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- 钮 鱼
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1 营 养 卫 生 食 品 科 学 2012, Vol.33, No 雷 红, 王 毅, 蔡 亮 亮, 张 凤 ( 合 肥 工 业 大 学 生 物 与 食 品 工 程 学 院, 安 徽 合 肥 ) 摘 要 : 研 究 芝 麻 素 (sesamin) 对 非 酒 精 性 脂 肪 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 小 鼠 的 防 治 作 用 及 其 机 理 采 用 高 脂 饮 食 建 立 小 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 模 型, 从 血 脂 水 平 及 游 离 脂 肪 酸 组 成 氧 自 由 基 代 谢 及 肝 细 胞 损 伤 进 行 研 究 结 果 表 明 : 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 (50 100mg/(kg d)) 可 有 效 降 低 NAFLD 小 鼠 血 清 总 胆 固 醇 (T-CHO) 甘 油 三 酯 (TG) 水 平, 显 著 改 善 高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 (HDL-C) 水 平 ; 提 高 NAFLD 小 鼠 血 清 游 离 不 饱 和 脂 肪 酸 比 例, 对 调 节 血 脂 水 平 有 积 极 作 用 芝 麻 素 还 能 降 低 NAFLD 小 鼠 肝 脏 组 织 丙 二 醛 (MDA) 含 量, 提 高 肝 脏 总 抗 氧 化 能 力 (T-AOC), 降 低 血 清 谷 草 转 氨 酶 (GOT) 和 谷 丙 转 氨 酶 (GPT) 活 力 肝 脏 病 理 组 织 学 观 察 表 明 芝 麻 素 能 明 显 减 轻 NAFLD 小 鼠 肝 脏 脂 肪 化 病 变 的 程 度 因 此, 芝 麻 素 对 非 酒 精 性 脂 肪 肝 病 具 有 防 治 作 用, 作 用 机 理 与 降 血 脂 调 节 血 脂 组 成 即 提 高 游 离 不 饱 和 脂 肪 酸 比 例 抗 氧 化 和 抑 制 肝 细 胞 损 伤 有 关 芝 麻 素 ; 非 酒 精 性 脂 肪 肝 ; 血 脂 ; 抗 氧 化 ; 肝 细 胞 损 伤 Preventive and Curative Effects and Mechanism of Sesamin against Nonalcoholic Fatty Liver Disease in Mice LEI Hong,WANG Yi,CAI Liang-liang,ZHANG Feng (College of Biological and Food Engineering, Hefei University of Technology, Hefei , China) Abstract:In this study, the preventive and curative effect of sesamin against nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) in mice and its mechanism of action were investigated. NAFLD mouse models were established by feeding high fat diet. Serum lipid and free fatty acid composition, oxygen radical metabolism and liver injury were analyzed to evaluate the preventive and curative effect of sesamin against NAFLD in mice. Sesamin prevention (50 mg/(kg d)) and treatment (50, 100 mg/(kg d)) effectively decreased serum levels of T-CHO and TG in NAFLD mice, significantly improved serum HDL-C level, increased serum percentage of free unsaturated fatty acids and had positive regulatory effects on serum lipid levels. In addition, sesamin also could lower liver MDA level and serum levels of GOT and GPT and increase liver T-AOC level. Histopathological observation indicated that sesamin markedly alleviated liver lesions in NAFLD mice. Hence, sesamin has both preventive and curative effects against NAFLD in mice and its mechanism of action is relevant to lowering serum lipid levels, regulating serum free fatty acid composition (elevating unsaturated fatty acid proportion), antioxidation and attenuating hepatocyte damage. Key words:sesamin;nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD);serum lipid;antioxidation;hepatocyte damage 中 图 分 类 号 :TS225.1 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 : (2012) 芝 麻 含 有 多 种 活 性 成 分, 如 膳 食 纤 维 VB 1 VB 2 尼 克 酸 VE 卵 磷 脂 不 饱 和 脂 肪 酸 木 脂 素 类 如 芝 麻 素 及 芝 麻 林 素 植 物 甾 醇 多 酚 类 等, 具 有 很 高 的 生 物 价 值 [1] ; 其 中 芝 麻 素 是 主 要 的 活 性 成 分 之 一 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (NAFLD) 是 一 种 无 过 量 饮 酒 史, 常 由 饮 食 不 合 理 引 起 的 肝 细 胞 内 脂 肪 堆 积, 以 肝 细 胞 脂 肪 变 性 和 脂 质 蓄 积 为 主 要 特 征 的 临 床 病 理 综 合 征, 常 对 应 血 脂 升 高 及 氧 自 由 基 代 谢 的 损 伤 [2] 目 前 对 国 内 芝 麻 素 保 肝 方 面 的 研 [3] 究 主 要 有 : 汪 五 三 等 报 道 芝 麻 素 在 急 性 肝 损 伤 酒 精 性 亚 急 性 肝 损 伤 及 四 氯 化 碳 慢 性 肝 损 伤 方 面 的 保 肝 作 用 实 验 研 究, 结 果 表 明 芝 麻 素 对 急 性 亚 急 性 和 慢 性 肝 损 伤 [4] 有 一 定 的 治 疗 作 用 ; 郭 莉 群 等 对 芝 麻 素 在 治 疗 高 血 脂 症 大 鼠 血 脂 水 平 变 化 肝 组 织 抗 氧 化 活 性 inos 和 NT 蛋 白 表 达 情 况 方 面 进 行 了 研 究, 结 果 表 明 芝 麻 素 具 有 降 低 血 脂 水 平 抑 制 脂 质 过 氧 化 和 下 调 inos 表 达 的 作 用 国 外 对 芝 麻 素 影 响 血 脂 和 保 肝 方 面 的 研 究 主 要 有 : 芝 麻 素 能 增 加 大 鼠 肝 脏 脂 肪 酸 氧 化 相 关 酶 乙 酰 辅 酶 A 氧 化 酶 的 活 性 与 表 达 量 [5], 降 低 肝 脏 脂 肪 合 成 酶 活 性 与 表 达 量 [6], 并 可 [7] 明 显 降 低 高 血 脂 症 大 鼠 血 清 胆 固 醇 和 甘 油 三 酯 含 量 [8] ; 采 用 DNA 微 阵 列 技 术, 研 究 芝 麻 素 对 大 鼠 肝 脏 脂 肪 代 谢 收 稿 日 期 : 作 者 简 介 : 雷 红 (1973 ), 女, 副 教 授, 博 士, 研 究 方 向 为 天 然 产 物 化 学 与 药 理 leihong66@sohu.com
2 , Vol.33, No.23 食 品 科 学 营 养 卫 生 和 酒 精 代 谢 相 关 酶 基 因 表 达 的 影 响, 结 果 表 明 芝 麻 素 可 明 显 上 调 16 种 脂 肪 代 谢 相 关 酶 和 醛 脱 氢 酶 的 基 因 表 达, 说 明 芝 麻 素 可 在 mrna 水 平 调 节 血 脂 和 酒 精 代 谢 [9] 本 实 验 室 已 采 用 脱 脂 醇 提 重 结 晶 等 方 法 分 离 纯 化 得 到 了 芝 麻 素 ( 纯 度 >80%), 本 研 究 拟 采 用 高 脂 饮 食 建 立 小 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 模 型, 以 小 鼠 血 脂 水 平 血 清 游 离 脂 肪 酸 组 成 和 比 例 抗 氧 化 活 性 及 肝 细 胞 损 伤 为 指 标, 探 讨 芝 麻 素 在 调 节 血 脂 代 谢 及 保 肝 方 面 的 作 用, 研 究 芝 麻 素 对 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 防 治 作 用 及 机 理 1 材 料 与 方 法 1.1 动 物 昆 明 种 小 鼠, 雌 雄 各 半,6~8 周 龄, 体 质 量 (18±2)g, 购 于 安 徽 医 科 大 学 实 验 动 物 中 心, 合 格 证 号 : 皖 医 实 动 准 第 01 号 小 鼠 分 笼 饲 养, 温 度 为 (22±2), 自 然 光 照, 自 由 进 食 进 水 基 础 饲 料 购 于 安 徽 医 科 大 学 实 验 动 物 中 心, 测 得 饲 料 中 脂 肪 含 量 3.29% 总 糖 含 量 34.32% 蛋 白 质 含 量 7.66% 1.2 材 料 与 试 剂 芝 麻 粕 购 于 安 徽 省 东 至 县 昭 潭 镇 龙 潭 油 坊 芝 麻 素 : 以 芝 麻 粕 为 实 验 材 料, 采 用 脱 脂 醇 提 重 结 晶 等 方 法 分 离 纯 化 得 到 了 芝 麻 素, 纯 度 >80%, 临 用 时 用 0.5%CMC-Na 溶 液 稀 释 至 所 需 浓 度, 制 成 悬 浊 液, 灌 胃 给 药 甘 油 三 酯 (TG) 总 胆 固 醇 (T-CHO) 高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 (HDL-C) 谷 丙 转 氨 酶 (GPT) 谷 草 转 氨 酶 (GOT) 测 定 试 剂 盒 长 春 汇 力 生 物 技 术 有 限 公 司 ; 总 抗 氧 化 能 力 (T-AOC) 考 马 斯 亮 兰 蛋 白 测 定 试 剂 盒 南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 ; 硫 代 巴 比 妥 酸 三 氯 乙 酸 为 国 产 分 析 纯 ; 甲 醇 正 己 烷 为 国 产 色 谱 纯 1.3 仪 器 与 设 备 FA1004B 型 电 子 天 平 上 海 越 平 仪 器 科 技 有 限 公 司 ;HH-2 型 电 热 恒 温 水 浴 锅 江 苏 省 金 坛 市 荣 华 仪 器 制 造 有 限 公 司 ;Anke TGL-16B 型 离 心 机 天 津 市 金 贝 尔 科 技 有 限 公 司 ; SW-CJ-IF 型 净 化 工 作 台 苏 州 安 泰 空 气 技 术 有 限 公 司 ; 752 紫 外 分 光 光 度 计 上 海 菁 华 科 技 仪 器 有 限 公 司 ;QP2010 型 气 质 联 用 仪 日 本 岛 津 公 司 1.4 方 法 小 鼠 分 组 给 药 及 实 验 方 案 设 正 常 对 照 组 模 型 对 照 组 及 芝 麻 素 预 防 高 低 剂 量 组 (50 25mg/(kg d))( 以 体 质 量 计, 下 同 ), 芝 麻 素 治 疗 高 低 剂 量 组 (100 50mg/(kg d)), 每 组 动 物 数 10 只, 雌 雄 各 半 芝 麻 素 剂 量 选 择 依 据 为 参 考 文 献 [3-10] 和 本 实 验 室 预 实 验 结 果 正 常 对 照 组 喂 以 正 常 饲 料, 其 他 各 组 小 鼠 喂 以 高 脂 饲 料, 连 续 喂 养 8 周 高 脂 饲 料 配 方 为 [11] : 68.3% 基 础 饲 料 1% 胆 固 醇 0.2% 猪 胆 盐 10% 猪 油 [12] 10% 蔗 糖 10% 蛋 黄 粉 0.5% 食 盐 ; 采 用 索 氏 提 取 法 测 得 饲 料 中 脂 肪 含 量 为 19.69%; 采 用 菲 林 试 剂 直 接 滴 定 [13] [14] 法 测 得 饲 料 中 总 糖 含 量 为 37.04%; 采 用 凯 氏 定 氮 法 测 得 饲 料 中 蛋 白 质 含 量 为 10.12% 芝 麻 素 预 防 组 小 鼠 第 1 周 开 始 灌 胃 相 应 剂 量 的 芝 麻 素, 连 续 8 周 ; 芝 麻 素 治 疗 组 小 鼠 第 5 周 开 始 灌 胃 相 应 剂 量 的 芝 麻 素, 连 续 4 周 每 周 称 小 鼠 体 质 量 一 次, 并 按 此 调 整 芝 麻 素 的 剂 量 于 实 验 结 束 取 血, 分 离 血 清 ; 解 剖 小 鼠, 取 肝 脏, 称 质 量, 计 算 肝 指 数 肝 湿 质 量 /g 肝 指 数 /%= 体 质 量 /g 血 清 TG T-CHO HDL-C 含 量 的 测 定 采 用 甘 油 氧 化 法 测 定 血 清 中 TG 含 量 ; 采 用 COD-PAP 法 测 定 T-CHO 含 量 ; 直 接 分 光 光 度 法 测 定 HDL-C 含 量, 结 果 以 mmol/l 表 示 具 体 操 作 方 法 按 试 剂 盒 说 明 书 进 行 血 清 中 游 离 脂 肪 酸 组 成 及 比 例 的 测 定 采 用 气 相 色 谱 质 谱 联 用 仪 检 测 游 离 脂 肪 酸 种 类 及 比 例 [15] 样 品 制 备 : 量 取 0.1mL 血 清, 加 入 1mL 正 己 烷 溶 解 后 加 入 0.5mol/L KOH- 甲 醇 溶 液 0.5mL 在 60 水 浴 中 振 荡 30min, 冷 却 后 加 入 1mL 正 己 烷, 用 超 纯 水 定 容 到 5mL 后 静 置 离 心 取 上 清 液 气 相 色 谱 的 条 件 : 火 焰 离 子 检 测 器 (FID) 温 度 260, 进 样 口 温 度 250, 分 流 比 为 5:1; 程 序 升 温 过 程 :200 (1min),3 /min 升 至 230 保 留 9min; 载 气 为 氦 气 通 过 质 谱 分 析 各 峰 的 脂 肪 酸 组 成, 并 采 用 面 积 归 一 化 的 方 法 确 定 各 种 脂 肪 酸 的 含 量 MDA 含 量 的 测 定 采 用 硫 代 巴 比 妥 酸 比 色 法 [16], 根 据 1,1,3,3- 四 乙 氧 基 丙 烷 (TEP) 标 准 曲 线 计 算 MDA 含 量, 结 果 以 nmol/mg pro 表 示 蛋 白 质 含 量 测 定 采 用 改 良 Lowry 氏 法 T-AOC 活 性 测 定 采 用 Fe 2+ 菲 啉 类 络 合 比 色 法 测 定 肝 脏 总 抗 氧 化 能 力 活 性 其 活 力 单 位 以 U/mg pro 表 示 GPT GOT 活 性 测 定 采 用 2,4- 二 硝 基 苯 肼 法 测 定 血 清 GPT GOT 的 含 量, 其 结 果 以 U/L 表 示 参 照 试 剂 盒 进 行 肝 脏 病 理 学 组 织 学 观 察 取 各 小 鼠 相 同 部 位 肝 组 织, 用 10% 甲 醛 溶 液 固 定, 常 规 方 法 脱 水 浸 蜡 包 埋,HE 染 色, 光 镜 观 察 肝 脏 组 织 病 理 学 改 变 1.5 统 计 学 处 理 数 据 均 以 x ±s 表 示, 组 间 比 较 采 用 t 检 验 2 结 果 与 分 析 2.1 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 体 质 量 及 肝 指 数 的 影 响
3 营 养 卫 生 食 品 科 学 2012, Vol.33, No 喂 饲 高 脂 饲 料 前 小 鼠 毛 色 白, 有 光 泽 喂 饲 高 脂 饮 食 8 周 后, 小 鼠 毛 色 灰 暗, 具 有 油 腻 感, 体 质 量 降 低, 摄 食 量 减 少, 行 动 缓 慢, 精 神 萎 靡 各 组 小 鼠 体 质 量 如 表 1 所 示, 与 正 常 对 照 组 比 较, 模 型 对 照 组 小 鼠 体 质 量 明 显 偏 低, 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 组 (50 100mg/(kg d) ) 小 鼠 体 质 量 显 著 大 于 模 型 对 照 组 说 明 长 期 的 高 脂 饮 食 可 能 导 致 小 鼠 肝 脏 病 变, 形 成 消 耗 性 的 不 良 体 质, 使 体 质 量 降 低 ; 芝 麻 素 能 明 显 缓 解 该 不 良 体 质 造 成 的 体 质 量 减 轻 肉 眼 观 察 小 鼠 肝 组 织, 可 见 正 常 对 照 组 小 鼠 肝 组 织 表 面 颜 色 为 暗 红 色, 无 油 腻 感 ; 模 型 对 照 组 肝 脏 多 表 现 为 颜 色 发 黄 体 积 增 大 切 面 油 腻, 说 明 脂 肪 肝 模 型 建 立 成 功 芝 麻 素 各 给 药 组 肝 脏 较 模 型 组 颜 色 偏 红, 体 积 较 模 型 组 小 各 组 小 鼠 肝 湿 质 量 及 肝 指 数 如 表 1 所 示, 与 正 常 对 照 组 比 较, 模 型 对 照 组 小 鼠 肝 湿 质 量 和 肝 指 数 明 显 高 于 正 常 组, 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (25 50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 组 (50 100mg/(kg d)) 小 鼠 肝 湿 质 量 和 肝 指 数 显 著 低 于 模 型 对 照 组, 说 明 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 肝 指 数 及 肝 组 织 外 观 有 明 显 的 改 善 作 用 表 1 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 体 质 量 与 肝 脏 指 数 的 影 响 ( x ±s, n=10) Table 1 Effect of sesamin on body weigh and liver index in NAFLD mice( x ±s, n=10) 组 别 剂 量 /(mg/(kg d)) 体 质 量 /g 肝 湿 质 量 /g 肝 指 数 /(mg/g) 正 常 对 照 组 ±8.32* 1.28±0.06** 41.58±6.36** 模 型 对 照 组 ±9.14 # 1.54±0.04 ## 76.03±4.41 ## 预 防 低 剂 量 组 ±2.23 ## 1.45±0.11* ## 72.32±3.97 ## 预 防 高 剂 量 组 ±4.06** 1.21±0.06** # 38.53±5.90** 治 疗 低 剂 量 组 ± ±0.07** # 51.76±3.73** ## 治 疗 高 剂 量 组 ± ±0.17** ## 43.01±5.63** 注 : *. 与 模 型 对 照 组 相 比, 有 显 著 性 差 异 (P < 0.05); **. 与 模 型 对 照 组 相 比, 有 极 显 著 性 差 异 (P<0.01);#. 与 正 常 对 照 组 相 比, 有 显 著 性 差 异 (P<0.05), ##. 与 正 常 对 照 组 相 比, 有 极 显 著 性 差 异 (P < 0.01) 下 同 2.2 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 血 脂 TG T-CHO HDL-C 的 影 响 正 常 机 体 的 血 脂 代 谢 处 于 动 态 平 衡 状 态, 血 清 中 TG T-CHO HDL-C 含 量 是 反 映 机 体 血 脂 代 谢 的 重 要 指 标 当 摄 入 脂 肪 过 多 时, 可 引 起 血 脂 代 谢 紊 乱 表 2 结 果 表 明, 与 正 常 对 照 组 比 较, 模 型 对 照 组 血 清 TG T-CHO 含 量 显 著 升 高, HDL-C 含 量 显 著 降 低 ; 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (25 50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 组 (50 100mg/(kg d)) 使 小 鼠 血 清 TG T-CHO 含 量 显 著 降 低, 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 组 (50 100mg/(kg d) ) 使 小 鼠 血 清 HDL-C 含 量 显 著 升 高 说 明 芝 麻 素 可 降 低 NAFLD 小 鼠 血 清 TG T-CHO, 升 高 血 清 HDL-C 含 量, 改 善 血 脂 代 谢 文 献 [4-9] 报 道 芝 麻 素 可 明 显 降 低 高 血 脂 症 大 鼠 血 清 胆 固 醇 和 甘 油 三 酯 含 量, 上 调 肝 脏 脂 肪 代 谢 相 关 酶 和 降 低 脂 肪 合 成 酶 活 性 与 表 达 量 因 此 本 研 究 结 果 在 芝 麻 素 影 响 血 脂 水 平 方 面 与 相 关 文 献 报 道 一 致 表 2 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 血 脂 水 平 的 影 响 ( x ±s, n=10) Table 2 组 别 Effect of sesamin on serum lipid levels of NAFLD mice 剂 量 / (mg/(kg d)) ( x ±s, n=10) TG 含 量 / T-CHO 含 量 / HDL-C 含 量 / 正 常 对 照 组 ±0.60* 2.05±0.12** 0.97±0.47** 模 型 对 照 组 ±0.66 # 2.98±0.25 ## 0.47±0.23 ## 预 防 低 剂 量 组 ±0.18** 2.28±0.21** # 0.62±0.15 预 防 高 剂 量 组 ±0.13** # 2.14±0.15** 0.76±0.16** 治 疗 低 剂 量 组 ±0.47* 2.25±0.30** 0.75±0.15** 治 疗 高 剂 量 组 ±0.50** 1.96±0.09** 0.81±0.15** 2.3 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 血 清 游 离 脂 肪 酸 组 成 及 含 量 的 影 响 通 过 气 质 联 用 仪 测 得 血 清 游 离 脂 肪 酸 的 色 谱 图 如 图 1 所 示, 出 峰 的 游 离 脂 肪 酸 依 次 为 : 软 脂 酸 (C 16:0 ) 硬 脂 酸 (C 18:0 ) 油 酸 (C 18:1 ) 亚 油 酸 (C 18:2 ) 花 生 四 烯 酸 (C 20:4 ) μv( 10 6 ) Fig /min 1. 软 脂 酸 (C 16:0 ) ; 2. 硬 脂 酸 (C 18:0 ) ; 3. 油 酸 (C 18:1 ) ;4. 亚 油 酸 (C 18:2 );5. 花 生 四 烯 酸 (C 20:4 ) 图 小 鼠 血 清 游 离 脂 肪 酸 的 气 相 色 谱 图 Gas chromatogram of free fatty acids in mouse serum 表 3 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 血 清 中 脂 肪 酸 组 成 比 例 的 影 响 ( x ±s, n=10) Table 3 Effect of sesamin on serum free fatty acid composition in NAFLD mice( x ±s, n=10) 组 别 C 16:0 C 18:0 C 18:1 C 18:2 C 20:4 正 常 对 照 组 ±1.336* ±1.266** ± ±1.332** 8.136±1.060** 模 型 对 照 组 ±1.397 # ±1.546 ## ± ±1.715 ## 5.764±1.466 ## 预 防 低 剂 量 组 ±0.656** ±0.466 ## ±1.202 # ±0.906 ## 7.179±1.790 预 防 高 剂 量 组 ±0.508** # ±1.344* ±1.925** ## ±1.024** ## 7.334±1.186* 治 疗 低 剂 量 组 ±0.626** # ± ±1.672** # ±0.853** 6.932±0.586* ## 治 疗 高 剂 量 组 ±2.476** ## ±1.478 ## ±1.872** ## ±2.152** 9.884±2.200** # 不 同 的 游 离 脂 肪 酸 对 脂 质 代 谢 有 着 不 同 的 影 响, 目 前 认 为 不 饱 和 脂 肪 酸 对 血 脂 代 谢 有 良 好 影 响, 升 高 不 饱 和 脂 肪 酸 的 比 例 在 调 节 血 脂 保 护 肝 功 能 方 面 具 有 积 极 作 用 [15,17] 未 见 芝 麻 素 影 响 血 清 游 离 脂 肪 酸 组 成 及 比 例 相 关 的 文 献 报 道 表 3 结 果 表 明, 与 正 常 对 照 组 比, 模 型 对 照 组 血 清 游 离 脂 肪 酸 中 软 脂 酸 (C 16:0 ) 和 硬 脂 酸 (C 18:0 ) 的 比 例 显 著 升 高, 亚 油 酸 (C 18:2 ) 和 花 生 四 烯 酸 (C 20:4 ) 比 例 显 著 降 低 芝 麻 素 预 防 剂 量 (50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 组 (50 100mg(kg d)) 血 清 游 离 脂 肪 酸 中 的 软 脂 酸 (C 16:0 ) 的 比 例 显 著 降 低, 油 酸 (C 18:1 ) 亚 油 酸 (C 18:2 ) 花 生 四 烯 酸 %
4 , Vol.33, No.23 食 品 科 学 营 养 卫 生 (C 20:4 ) 的 比 例 显 著 升 高 ; 硬 脂 酸 (C 18:0 ) 比 例 仅 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (50mg/(kg d)) 有 显 著 性 改 变 说 明 芝 麻 素 能 调 节 血 清 中 游 离 脂 肪 酸 的 组 成 比 例, 提 高 不 饱 和 脂 肪 酸 中 油 酸 (C 18:1 ) 亚 油 酸 (C 18:2 ) 和 花 生 四 烯 酸 (C 20:4 ) 比 例, 降 低 饱 和 脂 肪 酸 中 软 脂 酸 (C 16:0 ) 和 硬 脂 酸 (C 18:0 ) 比 例, 对 防 治 NAFLD 小 鼠 高 脂 血 症, 减 轻 肝 脂 肪 变 性 程 度 具 有 积 极 的 意 义 2.4 芝 麻 素 对 肝 脏 抗 氧 化 能 力 的 影 响 脂 质 过 氧 化 产 物 (MDA) 和 T-AOC 是 反 应 机 体 抗 氧 化 能 力 的 重 要 指 标 表 4 结 果 表 明, 模 型 对 照 组 小 鼠 肝 组 织 T-AOC 活 性 含 量 显 著 低 于 正 常 对 照 组,MDA 含 量 显 著 高 于 正 常 对 照 组 ; 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (50mg/(kg d)) 治 疗 (50 100mg/(kg d)) 剂 量 组 的 肝 组 织 T-AOC 活 性 显 著 高 于 模 型 对 照 组,MDA 含 量 显 著 低 于 模 型 对 照 组 说 明 芝 麻 素 能 减 少 肝 脏 脂 质 过 氧 化, 提 高 机 体 的 抗 氧 化 能 力, 从 而 降 低 肝 脏 脂 肪 变 性 程 度 文 献 [18] 报 道 芝 麻 素 具 有 体 外 清 除 自 由 基 能 力, 由 强 到 弱 依 次 为 DPPH 自 由 基 OH O 2- ; 文 献 [10] 报 道 芝 麻 素 具 有 降 低 高 血 脂 症 大 鼠 血 清 MDA 升 高 血 清 SOD GSH-Px 活 力 的 作 用 因 此 本 研 究 结 果 在 芝 麻 素 抗 氧 化 作 用 机 理 方 面 与 相 关 文 献 报 道 一 致 表 4 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 肝 组 织 T-AOC MDA 的 影 响 ( x ±s, n=10) Table 4 组 别 Effect of sesamin on liver T-AOC and MDA in NAFLD mice( x ±s, n=10) 剂 量 /(mg/(kg d)) T-AOC 活 力 / (U/mg pro) MDA 含 量 / (nmol/mg) 正 常 对 照 组 ±0.20** 2.09±0.49** 模 型 对 照 组 ±0.47 ## 2.92±0.43 ## 预 防 低 剂 量 组 ±0.56 # 2.60±0.22 # 预 防 高 剂 量 组 ±0.67** ## 2.10±0.19** 治 疗 低 剂 量 组 ±0.18** ## 2.23±0.24** 治 疗 高 剂 量 组 ±0.44** ## 2.01±0.14** 2.5 芝 麻 素 对 肝 细 胞 损 伤 的 影 响 表 5 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 GPT GOT 活 力 的 影 响 ( x ±s, n=10) Table 5 Effect of sesamin on serum GPT and GOT in NAFLD mice ( x ±s, n=10) 组 别 剂 量 /(mg/(kg d)) GPT 活 力 /(U/L) GOT 活 力 /(U/L) 正 常 对 照 组 ±13.6** ±41.86* 模 型 对 照 组 ±12.52 ## ±34.85 # 预 防 低 剂 量 组 ±12.98** ±23.25 预 防 高 剂 量 组 ±7.24** ±17.20** 治 疗 低 剂 量 组 ±9.01* # ±30.47* 治 疗 高 剂 量 组 ±11.93** ±12.15** GPT 和 GOT 是 反 应 肝 功 能 损 害 的 重 要 指 标 表 5 结 果 表 明, 模 型 对 照 组 小 鼠 血 清 GPT GOT 活 力 显 著 高 于 正 常 对 照 组 ; 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (25 50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 组 (50 100mg/(kg d)) 血 清 GPT 含 量 显 著 低 于 模 型 对 照 组 ; 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 组 (50 100mg/(kg d)) 血 清 GOT 含 量 显 著 低 于 模 型 对 照 组 说 明 芝 麻 素 能 改 善 肝 功 能, 降 低 肝 细 胞 的 损 伤 程 度 文 献 [3] 报 道 芝 麻 素 可 显 著 改 善 扑 热 息 痛 引 起 的 急 性 肝 损 伤, 减 轻 酒 精 所 致 的 亚 急 性 肝 损 伤, 降 低 四 氯 化 碳 对 肝 脏 的 慢 性 损 伤 和 延 缓 肝 纤 维 化, 说 明 芝 麻 素 具 有 保 肝 作 用 因 此 本 研 究 结 果 在 芝 麻 素 保 肝 作 用 机 理 方 面 与 相 关 文 献 报 道 一 致 2.6 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 肝 组 织 脂 肪 化 病 变 的 病 理 学 影 响 Ⅰ Ⅳ Ⅱ 100μm 100μm 100μm Ⅴ 100μm 100μm 100μm Fig.2 Ⅰ. 正 常 对 照 组 ;Ⅱ. 模 型 对 照 组 ;Ⅲ. 预 防 低 剂 量 组 ; Ⅳ. 预 防 高 剂 量 组 ;Ⅴ. 治 疗 低 剂 量 组 ;Ⅵ. 治 疗 高 剂 量 组 图 2 Ⅲ Ⅵ 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 的 病 理 组 织 学 观 察 影 响 Histopathologic changes of NAFLD mouse liver with and without sesamin administration 图 2 结 果 表 明, 正 常 组 小 鼠 肝 小 叶 结 构 清 晰, 肝 细 胞 索 排 列 整 齐, 呈 放 射 状, 肝 窦 正 常, 胞 核 结 构 清 晰 模 型 组 小 鼠 肝 细 胞 明 显 肿 胀, 细 胞 中 有 大 量 脂 肪 积 累, 核 被 挤 于 细 胞 边 缘 ; 肝 细 胞 索 排 列 松 散, 肝 小 叶 结 构 不 清 楚 ; 少 数 可 见 有 肝 细 胞 碎 屑 样 坏 死 和 炎 细 胞 浸 润 芝 麻 素 预 防 剂 量 组 (50mg/(kg d)) 治 疗 剂 量 组 (50 100mg/(kg d)) 小 鼠 肝 细 胞 肿 胀 明 显 减 轻, 脂 肪 空 泡 显 著 减 小, 肝 细 胞 索 排 列 较 整 齐, 肝 小 叶 和 胞 核 结 构 较 清 晰 说 明 芝 麻 素 对 NAFLD 小 鼠 肝 组 织 脂 肪 化 病 变 具 有 明 显 的 改 善 作 用 3 结 论 3.1 芝 麻 素 对 非 酒 精 性 脂 肪 肝 小 鼠 体 质 量 肝 指 数 和 肝 脏 外 观 有 明 显 的 改 善 作 用 3.2 芝 麻 素 可 使 非 酒 精 性 脂 肪 肝 小 鼠 血 清 TG T-CHO 含 量 显 著 降 低, HDL-C 含 量 显 著 升 高 ; 说 明 芝 麻 素 能 明 显 降 低 血 脂 水 平 芝 麻 素 还 能 调 节 小 鼠 血 清 游 离 脂 肪 酸 的 组 成 比 例, 提 高 不 饱 和 脂 肪 酸 中 亚 油 酸 (C 18:1 ) 亚 油 酸 (C 18:2 ) 和 花 生 四 烯 酸 (C 20:4 ) 的 比 例, 降 低 饱 和 脂 肪 酸 中 软 脂 酸 (C 16:0 ) 和 硬 脂 酸 (C 18:0 ) 的 比 例, 对 血 脂 代 谢 调 节 有 良 好 的 影 响 3.3 芝 麻 素 可 明 显 降 低 非 酒 精 性 脂 肪 肝 小 鼠 肝 组 织 脂 质 过 氧 化 产 物 MDA 的 含 量, 提 高 肝 组 织 T-AOC 的 活 性, 降 低 血 清 GPT 和 GOT 活 力 病 理 组 织 学 观 察 芝 麻 素 可 明 显 减
5 营 养 卫 生 食 品 科 学 2012, Vol.33, No 轻 非 酒 精 性 脂 肪 肝 小 鼠 肝 细 胞 脂 肪 化 病 变 程 度 说 明 芝 麻 素 能 显 著 提 高 机 体 抗 氧 化 能 力, 减 轻 肝 细 胞 损 伤 程 度 3.4 芝 麻 素 具 有 防 治 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 作 用, 作 用 机 理 与 降 低 血 脂 调 节 血 脂 游 离 脂 肪 酸 组 成 提 高 机 体 抗 氧 化 能 力 与 抑 制 肝 细 胞 损 伤 有 关 参 考 文 献 : [1] KANU P J, ZHU Kerui, KANU J B, et al.biologically active components and nutraceuticals in sesame and related products:a review and prospect[j]. Trends in Food Science & Technology, 2007, 18(12): [2] PAUL A. Nonalcoholic fatty liver disease[j]. The New England Journal of Medicine, 2002, 346(16): [3] 汪 五 三, 宋 建 国. 芝 麻 素 保 肝 作 用 实 验 研 究 [J]. 中 药 药 理 与 临 床, 2006, 22(3): [4] 郭 莉 群, 杨 解 人, 孔 祥. 芝 麻 素 对 代 谢 综 合 征 性 脂 肪 肝 大 鼠 肝 组 织 inos 和 NT 表 达 的 影 响 [J]. 中 国 病 理 生 理 杂 志, 2010, 26(2): [5] ASHAKUMARY L, ROUYER I, TAKAHASHI Y, et al. Sesamin, a sesame lignan, is a potent inducer of hepatic fatty acid oxidation in the rat[j]. Metabolism, 1999, 48(10): [6] IDE T, ASHAKUMARY L, TAKAHASHI Y, et al. Sesamin, a sesame lignan, decreases fatty acid synthesis in rat liver accompanying the down-regulation of sterol regulatory element binding protein-1[j]. Biochimica et Iophysica Acta, 2001, 1534: [7] ROGI T, TOMIMORI N, ONO Y, et al. The mechanism underlying the synergetic hypocholesterolemic effect of sesamin and α-tocopherol in rats fed a high-cholesterol diet[j]. Journal of Pharmacological Sciences, 2011, 115: [8] LIM J S, ADACHI Y, TAKAHASHI Y, et al. Comparative analysis of sesame lignans (sesamin and sesamolin) in affecting hepatic fatty acid metabolism in rats[j]. British Journal of Nutrition, 2007, 97: [9] TSURUOKA N, KIDOKORO A, MATSUMOTO I, et al. Modulating effect of sesamin, a functional lignan in sesame seeds, on the transcription levels of lipid- and alcohol-metabolizing enzymes in rat liver: A DNA microarray study[j]. Biosci Biotechnol Biochem, 2005, 69(1): [10] 安 建 博, 张 瑞 娟. 芝 麻 素 对 高 脂 血 症 大 鼠 脂 代 谢 的 作 用 [J]. 西 安 交 通 大 学 学 报 : 医 学 版, 2010, 31(1): [11] 刘 贺 荣, 李 国 莉, 任 彬 彬, 等. 非 酒 精 性 脂 肪 肝 动 物 模 型 的 建 立 [J]. 宁 夏 医 科 大 学 学 报, 2010, 32(8): [12] 中 华 人 民 共 和 国 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局, 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员. GB/T /ISO 6492:199 饲 料 中 粗 脂 肪 的 测 定 [S] [13] 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部, 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会. GB/T 食 品 中 还 原 糖 的 测 定 [S] [14] 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部, 全 国 饲 料 工 业 标 准 化 技 术 委 员 会. GB/T 饲 料 中 粗 蛋 白 的 测 定 方 法 [S] [15] 阎 明, 孟 繁 立, 董 春 峡, 等. 非 诺 贝 特 和 辛 伐 他 汀 对 酒 精 性 脂 肪 肝 血 清 游 离 脂 肪 酸 谱 的 影 响 [J]. 中 国 药 理 学 通 报, 2003, 19(11): [16] 钟 福 孙, 胡 文 艺, 冯 弛. 硫 代 巴 比 妥 酸 比 色 法 测 定 血 清 过 氧 化 脂 质 [J]. 临 床 检 验 学 杂 志, 1986(4): [17] 闫 明, 吕 瑞 娟, 贾 晓 青, 等. 高 血 脂 症 性 脂 肪 肝 大 鼠 血 清 游 离 脂 肪 酸 的 变 化 及 意 义 [J]. 山 东 医 药, 2001, 41(15): 6-7. [18] 金 青 哲, 刘 元 法, 王 兴 国, 等. 芝 麻 素 抗 氧 化 性 的 初 步 研 究 [J]. 中 国 粮 油 学 报, 2005, 20(4):
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