概述 阻断剂应用于酶联免疫吸附试验和横向免疫层析试验以减少来自患者样本中的蛋白质干扰并由此可能造成的假阳性, 假阴性的错误检测结果 选择最佳检测方法取决于预期测定方法的实际应用, 待分析的样品的种类, 原材料的可用性, 以及该检测方法只是用于一个实验室的单个检测还是在多个实验室中由不同技术人员操作

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1 免疫学诊断试剂中常用的阻断剂应用指南

2 概述 阻断剂应用于酶联免疫吸附试验和横向免疫层析试验以减少来自患者样本中的蛋白质干扰并由此可能造成的假阳性, 假阴性的错误检测结果 选择最佳检测方法取决于预期测定方法的实际应用, 待分析的样品的种类, 原材料的可用性, 以及该检测方法只是用于一个实验室的单个检测还是在多个实验室中由不同技术人员操作 一般而言, 免疫测定方法包括下列类别 : 各类免疫技术的固相材料 材料 结合能力 结合类型 硝化棉 高 疏水, 亲水 PVDF 高 疏水 尼龙高疏水 酶联免疫吸附免疫夹心法检测 - 用于定量检测靶 / 分析物 酶联免疫吸附俘获法 - 用于筛查特定抗体 ( 如 : IgG, IgM, IgA & IgE) 酶联免疫吸附竞争法 - 用于检测存在于样品中 / 分析物, 通常用于当小分子或只有 1-2 个表位 对于所有的方法有几个参数是决定检测方法性能的关键 :(1) 固相材料的选择 (2) 抗体 / 的选择 (3) 阻断剂的选择 为了生产出高灵敏度和高特异性的试剂, 最关键的因素是选择具有与靶分子的高特异性结合的抗体或 然而, 正确地使用阻断剂也有助于提高检测的灵敏度和特异性 这些阻断剂的使用可以减少非特异性结合以增加信噪比 板材及管材 聚苯乙烯 低 疏水 聚乙烯醇低疏水 酶标板低共价, 疏水, 亲水 珠类 聚苯乙烯 中度 疏水 聚苯乙烯高共价, 疏水, 亲水 微粒高共价, 疏水 理想的固体表面是既有高度的结合能力又不破坏包被的或抗体的天然蛋白质的构象 在免疫测试中非特异性结合可发生于 (1) 固相材料和非目标的蛋白质结合 (2) 患者的样品中存在的内源性抗体和检测试剂内抗体的结合 为了防止非特异性结合, 在固相材料包被之后使用阻断缓冲剂中以封闭固相材料上任何剩余未结合的位点 在准备检测样本的过程中使用其他的阻断剂以防止内源性干扰抗体与检测试剂组分抗体结合 单克隆抗体和多克隆抗体的性能上的关键差异 通常, 选择单抗作为初级抗体, 以保证检测试剂的高特异性, 而多抗则被选择作为二抗, 这样通过多点结合以达到信号的最大化 然而, 任何其他的组合均可采用 所有的候选抗体必须根据预期样本类型进行优化以选择出最佳的组合方案 单克隆抗体 ( 单抗 ) 通常用小鼠或重组方法生产, 这些抗体识别的单一的表位 由于只有一个抗体分子与结合, 该结合是高度特异性的, 但可能缺乏灵敏性 多克隆抗体 ( 多抗 ) 用山羊, 绵羊, 鸡, 兔等动物生产 多克隆血清是多种特异抗体的混合 特异性抗体 ( 多抗 ) 的浓度通常为 g/ 毫升 多抗能够识别任何一个特定上的多个表位, 这使得它们对于决定簇的突变不太敏感 当的性质没有完全知晓的情况下多抗是十分有应用价值的 然而, 它们的产量是受产生它的动物的寿命限制的 2 阻断剂 - 应用指南

3 免疫诊断方法分类 免疫夹心法检测 二抗 直接法 间接法 这是一个灵敏感和稳定的方法 靶加在两个抗体之间 ( 和 ) 被预先包被到固相材料上然后加入含有的样品 经过洗涤步骤以去除未结合的, 而后加入可直接和结合的 和必须结合到的非重迭表位上 任何单克隆抗体或经亲和纯化的多克隆抗体均可以用作或 进而, 被检测可以与标记的 ( 直接检测 ) 结合或与一组匹配的未标记的和标记的二抗 ( 间接检测 ) 来结合, 从而达到检测的目的 免疫捕获法 (IgG, IgM & IgA) 病人样本 IgG 抗体 病人样本 IgM 抗体 IgG 检测 IgM 检测 直接包被在固相材料上 加入含有抗体的样本 使用标记的 ( 直接检测 ) 或一组匹配的未标记和标记二抗 ( 间接检测 ) 检测病人样本中的的抗体 直接检测法如图所示 免疫竞争法 病人样本 竞争 这是一个患者的目标分析物中的和竞争 ( 抑制剂 ) 之间的竞争性结合的过程 目标分析物特异性抗体特被包被到固相材料上, 患者样品中的和标记的抑制剂一起与包被的抗体温育并且竞争结合位点 未结合的标记的抑制剂和分析物通过洗涤除去 样品中的分析物越多则越少的标记抑制剂可以结合到抗体 由此产生的测定信号则越弱 反之亦然 这种方法通常用于只有 1-2 个表位的小分子的 直接法 3

4 固相材料的封闭 固相的定量免疫学测定方法, 如酶联免疫吸附, 横向免疫层析, 以及免疫印迹均涉及抗体通过共价结合包被到固相材料的表面上这一过程 固相材料表面其他蛋白质或生物分子的非特异性结合可以减少检测的特异性和灵敏度 由此而专门设计的固相材料封闭剂是用以饱和固相材料的表面上未被抗体包被的结合位点以防止其他物质的非特异性结合从而提高试剂的灵敏度 开发一种新的免疫测试方法, 第一步就是优化或在固相材料上的包被条件以期最大限度地把有效蛋白包被到固相材料表面 包被之后, 固相材料表面任何剩余的未占据的结合位点必须被封闭以防止非特异性物质的结合 一个理想的封闭剂通常为蛋白质, 因为它能够有效地封闭固相材料表面疏水性和亲水性位点 此外, 它可以作为一种稳定剂用以防止蛋白在与固相材料的表面反应时发生变性 封闭剂的用量和使用时间必须根据每个检测方法进行优化 封闭剂的用量不足将导致过高的背景信号以及减小的信噪比 而使用浓度过高的封闭剂则可能掩盖抗体 - 相互作用, 从而也可引起信噪比的减小 理想封闭剂具有以下特征 : 有效地阻断测定反应物非特异性结合到固体材料表面 不影响已包被到固体材料表面的试剂有效成分 可以起到试剂有效成分在固相表面稳定剂 ( 防止变性 ) 的作用 不与其它试剂有效成分发生交叉反应 不具有酶活性并由此可能与试剂中的底物反应而使信号加强或降解试剂中的反应物 每个批号批间差小 酶联免疫吸附试验中不使用封闭缓冲液时 联免疫吸附试验中使用封闭缓冲液时 未结合的杂质 封闭缓冲液 患者样品中的未结合的杂质, 如蛋白质, 干扰分子等和测定标记物结合到固相材料表面并与特异性 - 抗体反应信号竞争从而引起的背景噪声和减少检测信号 封闭缓冲液旨在饱固相材料上的开放位点从而防止未结合的杂质与开放位点的非特异性结合 4 阻断剂 - 应用指南

5 推荐使用的封闭剂 J82100B 用于 ELISA, PBS 缓冲液这是在 PBS 缓冲液 (ph 7.4) 中非哺乳动物干扰物封闭剂 它用于使用微孔板或其它固相材料的 ELISA 方法 包被之后, 它可以有效地封闭微孔板或膜上的未被包被的位点 从而提供提高信噪比 建议使用 1 倍浓度或进一步稀释 J82300B 用于横向免疫层析, PBS 缓冲液这是在 PBS 缓冲液 (ph7.4±0.2) 中我们有自主知识产权的专有封闭剂 它用于使用膜或其它固相材料的横向免疫层析系统 它可以降低非特异性结合并稳定包被蛋白从而提高检测信号 用于封闭非哺乳动物蛋白的干扰分子 建议使用 1 倍浓度或进一步稀释 J82310B 用于横向免疫层析, Tris 缓冲液这是在 Tris 缓冲液 (ph 8.1) 中的我们有自主知识产权的专有封闭剂 它用于使用膜或其它固相材料的横向免疫层析系统 它可以降低非特异性结合并稳定包被蛋白从而提高检测信号 用于封闭非哺乳动物蛋白的干扰分子 建议使用 1 倍浓度或进一步稀释 J82200B 用于免疫印记, PBS 缓冲液这是在 PBS 缓冲液 (ph 7.4) 中非哺乳动物干扰物封闭剂 它是经优化后用于超敏免疫印迹测定系统中的非哺乳动物封闭试剂 该配方用于非哺乳动物蛋白以防止非特异性相互作用和提高检测的特异性 建议使用 1 倍浓度或进一步稀释 J16430D 包被稳定剂和封闭缓冲液专门配制的试剂旨在改善结合于固相的 / 蛋白质的稳定性和功能 应用于极不稳定的蛋白质或含少且不稳定 / 蛋白质 1:1 稀释到的试剂中其他阻断剂的浓度 缓冲液的 ph7.2±0.2 A64801B 牛血清白蛋白 (BSA) 最常用的封闭剂, 可用于各种用途包括 ELISA, 免疫印迹和免疫组化 BSA 作为封闭试剂对于使用蛋白敏感的抗体, 如磷酸化特异性抗体的方法尤其有效 在 PBS 缓冲液中 (ph7) 常用浓度为 1% 到 5% 之间 常规封闭流程 1. 在抗体包被在固相基质上后, 直接加封闭液到小孔, 磁珠, 印迹膜或 NC 膜上 2. 选择检测时封闭剂的最佳浓度, 可以是 1X 或进一步稀释 3. 优化最佳的孵育温度和时间来调节封闭剂的效果, 提高温度和增长时间都会增加封闭的效率, 典型的条件为在 下孵育 分钟 4. 进行洗涤步骤 注意事项 :( 除了加封闭液以外, 每一步之间的充分洗涤也很重要 可以减小残留试剂和膜的非特异性结合, 降低背景, 增强信噪比, 未充分洗涤会造成本底过高 经常用的技术是稀释的封闭液中加上一些高纯度的去污剂 ) 5

6 阻断试验中出现的干扰 免疫检测干扰是一类会引起检测结果假阳性或假阴性现象的泛指 潜在的干扰因素包括内源性抗体或病人样本中的其它结合蛋白, 多反应抗体, 自身抗体 ( 嗜异性抗体 ) 和人抗动物抗体 在免疫检测时, 干扰物可通过非特异性结合来干扰抗体和分析物之间的反应, 一方面抑制目标分析物与的结合, 产生假阴性, 另一方面又可以在缺少目标分析物的情况下与捕获和结合, 从而产生假阳性 封闭缓冲液封闭缓冲液封闭缓冲液 干扰抗体 ( 异嗜性干扰 ) 真正的阳性结果 假阴性干扰抗阻断捕获或的结合位点 通常发生在夹心法和竞争法分析 假阳性干扰抗体在没有的的情况下和和结合 通常只发生在有夹心法测定 容易受到干扰的检测包括双抗体夹心检测, 竞争性检测和 IgM 捕获检测 文献中报道过的典型的例子包括对 ToRCH,CEA,CA-125,CK-MB,LH,FSH,prola ctin,tsh,afp,cardiac troponin I (ctni) 和 hcg 等的检测 常见的引起夹心检测和竞争性检测偏差的类型主要是异嗜性抗体 (HA) 的干扰,HA 是一类结合力弱的天然抗体, 可与来自不同物种的免疫球蛋白反应, 这些物种包括小鼠, 山羊, 兔子, 绵羊和鸡 在诊断检测中,HA 可以结合多种类型的无关, 从而干扰 - 抗体的特异性结合反应 人抗小鼠抗体 (HAMA) 的干扰是 HA 干扰的一种类型, 它可以特异性的结合小鼠抗体 因为小鼠单克隆在免疫检测的商业诊断中应用非常广泛, 所以 HAHA 的干扰经常会遇到 例如人自身抗体类风湿因子 (RF), 可以与人自身的免疫球蛋白 (IG) 结合, 同时也可以与动物免疫球蛋白交叉反应, 可引起与 HA/HAMA 干扰类似的 RF 干扰 通常同种型 (Fc 区域 ) 特异性的 HA 干扰比异种型 (Fab 或结合位点 ) 特异性的 HA 更普遍 IgM 捕获检测一般会受到两种类型的干扰, 第一来自于病人的高丰度的 IgG 抗体在固相时会与 IgM 竞争性的结合上的结合位点 因为人血清中 IgG 抗体含量非常高, 大约占血清中总抗体的 75%, 所以在竞争性结合的结合位点时占据绝对优势 第二个干扰是 IgM RF, 它可以与免疫球蛋白上的 Fc 片段互做产生假阳性结果 RF 在 1-4% 的人群中发现, 而在 75% 的 65 岁以上的成年病人中都有存在 6 阻断剂 - 应用指南

7 夹心法和间接法试验中的干扰 夹心法免疫检测是指用两个抗体 ( 单抗或者多抗 ) 分别结合或其它目标物上的两个位点, 对的亲和能力是免疫检测敏感度的决定因素, 但是人抗动物免疫球蛋白抗体 (HA 抗体 ) 可以干扰这种亲和, 减少免疫检测的敏感性和特异性 动物 IgG 属于被动阻断剂, 例如动物 IgG 通过干扰抗体和捕获物的结合, 提供可选结合位点来 动物 IgG( 例如羊 IgG) 只能封闭一种类型的干扰物 ( 例如人抗山羊抗体 ), 因此通常不止一种类型的 IgG 被选用, 这取决于捕获和的性质 动物 IgG 应该过量添加, 有效性取决于动物 IgG 对干扰抗体的亲和力 推荐使用浓度 : 在检测中需要使用 10 倍于的多抗 / 单抗的浓度 ( 例如 5mg/mL 的偶联单抗, 要加 50mg/mL 动物 IgG). 可以直接加到样本或酶联物稀释液中, 但理想的状态是在加入检测孵育前先和病人的样本混合 动物 IgG ( 如 : 兔 IgG) 干扰抗体 ( 如 : 人抗兔 IgG) ( 比如, 羊抗 ) 俘获抗体 ( 如 : 兔抗体 ) 封闭剂 动物 IgG ( 如 : 羊 IgG) 干扰抗体 ( 如 : 人抗羊 IgG) TRU Block TM 针对人抗鼠抗体和类风湿因子的阻断剂它们是在双鼠单抗检测中另一类的阻断剂 它们被用来去除嗜异类型的干扰, 即人抗鼠抗体 (HAMA) 和类风湿因子 (RF) 干扰 HAMA 阻断剂含有特异结合位点来结合嗜异干扰物, 包括 HAMA 和 RF TRU BlocK 通过与干扰物结合而产生空间位阻进一步阻止干扰物与分析物质结合 这类主动型阻断剂通常使用浓度要低于被动型阻断剂, 从而可以减少由于过量使用被动型阻断剂而引起的检测信号减小等负作用 推荐使用浓度 : TRU Block 应该作为样本或酶联稀释液的一部分, 以下是推荐的使用浓度范围 : TRU Block IgM 类风湿因子 ( 小鼠来源 ) 俘获抗体 ( 小鼠来源 ) TRU Block 嗜异类干扰 ( 如 : HAMA) 封闭剂 0.5mg/mL 20mg/mL ( 稀释过的样本 ) 或 5mg/mL 20mg/mL ( 未稀释过的样本 ) TRU Block 应该作为样本或酶联稀释液的一部分, 理想的 TRU Block 应该在与孵育之前与病人样本结合 7

8 正确选择阻断剂 双抗体夹心试验 推荐的阻断剂 双小鼠单抗 TRU Block TM A66800H (TRU Block 1) A66802H (TRU Block 2) A66803H (TRU Block 3) 小鼠单抗 小鼠单抗 封闭剂 小鼠 IgG A66186M (9-13mg/mL) A66185M (50-55mg/mL) A66185M-LY ( 冻干 ) 不同物种捕获和可以是多抗也可以是单抗 如 : 山羊, 棉羊, 兔, 鼠, 鸡, 鼠 如 : 山羊, 棉羊, 兔, 鼠, 鸡, 鼠 封闭剂 使用的 IgG 阻断剂的物种种类一定要和捕获宿主的物种种类一致 如果在夹心检测中使用两个物种抗体的话, 那应该使用相同两个物种的 IgG 阻断剂 山羊多抗 山羊 IgG A66200H 小鼠单抗 小鼠 IgG A66186M (9-13mg/mL) A66185M (50-55mg/mL) A66185M-LY (Lyophilized) 鸡多抗 鸡 IgY A01302C (Lyophilized) 大鼠单抗 大鼠 IgG A64391R 兔单抗或多抗 兔 IgG A66100H 绵羊多抗 绵羊 IgG A66400S (70-77mg/mL, Liquid) 8 阻断剂 - 应用指南

9 IgM 俘获法中的干扰 IgM 抗体是肌体免疫系统对于感染应答所产生的第一种类型的抗体 因此,IgM 的检测已被证明是帮助识别早期和近期感染有价值的诊断指标 然而,IgM 抗体仅占体内总抗体的 5% 至 10% 与此相反,IgG 抗体是体内含量最丰富的免疫球蛋白, 它占了体内总抗体的约 75% 至 80% 为了确保 IgM 的检测的敏感性和特异性, 阻断来自含量丰富的 IgG 抗体和其它非特异性蛋白质, 如类风湿因子对于 IgM 的检测的干扰是十分必要的 IgG 吸附剂 IgG 吸附剂是纯化的山羊抗 - 人 IgG(GAH IgG) 的 Fc 片段 它专门为酶联免疫或其他免疫学方法血清检测特异性 IgM 抗体而设计 它旨在在 IgM 抗体检测之前去除人血标本中的 IgG 以及 IgG/ 类风湿因子 (RF) 结合物 试验证明, 除去 IgG 的干扰可以显著增加的 IgM 检测方法的灵敏度 迈迪安公司的 IgG 吸附剂经由免疫电泳测试以确保特异性地针对 IgG 而和 IgM 或 IgA 没有交叉反应性 IgM 稀释液 IgM 的稀释液用于定性和定量检测 IgM 抗体 这一稀释剂的配方旨在减少患者血液标本中的 IgG 抗体, 类风湿因子, 嗜异性抗体, 和任何可以影响 IgM 抗体免疫学检测结果的非特异性蛋白的干扰 IgM 稀释液含有高浓度的各种阻断蛋白, 它们可以封闭任何干扰因素可能结合的位点以防止它们与干扰因素结合 作为免疫测试试剂盒的一部分,IgM 稀释液可以增加 IgM 检测的灵敏度 推荐原料 : L15406G 山羊抗人 IgG 的 Fc 片段 (GAH IgG) 荐议在与病人标本混合前先用 PBS 稀释 1:10 以 1:10 比例与病人标本混合并孵育 5-30 分钟 8120 IgM 稀释液在一个单独的试管中, 以 1:21 或更高稀释度稀释病人血清 ( 混匀 ) 稀释液必须与试剂其它组分标准量化 山羊抗人 IgG 或 IgM 稀释液 病人血清 IgG 标记物 病人血清 IgM IgM 俘获法 9

10 产品目录 缩略语 Ab Antibody ( 抗体 ) Aff. Pur. Affinity Purified( 亲和纯化 ) Block Tested as a blocking agent( 封闭剂 ) BSA Bovine Serum Albumin( 牛血清白蛋白 ) EIA, ELISA Enzyme Immunoassay( 酶免疫 ) FC Fragment crystallizable region of an antibody( 抗体结晶区片段 ) H&L Heavy and light chain in IgG(IgG 抗体重 链和轻链 ) HA Heterothallic antibodies( 嗜异性抗体 ) HAMA Human anti-mouse antibodies ( 人抗鼠抗体 ) HRP Horseradish peroxidase( 辣根过氧化物酶 ) IEP Immunoelectrophoresis( 免疫层析 ) IgA Immunoglobulin A( 免疫球蛋白 A) IgE Immunoglobulin E ( 免疫球蛋白 E) IgG Immunoglobulin G( 免疫球蛋白 G) IgM Immunoglobulin M( 免疫球蛋白 M) IgY Immunoglobulin Y(( 免疫球蛋白 Y) LF Lateral flow( 横向层析 ) MAb Monoclonal antibody( 单克隆抗体 ) Monospecific Monospecific when tested by immunoelectrophoresis( 免疫电泳测试单一性 ) Neat Whole, unpurified, undiluted antisera ( 全部, 未纯化, 未稀释的抗血清 ) Neph Nephelometry( 散射比浊法 ) PAb Polyclonal antibody( 多克隆抗体 ) PBS Phosphate buffered saline( 磷酸盐缓冲盐水 ) Purified Refer to the product COA regarding the extent of purification and/or process used ( 关于纯化和 / 或使用参照该产品的 COA) TIA Turbidimetry( 比浊法 ) Tris Tris( 羟甲基 ) 氨基甲烷缓冲液 动物血清 动物血清中含有各种不同的蛋白质, 它们能吸收各种嗜异干扰 动物血清可以代替动物源性 IgG 或与之合并使用 作为阻断剂使用的动物血清必须和诊断试剂中的试剂是来自同一种动物 产品名称 分类 货号 宿主 / 来源 应用 性状 Normal Bovine Serum, Sterile Filtered Serum N64007B Bovine Block Neat Bovine Serum, Sterile Filtered Serum N21010B Bovine Block Neat Fish Plasma Serum N82107F Fish Block Neat Fish Serum (cell culture grade) Serum N82800F Fish Block Neat Goat Serum, Sterile Filtered Serum N66001G Goat Block Neat Goat Serum, Sterile Filtered and Heat Inactivated Serum N66111G Goat Block Neat Mouse Serum, Filtered Serum N14010M Mouse Block Neat Mouse Serum, Lipid-Stripped Serum M0P Mouse Block Neat Porcine Serum, Sterile Filtered Serum N64250P Pig Block Neat Rabbit Serum Serum N66010R Rabbit Block Neat Rabbit Serum, Sterile Filtered and Heat Inactivated Serum N01267R Rabbit Block Neat Rat Serum, Filtered Serum N64110A Rat Block Neat Sheep Serum, Sterile Filtered Serum N21010S Sheep Block Neat 鸡 IgY 鸡 IgY 应用于使用鸡抗体的免疫夹心法或竞争发的酶联免疫或横向免疫层析试剂 鸡 IgY 可以预先结合任何患者样品中人自身抗鸡抗体的抗体以防止其非特异性结合由此可能产生的对于测定结果的干扰 IgY, Chicken A01302C Chicken Serum Block Lyophilized IgY, Chicken, mg/ml A01366C Chicken Eggs Block Purified IgY, Chicken, mg/ml A01460C Chicken Serum Block Purified 10 阻断剂 - 应用指南

11 山羊 IgG 山羊 IgG 应用于使用山羊抗体的免疫夹心法或竞争发的酶联免疫或横向免疫层析试剂 山羊 IgG 可以预先结合任何患者样品中人自身抗山羊抗体的抗体以防止其非特异性结合由此可能产生的对于测定结果的干扰 IgG, Goat - Differential precipitation, 8-12 mg/ ml A66200H Goat Serum Block Purified 小鼠免疫球蛋白 小鼠 IgG 应用于使用小鼠抗体的免疫夹心法或竞争发的酶联免疫或横向免疫层析试剂 小鼠 IgG 可以预先结合任何患者样品中人自身抗小鼠抗体的抗体 (HAMA) 以防止其非特异性结合由此可能产生的对于测定结果的干扰 IgA, kappa, Mouse A03090M Mouse Myeloma IEP Aff.Pur. IgG1, kappa, Mouse A31171H Mouse Myeloma IEP Purified IgG2a, kappa, Mouse A03117M Mouse IEP,ID Purified IgG, Mouse - Caprylic Acid Cut A66187M Mouse Serum Block Purified IgG, Mouse IgG Protein A, 9-13 mg/ml A66186M Mouse Serum Block Purified IgG, Mouse - Protein A, mg/ml A66181M Mouse Serum Block Purified IgG, Mouse - Protein A, Lyophilized A66185M-LY Mouse Serum Block Lyophilized IgG, Mouse - Protein A, mg/ml A66185M Mouse Serum Block Purified IgE, Mouse A03900M Mouse IEP,ID Aff.Pur. IgE (Chimeric) A87180H Mouse EIA Supernatant IgM, kappa, Mouse A03169M Mouse Myeloma IEP,ID Purified IgM, lambda, Mouse A03100M Mouse Myeloma IEP,ID Aff.Pur. 兔 IgG 兔 IgG 应用于使用兔抗体的免疫夹心法或竞争发的酶联免疫或横向免疫层析试剂 兔 IgG 可以预先结合任何患者样品中人自身抗兔抗体的抗体以防止其非特异性结合由此可能产生的对于测定结果的干扰 IgG, Rabbit, 8-12 mg/ml A66100H Rabbit Serum Block Purified IgG, Rabbit - Differential ppt A66105R Rabbit Serum Block Purified 大鼠 IgG 大鼠 IgG 应用于使用大鼠抗体的免疫夹心法或竞争发的酶联免疫或横向免疫层析试剂 大鼠 IgG 可以预先结合任何患者样品中人自身抗大鼠抗体的抗体以防止其非特异性结合由此可能产生的对于测定结果的干扰 IgG, Rat A64391R Rat Serum Block Purified 绵羊 IgG 绵羊 IgG 应用于使用绵羊抗体的免疫夹心法或竞争发的酶联免疫或横向免疫层析试剂 绵羊 IgG 可以预先结合任何患者样品中人自身抗绵羊抗体的抗体以防止其非特异性结合由此可能产生的对于测定结果的干扰 IgG Sheep - Caprylic Acid/Sodium Sulfate, 45-55mg/mL A66441S Sheep Serum Block Purified IgG Sheep - Protein A, 5-15 mg/ml A66551S Sheep Serum Block Purified IgG Sheep, 70mg/mL A66400S Sheep Serum Block Purified 11

12 固相基质封闭缓冲液 固相基质封闭剂旨在饱和封闭在固相上未被包被物占据的结合位点以防止非特异性结合 通常固相基质封闭缓冲液能够封闭固相基质上的疏水性和亲水性位点 另外, 它们还可以作为包被物的稳定剂以及防止包被蛋白质与固相的表面发生反应而变性. Blocking Buffer for ELISA, PBS based J82100B - EIA,WB - Blocking Buffer for Lateral Flow Assays, PBS based J82300B - LF - Blocking Buffer for Lateral Flow Assays, Tris based J82310B - LF - Blocking Buffer for Western blot J82200B - WB - BSA, Standard Powder A64801B - EIA Purified Coating Stabilizer & Blocking Buffer J16430D - EIA Liquid Conjugate Stabilizer Diluent, HRP J16200D - EIA Liquid Gamma Globulin, Bovine A01245B Bovine IEP Purified Gamma Globulin, Bovine A51300B Bovine Serum IEP Purified IgG 吸附剂 IgG 吸附剂专门为酶联免疫或其他免疫学方法血清检测特异性 IgM 抗体而设计 它旨在在 IgM 抗体检测之前去除人血标本中的 IgG 以及 IgG/ 类风湿因子 (RF) 结合物 试验证明, 除去 IgG 的干扰可以显著增加的 IgM 检测方法的灵敏度 产品名称 分类 货号 宿主 / 来源 应用 性状 IgM Assay Diluent Goat EIA Purified IgG (Fc) PAb L15406G Goat EIA,IEP,Neph,TIA Monospecific IgG (Fc) PAb G5G Goat EIA Aff.Pur. IgG (Fc) PAb L62540G Goat IEP Purified IgG (H&L) PAb G5G Goat EIA, WB Aff.Pur. TRU Block - 人抗鼠抗体和类风湿因子的阻断剂 该类主动型阻断剂是针对人抗鼠抗体 (HAMA) 和类风湿因子 (RF) 对于使用小鼠单克隆抗体的免疫夹心法的非特异性的干扰以防止假阳性和假阴性的检测结果 TRU Block 我们拥有自主知识产权的主动型阻断剂 它可显著降低在免疫学诊断中出现的干扰而大大提高检测的可靠性 和被动型封闭试剂如小鼠 IgG 比较, 它使用浓度低, 但阻断效果明显 产品名称 货号 应用 性状 TRU Block A66800H Block Purified TRU Block 2 A66802H Block Purified TRU Block 3 A66803H Block Purified 人抗鼠抗体和类风湿因子阳性标本 人抗鼠抗体和类风湿因子阳性血清标本用于检验在各种检测方法中使用阻断剂的效果 Human Anti Mouse Antibody (HAMA) Plasma A01431H Human EIA Neat Human Anti Mouse Antibody (HAMA) Serum > 600 ng/ml N01268H Human EIA Serum Rheumatoid Factor Plasma A01432H Human EIA Neat 12 Meridian Life Science, Inc Wilfong Road Memphis, TN July 2015

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材料 方法 生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人

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