Microsoft Word - 新建 Microsoft Word 文档.doc
|
|
|
- 楠洞 仰
- 7 years ago
- Views:
Transcription
1 时 荧 光 定 量 (Realtime )PCR 检 测 服 务 原 理 所 谓 的 实 时 荧 光 定 量 PCR, 其 反 应 体 系 中, 引 入 了 一 种 荧 光 化 学 物 质, 随 着 PCR 反 应 的 进 行,PCR 反 应 产 物 不 断 累 计, 荧 光 信 号 强 度 也 等 比 例 增 加 每 经 过 一 个 循 环, 收 集 一 个 荧 光 强 度 信 号, 这 样 我 们 就 可 以 通 过 荧 光 强 度 变 化 监 测 产 物 量 的 变 化, 从 而 得 到 一 条 荧 光 扩 增 曲 线 一 般 而 言, 荧 光 扩 增 曲 线 可 以 分 三 个 阶 段 : 荧 光 背 景 信 号 阶 段, 荧 光 信 号 指 数 扩 增 阶 段 和 平 台 期 在 荧 光 背 景 信 号 阶 段, 扩 增 的 荧 光 信 号 被 荧 光 背 景 信 号 所 掩 盖, 我 们 无 法 判 断 产 物 量 的 变 化 而 在 平 台 期, 扩 增 产 物 已 不 再 呈 指 数 级 的 增 加 PCR 的 终 产 物 量 与 起 始 模 板 量 之 间 没 有 线 性 关 系, 所 以 根 据 最 终 的 PCR 产 物 量 不 能 计 算 出 起 始 DNA 拷 贝 数 只 有 在 荧 光 信 号 指 数 扩 增 阶 段,PCR 产 物 量 的 对 数 值 与 起 始 模 板 量 之 间 存 在 线 性 关 系, 我 们 可 以 选 择 在 这 个 阶 段 进 行 定 量 分 析 为 了 定 量 和 比 较 的 方 便, 在 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 中 引 入 了 两 个 非 常 重 要 的 概 念 : 荧 光 阈 值 和 CT 值 荧 光 阈 值 是 在 荧 光 扩 增 曲 线 上 人 为 设 定 的 一 个 值, 它 可 以 设 定 在 荧 光 信 号 指 数 扩 增 阶 段 任 意 位 置 上, 但 一 般 我 们 将 荧 光 域 值 的 缺 省 设 置 是 3-15 个 循 环 的 荧 光 信 号 的 标 准 偏 差 的 10 倍 每 个 反 应 管 内 的 荧 光 信 号 到 达 设 定 的 域 值 时 所 经 历 的 循 环 数 被 称 为 CT 值 ( threshold value ) 定 量 荧 光 扩 增 曲 线 是 荧 光 量 与 循 环 数 的 图 表 荧 光 阈 值 线 的 位 置 一 般 事 实 上 位 于 减 去 本 底 的 位 置 上, 这 时 的 荧 光 信 号 超 过 了 荧 光 背 景 信 号 并 且 开 始 增 加 对 某 一 样 品 的 C( t ) 值 就 定 义 为 荧 光 量 与 荧 光 阈 值 线 交 叉 时 的 循 环 数 CT 值 与 起 始 模 板 的 关 系 研 究 表 明, 每 个 模 板 的 CT 值 与 该 模 板 的 起 始 拷 贝 数 的 对 数 存 在 线 性 关 系, 起 始 拷 贝 数 越 多,CT 值 越 小 利 用 已 知 起 始 拷 贝 数 的 标 准 品 可 作 出 标 准 曲 线, 其 中 横 坐 标 代 表 CT 值, 纵 坐 标 代 表 起 始 拷 贝 数 的 对 数 因 此 只 要 获 得 未 知 样 品 的 CT 值,how? 即 可 从 标 准 曲 线 上 计 算 出 该 样 品 的 起 始 拷 贝 数 SYBR Green Ⅰ 荧 光 染 料 荧 光 定 量 PCR 实 验 过 程
2 a. 准 备 样 品 及 试 剂 PCR Master Mix ; 光 学 96 孔 板 和 光 学 盖 ; 客 户 样 品 cdna ( 浓 度 不 低 于 10ng/ul ); b. 设 计 并 合 成 引 物 和 TaqMan 探 针 c. 定 量 PCR 实 验 d. 引 物 和 探 针 稀 释 e. 制 备 标 准 曲 线 样 品 取 一 个 客 户 的 样 品 做 至 少 5 个 梯 度 稀 释, 用 于 做 标 准 曲 线 如 果 需 要 做 绝 对 定 量, 则 先 要 用 客 户 样 品 进 行 扩 增, 把 扩 增 片 段 连 入 质 粒, 通 过 大 肠 杆 菌 扩 增 质 粒, 抽 提 出 质 粒 测 定 浓 度, 换 算 成 目 的 片 段 的 拷 贝 数 或 纳 克 数, 在 将 质 粒 DNA 进 行 至 少 5 个 梯 度 稀 释 用 于 做 标 准 曲 线 ; 如 果 用 看 家 基 因 进 行 相 对 定 量, 则 无 需 制 备 目 的 片 段 的 克 隆 样 品 目 的 基 因 的 荧 光 定 量 PCR ( 每 样 品 每 基 因 都 进 行 三 孔 平 行 实 验, 保 证 实 验 结 果 的 准 确 性 ) 荧 光 定 量 PCR 的 应 用 范 围 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 是 DNA 定 量 技 术 的 一 次 飞 跃 运 用 该 项 技 术, 我 们 可 以 对 DNA RNA 样 品 进 行 定 量 和 定 性 分 析 定 量 分 析 包 括 绝 对 定 量 分 析 和 相 对 定 是 量 分 析 前 者 可 以 得 到 某 个 样 本 中 基 因 的 拷 贝 数 和 浓 度 ; 后 者 可 以 对 不 同 方 式 处 理 的 两 个 样 本 中 的 基 因 表 达 水 平 进 行 比 较 除 此 之 外 我 们 不 定 期 可 以 对 PCR 产 物 或 样 品 进 行 定 性 分 析 : 例 如 利 用 熔 解 曲 线 分 析 识 别 扩 增 产 物 和 引 物 二 聚 体 以 区 分 非 特 异 扩 增 ; 利 用 特 异 性 探 针 进 行 基 因 型 分 析 及 SNP 检 测 等 目 前 实 时 荧 光 PCR 技 术 已 经 被 广 泛 应 用 于 基 础 科 学 研 究 临 床 诊 断 疾 病 研 究 及 药 物 研 发 等 领 域 其 中 最 主 要 的 应 用 集 中 在 以 下 几 个 方 面 : a. 研 究 各 种 处 理 对 细 胞 mrna 表 达 量 变 化 的 影 响 b. 比 较 病 理 组 织 与 正 常 组 织 中 各 种 mrna 表 达 量 差 异 c.dna 或 RNA 的 转 染 量 与 实 验 结 果 关 系 的 研 究
3 d. 基 因 整 合 拷 贝 数 的 研 究 e. 疾 病 药 物 及 医 疗 方 面 : f. 新 药 开 发 药 物 疗 效 研 究 g. 个 人 基 因 型 与 药 物 疗 效 之 间 的 关 系 h. 药 物 治 疗 前 后 相 关 基 因 表 达 量 的 变 化 I. 疾 病 的 发 病 监 控 建 立 病 原 体 病 分 子 诊 断 标 准 技 术 服 务 内 容 和 价 格 : a. 引 物 探 针 的 设 计 合 成 和 荧 光 标 记 ; b. 样 品 的 处 理 ( 如 DNA 和 RNA 抽 提 逆 转 录 标 准 品 的 制 备 等 ); c. PCR 条 件 的 摸 索, 产 物 的 鉴 定 ; d. 提 供 配 套 的 内 外 参 照 ; e. 定 量 PCR 实 验 及 结 果 数 据 的 处 理 和 分 析 方 法 样 本 数 收 费 标 准 工 作 日 Taqman 探 针 1-10 个 2000 元 / 条 探 针 设 计 合 成 300 元 / 基 因 样 品 分 析 费 用 300 元 /home 基 因 样 品 分 析 费 用 个 2000 元 / 条 探 针 设 计 合 成 250 元 / 基 因 样 品 分 析 费 用 15 个 工 作 日 20 个 工 作 日 250 元 / home 基 因 样 品 分 析 费 用 30 个 以 上 2000 元 / 条 探 针 设 计 合 成 230 元 / 基 因 样 品 分 析 费 用 30 个 工 作 日
4 230 元 / home 基 因 样 品 分 析 费 用 SYBR Green 1-10 个 400 元 / 基 因 样 品 分 析 费 用 15 个 工 作 日 元 / home 基 因 样 品 分 析 费 用 10 个 以 上 350 元 / 基 因 样 品 分 析 费 用 15 个 工 作 日 250 元 / home 基 因 样 品 分 析 费 用 实 验 案 例 : 实 时 荧 光 定 量 PCR 实 验 报 告 范 例 实 验 目 的 : 肿 瘤 细 胞 分 别 进 行 2 种 不 同 情 况 的 药 物 处 理 后, 测 定 其 Caspase3 基 因 的 mrna 表 达 量 变 化 3 种 样 品 分 别 为 : 对 照 ( 肿 瘤 细 胞 ) ; 药 物 处 理 1 ( 加 入 第 一 种 药 物 进 行 培 养 的 肿 瘤 细 胞 ); 药 物 处 理 2( 加 入 第 二 种 药 物 进 行 培 养 的 肿 瘤 细 胞 ) 结 果 分 析 使 用 双 标 准 曲 线 法 进 行 相 对 定 量 实 验 报 告 内 容 包 括 : RNA 抽 提 :( Trizol RNA 抽 提 及 质 量 检 测 方 法 ) cdna 合 成 :( cdna 合 成 方 法 ) 实 时 定 量 PCR : 实 时 定 量 PCR 方 法 介 绍 实 时 定 量 PCR 反 应 的 详 细 过 程 实 时 定 量 PCR 使 用 引 物 的 列 表 梯 度 稀 释 的 标 准 品 及 3 个 待 测 样 品 的 待 测 基 因 实 时 定 量 PCR 结 果 梯 度 稀 释 的 标 准 品 及 3 个 待 测 样 品 的 管 家 基 因 ( 内 参 ) 实 时 定 量 PCR 结 果 各 样 品 目 的 基 因 量 以 内 参 校 正 的 计 算 表 格 3 种 样 品 所 抽 提 的 RNA 紫 外 吸 收 值 及 浓 度 : 样 品 OD 260 OD 280 OD 260 /OD 浓 度 (ug/ul)
5 对 照 药 物 处 理 药 物 处 理 待 测 基 因 ( Caspase 3 ) 实 时 定 量 PCR 结 果 Raw Data For Cycling B.FAM/Sybr Quantitation data for Cycling B.FAM/Sybr Standard Curve 内 参 基 因 ( Beta-actin ) 实 时 定 量 PCR 结 果 Raw Data For Cycling B.FAM/Sybr Quantitation data for Cycling B.FAM/Sybr Standard Curve 结 果 校 正 3 种 样 品 待 测 基 因 (Caspase 3) 实 时 定 量 PCR 后 由 标 准 曲 线 图 所 得 测 量 值 为 : 1.36E-04, 3.06E-04 和 3.35E-03 ; 3 种 样 品 内 参 基 因 (beta-actin) 实 时 定 量 PCR 后 由 标 准 曲 线 图 所 得 测 量 值 为 : 1.09E-02,1.16E-02 和 1.33E-02 ; 实 时 定 量 PCR 时 3 种 样 品 上 样 量 均 为 1ul, 然 而 由 于 受 RNA 浓 度 定 量 误 差 和 RNA 逆 转 录 效 率 误 差 等 的 影 响, 每 个 样 品 的 1ul 体 积 的 cdna 其 含 量 并 不
6 完 全 相 同, 为 校 正 此 差 异, 我 们 使 用 管 家 基 因 beta-actin( 不 同 样 品 间 表 达 量 基 本 恒 定 ) 作 为 内 参, 以 样 品 待 测 基 因 得 值 除 以 此 样 品 内 参 得 值, 最 终 得 到 的 比 值 为 样 品 的 待 测 基 因 相 对 含 量 内 参 校 正 列 表 : 样 品 名 称 对 照 药 物 处 理 1 药 物 处 理 2 样 品 编 号 ( 内 参 )beta-actin 1.09E E E-02 ( 待 测 基 因 )Caspase E E E-03 待 测 基 因 以 内 参 校 正 值 Caspase 3/beta-actin 1.25E E E-01 疑 难 解 答 : 请 问 : 在 做 Real-time PCR 时, 对 于 Taqman 探 针 法 和 SYBR Green 染 料 法, 有 什 么 区 别? 选 择 时 有 什 么 不 同 的 要 求 吗? 答 : 目 前 荧 光 实 时 定 量 PCR 所 使 用 的 荧 光 化 学 方 法 主 要 有 五 种, 分 别 是 : 内 嵌 染 料 ( SYBR GreenⅠ) 双 标 记 探 针 FRET 探 针 分 子 信 标 和 Ampliflor SYBR Green Ⅰ 是 一 种 结 合 于 小 沟 中 的 双 链 DNA 结 合 染 料, 与 双 链 DNA 结 合 后, 其 荧 光 大 大 增 强 这 一 性 质 使 其 用 于 扩 增 产 物 的 检 测 非 常 理 想, SYBR Green Ⅰ 的 最 大 吸 收 波 长 约 为 497nm, 发 射 波 长 最 大 约 为 520nm 在 PCR 反 应 体 系 中, 加 入 过 量 SYBR 荧 光 染 料,SYBR 荧 光 染 料 特 异 性 地 掺 入 DNA 双 链 后, 发 射 强 荧 光 信 号, 而 不 掺 入 链 中 的 SYBR 染 料 分 子 仅 有 微 弱 荧 光 信 号 背 景, 从 而 保 证 荧 光 信 号 的 增 加 与 PCR 产 物 的 增 加 同 步 SYBR Green Ⅰ 在 核 酸 的 实 时 检 测 方 面 有 很 多 优 点
7 由 于 它 与 所 有 的 双 链 DNA 相 结 合, 不 必 因 为 模 板 不 同 而 特 别 定 制, 因 此 通 用 性 好, 且 价 格 相 对 较 低 利 用 荧 光 染 料 可 以 指 示 双 链 DNA 熔 点 的 性 质, 通 过 熔 点 曲 线 分 析 可 以 识 别 扩 增 产 物 和 引 物 二 聚 体, 因 而 可 以 区 分 非 特 异 扩 增 此 外, 由 于 一 个 PCR 产 物 可 以 与 多 个 分 子 的 染 料 结 合, 因 此 SYBR Green Ⅰ 的 检 测 灵 敏 度 很 高 但 是, 由 于 SYBR Green Ⅰ 与 所 有 的 双 链 DNA 相 结 合, 因 此 由 引 物 二 聚 体 单 链 二 级 结 构 以 及 错 误 的 扩 增 产 物 引 起 的 假 阳 性 会 影 响 定 量 的 精 确 性 TaqMan 探 针 是 一 种 寡 核 苷 酸 探 针, 荧 光 基 团 连 接 在 探 针 的 5' 末 端, 而 淬 灭 剂 则 在 3' 末 端 当 探 针 与 靶 序 列 配 对 时, 荧 光 基 团 发 射 的 荧 光 因 与 3' 端 的 淬 灭 剂 接 近 而 被 淬 灭 在 进 行 延 伸 反 应 时, 聚 合 酶 的 5' 外 切 酶 活 性 将 探 针 切 断, 使 得 荧 光 基 团 与 淬 灭 剂 分 离, 发 射 荧 光 一 分 子 的 产 物 生 成 就 伴 随 着 一 分 子 的 荧 光 信 号 的 产 生 随 着 扩 增 循 环 数 的 增 加, 释 放 出 来 的 荧 光 基 团 不 断 积 累 因 此 Taqman 探 针 检 测 的 是 积 累 荧 光 常 用 的 荧 光 基 团 是 FAM, TET, VIC, HEX 具 体 原 理 如 下 图 所 示 相 对 于 荧 光 染 料 的 方 法, 探 针 的 方 法 更 准 确, 可 信 度 也 相 对 较 高, 实 验 本 身 的 影 响 因 素 比 较 少, 因 而, 实 验 的 可 操 作 性, 科 重 复 性 也 好, 但 是, 探 针 的 方 法, 相 对 于 染 料 的 方 法 来 说, 价 格 相 对 较 高, 成 本 也 高 如 果 实 验 资 金 允 许 的 话, 还 是 选 用 探 针 的 方 法 更 好 一 些 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 原 理 与 应 用 生 物 谷 网 站 聚 合 酶 链 式 反 应 ( PCR) 可 对 特 定 核 苷 酸 片 断 进 行 指 数 级 的 扩 增 在 扩 增 反 应 结 束 之 后, 我 们 可 以 通 过 凝 胶 电 泳 的 方 法 对 扩 增 产 物 进 行 定 性 的 分 析, 也 可 以 通 过 放 射 性 核 素 掺 入 标 记 后 的 光 密 度 扫 描 来 进 行 定 量 的 分 析 无 论 定 性 还 是 定 量 分 析, 分 析 的 都 是 PCR 终 产 物 但 是 在 许 多 情 况 下, 我 们 所 感 兴 趣 的 是 未 经 PCR 信 号 放 大 之 前 的 起 始 模 板 量 例 如 我 们 想 知 道 某 一 转 基 因 动 植 物 转 基 因 的 拷 贝 数 或 者 某 一 特 定 基 因 在 特 定 组 织 中 的 表 达 量 在 这 种 需 求 下 荧 光 定 量 PCR 技 术 应 运 而 生 所 谓 的 实 时 荧 光 定 量 PCR 就 是 通 过 对 PCR 扩 增 反 应 中 每 一 个 循 环 产 物 荧 光 信 号 的 实 时 检 测 从 而 实 现 对 起 始 模 板 定 量 及 定 性 的 分 析 在 实 时 荧
8 光 定 量 PCR 反 应 中, 引 入 了 一 种 荧 光 化 学 物 质, 随 着 PCR 反 应 的 进 行, PCR 反 应 产 物 不 断 累 计, 荧 光 信 号 强 度 也 等 比 例 增 加 每 经 过 一 个 循 环, 收 集 一 个 荧 光 强 度 信 号, 这 样 我 们 就 可 以 通 过 荧 光 强 度 变 化 监 测 产 物 量 的 变 化, 从 而 得 到 一 条 荧 光 扩 增 曲 线 图 ( 如 图 1) 图 1 实 时 荧 光 扩 增 曲 线 图 一 般 而 言, 荧 光 扩 增 曲 线 扩 增 曲 线 可 以 分 成 三 个 阶 段 : 荧 光 背 景 信 号 阶 段, 荧 光 信 号 指 数 扩 增 阶 段 和 平 台 期 在 荧 光 背 景 信 号 阶 段, 扩 增 的 荧 光 信 号 被 荧 光 背 景 信 号 所 掩 盖, 我 们 无 法 判 断 产 物 量 的 变 化 而 在 平 台 期, 扩 增 产 物 已 不 再 呈 指 数 级 的 增 加 PCR 的 终 产 物 量 与 起 始 模 板 量 之 间 没 有 线 性 关 系, 所 以 根 据 最 终 的 PCR 产 物 量 不 能 计 算 出 起 始 DNA 拷 贝 数 只 有 在 荧 光 信 号 指 数 扩 增 阶 段,PCR 产 物 量 的 对 数 值 与 起 始 模 板 量 之 间 存 在 线 性 关 系, 我 们 可 以 选 择 在 这 个 阶 段 进 行 定 量 分 析 为 了 定 量 和 比 较 的 方 便, 在 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 中 引 入 了 两 个 非 常 重 要 的 概 念 : 荧 光 阈 值 和 CT 值 荧 光 阈 值 是 在 荧 光 扩 增 曲 线 上 人 为 设 定 的 一 个 值, 它 可 以 设 定 在 荧 光 信 号 指 数 扩 增 阶 段 任 意 位 置 上, 但 一 般 我 们 将 荧 光 域 值 的 缺 省 设 置 是 3-15 个 循 环 的 荧 光 信 号 的 标 准 偏 差 的 10 倍 每 个 反 应 管 内 的 荧 光 信 号 到 达 设 定 的 域 值 时 所 经 历 的 循 环 数 被 称 为 CT 值 ( threshold value )( 如 图 2 所 示 )
9 图 2. 荧 光 定 量 标 准 曲 线 CT 值 与 起 始 模 板 的 关 系 研 究 表 明, 每 个 模 板 的 CT 值 与 该 模 板 的 起 始 拷 贝 数 的 对 数 存 在 线 性 关 系, 起 始 拷 贝 数 越 多, CT 值 越 小 利 用 已 知 起 始 拷 贝 数 的 标 准 品 可 作 出 标 准 曲 线, 其 中 横 坐 标 代 表 起 始 拷 贝 数 的 对 数, 纵 坐 标 代 表 Ct 值 ( 如 图 3 所 示 ) 因 此, 只 要 获 得 未 知 样 品 的 Ct 值, 即 可 从 标 准 曲 线 上 计 算 出 该 样 品 的 起 始 拷 贝 数 图 3 阈 值 线 和 CT 值 荧 光 探 针 和 荧 光 染 料 实 时 荧 光 定 量 PCR 的 化 学 原 理 包 括 探 针 类 和 非 探 针 类 两 种, 探 针 类 是 利 用 与 靶 序 列 特 异 杂 交 的 探 针 来 指 示 扩 增 产 物 的 增 加, 非 探 针 类 则 是 利 用 荧 光 染 料 或 者 特 殊 设 计 的 引 物 来 指 示 扩 增 的 增 加 前 者 由 于 增 加 了 探 针 的 识 别 步 骤, 特 异 性 更 高, 但 后 者 则 简 便 易 行 1.SYBR Green I
10 图 4 SYBR GREEN I 工 作 原 理 SYBR Green I 是 一 种 结 合 于 小 沟 中 的 双 链 DNA 结 合 染 料 与 双 链 DNA 结 合 后, 其 荧 光 大 大 增 强 这 一 性 质 使 其 用 于 扩 增 产 物 的 检 测 非 常 理 想 SYBR Green I 的 最 大 吸 收 波 长 约 为 497nm, 发 射 波 长 最 大 约 为 520nm 在 PCR 反 应 体 系 中, 加 入 过 量 SYBR 荧 光 染 料, SYBR 荧 光 染 料 特 异 性 地 掺 入 DNA 双 链 后, 发 射 荧 光 信 号, 而 不 掺 入 链 中 的 SYBR 染 料 分 子 不 会 发 射 任 何 荧 光 信 号, 从 而 保 证 荧 光 信 号 的 增 加 与 PCR 产 物 的 增 加 完 全 同 步 图 4. SYBR GREEN I 工 作 原 理 SYBR Green I 在 核 酸 的 实 时 检 测 方 面 有 很 多 优 点, 由 于 它 与 所 有 的 双 链 DNA 相 结 合, 不 必 因 为 模 板 不 同 而 特 别 定 制, 因 此 设 计 的 程 序 通 用 性 好, 且 价 格 相 对 较 低 利 用 荧 光 染 料 可 以 指 示 双 链 DNA 熔 点 的 性 质, 通 过 熔 点 曲 线 分 析 可 以 识 别 扩 增 产 物 和 引 物 二 聚 体, 因 而 可 以 区 分 非 特 异 扩 增, 进 一 步 地 还 可 以 实 现 单 色 多 重 测 定 此 外, 由 于 一 个 PCR 产 物 可 以 与 多 分 子 的 染 料 结 合, 因 此 SYBR Green I 的 灵 敏 度 很 高 但 是, 由 于 SYBR Green I 与 所 有 的 双 链 DNA 相 结 合, 因 此 由 引 物 二 聚 体 单 链 二 级 结 构 以 及 错 误 的 扩 增 产 物 引 起 的 假 阳 性 会 影 响 定 量 的 精 确 性 通 过 测 量 升 高 温 度 后 荧 光 的 变 化 可 以 帮 助 降 低 非 特 异 产 物 的 影 响 1 由 解 链 曲 线 来 分 析 产 物 的 均 一 性 有 助 于 分 析 由 SYBR Green I 得 到 定 量 结 果
11 2. 分 子 信 标 (molecular beacon) 分 子 信 标 是 一 种 在 靶 DNA 不 存 在 时 形 成 茎 环 结 构 的 双 标 记 寡 核 苷 酸 探 针 在 此 发 夹 结 构 中, 位 于 分 子 一 端 的 荧 光 基 团 与 分 子 另 一 端 的 淬 灭 基 团 紧 紧 靠 近 在 此 结 构 中, 荧 光 基 团 被 激 发 后 不 是 产 生 光 子, 而 是 将 能 量 传 递 给 淬 灭 剂, 这 一 过 程 称 为 荧 光 谐 振 能 量 传 递 ( FRE T ) 由 于 " 黑 色 " 淬 灭 剂 的 存 在, 由 荧 光 基 团 产 生 的 能 量 以 红 外 而 不 是 可 见 光 形 式 释 放 出 来 如 果 第 二 个 荧 光 基 团 是 淬 灭 剂, 其 释 放 能 量 的 波 长 与 荧 光 基 团 的 性 质 有 关 分 子 信 标 的 茎 环 结 构 中, 环 一 般 为 个 核 苷 酸 长, 并 与 目 标 序 列 互 补 ; 茎 一 般 5-7 个 核 苷 酸 长, 并 相 互 配 对 形 成 茎 的 结 构 荧 光 基 团 连 接 在 茎 臂 的 一 端, 而 淬 灭 剂 则 连 接 于 另 一 端 分 子 信 标 必 须 非 常 仔 细 的 设 计, 以 致 于 在 复 性 温 度 下, 模 板 不 存 在 时 形 成 茎 环 结 构, 模 板 存 在 时 则 与 模 板 配 对 与 模 板 配 对 后, 分 子 信 标 的 构 象 改 变 使 得 荧 光 基 团 与 淬 灭 剂 分 开 当 荧 光 基 团 被 激 发 时, 它 发 出 自 身 波 长 的 光 子 ( 图 5 )
12 图 5. 分 子 信 标 工 作 原 理 3.TaqMan 探 针 TaqMan 探 针 是 多 人 拥 有 的 专 利 技 术 TaqMan 探 针 是 一 种 寡 核 苷 酸 探 针, 它 的 荧 光 与 目 的 序 列 的 扩 增 相 关 它 设 计 为 与 目 标 序 列 上 游 引 物 和 下 游 引 物 之 间 的 序 列 配 对 荧 光 基 团 连 接 在 探 针 的 5 末 端, 而 淬 灭 剂 则 在 3 末 端 当 完 整 的 探 针 与 目 标 序 列 配 对 时, 荧 光 基 团 发 射 的 荧 光 因 与 3 端 的 淬 灭 剂 接 近 而 被 淬 灭 但 在 进 行 延 伸 反 应 时, 聚 合 酶 的 5 外 切 酶
13 活 性 将 探 针 进 行 酶 切, 使 得 荧 光 基 团 与 淬 灭 剂 分 离 TaqMan 探 针 适 合 于 各 种 耐 热 的 聚 合 酶, 如 DyNAzymeTM II DNA 聚 合 酶 ( MJ Research 公 司 有 售 ) 随 着 扩 增 循 环 数 的 增 加, 释 放 出 来 的 荧 光 基 团 不 断 积 累 因 此 荧 光 强 度 与 扩 增 产 物 的 数 量 呈 正 比 关 系 图 6. Taqman 探 针 工 作 原 理 4. LUX Primers LUX (light upon extention) 引 物 是 利 用 荧 光 标 记 的 引 物 实 现 定 量 的 一 项 新 技 术 目 标 特 异 的 引 物 对 中 的 一 个 引 物 3 端 用 荧 光 报 告 基 团 标 记 在 没 有 单 链 模 板 的 情 况 下, 该 引 物 自 身 配 对, 形 成 发 夹 结 构, 使 荧 光 淬 灭 在 没 有 目 标 片 断 的 时 候, 引 物 与 模 板 配 对, 发 夹 结 构 打 开, 产 生 特 异 的 荧 光 信 号 ( 如 图 7 ) 图 7.LUX 引 物 工 作 原 理 与 Taqman 探 针 和 分 子 信 标 相 比, LUX 引 物 通 过 二 级 结 构 实 现 淬 灭, 不 需 要 荧 光 淬 灭 基 团, 也 不 需 要 设 计 特 异 的 探 针 序 列 因 为 LUX 引 物 是 一 个 相 对 较 新 的 技 术, 所 以 其 应 用 还 有 待 实 践 的 检 验 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 的 应 用 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 是 DNA 定 量 技 术 的 一 次 飞 跃 运 用 该 项 技 术, 我 们 可 以 对 DNA RNA 样 品 进 行 定 量 和 定 性 分 析 定 量 分 析 包 括 绝 对 定 量 分 析 和 相 对 定 量 分 析 前 者 可 以 得 到 某 个 样 本 中 基 因 的 拷 贝 数 和 浓 度 ; 后 者 可 以 对 不 同 方 式 处 理 的 两 个 样 本 中 的 基 因 表 达 水 平 进 行 比 较 除 此 之 外 我 们 还 可 以 对 PCR 产 物 或 样 品 进 行 定 性 分 析 : 例 如 利 用 熔 解 曲
14 线 分 析 识 别 扩 增 产 物 和 引 物 二 聚 体, 以 区 分 非 特 异 扩 增 ; 利 用 特 异 性 探 针 进 行 基 因 型 分 析 及 SNP 检 测 等 目 前 实 时 荧 光 PCR 技 术 已 经 被 广 泛 应 用 于 基 础 科 学 研 究 临 床 诊 断 疾 病 研 究 及 药 物 研 发 等 领 域 其 中 最 主 要 的 应 用 集 中 在 以 下 几 个 方 面 : 1. DNA 或 RNA 的 绝 对 定 量 分 析 包 括 病 原 微 生 物 或 病 毒 含 量 的 检 测, 转 基 因 动 植 物 转 基 因 拷 贝 数 的 检 测, RNAi 基 因 失 活 率 的 检 测 等 2. 基 因 表 达 差 异 分 析 例 如 比 较 经 过 不 同 处 理 样 本 之 间 特 定 基 因 的 表 达 差 异 ( 如 药 物 处 理 物 理 处 理 化 学 处 理 等 ), 特 定 基 因 在 不 同 时 相 的 表 达 差 异 以 及 cdna 芯 片 或 差 显 结 果 的 确 证 3. 基 因 分 型 例 如 SNP 检 测, 甲 基 化 检 测 等 随 着 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 的 推 广 和 普 及, 该 技 术 必 然 会 得 到 更 广 泛 的 应 用 生 物 谷 网 时 荧 光 定 量 PCR(real-time Q-PCR) 的 研 究 进 展 及 其 应 用 From: ibioo.com Update: 多 聚 集 链 反 应 (polymerase chain reaction,pcr) 技 术 发 明 至 今 已 近 20 年 了, 在 这 期 间 技 术 得 到 了 不 断 的 发 展, 近 年 来 出 现 的 实 时 荧 光 定 量 PCR(real-time quantitative PCR) 技 术 实 现 了 PCR 从 定 性 到 定 量 的 飞 跃, 它 以 其 特 异 性 强 灵 敏 度 高 重 复 性 好 定 量 准 确 速 度 快 全 封 闭 反 应 等 优 点 成 为 了 分 子 生 物 学 研 究 中 的 重 要 工 具, 本 文 就 此 技 术 及 其 应 用 做 一 综 述 1 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 的 方 法 学 1.1 原 理 所 谓 real-time Q-PCR 技 术, 是 指 在 PCR 反 应 体 系 中 加 入 荧 光 基 团, 利 用 荧 光 信 号 累 积 实 时 监 测 整 个 PCR 进 程, 最 后 通 过 标 准 曲 线 对 未 知 模 板 进 行 定 量 分 析 的 方 法 在 realtime 技 术 的 发 展 过 程 中, 两 个 重 要 的 发 现 起 着 关 键 的 作 用 :(1) 在 90 年 代 早 期,Taq DN A 多 聚 酶 的 5 核 酸 外 切 酶 活 性 的 发 现, 它 能 降 解 特 异 性 荧 光 记 探 针, 因 此 使 得 间 接 的 检 测 PCR 产 物 成 为 可 能 (2) 此 后 荧 光 双 标 记 探 针 的 运 用 使 在 一 密 闭 的 反 应 管 中 能 实 时 地 监 测 反 应 全 过 程 这 两 个 发 现 的 结 合 以 及 相 应 的 仪 器 和 试 剂 的 商 品 化 发 展 导 致 real-time Q-PCR 方 法 在 研 究 工 作 中 的 运 用
15 PCR 反 应 过 程 中 产 生 的 DNA 拷 贝 数 是 呈 指 数 方 式 增 加 的, 随 着 反 应 循 环 数 的 增 加, 最 终 PCR 反 应 不 再 以 指 数 方 式 生 成 模 板, 从 而 进 入 平 台 期 在 传 统 的 PCR 中, 常 用 凝 胶 电 泳 分 离 并 用 荧 光 染 色 来 检 测 PCR 反 应 的 最 终 扩 增 产 物, 因 此 用 此 终 点 法 对 PCR 产 物 定 量 存 在 不 可 靠 之 处 在 real-time Q-PCR 中, 对 整 个 PCR 反 应 扩 增 过 程 进 行 了 实 时 的 监 测 和 连 续 地 分 析 扩 增 相 关 的 荧 光 信 号, 随 着 反 应 时 间 的 进 行, 监 测 到 的 荧 光 信 号 的 变 化 可 以 绘 制 成 一 条 曲 线 在 PCR 反 应 早 期, 产 生 荧 光 的 水 平 不 能 与 背 景 明 显 地 区 别, 而 后 荧 光 的 产 生 进 入 指 数 期 线 性 期 和 最 终 的 平 台 期, 因 此 可 以 在 PCR 反 应 处 于 指 数 期 的 某 一 点 上 来 检 测 PCR 产 物 的 量, 并 且 由 此 来 推 断 模 板 最 初 的 含 量 为 了 便 于 对 所 检 测 样 本 进 行 比 较, 在 real-time Q -PCR 反 应 的 指 数 期, 首 先 需 设 定 一 定 荧 光 信 号 的 域 值, 一 般 这 个 域 值 (threshold) 是 以 PC R 反 应 的 前 15 个 循 环 的 荧 光 信 号 作 为 荧 光 本 底 信 号 (baseline), 荧 光 域 值 的 缺 省 设 置 是 3~15 个 循 环 的 荧 光 信 号 的 标 准 偏 差 的 10 倍 如 果 检 测 到 荧 光 信 号 超 过 域 值 被 认 为 是 真 正 的 信 号, 它 可 用 于 定 义 样 本 的 域 值 循 环 数 (Ct) Ct 值 的 含 义 是 : 每 个 反 应 管 内 的 荧 光 信 号 达 到 设 定 的 域 值 时 所 经 历 的 循 环 数 研 究 表 明, 每 个 模 板 的 Ct 值 与 该 模 板 的 起 始 拷 贝 数 的 对 数 存 在 线 性 关 系, 起 始 拷 贝 数 越 多,Ct 值 越 小 利 用 已 知 起 始 拷 贝 数 的 标 准 品 可 作 出 标 准 曲 线, 因 此 只 要 获 得 未 知 样 品 的 Ct 值, 即 可 从 标 准 曲 线 上 计 算 出 该 样 品 的 起 始 拷 贝 数 1.2 荧 光 化 学 目 前 real-time Q-PCR 所 使 用 的 荧 光 化 学 方 法 主 要 有 五 种, 分 别 是 :DNA 结 合 染 色, 水 解 探 针, 分 子 信 标, 荧 光 标 记 引 物, 杂 交 探 针 它 们 又 可 分 为 扩 增 序 列 特 异 和 非 特 异 的 检 测 两 大 类 扩 增 序 列 非 特 异 性 检 测 方 法 的 基 础 是 DNA 结 合 的 荧 光 分 子, 如 SYBR green 1 等 荧 光 染 料 Real-time Q-PCR 发 展 早 期 就 是 运 用 这 种 最 简 单 的 方 法, 在 PCR 反 应 体 系 中, 加 入 过 量 SY BR green 1 荧 光 染 料,SYBR green 1 荧 光 染 料 特 异 性 地 掺 入 DNA 双 链 后, 发 射 荧 光 信 号 荧 光 染 料 的 优 势 在 于 它 能 监 测 任 何 dsdna 序 列 的 扩 增, 不 需 要 探 针 的 设 计, 使 检 测 方 法 变 得 简 便, 同 时 也 降 低 了 检 测 的 成 本 然 而 正 是 由 于 荧 光 染 料 能 和 任 何 dsdna 结 合, 因 此 它 也 能 与 非 特 异 的 dsdna( 如 引 物 二 聚 体 ) 结 合, 使 实 验 容 易 产 生 假 阳 性 信 号 引 物 二 聚 体 的 问 题 目 前 可 以 用 带 有 熔 解 曲 线 (melting curve) 分 析 的 软 件 加 以 解 决 扩 增 序 列 特 异 性 检 测 方 法 是 在 PCR 反 应 中 利 用 标 记 荧 光 染 料 的 基 因 特 异 寡 核 苷 酸 探 针 来 检 测 产 物, 它 又 可 分 为 直 接 法 和 间 接 法 间 接 的 方 法 就 是 利 用 水 解 探 针 的 策 略 目 前 在 rea
16 l-time Q-PCR 中 最 广 泛 使 用 的 TaqMan 系 统 就 是 运 用 了 这 个 原 理 PCR 扩 增 时 在 加 入 一 对 引 物 的 同 时 加 入 一 个 特 异 性 的 荧 光 探 针, 该 探 针 为 一 寡 核 苷 酸, 两 端 分 别 标 记 一 个 报 告 荧 光 基 团 和 一 个 淬 灭 荧 光 基 团, 此 时 5 端 荧 光 基 团 吸 收 能 量 后 将 能 量 转 移 给 临 近 的 3 端 荧 光 淬 灭 基 团 ( 发 生 荧 光 共 振 能 量 转 移,FRET), 因 此 探 针 完 整 时, 检 测 不 到 该 探 针 5 端 荧 光 基 团 发 出 的 荧 光 但 在 PCR 扩 增 中, 溶 液 中 的 模 板 变 性 后 低 温 退 火 时, 引 物 与 探 针 同 时 与 模 板 结 合 在 引 物 的 介 导 下, 沿 模 板 向 前 延 伸 至 探 针 结 合 处, 发 生 链 的 置 换,Taq 酶 的 5-3 外 切 酶 活 性 ( 此 活 性 是 双 链 特 异 性 的, 游 离 的 单 链 探 针 不 受 影 响 ) 将 探 针 5 端 连 接 的 荧 光 基 团 从 探 针 上 切 割 下 来, 游 离 于 反 应 体 系 中, 从 而 脱 离 3 端 荧 光 淬 灭 基 团 的 屏 蔽, 接 受 光 刺 激 发 出 荧 光 信 号, 即 每 扩 增 一 条 DNA 链, 就 有 一 个 荧 光 分 子 形 成, 实 现 了 荧 光 信 号 的 累 积 与 PCR 产 物 形 成 完 全 同 步 直 接 的 方 法 指 的 是 标 记 荧 光 的 探 针 与 扩 增 产 物 结 合 后 即 直 接 产 生 荧 光, 分 子 信 标 (molecular beacon) 就 属 于 这 一 类, 它 本 质 上 是 一 种 标 记 荧 光 的 发 夹 探 针, 当 探 针 分 子 呈 发 夹 结 构 时, 结 合 在 其 两 端 的 荧 光 基 团 距 离 上 接 近, 使 得 产 生 能 量 转 移 效 应, 而 不 发 生 荧 光 当 互 补 序 列 出 现 时, 探 针 与 DNA 杂 交, 探 针 转 变 成 一 个 开 放 的 结 构, 呈 线 性, 报 告 荧 光 基 团 与 淬 灭 荧 光 基 团 彼 此 在 空 间 上 产 生 足 够 的 分 离, 荧 光 基 团 脱 离 了 淬 灭 基 团 的 影 响, 从 而 产 生 可 被 检 测 到 的 荧 光 荧 光 标 记 引 物 是 从 分 子 信 标 的 概 念 变 化 而 产 生 的 一 种 联 合 分 子 探 针 系 统, 它 把 荧 光 基 团 标 记 的 发 夹 结 构 的 序 列 直 接 与 PCR 引 物 相 结 合, 从 而 使 荧 光 标 记 基 团 直 接 掺 入 PCR 扩 增 产 物 中 目 前 主 要 有 两 种 : 日 出 引 物 (sunrise primes) 和 蝎 子 引 物 (scorpion primes) 杂 交 探 针 (hybridization probe) 使 用 两 个 特 异 的 探 针, 其 中 上 游 的 探 针 的 3 端 标 记 有 供 体 荧 光 素 (donor), 而 下 游 的 探 针 的 5 端 标 记 有 受 体 荧 光 素 (acceptor) 在 PCR 中 模 板 退 火 阶 段, 两 探 针 同 时 与 扩 增 产 物 杂 交, 并 形 成 头 尾 结 合 的 形 式, 使 供 体 和 受 体 荧 光 素 距 离 非 常 接 近, 两 者 产 生 荧 光 共 振 能 量 转 移 (FRET, 此 作 用 与 上 述 水 解 探 针 的 方 式 相 反 ), 使 得 受 体 荧 光 基 团 发 出 荧 光 ; 当 两 探 针 处 于 游 离 状 态 时, 无 荧 光 产 生 由 于 反 应 中 运 用 了 两 个 探 针, 因 此 增 加 了 方 法 的 特 异 性, 另 外 也 可 利 用 荧 光 寡 核 苷 酸 熔 解 曲 线 (melting curve) 对 与 寡 核 苷 酸 探 针 结 合 的 序 列 进 行 分 析, 从 中 获 取 有 用 的 信 息 1.3 定 量 方 法 在 real-time Q-PCR 中, 模 板 定 量 有 两 种 策 略 ; 相 对 定 量 和 绝 对 定 量 相 对 定 量 指 的 是 在 一 定 样 本 中 靶 序 列 相 对 于 另 一 参 照 样 本 的 量 的 变 化 绝 对 定 量 指 的 是 用 已 知 的 标 准 曲 线 来 推 算 未 知 的 样 本 的 量 标 准 曲 线 的 法 的 相 对 定 量 由 于 在 此 方 法 中 量 的 表 达 是 相 对 于 某 个 参 照 物 的 量 而 言 的, 因 此 相 对 定 量 的 标 准 曲 线 就 比 较 容 易 制 备, 对 于 所 用 的 标 准 品 只 要 知 道 其 相 对 稀 释 度 即 可 在 整 个 实 验 中 样 本 的 靶 序 列 的 量 来 自 于 标 准 曲 线, 最 终 必 须 除 以 参 照 物 的 量, 即 参 照 物 是 1* 的 样 本, 其 它 的 样 本 为 参 照 物 量 的 n 倍 在 实 验 中 为 了 标 准 化 加 入 反 应 体 系 的 RNA 或 DNA 的 量, 往 往 在 反 应 中 同 时 扩 增 一 内 源 控 制 物, 如 在 基 因 表 达 研 究 中, 内 源 控 制 物 常 为 一 些 管 家 基 因 ( 如 beta- actin,3- 磷 酸 甘 油 醛 脱 氢 酶 GAPDH 等 ) 比 较 CT 法 的 相 对 定 量 比 较 CT 法 与 标 准 曲 线 法 的 相 对 定 量 的 不 同 之 处 于 在 于 其 运 用 了 数 学 公 式 来 计 算 相 对 量, 前 提 是 假 设 每 个 循 环 增 加 一 倍 的 产 物 数 量, 在 PCR 反 应 的 指 数 期 得 到 CT 值 来 反 应 起 始 模 板 的 量, 一 个 循 环 (CT=1) 的 不 同 相 当 于 起 始 模 板 数 2 倍 的 差
17 异 但 是 此 方 法 是 以 靶 基 因 和 内 源 控 制 物 的 扩 增 效 率 基 本 一 致 为 前 提 的, 效 率 的 偏 移 将 影 响 实 际 拷 贝 数 的 估 计 标 准 曲 线 法 的 绝 对 定 量 此 方 法 与 标 准 曲 线 法 的 相 对 定 量 的 不 同 之 处 在 于 其 标 准 品 的 量 是 预 先 可 知 的 质 粒 DNA 和 体 外 转 入 的 RNA 常 作 为 绝 对 定 量 标 准 品 的 制 备 之 用 标 准 品 的 量 可 根 据 260nm 的 吸 光 度 值 并 用 DNA 或 RNA 的 分 子 量 来 转 换 成 其 拷 贝 数 来 确 定 2 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 的 应 用 Real- time Q-PCR 的 应 用 范 围 很 广 泛, 包 括 mrna 表 达 的 研 究 DNA 拷 贝 数 的 检 测 单 核 苷 酸 多 态 性 (SNPs) 的 测 定 等 以 下 就 目 前 real- time Q-PCR 在 易 位 基 因 的 检 测, 细 胞 因 子 的 表 达 分 析, 肿 瘤 耐 药 基 因 表 达 的 研 究 以 及 病 毒 感 染 的 定 量 监 测 中 的 应 用 作 一 概 述 2.1 微 小 残 留 病 变 的 检 测 肿 瘤 疾 病 尤 其 是 血 液 的 恶 性 肿 瘤 常 伴 有 特 异 性 基 因 的 易 位, 这 种 易 位 往 往 可 以 作 为 监 测 临 床 治 疗 效 果 的 一 种 肿 瘤 标 志 虽 然 在 过 去 的 几 十 年 里 治 疗 方 案 的 改 进 已 大 大 地 延 长 了 病 人 的 生 存 期, 但 是 缓 解 期 的 病 人 仍 存 在 复 发 的 危 险 性 因 此 微 小 残 留 病 变 (MRD) 的 检 测 对 于 进 一 步 调 整 治 疗 方 案 是 至 关 重 要 的 Real-time Q-PCR 的 应 用 正 成 为 检 测 肿 瘤 微 小 残 留 分 子 标 志 的 一 种 必 备 的 研 究 工 具 通 过 对 肿 瘤 融 合 基 因 的 定 量 测 定 能 指 导 临 床 对 病 人 实 行 个 体 化 的 治 疗 急 性 粒 细 胞 性 白 血 病 (AML) 最 常 见 的 染 色 体 异 常 是 交 互 易 位 t(8;21) (q 22;q22), 在 这 易 位 中,AML-1 转 录 因 子 基 因 和 8 号 染 色 体 的 MTG8 基 因 发 生 融 合, 致 使 正 常 的 AML-1 转 录 调 控 受 到 影 响, 这 可 能 是 白 血 病 的 病 因 目 前 的 研 究 证 明 用 real-time Q-PCR 来 检 测 融 合 基 因 有 助 于 对 这 些 病 人 的 MRD 进 行 定 量, 其 作 为 预 后 的 指 标 或 对 治 疗 方 案 的 评 估 是 有 价 值 的 同 样 的 方 法 也 被 用 于 定 量 其 它 的 易 位 融 合 基 因 水 平, 如 慢 性 粒 细 胞 性 白 血 病 (CML) 的 BCR-ABL 融 合 基 因 ; 急 性 淋 巴 细 胞 性 白 血 病 (ALL) 的 白 血 病 特 异 的 TEL-AML1 融 合 基 因 ; 滤 泡 状 淋 巴 瘤 (FL) 的 染 色 体 易 位 t(14;18)(q32;q21) 和 bcl-2 重 排 等 许 多 研 究 都 在 很 大 程 度 上 受 益 于 real-time Q-PCR 方 法 的 应 用, 随 着 技 术 的 发 展,Real-time Q-PCR 的 运 用 将 不 断 地 扩 大 2.2 细 胞 因 子 的 表 达 分 析 细 胞 因 子 是 调 节 蛋 白, 它 通 过 调 节 免 疫 反 应 ( 包 括 淋 巴 细 胞 活 化 增 殖 分 化 生 存 和 凋 亡 ) 在 免 疫 系 统 中 起 着 核 心 作 用 许 多 不 同 类 型 的 细 胞 都 能 分 泌 这 种 低 分 子 量 的 蛋 白 质, 其 中 包 括 淋 巴 细 胞 抗 原 递 呈 细 胞 单 核 细 胞 内 皮 细 胞 和 成 纤 维 细 胞 细 胞 因 子 可 被 分 为 不 同 的 组 ; 白 介 素 (IL-1~IL-23), 干 扰 素 (IFN-α,IFN-γ 等 ), 集 落 刺 激 因 子 (CSF), 肿 瘤 坏 死 因 子 (TNF), 肿 瘤 生 长 因 子 (TGF-β 等 ) 和 化 学 因 子 (MCP-1,MIP-1 等 ) 为 了 阐 明 在 许 多 炎 症 反 应, 自 身 免 疫 性 疾 病 和 器 官 移 植 排 异 中 的 免 疫 致 病 途 径, 细 胞 因 子 mrna 表 达 谱 的 可 靠 定 量 是 很 重 要 的 尽 管 被 检 样 本 中 细 胞 因 子 含 量 往 往 极 低, 然 而 real-time 反 转 灵 PCR(RT-PCR) 以 其 高 敏 感 性 和 准 确 性 在 细 胞 因 子 的 定 量 中 越 来 越 受 到 青 睐 2.3 肿 瘤 耐 药 基 因 表 达 的 研 究 对 化 疗 药 物 的 耐 药 是 治 疗 肿 瘤 病 人 的 主 要 障 碍 由 于 耐 药 限 制 了 许 多 肿 瘤 的 成 功 治 疗, 因 此 研 究 肿 瘤 细 胞 对 耐 药 机 制 就 变 得 十 分 重 要 目 前 研 究 中 发 现 主 要 的 耐 药 机 制 有 :ATP 结 合 盒 基 因 超 家 族 (ATP-binding cassette superfamily) 的 膜 转 运 蛋 白 介 导 的 耐 药, 这 些 蛋 白 包 括 :MDR-1 基 因 编 码 的 P- 糖 蛋 白 (P- gp), 多 药 耐 药 相 关 蛋 白 (MRP), 肺 耐 药 相 关 蛋 白 (LRP), 乳 腺 癌 耐 药 蛋 白 (BCRP) 等 ; 酶 介 导 的 耐 药, 包 括 拓 扑 导 构 酶 (Topo), 谷 胱 甘 肽 (GSH) 及 谷 胱 甘 肽 -S- 转 移 酶 (GST), 蛋 白 激 酶 C(PKC), 脱 氧 胞 嘧 啶 核 苷 激 酶 (deoxycytidine kinase) 等, 凋 亡 基 因 介 导 的 耐 药, 如 bcl-2 家 族,p53 基 因,c-myc 等 多 药 耐 药 (MDR) 是 多 因 素, 多 种 机 制 共 同 作 用 的 结 果 real- time 反 转
18 录 PCR(RT-PCR) 是 了 解 肿 瘤 耐 药, 指 导 临 床 治 疗 策 略 的 有 用 手 段, 它 能 观 测 用 药 前 后 及 复 发 时 肿 瘤 细 胞 的 耐 药 基 因 mrna 表 达 变 化, 从 而 及 时 调 整 治 疗 方 案 和 评 价 疾 病 的 预 后 2.4 病 毒 感 染 的 定 量 监 测 扩 增 技 术 的 发 展 使 得 对 病 毒 的 定 性 或 定 量 检 测 的 能 力 随 之 提 高, 也 使 研 究 病 毒 的 负 荷 和 疾 病 进 展 的 关 系 成 为 可 能 Real-time Q-PCR 是 主 要 被 运 用 于 科 研 和 诊 断 领 域 的 扩 增 技 术, 它 不 仅 能 对 病 毒 定 性, 而 且 由 于 其 实 验 的 批 间 和 批 内 差 异 小, 重 复 性 好, 因 此 能 方 便 快 速 灵 敏 准 确 地 定 量 病 毒 DNA 或 RNA 的 序 列, 更 重 要 的 是 从 中 可 以 动 态 地 研 究 在 整 个 病 程 中 潜 在 病 毒 的 复 活 或 持 续, 从 而 使 临 床 医 生 和 病 毒 学 家 能 检 测 临 床 的 变 化, 如 抗 病 毒 治 疗 的 效 果, 耐 药 变 异 的 出 现 等 目 前 运 用 较 多 的 是 在 器 官 移 值 中 对 使 用 免 疫 抑 制 剂 的 病 人 用 Real- time Q-PCR 来 定 量 测 定 CMV 感 染 研 究 表 明 在 骨 髓 移 植 的 病 人 中 用 Real-time Q-PCR 检 测 CMV 感 染 比 传 统 的 pp65 抗 原 试 验 更 敏 感, 抗 CMV 药 物 治 疗 能 使 血 中 的 病 毒 含 量 下 降,Real-time Q-PCR 对 于 快 速 定 量 骨 移 植 病 人 的 CMV 感 染 和 监 测 CMV 复 活 是 一 个 有 用 的 工 具 3 存 在 的 问 题 及 应 用 前 景 在 real-time Q-PCR 技 术 中, 无 论 是 相 对 定 量 还 是 标 准 曲 线 定 量 方 法 仍 存 在 一 些 PCR 定 量 方 法 均 有 的 问 题 有 待 解 决 在 标 准 曲 线 定 量 中, 标 准 品 的 制 备 是 一 个 必 不 可 少 的 过 程 目 前 由 于 无 一 统 一 标 准, 各 个 实 验 室 所 用 的 生 成 标 准 曲 线 的 样 品 各 不 相 同, 致 使 实 验 结 果 缺 乏 可 比 性 此 外, 用 real-time Q-PCR 来 研 究 mrna 时, 受 到 不 同 RNA 样 本 存 在 不 同 的 逆 转 录 (RT) 效 率 的 限 制 在 相 对 定 量 中, 其 前 提 是 假 设 内 源 控 制 物 不 受 实 验 条 件 的 影 响 的, 合 理 地 选 择 合 适 的 不 受 实 验 条 件 影 响 的 内 源 控 制 物 也 是 实 验 结 果 可 靠 与 否 的 关 键 另 外, 与 传 统 的 PCR 技 术 相 比,Real-time Q-PCR 的 不 足 之 处 是 :(1) 由 于 运 用 了 封 闭 的 检 测, 减 少 了 扩 增 后 电 泳 的 检 测 步 骤, 因 此 也 就 不 能 监 测 扩 增 产 物 的 大 小 ;(2) 因 为 荧 光 素 种 类 以 及 检 测 光 源 的 局 限 性, 从 而 相 对 地 限 制 了 real-time Q-PCR 的 复 合 式 (multiplex) 检 测 的 应 用 能 力 ;(3) 目 前 real-time Q-PCR 实 验 成 本 比 较 高, 从 而 也 限 制 了 其 广 泛 的 应 用 随 着 技 术 不 断 改 进 和 发 展 目 前 real-time Q-PCR 已 成 为 科 研 的 主 要 工 具, 该 技 术 未 来 的 应 用 前 景 是 令 人 鼓 舞 的, 一 方 面 real-time Q-PCR 技 术 与 其 它 分 子 生 物 学 技 术 相 结 合 使 定 量 极 微 量 的 基 因 表 达 或 DNA 拷 贝 数 成 为 可 能 另 一 方 面 荧 光 标 记 核 酸 化 学 技 术 和 寡 核 苷 酸 探 针 杂 交 技 术 的 发 展 以 及 real-time Q- PCR 技 术 的 应 用, 使 定 量 PCR 技 术 有 一 个 足 够 的 基 础 为 广 大 临 床 诊 断 实 验 室 所 接 受, 将 有 助 于 临 床 医 生 对 疾 病 的 诊 断 和 治 疗 4 结 语 Real- time Q-PCR 的 发 展 使 得 研 究 人 员 又 多 了 一 种 比 较 简 单 且 自 动 化 的 手 段 去 研 究 许 多 重 要 的 基 础 课 题 虽 然 此 技 术 仍 存 在 一 些 不 足 需 要 改 进, 但 是 它 为 real- time Q-PCR 在 常 规 诊 断 检 测 中 的 运 用 打 下 了 良 好 的 基 础 Real-time Q-PCR 将 成 为 未 来 分 子 生 物 学 实 验 室 必 备 的 研 究 工 具
说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度, 对 2015 年 春 季 期 教 运 行 基
内 部 资 料 东 北 师 范 大 教 运 行 基 本 状 态 据 报 告 2015 年 春 季 期 教 务 处 2015 年 10 月 27 日 说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度,
,,,,, :,, (.,, );, (, : ), (.., ;. &., ;.. &.., ;, ;, ),,,,,,, ( ) ( ),,,,.,,,,,, : ;, ;,.,,,,, (., : - ),,,, ( ),,,, (, : ),, :,
: 周 晓 虹 : - -., - - - -. :( ), -,.( ),,, -. - ( ).( ) ', -,,,,, ( ).( ),,, -., '.,, :,,,, :,,,, ,,,,, :,, (.,, );, (, : ), (.., ;. &., ;.. &.., ;, ;, ),,,,,,, ( ) ( ),,,,.,,,,,, : ;, ;,.,,,,, (., : - ),,,,
1600 1000 40 50 2030 2000 采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路 2
简 略 版 本 :2015 3 10 2016 2021 全 球 卫 生 部 门 病 毒 性 肝 炎 战 略 2016 2021 2015 3 12 2012 2010 2014 2015 2016 2021 140 55% 35% 5 15% 5 20% 2.4 1.3 1.5 1 1600 1000 40 50 2030 2000 采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路
<4D F736F F D D323630D6D0B9FAD3A6B6D4C6F8BAF2B1E4BBAFB5C4D5FEB2DFD3EBD0D0B6AF C4EAB6C8B1A8B8E6>
中 国 应 对 气 候 变 化 的 政 策 与 行 动 2013 年 度 报 告 国 家 发 展 和 改 革 委 员 会 二 〇 一 三 年 十 一 月 100% 再 生 纸 资 源 目 录 前 言... 1 一 应 对 气 候 变 化 面 临 的 形 势... 3 二 完 善 顶 层 设 计 和 体 制 机 制... 4 三 减 缓 气 候 变 化... 8 四 适 应 气 候 变 化... 20
0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 考 核 ( 扣 原 因 ) 考 评 得 3 安 全 生 产 目 30 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 无 轻 伤 责 任 事 故 无 重 大 质 量
0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 3 无 轻 伤 责 任 事 故 目 标 30 及 事 无 重 大 质 量 工 作 过 失 故 管 无 其 他 一 般 责 任 事 故 理 在 公 司 文 明 环 境 创 建 中, 无 工 作 过 失 及 被 追 究 的
文 化 记 忆 传 统 创 新 与 节 日 遗 产 保 护 根 据 德 国 学 者 阿 斯 曼 的 文 化 记 忆 理 论 仪 式 与 文 本 是 承 载 文 化 记 忆 的 两 大 媒 体 在 各 种 仪 式 行 为 中 节 日 以 其 高 度 的 公 共 性 有 组 织 性 和 历 史 性 而 特 别 适 用 于 文 化 记 忆 的 储 存 和 交 流 节 日 的 文 化 功 能 不 仅 在 于
何 秋 琳 张 立 春 视 觉 学 习 研 究 进 展 视 觉 注 意 视 觉 感 知
第 卷 第 期 年 月 开 放 教 育 研 究 何 秋 琳 张 立 春 华 南 师 范 大 学 未 来 教 育 研 究 中 心 广 东 广 州 随 着 图 像 化 技 术 和 电 子 媒 体 的 发 展 视 觉 学 习 也 逐 步 发 展 为 学 习 科 学 的 一 个 研 究 分 支 得 到 研 究 人 员 和 教 育 工 作 者 的 广 泛 关 注 基 于 此 作 者 试 图 对 视 觉 学 习
一 公 共 卫 生 硕 士 专 业 学 位 论 文 的 概 述 学 位 论 文 是 对 研 究 生 进 行 科 学 研 究 或 承 担 专 门 技 术 工 作 的 全 面 训 练, 是 培 养 研 究 生 创 新 能 力, 综 合 运 用 所 学 知 识 发 现 问 题, 分 析 问 题 和 解 决
上 海 市 公 共 卫 生 硕 士 专 业 学 位 论 文 基 本 要 求 和 评 价 指 标 体 系 ( 试 行 ) 上 海 市 学 位 委 员 会 办 公 室 二 O 一 二 年 三 月 一 公 共 卫 生 硕 士 专 业 学 位 论 文 的 概 述 学 位 论 文 是 对 研 究 生 进 行 科 学 研 究 或 承 担 专 门 技 术 工 作 的 全 面 训 练, 是 培 养 研 究 生 创
(2015-2016-2)-0004186-04205-1 140242 信 号 与 系 统 Ⅰ 学 科 基 础 必 修 课 37 37 1 教 203 17 周 2016 年 06 月 13 日 (08:00-09:35) (2015-2016-2)-0004186-04205-1 141011
关 于 2015-2016 学 年 第 二 学 期 期 末 周 内 考 试 时 间 地 点 安 排 选 课 课 号 班 级 名 称 课 程 名 称 课 程 性 质 合 考 人 数 实 际 人 数 考 试 教 室 考 试 段 考 试 时 间 (2015-2016-2)-0006178-04247-1 130101 测 试 技 术 基 础 学 科 基 础 必 修 课 35 35 1 教 401 17 周
随着执业中医师资格考试制度的不断完善，本着为我校中医学专业认证服务的目的，本文通过对我校中医类毕业生参加2012年和2013年的中医执业医师考试成绩及通过率、掌握率进行分析，并与全国的平均水平进行差异比较分析，以此了解我校执业中医师考试的现状，进而反映我校中医类课程总体教学水平，发现考核知识模块教学中存在的不足，反馈给相关学院和教学管理部门，以此提高教学和管理水平。
2012-2013 中 医 类 别 执 业 医 师 综 合 笔 试 成 绩 分 析 反 馈 报 告 教 务 处 二 零 一 三 年 三 月 1 目 录 1 前 言 3 2 2012-2013 中 医 类 别 执 业 医 师 综 合 笔 试 成 绩 分 析 反 馈 报 告 4 附 件 1:2012 年 中 医 类 别 医 师 资 格 综 合 笔 试 院 校 学 科 成 绩 分 析 报 告 附 件 2:2013
<433A5C446F63756D656E747320616E642053657474696E67735C41646D696E6973747261746F725CD7C0C3E65CC2DBCEC4CFB5CDB3CAB9D3C3D6B8C4CFA3A8BCF2BBAFA3A95CCAB9D3C3D6B8C4CF31302D31392E646F63>
( 一 ) 系 统 整 体 操 作 流 程 简 述 3 ( 二 ) 系 统 中 各 角 色 操 作 功 能 说 明 5 1. 学 院 管 理 员 5 2. 教 学 院 长 8 3. 指 导 教 师 10 4. 答 辩 组 组 长 12 5. 学 生 12 6. 系 统 管 理 员 15 ( 一 ) 论 文 系 统 常 见 问 题 16 ( 二 ) 论 文 查 重 常 见 问 题 22 1 2 主
人 工 抗 原 的 鉴 定
生 物 技 术 通 报 张 海 棠 王 自 良 刘 耀 东 传 统 的 理 化 分 析 方 法 在 食 品 污 染 检 测 方 面 发 挥 了 重 要 的 作 用 但 均 存 在 一 定 的 缺 陷 急 需 建 立 快 速 高 效 的 检 测 方 法 食 品 污 染 免 疫 检 测 是 一 种 新 型 的 分 析 方 法 与 理 化 分 析 方 法 相 比 具 有 省 时 省 力 费 用 低 廉 便
龚 亚 夫 在 重 新 思 考 基 础 教 育 英 语 教 学 的 理 念 一 文 中 援 引 的 观 点 认 为 当 跳 出 本 族 语 主 义 的 思 维 定 式 后 需 要 重 新 思 考 许 多 相 连 带 的 问 题 比 如 许 多 发 音 的 细 微 区 别 并 不 影 响 理 解 和
语 音 语 篇 语 感 语 域 林 大 津 毛 浩 然 改 革 开 放 以 来 的 英 语 热 引 发 了 大 中 小 学 英 语 教 育 整 体 规 划 问 题 在 充 分 考 虑 地 区 学 校 和 个 体 差 异 以 及 各 家 观 点 的 基 础 上 遵 循 实 事 求 是 逐 级 定 位 逐 层 分 流 因 材 施 教 的 原 则 本 研 究 所 倡 导 的 语 音 语 篇 语 感 语 域
<433A5C55736572735C6B73625C4465736B746F705CB9FABCCAD6D0D2BDD2A9D7A8D2B5B8DFBCB6BCBCCAF5D6B0B3C6C6C0C9F3C9EAC7EBD6B8C4CFA3A832303136CDA8D3C3B0E6A3A92E646F63>
附 件 1 国 际 中 药 专 业 高 级 技 术 职 称 评 审 条 件 及 报 名 材 料 一 系 列 ( 一 ) 中 1 高 级 专 科 ( 副 ) 高 级 专 科 ( 副 ) 1 取 得 中 专 科 职 称 后, 独 立 从 事 中 临 床 实 践 5 年 以 上 2 取 得 中 博 士 学 位 后, 临 床 实 践 2 年 以 上 3 取 得 中 硕 士 学 位 后, 临 床 实 践 7
Microsoft Word - 第7章 图表反转形态.doc
第 七 章 图 表 反 转 形 态 我 们 知 道 市 场 趋 势 共 有 三 种 : 上 升 趋 势 下 降 趋 势 和 横 向 整 理 市 场 的 价 格 波 动 都 是 运 行 在 这 三 种 趋 势 中, 所 有 的 走 势 都 是 这 三 种 趋 势 的 排 列 组 合 如 图 市 场 趋 势 结 构 示 意 图 7-1 所 示 市 场 趋 势 结 构 示 意 图 7-1 图 市 场 趋
黄 金 原 油 总 持 仓 增 长, 同 比 增 幅 分 别 为 4.2% 和 4.1% 而 铜 白 银 以 及 玉 米 则 出 现 减 持, 减 持 同 比 减 少 分 别 为 9.4%,9.4% 以 及 6.5% 大 豆, 豆 粕 结 束 连 续 4 周 总 持 仓 量 增 长, 出 现 小 幅
小 麦 净 多 持 仓 增 加, 豆 油 豆 粕 净 多 持 仓 减 少 美 国 CFTC 持 仓 报 告 部 门 : 市 场 研 究 与 开 发 部 类 型 : 量 化 策 略 周 报 日 期 :212 年 5 月 7 日 电 话 :592-5678753 网 址 :www.jinyouqh.com 主 要 内 容 : 根 据 美 国 CFTC 公 布 的 数 据, 本 报 告 中 的 11 个
第 期 王 兴 涛 等 猪 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 种 猪 精 液 分 离 株 的 鉴 定 及 进 化 分 析 病 料 毒 株 及 细 胞 试 剂 引 物 设 计 提 取 及 基 因 克 隆 及 测 序
河 南 农 业 科 学 王 兴 涛 罗 俊 滕 蔓 樊 剑 鸣 鄂 巍 禹 斌 刘 力 张 改 平 利 用 技 术 对 河 南 省 某 规 模 化 猪 场 乙 脑 疑 似 病 例 的 种 猪 精 液 进 行 分 析 从 部 分 样 本 中 扩 增 出 与 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 基 因 和 基 因 具 有 高 度 同 源 性 的 预 期 产 物 在 日 龄 乳 鼠 脑 内 接 种 种 猪
评 委 : 李 炎 斌 - 个 人 技 术 标 资 信 标 初 步 审 查 明 细 表 序 号 投 标 单 位 投 标 函 未 按 招 标 文 件 规 定 填 写 漏 填 或 内 容 填 写 错 误 的 ; 不 同 投 标 人 的 投 标 文 件 由 同 一 台 电 脑 或 同 一 家 投 标 单
评 委 : 李 炎 斌 - 个 人 清 标 评 审 明 细 表 评 审 因 素 序 号 投 标 单 位 清 标 评 审 1 深 圳 市 创 捷 科 技 有 限 合 格 2 四 川 川 大 智 胜 软 件 股 份 有 限 合 格 3 北 京 航 天 长 峰 科 技 工 业 集 团 有 限 公 司 合 格 4 深 圳 中 兴 力 维 技 术 有 限 合 格 5 深 圳 键 桥 通 讯 技 术 股 份 有
抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 % # % % % ) % % # # + #, ) +, % % % % % % % %
抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 王 红 曼 抗 战 时 期 国 民 政 府 为 适 应 战 时 经 济 金 融 的 需 要 实 行 由 财 政 部 四 联 总 处 中 央 银 行 等 多 家 机 构 先 后 共 同 参 与 的 多 元 化 银 行 监 理 体 制 对 战 时 状 态 下 的 银 行 发 展 与 经 营 安 全 进 行 了 大 规 模 的 设 计 与
中 国 软 科 学 年 第 期!!!
山 寨 模 式 的 形 成 机 理 及 其 对 组 织 创 新 的 启 示 山 寨 模 式 的 形 成 机 理 及 其 对 组 织 创 新 的 启 示 陶 厚 永 李 燕 萍 骆 振 心 武 汉 大 学 经 济 与 管 理 学 院 武 汉 大 学 中 国 产 学 研 合 作 问 题 研 究 中 心 湖 北 武 汉 北 京 大 学 经 济 研 究 所 光 华 天 成 博 士 后 工 作 站 北 京 本
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CEBFBC3232C6DAD1A7CFB0D3EBCBBCBFBCC4DAD2B3>
- 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - 做 四 个 全 面 的 宣 传 者 实 践 者 - 6 - - 7 - - 8 - - 9 - - 10 - - 11 - - 12 - - 13 - - 14 - - 15 - - 16 - - 17 - - 18 - - 19 - - 20 - 创 新 调 处 新 机 制 构 筑 稳 定 防 火 墙 - 21 - - 22 - - 23
Microsoft Word - 文件汇编.doc
北 京 市 中 医 管 理 局 二 一 五 年 四 月 ... 1... 18 2015... 30 京 中 医 政 字 [2014]160 号 1 2 一 充 分 认 识 中 医 健 康 乡 村 建 设 工 作 的 重 要 意 义 二 建 立 健 全 工 作 保 障 机 制 2014 12 15 三 做 好 工 作 启 动 的 准 备 事 宜 1 2014 12 15 5-10 2014 12 15
国债回购交易业务指引
附 件 1 上 海 证 券 交 易 所 新 质 押 式 国 债 回 购 交 易 业 务 指 引 一 总 述 根 据 上 海 证 券 交 易 所 债 券 交 易 实 施 细 则, 上 证 所 将 于 2006 年 5 月 8 日 起 推 出 新 质 押 式 国 债 回 购 新 质 押 式 回 购 与 现 行 质 押 式 回 购 相 比 区 别 主 要 在 以 下 几 个 方 面 :1 新 质 押 式
科 学 出 版 社 科 学 出 版 社 前 言 本 书 是 针 对 普 通 高 等 院 校 经 济 类 和 工 商 管 理 类 本 科 专 业 财 务 管 理 学 的 教 学 需 求, 结 合 教 育 部 经 济 管 理 类 本 科 财 务 管 理 学 课 程 教 学 大 纲 编 写 而 成 的 本 书 执 笔 者 都 是 长 期 工 作 在 财 务 管 理 教 学 一 线 的 专 业 教 师,
<4D6963726F736F667420576F7264202D2032303133C4EAB9A4B3CCCBB6CABFCAFDD1A7D7A8D2B5BFCEBFBCCAD4B4F3B8D9D3EBD2AAC7F3>
工 程 硕 士 数 学 考 试 大 纲 与 要 求 ( 包 括 高 等 数 学 和 线 性 代 数 ) 一 函 数 极 限 与 连 续 第 一 部 分 : 高 等 数 学 考 试 内 容 函 数 的 概 念 及 表 示 法 函 数 的 有 界 性 单 调 性 周 期 性 和 奇 偶 性 复 合 函 数 反 函 数 分 段 函 数 和 隐 函 数 基 本 初 等 函 数 的 性 质 及 其 图 形 初
Microsoft Word - 资料分析练习题09.doc
行 测 高 分 冲 刺 练 习 题 资 料 分 析 ( 共 15 题, 参 考 时 限 10 分 钟 ) 材 料 题 - 1 2012 年 1 月 某 小 区 成 交 的 二 手 房 中, 面 积 为 60 平 方 米 左 右 的 住 宅 占 总 销 售 套 数 的 ( ) A.25% B.35% C.37.5% 长 沙 市 雨 花 区 侯 家 塘 佳 天 国 际 大 厦 北 栋 20 楼 第 1
中 中 中 中 部 中 岗 位 条 件 历 其 它 历 史 师 地 理 师 生 物 师 体 与 健 康 师 04 05 06 07 从 事 中 历 史 工 从 事 中 地 理 工 从 事 中 生 物 工 从 事 中 体 与 健 康 工 2. 课 程 与 论 ( 历 史 ); 2. 科 ( 历 史 )
中 中 中 部 中 26 年 系 统 事 业 公 开 计 划 岗 位 条 件 历 其 它 数 师 英 语 师 物 理 师 02 0 从 事 中 数 工 从 事 中 英 语 工 从 事 中 物 理 工 2. 课 程 与 论 ( 数 ); 2. 科 ( 数 );. 数 ; 4. 基 础 数 ; 5. 计 算 数 ; 6. 概 率 论 与 数 理 统 计 ; 7. 应 用 数 ; 8. 数. 课 程 与
西 南 民 族 学 院 学 报 哲 学 社 会 科 学 版 第 卷 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 年 年 新 中 国 五 十 年 统 计 资 料 汇 编 中 国 人 口 统 计 年 鉴 年 数 据 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 中 国 统 计 出 版 社 年 版 资 料 来 源
郑 长 德 教 育 的 发 展 人 力 资 源 的 开 发 是 决 定 西 部 民 族 地 区 未 来 发 展 的 关 键 因 素 之 一 是 实 施 西 部 大 开 发 战 略 提 高 其 经 济 竞 争 力 和 综 合 实 力 的 重 要 保 障 本 文 从 西 部 民 族 地 区 教 育 发 展 的 现 状 入 手 指 出 中 华 人 民 共 和 国 成 立 多 年 来 西 部 民 族 地 区
第 期 李 伟 等 用 方 法 对 中 国 历 史 气 温 数 据 插 值 可 行 性 讨 论
李 伟 李 庆 祥 江 志 红 使 用 插 值 方 法 对 已 经 过 质 量 控 制 和 均 一 化 的 年 月 年 月 中 国 全 部 基 本 基 准 站 气 温 资 料 逐 月 进 行 空 间 插 值 通 过 站 点 的 实 际 序 列 与 插 值 后 格 点 序 列 进 行 比 较 针 对 相 关 系 数 和 线 性 趋 势 等 多 个 量 来 检 验 方 法 对 气 候 资 料 插 值 的
编号：
编 号 : 企 业 内 高 技 能 人 才 培 养 评 价 实 施 方 案 ( 仅 适 用 于 企 业 特 有 行 业 特 有 工 种 ) 实 施 单 位 ( 公 章 ) 申 报 日 期 年 _ 月 日 1 企 业 内 高 技 能 人 才 培 养 评 价 项 目 实 施 方 案 申 报 表 项 目 名 称 等 级 项 目 性 质 课 时 申 报 单 位 联 系 人 通 讯 地 址 电 话 手 机 电
导 数 和 微 分 的 概 念 导 数 的 几 何 意 义 和 物 理 意 义 函 数 的 可 导 性 与 连 续 性 之 间 的 关 系 平 面 曲 线 的 切 线 和 法 线 导 数 和 微 分 的 四 则 运 算 基 本 初 等 函 数 的 导 数 复 合 函 数 反 函 数 隐 函 数 以
2015 年 考 研 数 学 二 考 试 大 纲 考 试 科 目 : 高 等 数 学 线 性 代 数 考 试 形 式 和 试 卷 结 构 一 试 卷 满 分 及 考 试 时 间 试 卷 满 分 为 150 分, 考 试 时 间 为 180 分 钟. 二 答 题 方 式 答 题 方 式 为 闭 卷 笔 试. 三 试 卷 内 容 结 构 高 等 教 学 约 78% 线 性 代 数 约 22% 四 试 卷
课程类 别
美 声 演 唱 方 向 培 养 方 案 一 培 养 目 标 本 方 向 要 求 学 生 德 智 体 美 全 面 发 展, 培 养 能 在 文 艺 团 体 从 事 声 乐 演 唱 及 能 在 艺 术 院 校 从 事 本 方 向 教 学 的 高 级 门 人 才 二 培 养 规 格 本 方 向 学 生 应 系 统 掌 握 声 乐 演 唱 方 面 的 理 论 和 技 能, 具 备 较 高 的 声 乐 演 唱
一 开 放 性 的 政 策 与 法 规 二 两 岸 共 同 的 文 化 传 承 三 两 岸 高 校 各 自 具 有 专 业 优 势 远 见 杂 志 年 月 日
河 北 师 范 大 学 学 报 新 时 期 海 峡 两 岸 高 校 开 放 招 生 问 题 探 讨 郑 若 玲 王 晓 勇 海 峡 两 岸 高 校 开 放 招 生 是 新 时 期 推 进 海 峡 两 岸 高 等 教 育 交 流 与 合 作 的 重 要 尝 试 系 统 梳 理 改 革 开 放 以 来 两 岸 招 生 政 策 与 就 学 人 数 发 展 变 化 的 历 史 进 程 可 发 现 促 进 两
深圳市新亚电子制程股份有限公司
证 券 代 码 :002388 证 券 简 称 : 新 亚 制 程 公 告 编 号 :2016-053 深 圳 市 新 亚 电 子 制 程 股 份 有 限 公 司 2016 年 第 二 次 临 时 股 东 大 会 决 议 公 告 本 公 司 及 董 事 会 全 体 成 员 保 证 公 告 内 容 真 实 准 确 和 完 整, 不 存 在 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 者 重 大 遗 漏 特
评 委 : 徐 岩 宇 - 个 人 技 术 标 资 信 标 初 步 审 查 明 细 表 序 号 投 标 单 位 投 标 函 未 按 招 标 文 件 规 定 填 写 漏 填 或 内 容 填 写 错 误 的 ; 不 同 投 标 人 的 投 标 文 件 由 同 一 台 电 脑 或 同 一 家 投 标 单
评 委 : 徐 岩 宇 - 个 人 清 标 评 审 明 细 表 评 审 因 素 序 号 投 标 单 位 清 标 评 审 1 深 圳 市 创 捷 科 技 有 限 合 格 2 四 川 川 大 智 胜 软 件 股 份 有 限 合 格 3 北 京 航 天 长 峰 科 技 工 业 集 团 有 限 公 司 合 格 4 深 圳 中 兴 力 维 技 术 有 限 合 格 5 深 圳 键 桥 通 讯 技 术 股 份 有
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B3D6B2D6CFDEB6EEB1EDB8F1D7EED6D52E646F63>
国 内 各 期 货 交 易 所 关 于 合 约 限 仓 方 面 的 规 定 上 海 期 货 交 易 所 经 纪 会 员 非 经 纪 会 员 和 客 户 的 期 货 合 约 在 不 同 时 期 限 仓 的 具 体 比 例 和 数 额 如 下 : ( 单 位 : ) 合 约 挂 牌 至 交 割 月 前 第 二 月 的 最 后 一 个 交 易 日 交 割 月 前 第 一 月 交 割 月 份 某 一 期 货
I
机 电 一 级 注 册 建 造 师 继 续 教 育 培 训 广 东 培 训 点 网 上 报 名 操 作 使 用 手 册 (2013 年 1 月, 第 一 版 ) 第 一 章 个 人 注 册 与 个 人 信 息 管 理 1. 个 人 注 册 ( 请 每 人 只 申 请 一 个 注 册 号, 如 果 单 位 批 量 报 班 单 位 帮 申 请 注 册, 不 需 个 人 再 注 册 ) 首 次 报 班,
《C语言基础入门》课程教学大纲
C 语 言 开 发 入 门 教 程 课 程 教 学 大 纲 课 程 编 号 :201409210011 学 分 :5 学 分 学 时 :58 学 时 ( 其 中 : 讲 课 学 时 :39 学 时 上 机 学 时 :19 学 时 ) 先 修 课 程 : 计 算 机 导 论 后 续 课 程 :C++ 程 序 设 计 适 用 专 业 : 信 息 及 其 计 算 机 相 关 专 业 开 课 部 门 : 计
类 似 地, 又 可 定 义 变 下 限 的 定 积 分 : ( ). 与 ψ 统 称 为 变 限 积 分. f ( ) d f ( t) dt,, 注 在 变 限 积 分 (1) 与 () 中, 不 可 再 把 积 分 变 量 写 成 的 形 式 ( 例 如 ) 以 免 与 积 分 上 下 限 的
5 ( 一 ) 微 积 分 学 基 本 定 理 当 函 数 的 可 积 性 问 题 告 一 段 落, 并 对 定 积 分 的 性 质 有 了 足 够 的 认 识 之 后, 接 着 要 来 解 决 一 个 以 前 多 次 提 到 过 的 问 题 在 定 积 分 形 式 下 证 明 连 续 函 数 必 定 存 在 原 函 数. 一 变 限 积 分 与 原 函 数 的 存 在 性 设 f 在 [,] 上
名 称 生 命 科 学 学 院 083001 环 境 科 学 1 生 物 学 仅 接 收 院 内 调 剂, 初 试 分 数 满 足 我 院 生 物 学 复 试 最 低 分 数 线 生 命 科 学 学 院 071300 生 态 学 5 生 态 学 或 生 物 学 生 命 科 学 学 院 040102
华 中 师 范 大 学 2016 年 接 收 校 内 外 优 秀 硕 士 研 究 生 调 剂 信 息 表 名 称 经 济 与 工 商 管 理 学 院 020101 政 治 经 济 学 1 经 济 学 类 毕 业 学 校 与 报 考 学 校 不 低 于 我 校 办 学 层 次 经 济 与 工 商 管 理 学 院 020105 世 界 经 济 学 1 经 济 学 类 毕 业 学 校 与 报 考 学 校
所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 具 有 肉 品 科 学 与 技 术 食 品 科 学 专 业 背 景, 熟 悉 畜 禽 屠 宰 副 产 物 加 工 领 域 科 学 发 展 前 沿, 在 海 外 取 得 博 士 学 位 或 有 3 年 以 上 国 外 博 士 后 科 研 工
中 国 农 业 科 学 院 农 产 品 加 工 研 究 所 2016 年 青 年 英 才 计 划 人 才 招 聘 岗 位 和 应 聘 条 件 所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 熟 悉 粮 油 加 工 品 质 学 植 物 蛋 白 质 工 程 活 性 短 肽 与 多 糖 等 研 究 领 域, 在 海 外 获 得 博 士 学 位 或 获 得 博 油 料 加 工 与 品 粮 油 加
ETF、分级基金规模、份额变化统计20130816
ETF 分 级 基 金 规 模 份 额 变 化 统 计 截 至 上 周 末, 全 市 场 股 票 型 ETF 规 模 约 1451 亿, 份 额 约 1215 亿,ETF 总 份 额 及 规 模 的 周 变 动 值 分 别 为 -23-44 亿, 份 额 与 规 模 均 下 降 ; 分 级 基 金 规 模 约 438 亿, 份 额 572 亿, 总 份 额 及 规 模 的 周 变 动 值 分 别 为
修改版-操作手册.doc
职 称 信 息 系 统 升 级 指 南 须 使 用 IE9 及 其 以 上 版 本 浏 览 器 或 谷 歌 浏 览 器 登 录 www.njrs.gov.cn 南 京 市 职 称 ( 职 业 资 格 ) 工 作 领 导 小 组 办 公 室 2016 年 5 月 目 录 一 申 报 人 员 操 作 指 南...1 1.1 职 称 初 定 申 报...1 1.1.1 职 称 初 定 基 础 信 息 填
上海证券交易所会议纪要
附 件 上 海 市 场 首 次 公 开 发 行 股 票 网 下 发 行 实 施 细 则 第 一 章 总 则 第 一 条 为 规 范 拟 在 上 海 证 券 交 易 所 ( 以 下 简 称 上 交 所 ) 上 市 的 公 司 首 次 公 开 发 行 股 票 网 下 发 行 业 务, 提 高 首 次 公 开 发 行 股 票 网 下 申 购 及 资 金 结 算 效 率, 根 据 证 券 发 行 与 承 销
新, 各 地 各 部 门 ( 单 位 ) 各 文 化 事 业 单 位 要 高 度 重 视, 切 实 加 强 领 导, 精 心 组 织 实 施 要 根 据 事 业 单 位 岗 位 设 置 管 理 的 规 定 和 要 求, 在 深 入 调 查 研 究 广 泛 听 取 意 见 的 基 础 上, 研 究 提
广 西 壮 族 自 治 区 人 事 厅 广 西 壮 族 自 治 区 文 化 厅 文 件 桂 人 发 2009 42 号 关 于 印 发 广 西 壮 族 自 治 区 文 化 事 业 单 位 岗 位 设 置 结 构 比 例 指 导 标 准 的 通 知 各 市 人 事 局 文 化 局, 区 直 各 部 门 ( 单 位 ): 根 据 人 事 部 印 发 的 事 业 单 位 岗 位 设 置 管 理 试 行 办
朱 丽 明 柯 美 云 周 丽 雅 袁 耀 宗 罗 金 燕 候 晓 华 陈 旻 湖 滥 用 安 非 他 命 会 增 加 得 心 脏 病 的 风 险 据 美 国 科 技 新 闻 网 报 道 根 据 纽 约 路 透 社 报 道 一 份 新 的 研 究 显 示 青 年 及 成 年 人 若 滥 用 安 非 他 命 会 增 加 得 心 脏 病 的 风 险 美 国 德 州 大 学 西 南 医 学 中 心
抗 日 战 争 研 究 年 第 期
田 子 渝 武 汉 抗 战 时 期 是 国 共 第 二 次 合 作 的 最 好 时 期 在 国 共 合 作 的 基 础 上 出 现 了 抗 日 救 亡 共 御 外 侮 的 局 面 这 个 大 好 局 面 的 出 现 与 中 共 长 江 局 的 丰 功 伟 绩 是 分 不 开 的 但 长 期 以 来 由 于 有 一 个 王 明 的 右 倾 错 误 直 接 影 响 了 对 它 的 全 面 科 学 准 确
2006年顺德区高中阶段学校招生录取分数线
2014 年 顺 德 区 高 中 阶 段 学 校 考 试 提 前 批 第 一 批 第 二 批 学 校 录 取 根 据 佛 山 市 办 提 供 的 考 生 数 据, 现 将 我 区 2014 年 高 中 阶 段 学 校 考 试 提 前 批 第 一 批 第 二 批 学 校 的 录 取 公 布 如 下 : 一 顺 德 一 中 录 取 分 第 1 志 愿, 总 分 585, 综 合 表 现 评 价 A, 考
附件1：
附 件 5 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 申 请 表 硕 士 专 业 学 位 类 别 ( 工 程 领 域 ): 工 程 硕 士 ( 控 制 工 程 领 域 ) 申 报 单 位 名 称 : 上 海 工 程 技 术 大 学 一 申 请 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 论 证 报 告 申 请 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 论 证 报 告 一 专 业 人 才 需 求
金 不 少 于 800 万 元, 净 资 产 不 少 于 960 万 元 ; (3) 近 五 年 独 立 承 担 过 单 项 合 同 额 不 少 于 1000 万 元 的 智 能 化 工 程 ( 设 计 或 施 工 或 设 计 施 工 一 体 ) 不 少 于 2 项 ; (4) 近 三 年 每 年
工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 一 总 则 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 ( 一 ) 为 了 加 强 对 从 事 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 企 业 的 管 理, 维 护 建 筑 市 场 秩 序, 保 证 工 程 质 量 和 安 全, 促 进 行 业 健 康 发 展, 结 合 建 筑 智 能 化 工 程 的 特 点, 制 定 本 标
18 上 报 该 学 期 新 生 数 据 至 阳 光 平 台 第 一 学 期 第 四 周 至 第 六 周 19 督 促 学 习 中 心 提 交 新 增 专 业 申 请 第 一 学 期 第 四 周 至 第 八 周 20 编 制 全 国 网 络 统 考 十 二 月 批 次 考 前 模 拟 题 第 一 学
1 安 排 组 织 全 国 网 络 统 考 九 月 批 次 网 上 考 前 辅 导 第 一 学 期 第 一 周 统 考 考 前 半 个 月 2 下 发 全 国 网 络 统 考 九 月 批 次 准 考 证 第 一 学 期 第 一 周 导 出 下 半 年 成 人 本 科 学 士 学 位 英 语 统 一 考 试 报 考 3 信 息 第 一 学 期 第 一 周 4 教 学 计 划 和 考 试 计 划 上 网,
¹ º ¹ º 农 业 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 农 业 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个 月 及 以 上 的 流 动 人 口 非 农 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 非 农 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个
¹ 改 革 开 放 年 来 人 口 流 动 规 模 持 续 增 加 对 我 国 社 会 经 济 的 持 续 发 展 起 到 了 重 要 作 用 为 全 面 了 解 我 国 流 动 人 口 生 存 状 况 准 确 把 握 流 动 人 口 发 展 规 律 和 趋 势 不 断 加 强 流 动 人 口 服 务 管 理 引 导 人 口 有 序 流 动 合 理 分 布 国 家 人 口 计 生 委 于 年 月 启
马 克 思 主 义 公 正 观 的 基 本 向 度 及 方 法 论 原 则!! # #
马 克 思 主 义 公 正 观 的 基 本 向 度 及 方 法 论 原 则 马 俊 峰 在 社 会 公 正 问 题 的 大 讨 论 中 罗 尔 斯 诺 齐 克 哈 耶 克 麦 金 泰 尔 等 当 代 西 方 思 想 家 的 论 述 被 反 复 引 用 和 申 说 而 将 马 克 思 恩 格 斯 等 经 典 作 家 的 观 点 置 于 一 种 被 忽 视 甚 至 被 忘 却 的 状 态 形 成 这 种
国家职业标准：网络课件设计师
国 家 职 业 标 准 : 网 络 设 师 1. 职 业 概 况 1.1 职 业 名 称 网 络 设 师 1.2 职 业 定 义 运 用 学 习 理 论 和 教 学 设 原 理, 依 托 多 媒 体 与 网 络 技 术, 从 事 网 络 内 容 分 设 制 作 和 评 价 等 工 作 的 人 员 1.3 职 业 等 级 本 职 业 共 设 三 个 等 级, 分 别 为 : 四 级 网 络 设 师 (
网 球 / 排 球 1 教 师 硕 士 四 级 男 性 诊 断 教 研 室 1 教 师 博 士 或 硕 士 六 级 本 科 阶 段 为 临 床 医 学 专 业, 男 士 温 病 教 研 室 2 教 师 博 士 或 硕 士 六 级 中 医 专 业 中 医 诊 断 教 研 室 诊 断 学 / 中 医 诊
校 本 部 工 程 项 目 管 理 或 土 木 工 程 医 学 类 / 计 算 机 / 图 书 馆 专 业 1 专 技 硕 士 以 上 六 级 1 专 技 硕 士 以 上 六 级 1 年 以 上 工 程 造 价 管 理 或 现 场 施 工 管 理 经 验 的 ( 限 男 性 ) 中 医 药 类 专 业 1 编 辑 博 士 六 级 医 学 或 生 物 学 专 业 医 学 或 生 物 学 专 业 2 实
张 荣 芳 中 山 大 学 历 史 系 广 东 广 州 张 荣 芳 男 广 东 廉 江 人 中 山 大 学 历 史 系 教 授 博 士 生 导 师 我 们 要 打 破 以 前 学 术 界 上 的 一 切 偶 像 以 前 学 术 界 的 一 切 成 见 屏 除 我 们 要 实 地 搜 罗 材 料 到 民 众 中 寻 方 言 到 古 文 化 的 遗 址 去 发 掘 到 各 种 的 人 间 社 会 去
2014年中央财经大学研究生招生录取工作简报
2015 年 中 央 财 经 大 学 研 究 生 招 生 录 取 工 作 简 报 一 硕 士 研 究 生 招 生 录 取 情 况 2015 年 共 有 8705 人 报 考 我 校 硕 士 研 究 生, 其 中 学 术 型 研 究 生 报 考 3657 人, 专 业 硕 士 研 究 生 报 考 5048 人 ; 总 报 考 人 数 较 2014 年 增 长 1.4%, 学 术 型 报 考 人 数 较
!!!!!!!!!!
有 限 理 性 动 物 精 神 及 市 场 崩 溃 对 情 绪 波 动 与 交 易 行 为 的 实 验 研 究 林 树 俞 乔 资 本 市 场 的 经 验 表 明 市 场 参 与 主 体 投 资 者 的 情 绪 波 动 对 资 产 交 易 与 价 格 决 定 产 生 了 不 可 忽 视 的 影 响 但 是 现 有 文 献 尚 缺 乏 对 这 一 重 要 因 素 的 研 究 因 此 本 文 的 目 的
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B8BDBCFE34A3BAD2A9C6B7B2B9B3E4C9EAC7EBD7A2B2E1CAC2CFEEBCB0C9EAB1A8D7CAC1CFD2AAC7F32E646F63>
附 件 4: 药 品 补 充 申 请 注 册 事 项 及 申 报 资 料 要 求 一 注 册 事 项 ( 一 ) 国 家 食 品 药 品 监 督 管 理 局 审 批 的 补 充 申 请 事 项 : 1. 持 有 新 药 证 书 的 药 品 生 产 企 业 申 请 该 药 品 的 批 准 文 号 2. 使 用 药 品 商 品 名 称 3. 增 加 中 药 的 功 能 主 治 天 然 药 物 适 应 症
收 入 支 出 项 目 2016 年 预 算 项 目 2016 年 预 算 预 算 01 表 单 位 : 万 元 ( 保 留 两 位 小 数 ) 一 公 共 财 政 预 算 拨 款 50.06 一 人 员 经 费 23.59 1 一 般 财 力 50.06 1 人 员 支 出 21.95 2 成 品
100.12 2016 年 龙 岩 市 部 门 预 算 表 报 送 日 期 : 年 月 日 单 位 负 责 人 签 章 : 财 务 负 责 人 签 章 : 制 表 人 签 章 : 收 入 支 出 项 目 2016 年 预 算 项 目 2016 年 预 算 预 算 01 表 单 位 : 万 元 ( 保 留 两 位 小 数 ) 一 公 共 财 政 预 算 拨 款 50.06 一 人 员 经 费 23.59
一 从 分 封 制 到 郡 县 制 一 从 打 虎 亭 汉 墓 说 起
县 乡 两 级 的 政 治 体 制 改 革 如 何 建 立 民 主 的 合 作 新 体 制 县 乡 人 大 运 行 机 制 研 究 课 题 组 引 言 一 从 分 封 制 到 郡 县 制 一 从 打 虎 亭 汉 墓 说 起 二 密 县 在 周 初 是 两 个 小 国 密 国 和 郐 国 三 密 县 的 第 一 任 县 令 卓 茂 四 明 清 时 代 的 密 县 二 从 集 中 的 动 员 体
工 程 勘 察 资 质 标 准 根 据 建 设 工 程 勘 察 设 计 管 理 条 例 和 建 设 工 程 勘 察 设 计 资 质 管 理 规 定, 制 定 本 标 准 一 总 则 ( 一 ) 本 标 准 包 括 工 程 勘 察 相 应 专 业 类 型 主 要 专 业 技 术 人 员 配 备 技 术
住 房 和 城 乡 建 设 部 关 于 印 发 工 程 勘 察 资 质 标 准 的 通 知 建 市 [2013]9 号 各 省 自 治 区 住 房 和 城 乡 建 设 厅, 北 京 市 规 划 委, 天 津 上 海 市 建 设 交 通 委, 重 庆 市 城 乡 建 设 委, 新 疆 生 产 建 设 兵 团 建 设 局, 总 后 基 建 营 房 部 工 程 局, 国 务 院 有 关 部 门 建 设 司,
100566035515613 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566035715658 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566037615926 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000100357 101 思 想
2016 年 天 津 大 学 硕 士 学 位 研 究 生 考 试 初 试 成 绩 复 核 结 果 公 示 考 生 编 号 科 目 码 科 目 名 称 复 核 结 果 100566000100858 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000101151 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000101348 101 思 想 政 治 理 论 经
数 学 标 准 不 练 习 1.1 理 解 问 题 并 坚 持 解 决 这 些 问 题 1.2 以 抽 象 和 定 量 方 式 推 理 1.3 建 构 可 行 参 数 和 评 判 他 人 的 推 理 1.4 使 用 数 学 方 法 建 模 1.5 策 略 性 地 使 用 合 适 的 工 具 1.6
课 程 表 格 科 学 框 架 不 练 习 1.1 提 问 1.2 开 发 和 使 用 模 型 1.3 规 划 和 开 展 调 查 1.4 分 析 和 解 释 数 据 1.5 使 用 数 学 运 算 信 息 和 计 算 机 技 术 以 及 计 算 思 维 1.6 构 造 解 释 和 设 计 解 决 方 案 1.7 通 过 证 据 进 行 论 证 1.8 获 取 评 估 和 交 流 信 息 跨 领 域
01
Zebra Technologies 利 用 移 动 技 术 提 高 货 运 公 司 工 作 效 率 和 成 本 效 益 货 运 物 流 自 动 化 案 例 在 当 前 严 峻 的 经 济 形 势 下, 公 路 货 运 公 司 开 始 寻 求 提 高 效 率 降 低 运 营 开 支 和 保 留 客 户 的 有 效 途 径 然 而, 他 们 面 临 的 冷 酷 现 实 是 燃 料 价 格 难 以 预
际 联 考 的 非 美 术 类 本 科, 提 前 批 本 科 体 育 类 第 一 批 第 二 批 第 三 批 的 理 工 类 和 文 史 类 本 科 平 行 志 愿, 考 生 可 以 填 报 6 所 院 校 志 愿 符 合 贫 困 地 区 专 项 计 划 和 农 村 考 生 专 项 计 划 报 考
第 四 部 分 平 行 志 愿 57. 什 么 是 平 行 志 愿?/ 32 58. 我 省 在 哪 个 批 次 实 行 平 行 志 愿? 考 生 最 多 可 以 填 报 几 所 院 校 志 愿?/ 32 59. 第 一 二 三 批 本 科 平 行 志 愿 如 何 投 档?/ 32 60. 艺 术 本 科 ( 二 ) 艺 术 本 科 ( 三 ) 和 体 育 本 科 的 平 行 志 愿 如 何 投 档?/
目 录 第 一 部 分 概 况 一 主 要 职 能 二 部 门 预 算 单 位 构 成 第 二 部 分 15 年 部 门 预 算 表 一 15 年 收 支 预 算 总 表 二 15 年 收 入 预 算 表 三 15 年 支 出 预 算 表 ( 按 科 目 ) 四 15 年 支 出 预 算 表 ( 按
15 年 山 东 省 科 学 院 部 门 预 算 1 目 录 第 一 部 分 概 况 一 主 要 职 能 二 部 门 预 算 单 位 构 成 第 二 部 分 15 年 部 门 预 算 表 一 15 年 收 支 预 算 总 表 二 15 年 收 入 预 算 表 三 15 年 支 出 预 算 表 ( 按 科 目 ) 四 15 年 支 出 预 算 表 ( 按 单 位 ) 五 15 年 财 政 拨 款 支
2015-2016 学 年 第 二 学 期 集 中 考 试 安 排 (18 周 ) 考 试 日 期 :6 月 27 日 星 期 一 8:10-9:50 第 二 公 共 教 学 楼 A 区 A303 10811046 高 等 数 学 ( 理 二 2) 复 材 1501-2 材 料 科 学 与 工 程
考 试 时 间 2015-2016 学 年 第 二 学 期 集 中 考 试 安 排 (18 周 ) 考 试 日 期 :6 月 27 日 星 期 一 考 场 所 在 教 学 楼 ( 教 学 区 ) 考 试 教 室 课 程 号 课 程 名 考 生 所 在 专 业 ( 班 级 ) 考 生 所 属 学 院 8:10-9:50 第 二 公 共 教 学 楼 A 区 A101 10811026 高 等 数 学 (
第2章 数据类型、常量与变量
第 2 章 数 据 类 型 常 量 与 变 量 在 计 算 机 程 序 中 都 是 通 过 值 (value) 来 进 行 运 算 的, 能 够 表 示 并 操 作 值 的 类 型 为 数 据 类 型 在 本 章 里 将 会 介 绍 JavaScript 中 的 常 量 (literal) 变 量 (variable) 和 数 据 类 型 (data type) 2.1 基 本 数 据 类 型 JavaScript
i 1) 系 统 运 作 前 设 定 *1. [2.1 网 页 主 机 名 称 设 定 ] -- 设 定 校 务 系 统 的 主 机 IP 地 址, 以 供 其 他 个 人 电 脑 连 接 及 使 用 该 系 统 *2. [2.3.1 输 入 / 修 改 学 校 资 料 ] -- 输 入 系 统 使
![i 1) 系 统 运 作 前 设 定 *1. [2.1 网 页 主 机 名 称 设 定 ] -- 设 定 校 务 系 统 的 主 机 IP 地 址, 以 供 其 他 个 人 电 脑 连 接 及 使 用 该 系 统 *2. [2.3.1 输 入 / 修 改 学 校 资 料 ] -- 输 入 系 统 使](/thumbs/41/22715617.jpg "i 1) 系 统 运 作 前 设 定 *1. [2.1 网 页 主 机 名 称 设 定 ] -- 设 定 校 务 系 统 的 主 机 IP 地 址, 以 供 其 他 个 人 电 脑 连 接 及 使 用 该 系 统 *2. [2.3.1 输 入 / 修 改 学 校 资 料 ] -- 输 入 系 统 使")
校 务 系 统 使 用 步 骤 说 明 手 册 简 介 此 手 册 是 配 合 校 务 系 统 使 用 手 册 编 辑 的, 因 此 必 须 同 时 参 考 校 务 系 统 使 用 手 册, 以 获 知 更 详 细 的 使 用 说 明 此 手 册 主 要 记 载 几 项 较 为 复 杂 事 务 的 处 理 步 骤 及 说 明, 以 让 使 用 者 更 容 易 掌 握 及 使 用 校 务 系 统 其
( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,
![( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,](/thumbs/39/20125331.jpg "( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,")
( ) ( )... 李 雪 岩, 龙 耀 (. 广 西 民 族 大 学 商 学 院, 广 西 南 宁 ;. 中 山 大 学 教 育 学 院, 广 东 广 州 ) : 高 等 教 育 是 专 业 教 育 高 考 是 为 高 等 教 育 服 务 的, 是 为 高 等 专 业 教 育 选 拔 有 专 业 培 养 潜 质 的 人 才 现 行 高 考 制 度 忽 略 专 业 潜 质 的 因 素, 过 份 强
第 六 章 债 券 股 票 价 值 评 估 1 考 点 一 : 债 券 价 值 的 影 响 因 素 2
Professional Accounting Education Provided by Academy of Professional Accounting (APA) CPA 财 务 管 理 习 题 班 第 八 讲 债 券 股 票 价 值 评 估 IreneGao ACCAspace 中 国 ACCA 国 际 注 册 会 计 师 教 育 平 台 Copyright ACCAspace.com
伊 犁 师 范 学 院 611 语 言 学 概 论 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 语 言 学 纲 要 笔 记, 由 考 取 本 校 本 专 业 高 分 研 究 生 总 结 而 来, 重 点 突 出, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 效
伊 犁 师 范 学 院 611 语 言 学 概 论 全 套 考 研 资 料 ......2 伊 犁 师 范 学 院 802 文 学 概 论 全 套 考 研 资 料 ......2 伊 犁 师 范 学 院 702 普 通 物 理 全 套 考 研 资 料 ......3 伊 犁
Template BR_Rec_2005.dot
ITU-R BT.1789 建 议 书 1 ITU-R BT.1789 建 议 书 在 分 组 视 频 传 输 中 利 用 传 输 误 码 信 息 重 建 接 收 视 频 的 方 法 (ITU-R 44/6 和 ITU-R 109/6 课 题 ) (2007 年 ) 范 围 本 建 议 书 对 业 务 提 供 商 重 建 接 收 视 频 的 方 法 做 了 详 细 介 绍, 以 便 利 用 传 输
<4D F736F F D20322EC9F3BACBC8CBD4B1D7CAB8F1D7A2B2E1B9DCC0EDB9E6B7B6B8BDB1ED2E646F63>
审 核 人 员 资 格 管 理 规 范 版 次 :F/0 附 表 1: QMS/EMS/OHSMS 管 理 体 系 审 核 员 通 用 要 求 申 请 条 件 初 次 综 合 素 质 考 核 越 级 晋 升 条 件 实 习 审 核 员 审 核 员 主 任 审 核 员 1. 高 等 教 育 : 大 学 本 科 以 上 学 历, 或 大 专 学 历 及 相 2. 工 作 1 : ; 3. 专 业 工 作
,2003. 11 (CIP) /. - : ISBN 7-5364 - 5381-7... -.R657.1 CIP (2003) 102797 3 61 0012 880mm1230m m 1/ 32 10. 5 242 1 2003 11 2003 11 1-2 000 35.00 IS BN
,2003. 11 (CIP) /. - : ISBN 7-5364 - 5381-7... -.R657.1 CIP (2003) 102797 3 61 0012 880mm1230m m 1/ 32 10. 5 242 1 2003 11 2003 11 1-2 000 35.00 IS BN 7-5364 - 5381-7,, : 3 : 61001 2 : 866710 39 866728
生 物 技 术 通 报 相 关 载 体 及 试 剂 动 物 组 织 及 细 胞 培 养 总 的 提 取 及 反 转 录 内 蒙 古 白 绒 山 羊 基 因 的 分 子 克 隆 生 物 信 息 学 分 析
生 物 技 术 通 报 鲍 文 蕾 杨 娇 馥 李 彬 刘 俊 娥 王 潇 郭 旭 东 王 志 钢 侯 鑫 刘 东 军 旨 在 克 隆 内 蒙 古 白 绒 山 羊 血 管 内 皮 生 长 因 子 基 因 并 分 析 其 基 本 表 达 模 式 采 用 技 术 克 隆 基 因 将 得 到 的 基 因 序 列 及 其 编 码 的 氨 基 酸 序 列 进 行 生 物 信 息 学 分 析 利 用 半 定 量
保健食品功能目录管理办法
保 健 食 品 保 健 功 能 目 录 与 原 料 目 录 管 理 办 法 ( 征 求 意 见 稿 ) 第 一 章 总 则 第 一 条 [ 目 的 依 据 ] 为 规 范 保 健 食 品 保 健 功 能 目 录 和 保 健 食 品 原 料 目 录 的 管 理 工 作, 根 据 中 华 人 民 共 和 国 食 品 安 全 法, 制 定 本 办 法 第 二 条 [ 适 用 范 围 ] 中 华 人 民 共
测 谱 学 基 础 宽 波 段 遥 感
燕 守 勋 武 晓 波 周 朝 宪 刘 朝 晖 庄 永 成 曹 春 香 魏 欣 欣 于 彩 虹 肖 春 生 中 国 科 学 院 遥 感 应 用 研 究 所 北 京 有 色 金 属 矿 产 地 质 调 查 中 心 北 京 青 海 西 部 资 源 公 司 西 宁 青 海 青 海 省 地 质 调 查 院 西 宁 青 海 根 据 年 出 版 的 专 辑 近 年 来 发 表 的 相 关 文 献 以 及 研 究
第 四 条 建 设 单 位 对 可 能 产 生 职 业 病 危 害 的 建 设 项 目, 应 当 依 照 本 办 法 向 安 全 生 产 监 督 管 理 部 门 申 请 职 业 卫 生 三 同 时 的 备 案 审 核 审 查 和 竣 工 验 收 建 设 项 目 职 业 卫 生 三 同 时 工 作 可
第 51 号 建 设 项 目 职 业 卫 生 三 同 时 监 督 管 理 暂 行 办 法 已 经 2012 年 3 月 6 日 国 家 安 全 生 产 监 督 管 理 总 局 局 长 办 公 会 议 审 议 通 过, 现 予 公 布, 自 2012 年 6 月 1 日 起 施 行 国 家 安 全 生 产 监 督 管 理 总 局 骆 琳 二 一 二 年 四 月 二 十 七 日 建 设 项 目 职 业
untitled
( 一 ) 深 刻 认 识 学 习 教 育 的 重 大 意 义 : - 3 - ( 二 ) 明 确 学 习 教 育 的 任 务 目 标 ( 三 ) 把 握 特 点 方 法 - 4 - ( 四 ) 坚 持 六 项 原 则 在 - 5 - ( 五 ) 着 力 解 决 问 题 - 6 - - 7 - - 8 - ( 一 ) 学 党 章 党 规, 进 一 步 明 确 党 员 标 准 树 立 行 为 规 范
反 学 校 文 化 与 阶 级 再 生 产 小 子 与 子 弟 之 比 较 周 潇 作 者 通 过 对 北 京 某 打 工 子 弟 学 校 的 田 野 调 查 后 发 现 在 农 民 工 子 弟 中 间 盛 行 着 类 似 学 做 工 中 所 描 述 的 工 人 阶 级 小 子 的 反 学 校 文 化 但 是 由 于 制 度 安 排 与 社 会 条 件 的 差 异 子 弟 与 小 子 的 反 学 校
教师上报成绩流程图
教 务 管 理 系 统 使 用 说 明 学 生 端 用 户 1 在 校 内 任 何 一 台 连 接 校 园 网 的 计 算 机 上 登 录 教 务 处 主 页 教 务 处 主 页 地 址 : http://jw.stdu.edu.cn/homepage 随 后 点 击 按 钮 ( 见 下 图 所 示 ), 即 可 进 入 综 合 教 务 管 理 系 统 2 在 综 合 教 务 管 理 区 域 内 键
一 六 年 级 下 册 教 科 书 总 体 说 明 ( 一 ) 教 学 内 容 本 册 教 科 书 一 共 安 排 了 5 个 教 学 单 元, 其 中 前 4 个 单 元 为 新 知 识, 第 五 单 元 是 对 整 个 小 学 阶 段 所 学 数 学 知 识 系 统 的 整 理 和 复 习
西 南 师 大 版 小 学 数 学 六 年 级 下 册 教 科 书 分 析 及 教 学 建 议 重 庆 市 教 育 科 学 研 究 院 李 光 树 一 六 年 级 下 册 教 科 书 总 体 说 明 ( 一 ) 教 学 内 容 本 册 教 科 书 一 共 安 排 了 5 个 教 学 单 元, 其 中 前 4 个 单 元 为 新 知 识, 第 五 单 元 是 对 整 个 小 学 阶 段 所 学 数 学
行政管理学考试题库
中 央 民 族 大 学 硕 士 研 究 生 入 学 考 试 初 试 科 目 考 试 大 纲 科 目 代 码 :815 科 目 名 称 : 行 政 管 理 学 I. 考 查 目 标 行 政 管 理 学 考 试 涵 盖 公 共 管 理 一 般 原 理 公 共 政 策 分 析 公 共 组 织 管 理 领 导 科 学 公 共 部 门 人 力 资 源 管 理 政 府 改 革 与 治 理 等 方 面 的 相 关
供 试 材 料 试 验 试 剂 和 仪 器 基 因 组 提 取 分 析 方 法 反 应 体 系 最 佳 配 比 的 筛 选 退 火 温 度 对 扩 增 效 果 的 影 响
生 物 技 术 通 报 胡 立 敏 陶 兴 林 侯 栋 朱 惠 霞 张 东 琴 选 取 温 敏 花 椰 菜 不 育 系 与 杂 交 组 合 的 高 可 育 和 高 不 育 单 株 构 建 基 因 池 利 用 对 随 机 引 物 对 其 进 行 标 记 同 时 采 用 正 交 设 计 对 其 反 应 体 系 及 扩 增 条 件 进 行 优 化 试 验 结 果 表 明 在 反 应 体 系 中 含 引 物
3 复 试 如 何 准 备 4 复 试 成 绩 计 算 5 复 试 比 例 6 复 试 类 型 7 怎 么 样 面 对 各 种 复 试 04 05
1 复 试 流 程 2 复 试 考 查 形 式 02 03 3 复 试 如 何 准 备 4 复 试 成 绩 计 算 5 复 试 比 例 6 复 试 类 型 7 怎 么 样 面 对 各 种 复 试 04 05 2 怎 样 给 导 师 留 下 良 好 的 第 一 印 象 把 握 进 门 时 机 1 面 试 中 穿 着 的 瞒 天 过 海 3 无 声 胜 有 声 的 肢 体 语 言 育 4 眼 睛 是 心
全国建筑市场注册执业人员不良行为记录认定标准（试行）.doc
- 1 - - 2 - 附 件 全 国 建 筑 市 场 注 册 执 业 人 员 不 良 记 录 认 定 标 准 ( 试 行 ) 说 明 为 了 完 善 建 筑 市 场 注 册 执 业 人 员 诚 信 体 系 建 设, 规 范 执 业 和 市 场 秩 序, 依 据 相 关 法 律 法 规 和 部 门 规 章, 根 据 各 行 业 特 点, 我 部 制 订 了 全 国 建 筑 市 场 注 册 执 业 人
第二讲 数列
Togisu XueD Persolized Eduio Developme Ceer 高 考 中 不 等 式 问 题 的 解 决 方 法 通 润 达 久 王 力 前 言 : 近 年 来 不 等 式 问 题 正 越 来 越 多 的 出 现 在 调 研 题 和 高 考 试 题 中 而 且 大 多 出 现 在 江 苏 高 考 的 填 空 压 轴 题 中 是 高 考 考 察 的 重 点 和 难 点 由 于
西 南 大 学 硕 士 学 位 论 文 网 络 购 物 动 机 问 卷 的 编 制 及 实 测 姓 名 : 曹 建 英 申 请 学 位 级 别 : 硕 士 专 业 : 基 础 心 理 学 指 导 教 师 : 张 进 辅 20090401 网 络 购 物 动 机 问 卷 的
Microsoft Word - 中节能_工业项目节能评估审查导则Draft.doc
0 -------------------------------------------------------------------------------- 2 ----------------------------------------------------------------------------- 2 节 评 ----------------------------------------------------------------------------------------------------
正 规 培 训 达 规 定 标 准 学 时 数, 并 取 得 结 业 证 书 二 级 可 编 程 师 ( 具 备 以 下 条 件 之 一 者 ) (1) 连 续 从 事 本 职 业 工 作 13 年 以 上 (2) 取 得 本 职 业 三 级 职 业 资 格 证 书 后, 连 续 从 事 本 职 业
1. 职 业 概 况 1.1 职 业 名 称 可 编 程 师 1.2 职 业 定 义 可 编 程 师 国 家 职 业 标 准 从 事 可 编 程 序 控 制 器 (PLC) 选 型 编 程, 并 对 应 用 进 行 集 成 和 运 行 管 理 的 人 员 1.3 职 业 等 级 本 职 业 共 设 四 个 等 级, 分 别 为 : 四 级 可 编 程 师 ( 国 家 职 业 资 格 四 级 ) 三
!!
梁 运 文 霍 震 刘 凯 本 文 利 用 奥 尔 多 中 心 的 调 查 数 据 从 三 个 方 面 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 状 况 进 行 了 详 细 的 实 证 分 析 首 先 刻 画 了 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 的 总 体 统 计 特 征 然 后 从 财 产 构 成 出 发 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 进 行 了 结 构 分 解 最 后 通
公 开 刊 物 须 有 国 内 统 一 刊 (CN), 发 表 文 章 的 刊 物 需 要 在 国 家 新 闻 出 版 广 电 总 局 (www.gapp.gov.cn 办 事 服 务 便 民 查 询 新 闻 出 版 机 构 查 询 ) 上 能 够 查 到 刊 凡 在 有 中 国 标 准 书 公 开
杭 教 人 2014 7 杭 州 市 教 育 局 关 于 中 小 学 教 师 系 列 ( 含 实 验 教 育 管 理 ) 晋 升 高 级 专 业 技 术 资 格 有 关 论 文 要 求 的 通 知 各 区 县 ( 市 ) 教 育 局 ( 社 发 局 ), 直 属 学 校 ( 单 位 ), 委 托 单 位 : 为 进 一 步 规 范 杭 州 市 中 小 学 教 师 系 列 ( 含 实 验 教 育 管
3. 稀 释 样 本 通 常 在 送 检 的 样 本 中, 各 种 细 胞 相 互 重 叠 分 析 仪 无 法 在 此 情 况 下 准 确 地 计 算 血 细 胞 的 数 目 或 统 计 血 细 胞 的 体 积 分 布 因 此, 在 分 析 仪 计 数 或 统 计 体 积 分 布 之 前, 需 要
1. 概 述 本 分 析 仪 采 用 电 阻 抗 法 检 测 红 细 胞 白 细 胞 和 血 小 板 的 数 目 以 及 体 积 分 布, 采 用 比 色 法 测 量 血 红 蛋 白 浓 度 在 此 基 础 之 上, 分 析 仪 计 算 出 其 余 参 数 的 结 果 2. 吸 取 样 本 在 全 血 工 作 模 式 下, 操 作 者 可 直 接 将 全 血 样 本 送 至 分 析 仪 进 行 采
2. 本 次 修 改 后, 投 资 者 申 购 新 股 的 持 有 市 值 要 求 市 值 计 算 规 则 及 证 券 账 户 使 用 的 相 关 规 定 是 否 发 生 了 变 化? 答 : 未 发 生 变 化 投 资 者 申 购 新 股 的 持 有 市 值 是 指, 以 投 资 者 为 单 位
新 股 网 上 网 下 发 行 实 施 细 则 问 答 上 交 所 2016-01-05 一 网 上 发 行 业 务 问 答 1. 本 次 修 改 的 主 要 内 容 是 什 么? 答 : 本 次 修 改 的 主 要 内 容 包 括 : 一 是 取 消 了 投 资 者 在 申 购 委 托 时 应 全 额 缴 纳 申 购 资 金 的 规 定, 明 确 了 投 资 者 应 根 据 最 终 确 定 的 发
<4D6963726F736F667420576F7264202D20C6F3D2B5C5E0D1B5CAA6B9FABCD2D6B0D2B5B1EAD7BC2E646F63>
企 业 培 训 师 国 家 职 业 标 准 1. 职 业 概 况 1.1 职 业 名 称 企 业 培 训 师 1.2 职 业 定 义 指 能 够 结 合 经 济 技 术 发 展 和 就 业 要 求, 研 究 开 发 针 对 新 职 业 ( 工 种 ) 的 培 训 项 目, 以 及 根 据 企 业 生 产 经 营 需 要, 掌 握 并 运 用 现 代 培 训 理 念 和 手 段, 策 划 开 发 培
精 勤 求 学 自 强 不 息 Born to win! 解 析 : 由 极 限 的 保 号 性 知 存 在 U ( a) 当 a 时 f ( ) f ( a) 故 f ( ) 在 点 a 不 取 极 值 f ( ) f ( a) f ( ) f ( a) lim lim a a a a ( a)
年 考 研 数 学 二 模 拟 题 ( 二 ) 参 考 答 案 本 试 卷 满 分 5 考 试 时 间 8 分 钟 一 选 择 题 :~8 小 题 每 小 题 分 共 分 下 列 每 小 题 给 出 的 四 个 选 项 中 只 有 一 项 符 合 题 目 要 求 的 请 将 所 选 项 前 的 字 母 填 在 答 题 纸 指 定 位 置 上 () 在 点 处 不 存 在 极 限 的 函 数 是 (
上证指数
上 证 与 修 正 方 法 一 ( 一 ) 计 算 公 式 1. 上 证 指 数 系 列 均 采 用 派 许 加 权 综 合 价 格 指 数 公 式 计 算 2. 上 证 180 指 数 上 证 50 指 数 等 以 成 份 股 的 调 整 股 本 数 为 权 数 进 行 加 权 计 算, 计 算 公 式 为 : 报 告 期 指 数 =( 报 告 期 样 本 股 的 调 整 市 值 / 基 期 )
2016年德州市机构编制委员会
2016 年 德 州 市 机 构 编 制 委 员 会 办 公 室 部 门 预 算 -1- 第 一 部 分 部 门 概 况 目 录 一 主 要 职 能 二 部 门 预 算 单 位 构 成 第 二 部 分 2016 年 部 门 预 算 表 表 1 2016 年 收 支 预 算 总 表 表 2 2016 2016 年 收 入 预 算 表 ( 科 目 ) 表 3 2016 年 收 入 预 算 表 ( 单 位