期 戚 瑞 荣 等 单 克 隆 抗 体 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 虾 体 之 后 细 胞 形 态 很 容 易 发 生 改 变 因 此 依 靠 传 统 的 光 镜 观 察 方 法 很 难 准 确 统 计 这 三 类 细 胞 单 克 隆 抗 体 用 单

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1 中 国 农 业 科 技 导 报!"#!$!$% &$!' 单 克 隆 抗 体 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 戚 瑞 荣 李 强 于 毅 李 华 / 大 连 海 洋 大 学 辽 宁 省 海 洋 生 物 资 源 与 生 物 修 复 重 点 实 验 室 辽 宁 大 连 / 北 京 市 水 产 技 术 推 广 站 北 京 摘 要 近 年 来 单 克 隆 抗 体 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 越 来 越 广 泛 迄 今 报 道 的 研 究 种 类 主 要 是 对 虾 和 贝 类 另 外 还 包 括 一 些 其 他 水 产 无 脊 椎 动 物 如 海 参 等 主 要 应 用 于 血 淋 巴 细 胞 的 识 别 和 鉴 定 并 对 其 个 体 的 发 生 和 分 化 方 面 也 进 行 了 初 步 的 研 究 对 单 克 隆 抗 体 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 的 分 类 分 布 发 生 和 功 能 研 究 等 方 面 的 应 用 进 行 了 综 述 关 键 词 单 克 隆 抗 体 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 / ** 01/ / /// 中 图 分 类 号 #* */ 文 献 标 识 码 文 章 编 号!"#$# %&' 2 3 /) 4!$ 2 5$" 6$ 7" 8 $($!$$ "" % 3 7 " " $9 " : 5!$ ) /($1 -"!&$!' +;"$ #" " ($1 ' $!$ " $ "'$,!"7% $ -"! 5$ "$7"$, $%, $ %$ 99 $% 7 " 7$, $9 "$% ',9 '$ ' %,$"'$-"!,!' $!!,7$ /&'$$ $, $% $! " % %$ "! " 7 %,9'! "$ % 9 $, $ $!'$$ $!$% "7,!"7% $ "$ $% % $ $ " " / "' 9 9$ $ $5$ "'$ 99! ",! "7% $!! " % " 7 " "$ $%!" 7 %,9'! "$ -"! 5$ "$7"$ 7$% "'$ "$"$$9 "$% "',$% 7%/ #,!"7% -"! 5$ "$7"$ 7 %,9'! "$ 血 淋 巴 细 胞 在 水 产 无 脊 椎 动 物 的 免 疫 防 护 过 程 中 发 挥 着 重 要 作 用 它 们 参 与 吞 噬 血 细 胞 聚 集 结 节 形 成 炎 症 和 伤 口 修 复 等 免 疫 反 应 至 今 国 内 外 学 者 已 通 过 显 微 观 察 电 镜 观 察 生 物 化 学 流 式 细 胞 术 和 免 疫 学 等 技 术 对 甲 壳 类 贝 类 棘 皮 动 物 等 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 开 展 了 许 多 细 致 而 深 入 的 研 究 自 从 * 年 单 克 隆 抗 体 出 现 以 来 这 一 技 术 就 显 示 出 了 巨 大 的 生 命 力 和 广 泛 的 实 用 性 单 克 隆 抗 体 技 术 发 展 非 常 迅 速 目 前 已 经 深 入 到 整 个 生 物 医 学 的 各 个 领 域 单 克 隆 抗 体 具 有 特 异 性 高 抗 原 专 一 性 等 特 点 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 的 分 类 分 布 发 生 和 功 能 等 方 面 进 行 了 很 好 的 应 用 本 文 主 要 就 国 内 外 学 者 有 关 单 克 隆 抗 体 技 术 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 进 行 综 述 旨 在 为 相 关 研 究 提 供 参 考 单 克 隆 抗 体 在 对 虾 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 血 淋 巴 细 胞 的 分 类 鉴 定 对 虾 血 淋 巴 细 胞 根 据 细 胞 的 形 态 大 小 和 胞 质 内 的 颗 粒 情 况 一 般 分 为 透 明 细 胞 小 颗 粒 细 胞 和 大 颗 粒 细 胞 三 种 然 而 当 受 到 外 物 刺 激 或 离 开 收 稿 日 期 接 受 日 期 基 金 项 目 国 家 十 二 五 科 技 支 撑 项 目 () ( 海 洋 公 益 性 行 业 科 研 专 项 * 资 助 作 者 简 介 戚 瑞 荣 硕 士 研 究 生 主 要 从 事 水 产 动 物 病 害 与 免 疫 研 究 +,-. /!, 通 讯 作 者 李 强 副 教 授 博 士 研 究 方 向 为 水 产 动 物 病 害 与 免 疫 +, -.%/$% /!

2 期 戚 瑞 荣 等 单 克 隆 抗 体 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 虾 体 之 后 细 胞 形 态 很 容 易 发 生 改 变 因 此 依 靠 传 统 的 光 镜 观 察 方 法 很 难 准 确 统 计 这 三 类 细 胞 单 克 隆 抗 体 用 单 抗 标 记 细 胞 具 有 能 鉴 别 特 异 性 细 胞 抗 原 决 定 簇 的 特 点 这 较 传 统 形 态 学 观 察 更 准 确 加 之 生 物 素 亲 和 素 的 信 号 放 大 作 用 使 结 果 更 加 敏 感 可 靠 目 前 已 有 很 多 学 者 利 用 单 克 隆 抗 体 对 对 虾 的 血 淋 巴 细 胞 进 行 了 类 型 鉴 定 这 些 研 究 都 不 同 程 度 地 用 单 克 隆 抗 体 揭 示 了 对 虾 血 淋 巴 细 胞 亚 群 的 特 性 抗 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 所 识 别 的 抗 原 决 定 簇 非 常 稳 定 能 够 在 不 同 的 环 境 中 使 用 血 淋 巴 细 胞 固 定 后 仍 可 与 单 克 隆 抗 体 结 合 所 以 用 其 来 对 血 淋 巴 细 胞 进 行 分 类 鉴 定 简 单 易 行 " 9' 等 用 抗 斑 节 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 与 血 淋 巴 细 胞 反 应 将 单 克 隆 抗 体 分 成 组 第 一 组 单 抗 能 够 与 一 小 部 分 透 明 细 胞 和 内 含 完 整 颗 粒 的 半 颗 粒 细 胞 反 应 第 二 组 单 抗 与 大 多 数 的 颗 粒 细 胞 和 半 数 的 半 颗 粒 细 胞 反 应 第 三 组 单 抗 与 所 有 颗 粒 细 胞 及 一 小 部 分 的 半 颗 粒 细 胞 反 应 第 四 组 第 五 组 和 第 六 组 单 抗 分 别 与 颗 粒 细 胞 半 颗 粒 细 胞 和 透 明 细 胞 反 应 有 学 者 还 制 备 得 到 了 能 够 特 异 性 识 别 斑 节 对 虾 颗 粒 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 认 为 单 抗 识 别 出 的 血 淋 巴 细 胞 中 的 颗 粒 因 子 在 斑 节 对 虾 的 防 御 系 统 中 起 到 重 要 的 作 用 但 是 对 于 这 些 颗 粒 因 子 的 功 能 还 需 要 进 一 步 的 证 实 战 文 斌 等 针 对 中 国 明 对 虾 研 制 了 三 组 单 克 隆 抗 体 ( 和 ( 它 们 分 别 对 不 同 的 血 淋 巴 细 胞 有 不 同 的 免 疫 荧 光 染 色 说 明 这 三 组 单 克 隆 抗 体 所 识 别 的 血 淋 巴 细 胞 之 间 具 有 显 著 的 差 异 性 同 时 也 确 定 了 中 国 明 对 虾 血 淋 巴 细 胞 至 少 有 三 种 具 有 不 同 分 化 抗 原 受 体 特 征 的 细 胞 亚 群 初 步 显 示 出 这 三 种 血 淋 巴 细 胞 亚 群 的 膜 分 化 抗 原 受 体 的 分 布 特 征 并 为 进 一 步 研 究 中 国 明 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 分 子 免 疫 学 机 制 提 供 了 有 利 的 工 具 和 手 段 应 用 单 克 隆 抗 体 对 对 虾 血 淋 巴 细 胞 及 亚 型 进 行 研 究 与 光 镜 电 镜 等 其 他 传 统 方 法 相 比 是 从 抗 原 上 对 对 虾 血 淋 巴 细 胞 进 行 鉴 定 分 类 比 较 准 确 准 确 的 细 胞 分 类 为 血 淋 巴 细 胞 的 分 布 发 生 和 功 能 等 方 面 的 研 究 提 供 了 便 利 ( 血 淋 巴 细 胞 的 分 布 与 发 生 针 对 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 发 生 器 官 以 往 的 研 究 大 多 采 用 光 镜 和 电 镜 观 察 近 年 来 随 着 单 克 隆 抗 体 技 术 的 发 展 应 用 单 克 隆 抗 体 对 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 分 布 发 生 进 行 了 越 来 越 多 的 研 究 为 弄 清 对 虾 的 细 胞 免 疫 防 御 机 制 奠 定 了 基 础 战 文 斌 等 利 用 抗 中 国 明 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 应 用 冰 冻 切 片 和 间 接 免 疫 荧 光 染 色 法 将 中 国 明 对 虾 的 造 血 组 织 初 步 定 位 于 中 国 明 对 虾 仔 虾 的 胃 前 部 心 脏 前 方 肝 胰 脏 的 前 部 和 间 隙 颚 足 基 部 第 二 触 角 的 鳞 片 中 心 等 部 位 这 些 部 位 的 细 胞 尚 未 发 育 成 熟 个 体 较 小 且 始 终 处 于 一 种 高 度 有 丝 分 裂 状 态 幼 小 的 血 淋 巴 细 胞 重 叠 在 一 起 细 胞 形 状 无 法 展 开 相 连 成 堆 血 淋 巴 细 胞 常 常 聚 堆 间 接 免 疫 荧 光 染 色 显 示 为 强 阳 性 反 应 他 们 的 研 究 结 果 亦 显 示 对 虾 各 附 肢 附 肢 基 部 胃 上 部 胃 前 部 肝 胰 脏 间 隙 心 脏 鳃 胸 下 动 脉 腹 下 动 脉 腹 上 动 脉 尾 垂 动 脉 等 部 位 也 呈 现 为 阳 性 反 应 说 明 血 淋 巴 细 胞 同 样 存 在 于 这 些 部 位 中 等 应 用 单 克 隆 抗 体 通 过 间 接 免 疫 荧 光 抗 体 技 术 研 究 了 中 国 明 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 发 生 发 现 血 淋 巴 细 胞 最 早 出 现 在 胚 胎 出 芽 期 可 辨 别 的 阳 性 血 淋 巴 细 胞 出 现 在 胚 胎 无 节 幼 体 期 直 径 大 约, 应 用 同 样 技 术 利 用 另 外 一 种 单 克 隆 抗 体 3 发 现 颗 粒 细 胞 首 先 出 现 在 胚 胎 无 节 幼 体 期 在 无 节 幼 体 期 血 淋 巴 细 胞 总 数 和 颗 粒 细 胞 总 数 均 上 升 分 析 原 因 可 能 是 随 着 中 国 明 对 虾 胚 胎 的 发 育 其 免 疫 系 统 逐 渐 完 善 的 结 果 " 9' 等 利 用 抗 斑 节 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 发 现 在 斑 节 对 虾 的 造 血 组 织 和 淋 巴 器 官 中 均 存 在 抗 原 抗 体 反 应 反 映 出 这 些 器 官 在 颗 粒 细 胞 和 半 颗 粒 细 胞 亚 群 发 展 中 的 相 互 关 系 造 血 组 织 可 能 是 血 淋 巴 细 胞 产 生 的 场 所 而 淋 巴 器 官 可 能 是 两 种 细 胞 进 一 步 分 化 的 场 所 用 能 同 时 抗 凡 纳 滨 对 虾! 三 类 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 和 特 异 性 抗 大 颗 粒 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 与 由 凡 纳 滨 对 虾 卵 及 各 个 不 同 发 育 时 期 的 幼 体 期 无 节 幼 体 期 蚤 状 幼 体 期 糠 虾 及 仔 虾 制 作 的 冰 冻 切 片 反 应 并 辅 以 卵 和 幼 体 的 石 蜡 切 片 和 苏 木 精 曙 红 3 + 染 色 发 现 在 凡 纳 滨 对 虾 多 细 胞 期 的 胚 胎 已 出 现 阳 性 信 号 随 着 对 虾 个 体 发 育 的 进 行 在 膜 内 无 节 幼 体 期 出 现 形 态 可 见 的 单 个 的 阳 性 血 淋 巴 细 胞 在 蚤 状 幼 体 期 发 现 大 颗

3 中 国 农 业 科 技 导 报 卷 粒 细 胞 说 明 在 胚 胎 多 细 胞 期 已 有 对 虾 血 淋 巴 细 胞 的 成 分 出 现 而 真 正 的 血 淋 巴 细 胞 出 现 于 膜 内 无 节 幼 体 期 在 蚤 状 幼 体 期 出 现 细 胞 的 分 化 在 明 确 了 单 抗 所 结 合 的 血 淋 巴 细 胞 类 型 的 基 础 上 用 单 抗 与 相 应 动 物 的 组 织 或 个 体 发 育 中 的 各 期 胚 胎 和 幼 体 反 应 根 据 阳 性 信 号 的 分 布 研 究 相 应 血 淋 巴 细 胞 的 分 布 和 发 生 情 况 这 种 方 法 虽 然 能 定 位 组 织 中 血 淋 巴 细 胞 的 分 布 但 尚 不 能 准 确 标 识 血 淋 巴 细 胞 的 发 生 器 官 针 对 这 方 面 的 研 究 还 需 借 助 于 其 他 一 些 技 术 或 设 备 ) 血 淋 巴 细 胞 的 功 能 研 究 应 用 特 异 性 抗 凡 纳 滨 对 虾 大 颗 粒 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 研 究 发 现 凡 纳 滨 对 虾 在 人 工 感 染 白 斑 症 病 毒 后 血 淋 巴 细 胞 中 大 颗 粒 细 胞 的 细 胞 质 较 正 常 细 胞 有 所 增 多 大 颗 粒 细 胞 的 数 量 及 占 血 淋 巴 细 胞 总 数 的 比 例 也 明 显 增 加 说 明 大 颗 粒 细 胞 在 凡 纳 滨 对 虾 的 免 疫 防 御 系 统 中 可 能 具 有 非 常 重 要 的 作 用 %$ 等 * 研 制 了 抗 日 本 囊 对 虾 " 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 发 现 第 一 组 抗 体 可 以 识 别 分 子 量 为 <) 的 蛋 白 该 蛋 白 存 在 于 血 浆 及 能 够 分 泌 该 蛋 白 的 血 淋 巴 细 胞 中 初 步 判 定 这 种 蛋 白 类 似 于 从 小 龙 虾 血 浆 中 纯 化 的 一 种 单 节 显 性 蛋 白 巨 球 蛋 白 无 脊 椎 动 物 的 巨 球 蛋 白 与 补 体 系 统 的 和 蛋 白 类 似 可 能 在 提 高 机 体 免 疫 力 上 起 到 重 要 的 作 用 利 用 第 三 组 抗 体 识 别 出 了 一 种 凝 固 蛋 白 原 这 种 物 质 在 对 虾 血 浆 中 大 量 存 在 能 阻 止 血 液 流 失 并 且 能 消 灭 病 原 微 生 物 被 认 为 是 甲 壳 动 物 的 重 要 防 御 机 制 之 一 迄 今 单 克 隆 抗 体 在 对 虾 血 淋 巴 细 胞 功 能 方 面 的 研 究 报 道 比 较 少 血 淋 巴 细 胞 在 对 虾 的 免 疫 防 御 机 制 中 发 挥 着 重 要 的 作 用 不 同 类 型 细 胞 的 功 能 不 同 随 着 不 同 类 型 血 淋 巴 细 胞 单 克 隆 抗 体 的 研 制 应 用 单 克 隆 抗 体 进 行 对 虾 血 淋 巴 细 胞 功 能 的 研 究 将 会 是 今 后 重 要 的 研 究 方 向 ( 单 克 隆 抗 体 在 贝 类 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 ( 血 淋 巴 细 胞 的 类 型 鉴 定 有 关 贝 类 血 淋 巴 细 胞 形 态 学 的 研 究 主 要 是 利 用 光 镜 和 电 镜 观 察 技 术 且 分 类 标 准 不 统 一 随 着 单 克 隆 抗 体 技 术 的 发 展 应 用 越 来 越 多 的 学 者 开 始 应 用 单 克 隆 抗 体 对 贝 类 血 淋 巴 细 胞 从 其 抗 原 方 面 进 行 分 类 鉴 定 利 用 单 克 隆 抗 体 可 以 将 食 用 牡 蛎 即 欧 洲 平 牡 蛎 # $ 的 血 淋 巴 细 胞 分 为 小 透 明 细 胞 大 透 明 细 胞 和 颗 粒 细 胞 针 对 栉 孔 扇 贝 % $&' 刑 婧 制 备 获 得 了 株 抗 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 + = 3 其 中 单 抗 + 和 3 与 颗 粒 细 胞 的 细 胞 质 特 异 性 结 合 单 抗 可 与 透 明 细 胞 和 颗 粒 细 胞 的 细 胞 质 发 生 结 合 单 抗 = 与 透 明 细 胞 和 颗 粒 细 胞 的 细 胞 质 和 细 胞 膜 反 应 呈 现 阳 性 此 外 夏 行 权 应 用 单 克 隆 抗 体 结 合 显 微 和 超 微 观 察 将 血 淋 巴 细 胞 分 为 三 大 类 八 个 亚 型 非 颗 粒 细 胞 包 括 透 明 细 胞 和 成 原 血 细 胞 颗 粒 细 胞 包 括 嗜 中 性 颗 粒 细 胞 嗜 碱 性 颗 粒 细 胞 嗜 酸 性 颗 粒 细 胞 嗜 酸 性 网 状 颗 粒 细 胞 和 嗜 酸 性 双 核 颗 粒 细 胞 桑 葚 胚 样 细 胞 应 用 单 克 隆 抗 体 结 合 显 微 超 微 观 察 发 现 贻 贝 &$ $ 中 存 在 三 种 不 同 类 型 的 血 淋 巴 细 胞 嗜 碱 性 粒 细 胞 透 明 细 胞 和 嗜 酸 性 粒 细 胞 > 制 备 获 得 了 类 抗 贻 贝 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 第 一 类 单 克 隆 抗 体 特 异 的 与 嗜 碱 性 颗 粒 细 胞 内 含 小 颗 粒 反 应 第 二 类 和 第 三 类 单 克 隆 抗 体 均 可 识 别 嗜 碱 性 和 嗜 酸 性 颗 粒 细 胞 第 四 类 单 克 隆 抗 体 识 别 的 抗 原 表 位 主 要 存 在 于 嗜 酸 性 颗 粒 细 胞 中 内 含 大 颗 粒 8 等 根 据 染 色 性 质 和 细 胞 抗 原 性 利 用 四 种 抗 贻 贝 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 将 紫 贻 贝 &$ $! $ 血 淋 巴 细 胞 分 成 两 大 类 透 明 细 胞 和 颗 粒 细 胞 其 中 颗 粒 细 胞 又 分 为 嗜 酸 性 颗 粒 细 胞 嗜 碱 性 颗 粒 细 胞 和 同 时 具 有 嗜 酸 性 和 嗜 碱 性 颗 粒 的 细 胞 间 接 免 疫 荧 光 和 免 疫 过 氧 化 物 酶 检 测 结 果 显 示 抗 体 (* + 可 与 嗜 碱 性 颗 粒 细 胞 的 细 胞 质 发 生 结 合 而 不 与 嗜 酸 性 颗 粒 细 胞 反 应 其 余 抗 体 可 同 时 识 别 两 种 类 型 的 颗 粒 另 外 有 一 些 透 明 细 胞 也 与 抗 体 反 应 说 明 这 些 颗 粒 细 胞 为 抗 原 不 同 的 类 群 尽 管 应 用 单 抗 对 贝 类 血 淋 巴 细 胞 进 行 分 类 鉴 定 比 较 准 确 但 由 于 研 究 人 员 实 验 方 法 实 验 目 的 等 的 不 同 即 使 用 同 一 种 贝 类 也 可 能 得 到 不 同 的 单 抗 所 以 目 前 对 于 贝 类 的 血 淋 巴 细 胞 还 没 有

4 期 戚 瑞 荣 等 单 克 隆 抗 体 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 统 一 的 分 类 方 法 但 是 应 用 单 抗 进 行 细 胞 分 类 鉴 定 的 标 准 是 一 样 的 都 是 根 据 单 抗 所 识 别 的 抗 原 决 定 簇 来 分 类 所 以 如 果 能 够 找 到 贝 类 血 淋 巴 细 胞 的 特 异 抗 原 进 而 制 备 抗 这 种 特 异 抗 原 的 单 抗 就 能 够 对 贝 类 血 淋 巴 细 胞 进 行 统 一 分 类 ( ( 血 淋 巴 细 胞 的 分 布 与 发 生 目 前 关 于 双 壳 贝 类 造 血 组 织 和 血 淋 巴 细 胞 起 源 的 研 究 较 少 应 用 单 克 隆 抗 体 借 助 免 疫 荧 光 技 术 在 栉 孔 扇 贝 稚 贝 的 外 套 膜 鳃 消 化 盲 囊 闭 壳 肌 肾 等 处 可 以 观 察 到 大 量 的 血 淋 巴 细 胞 而 且 靠 近 闭 壳 肌 侧 的 囊 状 膨 大 组 织 其 形 态 结 构 及 内 部 血 淋 巴 细 胞 的 形 态 分 布 免 疫 特 性 都 近 似 于 血 淋 巴 细 胞 的 造 血 组 织 推 测 闭 壳 肌 侧 的 囊 状 膨 大 组 织 很 可 能 为 栉 孔 扇 贝 稚 贝 的 造 血 组 织 夏 行 权 利 用 种 昆 虫 的 单 克 隆 抗 体 对 栉 孔 扇 贝 血 淋 巴 细 胞 进 行 了 筛 选 结 果 得 到 一 种 只 与 嗜 碱 性 颗 粒 细 胞 和 嗜 中 性 颗 粒 细 胞 呈 阳 性 反 应 的 单 克 隆 抗 体? 揭 示 了 嗜 碱 性 颗 粒 细 胞 和 嗜 中 性 颗 粒 细 胞 具 有 相 同 或 相 似 的 抗 原 它 们 在 发 生 上 可 能 具 有 一 定 的 联 系 将 单 克 隆 抗 体 与 流 式 细 胞 术 结 合 起 来 利 用 流 式 细 胞 术 发 现 欧 洲 平 牡 蛎 颗 粒 细 胞 有 大 小 上 的 变 化 说 明 在 牡 蛎 个 体 血 淋 巴 细 胞 中 存 在 着 细 胞 发 生 的 不 同 阶 段 )% 等 发 现 针 对 贻 贝 血 淋 巴 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 能 与 幼 体 的 细 胞 反 应 其 中 单 抗 ( 能 与 担 轮 幼 虫 和 面 盘 幼 虫 的 血 淋 巴 细 胞 发 生 反 应 表 明 这 种 单 克 隆 抗 体 识 别 的 抗 原 决 定 簇 存 在 于 贻 贝 幼 体 发 育 阶 段 的 血 淋 巴 细 胞 中 ( ) 血 淋 巴 细 胞 的 功 能 研 究 软 体 动 物 不 具 有 特 异 的 免 疫 球 蛋 白 对 机 体 的 保 护 作 用 主 要 是 由 血 淋 巴 细 胞 和 体 液 中 的 活 性 酶 来 承 担 血 淋 巴 细 胞 随 着 血 液 循 环 分 布 到 全 身 各 处 发 挥 着 吞 噬 结 节 包 囊 等 免 疫 防 御 功 能 )<<$7, 等 发 现 单 克 隆 抗 体 # 识 别 静 水 椎 实 螺 幼 体 和 成 体 循 环 血 淋 巴 细 胞 上 的 一 个 膜 表 位 对 单 克 隆 抗 体 # 阳 性 的 血 淋 巴 细 胞 形 态 上 为 未 成 熟 的 细 胞 血 淋 巴 细 胞 的 百 分 比 螺 幼 体 高 于 成 螺 另 外 还 研 究 了 这 些 对 单 克 隆 抗 体 # 呈 阳 性 的 血 淋 巴 细 胞 的 功 能 特 性 和 粘 连 其 上 的 凝 集 素 并 对 所 有 循 环 血 淋 巴 * 细 胞 进 行 了 组 织 化 学 染 色 结 果 发 现 无 论 是 幼 体 组 还 是 成 体 组 血 淋 巴 细 胞 的 增 殖 活 动 要 比 # 血 淋 巴 细 胞 活 跃 与 缺 少 这 种 表 位 的 细 胞 相 比 血 淋 巴 细 胞 吞 噬 活 性 低 且 含 有 的 溶 酶 体 酶 成 分 低 组 织 化 学 染 色 结 果 显 示 凝 集 素 )((# (# (:>#(+ 不 与 血 淋 巴 细 胞 反 应 &: A 和 粘 连 所 有 的 血 淋 巴 细 胞 和 #& 只 识 别 血 淋 巴 细 胞 亚 群 的 表 面 碳 水 化 合 物 分 子 血 淋 巴 细 胞 缺 少 被 #& 识 别 的 碳 水 化 合 物 残 留 物 而 # 从 不 粘 连 结 果 表 明 # 表 位 是 幼 体 螺 和 成 体 螺 中 未 分 化 血 淋 巴 细 胞 的 膜 标 记 物 # 表 位 的 存 在 和 无 #&) 粘 连 有 相 关 关 系 单 克 隆 抗 体 在 贝 类 血 淋 巴 细 胞 的 功 能 方 面 的 研 究 比 较 少 但 是 鉴 于 血 淋 巴 细 胞 在 贝 类 免 疫 防 御 系 统 中 发 挥 着 重 要 的 作 用 单 抗 用 于 贝 类 血 淋 巴 细 胞 功 能 上 的 研 究 会 越 来 越 多 随 着 研 究 的 进 行 对 于 血 淋 巴 细 胞 在 贝 类 免 疫 防 御 系 统 中 发 挥 的 具 体 作 用 及 其 作 用 机 制 定 会 有 更 清 楚 的 认 识 ) 单 克 隆 抗 体 在 其 他 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 随 着 科 学 技 术 的 不 断 进 步 越 来 越 多 的 学 者 开 始 转 移 自 己 的 视 角 将 单 克 隆 抗 体 应 用 于 除 贝 类 对 虾 以 外 的 其 他 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 的 研 究 上 如 棘 皮 动 物 应 用 抗 仿 刺 参 " 球 形 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 = 通 过 间 接 免 疫 荧 光 技 术 对 其 他 水 产 无 脊 椎 动 物 包 括 马 粪 海 胆 $ 毛 蚶 海 燕 ' 罗 氏 海 盘 车 $ 菲 律 宾 蛤 仔 $ 虾 夷 扇 贝 & 和 贻 贝 的 体 腔 细 胞 或 血 淋 巴 细 胞 进 行 检 测 发 现 单 克 隆 抗 体 = 不 与 以 上 任 何 一 种 动 物 的 体 腔 细 胞 或 血 淋 巴 细 胞 反 应 具 有 非 常 强 的 种 属 特 异 性 这 为 今 后 研 究 仿 刺 参 体 腔 球 形 细 胞 的 发 生 分 布 及 功 能 提 供 了 很 好 的 研 究 工 具 B 等 * 应 用 抗 $ $ 球 形 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 #9'#9'#9' 研 究 了 球 形 细 胞 在 肠 再 生 过 程 中 的 变 化 发 现 该

5 中 国 农 业 科 技 导 报 卷 型 细 胞 与 海 参 肠 再 生 相 关 但 是 细 胞 所 发 挥 的 具 体 作 用 还 有 待 进 一 步 的 研 究 用 株 特 异 性 抗 紫 海 胆 $ 体 腔 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 3 * 3*=+ 进 行 免 疫 荧 光 实 验 发 现 单 克 隆 抗 体 3 与 阿 米 巴 细 胞 反 应 呈 强 阳 性 单 抗 3 与 白 色 桑 葚 细 胞 反 应 这 些 抗 体 的 研 制 为 进 一 步 研 究 紫 海 胆 体 腔 细 胞 的 分 类 及 发 生 提 供 了 很 好 的 工 具 以 抗 沙 蚕 (!$ 三 种 类 型 颗 粒 细 胞 的 单 克 隆 抗 体 为 特 异 性 标 记 物 来 追 踪 大 型 外 来 异 物 形 成 包 囊 的 过 程 结 果 显 示 在 前 几 分 钟 内 是 第 三 类 颗 粒 细 胞 起 作 用 接 着 是 第 二 类 颗 粒 细 胞 围 绕 异 物 并 降 解 颗 粒 最 后 是 第 一 类 颗 粒 细 胞 起 作 用 形 成 一 网 状 物 即 包 囊 因 此 应 用 单 克 隆 抗 体 技 术 有 利 于 研 究 血 淋 巴 细 胞 的 作 用 机 制 * 展 望 依 据 形 态 学 和 组 织 化 学 对 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 进 行 的 分 类 存 在 很 多 分 歧 因 为 根 据 这 些 指 标 分 类 的 血 淋 巴 细 胞 仅 仅 是 它 们 发 育 时 期 的 不 同 阶 段 不 能 从 功 能 上 区 分 血 淋 巴 细 胞 的 亚 组 分 因 此 应 用 单 克 隆 抗 体 研 究 血 淋 巴 细 胞 的 表 面 抗 原 特 征 和 血 淋 巴 细 胞 表 面 受 体 分 子 并 明 确 不 同 血 淋 巴 细 胞 的 功 能 已 经 成 为 血 淋 巴 细 胞 研 究 的 一 个 新 方 向 水 产 无 脊 椎 动 物 的 血 淋 巴 细 胞 类 型 多 种 多 样 应 用 单 克 隆 抗 体 技 术 有 望 统 一 血 淋 巴 细 胞 的 分 类 标 准 及 明 确 血 淋 巴 细 胞 的 功 能 在 此 基 础 上 更 有 利 于 应 用 单 克 隆 抗 体 进 行 血 淋 巴 细 胞 的 分 布 和 发 生 等 其 他 方 面 的 研 究 进 而 弄 清 楚 血 淋 巴 细 胞 的 免 疫 防 御 机 制 总 之 有 关 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 的 研 究 还 有 许 多 要 解 决 的 问 题 但 可 以 肯 定 的 是 应 用 单 克 隆 抗 体 对 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 进 行 研 究 是 比 较 快 速 灵 敏 准 确 和 前 沿 的 方 法 参 考 文 献 C )$( < (& & 5$$> ("$ 7,8 3 $)) '!"$ " % $ $ ", 9'! $ "$7!< "$',9 ' $,! "$,! "7% $ /= ' #'$ ',,/ / #33 # /2 $,!"7% $ "! '$,! "$799 " "$',9 //"!$ ( / / " 9' : # "' : 8 $ 9 4 $)) 8!"7% $9$!!"' $,! "$7!< "$ 9 /= ' #'$ ',,/ * * / 战 文 斌 张 利 峰 张 志 栋 等 / 中 国 对 虾 血 细 胞 单 克 隆 抗 体 研 制 及 对 虾 血 细 胞 类 型 的 鉴 别 / 高 技 术 通 讯 * / D' ( D' = D'D) $)): %!",!"7% $ "'$,! "$',9 % "'$," "'$'$,! "$" 9$ / 3' &$!'/ $"/ * / 战 文 斌 王 姝 张 利 峰 等 / 中 国 对 虾 仔 虾 造 血 组 织 分 布 的 研 究 / 水 生 生 物 学 报 / D' ( # D' = $))#" % $ % "7 " '$, "9$"! "$ "'$ 9 " 5 /!" 3 % 7!#! / ( D' ( $))4 "$ $ ' $,! "$ ',9 " % $% "' 9 7$,!"7% /)$5/,9/,, / / 薛 艳 红 / 对 虾 白 斑 综 合 症 病 毒 对 血 细 胞 的 感 染 及 血 细 胞 的 发 生 研 究 ) / 青 岛 中 国 海 洋 大 学 硕 士 学 位 论 文 /? $ 3/ ' "$ 9" %,$5 $!" "' $,! "$ ',9 % "$ $ "'$' $,! "$ ) / % 4!$ 2 5$" ' 8"$ E )$ $$&'$/ 张 志 栋 战 文 斌 薛 艳 红 等 / 凡 纳 滨 对 虾! 感 染 白 斑 症 病 毒 ##C 后 大 颗 粒 血 细 胞 的 变 化 / 海 洋 与 湖 沼 / D'D ) D' (? $ 3 $))C " ' $,! "$ '$ ',9 "9$$ 5,$ $!"$% 7 ' "$ 9" %,$ 5 ##C / 4!$+&, #! / * %$ (C 8 '$+ $)) '!"$ " ',9 ' $,! "$ % 9,!,9 $ " 7,! "7% $ // $ #!/ ** / $"&? $ A ',!< #/=! ",$"! +9$ ""$ # $ ' $,! "$,!"7% 9$!!! "$ / = ' #'$ ',,/ * / 邢 婧 / 栉 孔 扇 贝 % $& 血 细 胞 及 其 免 疫 特 性 的 研 究 ) / 青 岛 中 国 海 洋 大 学 博 士 学 位 论 文 /? / '!"$ " ',$,! "$!9 % $& ',, ) /% 4!$ 2 5$" ' )!" E )$ $$&'$/ 夏 行 权 / 栉 孔 扇 贝 % $&' 血 细 胞 的 形 态 和 功 能 研 究 ) / 济 南 山 东 大 学 硕 士 学 位 论 文 /?? /#" %' $,! "$7 99 "%!" "'$!9 % $& ' ) / #'% 2 5$" 8"$ E )$ $$&'$/

6 期 戚 瑞 荣 等 单 克 隆 抗 体 在 水 产 无 脊 椎 动 物 血 淋 巴 细 胞 研 究 中 的 应 用 )% + :9$ 6 "!$>/# 7 99 " ' $,! "$ "'$ %"% %$5$ 9, $, $ &$ $ %$ " $% 7 $,!"7% $ / $ & / $ / *** / > ) :9$ +" $)) "$!!'!"$ " ' $,! "$799 " "'$, $&$ $7,$,!"7% $ /8 $( / *** * / 8/3$,,9'!$ " 9$"'$, $&$ $! $/) /-"/4 / ** * / 刑 婧 战 文 斌 / 栉 孔 扇 贝 稚 贝 造 血 组 织 的 研 究 / 水 产 学 报 * */? D' (/!" '$, "9$"!"$! 9 % $&' //= '$ $' * */ )<<$7, &1$ 8A C %$ 699 : /8!"7%$! $% '$,! "$799 " 1 5$ $ % %"& $!"!'!"$ " % $!" 7 % /)$5/,9/,, / * / 3 $)): %!"!'!"$ " % 99! ",!"7% " 9'$! "$ 799 "!$,! "$ "/= ' #'$ ',,/ * / *A!+ #!'$ < % $,$ $))#9'$! "$ "'$$!' %$, $ $ % "'$ 5 5$,$ " "$ "$$ $" /)$5/)/ * / A "# ($!< A/ A$ $",! "7% $ "!$,! "$"'$99 $ $!' $ '!"$ " % 9'$ " 9 / )$5/,9/,, / / :!'$" 3$$ $+/9$" 7$" $$ % $ $ "!$,! "$99 "% "'$$! 9" $ 9$ (!$ %$,""$% 7,!"7% $ / /5$ "$7 /: "' / ** / 年 园 艺 植 物 染 色 体 倍 性 操 作 与 遗 传 改 良 学 术 研 讨 会 自 年 月 在 中 国 农 业 科 学 院 郑 州 果 树 研 究 所 成 功 召 开 园 艺 植 物 染 色 体 倍 性 操 作 与 遗 传 改 良 研 讨 会 以 来 我 国 科 研 人 员 在 该 领 域 的 研 究 取 得 了 可 喜 的 成 绩 为 进 一 步 总 结 近 几 年 来 在 该 领 域 的 研 究 进 展 促 进 园 艺 植 物 倍 性 育 种 研 究 同 时 为 该 领 域 的 专 家 学 者 和 同 仁 们 提 供 良 好 的 交 流 平 台 中 国 园 艺 学 会 定 于 年 月 中 旬 在 重 庆 召 开 园 艺 植 物 染 色 体 倍 性 操 作 与 遗 传 改 良 学 术 研 讨 会 欢 迎 从 事 该 研 究 领 域 及 相 关 研 究 工 作 人 员 参 加 一 会 议 组 织 主 办 单 位 中 国 园 艺 学 会 协 办 单 位 中 国 农 业 科 学 院 郑 州 果 树 研 究 所 南 京 农 业 大 学 园 艺 学 院 承 办 单 位 西 南 大 学 园 艺 园 林 学 院 二 会 议 时 间 地 点 年 月 日 重 庆 市 西 南 大 学 三 会 议 主 题 染 色 体 倍 性 操 作 与 遗 传 改 良 基 础 应 用 研 究 分 子 生 物 学 研 究 技 术 在 染 色 体 倍 性 与 遗 传 改 良 上 的 应 用 等 四 联 系 方 式 联 系 人 何 桥 电 话 * +, "7./!,

+++ 期 效 果 不 佳 因 此 建 立 接 近 人 类 肝 癌 临 床 特 征 的 动 物 模 型 对 于 观 察 体 内 生 长 和 转 移 规 律 研 究 肿 瘤 对 各 种 治 疗 的 反 应 以 及 寻 找 新 的 肝 癌 治 疗 方 法 具 有 重 要 意 义 荧 光 素 酶 $ /!

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