参 照 等 建 立 的 分 级 法 于 缺 血 再 灌 注 后 对 各 组 动 物 进 行 神 经 功 能 缺 陷 评 分 无 症 状 提 尾 时 损 伤 对 侧 前 肢 不 能 伸 直 向 损 伤 对 侧 推 力 下 降 向 损 伤 对 侧 转 圈 采 用 小 鼠 脑 片 染 色 法 小 鼠 于

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1 油 酰 乙 醇 胺 对 小 鼠 局 灶 性 脑 缺 血 的 保 护 作 用 杨 立 朝 杨 武 双 周 宇 金 鑫 观 察 新 型 激 动 剂 油 酰 乙 醇 胺 对 小 鼠 局 灶 性 脑 缺 血 损 伤 的 保 护 作 用 及 特 点 线 栓 法 制 备 小 鼠 大 脑 中 动 脉 栓 塞 模 型 诱 导 脑 缺 血 收 稿 日 期 修 回 日 期 基 金 项 目 厦 门 市 科 技 计 划 资 助 项 目 作 者 简 介 杨 立 朝 男 硕 士 生 研 究 方 向 心 脑 血 管 药 理 学 周 宇 女 博 士 讲 师 研 究 方 向 心 脑 血 管 药 理 学 通 讯 作 者 在 术 前 开 始 每 天 灌 胃 给 药 次 或 在 缺 血 前 再 灌 注 同 时 再 灌 后 各 单 次 灌 胃 给 予 脑 缺 血 再 灌 注 后 测 定 小 鼠 神 经 功 能 缺 失 评 分 脑 梗 死 体 积 脑 水 肿 等 评 定 脑 缺 血 损 伤 的 指 标 术 前 多 次 给 药 及 缺 血 前 或 再 灌 注 同 时 单 次 给 药 可 明 显 改 善 小 鼠 神 经 功 能 损 伤 减 小 脑 梗 死 体 积 和 减 轻 脑 水 肿 程 度 且 以 再 灌 注 同 时 单 次 给 药 效 果 最 为 明 显 剂 量 及 时 间 依 赖 性 的 保 护 小 鼠 局 灶 性 脑 缺 血 急 性 损 伤 有 效 剂 量 为 和 最 佳 治 疗 时 间 点 为 再 灌 注 同 时 油 酰 乙 醇 胺 大 脑 中 动 脉 栓 塞 脑 缺 血 再 灌 注 损 伤 有 效 剂 量 最 佳 治 疗 时 间 点 小 鼠 油 酰 乙 醇 胺 是 一 种 天 然 存 在 于 组 织 和 循 环 血 液 中 的 脂 肪 酸 乙 醇 胺 类 化 合 物 在 脑 内 的 功 能 逐 渐 引 起 人 们 的 重 视 在 兴 奋 性 脑 损 伤 后 脑 内 神 经 元 释 放 且 发 挥 明 显 的 神 经 保 护 作 用 另 有 研 究 报 道 脑 梗 死 患 者 脑 组 织 内 大 量 释 放 且 主 要 集 中 在 脑 缺 血 原 发 灶 的 周 边 区 提 示 对 缺 血 后 脑 损 伤 可 能 具 有 保 护 作 用 那 么 外 源 性 应 用 是 否 具 有 抗 脑 缺 血 损 伤 作 用 作 用 特 点 又 如 何 呢 本 研 究 在 小 鼠 局 灶 型 脑 缺 血 模 型 上 观 察 新 型 激 动 剂 是 否 具 有 抗 脑 缺 血 损 伤 作 用 并 进 一 步 阐 明 其 作 用 的 特 点 健 康 昆 明 种 小 鼠 体 重 由 厦 门 大 学 医 学 院 实 验 动 物 中 心 提 供 合 格 证 号 闽 自 然 光 照 周 期 饲 养 术 前 禁 食 自 由 饮 水 油 酰 乙 醇 胺 厦 门 大 学 医 学 院 药 学 系 提 供 临 用 前 用 含 体 积 分 数 为 的 吐 温 的 生 理 盐 水 配 置 所 需 浓 度 三 苯 基 氯 化 四 氮 唑 美 国 公 司 产 品 其 余 均 为 市 售 分 析 纯 产 品 型 电 热 恒 温 振 荡 水 槽 上 海 精 宏 实 验 设 备 有 限 公 司 显 微 手 术 器 械 上 海 医 疗 器 械 集 团 有 限 公 司 手 术 器 械 厂 数 码 相 机 日 本 佳 能 公 司 参 照 等 建 立 的 方 法 制 备 小 鼠 右 侧 大 脑 中 动 脉 栓 塞 模 型 小 鼠 用 质 量 浓 度 为 的 水 合 氯 醛 腹 腔 注 射 麻 醉 后 分 离 颈 总 动 脉 将 头 端 用 聚 胺 酯 处 理 的 直 径 为 的 尼 龙 丝 线 经 颈 总 动 脉 切 口 插 入 颈 内 动 脉 线 栓 插 入 总 长 度 自 颈 总 动 脉 分 叉 部 记 为 缺 血 后 拔 除 线 栓 即 恢 复 血 供 动 物 术 中 及 术 后 麻 醉 清 醒 前 给 予 保 温 动 物 苏 醒 后 出 现 对 侧 肢 体 运 动 障 碍 即 为 模 型 制 备 成 功 实 验 小 鼠 随 机 分 为 组 ¹ 假 手 术 组 组 术 前 用 体 积 分 数 为 的 吐 温 灌 胃 º 模 型 组 组 术 前 用 体 积 分 数 为 的 吐 温 灌 胃»¼½ 组 分 别 为 术 前 给 予 灌 胃 进 行 手 术 造 模 另 取 实 验 小 鼠 随 机 分 为 组 ¹ 假 手 术 组 组 术 前 用 体 积 分 数 为 的 吐 温 灌 胃 º 模 型 组 组 术 前 用 体 积 分 数 为 的 吐 温 灌 胃»¼ ½¾ 分 别 为 缺 血 前 再 灌 注 同 时 再 灌 后 组 在 相 应 的 时 间 点 单 次 灌 胃 给 予

2 参 照 等 建 立 的 分 级 法 于 缺 血 再 灌 注 后 对 各 组 动 物 进 行 神 经 功 能 缺 陷 评 分 无 症 状 提 尾 时 损 伤 对 侧 前 肢 不 能 伸 直 向 损 伤 对 侧 推 力 下 降 向 损 伤 对 侧 转 圈 采 用 小 鼠 脑 片 染 色 法 小 鼠 于 缺 血 再 灌 注 后 断 头 取 脑 切 成 厚 的 冠 状 切 片 置 于 质 量 浓 度 为 的 溶 液 中 孵 育 正 常 脑 组 织 着 深 红 色 梗 死 脑 组 织 不 着 色 在 质 量 浓 度 为 的 多 聚 甲 醛 溶 液 中 避 光 固 定 后 数 码 相 机 拍 照 应 用 图 像 分 析 系 统 测 量 脑 梗 死 面 积 并 计 算 脑 梗 死 体 积 用 损 伤 侧 脑 半 球 体 积 非 损 伤 侧 脑 半 球 体 积 非 损 伤 侧 脑 半 球 体 积 来 反 映 脑 水 肿 程 度 所 有 实 验 数 据 均 以 表 示 采 用 软 件 进 行 统 计 学 分 析 组 间 比 较 用 单 因 素 方 差 分 析 当 方 差 分 析 差 异 有 显 著 性 时 进 一 步 用 检 验 作 两 两 比 较 缺 血 再 灌 注 后 小 鼠 出 现 明 显 的 神 经 功 能 缺 失 症 状 术 前 多 次 给 药 能 明 显 减 轻 小 鼠 神 经 功 能 损 伤 见 术 前 单 次 给 药 及 术 后 单 次 给 药 可 改 善 小 鼠 神 经 功 能 损 伤 其 中 以 再 灌 注 同 时 单 次 给 药 效 果 最 明 显 见 缺 血 再 灌 注 后 小 鼠 缺 血 侧 额 顶 叶 皮 层 和 皮 层 下 区 纹 状 体 海 马 等 可 见 明 显 的 苍 白 梗 死 灶 术 前 多 次 给 药 能 明 显 减 小 脑 梗 死 体 积 并 且 对 皮 层 梗 死 体 积 改 善 更 为 明 显 可 降 低 大 脑 皮 层 梗 死 体 积 达 和 对 皮 层 下 区 梗 死 体 积 只 降 低 和 见 不 同 时 间 单 次 给 药 以 再 灌 注 同 时 单 次 给 药 效 果 最 明 显 其 脑 梗 死 体 积 较 模 型 组 小 鼠 减 少 见 术 前 多 次 给 药 呈 剂 量 依 赖 性 减 轻 脑 水 肿 程 度 或 缺 血 前 单 次 给 药 及 缺 血 后 单 次 给 药 均 可 减 轻 脑 水 肿 程 度 其 中 以 再 灌 注 同 时 单 次 给 药 效 果 最 明 显 与 组 比 其 降 低 脑 水 肿 程 度 达 最 近 研 究 表 明 是 过 氧 化 物 酶 体 增 殖 物 激 活 受 体 的 天 然 高 亲 和 激 动 剂 其 激 活 的 半 数 有 效 浓 度 仅 为 而 现 有 研 究 提 示 因 子 研 究 发 现 可 能 是 一 种 内 源 性 神 经 保 护 激 动 药 非 诺 贝 特 可 明 显 减 少 小 鼠 缺 血 后 的 脑 梗 死 体 积 减 轻 脑 缺 血 后 的 氧 化 应 激 反 应 和 炎 症 反 应 最 近 又 有 研 究 报 道 基 因 敲 除 小 鼠 脑 缺 血 后 的 梗 死 体 积 较 野 生 型 小 鼠 扩 大 提 示 可 能 直 接 参 与 了 脑 缺 血 后 的 神 经 保 护 机 制 本 实 验 应 用 新 型 的 激 动 剂 亦 观 察 到 其 对 脑 缺 血 损 伤 后 的 各 种 评 价 指 标 的 改 善 作 用 这 一 结 果 为 阐 明 在 抗 脑 缺 血 损 伤 中 的 保 护 作 用 提 供 了 新 的 依 据 本 实 验 还 进 一 步 探 讨 了 神 经 保 护 作 用 的

3 剂 量 依 赖 性 抗 脑 缺 血 损 伤 作 用 具 有 剂 量 依 赖 性 有 效 剂 量 是 和 小 剂 量 无 保 护 作 用 并 发 现 对 皮 层 梗 死 体 积 的 改 善 作 用 更 为 明 显 而 对 皮 层 下 区 的 改 善 作 用 并 不 明 显 其 原 因 可 能 是 作 为 脑 缺 血 中 心 部 位 的 纹 状 体 和 海 马 损 伤 较 为 严 重 药 物 难 以 改 善 而

4 位 于 缺 血 周 边 区 的 脑 皮 质 区 损 伤 较 轻 药 物 可 发 挥 明 显 的 保 护 作 用 是 药 物 重 点 救 治 的 部 位 另 外 本 实 验 还 观 察 了 神 经 保 护 作 用 的 时 间 依 赖 性 在 缺 血 前 多 次 给 药 及 在 缺 血 前 或 再 灌 同 时 单 次 给 药 均 能 改 善 小 鼠 脑 缺 血 损 伤 其 中 以 再 灌 同 时 单 次 给 药 效 果 最 明 显 研 究 表 明 脑 缺 血 后 脑 组 织 从 可 逆 性 损 伤 到 不 可 逆 行 损 伤 转 变 的 关 键 时 期 是 恢 复 血 供 过 程 而 非 缺 血 过 程 因 此 再 灌 同 时 应 是 药 物 救 治 的 关 键 时 机 本 研 究 结 果 也 表 明 在 再 灌 注 同 时 给 药 其 抗 脑 缺 血 损 伤 效 果 最 为 明 显 掌 握 好 这 一 最 佳 的 治 疗 时 间 点 是 发 挥 脑 缺 血 损 伤 后 神 经 保 护 作 用 的 关 键 总 之 本 研 究 结 果 表 明 具 有 抗 脑 缺 血 损 伤 作 用 其 有 效 剂 量 为 和 最 佳 治 疗 时 间 点 是 再 灌 注 同 时 脑 缺 血 是 危 害 人 类 健 康 的 主 要 疾 病 亟 需 开 发 有 效 的 治 疗 药 物 内 源 性 存 在 于 组 织 中 毒 副 作 用 小 可 作 为 治 疗 脑 缺 血 损 伤 的 一 种 先 导 化 合 物 为 今 后 开 发 毒 副 作 用 小 而 疗 效 明 显 的 抗 脑 缺 血 损 伤 药 物 提 供 思 路 张 慧 灵 顾 振 纶 秦 正 红 与 神 经 退 行 性 疾 病 董 文 鹏 章 翔 高 大 宽 等 白 藜 芦 醇 对 小 鼠 局 灶 性 缺 血 再 灌 注 后 急 性 期 的 影 响

5 罗 红 霉 素 通 过 诱 导 型 一 氧 化 氮 合 酶 一 氧 化 氮 途 径 抑 制 哮 喘 大 鼠 气 道 炎 症 夏 晓 东 吴 立 琴 徐 慧 戴 元 荣 杨 雷 探 讨 罗 红 霉 素 对 哮 喘 大 鼠 支 气 管 诱 导 型 一 氧 化 氮 合 酶 及 一 氧 化 氮 的 影 响 只 成 年 哮 喘 大 鼠 随 机 分 成 对 照 组 哮 喘 组 以 及 罗 红 霉 素 组 对 支 气 管 肺 泡 灌 洗 液 细 胞 总 数 及 嗜 酸 性 粒 细 胞 计 数 免 疫 组 织 化 学 检 测 大 鼠 支 气 管 上 皮 细 胞 蛋 白 表 达 检 测 肺 组 织 表 达 分 光 光 度 计 检 测 肺 组 织 活 性 及 含 量 双 抗 体 夹 心 法 检 测 肺 组 织 白 细 胞 介 素 及 干 扰 素 哮 喘 组 大 鼠 细 胞 总 数 及 嗜 酸 性 粒 细 胞 分 类 分 别 为 均 高 于 对 照 组 罗 红 霉 素 组 细 胞 总 数 及 嗜 酸 性 粒 细 胞 分 类 分 别 为 明 显 低 于 哮 喘 组 差 异 有 统 计 学 意 义 哮 喘 组 肺 组 织 浓 度 活 性 及 含 量 高 于 对 照 组 罗 红 霉 素 组 肺 组 织 浓 度 活 性 及 含 量 低 于 哮 喘 组 哮 喘 组 肺 组 织 浓 度 低 于 对 照 组 罗 红 霉 素 组 肺 组 织 浓 度 高 于 哮 喘 组 哮 喘 大 鼠 支 气 管 上 皮 细 胞 蛋 白 及 肺 组 织 表 达 分 布 吸 光 度 值 分 别 为 较 对 照 组 明 显 增 强 但 罗 红 霉 素 组 蛋 白 及 表 达 为 均 明 显 较 哮 喘 组 减 弱 罗 红 霉 素 通 过 干 预 哮 喘 大 鼠 气 道 以 及 体 系 抑 制 哮 喘 气 道 炎 症 反 应 罗 红 霉 素 哮 喘 一 氧 化 氮 诱 导 型 一 氧 化 氮 合 酶 气 道 炎 症 细 胞 因 子 收 稿 日 期 修 回 日 期 基 金 项 目 温 州 市 科 委 基 金 资 助 项 目 作 者 简 介 夏 晓 东 男 硕 士 副 主 任 医 师 研 究 方 向 支 气 管 哮 喘 及 慢 性 阻 塞 性 肺 疾 病 发 病 机 制 杨 雷 男 硕 士 副 研 究 员 研 究 方 向 疾 病 分 子 生 物 学 一 氧 化 氮 由 一 氧 化 氮 合 酶 催 化 精 氨 酸 产 生 一 氧 化 氮 合 酶 包 括 神 经 元 型 内 皮 型 及 诱 导 型 共 种 支 气 管 哮 喘 以 下 简 称 哮 喘 是 由 嗜 酸 性 粒 细 胞 等 多 种 细 胞 和 细 胞 组 分 参 与 的 慢 性 气 道 炎 症 性 疾 病 体 系 的 变 化 可 能 与 哮 喘 气 道 炎 症 反 应 密 切 相 关 已 有 研 究 显 示 临 床 上 常 用 的 大 环 内 酯 类 抗 生 素 可 以 通 过 纠 正 细 胞 因 子 失 衡 起 抑 制 炎 症 作 用 罗 红 霉 素 是 临 床 应 用 广 泛 的 大 环 内 酯 类 抗 生 素 之 一 哮 喘 患 者 服 用 罗 红 霉 素 其 临 床 症 状 及 其 支 气 管 高 反 应 性 能 得 到 明 显 的 改 善 为 此 本 研 究 通 过 复 制 哮 喘 大 鼠 模 型 观 察 罗 红 霉 素 对 哮 喘 大 鼠 气 道 基 因 及 其 蛋 白 表 达 含 量 以 及 细 胞 因 子 白 细 胞 介 素 干 扰 素 水 平 变 化 的 影 响 以 期 探 讨 罗 红 霉 素 在 哮 喘 气 道 炎 症 形 成 中 的 干 预 作 用 大 鼠 由 温 州 医 学 院 动 物 实 验 中 心 提 供 鸡 卵 清 蛋 白 购 自 公 司 罗 红 霉 素 片 购 自 法 国 公 司 兔 抗 大 鼠 多 克 隆 抗 体 购 自 武 汉 博 士 德 公 司 引 物 由 上 海 生 工 合 成 及 试 剂 盒 购 自 南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 及 试 剂 盒 购 自 上 海 晶 美 生 物 工 程 公 司 清 洁 级 健 康 大 鼠 只 随 机 均 分 为 组 分 别 为 正 常 对 照 组 哮 喘 组 以 及 罗 红 霉 素 组 大 鼠 哮 喘 模 型 制 作 腹 腔 内 注 射 的 鸡 卵 清 蛋 白 和 的 氢 氧 化 铝 混 合 液 相 同 剂 量 相 同 方 法 加 强 致 敏 次 致 敏 后 开 始 予 鸡 卵 清 蛋 白 雾 化 吸 入 刺 激 每 周 次 每 次 连 续 正 常 对

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