., 2000 錄 NASBA nucleic acid sequence-based amplification TAS TMA 3SR 行 amplicon PCR 年來 Taq DNA 5 3 切 exonuclease 量 fluorescence resonance energy transfer FRET 理 FRET5 3 dual-label 不 裂 5 3 切 來 Taq DNA 異 度 異 量 異 TaqMan 理 1PCR 了 靈 度 理 量 量 量 quantificationqpcr TaqMan LightCycler 陸 SmartCycler icycler Rotor-Gene Mx4000 Multiplex Microplate 96 LightCycler 利 了 FRET 7

8 adjacent FRET probe2 SYBR 綠 green dye3 ethidium bromide 異 來 異 錄 NASBA molecular beacon 利 FRET 理 狀 TaqMan 不 不 5 3 切 利 異 hybridization 拉 離 4 1. TaqMan 理 Fig. 2 in Giulietti et al.,

9 2. 理 Fig. 4 in Giulietti et al., SYBR 綠 理 Fig. 5 in Giulietti et al.,

10 4. 理 Fig. 3 in Giulietti et al., 2001 來 不 行 不 見 類 不 留 consensus multiplex universal assay 來 略 臨 度 降 臨 PCR 立 CSF 數 類 異 列 micrarrays 度 10 6 /cm 2 數 RT-PCR 列來 行 10

11 參 1. Cinque P, Bossolasco S, Lundkvist A Molecular analysis of cerebrospinal fluid in viral diseases of the central nervous system. J Clin Virol. 26: Giulietti A, Overbergh L, Valckx D, Decallonne B, Bouillon R, Mathieu C An overview of real-time quantitative PCR: applications to quantify cytokine gene expression. Methods. 25: Lambert AJ, Martin DA, Lanciotti RS Detection of North American eastern and western equine encephalitis viruses by nucleic acid amplification assays. J Clin Microbiol. 41: Lanciotti RS, Kerst AJ Nucleic acid sequence-based amplication assays for rapid detection of West Nile and St. Louis encephalitis viruses. J Clin Microbiol. 39: Linssen B, Kinney RM, Aguilar P, Russell KL, Watts DM, Kaaden OR, Pfeffer M Development of reverse transcription-pcr assays specific for detection of equine encephalitis viruses. J Clin Microbiol. 38: Mackay IM, Arden KE, Nitsche A Real-time PCR in virology. Nucleic Acids Res. 30: Meiyu F, Huosheng C, Cuihua C, Xiaodong T, Lianhua J, Yifei P, Weijun C, Huiyu G Detection of flaviviruses by reverse transcriptase-polymerase chain reaction with the universal primer set. Microbiol Immunol. 41: Read SJ, Burnett D, Fink CG Molecular techniques for clinical diagnostic virology. J Clin Pathol. 53: Read SJ, Kurtz JB Laboratory diagnosis of common viral infections of the central nervous system by using a single multiplex PCR screening assay. J Clin Microbiol. 37: Read SJ, Mitchell JL, Fink CG LightCycler multiplex PCR for the laboratory diagnosis of common viral infections of the central nervous system. J Clin Microbiol. Sep;39(9): Schwaiger M, Cassinotti P Development of a quantitative real-time RT-PCR assay with internal control for the laboratory detection of tick borne encephalitis virus (TBEV) RNA. J Clin Virol. 27: Vernet G Diagnosis of zoonotic viral encephalitis. Arch Virol Suppl.;(18): Wacharapluesadee S, Hemachudha T Nucleic-acid sequence based amplification in the rapid diagnosis of rabies. Lancet. 358: Yamamoto A, Nakayama M, Kurosawa Y, Sugo K, Karasawa H, Ogawa T, Takasaki T, Tashiro M, Kurane I Development of a particle agglutination assay system for detecting Japanese encephalitis virus-specific human IgM, using hydroxyapatite-coated nylon beads. J Virol Methods. 104:

12 15. Yamamoto A, Nakayama M, Tashiro M, Ogawa T, Kurane I Hydroxyapatite-coated nylon beads as a new reagent to develop a particle agglutination assay system for detecting Japanese encephalitis virus-specific human antibodies. J Clin Virol. 19: