远 猿 远 中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志, 园 源 年 月, ( 远 ) 孕 约 园 援 园 ) 援 悦 燥 灶 糟 造 怎 泽 蚤 燥 灶 : 杂 藻 择 怎 藻 灶 糟 藻 鄄 泽 责 藻 糟 蚤 枣 蚤 糟 泽 蚤 砸 晕 粤 皂 葬 赠 藻 枣 枣 藻 糟 贼 蚤 增 藻 造 赠

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1 中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志 摇 澡 贼 贼 责 : 辕 辕 憎 憎 憎 援 遭 蚤 燥 贼 澡 藻 则 援 燥 则 早 悦 澡 蚤 灶 允 悦 葬 灶 糟 藻 则 月 蚤 燥 贼 澡 藻 则, 阅 藻 糟 援 园 源, 灾 燥 造 援, 晕 燥 援 远 远 猿 缘 凿 燥 蚤 : 园 援 猿 愿 苑 辕 躁 援 蚤 泽 泽 灶 援 园 园 苑 鄄 猿 愿 缘 载 援 园 源 援 园 远 援 园 园 远 基 础 研 究 泽 蚤 砸 晕 粤 沉 默 栽 蕴 砸 源 表 达 对 人 肺 腺 癌 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 和 侵 袭 的 影 响 郭 隽 馥, 苗 兰 英, 王 艳 杰, 丛 培 玮 ( 援 辽 宁 中 医 药 大 学 教 学 实 验 中 心 生 物 技 术 实 验 室, 辽 宁 沈 阳, 园 愿 源 苑 ; 援 辽 宁 中 医 药 大 学 基 础 医 学 院 生 物 化 学 教 研 室, 辽 宁 沈 阳, 园 愿 源 苑 ) [ 摘 摇 要 ] 摇 目 的 : 探 讨 靶 向 栽 蕴 砸 源 基 因 的 小 干 扰 砸 晕 粤 ( 泽 皂 葬 造 造 蚤 灶 贼 藻 则 枣 藻 则 藻 灶 糟 藻 砸 晕 粤, 泽 蚤 砸 晕 粤 ) 对 人 肺 腺 癌 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 和 侵 袭 的 影 响 方 法 : 设 计 并 合 成 针 对 栽 蕴 砸 源 基 因 的 猿 条 泽 蚤 砸 晕 粤 ( 泽 蚤 砸 晕 粤 苑 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 和 泽 蚤 砸 晕 粤 缘 远 园 ) 及 条 与 栽 蕴 砸 源 基 因 无 同 源 性 的 阴 性 对 照 泽 蚤 砸 晕 粤, 采 用 砸 藻 葬 造 鄄 贼 蚤 皂 藻 孕 悦 砸 和 宰 藻 泽 贼 藻 则 灶 遭 造 燥 贼 贼 蚤 灶 早 方 法 测 定 干 扰 后 粤 缘 源 怨 细 胞 中 栽 蕴 砸 源 皂 砸 晕 粤 及 蛋 白 的 表 达 水 平, 筛 选 出 有 效 抑 制 靶 基 因 表 达 的 泽 蚤 砸 晕 粤 并 确 定 最 佳 转 染 条 件 栽 蕴 砸 源 特 异 性 泽 蚤 砸 晕 粤 ( 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 ) 转 染 粤 缘 源 怨 细 胞 后, 采 用 悦 悦 运 鄄 愿 法 和 栽 则 鄄 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 小 室 法 分 别 检 测 沉 默 栽 蕴 砸 源 对 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 和 侵 袭 能 力 的 影 响 结 果 : 与 阴 性 对 照 相 比, 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 在 转 染 源 愿 澡 后 对 栽 蕴 砸 源 皂 砸 晕 粤 和 蛋 白 表 达 的 抑 制 最 为 明 显 [( 园 援 源 缘 依 园 援 园 猿 ) 增 ( 泽 园 援 愿 猿 依 园 援 园 ),( 园 援 猿 依 园 援 园 远 ) 增 ( 泽 园 援 怨 愿 依 园 援 园 怨 ); 均 孕 约 园 援 园 ] 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 转 染 苑 澡 后 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 活 性 显 著 下 降 [( 园 援 苑 苑 依 园 援 园 ) 增 ( 泽 园 援 怨 愿 依 园 援 ) ( 园 援 怨 猿 依 园 援 园 源 ), 孕 约 园 援 园 ]; 转 染 源 愿 澡 后, 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 组 粤 缘 源 怨 细 胞 的 侵 袭 细 胞 数 明 显 少 于 阴 性 对 照 组 [( 猿 援 远 园 依 援 愿 愿 ) 增 ( 泽 缘 怨 援 愿 园 依 缘 援 缘 源 ) 个, 孕 约 园 援 园 ] 结 论 : 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 能 够 沉 默 粤 缘 源 怨 细 胞 中 栽 蕴 砸 源 基 因 表 达, 抑 制 粤 缘 源 怨 细 胞 的 增 殖 和 侵 袭 能 力, 栽 蕴 砸 源 可 能 成 为 肺 癌 基 因 治 疗 的 候 选 靶 点 [ 关 键 词 ] 摇 肺 癌 ; 栽 蕴 砸 源 基 因 ; 泽 蚤 砸 晕 粤 ; 增 殖 ; 侵 袭 [ 中 图 分 类 号 ] 摇 砸 苑 猿 源 援 ; 砸 苑 猿 园 援 缘 源 摇 摇 摇 摇 [ 文 献 标 志 码 ] 摇 粤 摇 摇 摇 摇 [ 文 章 编 号 ] 摇 园 园 苑 鄄 猿 愿 缘 载 ( 园 源 ) 园 远 鄄 园 远 猿 缘 鄄 园 缘 耘 枣 枣 藻 糟 贼 泽 燥 枣 泽 皂 葬 造 造 蚤 灶 贼 藻 则 枣 藻 则 藻 灶 糟 藻 砸 晕 粤 鄄 皂 藻 凿 蚤 葬 贼 藻 凿 栽 蕴 砸 源 泽 蚤 造 藻 灶 糟 蚤 灶 早 燥 灶 贼 澡 藻 责 则 燥 造 蚤 枣 藻 则 葬 贼 蚤 燥 灶 葬 灶 凿 蚤 灶 增 葬 泽 蚤 燥 灶 燥 枣 澡 怎 皂 葬 灶 造 怎 灶 早 葬 凿 藻 灶 燥 糟 葬 则 糟 蚤 灶 燥 皂 葬 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 郧 怎 燥 允 怎 灶 枣 怎, 酝 蚤 葬 燥 蕴 葬 灶 赠 蚤 灶 早, 宰 葬 灶 早 再 葬 灶 躁 蚤 藻, 悦 燥 灶 早 孕 藻 蚤 憎 藻 蚤 ( 援 月 蚤 燥 贼 藻 糟 澡 灶 燥 造 燥 早 赠 蕴 葬 遭 燥 则 葬 贼 燥 则 赠, 栽 藻 葬 糟 澡 蚤 灶 早 葬 灶 凿 耘 曾 责 藻 则 蚤 皂 藻 灶 贼 悦 藻 灶 鄄 贼 藻 则, 蕴 蚤 葬 燥 灶 蚤 灶 早 哉 灶 蚤 增 藻 则 泽 蚤 贼 赠 燥 枣 栽 则 葬 凿 蚤 贼 蚤 燥 灶 葬 造 悦 澡 蚤 灶 藻 泽 藻 酝 藻 凿 蚤 糟 蚤 灶 藻, 杂 澡 藻 灶 赠 葬 灶 早 园 愿 源 苑, 蕴 蚤 葬 燥 灶 蚤 灶 早, 悦 澡 蚤 灶 葬 ; 援 阅 藻 责 葬 则 贼 皂 藻 灶 贼 燥 枣 月 蚤 燥 鄄 糟 澡 藻 皂 蚤 泽 贼 则 赠, 悦 燥 造 造 藻 早 藻 燥 枣 月 葬 泽 蚤 糟 酝 藻 凿 蚤 糟 蚤 灶 藻, 蕴 蚤 葬 燥 灶 蚤 灶 早 哉 灶 蚤 增 藻 则 泽 蚤 贼 赠 燥 枣 栽 则 葬 凿 蚤 贼 蚤 燥 灶 葬 造 悦 澡 蚤 灶 藻 泽 藻 酝 藻 凿 蚤 糟 蚤 灶 藻, 杂 澡 藻 灶 赠 葬 灶 早 园 愿 源 苑, 蕴 蚤 葬 燥 灶 蚤 灶 早, 悦 澡 蚤 灶 葬 ) [ 粤 遭 泽 贼 则 葬 糟 贼 ] 摇 韵 遭 躁 藻 糟 贼 蚤 增 藻 : 栽 燥 蚤 灶 增 藻 泽 贼 蚤 早 葬 贼 藻 贼 澡 藻 藻 枣 枣 藻 糟 贼 泽 燥 枣 泽 皂 葬 造 造 蚤 灶 贼 藻 则 枣 藻 则 藻 灶 糟 藻 砸 晕 粤 ( 泽 蚤 砸 晕 粤 ) 鄄 皂 藻 凿 蚤 葬 贼 藻 凿 栽 蕴 砸 源 泽 蚤 造 藻 灶 糟 蚤 灶 早 燥 灶 责 则 燥 鄄 造 蚤 枣 藻 则 葬 贼 蚤 燥 灶 葬 灶 凿 蚤 灶 增 葬 泽 蚤 燥 灶 燥 枣 澡 怎 皂 葬 灶 造 怎 灶 早 葬 凿 藻 灶 燥 糟 葬 则 糟 蚤 灶 燥 皂 葬 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 援 酝 藻 贼 澡 燥 凿 泽 : 栽 澡 则 藻 藻 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 责 藻 糟 蚤 枣 蚤 糟 泽 蚤 砸 晕 粤 泽 ( 泽 蚤 砸 晕 粤 苑, 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 葬 灶 凿 泽 蚤 砸 晕 粤 缘 远 园 ) 葬 灶 凿 燥 灶 藻 灶 藻 早 葬 贼 蚤 增 藻 糟 燥 灶 贼 则 燥 造 泽 蚤 砸 晕 粤 憎 藻 则 藻 凿 藻 泽 蚤 早 灶 藻 凿 葬 灶 凿 糟 澡 藻 皂 蚤 糟 葬 造 造 赠 泽 赠 灶 贼 澡 藻 泽 蚤 扎 藻 凿 援 韵 灶 藻 泽 蚤 砸 晕 粤 贼 澡 葬 贼 糟 燥 怎 造 凿 皂 燥 泽 贼 藻 枣 枣 藻 糟 贼 蚤 增 藻 造 赠 泽 蚤 造 藻 灶 糟 藻 贼 澡 藻 栽 蕴 砸 源 早 藻 灶 藻 蚤 灶 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 憎 葬 泽 糟 澡 燥 泽 藻 灶 枣 则 燥 皂 贼 澡 藻 贼 澡 则 藻 藻 贼 藻 泽 贼 泽 蚤 砸 晕 粤 泽 遭 葬 泽 藻 凿 燥 灶 贼 澡 藻 蚤 则 糟 葬 责 葬 糟 蚤 贼 赠 燥 枣 造 燥 憎 藻 则 蚤 灶 早 栽 蕴 砸 源 皂 砸 晕 粤 葬 灶 凿 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 造 藻 增 藻 造 泽 则 藻 增 藻 葬 造 藻 凿 遭 赠 则 藻 葬 造 鄄 贼 蚤 皂 藻 孕 悦 砸 葬 灶 凿 宰 藻 泽 贼 藻 则 灶 遭 造 燥 贼 贼 蚤 灶 早 葬 灶 葬 造 赠 泽 蚤 泽 则 藻 泽 责 藻 糟 贼 蚤 增 藻 造 赠 援 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 憎 藻 则 藻 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 糟 贼 藻 凿 憎 蚤 贼 澡 贼 澡 蚤 泽 皂 燥 泽 贼 藻 枣 枣 藻 糟 贼 蚤 增 藻 泽 蚤 砸 晕 粤 葬 灶 凿 贼 澡 藻 糟 燥 灶 贼 则 燥 造 泽 蚤 砸 晕 粤 则 藻 泽 责 藻 糟 贼 蚤 增 藻 造 赠 援 孕 则 燥 造 蚤 枣 藻 则 葬 贼 蚤 燥 灶 葬 灶 凿 蚤 灶 增 葬 泽 蚤 燥 灶 糟 葬 责 葬 糟 蚤 鄄 贼 赠 燥 枣 贼 澡 藻 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 糟 贼 葬 灶 贼 泽 憎 藻 则 藻 葬 泽 泽 藻 泽 泽 藻 凿 遭 赠 悦 悦 运 鄄 愿 葬 泽 泽 葬 赠 葬 灶 凿 栽 则 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 葬 泽 泽 葬 赠, 则 藻 泽 责 藻 糟 贼 蚤 增 藻 造 赠 援 砸 藻 泽 怎 造 贼 泽 : 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 憎 葬 泽 贼 澡 藻 皂 燥 泽 贼 藻 枣 枣 藻 糟 贼 蚤 增 藻 泽 蚤 砸 晕 粤 憎 澡 蚤 糟 澡 糟 燥 怎 造 凿 泽 蚤 早 灶 蚤 枣 蚤 糟 葬 灶 贼 造 赠 蚤 灶 澡 蚤 遭 蚤 贼 贼 澡 藻 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 燥 枣 栽 蕴 砸 源 葬 贼 遭 燥 贼 澡 皂 砸 晕 粤 ( 园 援 源 缘 依 园 援 园 猿 增 泽 园 援 愿 猿 依 园 援 园, 孕 约 园 援 园 ) 葬 灶 凿 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 ( 园 援 猿 依 园 援 园 远 增 泽 园 援 怨 愿 依 园 援 园 怨 ) 造 藻 增 藻 造 泽 葬 贼 源 愿 澡 葬 枣 贼 藻 则 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 糟 贼 蚤 燥 灶 蚤 灶 贼 燥 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 葬 泽 糟 燥 皂 责 葬 则 藻 凿 憎 蚤 贼 澡 灶 藻 早 葬 贼 蚤 增 藻 糟 燥 灶 贼 则 燥 造 泽 蚤 砸 晕 粤 援 栽 澡 藻 责 则 燥 造 蚤 枣 藻 则 葬 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 贼 澡 藻 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 鄄 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 糟 贼 藻 凿 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 憎 葬 泽 泽 蚤 早 灶 蚤 枣 蚤 糟 葬 灶 贼 造 赠 蚤 灶 澡 蚤 遭 蚤 贼 藻 凿 糟 燥 皂 责 葬 则 藻 凿 憎 蚤 贼 澡 贼 澡 藻 晕 杂 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 鄄 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 糟 贼 藻 凿 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 ( 孕 约 园 援 园 缘 ) 援 杂 蚤 皂 蚤 造 葬 则 造 赠, 贼 澡 藻 蚤 灶 增 葬 泽 蚤 燥 灶 糟 葬 责 葬 糟 蚤 贼 赠 憎 葬 泽 泽 蚤 早 灶 蚤 枣 蚤 糟 葬 灶 贼 造 赠 造 燥 憎 藻 则 蚤 灶 贼 澡 藻 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 鄄 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 糟 贼 藻 凿 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 贼 澡 葬 灶 蚤 灶 贼 澡 藻 晕 杂 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 鄄 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 糟 贼 藻 凿 糟 藻 造 造 泽 ( 猿 援 远 园 依 援 愿 愿 增 泽 缘 怨 援 愿 园 依 缘 援 缘 源, [ 基 金 项 目 ] 摇 国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目 ( 晕 燥 援 愿 园 苑 愿 怨 ); 辽 宁 省 教 育 厅 高 等 学 校 科 研 资 助 项 目 ( 晕 燥 援 园 园 怨 粤 缘 园 园 ); 辽 宁 省 博 士 启 动 基 金 资 助 项 目 ( 晕 燥 援 园 猿 源 ) 孕 则 燥 躁 藻 糟 贼 泽 怎 责 责 燥 则 贼 藻 凿 遭 赠 贼 澡 藻 晕 葬 贼 蚤 燥 灶 葬 造 晕 葬 贼 怎 则 葬 造 杂 糟 蚤 藻 灶 糟 藻 云 燥 怎 灶 凿 葬 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 悦 澡 蚤 灶 ( 葬 晕 燥 援 愿 园 苑 愿 怨 ), 贼 澡 藻 杂 糟 蚤 藻 灶 贼 蚤 枣 蚤 糟 砸 藻 泽 藻 葬 则 糟 澡 孕 则 燥 躁 藻 糟 贼 枣 燥 则 匀 蚤 早 澡 耘 凿 怎 糟 葬 贼 蚤 燥 灶 枣 则 燥 皂 耘 凿 怎 糟 葬 贼 蚤 燥 灶 月 怎 则 藻 葬 怎 燥 枣 蕴 蚤 葬 燥 灶 蚤 灶 早 孕 则 燥 增 蚤 灶 糟 ( 藻 晕 燥 援 园 园 怨 粤 缘 园 园 ), 葬 灶 凿 贼 澡 藻 阅 燥 糟 贼 燥 则 葬 造 云 燥 怎 灶 凿 葬 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 蕴 蚤 葬 燥 灶 蚤 灶 早 孕 则 燥 增 蚤 灶 糟 ( 藻 晕 燥 援 园 猿 源 ) [ 作 者 简 介 ] 摇 郭 隽 馥 ( 怨 愿 猿 原 ), 女, 辽 宁 省 沈 阳 市 人, 硕 士, 主 要 从 事 肿 瘤 分 子 遗 传 学 方 面 的 基 础 研 究, 耘 鄄 皂 葬 蚤 造 : 早 怎 燥 躁 怎 灶 枣 怎 岳 葬 造 蚤 赠 怎 灶 援 糟 燥 皂 [ 通 信 作 者 ] 摇 王 艳 杰 ( 宰 葬 灶 早 再 葬 灶 躁 蚤 藻, 糟 燥 则 则 藻 泽 责 燥 灶 凿 蚤 灶 早 葬 怎 贼 澡 燥 则 ), 耘 鄄 皂 葬 蚤 造 : 缘 怨 源 园 缘 苑 园 缘 源 岳 远 猿 援 糟 燥 皂

2 远 猿 远 中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志, 园 源 年 月, ( 远 ) 孕 约 园 援 园 ) 援 悦 燥 灶 糟 造 怎 泽 蚤 燥 灶 : 杂 藻 择 怎 藻 灶 糟 藻 鄄 泽 责 藻 糟 蚤 枣 蚤 糟 泽 蚤 砸 晕 粤 皂 葬 赠 藻 枣 枣 藻 糟 贼 蚤 增 藻 造 赠 泽 蚤 造 藻 灶 糟 藻 栽 蕴 砸 源 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 葬 灶 凿 蚤 灶 澡 蚤 遭 蚤 贼 贼 澡 藻 责 则 燥 造 蚤 枣 藻 则 葬 贼 蚤 燥 灶 葬 灶 凿 蚤 灶 增 葬 泽 蚤 燥 灶 葬 遭 蚤 造 蚤 贼 赠 燥 枣 澡 怎 皂 葬 灶 造 怎 灶 早 糟 葬 则 糟 蚤 灶 燥 皂 葬 糟 藻 造 造 泽 蚤 灶 增 蚤 贼 则 燥 援 栽 澡 蚤 泽 责 则 藻 造 蚤 皂 蚤 灶 葬 则 赠 燥 遭 泽 藻 则 增 葬 贼 蚤 燥 灶 泽 怎 早 早 藻 泽 贼 泽 贼 澡 葬 贼 栽 蕴 砸 源 皂 葬 赠 泽 藻 则 增 藻 葬 泽 葬 责 怎 贼 葬 贼 蚤 增 藻 贼 澡 藻 则 葬 责 藻 怎 贼 蚤 糟 贼 葬 则 早 藻 贼 枣 燥 则 造 怎 灶 早 糟 葬 灶 糟 藻 则 援 [ 运 藻 赠 憎 燥 则 凿 泽 ] 摇 造 怎 灶 早 糟 葬 则 糟 蚤 灶 燥 皂 葬 ; 栽 蕴 砸 源 早 藻 灶 藻 ; 泽 蚤 砸 晕 粤 ; 责 则 燥 造 蚤 枣 藻 则 葬 贼 蚤 燥 灶 ; 蚤 灶 增 葬 泽 蚤 燥 灶 [ 悦 澡 蚤 灶 允 悦 葬 灶 糟 藻 则 月 蚤 燥 贼 澡 藻 则, 园 源, ( 远 ): 远 猿 缘 鄄 远 猿 怨 ] 摇 摇 摇 摇 肺 癌 是 源 于 支 气 管 黏 膜 或 腺 体 的 恶 性 肿 瘤, 发 病 率 及 病 死 率 高, 是 世 界 范 围 内 恶 性 肿 瘤 的 主 要 死 [ 因 ] [ 鄄 苑 ] 研 究 发 现, 栽 燥 造 造 样 受 体 ( 栽 燥 造 造 鄄 造 蚤 噪 藻 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则, 栽 蕴 砸 ) 在 多 种 肿 瘤 中 表 达 上 调, 与 肿 瘤 的 发 生 发 展 密 切 相 关, 并 在 肿 瘤 的 侵 袭 转 移 过 程 中 发 挥 着 重 要 作 用 栽 蕴 砸 源 是 人 类 发 现 的 第 一 个 栽 蕴 砸 家 族 蛋 白, 主 要 介 导 革 兰 阴 性 菌 感 染 时 产 生 的 脂 多 糖 ( 蕴 孕 杂 ) 信 号 转 导 激 活 晕 云 鄄 κ 月 等 信 号 通 路, 引 起 炎 症 反 应, 从 [ 愿 ] 而 发 挥 早 期 免 疫 应 答 的 作 用 近 期 研 究 表 明, 栽 蕴 砸 源 在 肿 瘤 的 预 转 移 阶 段 发 挥 重 要 的 功 能 受 体 作 用 目 前 栽 蕴 砸 源 基 因 沉 默 对 人 肺 腺 癌 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 和 侵 袭 的 影 响 尚 未 见 报 道, 因 此 本 研 究 以 栽 蕴 砸 源 基 因 为 靶 标, 化 学 合 成 猿 条 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤, 筛 选 有 效 的 泽 蚤 砸 晕 粤 并 确 定 最 佳 转 染 时 间, 进 一 步 检 测 栽 蕴 砸 源 基 因 沉 默 对 人 肺 腺 癌 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 及 侵 袭 的 影 响, 以 期 为 肺 癌 的 基 因 治 疗 提 供 新 的 靶 点 摇 援 摇 材 料 与 方 法 细 胞 系 与 主 要 试 剂 人 肺 腺 癌 粤 缘 源 怨 细 胞 购 于 中 国 科 学 院 典 型 培 养 物 保 藏 委 会, 培 养 于 含 园 豫 胎 牛 血 清 园 园 哉 辕 皂 造 青 霉 素 和 园 园 μ 早 辕 皂 造 链 霉 素 的 阅 酝 耘 酝 培 养 液 中, 猿 苑 益, 缘 豫 悦 韵 饱 和 湿 度 培 养, 常 规 消 化 传 代, 选 取 处 于 指 数 生 长 期 细 胞 进 行 实 验 阅 酝 耘 酝 培 养 基 胎 牛 血 清 双 抗 栽 砸 陨 扎 燥 造 试 剂 和 栽 酝 蕴 蚤 责 燥 枣 藻 糟 贼 葬 皂 蚤 灶 园 园 园 均 购 自 陨 灶 增 蚤 贼 则 燥 早 藻 灶 公 司 砸 藻 葬 造 鄄 贼 蚤 皂 藻 孕 悦 砸 试 剂 盒 购 自 栽 葬 运 葬 砸 葬 公 司, 细 胞 培 养 瓶 培 养 板 和 栽 则 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 细 胞 培 养 小 室 购 自 悦 燥 泽 贼 葬 则 公 司, 悦 藻 造 造 悦 燥 怎 灶 贼 蚤 灶 早 运 蚤 贼 鄄 愿 ( 悦 悦 运 鄄 愿 ) 试 剂 购 自 碧 云 天 公 司 小 鼠 抗 人 栽 蕴 砸 源 单 克 隆 抗 体 ( 葬 遭 园 源 愿 ) 购 自 粤 月 糟 葬 皂 公 司, 兔 抗 小 鼠 二 抗 购 自 北 京 博 奥 森 公 司 援 摇 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 的 设 计 合 成 根 据 郧 藻 灶 月 葬 灶 噪 数 据 库 提 供 的 人 栽 蕴 砸 源 全 长 基 因 选 取 砸 晕 粤 蚤 的 靶 区, 设 计 猿 个 泽 蚤 砸 晕 粤 序 列, 根 据 靶 序 列 对 应 的 糟 阅 晕 粤 起 始 点 位 置 命 名 为 泽 蚤 砸 晕 粤 苑 泽 蚤 砸 鄄 晕 粤 远 苑 猿 和 泽 蚤 砸 晕 粤 缘 远 园 另 外 设 计 一 条 阴 性 对 照 ( 灶 藻 早 葬 贼 蚤 增 藻 糟 燥 灶 贼 则 燥 造, 晕 悦 ) 序 列, 月 造 葬 泽 贼 查 询 验 证, 排 除 与 其 他 基 因 同 源 以 上 核 酸 分 子 由 上 海 吉 玛 制 药 有 限 公 司 设 计 合 成 ( 表 ) 表 摇 泽 蚤 砸 晕 粤 寡 核 苷 酸 序 列 栽 葬 遭 援 摇 泽 蚤 砸 晕 粤 燥 造 蚤 早 燥 灶 怎 糟 造 藻 燥 贼 蚤 凿 藻 泽 藻 择 怎 藻 灶 糟 藻 泽 晕 葬 皂 藻 杂 藻 灶 泽 藻 ( 缘 忆 鄄 猿 忆 ) 粤 灶 贼 蚤 泽 藻 灶 泽 藻 ( 缘 忆 鄄 猿 忆 ) 晕 悦 哉 哉 悦 哉 悦 悦 郧 粤 粤 悦 郧 哉 郧 哉 悦 粤 悦 郧 哉 栽 栽 粤 悦 郧 哉 郧 粤 悦 粤 悦 郧 哉 哉 悦 郧 郧 粤 郧 粤 粤 栽 栽 泽 蚤 砸 晕 粤 苑 悦 悦 粤 悦 悦 哉 悦 哉 悦 哉 粤 悦 悦 哉 哉 粤 粤 哉 粤 栽 栽 哉 粤 哉 哉 粤 粤 郧 郧 哉 粤 郧 粤 郧 粤 郧 郧 哉 郧 郧 栽 栽 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 郧 郧 郧 悦 哉 哉 粤 郧 粤 粤 悦 粤 粤 悦 哉 粤 郧 粤 粤 栽 栽 哉 哉 悦 哉 粤 郧 哉 哉 郧 哉 哉 悦 哉 粤 粤 郧 悦 悦 悦 栽 栽 泽 蚤 砸 晕 粤 缘 远 园 郧 悦 哉 郧 郧 哉 郧 哉 粤 哉 悦 哉 哉 哉 郧 粤 粤 哉 粤 栽 栽 哉 粤 哉 哉 悦 粤 粤 粤 郧 粤 哉 粤 悦 粤 悦 悦 粤 郧 悦 栽 栽 援 猿 摇 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 转 染 粤 缘 源 怨 细 胞 转 染 前 一 天, 取 生 长 状 态 良 好 的 对 数 生 长 期 粤 缘 源 怨 细 胞, 胰 酶 消 化, 将 其 接 种 到 远 孔 细 胞 培 养 板 中 培 养 耀耀耀耀耀耀 源 澡 后 ( 汇 合 度 缘 园 豫 耀耀耀耀耀耀 苑 园 豫 ) 弃 完 全 培 养 基, 孕 月 杂 洗 一 次, 加 入 援 缘 皂 造 无 抗 阅 酝 耘 酝 培 养 栽 酝 基 培 养 缘 μ 造 蕴 蚤 责 燥 枣 藻 糟 贼 葬 皂 蚤 灶 藻 园 园 园 与 缘 园 μ 造 双 无 阅 酝 耘 酝 培 养 基 混 匀 后, 室 温 孵 育 缘 皂 蚤 灶 缘 μ 造 泽 蚤 砸 晕 粤 与 缘 园 μ 造 双 无 阅 酝 耘 酝 培 养 基 混 匀 后, 室 温 孵 育 缘 皂 蚤 灶 将 以 上 两 步 所 得 溶 液 混 匀, 室 温 放 置 园 皂 蚤 灶, 即 泽 蚤 砸 晕 粤 转 染 液 将 泽 蚤 砸 晕 粤 转 染 液 加 入 已 换 成 双 无 阅 酝 耘 酝 培 养 基 的 远 孔 板 中, 混 匀, 继 续 培 养 源 耀耀耀耀耀耀 远 澡 后, 更 换 为 无 抗 阅 酝 耘 酝 培 养 基 培 养 源 澡 后 更 换 为 含 园 豫 云 月 杂 的 完 全 阅 酝 耘 酝 培 养 基 援 源 摇 砸 藻 葬 造 鄄 贼 蚤 皂 藻 孕 悦 砸 筛 选 有 效 沉 默 栽 蕴 砸 源 的 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 序 列 按 转 染 的 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 序 列 不 同, 实 验 分 晕 悦

3 郭 隽 馥, 等 援 泽 蚤 砸 晕 粤 沉 默 栽 蕴 砸 源 表 达 对 人 肺 腺 癌 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 和 侵 袭 的 影 响 远 猿 苑 泽 蚤 砸 晕 粤 苑 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 和 泽 蚤 砸 晕 粤 缘 远 园 组 转 染 后 分 别 在 源 澡 源 愿 澡 和 苑 澡 提 取 总 砸 晕 粤, 逆 转 录 成 糟 阅 晕 粤 后, 以 郧 粤 孕 阅 匀 为 内 参, 砸 藻 葬 造 鄄 贼 蚤 皂 藻 孕 悦 砸 检 测 各 组 细 胞 内 栽 蕴 砸 源 皂 砸 晕 粤 的 表 达 水 平, 反 应 条 件 为 怨 缘 益 预 变 性 猿 园 泽, 怨 缘 益 变 性 缘 泽 远 园 益 退 火 及 延 伸 猿 源 泽, 进 行 源 缘 个 循 环 每 个 样 品 设 置 猿 个 复 孔 在 粤 月 陨 苑 缘 园 园 实 时 定 量 孕 悦 砸 系 统 上 进 行, 收 集 反 应 荧 光 信 号, 进 一 步 做 产 物 熔 解 曲 线 分 析, 检 测 产 物 的 特 异 性 砸 藻 鄄 鄄 ΔΔ 悦 贼 葬 造 鄄 贼 蚤 皂 藻 孕 悦 砸 数 据 用 法 进 行 分 析, 实 验 重 复 猿 次 栽 蕴 砸 源 引 物 序 列 ] : 上 游 为 缘 忆 鄄 悦 郧 粤 郧 鄄 郧 粤 粤 郧 粤 郧 粤 粤 郧 粤 悦 粤 悦 悦 粤 郧 栽 鄄 猿 忆, 下 游 为 缘 忆 鄄 悦 粤 栽 悦 粤 栽 悦 鄄 悦 栽 悦 粤 悦 栽 郧 悦 栽 栽 悦 栽 郧 栽 鄄 猿 忆 郧 粤 孕 阅 匀 引 物 序 列 ] : 上 游 为 缘 忆 鄄 郧 郧 粤 栽 栽 栽 郧 郧 栽 悦 郧 栽 粤 栽 栽 郧 郧 郧 鄄 猿 忆, 下 游 为 缘 忆 鄄 郧 郧 粤 粤 郧 粤 栽 郧 郧 栽 郧 粤 栽 郧 郧 郧 粤 栽 栽 鄄 猿 忆 援 缘 摇 宰 藻 泽 贼 藻 则 灶 遭 造 燥 贼 贼 蚤 灶 早 检 测 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 转 染 对 粤 缘 源 怨 细 胞 内 栽 蕴 砸 源 蛋 白 表 达 的 影 响 收 集 转 染 源 源 愿 和 苑 澡 后 的 粤 缘 源 怨 细 胞, 冰 冷 孕 月 杂 洗 猿 次, 加 入 细 胞 裂 解 液 提 取 蛋 白 以 杂 阅 杂 鄄 孕 粤 郧 耘 分 离 蛋 白 后, 将 蛋 白 转 移 至 孕 灾 阅 云 膜 上, 再 用 缘 豫 脱 脂 奶 粉 鄄 栽 月 杂 栽 室 温 摇 床 封 闭 澡, 加 入 小 鼠 抗 人 栽 蕴 砸 源 一 抗 ( 颐 园 园 园 ) 于 源 益 摇 床 孵 育 过 夜 ; 用 栽 月 杂 栽 洗 涤 猿 次, 每 次 园 皂 蚤 灶, 并 在 摇 床 上 振 摇, 加 入 兔 抗 小 鼠 二 抗 ( 颐 园 园 园 ), 于 猿 苑 益 下 孵 育 澡 ; 用 栽 月 杂 栽 洗 涤 猿 次, 每 次 园 皂 蚤 灶 在 化 学 发 光 仪 上 显 色, 测 量 条 带 灰 度 值 实 验 重 复 猿 次 援 远 摇 悦 悦 运 鄄 愿 实 验 检 测 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 转 染 对 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 的 影 响 取 生 长 状 态 良 好 的 对 数 生 长 期 细 胞, 常 规 胰 酶 源 消 化, 将 细 胞 密 度 调 整 为 ( 耀耀耀耀耀耀 猿 ) 伊 园 个 辕 皂 造, 接 种 于 怨 远 孔 培 养 板 中, 每 孔 加 入 园 园 μ 造 细 胞 悬 液, 每 组 设 立 猿 个 复 孔 耀耀耀耀耀耀 源 澡 后 ( 汇 合 度 : 缘 园 豫 耀耀耀耀耀耀 苑 园 豫 ) 进 行 转 染 分 别 在 转 染 源 源 愿 苑 和 怨 远 澡 后, 每 孔 加 入 园 μ 造 悦 悦 运 鄄 愿 溶 液, 在 细 胞 培 养 箱 内 继 续 孵 育 澡, 酶 标 仪 测 定 源 缘 园 灶 皂 波 长 处 光 密 度 ( 阅 ) 值, 绘 制 生 长 曲 线 实 验 重 复 猿 次 援 苑 摇 栽 则 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 实 验 检 测 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 转 染 对 粤 缘 源 怨 细 胞 体 外 侵 袭 能 力 的 影 响 将 酝 葬 贼 则 蚤 早 藻 造 基 质 胶 按 颐 猿 稀 释 后 均 匀 地 铺 在 小 室 膜 ( 源 园 μ 造 辕 孔 ) 上, 置 于 猿 苑 益 缘 豫 悦 韵 条 件 下 源 澡, 待 用 粤 缘 源 怨 细 胞 转 染 源 澡 后, 常 规 胰 酶 消 化, 将 细 缘 胞 密 度 调 整 为 猿 伊 园 个 辕 皂 造, 接 种 于 栽 则 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 小 室 中, 上 室 加 入 园 园 μ 造 细 胞 悬 液, 下 室 加 入 远 园 园 μ 造 体 积 分 数 园 援 豫 小 牛 血 清 的 阅 酝 耘 酝 培 养 基, 猿 苑 益 培 养 源 澡 取 出 滤 膜, 甲 醇 固 定 猿 园 皂 蚤 灶, 苏 木 精 染 色 源 园 泽, 伊 红 染 色 猿 皂 蚤 灶 ( 匀 鄄 耘 染 色 ), 苏 木 素 再 复 染 缘 泽, 自 然 晾 干 拍 照, 园 园 倍 显 微 镜 下 随 机 取 缘 个 视 野 计 算 穿 膜 细 胞 数, 求 出 每 个 视 野 平 均 穿 膜 细 胞 数 实 验 重 复 猿 次 援 愿 摇 统 计 学 处 理 计 量 数 据 用 曾 珋 依 泽 表 示, 采 用 杂 孕 杂 杂 远 援 园 软 件 进 行 分 析, 组 间 比 较 采 用 独 立 样 本 贼 检 验, 以 孕 约 园 援 园 缘 或 孕 约 园 援 园 表 示 差 异 具 有 统 计 学 意 义 摇 结 摇 果 援 摇 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 有 效 序 列 的 筛 选 和 最 佳 干 扰 时 间 的 确 定 转 染 不 同 泽 蚤 砸 晕 粤 后, 在 源 源 愿 和 苑 澡 采 用 砸 藻 鄄 葬 造 鄄 贼 蚤 皂 藻 孕 悦 砸 技 术 检 测 粤 缘 源 怨 细 胞 中 栽 蕴 砸 源 皂 砸 晕 粤 的 表 达 水 平, 结 果 ( 图 ) 显 示, 与 阴 性 对 照 组 相 比, 在 不 同 时 间 点 猿 个 泽 蚤 砸 晕 粤 对 粤 缘 源 怨 细 胞 中 栽 蕴 砸 源 皂 砸 晕 粤 的 表 达 均 有 明 显 的 抑 制 作 用 ( 孕 约 园 援 园 ), 其 中 泽 蚤 砸 鄄 晕 粤 远 苑 猿 转 染 源 愿 澡 对 栽 蕴 砸 源 皂 砸 晕 粤 的 抑 制 最 为 明 显 [( 园 援 猿 依 园 援 园 远 ) 增 ( 泽 园 援 怨 愿 依 园 援 园 怨 ), 孕 约 园 援 园 ] 宰 藻 泽 贼 鄄 藻 则 灶 遭 造 燥 贼 贼 蚤 灶 早 检 测 结 果 ( 图 ) 显 示, 转 染 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 源 愿 澡 后, 栽 蕴 砸 源 蛋 白 表 达 降 低 也 最 为 明 显 [( 园 援 源 缘 依 园 郾 园 猿 ) 增 ( 泽 园 援 愿 猿 依 园 援 园 ), 孕 约 园 援 园 ], 故 挑 选 泽 蚤 砸 晕 粤 远 苑 猿 进 行 后 续 试 验, 最 佳 转 染 时 间 确 定 为 源 愿 澡 图 摇 图 摇 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 有 效 序 列 的 筛 选 和 最 佳 干 扰 时 间 的 确 定 云 蚤 早 援 摇 杂 藻 造 藻 糟 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 藻 枣 枣 蚤 糟 蚤 藻 灶 贼 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 燥 造 蚤 早 燥 泽 藻 择 怎 藻 灶 糟 藻 泽 葬 灶 凿 贼 澡 藻 遭 藻 泽 贼 蚤 灶 贼 藻 则 枣 藻 则 藻 灶 糟 藻 贼 蚤 皂 藻 孕 约 园 援 园 增 泽 晕 悦 早 则 燥 怎 责 转 染 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 后 粤 缘 源 怨 细 胞 中 栽 蕴 砸 源 蛋 白 的 表 达 云 蚤 早 援 摇 耘 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 泽 燥 枣 栽 蕴 砸 源 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 泽 蚤 灶 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 葬 枣 贼 藻 则 贼 则 葬 灶 泽 枣 藻 糟 贼 蚤 燥 灶 憎 蚤 贼 澡 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 : 源 澡 晕 悦 早 则 燥 怎 责 ; : 源 澡 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 早 则 燥 怎 责 ; 猿 : 源 愿 澡 晕 悦 早 则 燥 怎 责 ; 源 : 源 愿 澡 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 早 则 燥 怎 责 ; 缘 : 苑 澡 晕 悦 早 则 燥 怎 责 ; 远 : 苑 澡 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 早 则 燥 怎 责

4 远 猿 愿 中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志, 园 源 年 月, ( 远 ) 援 摇 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 抑 制 粤 缘 源 怨 细 胞 的 增 殖 能 力 由 悦 悦 运 鄄 愿 检 测 结 果 ( 图 猿 ) 可 见, 与 空 白 对 照 组 和 晕 悦 组 相 比, 转 染 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 组 粤 缘 源 怨 细 胞 的 增 殖 明 显 缓 慢, 且 苑 澡 降 低 最 为 明 显 [( 园 援 苑 苑 依 园 援 园 ) 增 泽 ( 园 援 怨 愿 依 园 援 ) ( 园 援 怨 猿 依 园 援 园 源 ), 孕 约 园 援 园 ] 云 蚤 早 援 猿 摇 援 猿 摇 图 猿 摇 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 抑 制 粤 缘 源 怨 细 胞 的 增 殖 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 蚤 灶 澡 蚤 遭 蚤 贼 藻 凿 责 则 燥 造 蚤 枣 藻 则 葬 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 孕 约 园 援 园 缘, 孕 约 园 援 园 增 泽 晕 悦 燥 则 悦 燥 灶 贼 则 燥 造 早 则 燥 怎 责 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 下 调 粤 缘 源 怨 细 胞 的 侵 袭 能 力 栽 则 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 小 室 上 室 中, 粤 缘 源 怨 细 胞 穿 过 膜 上 酝 葬 鄄 贼 则 蚤 早 藻 造 胶 到 膜 的 下 室 面, 其 数 量 反 映 了 粤 缘 源 怨 细 胞 侵 袭 能 力 的 大 小 侵 袭 实 验 结 果 ( 图 源 ) 显 示, 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 组 ( 转 染 源 愿 澡 ) 穿 膜 细 胞 数 为 ( 猿 援 远 园 依 援 愿 愿 ) 个, 明 显 少 于 转 染 阴 性 对 照 晕 悦 组 的 ( 缘 怨 援 愿 园 依 缘 援 缘 源 ) 个 ( 孕 约 园 援 园 ) 由 此 表 明, 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 能 抑 制 粤 缘 源 怨 细 胞 的 侵 袭 能 力 图 源 摇 栽 则 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 实 验 检 测 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 对 粤 缘 源 怨 细 胞 侵 袭 的 影 响 ( 伊 园 园 ) 云 蚤 早 援 源 摇 陨 灶 枣 造 怎 藻 灶 糟 藻 燥 枣 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 燥 灶 蚤 灶 增 葬 泽 蚤 燥 灶 燥 枣 粤 缘 源 怨 糟 藻 造 造 泽 凿 藻 贼 藻 糟 贼 藻 凿 遭 赠 栽 则 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 葬 泽 泽 葬 赠 ( 伊 园 园 ) 猿 摇 讨 摇 论 粤 : 晕 悦 早 则 燥 怎 责 ; 月 : 栽 砸 蕴 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 早 则 燥 怎 责 [ 园 ] 近 年 来, 研 究 表 明, 由 自 身 免 疫 疾 病 或 者 病 原 微 生 物 感 染 引 起 的 许 多 慢 性 炎 症 是 相 应 恶 性 肿 瘤 的 癌 前 病 变 而 栽 蕴 砸 最 突 出 的 生 物 学 功 能 就 是 促 进 细 胞 因 子 的 合 成 与 释 放, 引 发 炎 症 反 应 韦 江 红 [ ] 等 发 现, 除 了 参 与 肿 瘤 细 胞 的 免 疫 逃 逸 外, 栽 蕴 砸 源 的 激 活 能 促 进 哮 喘 气 道 平 滑 肌 细 胞 的 增 殖, 抑 制 细 [ ] 胞 凋 亡 再 葬 灶 早 等 研 究 了 乳 腺 癌 细 胞 系 酝 阅 粤 鄄 酝 月 鄄 猿 中 栽 蕴 砸 耀 栽 蕴 砸 园 皂 砸 晕 粤 和 蛋 白 的 表 达 水 平, 发 现 栽 蕴 砸 源 表 达 水 平 最 高 ; 进 一 步 采 用 泽 蚤 砸 晕 粤 沉 默 酝 阅 粤 鄄 酝 月 鄄 猿 细 胞 中 栽 蕴 砸 源 的 表 达 后, 陨 蕴 鄄 远 和 陨 蕴 鄄 愿 的 水 平 显 著 下 降, 同 时 明 显 抑 制 了 细 胞 的 增 殖 能 力 研 究 提 示, 栽 蕴 砸 源 能 够 介 导 促 进 乳 腺 癌 细 胞 的 增 殖, 在 乳 腺 癌 进 展 中 发 挥 重 要 作 用, 是 乳 腺 癌 治 疗 的 潜 [ 猿 ] 在 靶 基 因 此 外, 赵 卉 等 研 究 发 现, 肺 癌 组 织 中 栽 蕴 砸 源 和 栽 蕴 砸 怨 在 皂 砸 晕 粤 和 蛋 白 水 平 都 有 强 阳 性 表 达, 提 出 栽 蕴 砸 源 的 阳 性 表 达 和 肺 癌 的 恶 性 程 度 呈 正 [ 源 ] 相 关 性 何 凤 莲 等 也 发 现, 非 小 细 胞 肺 癌 组 织 中 栽 蕴 砸 源 的 阳 性 率 为 缘 远 援 怨 豫, 显 著 高 于 正 常 肺 组 织 中 [ 缘 ] 的 园 豫 云 怎 等 采 用 免 疫 组 化 手 段 检 测 了 缘 猿 例 非 小 细 胞 癌 患 者 和 缘 例 正 常 肺 组 织 中 栽 蕴 砸 源 蛋 白 的 表 达 情 况, 发 现 与 正 常 肺 组 织 相 比 较, 栽 蕴 砸 源 蛋 白 的 表 达 水 平 在 非 小 细 胞 肺 癌 组 织 中 显 著 上 调, 栽 蕴 砸 源 表 达 与 肿 瘤 分 化 程 度 密 切 相 关 因 此, 本 研 究 以 栽 蕴 砸 源 为 靶 标, 对 肺 癌 细 胞 的 生 物 学 特 性 做 进 一 步 研 究, 旨 在 为 肺 癌 的 有 效 治 疗 提 供 新 的 思 路 小 干 扰 砸 晕 粤 ( 泽 皂 葬 造 造 蚤 灶 贼 藻 则 枣 藻 则 蚤 灶 早 砸 晕 粤, 泽 蚤 砸 晕 粤 ) 是 近 年 来 新 兴 的 一 种 在 转 录 后 水 平 高 效 特 异 地 沉 默 基 因 表 达 的 有 效 工 具, 进 入 哺 乳 动 物 细 胞 后 能 够 对 同 源 的 皂 砸 晕 粤 产 生 特 异 性 降 解, 作 为 后 基 因 组 时 代 的 一 种 下 调 基 因 表 达 的 工 具, 已 广 泛 应 用 于 基 因 功 能 的 研 究 ] 由 于 泽 蚤 砸 晕 粤 的 作 用 存 在 靶 点 结 构 依 赖 [ 远 性 ], 因 此, 本 实 验 共 设 计 了 猿 个 针 对 靶 基 因 的 泽 蚤 砸 晕 粤, 以 保 证 至 少 有 个 泽 蚤 砸 晕 粤 能 高 效 抑 制 靶 基 因 的 表 达, 同 时 设 立 了 阴 性 对 照 的 泽 蚤 砸 晕 粤 实 验 结 果 显 示, 猿 个 泽 蚤 砸 晕 粤 对 粤 缘 源 怨 细 胞 栽 蕴 砸 源 基 因 均 有 明 显 的 抑 制 作 用, 而 其 中 起 始 位 置 为 远 苑 猿 的 泽 蚤 砸 晕 粤 在 转 染 源 愿 澡 后 对 栽 蕴 砸 源 的 干 扰 效 果 最 为 明 显, 所 以 此 条 件 被 选 择 用 于 后 续 实 验 研 究 悦 悦 运 鄄 愿 法 细 胞 增 殖 检 测 和 栽 则 葬 灶 泽 憎 藻 造 造 小 室 实 验 结 果 显 示 : 栽 蕴 砸 源 鄄 泽 蚤 砸 晕 粤 转 染 的 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 和 侵 袭 能 力 明 显 减 弱, 提 示, 栽 蕴 砸 源 基 因 沉 默 能 明 显 抑 制 粤 缘 源 怨 细 胞 的 增 殖 和 侵 袭 综 上 所 述, 利 用 泽 蚤 砸 晕 粤 技 术 能 够 有 效 下 调 人 肺 腺 癌 粤 缘 源 怨 细 胞 中 栽 蕴 砸 源 的 表 达, 阻 滞 肿 瘤 细 胞 的 生 长, 抑 制 细 胞 的 侵 袭, 特 异 性 干 预 栽 蕴 砸 源 基 因 的 表 达 有 可 能 成 为 治 疗 肺 癌 的 一 种 新 手 段 [ 参 考 文 献 ] [ ] 摇 栽 泽 葬 蚤 允 砸, 蕴 蚤 怎 孕 蕴, 悦 澡 藻 灶 再 匀, 藻 贼 葬 造 援 郧 蚤 灶 噪 早 燥 遭 蚤 造 燥 遭 葬 藻 曾 贼 则 葬 糟 贼 凿 藻 糟 则 藻 葬 泽 藻 泽 灶 燥 灶 鄄 泽 皂 葬 造 造 糟 藻 造 造 造 怎 灶 早 糟 葬 灶 糟 藻 则 糟 藻 造 造 皂 蚤 早 则 葬 贼 蚤 燥 灶 遭 赠 凿 燥 憎 灶 则 藻 早 怎 造 葬 贼 蚤 灶 早 皂 藻 贼 葬 泽 鄄

5 郭 隽 馥, 等 援 泽 蚤 砸 晕 粤 沉 默 栽 蕴 砸 源 表 达 对 人 肺 腺 癌 粤 缘 源 怨 细 胞 增 殖 和 侵 袭 的 影 响 远 猿 怨 贼 葬 泽 蚤 泽 鄄 葬 泽 泽 燥 糟 蚤 葬 贼 藻 凿 枣 葬 糟 贼 燥 则 澡 藻 葬 贼 鄄 泽 澡 燥 糟 噪 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 苑 [ 允 ] 援 孕 蕴 燥 杂 韵 晕 耘, 园 源, 怨 ( 猿 ): 藻 怨 猿 猿 援 [ ] 摇 孕 蚤 皂 藻 灶 贼 藻 造 鄄 晕 怎 灶 藻 泽 孕, 粤 枣 燥 灶 泽 燥 蕴, 蕴 燥 责 藻 泽 孕, 藻 贼 葬 造, 陨 灶 糟 则 藻 葬 泽 藻 凿 藻 曾 责 则 藻 泽 鄄 泽 蚤 燥 灶 燥 枣 栽 燥 造 造 鄄 造 蚤 噪 藻 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 泽 ( 栽 蕴 砸 ), 源 葬 灶 凿 缘 蚤 灶 早 葬 泽 贼 则 蚤 糟 凿 赠 泽 责 造 葬 泽 蚤 葬 [ 允 ] 援 孕 葬 贼 澡 燥 造 韵 灶 糟 燥 造 砸 藻 泽, 园, 苑 ( 猿 ): 远 苑 苑 鄄 远 愿 猿 援 [ 猿 ] 摇 栽 泽 蚤 皂 燥 早 蚤 葬 灶 灶 蚤 泽 运 耘, 栽 藻 造 造 蚤 泽 悦 悦, 栽 泽 藻 造 藻 责 蚤 泽 粤 阅, 藻 贼 葬 造 援 栽 燥 造 造 鄄 造 蚤 噪 藻 则 藻 糟 藻 责 鄄 贼 燥 则 泽 蚤 灶 贼 澡 藻 蚤 灶 枣 造 葬 皂 皂 葬 贼 燥 则 赠 则 藻 泽 责 燥 灶 泽 藻 凿 怎 则 蚤 灶 早 燥 责 藻 灶 葬 灶 凿 造 葬 责 葬 则 燥 泽 糟 燥 责 蚤 糟 糟 燥 鄄 造 藻 糟 贼 燥 皂 赠 枣 燥 则 糟 燥 造 燥 则 藻 糟 贼 葬 造 糟 葬 灶 糟 藻 则 [ 允 ] 援 杂 怎 则 早 耘 灶 凿 燥 泽 糟, 园, 远 ( ): 猿 猿 园 鄄 猿 猿 远 援 [ 源 ] 摇 耘 蚤 则 佼 晕, 郧 燥 灶 扎 佗 造 藻 扎 蕴, 郧 燥 灶 扎 佗 造 藻 扎 蕴 韵, 藻 贼 葬 造, 杂 贼 怎 凿 赠 燥 枣 贼 澡 藻 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 燥 枣 栽 燥 造 造 鄄 造 蚤 噪 藻 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 泽 蚤 灶 凿 蚤 枣 枣 藻 则 藻 灶 贼 澡 蚤 泽 贼 燥 造 燥 早 蚤 糟 葬 造 贼 赠 责 藻 泽 燥 枣 糟 燥 造 燥 则 藻 糟 贼 葬 造 责 燥 造 赠 责 泽 葬 灶 凿 贼 澡 藻 蚤 则 则 藻 造 葬 贼 蚤 燥 灶 泽 澡 蚤 责 憎 蚤 贼 澡 糟 燥 造 燥 则 藻 糟 贼 葬 造 糟 葬 灶 糟 藻 则 [ 允 ] 援 允 悦 造 蚤 灶 陨 皂 皂 怎 灶 燥 造, 园, 猿 ( 源 ): 愿 源 愿 鄄 愿 缘 源 援 [ 缘 ] 摇 匀 怎 葬 阅, 蕴 蚤 怎 酝 再, 悦 澡 藻 灶 早 在 阅, 藻 贼 葬 造 援 杂 皂 葬 造 造 蚤 灶 贼 藻 则 枣 藻 则 蚤 灶 早 砸 晕 粤 鄄 凿 蚤 则 藻 糟 贼 鄄 藻 凿 贼 葬 则 早 藻 贼 蚤 灶 早 燥 枣 栽 燥 造 造 鄄 造 蚤 噪 藻 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 源 蚤 灶 澡 蚤 遭 蚤 贼 泽 澡 怎 皂 葬 灶 责 则 燥 泽 贼 葬 贼 藻 糟 葬 灶 糟 藻 则 糟 藻 造 造 蚤 灶 增 葬 泽 蚤 燥 灶, 泽 怎 则 增 蚤 增 葬 造, 葬 灶 凿 贼 怎 皂 燥 则 蚤 早 藻 灶 蚤 糟 蚤 贼 赠 [ 允 ] 援 酝 燥 造 陨 皂 皂 怎 灶 燥 造, 园 园 怨, 源 远 ( 缘 ): 愿 苑 远 鄄 愿 愿 源 援 [ 远 ] 摇 阅 葬 责 蚤 贼 燥 阅 匀, 酝 藻 灶 糟 蚤 灶 粤, 郧 憎 葬 噪 郧 再, 藻 贼 葬 造 援 孕 则 燥 皂 燥 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 澡 藻 责 葬 贼 燥 糟 藻 造 鄄 造 怎 造 葬 则 糟 葬 则 糟 蚤 灶 燥 皂 葬 遭 赠 贼 澡 藻 蚤 灶 贼 藻 泽 贼 蚤 灶 葬 造 皂 蚤 糟 则 燥 遭 蚤 燥 贼 葬 葬 灶 凿 栽 蕴 砸 源 [ 允 ] 援 悦 葬 灶 糟 藻 则 悦 藻 造 造, 园, ( 源 ): 缘 园 源 鄄 缘 远 援 [ 苑 ] 摇 栽 葬 噪 葬 扎 葬 憎 葬 再, 运 蚤 灶 蚤 憎 葬 再, 韵 早 葬 憎 葬 耘, 藻 贼 葬 造 援 栽 燥 造 造 鄄 造 蚤 噪 藻 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 源 泽 蚤 早 鄄 灶 葬 造 蚤 灶 早 责 则 燥 皂 燥 贼 藻 泽 贼 澡 藻 皂 蚤 早 则 葬 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 澡 怎 皂 葬 灶 皂 藻 造 葬 灶 燥 皂 葬 糟 藻 造 造 泽 [ 允 ] 援 栽 燥 鄄 澡 燥 噪 怎 允 耘 曾 责 酝 藻 凿, 园 源, 猿 源 ( ): 缘 苑 鄄 远 缘 援 [ 愿 ] 摇 匀 蚤 则 葬 贼 泽 怎 噪 葬 杂, 宰 葬 贼 葬 灶 葬 遭 藻 粤, 杂 葬 噪 怎 则 葬 蚤 再, 藻 贼 葬 造, 栽 澡 藻 杂 园 园 粤 愿 鄄 泽 藻 则 怎 皂 葬 皂 赠 造 燥 蚤 凿 粤 猿 鄄 栽 蕴 砸 源 责 葬 则 葬 糟 则 蚤 灶 藻 糟 葬 泽 糟 葬 凿 藻 藻 泽 贼 葬 遭 造 蚤 泽 澡 藻 泽 葬 责 则 藻 鄄 皂 藻 贼 葬 泽 贼 葬 贼 蚤 糟 责 澡 葬 泽 藻 [ 允 ] 援 晕 葬 贼 悦 藻 造 造 月 蚤 燥 造, 园 园 愿, 园 ( ): 猿 源 怨 鄄 猿 缘 缘 援 ] 摇 酝 糟 悦 葬 枣 枣 则 藻 赠 粤 孕, 酝 藻 怎 泽 藻 蕴, 孕 澡 葬 皂 栽 栽, 藻 贼 葬 造, 砸 晕 粤 蚤 灶 贼 藻 则 枣 藻 则 藻 灶 糟 藻 蚤 灶 葬 凿 怎 造 贼 皂 蚤 糟 藻 [ 允 ] 援 晕 葬 贼 怎 则 藻, 园 园, 源 愿 ( 远 愿 怨 猿 ): 猿 愿 鄄 猿 怨 援 [ 园 ] 粤 噪 蚤 则 葬 杂, 哉 藻 皂 葬 贼 泽 怎 杂, 栽 葬 噪 藻 怎 糟 澡 蚤 韵 援 孕 葬 贼 澡 燥 早 藻 灶 则 藻 糟 燥 早 灶 蚤 贼 蚤 燥 灶 葬 灶 凿 蚤 灶 灶 葬 贼 藻 蚤 皂 皂 怎 灶 蚤 贼 赠 [ 允 ] 援 悦 藻 造 造, 园 园 远, 源 ( 源 ): 苑 愿 猿 鄄 愿 园 援 [ ] 韦 江 红, 莫 碧 文, 黄 剑 伟 援 栽 韵 蕴 蕴 样 受 体 源 在 哮 喘 大 鼠 气 道 平 滑 肌 细 胞 增 殖 凋 亡 中 的 作 用 [ 允 ] 援 中 国 应 用 生 理 学 杂 志, 园, 苑 ( 猿 ): 愿 源 鄄 愿 愿 援 [ ] 再 葬 灶 早 匀, 在 澡 燥 怎 匀, 云 藻 灶 早 孕, 藻 贼 葬 造 援 砸 藻 凿 怎 糟 藻 凿 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 燥 枣 栽 燥 造 造 鄄 造 蚤 噪 藻 则 藻 糟 藻 责 贼 燥 则 源 蚤 灶 澡 蚤 遭 蚤 贼 泽 澡 怎 皂 葬 灶 遭 则 藻 葬 泽 贼 糟 葬 灶 糟 藻 则 糟 藻 造 造 泽 责 则 燥 造 蚤 枣 藻 则 葬 贼 蚤 燥 灶 葬 灶 凿 蚤 灶 鄄 枣 造 葬 皂 皂 葬 贼 燥 则 赠 糟 赠 贼 燥 噪 蚤 灶 藻 泽 泽 藻 糟 则 藻 贼 蚤 燥 灶 [ 允 辕 韵 蕴 ] 援 允 耘 曾 责 悦 造 蚤 灶 悦 葬 灶 糟 藻 则 砸 藻 泽, 园 园, 怨 : 怨 [ 园 源 鄄 园 苑 鄄 ] 援 澡 贼 贼 责 : 辕 辕 憎 憎 憎 援 躁 藻 糟 糟 则 援 糟 燥 皂 辕 糟 燥 灶 贼 藻 灶 贼 辕 怨 辕 辕 怨 援 [ 猿 ] 赵 卉, 何 凤 莲, 方 明, 等 援 高 表 达 的 栽 燥 造 造 样 受 体 在 肺 癌 发 生 发 展 中 的 初 步 探 讨 [ 允 ] 援 实 用 医 学 杂 志, 园 园 怨, 缘 ( 怨 ): 猿 怨 鄄 猿 怨 缘 援 [ 源 ] 何 凤 莲, 张 志 红, 王 道 兵, 等 援 栽 蕴 砸 源 与 栽 蕴 砸 怨 在 非 小 细 胞 肺 癌 组 织 中 的 表 达 及 临 床 意 义 [ 允 ] 援 肿 瘤, 园 园 远, 远 ( ): 园 怨 愿 鄄 园 援 [ 缘 ] 云 怎 匀 再, 蕴 蚤 悦, 再 葬 灶 早 宰, 藻 贼 葬 造 援 云 韵 载 孕 猿 葬 灶 凿 栽 蕴 砸 源 责 则 燥 贼 藻 蚤 灶 藻 曾 责 则 藻 泽 鄄 泽 蚤 燥 灶 葬 则 藻 糟 燥 则 则 藻 造 葬 贼 藻 凿 蚤 灶 灶 燥 灶 鄄 泽 皂 葬 造 造 糟 藻 造 造 造 怎 灶 早 糟 葬 灶 糟 藻 则 : 陨 皂 责 造 蚤 糟 葬 贼 蚤 燥 灶 泽 枣 燥 则 贼 怎 皂 燥 则 责 则 燥 早 则 藻 泽 泽 蚤 燥 灶 葬 灶 凿 藻 泽 糟 葬 责 藻 [ 允 ] 援 粤 糟 贼 葬 匀 蚤 泽 贼 燥 糟 澡 藻 皂, 园 猿, 缘 ( ): 缘 鄄 缘 苑 援 [ 远 ] 刘 思 兰, 杨 建 平, 王 丽 娜, 等 援 有 效 抑 制 小 胶 质 细 胞 上 栽 蕴 砸 源 表 达 的 泽 蚤 砸 晕 粤 筛 选 及 转 染 复 合 物 细 胞 毒 性 的 检 测 [ 允 ] 援 中 国 药 理 学 通 报, 园 园, 远 ( 源 ): 源 缘 苑 鄄 源 远 援 [ 收 稿 日 期 ] 摇 园 源 原 园 缘 原 缘 [ 修 回 日 期 ] 摇 园 源 原 园 原 园 [ 本 文 编 辑 ] 摇 黄 静 怡 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 檿 读 者 作 者 编 者 中 国 肿 瘤 生 物 治 疗 杂 志 转 化 医 学 栏 目 征 稿 启 事 摇 摇 转 化 医 学 ( 贼 则 葬 灶 泽 造 葬 贼 蚤 燥 灶 葬 造 皂 藻 凿 蚤 糟 蚤 灶 藻 ) 是 近 年 国 际 医 学 领 域 出 现 的 新 热 潮, 是 实 验 研 究 与 临 床 研 究 双 向 转 化 ( 遭 藻 灶 糟 澡 贼 燥 遭 藻 凿 泽 蚤 凿 藻 葬 灶 凿 遭 藻 凿 泽 蚤 凿 藻 贼 燥 遭 藻 灶 糟 澡 ) 的 研 究 体 系, 转 化 医 学 为 基 础 研 究 和 临 床 医 疗 之 间 架 起 了 桥 梁, 从 而 把 基 础 医 学 研 究 的 最 新 成 果 快 速 有 效 地 转 化 为 临 床 疾 病 诊 治 的 药 物 技 术 和 手 段, 有 力 地 推 动 医 学 科 学 的 发 展 为 了 顺 应 转 化 医 学 的 发 展 热 潮, 为 我 国 广 大 肿 瘤 防 治 工 作 者 提 供 有 关 转 化 医 学 信 息 传 播 和 学 术 交 流 的 平 台, 促 进 转 化 医 学 在 肿 瘤 学 领 域 的 发 展, 本 刊 特 开 辟 转 化 医 学 新 栏 目, 并 向 广 大 肿 瘤 防 治 工 作 者 征 集 转 化 医 学 相 关 稿 件 本 刊 转 化 医 学 栏 目 文 稿 内 容 包 括 以 下 几 个 方 面 : ( ) 宣 传 转 化 医 学 的 观 念 理 论 研 究 体 系 研 究 模 式 和 方 法 发 展 趋 势 等 ; ( ) 讨 论 我 国 肿 瘤 学 领 域 深 入 开 展 转 化 医 学 研 究 的 策 略 和 措 施 ; ( 猿 ) 介 绍 国 外 肿 瘤 学 领 域 转 化 医 学 发 展 的 新 闻 成 功 案 例 和 发 展 动 向 ; ( 源 ) 我 国 作 者 肿 瘤 学 领 域 转 化 医 学 的 研 究 成 果 和 经 验 体 会 ; ( 缘 ) 与 转 化 医 学 有 关 的 在 肿 瘤 学 领 域 有 发 表 价 值 的 其 他 文 稿 转 化 医 学 文 稿 的 写 作 格 式 要 求, 如 果 是 ( 源 ) 类 中 的 原 创 性 研 究 成 果 文 稿, 格 式 同 本 刊 论 著 ( 基 础 研 究 和 临 床 研 究 ); 如 果 是 ( ) ( ) ( 猿 ) 和 ( 缘 ) 类 的 文 稿, 格 式 类 似 于 本 刊 的 综 述, 篇 幅 在 缘 园 园 园 字 以 内, 附 中 文 摘 要 ( 报 道 式 非 结 构 式 ), 文 内 图 表 用 中 文 表 达, 参 考 文 献 应 精 选 最 主 要 的 园 篇 左 右 文 稿 的 文 字 力 求 简 洁 明 了 通 顺 流 畅 层 次 清 楚 重 点 突 出 如 文 稿 有 新 颖 性, 可 进 入 本 刊 快 速 发 表 通 道, 在 猿 个 月 左 右 发 表 ( 本 刊 编 辑 部 ) 摇 摇

第 期 王 兴 涛 等 猪 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 种 猪 精 液 分 离 株 的 鉴 定 及 进 化 分 析 病 料 毒 株 及 细 胞 试 剂 引 物 设 计 提 取 及 基 因 克 隆 及 测 序

第 期 王 兴 涛 等 猪 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 种 猪 精 液 分 离 株 的 鉴 定 及 进 化 分 析 病 料 毒 株 及 细 胞 试 剂 引 物 设 计 提 取 及 基 因 克 隆 及 测 序 河 南 农 业 科 学 王 兴 涛 罗 俊 滕 蔓 樊 剑 鸣 鄂 巍 禹 斌 刘 力 张 改 平 利 用 技 术 对 河 南 省 某 规 模 化 猪 场 乙 脑 疑 似 病 例 的 种 猪 精 液 进 行 分 析 从 部 分 样 本 中 扩 增 出 与 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 基 因 和 基 因 具 有 高 度 同 源 性 的 预 期 产 物 在 日 龄 乳 鼠 脑 内 接 种 种 猪

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