125I标记单克隆抗体技术
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- 劫 盍
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1 放 射 性 碘 标 记 在 RIA 中, 标 记 抗 原 质 量 的 优 劣, 直 接 影 响 测 定 结 果, 必 须 制 备 比 放 射 性 强 纯 度 高 的 标 记 抗 原, 并 保 持 免 疫 活 性 不 受 丧 失 一 同 位 素 的 选 择 同 位 素 有 稳 定 性 和 放 射 性 两 种 放 射 性 同 位 素 可 利 用 其 衰 变 时 放 出 的 放 射 线 进 行 测 量, 这 种 测 量 较 灵 敏 而 方 便, 故 多 用 放 射 性 同 位 素 标 记 抗 原, 常 用 的 放 射 性 同 位 素 有 3 H 14 C 131 I 和 I 等 在 使 用 上 各 有 其 优 缺 点, 可 根 据 所 进 行 的 放 射 免 疫 分 析 的 类 型 特 点, 标 记 物 制 备 和 供 应 情 况 以 及 实 验 室 设 备 条 件 等 作 14 适 当 的 选 择 ( 表 8-1) 大 多 数 抗 原 分 子 中 都 含 有 C H 等 原 子, 所 以 用 C 或 3 H 标 记 不 改 变 抗 原 的 结 构 14 及 其 免 疫 学 活 性, 且 C 3 H 半 衰 期 长, 所 标 记 的 抗 原 长 时 间 放 置 后 仍 可 使 用, 这 都 是 其 优 点 14 C 或 3 H 标 记 的 不 足 之 处 是 操 作 较 繁 琐, 并 难 以 获 得 高 比 放 射 性 的 标 记 物 ; 3 14 H 及 C 放 出 的 都 是 弱 β 射 线, 需 用 较 昂 贵 的 液 体 闪 烁 计 数 器 方 能 获 得 较 高 效 率 的 测 量, 且 测 定 操 作 也 较 麻 烦 但 某 些 抗 原 用 放 射 性 碘 标 记 容 易 丧 失 免 疫 化 学 或 生 物 学 活 性 者, 则 仍 以 采 用 3 14 H 或 C 标 记 物 为 佳 表 8-1 标 记 抗 原 常 用 的 放 射 性 同 位 素 及 其 性 质 放 射 性 元 素 半 衰 期 射 线 种 类 及 能 量 ( 百 万 电 子 伏 特 ) β γ 14 C 5720 年 H 12.5 年 I 60 天 I 8.05 天 0.608,0.335, ,0.637,0.722 大 多 数 抗 原 分 子 中 是 不 含 碘 的, 引 入 碘 原 子 就 改 变 了 抗 原 的 分 子 结 构, 往 往 容 易 损 伤 抗 原 的 免 疫 化 学 活 性 ; 且 放 射 性 碘 的 半 衰 期 较 短, 标 记 物 放 置 后 因 衰 变 使 放 射 性 降 低, 因 而 需 要 经 常 制 备 标 记 物 或 要 求 能 定 期 提 供 放 射 性 碘 标 记 都 能 适 用, 放 射 性 碘 放 出 γ 射 线, 用 一 般 晶 体 闪 烁 计 数 器 就 能 获 得 较 高 效 率 而 精 确 的 测 量, 测 量 操 作 也 很 简 单 由 于 这 些 突 出 的 优 点, 目 前 在 放 射 免 疫 分 析 中, 使 用 放 射 性 碘 标 记 物 最 多 从 应 用 角 度 来 看, 131 I 和 I 又 各 有 其 优 缺 点, 可 根 据 实 验 的 要 求 仪 器 的 条 件 和 放 射 性 碘 制 剂 的 规 格 等 条 件 合 理 选 用 但 相 对 而 言, I 有 较 多 的 优 点, 一 是 半 衰 期 适 中, 允 许 标 记 化 合 物 的 商 品 化 及 贮 存 应 用 一 段 时 间 ; 二 是 它 只 发 射 28keV 能 量 的 X 射 线 和 35keV 能 量 的 γ 射 线, 而 无 β 粒 子, 因 而 辐 射 自 分 解 少, 标 记 化 合 物 有 足 够 的 稳 定 性 放 射 性 碘 适 用 于 放 射 免 疫 分 析 许 多 对 象 ( 包 括 蛋 白 质 肽 类 固 醇 类 核 酸 类 以 及 环 型 核 苷 酸 衍 生 物 等 ) 的 标 记, 且 操 作 简 单, 一 般 实 验 室 都 不 难 做 到
2 二 蛋 白 质 与 多 肽 激 素 的 放 射 性 碘 标 记 要 制 备 高 比 度 高 纯 度 与 免 疫 化 学 活 性 好 的 标 记 物, 首 先 要 有 高 纯 度 良 好 免 疫 活 性 的 抗 原 用 作 放 射 标 记 加 网 免 疫 分 析 的 特 异 性, 所 以 若 用 纯 度 不 高 的 抗 原 作 标 记, 则 标 记 后 必 须 采 取 适 当 的 步 骤 除 去 杂 质, 以 获 得 高 纯 度 的 标 记 物 标 记 对 象 的 纯 化 应 尽 量 采 用 温 和 的 方 法, 否 则 在 纯 化 操 作 中 已 受 潜 在 性 损 伤 的 蛋 白 质 ( 这 时 表 面 上 活 性 可 能 还 是 良 好 的 ), 再 经 标 记 反 应 时 所 受 的 损 伤, 活 性 就 会 显 著 降 低, 影 响 以 后 的 放 射 分 析 结 果 有 了 好 的 纯 抗 原, 还 要 采 用 适 当 方 法 加 以 标 记, 尽 量 获 取 高 比 放 射 性 而 又 能 保 持 良 好 的 特 异 免 疫 化 学 活 性 的 标 记 物 这 些 都 是 放 射 免 疫 分 析 能 取 得 高 特 异 性 和 高 灵 敏 度 的 关 键 问 题 多 肽 激 素 与 蛋 白 质 多 用 碘 标 记, 最 常 用 的 是 I 碘 化 反 应 的 基 本 过 程 如 下 : 通 过 氧 化 剂 的 作 用, 使 碘 化 物 ( I - ) 氧 化 成 的 碘 分 子 ( I2), 再 与 多 肽 激 素 蛋 白 质 分 子 中 的 酪 氨 酸 残 基 发 生 碘 化 作 用 所 以 不 管 采 用 哪 一 种 放 射 性 碘 标 记 法, 标 记 的 化 合 物 内 部 必 须 有 碘 原 子 可 结 合 的 基 团, 即 结 构 上 要 含 有 酪 胺 基 或 组 织 胺 残 基 凡 蛋 白 质 肽 类 等 抗 原, 在 结 构 上 含 有 上 述 基 团 的 可 直 接 用 放 射 性 碘 进 行 标 记 如 不 含 上 述 基 团 的, 放 射 性 碘 无 法 标 记, 必 须 在 这 些 化 合 物 的 结 构 上 连 接 上 述 基 团 后 才 能 进 行 碘 标 记 因 此 影 响 蛋 白 质 多 肽 碘 化 效 率 的 因 素, 主 要 决 定 于 蛋 白 质 多 肽 分 子 中 酪 氨 酸 残 基 的 数 量 及 它 们 在 分 子 结 构 中 暴 露 的 程 度 ; 此 外, 碘 化 物 的 用 量 反 应 条 件 (ph 温 度 反 应 时 间 等 ) 及 所 用 氧 化 剂 的 性 质 等 也 有 影 响 常 用 的 标 记 方 法 有 : ( 一 ) 氯 胺 T 法 氯 胺 T 法 标 记 效 率 高 重 复 性 好 试 剂 便 宜 易 得, 是 目 前 使 用 最 多 的 碘 标 记 方 法 1. 原 理 氯 氨 T(Chloramine--T) 是 一 种 温 和 的 氧 化 剂, 在 水 溶 液 中 产 生 次 氯 酸, 可 使 碘 阴 离 子 氧 化 成 碘 分 子 这 活 性 碘 可 取 代 肽 链 上 酪 氨 酸 苯 环 上 羟 基 位 的 一 个 或 两 个 氢, 使 之 成 为 含 有 放 射 性 碘 化 酪 氨 酸 的 多 肽 链 2. 方 法 以 I AVP 的 制 备 为 例
3 (1) 碘 化 反 应 :AVP5μg+0.5mol/l PB50μl(pH7.5)+ 1800μCi, 混 合 后, 加 入 新 配 置 的 Ch t 30μ g/15μl(0.05mol/l PB, ph7.5) 迅 速 振 荡 混 匀, 室 温 下 反 应 40s (2) 终 止 碘 化 反 应 : 加 入 还 原 剂 偏 重 亚 硫 酸 钠 40μg/20μl(0.05mol/l PB, ph7.5), 以 终 止 碘 化 反 应 (3)Bio Gel P2 层 析 纯 化 : 将 碘 化 反 应 混 合 液 注 入 Bio Gel P2 柱, 用 0.1n HAC 溶 液 洗 脱, 分 部 收 集, 每 2min 收 集 一 管, 共 收 集 60 管 (4) 放 射 性 测 量 : 测 定 各 收 集 管 的 放 射 性, 出 现 两 个 峰, 第 一 峰 为 I AVP, 第 二 峰 为 游 离 碘 盐 峰 第 一 个 峰 中 计 算 最 高 的 几 管, 留 下 备 用 为 了 解 标 记 抗 原 的 质 量, 每 次 碘 标 记 后 应 计 算 出 碘 的 利 用 率, 标 记 上 多 少 放 射 性 碘, 以 及 每 微 克 抗 原 结 合 上 多 少 放 射 性 碘 (5) 标 记 抗 原 的 贮 存 : 经 纯 化 与 检 查 后 的 标 记 物 加 入 1/8 体 积 的 异 丙 醇, 分 成 若 干 小 份, 置 于 铅 罐 中, 在 -20 以 下 的 冰 箱 中 贮 存 备 用, 应 避 免 反 复 冻 融 标 记 抗 原 在 贮 存 中 是 不 稳 定 的, 这 是 因 为 : 一 是 脱 碘, 标 记 的 碘 从 原 来 位 置 上 脱 落, 变 成 游 离 碘 ; 二 是 蛋 白 损 伤 变 性, 成 为 聚 合 大 分 子 或 断 键 成 小 分 子 碎 片 由 于 上 述 原 因, 使 B/F 明 显 降 低, 标 准 曲 线 斜 率 变 小, 以 致 不 能 使 用, 故 需 分 离 纯 化, 其 方 法 是 用 S ephadex G100 长 柱 (40~80cm ) 过 柱, 洗 脱 后 出 现 3 个 峰 第 1 个 峰 分 子 量 大, 是 蛋 白 变 性 的 聚 合 的 大 分 子, 尚 保 留 部 分 抗 原 决 定 簇, 免 疫 活 性 弱 ; 第 2 个 峰 是 纯 抗 原 的 蛋 白 峰, 免 疫 活 性 好 ; 第 3 个 峰 是 游 离 I 或 小 分 子 碎 片, 不 具 备 免 疫 活 性 收 集 到 的 第 2 个 纯 抗 原 蛋 白 峰, 免 疫 活 性 好 ; 第 3 个 峰 是 游 离 I 或 小 分 子 碎 片, 不 具 备 免 疫 活 性 收 集 到 的 第 2 个 纯 抗 原 蛋 白 峰, 其 性 能 类 似 于 新 鲜 标 记 的 抗 原 分 离 纯 化 的 方 法 解 决 了 标 记 抗 原 的 贮 存 长 期 使 用 问 题, 特 别 对 来 之 不 易 的 抗 原 更 显 得 重 要 2. 注 意 事 项 131 (1) 放 射 性 碘 源 的 选 用 : 无 载 体 的 I 或 I 均 可 用 于 碘 化 标 记, 但 应 尽 量 选 用 新 鲜 的 比 放 射 强 度 高 的 含 还 原 剂 量 少 的 放 射 性 碘 源 碘 源 的 比 放 射 强 度 最 好 50~100mCi/ml, 至 少 也 要 >30mCi/ml, 否 则 加 入 碘 源 的 容 量 要 增 加, 随 着 带 入 碘 源 中 含 有 的 还 原 剂 ( 为 放 射 性 碘 源 运 输 保 存 所 需 加 入 ) 量 也 增 加, 这 将 会 显 著 降 低 碘 利 用 率 及 标 记 蛋 白 比 放 射 强 度 放 置 较 久 和 放 射 性 碘 源, 一 方 面 因 衰 变 致 比 放 射 强 度 降 低, 131 另 一 方 面 因 水 的 辐 射 化 学 产 物 增 多 ( 主 要 是 I 源 ), 都 会 降 低 标 记 时 的 碘 利 用 率 放 射 性 碘 源 含 还 原 剂 ( 如 Na2S2O5 等 ) 量 多 时, 会 抵 消 氯 胺 T 的 作 用, 降 低 碘 利 用 率, 甚 至 导 致 标 记 完 全 失 败 放 射 性 碘 源 要 用 无 载 体 的, 标 记 所 用 全 部 用 具 和 试 剂 必 须 不 含 碘 ; 只 要 有 极 少 量 的 碘 的 污 染, 非 放 射 性 碘 就 会 稀 释 放 射 性 碘, 使 放 射 性 碘 利 用 率 显 著 降 低 为 了 便 于 放 射 性 防 护 和 除 污 染, 以 及 减 少 射 线 对 蛋 白 质 分 子 的 损 伤, 标 记 投 入 的 放 射 碘 量 不 宜 过 大, 一 般 以 <5mCi 为 宜 (2) 放 射 性 碘 与 多 肽 蛋 白 质 用 量 的 比 例 : 这 比 例 对 标 记 结 果 的 影 响 很 大 如 上 述 原 因, 一 般 标 记 时 放 射 性 投 入 量 不 宜 过 多, 示 踪 实 验 室 中 常 规 每 次 只 用 1~2mCi, 因 而 放 射 性 碘 与 多 肽 蛋 白 质 用 量 的 比 值 主 要 靠 标 记 时 投 入 的 多 肽 蛋 白 质 用 量 来 控 制 当 投 入 的 放 射 碘 量 一 定 时, 多 肽 蛋 白 质 用 量 多 ( 即 I/ 多
4 肽 蛋 白 质 比 值 低 ), 能 获 得 高 碘 利 用 率, 但 所 得 标 记 蛋 白 比 放 射 强 度 低 ; 相 反 多 肽 蛋 白 质 用 量 少 ( 即 I/ 多 肽 蛋 白 质 比 值 高 ), 则 碘 利 用 率 降 低, 但 所 得 标 记 多 肽 蛋 白 比 放 射 性 随 此 比 值 变 化 都 有 较 大 的 变 动 ; 而 当 此 比 值 <1 后, 则 碘 利 用 率 再 下 降 的 幅 率 较 小, 标 记 多 肽 蛋 白 比 放 射 性 也 不 会 再 增 加 多 少 (3) 氯 胺 T 与 偏 重 亚 硫 酸 钠 的 用 量 及 碘 化 反 应 时 间 : 氧 化 碘 化 标 记 法 中, 会 导 致 失 活 的 最 主 要 原 因 是 氧 化 还 原 氯 胺 T 是 氧 化 剂, 早 期 用 氯 胺 T 法 作 碘 化 标 记 时 氯 胺 T 用 量 都 比 较 大, 或 碘 化 反 应 时 间 较 长, 结 果 导 致 蛋 白 质 结 构 和 活 性 的 严 重 损 伤 氯 胺 T 用 量 大, 或 长 时 间 进 行 碘 化 反 应, 结 果 并 不 能 使 碘 利 用 率 和 标 记 多 肽 蛋 白 质 比 放 射 强 度 提 高 多 少, 反 而 使 标 记 多 肽 蛋 白 活 性 下 降 当 用 不 含 还 原 剂 或 还 原 剂 很 少 的 放 射 性 碘 源 时, 试 以 各 种 蛋 白 质 ( 包 括 白 蛋 白 球 蛋 白 ACTH 胰 岛 素 等 ) 作 微 量 标 记, 当 氯 胺 T 用 量 为 20μg/0.1ml 反 应 液 0~20 C 反 应 20s, 碘 利 用 率 都 已 接 近 或 达 到 最 大 峰, 再 加 大 氯 胺 T 用 量 和 延 长 反 应 时 间 是 没 有 必 要 的 随 放 射 性 碘 源 中 还 原 剂 增 多, 氯 胺 T 用 量 也 应 增 加, 以 达 到 预 期 的 碘 利 用 率, 但 决 不 应 盲 目 加 大 氯 胺 T 用 量 和 延 长 碘 化 反 应 时 间 ( 通 常 反 应 时 间 不 要 超 过 1min), 否 则 会 导 致 标 记 多 肽 蛋 白 质 严 重 失 活, 不 能 用 于 实 验 当 然, 减 少 氯 胺 T 用 量 要 在 了 解 放 射 性 碘 源 还 原 剂 含 量 的 基 础 上, 否 则 碘 源 中 还 原 剂 量 较 多, 双 盲 目 减 少 氯 胺 T 用 量, 就 会 使 标 记 失 败 一 般 用 I 标 记 时, 氯 胺 T 用 量 要 适 当 加 大 加 入 氯 胺 T 后 必 须 迅 速 混 匀, 以 防 标 记 不 均 匀 氯 胺 T 与 偏 重 亚 硫 酸 钠 溶 液 要 新 配 制 的 氯 胺 T 用 量 减 少 了,Na2S2O5 用 量 也 就 可 以 随 之 减 少 为 保 证 按 时 终 止 碘 化 反 应, 实 验 时 加 入 Na2S2 O 5 一 般 都 是 过 量 的 氯 胺 T 用 量 大 时, 加 入 Na 2S 2O 5 的 剩 余 量 也 就 会 随 之 增 加, 这 就 可 能 加 重 某 些 对 还 原 剂 敏 感 的 蛋 白 质 或 多 肽 生 物 活 性 的 损 伤 为 此,Na2S2O5 用 量 也 不 应 过 多 只 要 药 品 没 有 变 质 试 剂 是 新 配 的, 以 重 量 计 算 Na2S2O5 加 入 量 与 氯 胺 T 相 同 就 足 以 保 证 终 止 碘 化 反 应 ( 按 反 应 克 分 子 浓 度 计 算,Na2 S2O5/ 氯 胺 T 重 量 比 约 0.4), 不 要 盲 目 加 大 用 量, 并 应 迅 速 将 标 记 多 肽 蛋 白 质 从 反 应 液 中 分 离 出 来, 以 尽 量 减 少 多 肽 蛋 白 质 活 性 的 损 伤 某 些 蛋 白 质 或 多 肽 对 氯 胺 T 较 敏 感, 还 可 进 一 步 减 少 氯 胺 T 用 量 缩 短 碘 化 反 应 时 间 降 低 反 应 温 度, 以 保 护 蛋 白 质 的 活 性 这 对 一 些 较 容 易 丧 失 活 性 蛋 白 质 或 多 肽 的 碘 标 记 十 分 重 要 (4) 碘 化 反 应 体 积 : 系 指 加 入 Na 2S 2O 5 终 止 反 应 前 液 体 的 总 量 碘 化 反 应 体 积 愈 小, 局 部 反 应 物 浓 度 愈 高, 所 得 碘 利 用 率 和 标 记 多 肽 蛋 白 比 放 射 强 度 就 愈 高 所 以, 标 记 应 采 用 比 放 射 标 记 效 果 当 反 应 液 量 少 (<0.2~0.3ml) 时, 反 应 体 积 对 碘 利 用 率 和 标 记 多 肽 蛋 白 质 比 放 射 强 度 的 高 低 影 响 较 大 ; 当 反 应 液 量 大 (>0.5~1.0ml) 时 则 影 响 较 小 微 量 氯 胺 T 法 放 射 碘 标 记 时, 一 般 多 控 制 碘 化 反 应 体 积 <100μl (5) 碘 化 反 应 温 度 : 温 度 升 高, 碘 化 反 应 速 度 加 快, 碘 利 用 率 有 所 增 加 但 总 的 来 看, 反 应 温 度 的 影 响 不 很 大, 一 般 从 0 到 20 碘 利 用 率 相 差 不 过 百 分 之 几, 故 一 般 在 室 温 下 进 行 标 记 操 作 就 可 能 获 得 重 复 性 好 的 结 果 有 些 蛋 白 质 或 肽 类 极 易 丧 失 活 性, 则 可 在 0 进 行 碘 化 反 应 (6) 碘 化 反 应 的 ph 值 : 受 氧 化 剂 氧 化 生 成 的 活 性 碘, 对 多 肽 链 的 酪 氨 酸 基 苯 环 羟 基 邻 位 的 碘 化 作 用, 最 适 ph 是 7.3~7.8 之 间 当 ph 变 化 时, 碘 化 位 置 也 会 发 生 变 化, 例 如 ph 值 较 高 时, 组 氧 酸 的 咪 唑 环 也 可 被 碘 化 ; 当 ph4~5 时, 活 性 碘 能 迅 速 氧 化 色 氨 酸 基 生 成 羟 基 吲 哚, 导 致 肽 链 断 裂 这 些 都 会 影 响 蛋 白
5 质 或 多 肽 的 放 射 性 碘 化 反 应, 或 引 起 降 解 或 失 活 因 此 作 放 射 性 碘 化 标 记 时, 除 放 射 性 碘 源 外, 所 有 的 试 剂 都 应 用 适 当 的 缓 冲 液 配 制, 保 证 碘 化 反 应 在 最 佳 ph 条 件 下 进 行 (7) 微 量 蛋 白 质 或 多 肽 的 吸 附 损 失 : 界 面 的 吸 附 损 失, 在 使 用 大 量 蛋 白 质 或 多 肽 类 时 是 可 以 忽 略 的, 但 作 微 量 法 标 记 时 投 入 的 蛋 白 质 或 多 肽 类 只 在 微 克 甚 至 毫 克 甚 至 毫 微 克 水 平, 界 面 吸 附 导 致 的 损 失 就 不 能 131 忽 略 例 如 制 备 I ACTH 时, 所 用 ACTH 浓 度 低 到 50Pg/ml 时, 因 表 面 吸 附 可 损 失 10%~30%, 甚 至 高 达 75% 改 变 ph 加 入 非 特 异 性 载 体 蛋 白 或 使 用 聚 苯 乙 烯 聚 乙 烯 容 器 时, 能 减 少 吸 附, 但 不 能 完 全 消 除 一 般 残 留 在 反 应 管 和 滴 管 上 的 放 射 性 为 投 入 总 放 射 性 的 2%~8% 残 留 在 层 析 柱 上 折 占 5%~10 % 残 留 量 随 标 记 蛋 白 比 放 射 性 强 度 而 直 线 增 减, 残 留 者 几 乎 全 部 都 是 标 记 蛋 白 由 此 可 见, 微 量 蛋 白 质 或 多 肽 受 吸 附 而 损 失 的 量 是 不 容 忽 略 的 由 于 微 量 蛋 白 质 多 肽 会 被 显 著 吸 附 而 丢 失, 所 以 标 记 时 投 入 蛋 白 质 多 肽 量 过 微 ( 如 <2μg) 也 是 不 适 宜 的, 否 则 标 记 蛋 白 质 多 肽 的 收 回 率 会 太 低, 并 在 计 算 上 会 造 成 较 大 的 误 差 (8) 不 同 蛋 白 质 多 肽 碘 化 标 记 的 差 别 : 由 于 不 同 的 蛋 白 质 和 多 肽 分 子 中 含 有 的 酪 氨 酸 数 目 不 同, 而 且 其 空 间 结 构 也 不 相 同, 分 子 中 的 酪 按 酸 残 基 有 的 容 易 发 生 碘 化 反 应, 有 的 就 不 容 易 碘 化, 因 此 同 样 条 件 下 进 行 碘 化 标 记, 不 同 蛋 白 质 或 多 肽 对 碘 的 利 用 率 是 不 相 同 的 不 同 蛋 白 质 经 碘 化 标 记 后 生 物 活 性 受 损 的 情 况 也 各 不 相 同 例 如 ACTH 促 性 腺 激 素 释 放 激 素 (GRH) 促 黄 体 激 素 释 放 激 素 (LRH) 等 多 肽, 碘 化 标 记 后 容 易 丧 失 激 素 活 性 或 与 受 体 结 合 的 活 性 ; 而 AFP 及 人 绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 (HCG) 等 的 碘 化 标 记, 则 较 容 易 保 存 良 好 的 免 疫 化 学 活 性 尽 管 不 同 多 肽 蛋 白 度 的 碘 化 标 记 结 果 有 所 差 别, 但 上 述 讨 论 的 因 素 对 不 同 多 肽 蛋 白 质 碘 化 标 记 的 影 响 有 共 同 的 规 律 掌 握 了 这 些 因 素, 就 容 易 成 功 地 获 得 合 格 的 标 记 物 不 同 多 肽 蛋 白 质 的 分 子 量 大 小 理 化 性 质 各 不 相 同, 放 射 碘 化 标 记 反 应 后, 可 根 据 具 体 情 况 采 取 不 同 的 方 法 将 标 记 蛋 白 质 ( 或 多 肽 ) 与 未 反 应 的 游 离 放 射 性 碘 及 受 损 伤 的 标 记 物 分 开, 常 用 的 方 法 有 凝 胶 过 滤 离 子 交 换 层 析 吸 附 层 析 各 种 电 泳 法 等 ( 二 ) 乳 过 氧 化 物 酶 法 (LPO LPO) 本 法 反 应 温 和, 对 抗 原 抗 体 免 疫 活 性 影 响 小, 已 被 广 泛 应 用 缺 点 是 标 记 率 较 低, 一 般 为 20~40% 1. 原 理 此 法 是 利 用 乳 过 氧 化 物 酶 (Lactoperoxidase) 有 促 进 微 量 过 氧 化 氢 对 I - 的 氧 化 作 用, 生 成 1 25 I +, 并 标 记 在 多 肽 蛋 白 质 酪 氨 酸 分 子 上 2. 方 法 以 标 记 蛋 白 质 抗 原 为 例 (1) 反 应 液 组 成 : 蛋 白 质 2~5μg 溶 于 磷 酸 缓 冲 液 10~25μl 中, 加 入 Na i 1m Ci(10μl) 乳 过 氧 化 物 酶 溶 液 25ng(10μl) H 2O 2200ng(10μl);
6 (2) 在 室 温 保 温 7min; (3) 加 入 H2O2200ng(10μl); (4) 过 7min 再 加 入 H2O2(3μl); (5) 保 温 7min 后, 加 入 0.5ml 10mmol/L 巯 基 乙 醇 以 停 止 反 应 ; (6)10min 后 加 入 NaI 载 体 溶 液 1ml ; (7) 按 常 规 方 法 分 离 纯 化 3. 注 意 事 项 (1)LPO 质 量 好 坏, 可 直 接 影 响 标 记 率,LPO 应 在 使 用 前 新 鲜 配 制, 以 防 酶 活 性 降 低 (2)LPO 用 量 应 小 于 总 蛋 白 质 用 量 的 1%, 以 减 少 酶 自 身 碘 化 而 带 入 的 放 化 杂 质 (3) 碘 化 反 应 速 率 分 析 表 明, 酶 的 催 化 速 度 很 快 (4) 碘 化 反 应 在 ph4.0~8.5 较 宽 范 围 内 均 可 进 行, 最 适 ph 值 应 依 据 蛋 白 质 本 身 性 质 而 定 (5)H 2O 2 应 保 持 低 浓 度, 如 高 于 0.1mmol/L, 对 酶 的 活 性 将 有 抑 制 作 用 ( 三 )Iodogen 碘 化 法 此 法 具 有 标 记 率 高 反 应 体 积 小 (3ml 水 平 ) 可 用 低 浓 度 的 I 原 料 对 多 肽 激 素 和 蛋 白 质 的 免 疫 活 性 损 失 小 稳 定 等 优 点, 系 常 规 的 碘 化 方 法 之 一 1. 原 理 用 Iodogen 为 氧 化 剂, 对 蛋 白 质 和 多 肽 抗 原 进 行 碘 化 标 记, 把 I 直 接 引 进 分 子 中 的 酪 氨 酸 残 基 上 标 记 过 程 中 被 标 记 样 品 不 与 Iodogen 混 合, 标 记 后 取 出 样 品 即 停 止 反 应, 不 使 用 任 何 还 原 剂 2. 方 法 (1) 标 记 之 前, 先 把 Iodogen 溶 于 有 机 溶 剂, 涂 于 管 底, 并 使 之 干 燥 (2) 标 记 时, 将 蛋 白 质 溶 液 10~20μg/10μl(0.5mol/L,pH7.5PB) 置 于 反 应 管 中, 反 应 管 置 于 冰 浴 中 碘 化 时, I 与 蛋 白 质 克 分 子 之 比 例 为 1~1.2 反 应 时 间 在 温 和 的 连 续 的 搅 拌 下 可 达 10min, 从 反 应 管 中 转 移 出 反 应 混 合 液, 使 其 反 应 停 止 反 应 液 转 移 到 含 有 200μl0.01mol/L ph7.2pb 和 0.15mol/L NaCl 溶 液 中, 层 析 分 离 前 再 放 置 5min, 使 其 未 标 记 的 碘 离 子 还 原 成 分 子 碘, 以 避 免 在 带 有 缓 冲 液 的 柱 中 使 白 蛋 白 碘 化
7 3. 注 意 事 项 (1) 涂 有 Iodogen 的 反 应 管, 有 氮 气 中 密 封, 并 贮 存 在 -20 条 件 下, 至 少 可 用 3 个 月 打 开 管, 使 用 时 间 很 短 (2) 碘 化 反 应 时 间,7min 时 标 记 率 达 最 高,10min 时 略 有 减 少 PH6.0~8.5 时, 标 记 率 最 高 (3)Iodogen 与 蛋 白 质 的 比 率 是 标 记 率 的 函 数 最 大 的 标 记 率 是 1 克 分 子 的 Iodogen 与 8 克 分 子 或 再 多 量 之 比 ( 四 ) 酰 化 试 剂 (Bolton 和 Hunter 试 剂 ) 法 1. 原 理 这 个 方 法 用 酰 化 剂 3--(4- 羟 苯 基 ) 丙 酸 N 琥 珀 酰 胺 酯 (Bolton Hunter 试 剂 ) 做 连 接 试 剂, 将 I 标 记 在 羟 苯 基 的 2,5 位 置 上, 再 将 琥 珀 酰 胺 酯 水 解, 通 过 一 个 酰 氨 键 将 3--(4 羟 基 5 I 苯 基 ) 接 在 蛋 白 或 多 肽 的 末 端 氨 基 上 2. 方 法 I Bolton Hunter 试 剂 可 用 氯 胺 T 法 自 行 制 备, 出 已 有 该 试 剂 的 苯 溶 液 作 为 商 品 出 售 使 用 时 取 一 定 量 的 标 记 酯 (μmol 蛋 白 用 3~5μmol 标 记 酯 ), 用 氮 气 吹 除 苯, 投 入 欲 标 记 蛋 白 5~10μg 及 缓 冲 液 10~50μl,pH8.0~8.5 为 宜, 在 冰 浴 中 反 应 15~30min 后, 加 入 多 量 氨 基 酸 ( 如 甘 氨 酸 ), 使 过 量 标 记 酯 消 耗 掉 以 终 止 反 应 此 法 避 免 了 蛋 白 质 与 氧 化 剂 的 接 触, 又 避 免 了 与 放 射 性 碘 原 子 的 直 接 接 触, 可 防 止 碘 源 中 有 害 物 质 对 蛋 白 质 的 损 伤, 适 用 于 标 记 缺 乏 酪 氨 酸 的 蛋 白 质 或 酪 氨 酸 在 活 性 中 心, 引 入 碘 原 子 后 会 引 起 蛋 白 质 的 失 活 其 缺 点 是 标 记 技 术 比 较 复 杂, 需 要 接 触 较 多 的 放 射 性, 经 二 步 反 应, 碘 标 记 率 比 较 低 一 般 认 为 此 法 不 宜 标 记 短 肽, 而 适 于 分 子 量 大 于 1 万 的 蛋 白 质 三 放 射 性 标 记 化 合 物 的 纯 化 与 鉴 定 ( 一 ) 纯 化 标 记 化 合 物 的 常 用 方 法 不 论 使 用 何 种 制 备 方 法, 要 获 得 合 格 的 标 记 化 合 物, 都 必 须 将 反 应 物 经 过 仔 细 的 分 离 纯 化 另 外, 一 些 标 记 化 合 物, 经 过 一 定 时 间 的 存 放 后, 往 往 会 出 现 不 纯 物, 而 需 再 纯 化 如 碘 标 记 生 长 激 素 ( --HG H), 在 刚 标 记 的 第 2 天, 从 Sephadex G-100 过 滤 谱 上 可 见, 几 乎 所 有 的 碘 化 HGH 都 集 中 在 峰 II; 保 存 1 个 月 后, 峰 II 组 份 减 少, 峰 I 和 峰 III 成 分 明 显 增 加, 峰 I 是 集 聚 的 标 记 生 长 激 素, 而 峰 III 是 不 具 有 免 疫 活 性 的 放 射 性 化 学 杂 质 ( 图 8--3)
8 图 8-3 I HGH 的 Sephadex G-100 过 滤 谱 实 线 : 新 鲜 制 备 的 I HGH 虚 线 : 保 存 1 个 月 的 I HGH 标 记 化 合 物 的 纯 化 方 法, 除 制 备 比 活 度 低 而 化 学 量 又 较 多 的 标 记 物 可 用 重 结 晶 蒸 馏 萃 取 等 常 规 方 法 外, 一 般 需 用 微 量 分 离 技 术, 较 方 便 的 是 层 析 法 离 子 交 换 法 凝 胶 过 滤 及 高 效 液 相 层 析 法 等 现 以 碘 标 记 蛋 白 为 例, 说 明 以 上 各 种 方 法 的 适 用 情 况 1. 凝 胶 过 滤 法 常 用 的 是 Sephadex G 系 列, 也 有 Biogel P 系 列 分 离 标 记 蛋 白 与 无 机 碘 时, 通 常 用 Sephadex G 25 或 G 50, 然 后 用 G 100 进 一 步 纯 化 2. 离 子 交 换 法 一 般 是 制 成 离 子 交 换 层 析 柱, 用 于 分 离 纯 化 短 肽 标 记 物 3. 透 析 法 能 将 标 记 蛋 白 与 小 分 子 化 合 物 很 好 地 分 离 4. 电 泳 法 可 用 来 分 离 单 碘 化 多 碘 化 及 已 受 损 伤 的 蛋 白 质 5. 亲 和 层 析 法 利 用 蛋 白 质 与 其 特 异 抗 体 或 受 体 的 结 合 来 分 离 纯 化 标 记 蛋 白 质 此 法 特 异 性 强, 保 持 生 物 活 性 好, 但 操 作 较 复 杂 6. 高 效 液 相 层 析 法 此 法 最 大 优 点 是 分 离 效 果 好 快 速, 但 需 特 殊 设 备 7. 伴 刀 豆 球 蛋 白 A(ConA) 吸 附 法 ConA 是 一 种 植 物 凝 集 素, 对 糖 蛋 白 有 良 好 吸 附 能 力, 因 此 适 于 分 离 标 记 糖 蛋 白 吸 附 的 标 记 糖 蛋 白 可 用 含 0.2mol/L 甲 基 α- 吡 喃 葡 萄 糖 苷 的 PBS 洗 脱 ( 二 ) 标 记 化 合 物 的 主 要 质 量 指 标
9 作 为 示 踪 剂 及 分 析 试 剂 的 标 记 化 合 物, 应 具 有 比 一 般 非 标 记 化 合 物 更 高 的 质 量 要 求 标 记 化 合 物 的 质 量 指 标 包 括 : 放 射 性 核 纯 度 放 射 化 学 纯 度 放 射 性 比 活 度 生 物 活 性 和 免 疫 活 性 以 及 标 记 位 置 和 定 量 分 布 情 况 等 1. 放 射 性 核 纯 度 及 其 检 查 方 法 (1) 放 射 性 核 纯 芳 可 用 下 式 表 示 : 放 射 性 核 纯 度 (%)= 所 需 放 射 性 核 素 的 活 度 / 样 品 的 总 放 射 性 活 度 100 (2) 放 射 性 核 纯 度 的 检 查 方 法 : 每 一 种 核 素 都 有 它 的 特 征, 即 物 理 半 衰 期 及 射 线 能 量, 故 可 通 过 半 衰 期 及 射 线 能 量 的 测 定 来 鉴 别 所 需 放 射 性 核 的 纯 度 1 测 定 半 衰 期 法 : 如 短 半 衰 期 放 射 性 核 素, 一 般 可 采 用 时 间 跟 踪 法, 每 隔 一 定 时 间 测 量 放 射 性 一 次, 共 测 3~5 个 半 衰 期, 以 每 次 测 得 的 放 射 性 计 数 为 纵 座 标, 时 间 为 横 座 标, 在 半 对 数 纸 上 作 图, 并 通 过 分 析, 可 求 出 该 放 射 性 核 素 的 纯 度 2 测 定 射 线 能 量 法 : 利 用 每 一 放 射 性 核 素 的 特 征 射 线 谱 来 检 查 放 射 性 核 纯 度 γ 发 射 体 可 用 γ 能 谱 仪, 如 检 测 57 Co 和 58 Co 的 核 纯 度 : 纯 β- 发 射 体 可 用 液 闪 仪, 调 节 道 宽 及 淬 火 校 正 后, 对 如 3 H 14 C 32 P 的 核 纯 度 进 行 测 量 ; 而 β γ 混 杂 垓 素, 则 用 吸 收 法 测 量, 如 99mr Tc 中 母 体 杂 质 99m Mo 的 含 量 测 量, 是 通 过 适 当 厚 度 的 铅 屏 蔽, 将 99m Tc 发 射 的 能 量 为 141ke V 的 γ 射 线 减 弱 后, 测 定 99 Mo 发 射 的 能 量 为 739Kev 的 γ 射 线 2. 放 射 化 学 纯 度 及 放 化 纯 度 鉴 定 (1) 放 射 化 学 纯 度 : 放 射 性 核 素 标 记 化 合 物 都 是 以 一 定 的 化 学 形 态 存 在 的, 所 以 : 放 射 化 学 纯 度 (%) 特 定 化 学 形 态 的 放 射 性 活 度 / 样 品 总 放 射 性 活 度 100 放 射 化 学 纯 度 受 制 备 方 法 及 原 料 的 化 学 纯 度 产 物 存 放 条 件 等 影 响, 一 般 放 化 纯 度 控 制 在 95% 以 上 (2) 放 射 化 学 纯 度 的 测 定 方 法 : 原 则 是 高 效 的 化 学 分 离 与 灵 敏 的 放 射 性 测 量 相 结 合 常 用 下 列 方 法 : 1 放 射 层 析 法, 又 称 放 射 色 谱 法 : 本 法 是 利 用 色 谱 技 术 使 混 合 物 中 各 组 份 分 离, 然 后 测 定 各 组 份 的 放 射 性 活 度 它 具 有 选 择 性 高 分 离 效 果 好 操 作 简 便 等 优 点, 在 放 化 纯 度 鉴 定 中 是 一 种 重 要 的 分 析 方 法 最 常 用 的 是 放 射 性 纸 层 析 法 和 放 射 性 薄 层 层 析 法 2 放 射 性 高 效 液 相 层 析 法 : 它 对 分 离 纯 化 标 记 化 合 物 及 鉴 定 标 记 化 合 物 的 放 化 纯 度 都 有 很 大 潜 力, 具 有 分 析 速 度 快 分 离 效 率 高 适 用 范 围 广 等 特 点 ( 几 乎 80% 的 有 机 化 合 物 均 可 应 用 ) 关 键 是 要 选 择 合 适 的 固 定 相 和 流 动 相, 使 产 品 与 杂 质 分 离 在 流 动 相 中, 被 分 析 物 各 组 份 的 浓 度 变 化 可 用 紫 外 或 荧 光 检 测 器
10 检 测, 而 其 放 射 性 活 度, 可 同 时 由 放 射 性 探 测 仪 测 定 放 射 性 活 度 测 定 最 简 单 的 一 种 办 法, 是 将 洗 脱 液 分 部 收 集, 然 后 在 γ 仪 或 液 闪 仪 上 进 行 测 量 ; 另 一 种 较 理 想 的 是 连 续 测 量, 在 洗 脱 液 流 通 池 外 包 围 一 个 固 体 闪 烁 探 头, 进 行 γ 计 数 或 在 流 通 池 前 加 一 个 三 通 混 合 室, 用 另 一 个 泵 混 入 闪 烁 液, 测 定 软 β 射 线 可 以 与 紫 外 控 测 器 的 扫 描 图, 同 步 描 绘 出 放 射 性 的 分 布 图 3 放 射 性 核 素 反 稀 释 法 : 取 一 定 量 (W1) 已 测 定 比 活 度 (SO) 的 标 记 化 合 物 ( 约 0.1~10mg), 用 > 1000 倍 化 学 量 (W2) 的 纯 载 体 稀 释, 充 分 混 匀 后 反 复 纯 化 到 比 活 度 恒 定 不 变 (Sp), 此 标 记 化 合 物 的 放 化 纯 度 值 应 为 : 有 时 该 值 >100% 时, 往 往 是 由 于 所 用 载 体 化 学 纯 度 不 够 因 本 法 操 作 要 求 严 格, 一 般 不 作 常 规 放 化 纯 度 鉴 定 用 3. 化 学 纯 度 及 化 学 量 的 测 定 标 记 化 合 物 中 的 非 放 射 性 化 学 杂 质 虽 一 般 不 会 对 示 踪 结 果 带 来 直 接 干 扰, 然 而 这 种 杂 质 的 含 量 越 多 对 标 记 化 合 物 在 使 用 存 放 过 程 中 分 解 变 性 的 影 响 就 越 大 此 外, 也 已 发 现 某 些 标 记 化 合 物 的 化 学 杂 质 会 给 使 用 带 来 直 接 影 响 如 用 氚 标 记 类 固 醇 作 放 射 免 疫 分 析 试 剂, 其 中 的 化 学 杂 质 会 影 响 标 记 抗 原 与 抗 体 的 结 合 率, 使 分 析 灵 敏 度 降 低 因 此, 对 标 记 化 合 物 的 化 学 杂 质 含 量, 同 样 必 须 加 以 控 制 要 制 得 化 学 纯 度 的 标 记 化 合 物, 最 好 是 对 可 能 产 生 的 杂 质 加 以 防 止 这 要 在 冷 试 验 中 解 决 因 为 冷 试 验 所 得 产 品 是 非 放 射 性 的, 其 化 学 纯 度 可 用 常 规 方 法, 如 溶 点 沸 点 测 定,NMR 红 外 紫 外 谱 分 析 等 手 段 加 以 鉴 定, 得 到 合 格 产 品 后, 再 按 同 样 方 法 及 条 件 进 行 标 记 制 备 对 于 标 记 化 合 物 的 化 学 含 量, 则 必 需 在 标 记 反 应 及 一 定 纯 化 步 骤 后 进 行, 由 于 需 要 高 比 活 度 的 标 记 化 合 物, 往 往 样 品 的 放 射 性 很 强, 而 化 学 量 极 微 ( 如 某 氘 标 记 化 合 物, 分 子 量 为 300, 每 分 子 上 标 记 2 个 氘 原 子, 氘 的 同 位 素 活 度 为 99.8%, 则 理 论 上 每 25mCi(925MBq) 的 化 学 量 还 不 足 (130μg), 所 以 需 用 微 量 分 析 法 才 能 测 定 其 含 量 一 般 而 言, 各 种 常 规 微 量 分 析 技 术 均 可 应 用 目 前 大 多 用 紫 外 分 光 荧 光 光 度 等 进 行 含 量 测 定 4. 放 射 性 比 活 度 及 其 测 定 (1) 放 射 性 比 活 度 简 称 比 活 度, 过 去 也 称 比 放 射 性 比 活 度 = 放 射 性 活 度 / 单 位 化 学 量 (2) 比 活 度 的 理 论 值 计 算 : 每 种 放 射 性 核 素 有 一 个 比 活 度 理 论 值, 取 决 于 该 核 素 的 半 衰 期 和 衰 变 常 数 若 N 是 1 毫 克 原 子 (1mA) 的 总 原 子 数, 衰 变 常 数 λ( 单 位 时 间 衰 变 的 %), 则
11 任 何 元 素 每 1mA 的 原 子 数 都 相 同, 等 于 阿 伏 加 德 罗 常 数, 即 个, 故 若 T1/2min 为 单 位, 则 上 式 的 活 度 单 位 为 dpm/ma, 进 行 单 位 换 算 后 为 : 根 据 上 式, 可 计 算 出 每 种 放 射 性 核 素 比 活 度 的 理 论 值 ( 常 用 放 射 性 核 素 的 比 活 度 理 论 值 见 表 8-2) 如 果 标 记 化 合 物 每 分 子 接 上 一 个 放 射 性 核 素 原 子, 则 以 上 原 论 值 亦 为 该 标 记 化 合 物 的 比 活 度 ( 每 毫 摩 尔 的 活 度 ) 理 论 值 表 8-2 一 些 常 用 放 射 性 核 素 的 比 活 度 理 论 值 ( 亦 即 每 分 子 一 接 一 个 该 放 射 性 核 素 原 子 的 标 记 化 合 物 的 经 活 度 理 论 值 ) 放 射 性 核 素 半 衰 期 比 活 度 理 论 值 ( 每 ma 或 mmol 的 活 度 ) 14 C 5730 年 Ci (2.3 GBq) 3 H 年 29.0 Ci(1073 GBq) 45 Ca 165 天 793 Ci (29.3 TBq) 75 Se 天 1100 Ci(40.7 TBq) 35 S 87.4 天 1494 Ci (55.2 TBq) I 60.2 天 2196 Ci(80.3 TBq) 131 I 8.04 天 Ci (600 TBq) (3) 放 射 性 比 活 度 测 定 方 法
12 1 直 接 测 定 计 算 法 : 将 标 记 产 品 经 分 离 纯 化 后, 配 成 合 适 的 溶 液, 测 定 每 毫 升 的 放 射 性 活 度 ( 如 mci /ml) 及 含 量 (μg/ml) 从 而 计 算 其 比 活 度 对 于 高 经 活 度 的 标 记 物, 化 学 含 量 甚 低, 一 般 需 用 光 谱 法, 如 紫 外 分 光 光 度 法 测 定 其 含 量 2 层 析 扫 描 面 积 计 算 法 : 一 般 应 用 纸 层 析 或 薄 层 层 析, 将 反 应 结 果 尚 未 分 离 的 反 应 液 点 样 展 层, 然 后 在 扫 描 仪 上 描 绘 放 射 性 分 布 图, 根 据 描 绘 的 面 积 来 进 行 计 算, 如 图 8-4 图 8-4 放 射 层 析 扫 描 面 积 计 算 比 活 度 示 意 图 1 为 标 记 物 峰 面 积 : S2S3 为 杂 质 峰 及 放 射 性 原 料 峰 面 积 先 计 算 标 记 率 : 放 射 性 比 活 度 的 计 算 : 若 投 入 的 待 标 记 物 重 量 为 W, 且 100% 转 化 为 标 记 物, 则 比 活 度 =A Y/W, 其 中 A 为 投 入 的 总 放 射 性 如 果 层 析 扫 描 仪 有 紫 外 监 测 器 和 放 射 性 活 度 计 数 率 仪 可 同 步 测 定 扫 描, 则 直 接 可 给 出 比 活 度 3 自 身 取 代 计 算 法 : 这 是 间 接 测 定 标 记 物 比 活 度 的 方 法 所 测 定 的 标 记 物, 需 是 分 离 纯 化 后 可 用 于 RI A 或 RRA 标 记 试 剂 方 法 的 原 理 是 : 作 一 条 常 规 的 RIA( 或 RRA) 标 准 曲 线, 另 作 一 条 不 加 非 标 记 标 准 品, 只 加 抗 体 和 不 同 量 标 记 试 剂 的 自 身 取 代 曲 线 两 者 用 同 一 种 抗 体, 且 抗 体 用 量 完 全 相 同 若 反 应 平 衡 后 测 定 结 合 部 分 的 放 射 性, 掏 算 成 所 加 总 放 射 性 ( 注 意 : 对 标 准 曲 线 总 说 总 放 射 性 各 管 相 同, 对 自 身 取 代 曲 线 来 说 各 管 不 同, 需 分 别 换 算 ) 的 百 分 数, 即 结 合 率 B 由 于 两 条 曲 线 所 用 抗 体 的 质 和 量 严 格 相 同, 标 记 物 与 非 标 记 标 准 品
13 与 抗 体 亲 和 力 也 相 同, 故 B 的 大 小 就 完 全 取 决 于 各 管 中 标 记 物 和 非 标 记 标 准 品 的 总 量 亦 即 若 从 两 标 准 曲 线 上 取 一 点 相 同 的 B, 则 ( 标 记 物 + 标 准 品 ) 标 准 曲 线 =( 标 记 物 ) 自 身 取 代 曲 线 比 活 度 故 由 此 便 可 直 接 计 算 标 记 试 剂 的 化 学 含 量 并 进 一 步 求 得 比 活 度 为 求 准 确 度 高, 可 取 我 点 B 求 出 平 均 用 自 身 取 代 法 测 定 标 记 化 合 物 的 比 活 度, 只 适 用 于 RIA 的 标 记 抗 原 及 受 体 的 标 记 配 基 使 用 时 应 注 意 : 1 标 记 物 与 未 标 记 物 对 抗 体 ( 受 体 ) 的 亲 和 力 应 相 同 ;2 非 特 异 性 结 合 应 较 小, 且 计 算 时 应 扣 除 ;3 制 备 标 准 曲 线 与 自 身 取 代 曲 线 时, 操 作 步 骤 应 相 同, 特 别 是 B 与 F 分 离 的 条 件 要 一 致 5. 生 物 活 性 免 疫 活 性 测 定 (10) 生 物 活 性 免 疫 活 性 测 定 的 重 要 性 : 放 射 性 标 记 化 合 物 作 为 示 踪 剂 用 于 生 物 体 内 的 示 踪 研 究, 或 作 为 分 析 试 剂 用 于 生 物 活 性 物 质 分 析, 都 要 求 标 记 化 合 物 不 改 变 其 原 有 的 生 物 活 性 和 免 疫 活 性 当 给 化 物 引 入 放 射 性 原 子, 即 使 同 位 素 标 记 大 多 需 经 过 原 子 交 换 或 化 学 反 应 及 分 离 纯 化 等 物 理 化 学 处 理, 有 可 能 造 成 光 学 构 型 及 立 体 构 型 的 改 变 而 使 标 记 物 改 变 性 质 非 同 位 素 标 记, 如 蛋 白 质 分 子 中 引 入 碘 原 子, 则 更 易 引 起 蛋 白 质 失 活 变 性 故 测 定 放 射 性 标 记 化 合 物 的 生 物 活 性 和 免 疫 活 性, 对 保 证 使 用 效 果 十 分 必 要 (2) 生 物 活 性 和 免 疫 活 性 测 定 的 要 求 : 需 根 据 使 用 要 求 而 定, 因 为 同 一 标 记 物 其 生 物 活 性 的 变 化 与 免 疫 活 性 的 变 化 不 一 定 相 关 ; 同 一 标 记 激 素, 其 与 受 体 结 合 能 力 的 改 变 与 抗 体 结 合 能 力 的 改 变 也 不 一 定 平 行 (3) 测 定 方 法 : 测 定 标 记 蛋 白 质 或 多 肽 的 生 物 活 性 和 免 疫 活 性 常 用 的 方 法 有 下 述 几 种 : 1 物 理 化 学 方 法 : 可 用 电 泳 法 吸 附 法 及 凝 胶 过 滤 法 等 物 理 化 学 方 法 来 测 定 标 记 蛋 白 质 的 结 构 改 变 情 况, 如 标 记 后 受 损 全 伤 的 蛋 白 质 在 电 泳 时 泳 动 性 减 少, 碘 化 受 损 的 多 肽 激 素 在 血 红 蛋 白 涂 碳 上 的 吸 附 性 质 也 有 改 变, 而 蛋 白 质 变 性 聚 合 时 大 分 子 聚 合 体 将 在 凝 胶 过 滤 时 不 停 留 在 凝 胶 柱 上 这 些 测 定 虽 较 快 速 方 便, 但 对 标 记 物 的 生 物 活 性 和 免 疫 活 性 的 严 格 判 定 来 说, 还 是 很 不 够 的 2 特 异 结 合 试 验 : 根 据 放 射 性 标 记 化 合 物 用 于 放 射 免 疫 分 析 等 不 同 要 求, 分 别 与 其 相 应 抗 体 或 受 体 进 行 特 异 性 结 合 试 验 以 放 射 免 疫 分 析 试 剂 为 例, 测 定 其 免 疫 活 性 的 方 法 是 : 先 观 察 标 记 物 与 抗 体 的 结 合 率, 如 果 结 合 率 高, 说 明 抗 原 的 免 疫 活 性 较 好 进 一 步 观 察 标 记 抗 原 与 非 标 记 对 抗 体 亲 合 力 是 否 一 致, 做 法 之 一 是 用 不 同 稀 释 度 的 抗 体, 分 别 与 标 记 抗 原 及 与 标 记 抗 原 加 非 标 记 抗 原 的 混 合 物 进 行 特 异 结 合, 其 中 混 合 物 抗 原 总 浓 度 要 和 单 独 使 用 放 射 性 抗 原 的 浓 度 相 同 如 单 独 使 用 标 记 抗 原 1.0ng, 而 混 合 抗 原 的 总 浓 度 亦 为 1.0ng, 其 中 标 记 抗 原 为 0.1ng, 非 标 记 抗 原 为 0.9ng, 比 较 两 者 的 结 合 率, 如 果 基 本 相 同, 说 明 标 记 抗 原 保 持 其 原 来 的 亲 和 力, 在 标 记 等 操 作 过 程 中 未 受 到 明 显 损 伤 如 图 8-5 中,A 线 与 B 线 基 本 平 行 ; 如 果 标 记 抗 原 免 疫 活 性 已 有 降 低, 则 如 C 线 所 示
14 图 8-5 标 记 蛋 白 的 免 疫 活 性 测 定 A; 为 标 记 抗 原 与 血 清 的 滴 度 曲 线 B: 为 非 标 记 抗 原 ( 加 入 少 量 标 记 抗 原 ) 的 滴 度 曲 线 ;C: 与 A 相 同, 但 标 记 抗 原 免 疫 活 性 已 有 降 低 3 生 物 特 性 测 定 : 如 I 纤 维 蛋 白 原, 可 用 凝 血 酶 测 定 其 可 凝 能 力, 与 非 标 记 物 相 比, 视 是 否 有 改 变 使 用 何 种 生 物 特 性 测 定, 根 据 标 记 物 的 生 物 性 质 而 定 另 外, 上 述 特 异 性 结 合 试 验, 如 果 受 体 作 异 结 合 剂, 也 是 检 验 用 作 RRA 或 RBA 分 析 试 剂 的 标 记 物 生 物 活 性 情 况 的 有 效 方 法 </P< p>
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神 奇 的 滅 孑 師 太 ~~ 探 討 日 常 生 活 常 用 水 溶 液 及 植 物 對 於 消 滅 孑 孓 之 成 效 壹 研 究 動 機 春 眠 不 覺 曉, 處 處 蚊 子 咬, 夜 來 巴 掌 聲, 蚊 子 死 多 少? 夏 天 即 將 到 來, 蚊 子 的 惡 夢 一 直 困 擾 著 我 們 了, 班 上 同 學 舉 起 手 腳 指 著 一 個 一 個 紅 豆 冰 咒 念, 真 是 令
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妇 产 科 学 笔 记 第 3 版 答 案 第 二 章 女 性 生 殖 系 统 解 剖 1. (1) 耻 骨 联 合 上 缘 (2) 髂 耻 缘 (3) 骶 岬 上 缘 2. 环 形 3. (1) 内 侧 (2) 子 宫 角 ( 二 ) 选 择 题 A 型 题 1. B 2. B 3. D 4. A 5. B ( 三 ) 名 词 解 释 1. 阴 阜 是 覆 盖 于 耻 骨 联 合 前 上 方 隆
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2010............... 1 1 2010...1 2 2010...5 3 2010...6 4 2010...7 5 2010...8 6 2010...9 7 2010 500...10 8 2010...20 9 2010...50 2010.........52 1 2010
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: 2 A B C D E ( ) 1 2 3 4 5 6 140 Hg / 90 Hg 50% 1/3 2-3 3-5 10 7.0mmol/L 2 11.1mmol/L 5.72mmol/L 1.70mmol/L (BMI) = (cm) 105 = (kg) / (m) 2 10%
22 8529 專 用 或 主 要 用 於 第 8525 至 8528 節 所 屬 器 具 之 零 件 23 8308 用 於 衣 服 靴 鞋 帳 蓬 手 提 包 旅 行 用 品 或 其 他 已 製 作 品 之 卑 金 屬 搭 鈕 帶 搭 鈕 之 框 架 帶 扣 帶 扣 搭 鈕 眼 環 眼 及 其
附 表 一 項 次 4 位 碼 稅 號 我 國 對 哥 倫 比 亞 出 口 符 合 哥 國 零 關 稅 項 目 清 單 ( 以 2014 年 海 關 稅 則 前 4 碼 排 名 前 300 項 產 品 為 比 對 基 礎 ) 中 文 名 稱 2013/01-2013/12 2014/01-2014/12 單 位 : 金 額 ( 美 元 ) 名 次 增 減 比 (%) 全 部 貨 品 出 口 總 額
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.. 中 国 热 带 医 学 杂 志 年 卷 主 题 索 引 (,,, ),( ): (, (,,, ( (,,, ~ (, ), (,,, (,, (,,, (, ),( ): (, (,, (,, (, (,,, ),( ): ~ (,,, (,, (,,, (,,, ),( ): ( ), ( ): - (, (, (, (,,, ),(): (,,, ), α- (,,, ), (, (,,,
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閱 讀 (1) 楊 桃 毒 素 過 去 有 許 多 糖 尿 病 或 高 血 壓 患 者 吃 過 新 鮮 楊 桃 或 楊 桃 汁 後, 出 現 嘔 吐 頭 暈 意 識 不 清 等 症 狀, 研 判 因 為 他 們 腎 功 能 不 佳, 無 法 排 出 楊 桃 中 不 明 的 中 毒 成 分 楊 桃 中 的 不 明 成 分 可 能 導 致 部 分 特 殊 體 質 的 尿 毒 症 病 患, 出 現 神 經
目 錄 第 一 章 緒 論 第 一 節 研 究 背 景 與 動 機... 2 第 二 節 研 究 目 的... 2 第 三 節 研 究 方 法... 2 第 二 章 溫 泉 的 歷 史... 3 第 三 章 溫 泉 法 律 與 分 布 第 一 節 溫 泉 的 法 律 / 定 義... 5 第 二 節
修 平 科 技 大 學 應 用 日 語 系 題 目 : 日 本 の 温 泉 と 台 湾 の 温 泉 指 導 教 師 : 古 瀨 和 彥 老 師 姓 名 : 袁 緣 姓 名 : 楊 錡 學 號 :BX99063 學 號 :BX99512 中 華 民 國 103 年 01 月 10 日 目 錄 第 一 章 緒 論 第 一 節 研 究 背 景 與 動 機... 2 第 二 節 研 究 目 的... 2 第
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中国药师 年第 卷第 期 Ｃ Ｐ ｍ Ｖ Ｎ 左金丸源自元代 丹溪心法 的火方 由黄连和 型在线脱气机 Ｓ Ｌ Ａ型自动进样器 ＣＴＯ Ａ型 吴茱萸两味药按照 的比例组成 近年来的现 柱温箱 日本 Ｓ ｍ 公司 ＢＰＤ型电子天平 代药理学研究表明 左金丸具有调节中枢 抑杀幽门 德国赛多利斯集团 ＢＲ
研究论文 ｗｗｗ 基于细胞色素 Ｐ 的左金丸体外药物相互作用研究 龚睿林 吕春明 石美智 郭澄 韩永龙 上海交通大学附属第六人民医院药剂科 上海 摘 要 目的 探讨左金丸对人肝细胞色素 Ｐ 的 ＣＹＰＡ Ｃ Ｃ Ｃ Ｄ Ａ亚型的体外抑制作用 方法 左金丸 黄连和吴茱萸的水提物分别与 ＣＹＰＡ Ｃ Ｃ Ｃ Ｄ Ａ Ａ亚型的 种混合探针底物在人肝微粒体中共同孵育后 串联质谱法 ＬＣ ＭＳ ＭＳ同时测定这
期 李 海 青 等 : 生 物 安 全 性 白 藜 芦 醇 合 成 酶 表 达 载 体 的 构 建 及 水 稻 遗 传 转 化 子 植 物 中 作 为 植 物 处 于 恶 劣 环 境 下 或 遭 到 病 原 体 侵 害 时, 植 物 自 身 分 泌 的 一 种 可 抵 御 病 菌 感 染 的 抗 菌
华 北 农 学 报 ( ): - 生 物 安 全 性 白 藜 芦 醇 合 成 酶 表 达 载 体 的 构 建 及 水 稻 遗 传 转 化, 李 海 青, 柳 絮, 王 庆 国,, 姚 方 印, 刘 炜 (. 山 东 省 农 业 科 学 院 高 新 技 术 研 究 中 心, 山 东 省 作 物 遗 传 改 良 与 生 物 技 术 重 点 实 验 室, 山 东 济 南 ;. 农 业 部 黄 淮 海 作
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习 题 集 一 选 择 题 1. 下 列 有 关 假 药 劣 药 的 说 法, 哪 些 正 确?( ) A. 药 品 所 含 成 分 与 国 家 药 品 标 准 规 定 的 成 分 不 符 的 为 假 药 ; B. 以 非 药 品 冒 充 药 品 或 者 以 他 种 药 品 冒 充 此 种 药 品 的 为 假 药 ; C. 药 品 成 分 的 含 量 不 符 合 国 家 药 品 标 准 的, 为 劣
Ｐｈ ｍ Ｖ Ｎ 中国药师 年第 卷第 期 Ｃｈ 学基础首先是开放性药物可直接经口 鼻给予 其次是应 连整个产品设计紧凑携带使用方便此外减速网也被认为 答性它富含的感受器和药物受体能对体内外刺激作出应答 是可用于降低药物微粒速度从而减少其惯性嵌顿的一种结 反射从而对调节气道的张力有重要作用 第三是吸
ｗｗｗ 综 述 ｈ Ｃ ｄ Ｈ ｂｐｇ Ｖ Ｂｕ Ｍ ｄ Ｈ Ｄ ｈ ｍｂ ｗ ｈ ｍ ｕ ｈ ｄ ｍ ｄ Ａ Ｄ ｍ ＡＳＦＴ ＳＨＴ ｈｈｃ Ａ ｈ ｄ ｍ ｄ ｄ ｂ ｗ ｈ ｄ ｄ ｈ ｕ ｍ ＡｍＪＣ Ｏ ＭＷＤ ＫＭ Ａ ｈ Ｍ ｍ ｋ ＤＳＳ ｈ ｄ ｍ ｄ ｗ ｈ ｕ ｍ ｄ Ｇ ｗ ｈ ｂ ｍ ｋ Ｏ Ｇ ｕ ｕｄ Ｇ Ｏ Ｌ Ｍ ｕ Ｆ Ｔｈ ｄ ｍ ｄ ｄｕ ｄ Ｆ Ｃ Ａ ｕ
北 京 市 环 境 状 况 公 报 2013 BEIJING ENVIRONMENTAL STATEMENT 根 据 中 华 人 民 共 和 国 环 境 保 护 法 第 十 一 条 国 务 院 和 省 自 治 区 直 辖 市 人 民 政 府 的 环 境 保 护 行 政 主 管 部 门, 应 当 定
2 3 北 京 市 环 境 状 况 公 报 2013 BEIJING ENVIRONMENTAL STATEMENT 根 据 中 华 人 民 共 和 国 环 境 保 护 法 第 十 一 条 国 务 院 和 省 自 治 区 直 辖 市 人 民 政 府 的 环 境 保 护 行 政 主 管 部 门, 应 当 定 期 发 布 环 境 状 况 公 报 的 规 定, 现 发 布 2013 年 北 京 市 环 境
产 科 麻 醉 指 南 推 荐 剖 宫 产 常 规 采 用 椎 管 内 麻 [ ] 醉, 全 身 麻 醉 (, ) 用 于 产 科 易 发 生 胎 儿 窒 息, 所 以 目 前 主 要 用 于 有 椎 管 内 麻 醉 禁 忌 证 的 产 妇 全 麻 产 科 中 新 生 儿 的 安 全 问 题 一 直
![产 科 麻 醉 指 南 推 荐 剖 宫 产 常 规 采 用 椎 管 内 麻 [ ] 醉, 全 身 麻 醉 (, ) 用 于 产 科 易 发 生 胎 儿 窒 息, 所 以 目 前 主 要 用 于 有 椎 管 内 麻 醉 禁 忌 证 的 产 妇 全 麻 产 科 中 新 生 儿 的 安 全 问 题 一 直](/thumbs/43/23141375.jpg "产 科 麻 醉 指 南 推 荐 剖 宫 产 常 规 采 用 椎 管 内 麻 [ ] 醉, 全 身 麻 醉 (, ) 用 于 产 科 易 发 生 胎 儿 窒 息, 所 以 目 前 主 要 用 于 有 椎 管 内 麻 醉 禁 忌 证 的 产 妇 全 麻 产 科 中 新 生 儿 的 安 全 问 题 一 直")
中 国 病 理 生 理 杂 志, ( ): - [ 文 章 编 号 ] - ( ) - - 全 身 麻 醉 对 脐 血 乳 酸 以 及 胎 盘 体 视 学 的 影 响 段 善 娥, 张 清 德 ( 暨 南 大 学 附 属 第 一 医 院 麻 醉 科,, 彭 雪 梅, 高 雪 松 产 科, 广 东 广 州 ) [ 摘 要 ] 目 的 : 通 过 研 究 全 身 麻 醉 ( ) 与 腰 硬 联 合 麻
AA.S92
目 录 第 一 章 肾 的 概 述 (1) 第 二 章 泌 尿 系 统 疾 病 的 诊 断 (41) 第 三 章 肾 血 管 疾 病 (101) 第 四 章 肾 脏 运 转 异 常 综 合 症 (117) 第 五 章 遗 传 性 和 先 天 性 肾 病 (124) 第 六 章 免 疫 介 导 性 肾 脏 病 (133) 第 七 章 尿 路 感 染 第 八 章 肾 衰 第 九 章 尿 失 禁 (143)
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589 1. 2. 1 2 30 1 120 /160 / 3. 8 4 0.86cm 4. 12 5. ph 7.20 6. 4 6 7. 8. 9. 2 4 4cm 2cm 1 10. 2 4 1 2 1 11. 6 8 12. 4cm 1. 5 10 2. 590 3 4cm 1 2 4. 1. 1 2 3 Apgar 5 4 5 2 3. 4. 5. 10 20 0.2 0.4 6. 2 3
酸檸檬？鹼檸檬？?食物的酸鹼性.doc
篇 名 : 酸 檸 檬? 鹼 檸 檬? 食 物 的 酸 鹼 性 作 者 : 何 國 維 國 立 埔 里 高 工 化 工 科 二 年 乙 班 指 導 老 師 : 余 志 輝 老 師 壹 前 言 食 物, 是 人 類 每 天 的 能 量 的 來 源, 無 論 酸 甜 苦 辣, 各 式 各 樣 的 食 物 隨 處 可 見, 頗 具 豐 富 性 及 變 化 性, 令 人 食 指 大 動 但 是, 日 前 科
作 品 名 稱 : 讓 地 球 酵 起 來 摘 要 化 學 製 品 充 斥 市 面, 如 何 使 用 更 天 然 環 保 的 製 品 替 代 市 面 上 的 化 學 製 劑, 使 我 們 的 環 境 更 美 好, 接 觸 環 保 酵 素 後 心 中 的 疑 問 似 乎 有 解, 但 疑 惑 的 是
金 門 地 區 第 56 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 組 別 : 化 學 科 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 讓 地 球 酵 起 來 關 鍵 詞 : 環 保 酵 素 去 汙 力 清 潔 編 號 : 作 品 名 稱 : 讓 地 球 酵 起 來 摘 要 化 學 製 品 充 斥 市 面, 如 何 使 用 更 天 然 環 保 的 製 品 替 代 市 面 上 的 化 學
Microsoft PowerPoint - 第4章 营养调查.ppt
第 四 章 营 养 调 查 一 概 述 ( 一 ) 定 义 营 养 调 查 (Nutritional survey): 运 用 科 学 手 段 来 了 解 某 一 人 群 或 个 体 的 膳 食 和 营 养 水 平, 以 此 判 断 其 膳 食 结 构 是 否 合 理 和 营 养 状 况 是 否 良 好 ( 二 ) 营 养 调 查 的 目 的 了 解 不 同 地 区 不 同 年 龄 组 人 群 的
第十一章 颈部疾病病人的护理
第 十 一 章 颈 部 疾 病 病 人 的 护 理 学 习 目 标 1. 了 解 颈 部 常 见 肿 块 病 人 的 身 体 状 况 及 处 理 原 则 ; 能 提 出 甲 状 腺 肿 瘤 甲 状 腺 功 能 亢 进 病 人 的 护 理 诊 断 并 制 定 出 护 理 措 施 2. 熟 悉 甲 状 腺 肿 瘤 甲 状 腺 功 能 亢 进 病 人 的 身 体 状 况 手 术 适 应 证 3. 掌 握
声 明 本 公 司 全 体 董 事 监 事 高 级 管 理 人 员 承 诺 股 票 发 行 方 案 不 存 在 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 重 大 遗 漏, 并 对 其 真 实 性 准 确 性 和 完 整 性 承 担 个 别 和 连 带 的 法 律 责 任 根 据 证 券 法 的 规 定
大 医 科 技 股 份 有 限 公 司 股 票 发 行 方 案 ( 修 订 ) ( 住 所 : 北 京 市 海 淀 区 苏 州 街 18 号 院 长 远 天 地 大 厦 4 号 楼 1707 室 ) 主 办 券 商 国 都 证 券 股 份 有 限 公 司 ( 住 所 : 北 京 市 东 城 区 东 直 门 南 大 街 3 号 国 华 投 资 大 厦 9 10 层 ) 二 〇 一 六 年 八 月 I
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药 物 分 析 技 术 专 业 教 学 大 纲 广 东 化 工 制 药 职 业 技 术 学 院 药 学 系 二 〇 〇 六 年 九 月 十 三 日 目 录 专 业 基 础 课 基 础 化 学 (1) 教 学 大 纲... I 基 础 化 学 (2) 教 学 大 纲...9 仪 器 分 析 教 学 大 纲...23 物 理 学 教 学 大 纲...30 天 然 药 物 化 学 教 学 大 纲...32
第一章 绪 论
环 境 监 测 主 编 : 王 怀 宇 姚 运 先 高 等 教 育 出 版 社 内 容 提 要 本 书 将 环 境 监 测 的 对 象 进 行 了 明 确 的 分 类, 详 细 讲 述 了 各 种 监 测 技 术 的 基 础 理 论 和 手 段 内 容 包 括 环 境 监 测 绪 论 环 境 监 测 质 量 控 制 水 体 监 测 大 气 监 测 噪 声 监 测 土 壤 与 固 体 废 物 监 测
一 收 费 目 录 中 公 布 的 行 政 事 业 性 收 费 项 目 ( 以 下 简 称 收 费 项 目 ) 是 按 行 政 事 业 性 收 费 管 理 审 批 权 限 由 和 省 两 级 有 权 部 门 批 准, 由 我 市 有 关 行 政 事 业 收 费 单 位 收 取 ( 含 为 省 代 收
淮 安 市 财 政 局 淮 安 市 物 价 局 文 件 淮 财 综 2016 8 号 关 于 公 布 淮 安 市 行 政 事 业 性 收 费 项 目 目 录 (2016 年 版 ) 的 通 知 市 各 部 委 办 局, 市 各 直 属 及 驻 淮 单 位, 各 县 ( 区 ) 财 政 局 物 价 局 : 为 规 范 行 政 事 业 性 收 费 执 收 行 为, 根 据 和 省 关 于 建 立 和 实
目 錄 壹 緒 論... 2 貳 明 時 代 背 景 一 明 代 禮 教 之 於 女 性? 母 德 婦 德... 2 二 明 代 婦 女 之 於 士 人? 經 濟 支 柱... 4 參 歸 有 光 一 仕 途... 7 二 家 庭... 7 肆 歸 有 光 文 學 裡 的 女 性 比 較 一 < 項
淺 談 歸 有 光 的 女 性 側 寫 以 項 籍 軒 志 葬 寒 花 志 及 先 妣 事 略 世 美 堂 後 記 為 例 指 導 教 授 : 陳 慶 元 撰 寫 學 生 : 亷 千 儀 目 錄 壹 緒 論... 2 貳 明 時 代 背 景 一 明 代 禮 教 之 於 女 性? 母 德 婦 德... 2 二 明 代 婦 女 之 於 士 人? 經 濟 支 柱... 4 參 歸 有 光 一 仕 途...
2010年执业药师考试模拟题直接答案版之专业知识一.doc
在 药 品 质 量 标 准 中, 药 品 的 外 观 臭 味 等 内 容 归 属 的 项 目 为 性 状 www.alllw.com 误 差 中 属 于 偶 然 误 差 的 是 温 度 波 动 引 入 的 误 差 中 国 药 品 通 用 名 称 的 英 文 简 称 是 CADN 用 酸 度 计 测 定 溶 液 的 ph 值, 测 定 前 应 用 PH 值 与 供 试 液 较 接 近 的 一 种 标
中共贺州市委员会
贺 州 市 加 强 宣 传 思 想 文 化 人 才 队 伍 建 设 签 约 制 暂 行 办 法 为 了 逐 步 解 决 当 前 贺 州 新 闻 写 作 播 音 主 持 记 者 编 辑 媒 体 运 营 文 艺 创 作 文 化 创 意 产 业 等 方 面 人 才 紧 缺 制 约 我 市 宣 传 思 想 文 化 工 作 和 文 化 产 业 发 展 滞 后 等 问 题, 根 据 自 治 区 党 委 自 治
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教 师 资 格 考 试 资 料 汇 编 目 录 1. 教 师 资 格 条 例...1 2. 教 师 资 格 条 例 实 施 办 法...5 3. 中 小 学 教 师 资 格 考 试 暂 行 办 法...9 4. 中 小 学 教 师 资 格 定 期 注 册 暂 行 办 法...13 5. 中 小 学 和 幼 儿 园 教 师 资 格 考 试 标 准 ( 试 行 )...16 6. 全 国 教 师 资 格
Microsoft Word - 长安大学.doc
长 安 大 学 805 管 理 学 全 套 考 研 资 料 ... 2 长 安 大 学 803 道 路 工 程 全 套 考 研 资 料 ... 2 长 安 大 学 802 结 构 设 计 原 理 全 套 考 研 资 料 ... 3 长 安 大 学 806 汽 车 理 论 全
绿化养殖
...1...13...15...20...23...38...62...64...67...68...70...72...74...76...77...78...80...82... 101... 107... 108 II ... 109... 113... 116... 119... 123... 130... 132... 136... 137... 139... 144... 148...
药学白皮书.FIT)
目 录 (1) (12) (35) 第 一 章 药 典 (35) 第 二 章 药 物 分 析 基 础 (36) 第 三 章 物 理 常 数 测 定 法 (39) 第 四 章 滴 定 分 析 法 (40) 第 五 章 分 光 光 度 法 (41) 第 六 章 色 谱 法 (43) 第 七 章 体 内 药 物 分 析 (47) 第 八 章 药 物 的 杂 质 检 测 (48 (57) 第 一 章 绪 论
素 ４ 在上述学 者 观 点 的 基 础 上本 文 认 为 员 工 需 要 一 理论与假设 同时具备创新意 识 创 新 能 力 创 新 动 机 和 创 新 机 会 才 能产生创新行为 创新 意 识 是 指 员 工 能 通 过 对 组 织 环 境 一 组织的创新战略与员工的创新行为 的解读认识到创新
中国人民大学学报 ５ 年第 ５ 期 Ｎ ５５ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＲＥＮＭＮ ＵＮＶＥＲ ＴＹ ＯＦ ＣＨＮＡ 组织创新战略如何转化为 员工创新行为 以中关村Ｔ 行业为例 苏中兴 张雨婷 曾湘泉 摘要 随 着 市 场 竞 争 加 剧 和 劳 动 力 成 本 快 速 上 升 越 来 越 多 的 中 国 企 业 开 始 采 用 创 新 战 略 来 应 对挑战 组织特定的战略需要匹配的员工行为作为支撑因此激发员工的创新
附件
附 件 晋 陕 豫 黄 河 金 三 角 区 域 合 作 规 划 2014 年 4 月 目 录 前 言... 1 第 一 章 合 作 背 景... 2 第 一 节 发 展 基 础... 2 第 二 节 重 大 意 义... 3 第 二 章 总 体 思 路... 3 第 一 节 指 导 思 想... 3 第 二 节 基 本 原 则... 4 第 三 节 战 略 定 位... 5 第 四 节 发 展 目
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综 合 性 设 计 性 实 验 指 导 手 册 ( 安 徽 医 科 大 学 卫 生 毒 理 学 系 编 写 ) 引 言 毒 理 学 是 一 门 研 究 外 源 因 素 ( 包 括 物 理 因 素 化 学 因 素 和 生 物 因 素 等 ) 对 机 体 的 损 害 作 用 及 其 机 制, 并 进 行 安 全 性 评 价 和 危 险 度 管 理 的 科 学 毒 理 学 既 是 一 门 基 础 学 科,
国环评证甲字第2606号
i 目 录 前 言... - 1-1 总 则... - 4-1.1 项 目 由 来... - 4-1.2 编 制 依 据... - 5-1.3 环 境 影 响 因 素 识 别 及 评 价 因 子 筛 选... - 7-1.4 环 境 功 能 区 划 及 评 价 标 准... - 9-1.5 评 价 目 的... - 14-1.6 评 价 重 点 与 评 价 工 作 等 级 和 范 围... - 14-1.7
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SPECT/CT 1 SPECT/CT 317 0599-8602831 1321216408@qq.com 353000 317 / / () 1.1 1500 () 1.1.1 140 9.3% () / / / 1905 1995 8 23 3 600 16 10 1700 1600 95 6 7 2.5 103333 48359, 47 45 1 1 3 2014 1497 205 372
Microsoft Word - 中三選科指南 2014 subject
必 修 科 目 簡 介 < < < 1. 中 文 > > > 本 科 的 公 開 評 核 以 課 程 發 展 議 會 與 香 港 考 試 及 評 核 局 聯 合 編 訂 的 中 國 語 文 科 課 程 及 評 估 指 引 ( 中 四 至 中 六 ) 為 根 據 目 標 本 科 主 要 評 核 考 生 : (1) 讀 寫 聽 說 能 力 思 維 能 力 審 美 能 力 和 自 學 能 力 ; (2)
中華民國 第49屆中小學科學展覽會
中 華 民 國 第 50 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 R 作 品 說 明 書 國 小 組 生 物 科 080313 窗 台 綠 光 ~ 無 臭 堆 肥 發 酵 緩 衝 劑 對 無 底 洞 植 栽 的 探 討 學 校 名 稱 : 臺 北 縣 永 和 市 秀 朗 國 民 小 學 作 者 : 指 導 老 師 : 小 四 劉 晉 嘉 小 四 劉 家 妤 蘇 秀 麗 朱 鄭 盟 小 四 鄭 旨 妤 小
校园之星
10 1 12 13 A B A B 14 15 16 17 18 19 20 21 2 23 24 25 26 S S 27 28 A B A B 29 V 30 N S 31 N S S S S N S S S 32 3 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 4 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 5 56 57 58 59 60 61 62 63
2013年护士执业资格考试《实践能力》模拟试卷
更 多 内 容 请 查 看 精 品 文 库 网 www.jingpinwenku.com 2013 年 护 士 执 业 资 格 考 试 实 践 能 力 模 拟 试 卷 选 择 题 一 第 1 题 患 者 男 性,65 岁, 颅 内 压 升 高 医 嘱 给 予 输 注 20% 甘 露 醇 250ml, 输 注 时 间 至 多 A. 10min B. 30min C. 60min D. 90min E.
汕尾市生活垃圾无害化处理中心焚烧厂首期工程项目环境影响报告书
广 州 市 兴 丰 生 活 垃 圾 卫 生 填 埋 二 场 一 期 工 程 项 目 环 境 影 响 报 告 书 公 示 简 本 环 境 保 护 部 华 南 环 境 科 学 研 究 所 二 O 一 二 年 十 一 月 目 录 项 目 背 景... 1 1 建 设 项 目 概 况... 2 1.1 建 设 项 目 基 本 概 况... 2 1.2 选 址 选 择 及 规 划 相 符 性... 3 1.2.1
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第 三 章 各 种 食 物 的 营 养 价 值 及 加 工 因 素 的 影 响 知 识 目 标 瞯 通 过 本 章 的 学 习, 掌 握 谷 类 豆 类 油 料 水 果 蔬 菜 鱼 肉 蛋 类 奶 类 以 及 坚 果 等 我 国 人 民 喜 爱 的 常 用 的 天 然 食 品 以 及 它 们 的 加 工 制 品 的 营 养 价 值 瞯 熟 悉 谷 粒 的 结 构, 加 工 烹 调 和 贮 藏 方 法
Microsoft Word - 3-11.专业主干课程和主要专业课程的教学大纲.doc
... 3... 7... 10... 31... 36... 41... 49... 52... 57... 62... 65... 71... 73... 98... 105... 108... 131... 137... 148... 159... 174... 176... 192... 195... 228... 235... 242... 243 ... 247... 255... 265...
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第 三 章 常 见 症 状 评 估 要 点 提 示 : 1 常 见 症 状 的 概 念 2 常 见 症 状 的 病 因 3 常 见 症 状 的 临 床 表 现 及 护 理 评 估 要 点 症 状 是 指 评 估 对 象 在 疾 病 状 态 下, 机 体 生 理 功 能 发 生 异 常 时 主 观 感 受 到 不 适 或 痛 苦 的 异 常 感 觉 或 病 态 改 变 疾 病 的 症 状 多 种 多
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模 块 三 牛 生 产 技 术 模 块 目 标 本 模 块 要 求 了 解 牛 的 生 物 学 特 性 养 牛 场 的 规 划 与 建 设, 熟 悉 牛 的 主 要 品 种, 掌 握 奶 牛 及 肉 牛 的 饲 养 管 理 技 术 常 见 牛 病 的 防 治 技 术 目 项 一 牛 的 品 种 项 目 目 标 了 解 不 同 品 种 牛 的 原 产 地 及 培 育 史, 掌 握 主 要 品 种 牛
(i) (ii) 97/99/M
1,400,000 700,000 2,000,000 216,000 382,000 531,000 17.1% 82.9% 13.8% 86.2% (i) (ii) 97/99/M 20,500 35 50,000 13 (i) (ii) (iii) [ ] 6,000 14,000 20,500 46.1% 44.9% 45.9% 16 5 16 30,000,000 34,500,000 41,700,000
七 公 安 序 号 执 收 部 门 福 田 区 行 政 事 业 性 项 目 清 单 ( 调 整 后 ) 项 目 是 否 涉 企 项 目 管 理 方 式 标 准 资 金 管 理 政 策 依 据 减 免 措 施 11 居 住 证 工 本 费 ( 仅 含 丢 失 补 办 ) 否 省 定 项 目 20 元
附 件 2 序 号 执 收 部 门 项 目 福 田 区 行 政 事 业 性 项 目 清 单 ( 调 整 后 ) 是 否 涉 企 项 目 管 理 方 式 标 准 资 金 管 理 政 策 依 据 减 免 措 施 一 民 政 1 婚 姻 登 记 证 书 费 否 国 家 定 项 目 9 元 / 对 1992 价 费 字 249 号 财 预 字 1994 37 号 计 价 格 缴 入 区 级 财 政 2001
建设项目竣工环境保护
建 设 项 目 竣 工 环 境 保 护 验 收 监 测 报 告 表 粤 环 辐 验 监 字 (2013) 第 B013 号 项 目 名 称 : 使 用 III 类 射 线 装 置 及 乙 级 非 密 封 源 工 作 场 所 委 托 单 位 : 海 丰 粤 东 医 院 广 东 省 环 境 辐 射 监 测 中 心 二 O 一 三 年 五 月 承 担 单 位 : 广 东 省 环 境 辐 射 监 测 中 心
1 S P Cl Pro 2 K Na Ca Mg K Na Ca Mg % 1 6%-9% 2 1%-3% 3 70%-80% 4 P Ca Fe Cu Co Zn Se Mn Mo Ni Cr P Ca 5 VB V B1 Vpp V B2 B3 VE
1 2 1 V Pro 2 3 1 Pro 2 Fe2+ Fe3+ 3 Vc 4 Vc 5 1-12% 45-64% 4 1 S P Cl Pro 2 K Na Ca Mg K Na Ca Mg 3 1-2 11-14% 1 6%-9% 2 1%-3% 3 70%-80% 4 P Ca Fe Cu Co Zn Se Mn Mo Ni Cr P Ca 5 VB V B1 Vpp V B2 B3 VE
Microsoft Word - chead095.doc
管 制 人 员 : 康 乐 及 文 化 事 务 署 署 长 会 交 代 本 总 目 下 的 开 支 二 O 一 O 至 一 一 年 度 预 算... 54.547 亿 元 二 O 一 O 至 一 一 年 度 的 编 制 上 限 ( 按 薪 级 中 点 估 计 的 年 薪 值 ) 相 等 于 由 二 O 一 O 年 三 月 三 十 一 日 预 算 设 有 的 8 049 个 非 首 长 级 职 位,
( ) 039 (CIP) /. :, ISBN TS CIP ( 2005) : : : : * ( ) : ( 010 ) / www. cip. com. cn
( ) 039 (CIP) /. :, 2005. 3 ISBN 7-5025-6678-3... -. TS211. 4 CIP ( 2005) 012222 : : : : * ( 3 100029 ) : ( 010 ) 64982530 http:/ / www. cip. com. cn * 850mm 1168mm 1/ 32 7 196 2005 4 1 2005 4 1 ISBN 7-5025-6678-3/
Microsoft Word - 00教学管理手册2011-12-11mo.doc
目 录 工 作 职 责 广 西 医 科 大 学 教 务 处 工 作 职 责 3 广 西 医 科 大 学 教 学 质 量 与 教 育 研 究 中 心 工 作 职 责 8 教 学 组 织 管 理 广 西 医 科 大 学 教 学 委 员 会 章 程 13 广 西 医 科 大 学 十 二 五 专 业 建 设 规 划 16 广 西 医 科 大 学 十 二 五 课 程 建 设 规 划 20 广 西 医 科 大
( ) 63 ( ) 68 ( ) 72 ( ) 77 ( ) 85 ( ) 91 ( ) ( ) 98 ( ) 103 ( ) 107 ( ) 111 ( ) 114 ( ) 117 ( ) 121 ( ) 125 ( ) 127 ( ) ( ) 133 ( ) 139
1 ( ) 1 ( ) 2 ( ) 7 ( ) 9 ( ) 10 16 ( ) 16 ( ) 17 ( ) 19 ( ) 23 ( ) 25 ( ) 26 30 ( ) 30 ( ) 46 50 ( ) 50 ( ) 52 1 ( ) 63 ( ) 68 ( ) 72 ( ) 77 ( ) 85 ( ) 91 ( ) 94 98 ( ) 98 ( ) 103 ( ) 107 ( ) 111 ( )
Microsoft Word - Book 8 將軍行.doc
宇 宙 生 靈 學 修 行 者 第 八 部 將 軍 行 ( 疏 第 二 十 四 篇 二 0 八 集 至 二 一 六 集 合 訂 本 ) 作 者 : 妙 航 玄 昊 玄 鑫 整 理 目 錄 第 二 0 八 集 劍 馬 嘶 鳴 第 二 0 九 集 該 當 何 斷 第 二 一 0 集 流 水 落 花 第 二 一 一 集 一 往 情 深 第 二 一 二 集 冷 面 藏 情 第 二 一 三 集 心 海 湖 平
中华人民共和国国家环境保护标准
中 华 人 民 共 和 国 国 家 环 境 保 护 标 准 HJ 809-2016 水 质 亚 硝 胺 类 化 合 物 的 测 定 气 相 色 谱 法 Water quality-determination of nitrosamine compounds Gas chromatography ( 发 布 稿 ) 本 电 子 版 为 发 布 稿 请 以 中 国 环 境 科 学 出 版 社 出 版 的
兽医临床诊断学实验指导
兽 医 临 床 诊 断 学 实 验 指 导 河 北 科 技 师 范 学 院 动 物 科 学 系 临 床 兽 医 学 实 验 室 2009 年 2 月 目 录 学 生 实 验 守 则... 3 实 习 一 动 物 的 接 近 保 定 和 基 本 检 查 法...4 实 习 二 临 床 基 本 检 查 法 及 一 般 检 查...10 实 习 三 循 环 系 统 的 临 床 检 查...15 实 习 四
关于推介发布秸秆“五料化”利用技术的通知
附 件 秸 秆 五 料 化 利 用 技 术 一 秸 秆 肥 料 化 利 用 技 术 1.1 秸 秆 直 接 还 田 技 术 1.1.1 秸 秆 机 械 混 埋 还 田 技 术 秸 秆 机 械 化 混 埋 还 田 技 术, 就 是 用 秸 秆 切 碎 机 械 将 摘 穗 后 的 玉 米 小 麦 水 稻 等 农 作 物 秸 秆 就 地 粉 碎, 均 匀 地 抛 撒 在 地 表, 随 即 采 用 旋 耕
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习 近 平 对 开 展 两 学 一 做 学 习 教 育 作 出 重 要 指 示 强 调 突 出 问 题 导 向 确 保 取 得 实 际 成 效 把 全 面 从 严 治 党 落 实 到 每 一 个 支 部 两 学 一 做 学 习 教 育 工 作 座 谈 会 在 京 召 开 刘 云 山 出 席 并 讲 话 近 日, 中 共 中 央 总 书 记 国 家 主 席 中 央 军 委 主 席 习 近 平 对 在
天主教永年高級中學綜合高中課程手冊目錄
天 主 教 永 年 高 級 中 學 綜 合 高 中 課 程 手 冊 目 錄 壹 學 校 背 景. 貳 教 育 理 念 與 教 育 目 標. 3 一 規 劃 理 念...3 二 教 育 目 標...3 參 畢 業 要 求. 5 一 總 學 分 數...5 二 必 選 修 學 分 數...5 三 必 須 參 加 活 動...9 四 成 績 評 量 方 式...9 肆 課 程 概 述.. 9 一 課 程
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第 三 章 护 理 病 案 分 析 综 合 练 习 第 一 节 呼 吸 系 统 病 案 病 案 分 析 1 一 基 本 情 况 患 者, 男 性,62 岁 反 复 发 作 性 咳 喘 20 余 年 近 年 来 上 述 症 状 持 续, 动 则 气 急 1 周 来 因 上 呼 吸 道 感 染 导 致 加 重 而 入 院 二 护 理 体 检 体 温 37, 脉 搏 100 次 / 分, 呼 吸 30 次
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第 八 章 葉 面 施 肥 要 領 植 物 葉 片 兩 面 有 很 多 氣 孔, 可 以 吸 收 噴 在 葉 片 上 溶 液 狀 態 的 肥 料, 也 可 直 接 透 過 葉 片 角 質 層 細 胞 壁 和 原 形 質 膜 而 進 入 細 胞 內 部, 這 就 是 葉 面 施 肥 葉 面 施 肥 為 土 壤 施 肥 以 外, 補 充 養 分 的 一 個 經 濟 有 效 的 辦 法 葉 面 肥 料 一
雅思写作应试教程（终稿）.doc
CIP ) /. :,2001.8 ( : 2) ISBN 7-5308 - 3032-3...- TV - 092 CIP ( 2001) 11633 : : : : 189 3 000 20 ( 0 22 ) 2730 631 4 * 787 10 92 1/ 16 2 4. 75 10 392 0 00 2 001 8 1 200 1 8 1 : 11 00 0 : 88. 00 1 8 8
第 1 頁 95 學 年 度 共 15 頁 第 壹 部 分 ( 佔 96 分 ) 一 單 選 題 ( 佔 72 分 ) 說 明 : 第 1 至 36 題 為 單 選 題, 每 題 均 計 分 每 題 選 出 一 個 最 適 當 的 選 項, 標 示 在 答 案 卡 之 選 擇 題 答 案 區 每 題
大 學 入 學 考 試 中 心 九 十 五 學 年 度 學 科 能 力 測 驗 試 題 - 作 答 注 意 事 項 - 考 試 時 間 : 100 分 鐘 題 型 題 數 第 壹 部 分 共 48 題 第 貳 部 分 共 20 題 作 答 方 式 用 2B 鉛 筆 在 答 案 卡 上 作 答, 修 正 時 應 以 橡 皮 擦 拭, 切 勿 使 用 修 正 液 選 擇 題 答 錯 不 倒 扣 參 考
第一章 总 则
佛 山 市 高 明 贝 斯 特 陶 瓷 有 限 公 司 年 生 产 800 万 平 方 米 墙 地 砖 改 扩 建 项 目 环 境 影 响 报 告 书 ( 报 批 稿 ) 建 设 单 位 : 佛 山 市 高 明 贝 斯 特 陶 瓷 有 限 公 司 评 价 单 位 : 荆 门 市 环 境 科 学 研 究 院 2015 年 5 月 第 2 页 第 3 页 目 录 前 言... 1 环 境 影 响 评 价
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目 录 上 篇 科 前 言 水 和 小 虫 的 故 事 2 科 未 解 之 谜 3 第 一 章 什 么 是 科 一 科 的 定 义 6 二 用 科 的 态 度 和 科 的 方 法 探 索 法 6 1 如 何 去 掉 大 豆 的 腥 气 和 羊 奶 的 膻 气 6 2 豆 腐 的 定 义 及 豆 制 品 的 三 个 公 式 7 3 用 科 的 态 度 和 科 的 方 法 探 索 法 9 第 二 章 什
个 危 险 因 素, 特 别 对 男 性 而 言, 可 能 是 由 于 乙 醇 酒 精 ) 对 成 细 胞 有 直 接 的 毒 性 作, 以 及 随 之 而 来 的 形 成 减 少 每 日 饮 酒 应 控 制 在 2 个 单 位 U) 内 1U 相 当 于 乙 醇 酒 精 )10g, 即 标 准 啤
个 危 险 因 素, 特 别 对 男 性 而 言, 可 能 是 由 于 乙 醇 酒 精 ) 对 成 细 胞 有 直 接 的 毒 性 作, 以 及 随 之 而 来 的 形 成 减 少 每 日 饮 酒 应 控 制 在 2 个 单 位 U) 内 1U 相 当 于 乙 醇 酒 精 )10g, 即 标 准 啤 酒 285ml 白 酒 30ml 葡 萄 酒 120ml 或 开 胃 酒 60ml 男 性 或 女
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1 要 闻 报 道 认 真 打 造 协 会 精 品 品 牌, 充 分 发 挥 老 教 授 们 的 积 极 作 用 中 国 老 教 授 协 会 今 年 第 二 季 度 连 续 举 办 三 个 专 家 论 坛 本 刊 讯 按 照 2009 年 1 月 12 日 中 国 老 教 授 协 会 六 届 五 次 常 务 理 事 会 通 过 的 协 会 2009 年 工 作 要 点, 协 会 与 有 关 单 位
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目 录 前 言... 1 1 总 则... 3 1.1 评 价 目 的... 3 1.2 编 制 依 据... 3 1.2.1 环 境 保 护 法 规 及 有 关 政 策... 3 1.2.2 地 方 性 政 策 法 规... 5 1.2.3 环 境 评 价 技 术 规 范... 6 1.2.4 建 设 项 目 有 关 资 料... 6 1.3 评 价 原 则 及 总 体 构 思... 6 1.3.1
第一章 总论
陕 西 盛 华 冶 化 有 限 公 司 30000 吨 金 属 钙 ( 一 期 15000 吨 金 属 钙 生 产 线 ) 建 设 项 目 前 言 前 言 一 项 目 由 来 金 属 钙 是 一 种 活 泼 的 轻 有 色 金 属, 在 工 业 领 域 中 的 应 用 广 泛, 随 着 现 代 科 学 技 术 的 不 断 发 展, 其 应 用 范 围 与 应 用 领 域 在 不 断 拓 展, 国 际
公报1a
概 述 2013 年, 是 贯 彻 落 实 党 的 十 八 大 精 神 全 面 推 进 生 态 文 明 建 设 的 开 局 年, 也 是 实 施 十 二 五 环 保 规 划 污 染 减 排 和 第 五 轮 环 保 三 年 行 动 计 划 的 关 键 年 本 市 坚 持 以 生 态 文 明 引 领 发 展 和 以 环 境 保 护 优 化 发 展 的 理 念, 深 入 开 展 党 的 群 众 路 线 教
Microsoft Word - Book 7 壯年行.doc
宇 宙 生 靈 學 修 行 者 第 七 部 壯 年 行 ( 疏 第 二 十 三 篇 一 九 九 集 至 二 零 七 集 合 訂 本 ) 作 者 : 妙 航 玄 昊 玄 鑫 整 理 目 錄 第 一 九 九 集 江 闊 雲 低 第 二 00 集 隨 遇 而 安 第 二 0 一 集 道 中 無 德 第 二 0 二 集 桃 花 流 水 第 二 0 三 集 源 遠 流 長 第 二 0 四 集 白 雲 古 寺
氏 名 所 属 医 師 又 は 薬 剤 師 登 録 番 号 第 号 登 録 年 月 日 麻 薬 施 用 者 免 許 証 番 号 第 号 登 録 年 月 日 麻 薬 施 用 者 免 許 がない 場 合 麻 薬 の 処 方 はできません
第 13 版 2013 年 5 月 横 浜 市 立 大 学 附 属 病 院 氏 名 所 属 医 師 又 は 薬 剤 師 登 録 番 号 第 号 登 録 年 月 日 麻 薬 施 用 者 免 許 証 番 号 第 号 登 録 年 月 日 麻 薬 施 用 者 免 許 がない 場 合 麻 薬 の 処 方 はできません 目 次 製 品 名 内 服 薬 1 外 用 薬 45 注 射 薬 65 一 般 名 109
目 录 第 一 章 实 验 室 安 全 管 理 概 论... 1 第 二 章 消 防 安 全... 2 第 三 章 电 气 安 全... 5 第 四 章 仪 器 设 备 安 全... 10 第 五 章 环 境 安 全... 12 第 六 章 化 学 品 放 射 性 物 品 安 全... 16 第 七
实 验 室 安 全 知 识 汇 编 编 委 会 主 任 : 郑 爱 榕 编 委 会 副 主 任 : 郭 祥 阳 陈 丽 丹 编 委 会 成 员 : 许 鹭 芬 张 朝 霞 郑 雪 红 林 智 勇 方 旅 平 责 任 编 辑 : 方 旅 平 责 任 校 对 : 黄 妙 琴 厦 门 大 学 海 洋 与 环 境 学 院 目 录 第 一 章 实 验 室 安 全 管 理 概 论... 1 第 二 章 消 防
女性美容保健（四）.doc
...1...4...6...8...9...10... 11...12...13...15...18...20...21...22...26...33...39...43 I II...47...52...53...59...60...63...65...68...69...71...73 1.5 ml...78...79...85...88...90...94...95...97...98...
第 一 节 体 液 的 正 常 代 谢 体 液 平 衡 包 括 : 细 胞 内 外 体 液 之 间 的 渗 透 压 平 衡 每 日 体 液 的 出 入 量 平 衡 ( 含 内 生 无 形 ) 体 液 中 电 解 质 分 布 的 平 衡 酸 与 碱 的 平 衡 等 四 大 平 衡 彼 此 之 间 相
第 二 章 外 科 体 液 代 谢 失 衡 病 人 的 护 理 许 昌 技 术 经 济 学 校 时 小 红 第 一 节 体 液 的 正 常 代 谢 体 液 平 衡 包 括 : 细 胞 内 外 体 液 之 间 的 渗 透 压 平 衡 每 日 体 液 的 出 入 量 平 衡 ( 含 内 生 无 形 ) 体 液 中 电 解 质 分 布 的 平 衡 酸 与 碱 的 平 衡 等 四 大 平 衡 彼 此 之 间
失眠防治（四）.doc
( 20 010010) 787 1092 1/32 498.50 4 980 2004 9 1 2004 9 1 1 1 000 ISBN 7-204-05940-9/R 019 1880.00 ( 20.00 ) ...1...3...4...5...8... 11...12...14...15...16...18...20...21...25...27...29...30...32 I ...32...33...36...37...38...41...44...46...49...54...55...58...60...65...66...69...70...73...84...85...88
或 者 不 符 合 法 定 形 式 的, 应 当 一 次 书 面 告 知 申 请 人 需 要 补 正 的 全 部 内 容 对 不 符 合 条 件 的, 应 当 书 面 告 知 理 由 车 辆 管 理 所 应 当 将 法 律 行 政 法 规 和 本 规 定 的 有 关 办 理 机 动 车 驾 驶 证
中 华 人 民 共 和 国 公 安 部 令 第 123 号 修 订 后 的 机 动 车 驾 驶 证 申 领 和 使 用 规 定 已 经 2012 年 8 月 21 日 公 安 部 部 长 办 公 会 议 通 过, 现 予 发 布, 自 2013 年 1 月 1 日 起 施 行, 第 五 章 第 四 节 自 发 布 之 日 起 施 行 公 安 部 部 长 孟 建 2012 年 9 月 12 日 机 动
D 慢 性 肾 炎 E 子 宫 蓄 脓 7. 支 气 管 肺 炎 的 X 线 影 征 是 A 黑 色 阴 影 B 密 度 均 匀 的 阴 影 C 大 小 不 一 的 云 絮 状 阴 影 D 边 缘 整 齐 的 大 块 状 阴 影 E 整 个 肺 野 出 现 高 密 度 阴 影 8. 以 波 幅 变
2010 年 国 家 执 业 兽 医 资 格 考 试 试 卷 ( 下 午 卷 ) 临 床 科 目 A 1 型 题 答 题 说 明 每 一 道 考 试 题 下 面 有 A B C D E 五 个 备 选 答 案, 请 从 中 选 择 一 个 最 佳 答 案, 并 在 答 题 卡 上 将 相 应 题 号 的 相 应 字 母 所 属 的 方 框 涂 黑 1. 检 查 浅 表 淋 巴 结 活 动 性 的 基
Ps22Pdf
, : 1. ( ),, 1015, 40,3, 1525 2., 6080, 100, 50, 3 25,, 3., 5058, 3040 ; 7885, 87100,,,,,,,,,, 1 ,,,,,,, 12, 4., 67.6, 43, 70,,,,,,,, 5., 70, 30,,, :,?, ;,,,,,,,,, :,,,,,,,,,,,,, 2 ,,, (,,,,,,, 1520, ),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
公司预计2010年日常关联交易的议案
证 券 代 码 : 600680 900930 证 券 简 称 : 上 海 普 天 沪 普 天 B 编 号 : 临 2016-010 上 海 普 天 邮 通 科 技 股 份 预 计 2016 年 日 常 关 联 交 易 的 公 告 本 公 董 事 会 及 全 体 董 事 保 证 本 公 告 内 容 不 存 在 任 何 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 者 重 大 遗 漏, 并 对 其 内 容
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天 锰 新 材 料 生 产 项 目 环 境 影 响 报 告 书 编 制 人 员 名 单 表 主 持 编 制 机 构 : 重 庆 市 环 境 保 护 工 程 设 计 研 究 院 有 限 公 司 编 制 主 持 人 职 ( 执 ) 业 资 登 记 ( 注 册 证 ) 姓 名 专 业 类 别 格 证 书 编 号 编 号 肖 骏 0008882 B31060080400 化 工 石 化 医 药 类 本 人
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证 券 代 码 :000798 证 券 简 称 : 中 水 渔 业 公 告 编 号 :2014-038 中 水 集 团 远 洋 股 份 有 限 公 司 第 五 六 届 董 事 会 第 三 次 会 议 决 议 公 告 本 公 司 及 董 事 会 全 体 成 员 保 证 信 息 披 露 内 容 的 真 实 准 确 和 完 整, 没 有 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 重 大 遗 漏 一 董 事
实验指导编写模板
顾 勇 编 著 2008 年 3 月 目 录 前 言 2 动 物 生 物 学 实 验 守 则 3 实 验 一 : 动 物 的 细 胞 和 组 织 及 多 细 胞 动 物 的 胚 胎 发 育 5 实 验 二 : 原 生 动 物 系 列 实 验 9 实 验 三 : 蛔 虫 和 环 毛 蚓 的 比 较 解 剖 13 实 验 四 :( 或 日 本 沼 虾 ) 和 棉 蝗 的 比 较 解 剖 与 观 察 18
水 平 考 试 管 理 部 门 办 理 报 名 登 记 手 续, 由 县 ( 市 区 ) 学 业 水 平 考 试 管 理 部 门 建 立 学 业 水 平 考 试 考 籍 ( 三 ) 在 云 南 省 借 考 的 外 省 户 籍 考 生, 经 本 人 申 请, 持 户 籍 等 相 关 材 料, 到 借
附 件 1: 云 南 省 普 通 高 中 学 业 水 平 考 试 考 籍 管 理 办 法 ( 试 行 ) 第 一 条 本 办 法 适 用 于 参 加 云 南 省 普 通 高 中 学 业 水 平 考 试 考 生 的 考 籍 管 理 第 二 条 普 通 高 中 学 业 水 平 考 试 考 籍 管 理 包 括 考 生 的 学 业 水 平 考 试 资 格 报 名 审 核 及 变 更 学 业 水 平 考 试
1247 1249 1270 120 121 . 11901268 . [] 89 1986 []. 1969 1969 . 1991 14 2 1985 45 1986 [] 1991 0 0 876 0 0 1285 36 0 0 2 44 1993 6 . 1991 . . .. 1982 2 2223 1984
Microsoft Word - 103鐵路佐級-國文(二)
103 年 特 種 考 試 交 通 事 業 鐵 路 人 員 考 試 試 題 等 別 : 佐 級 鐵 路 人 員 考 試 類 科 : 事 務 管 理 機 械 工 程 機 檢 工 程 電 力 工 程 電 子 工 程 養 路 工 程 科 目 : 國 文 ( 包 括 公 文 格 式 用 語 ) 一 單 一 選 擇 題 : 下 列 成 語, 沒 有 錯 別 字 的 選 項 是 : 手 屈 一 指 載 罪 立
背 景 资 料 水 浒 传 写 的 是 北 宋 宣 和 年 间 (1119~1121 前 后 ) 宋 江 等 聚 众 起 义 的 故 事 全 书 描 写 北 宋 末 年 以 宋 江 为 首 的 一 百 零 八 人 在 山 东 梁 山 泊 聚 义 的 故 事 故 事 在 宋 史 和 宋 人 笔 记 里
水 浒 传 作 者 简 介 施 耐 庵 ( 约 1296~1370) 中 国 元 末 明 初 作 家 名 子 安, 一 说 名 耳 兴 化 ( 今 江 苏 兴 化 县 ) 人, 原 籍 苏 州 相 传 施 耐 庵 是 水 浒 传 的 作 者 明 嘉 靖 十 九 年 (1540), 高 儒 百 川 书 志 载 : 忠 义 水 浒 传 100 卷 钱 塘 施 耐 庵 的 本 罗 贯 中 编 次 嘉 靖
19 20 21 22 23 24 25 产 品 出 口 企 业 当 年 减 半 缴 纳 企 业 所 得 税 的 核 准 外 商 投 资 企 业 财 产 转 让 收 益 分 期 计 入 应 纳 税 所 得 额 的 核 准 外 商 投 资 企 业 技 术 开 发 费 加 计 扣 除 的 核 准 财 政
序 号 批 次 项 目 名 称 设 定 依 据 或 备 注 1 第 一 批 2 (10 项 ) 3 2002.11 对 指 定 企 业 经 营 高 税 率 贵 重 产 品 出 口 退 税 的 对 列 名 企 业 销 售 以 出 顶 进 国 产 棉 退 ( 免 ) 税 的 对 列 名 炼 油 厂 销 售 以 产 顶 进 成 品 油 免 税 的 国 家 税 务 局 对 外 经 济 贸 易 部 关 于 明
学 习 贯 彻 中 央 尧 省 尧 市 纪 委 全 会 精 神 专 栏 中 国 共 产 党 第 十 八 届 中 央 纪 律 检 查 委 员 会 第 六 次 全 体 会 议 公 报 渊 2016 年 1 月 14 日 中 国 共 产 党 第 十 八 届 中 央 纪 律 检 查 委 员 会 第 六 次
内 部 资 料 注 意 保 存 渊 第 三 期 冤 中 共 六 盘 水 市 委 讲 师 团 编 2016 年 3 月 15 日 学 习 贯 彻 中 央 尧 省 尧 市 纪 委 全 会 精 神 专 辑 音 学 习 贯 彻 中 央 尧 省 尧 市 纪 委 全 会 精 神 专 栏 淫 中 国 共 产 党 第 十 八 届 中 央 纪 律 检 查 委 员 会 第 六 次 全 体 会 议 公 报 渊 2 冤 淫
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