总蛋白（TP）测定试剂盒使用说明书

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裔准王
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1 丙氨酸氨基转移酶 () 测定试剂盒使用说明书简介用于自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶 () 活性人体多种脏器都含有, 主要分布在肝肾心肌肉, 肝内活性远远超过其它脏器的活性, 主要存在肝细胞质的可溶性部分, 故测定活性可反映肝脏损害具有特殊的意义测定方法 IFCC 推荐速率法测定原理 L 丙氨酸 +α 酮戊二酸丙酮酸 + 谷氨酸丙酮酸 +NADH+H LDH L 乳酸 +NAD + +H 2 O NADH 的减少, 引起在波长 340nm 处的吸光度下降, 下降速率与活性成正比试剂盒组成试剂规格组份浓度液体双试剂, Tris 缓冲液 NADH LDH 适量试剂 Ⅰ: 试剂 Ⅱ=2:1 L- 丙氨酸 α- 酮戊二酸样本要求不溶血血清或肝素抗凝血浆样品中丙氨酸氨基转移酶在 2-8 可稳定 7 天测定步骤 1. 本试剂为液体双试剂, 可直接使用 2. 测定参数 : 波长 :340nm; 光径 :10mm; 温度 :37 3. 测定方法 : 加入物空白管测定管试剂 Ⅰ 蒸馏水 (ul) 9 - 标准液 (ul) - - 样本 (ul) - 9 混匀, 置 37 孵育 1-5 分钟试剂 Ⅱ(uL) 混匀, 置 37 延滞 1 分钟后读取各管吸光度, 每隔 1 分钟读 1 次, 共读 3 分钟, 计算平均每分钟吸光度变化率 ΔA/min 4. 上机参数 : 温度 37 延迟时间 60 秒样本量 9uL 主波长 340nm 试剂 Ⅰ 150uL 副波长 450nm 试剂 Ⅱ 75uL 读数时间 180 秒 5. 计算 : 活性 ()= (ΔAU/min ΔAB/min) TV 10 3 ε SV L = (ΔAU/min ΔAB/min) K 1

盒组成试剂规格组份浓度液体双试剂, Tris 缓冲液 NADH LDH 适量试剂 Ⅰ: 试剂 Ⅱ=2:1 L- 丙氨酸 α- 酮戊二酸样本要求不溶血血清或肝素抗凝血浆样品中丙氨酸氨基转移酶在 2-8 可稳定 7 天测定步骤 1.

2 式中 : TV 总反应物体积 (μl); SV 样本体积 (μl); ε NADH 在 340nm 处的毫摩尔吸光系数为 6.22; L 比色杯光径 (cm) K=-4180 (1.0cm 光径 ) 性能指标 1 空白吸光度 A 1.000; 2 线性范围批内 / 分析内精密度 CV 5%; 批间相对极差 7%; 4 准确性相对偏差不超过 ±10% 5 抗干扰性血清胆红素 <258umol/L TG<12mmol/L 维生素 <100mg/L 丙酮酸 <500μmol/L, 对测定结果无显著影响, 中等度溶血标本 (Hb 约 1000mg/L), 测定结果无显著影响 ; 明显溶血 (Hb 2800mg/L) 标本, 测定结果偏低 6 方法对照本试剂盒检测方法与赖氏法进行相关性比较试验, 结果如下 :Y=0.9895X-2.2,r=0.9986, n=30,y 为本法试剂,X 为赖氏法试剂注意事项 1 试剂和样品可因仪器要求不同, 按比例增减, 计算公式不变 2 试剂请放 2-8 储存, 避免冷冻污染, 否则将导致失效 3 高脂或黄疸样本在 340nm 处有较高的吸收值在这些样本的测定中, 高活性的丙氨酸氨基转移酶虽然可能将底物耗尽, 但在 340nm 处仍有较高吸收值, 此时样本应稀释后再测试 4 请勿用嘴直接吸取试剂, 避免接触皮肤眼睛及粘膜, 一旦接触, 应即用水冲洗污染部位 ; 5 建议使用 Roche 多项校准血清校准 K 值, 校准周期为 30 天, 更换试剂批号时需要重新校准使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控, 测定的控制值应在确定的限制范围内, 若控制值失控, 实验室应采取适当的纠正措施 6 可以采用单一试剂模式进行检测, 临用时将试剂 Ⅰ 与试剂 Ⅱ 按 2:1 比例混合若混合后试剂空白小于 ( 以水为空白,340nm 波长 1cm 光径 ) 时, 表明试剂已失效参考范围 8-40(37 ) 建议各地建立本地区的参考值范围储存条件与有效期未开封的试剂在 2-8 避光条件下可稳定 12 个月, 置 37 水浴至少可稳定 7 天试剂开封后, 存放在分析仪试剂仓中的试剂在 30 天内性质稳定参考文献 1. Clin. Chem. Acta 105 (1980) S Synopsis der Leberkrankheiten: H. Wallhöfer, E. Schmid u. F. W. Schmidt, G. Thieme Verlag, Stuttgart Thefeld W. et al, Dt. Med. Wschr. 99 (1974),

本 (Hb 约 1000mg/L), 测定结果无显著影响 ; 明显溶血 (Hb 2800mg/L) 标本, 测定结果偏低 6 方法对照本试剂盒检测方法与赖氏法进行相关性比较试验, 结果如下 :Y=0.9895X-2.2,r=0.

3 日立 7020 参数参数号界面内容 1 分析项目 2 分析方法 RateA 4 反应时间 10 5 测光点测光点次波长主波长样本量 9 12 R1 试剂量 R1 位置 # 14 R1 瓶尺寸 L 15 R2 量 0 16 R2 位置 0 17 R2 瓶尺寸 0 18 R3 量 R3 位置 # 20 R3 瓶尺寸 S 21 校准模式 linear 23 校准液 Con 校准液 pos 校准液 Con.2 C 26 校准液 pos.2 # 27 校准液 Con 校准液 pos 校准液 Con 校准液 pos 校准液 Con 校准液 pos 校准液 Con 校准液 pos K1 因数偏移吸光度值离散允许吸光 S1ABS 下限 S1ABS 上限反应吸光度界 0 50 反应方向 D 54 正常值下限 8 55 正常值上限 40 日立 7060/7080 参数 TEST NAME ASSAY TYPE Rate A Wavelength(2nd/primary) 405/340 Time 10 Point Sample vol 9 Reagent R1 150 Reagent R2 0 Reagent R3 75 Reagent R4 0 Abs.limit 0 Dec/inc Dec CAL.TYPE Point 1 Span point 0 STD(1)-Conc.pos 0-water STD(n)-Conc.pos --- SD limit K-factor 日立 7170/7180/7600 参数 TEST NAME ASSAY TYPE Rate A Wavelength(2nd/primary) 405/340 Time 10 Point Sample vol 9 Reagent R1 150 Reagent R2 0 Reagent R3 75 Reagent R4 0 Abs.limit 0 Dec/inc Dec CAL.TYPE Point 1 Span point 0 STD(1)-Conc.pos 0-water STD(n)-Conc.pos --- SD limit K-factor

4 0 31 校准液 Con.5 0 32 校准液 pos.5 0 33 校准液 Con.6 0 34 校准液 pos.6 0 36 K1 因数 -4180 44 偏移吸光度值 999.

4 奥林帕斯系列 BECKMAN-LX20 Test Name Chem Sample Volume 9 Reaction Type Rate1 Reagent R1 Volume 150 R2 Volume 75 Reaction Direction Negative Wave-Length Method Pri 340 Sec 410 Rate Math Modle Primary Wavelength 340 Secondary Wavelength 410 Reaction Slope - Cal.Time Limit 0Hours Measuring Point 1:First/Last K Factor 8360 Measuring Point 2:First/Last ity 30% First Inject Vol Secondary A/150μl B/75μl/-180Sec No Lag-Time Yes Third Inject Vol/Inject Time None/0μl/0Sec Min OD Max OD L-H Sample Volume 9μl Reagent Fst L-H Reagent Blank Start Time -60 OD Limit Lst L-H Dynamic Ranger L-H End Read -40 Reaction1 Start Time 60 Calibration Factor Calibration Type Formula Conc A 1 B 0 MB Y=AX+B End Read 120 Reaction2 Start Time End Read Usable Result Lower Limit 0 Upper Limit 800 MB Type Factor 4180 Initial Rate

Time Limit 0Hours Measuring Point 1:First/Last 14-18 K Factor 8360 Measuring Point 2:First/Last ity 30% First Inject Vol Secondary A/150μl B/75μl/-180Sec No Lag-Time Yes Third Inject Vol/Inject Time

5 AEROSET/C-8000 /TBA120 Name Reaction mode Rate Down Primary wavelength 340 Secondary wavelength 404 Main read time Flex read time Blank read time Last read time 33 Absorbance range Sample blank type Blank assay Sample volume 9 R1 reagent volume 150 R1 water volume 0 R1 Dispense mode Type0 R2 reagent volume 75 R2 water volume 0 R2 Dispense mode Type0 Calibration method Calibration Level 1 Water 0 Calibration Level 2 Factor 4180 Blank absorbance range ity range Result concentration unit Result decimal places 0 BECKMAN-CX 系列 Test Name Reaction Type RATE1 Reaction Directiom Negative s Decimal Precision X Calculation factor 8360 Math Model Primary Wavelength 340 Secondary Wavelength 410 Sample Volume 9 Primary Inject RgtA 150 Primary Inject RgtB 75 Secondary Inject RgtB Add Time Blank Start Read 240 End Read 272 Lowe Abs Limit 0.0 High Abs Limit 2.5 Recation Start Read 90 End Read 210 Lowe Abs Limit -1.5 High Abs Limit 1.5 Usable Range Lower Limit 0 Uppert Limit 1000 Initial Delta Abs 1.5 注 : 本参数仅供参考, 建议各实验室根据仪器的实际情况建立最佳参数某些酶项目, 不推荐使用理论 K 值, 建议使用 Roche 多项校准血清或测定试剂配套校准品进行校准 5

800 Sample blank type Blank assay Sample volume 9 R1 reagent volume 150 R1 water volume 0 R1 Dispense mode Type0 R2 reagent volume 75 R2 water volume 0 R2 Dispense mode Type0 Calibration method

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