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1 克 肺 癆 結 核 菌 感 染 診 斷 試 管 組 QuantiFERON -TB Gold In-Tube 中 文 操 作 說 明 供 體 外 診 斷 使 用 使 用 前 請 務 必 詳 閱 原 廠 之 使 用 說 明 書 並 遵 照 指 示 使 用 禾 伸 堂 生 技 股 份 有 限 公 司 114 台 北 市 內 湖 區 環 山 路 二 段 56 號 1 樓 Tel: Fax:

2 及 及 及 及 及 至 克 肺 癆 結 核 菌 感 染 診 斷 試 管 組 衛 署 醫 器 輸 字 第 號 使 供 前 體 請 外 務 診 必 斷 詳 使 閱 用 原 廠 之 使 用 說 明 書 並 遵 照 指 示 使 用 QuantiFERON -TB Gold In-Tube 外 利 效 反 用 能 應 模 所 擬 蛋 產 白 生 質 的 去 干 刺 擾 激 素 肝 素 化 之 全 血 中 的 細 胞, 再 經 由 酵 素 聯 結 免 疫 吸 附 分 析 法 測 定 對 該 胜 肽 抗 原 體 For In Vitro Diagnostic Use 1. -γ, 是 用 一 以 種 鑑 間 定 接 測 檢 試 測 者 結 是 核 否 菌 受 感 到 染 結 核 含 菌 結 的 核 感 病 染 的 測 試, 並 可 結 合 風 險 評 估 放 射 攝 結 影 及 其 他 醫 療 與 診 斷 上 評 估 QuantiFERON 剛 核 產 病 品 是 敘 一 述 種 具 傳 染 性 的 疾 病, 係 由 結 核 菌 複 合 有 機 體 結 核 分 枝 桿 菌 -TB Gold IT ( ) 2. [ (M. tuberculosis) 牛 分 枝 桿 菌 況 (M. bovis) 非 洲 分 枝 桿 菌 所 致 一 般 是 從 呼 吸 性 結 核 病 患 者 藉 由 空 氣 飛 沫 傳 染 至 新 宿 主 及 維 被 持 良 傳 好 染 病 況 病 患 而 從 潛 感 伏 染 性 到 結 發 核 病 菌 的 感 時 染 間, 短 則 幾 週 長 可 幾 個 月, 但 大 部 分 被 患 者 還 算 能 診, 到 斷 結 預 核 防 菌 的 會 方 潛 病 法 伏 在 對 醫 那 結 療 些 核 方 已 菌 式 受 素 感 結 的 染 核 皮 的 菌 膚 患 敏 素 者 感 皮 身 會 膚 上 測 在 數 試 感 月 染 後 甚 至 數 週 年 產 之 生 後 才 然 發 而 是 病 一 是 有 種 之 診 些 非 前 斷 受 傳 醫 感 學 染 性 診 的 斷 主 病 無 上 要 患 症 唯 對 目 狀 一 結 的 可 核 是 情 以 菌 顧 (M. africanum)] (latent tuberculosis infection, LTBI) 雖 素 像 是 沒 感 有 染 反 結 應 核 菌 的, 的 包 病 括 患 之 那, 後 些 卻 免 顯 非 疫 示 結 功 對 核 能 結 菌 受 核 複 到 菌 合 大 素 體 範 產 之 圍 生 其 阻 敏 他 礙 感 分 或 即 枝 甚 出 桿 至 現 菌 未 陽 感 有 性 染 免 結 疫 果 或 受 ), 其 阻 他 包 情 不 括 況 確 接 的 定 種 人 因 卡 素 介 相 的 苗 反 病 地 人, 有 些 不 LTBI (tuberculin skin test, TST) LTBI 2~10 疫 否 然 有 其 受 他 感 器 染 的 官 報 系 告 統 也 而 結 可 核 能 是 病 被 一 可 感 反 種 由 染 應 利, 病 的 用 但 史 測 模 試 擬 生 分 必 理 所 枝 須 有 桿 從 放 的 菌 結 射 蛋 核 白 病 組 菌 質 中 織 株 的 被 及 胜 識 分 大 肽 別 枝 部 抗 出 桿 份 原 來 菌 的, 學 非 並 通 的 結 檢 常 發 核 測 是 現 分 其 看 來 枝 所 肺 診 桿 引 部 斷 菌 發 及 並 細 下 不 胞 呼 存 媒 吸 在 介 道 免 是 ( (bacilli Calmette-Guérin, BCG) LTBI 用 患 會 於 者 產, 生 其 並 血 分 液 泌 中 細 通 胞 常 激 有 素 淋 巴 亦 球 即 這 能 三 辨 種 認 蛋 抗 白 原 質 是, 來 但 自 結 核 菌 複 合 有 機 體 或 是 其 他 分 枝 桿 菌 除, 外 這 種 受 辨 感 識 染 過 的 程 QuantiFERON -TB Gold IT (Cell Mediated Immune, CMI) BCG ESAT-6 CFP-10 TB7.7(p4) M. kansasii M. szulgai M. marinum IFN-γ 的 抗 原 而 是 檢 模 測 擬 與 後 續 定 量 便 成 為 本 測 蛋 試 白 的 質 基 的 礎 胜 肽 多 項 研 究 證 1 有 結 時 實 這 核, 些 病 有 胜 或 可 肽 無 能 會 抗 減 原 能 少 風 刺 險 激 者 感, 則 染 反 不 結 應 會 核 產 當 生 病 反 患 應 之 感 細 胞 產 生 的 反 應, 但 在 未 感 染 者 或 接 種 卡 介 苗 但 無 IFN-γ QuantiFERON -TB Gold IT ESAT-6 CFP-10 TB7.7(p4) T IFN-γ LTBI 1-2 染 下 然 列 而 分, 枝 以 桿 減 菌 弱 時 免, 疫 則 可 方 能 式 對 治 療 或 有 免 疫 功 能 下 降 的 病 況 斷 反 出 結 應, 核 暨 因 病 可 為 以 不 這 檢 過 些 測, 蛋 白 質 的 基 因 會 在 出 現 IFN-γ ESAT-6 CFP-10 TB7.7(p4) M. kansasii M. szulgai M. marinum 1,2 QuantiFERON -TB Gold IT LTBI, 其 他 分 對 枝 於 桿 發 菌 病 患 者 否 感 染 結 核 菌 複 合 體 的 診 斷 亦 有 所 幫 助 陽 性 結 果 代 表 診 檢 否 罹 患 結 核 病 其 他 醫 學 或 診 斷 上 的 如 評 估 是 必 要 的 的 感 染, 也 可 能 導 致 陽 性 結 果 為 了 確 認 或 排 除 是 後 測 取 原 出 理 血 漿, 並 測 定 對 胜 系 測 肽 統 試 抗, 分 原 二 係 有 使 用 特 殊 的 採 血 管 來 採 集 全 血 將 血 液 連 同 試 管 培 養 小 時 ( 階 反 :M. 段 應 進 而 產 生 之 kansasii) 行 首 先, 將 含 全 量 血 採 集 至 每 個 採 血 採 管 其 QuantiFERON 血, 檢 管 包 測 必 結 括 對 須 果 無 照 在 抗 管 採 原 可 及 結 核 菌 抗 原 管, 或 加 選 用 之 -TB 血 作 後 為 對 本 對 照 管 Gold 小 測 照 試 的 陽 性 對 照 當 無 法 肯 定 測 試 者 的 免 疫 狀 況 時, 加 更 能 擔 保 IT 時 管 內 亦, 可 盡 作 快 為 於 是 否 正 培 確 養 採 血 在 及 培 養 的 小 對 時 照 的 培 養 後, 將 試 管 離 心, 取 16 出 血 24 漿, IFN-γ QuantiFERON -TB Gold IT QuantiFERON -TB Gold (Nil) (TB) Mitogen Mitogen Mitogen 16 7 C 測 管 Mitogen

3 Mitogen 之 條 :0594 盤 :0590 :059 :0590 Nil 並 其 以 所 刺 原 激 管 的 測 血 漿 樣 反 本 應 則 若 作 顯 為 著 每 高 位 量 測 試 對 者 照 的 之 陽 性 對 照 值, 則 視 為 結 核 反 菌 應 感 較 染 陽 性 若 有 加 抗 管 原, 對 無 動 樣 反 力 本 中 應 的 者, 背 其 景 結 值 採 果 血 異 則 管 嗜 視 充 性 為 血 抗 不 或 體 確 混 效 定 合 應 不 這 適 或 種 當 非 現 特 象 或 異 可 因 能 病 發 人 生 的 在 淋 因 巴 球 無 不 管 法 足 產 不 正 的 確 值 所 的, 致 採 會 集 而 樣 降 抗 本 低 原 可 淋 調 巴 整 球 血 的 液 活 ELISA 若 有 加 的 結 果 判 讀 中 被 減 去 IFN-γ 檢 測 所 需 液 時 試 間 管 培 養 小 含 時 多 個 樣 本 位 檢 測 試 所 需 大 時 間 小 預 時 估 如 下 : 型 號 規 格 力 部 盤 分 需 少 增 小 時 分 鐘 ) 及 對 照 抗 原 採 血 灰 管 型 號 註 : 亦 有 紅 紫 其 他 組 合 可 供 選 擇 : 支 對 照 對 照 採 支 血 管 抗 型 原 號 採 血 管 型 號 支 量 色 型 號 晶 稀 乾 釋 燥 人 倍 濃 縮 標 軛 準 合 盤 小 瓶 條 槽 受 濃 質 縮 之 清 洗 緩 衝 未 提 供 之 材 素 停 止 養 料 器 及, 設 不 備 2 瓶 拋 棄 離 式 振 子 吸 盪 水 取 器 或 尖 蒸 端 餾 之 水 已 校 正 的 多 可 調 爪 式 容 微 量 微 量 分 量 吸 管, 可 遞 容 量 量 盤 清 判 洗 讀 儀, 建 裝 議 使 用 自 動 濾 清 鏡 洗 器 ) 採 儲 血 存 管 : 參 考 濾 鏡 組 抗 置 素 : 原 個 月 內 套 組 受 儲 質 存 液 須 避 免 陽 時 光, 直 有 射 效 期 限 為 製 造 日 起 年 內 15 抗 的 定 含 於 對 生 低 測 IFN-γ (IU/mL) TB IFN-γ Nil Mitogen Mitogen (< 0.5 IU/mL), 且 照 測 的 IFN-γ IFN-γ 此 中 於 血 : 測 試 Nil IFN-γ TB ( ) IFN-γ QuantiFERON -TB Gold IT ( 7 C 16~24 ELISA: 個 者 約 型 人 每 多 於 加 及 1 ELISA (28-44 ) 對 1 抗 照 原 1 10~15 對 照 管 蓋 蓋. QuantiFERON -TB Gold In-Tube TB ( 001) 1. Nil ( ) 套 照 管 TB ( ) 100. 微 管 Mitogen ( ) 綠 組 Nil +100 TB ( 0201) 100 凍 盤 類 品 凹 Mitogen ( 0201) ELISA 劑 ( 0201) 1. 酵 倍 之 ( 液 液 劑 ) 2 x 12 x 8 2. IFN-γ 1. 1 x 0mL x 0.mL x 100mL 有 6. 1 x 0mL 培 需 7. 1 x 15mL 送 的 微 去 器 7 C 有 CO 及 µL µL 2L ( 套 450nm nm 請 4-25 C 酵 當 於 4-25 C ELISA 2-8 C 於 2-8 C 對 及 TB Mitogen

4 光 或 ( :AFB 及 已 配 製 有 與 關 未 如 儲 使 何 存 用 配 之 製 試 劑 時 :, 請 已 操 的 作 套 步 組 驟 標 之 準 第 品 二 可 階 維 段 持 請 旦 配 製 套 後 組, 標 準 未 使 品 用 的 配 製 日 倍 期 濃 縮 軛 合 劑 必 須 再 至 存 多 放 個 月 註 明 軛 合 液 的 配 製 日 期 軛 合 液 必 須 於 配 製 小 時 內 使 並 用 於 個 月 內 使 用 警 告 警 告 及 注 工 意 作 事 強 項 清 洗 緩 衝 液 可 於 室 溫 儲 存 至 週 如 : 檢 體 在 陰 發 展 仍 不 反 排 應 除 前 有 取 感 得 染 ) 結 同 核 時 菌 患 或 有 結 會 核 影 病 響 的 免 可 疫 能 功 能 : 偽 的 陰 疾 性 病 結 果 經 有 靜 可 脈 能 穿 起 刺 因 的 於 採 感 血 染 操 階 會 不 正 確 測 定 的 操 作 不 切 正 勿 確 視 為 或 判 其 定 他 感 免 染 疫 結 學 核 上 菌 的 的 變 唯 數 一 或 絕 對 性 依 據 測 定 時 不 正 確 的 操 作, 可 作 檢 造 測 成 結 偽 陽 果 呈 性 陽 反 性 應 時, 應 進 一 步 進 行 開 放 性 結 核 病 的 醫 學 及 診 斷 評 估 如 抹 片 及 培 養 胸 能 能 然 因 所 感 有 菌 株 及 大 部 份 已 知 的 非 結 核 分 枝 使 桿 檢 菌 測 並 結 不 果 存 呈 陽 性 若 懷 疑 有 這 類 的 感 染, 則 但 應 可 注 意 做 事 其 項 它 測 試 加 僅 供 體 外 診 斷 使 用 膚 配 接 戴 觸 眼 而 罩 對 人 手 體 套 受 造 質 成 危 害, 造 含 成 皮 膚 及 四 眼 甲 睛 基 刺 聯 痛 苯, 以 及 誘 導 突 變 須 視 為 潛 會 在 藉 致 由 癌 攝 物, 食 在 使 吸 用 入 時 及 需 皮 有 使 睛 用, 害 時 請 物 需 立 質 : 配 即 酵 戴 以 素 眼 大 停 罩 量 標 止 清 準 液 手 水 品 沖 套 及 包 洗 穿 並 著 儘 一 速 般 就 實 醫 會 驗 藉 室 由 的 攝 防 食 護 眼 衣 睛 物 接 觸 如 果 皮 酵 膚 素 接 停 觸 止 及 溶 吸 液 入 不 而 慎 對 接 人 觸 體 到 造 成 危 或 害 眼,,5,5 請 處 局 配 理 部 戴 血 抗 手 液 菌 套 時, 做 及 請 為 穿 視 某 著 其 些 一 為 試 般 潛 劑 實 在 中 驗 的 室 倍 傳 保 的 濃 染 存 防 縮 源 劑 護 軛 衣 合 誤 請 物 劑 食 參 閱 如 吸 處 果 入 理 不 血 慎 或 液 誤 皮 之 食 膚 相 可 接 關 能 規 觸 會 範 皆 不 有 舒 可 服 能, 引 或 發 可 中 能 毒 造 成 皮 膚 刺 痛 綠 遵 用 色 稀 照 前 混 釋 本 試 合 或 仿 劑 使 含 單 瓶 操 有 用 已 來 作 正 有 自 步 常 任 其 驟 小 何 進 它 鼠 破 行 批 血 損 測 次 清 或 定 和 裂 可 漏 酪 能 現 蛋 會 象 白 套 獲 的, 組 套 得 可 組 錯 能, 誤 誘 請 結 發 勿 果 過 使 敏 請 用 反 於 應 使, 用 應 前 避 仔 免 細 接 研 觸 讀 皮 膚 據 勿 當 使 地 用 法 已 規 過 期 規 之 定 來 結 丟 核 棄 菌 胜 未 肽 使 及 用 對 的 照 試 抗 劑 原 及 或 生 物 樣 品 本 測 檢 試 體 會 採 使 集 用 及 到 處 下 理 列 採 血 管 : 套 組 灰 由 紅 紫 蓋 選 擇 使 為 採 於 血 了 抗 後 得 靜 到 原 脈 最 經 小 穿 過 佳 時 刺 結 乾 內 採 果 燥 集 附, 盡 測 著 應 快 試 於 遵 移 者 守 採 血 下 液 管 列, 的 步 並 內 驟 培 直 : 層 養 接 上 器 於, 中 每 因 培 支 此 養 採 充 血 分 管 混 各 合 充 試 管 內 含 物 血 與 液 血 液 是 必 要 的 採 血 管 必 須 在 )( 16 當 一 於 見 的 C 警 具 度 的 100 (working strength) (working strength) 段 出 4. 當 雖 部 ( CMI 染 的 而 僅 X ) BCG M. kansasii M. szulgai M. marinum 有 及 含 4, H 2 SO 未 處 使 局 :IFN-γ 100 綠 的 檢 根 請 是 對 ELISA 抗 照 原 對 照 蓋 用 ELISA Nil ( ) 以 至 2. TB ( ). Mitogen ( ) 7 C 1. 胺 (Tetramethylbenzidine), 後 於 2-8 C, 6 入 1mL 在 ESAT-6 CFP-10 多 2 TB7.7(p4),

5 之 為 QuantiFERON 為 為 由 採 於 試 管 在 抽 時 相 對 較 慢, 請 讓 採 血 管 持 續 與 針 頭 連 接 秒 直 至 試 管 顯 示 完 全 充 滿 血 若 液 以 血, 並 旁 確 保 的 所 黑 抽 線 的 處 表 量 示 正 為 確 容 量 採 血 管 已 被 確 認 所 採 的 血 量 範 圍 1mL 2-1mL -TB Gold mL 蝴 蝶 針 若, 採 在 血 後 的 容 量 不 太 接 近 指 採 示 血 線 管 處 採, 建 前 議, 重 必 新 須 採 先 血 使 用 管 以 確 保 所 連 適 接 的 管 路 充 滿 液 採 充 血 當 分 為 地 管 確 標 必 上 保 示 須 下 試 振 管 搖 內 管 採 含 血 物 管 與 血 小 液 次 時 完, 內 全, 以 混 盡 確 合 保 快, 整 移 充 至 個 分 試 地 管 混 內 合 層 是 都 被 要 血 的 液 覆 蓋 1mL 培 養 器 中 培 養 切 勿 冷 藏 或 冷 凍 血 液 樣 本 QuantiFERON -TB Gold purge 第 一 操 作 若 步 未 驟 能 在 採 血 後 立 即 進 行 培 養, 則 培 養 前, 採 血 管 必 須 再 重 複 混 合 步 驟 階 段 血 液 培 養 及 血 漿 取 得 C 請 已 未 6. 步 見 提 供 之 材 料 及 設 備 採 血 管 請 見 型 號 及 規 格 如 型 號 及 規 格 QuantiFERON 將 驟 採 血 檢 體 採 集 及 處 理 所 述, 若 未 能 在 採 血 後 立 即 進 行 培 養, 則 培 養 前, 採 管 必 須 再 重 複 混 合 步 -TB Gold IT (. ) 管 以 直 立 方 式, 於 於 離 心 培 前 養 至 多 可 於 小 時 培 養 放 器 置 需 天 或 濕 氣 取 培 養 結 束 後, 採 血 管 以 轉 速 離 心 分 鐘, 分 隔 出 血 球 細 胞 及 血 漿 後, 吸 2. 若 出 未 血 亦 立 漿 之 可 即 血 不 進 漿 若 經 未 行 樣 離 出 本 心 可 現 就 直 分 吸 接 隔 取 檢 加, 血 測 入 則, 漿 所 採, 血 但 管 在 須 吸 以 取 更 時 高 必 轉 須 速 特 再 別 次 注 離 意 心 不 要 擾 7 C 血 附 漿 的 樣 本 可 直 接 盤 中 離, 心 尤 管 其 形 是 式 利 或 用 移 自 動 CO 至 2 其 血 他 球 容 器 工 中 作 儲 檯 存 來 檢 如 測 : 時 取. 7 C 2-27 C 4. 7 C RCF(g) 15 第 二 放 入 微 量 盤 凹 槽 或 架 好 之 微 量 管 凹 槽 或 共 階 血 段 漿 可 人 於 類 儲 存 至 多 週, 於 以 下 管 建 為 議 一 低 組 於 內, 並 則 密 能 封 儲 以 存 免 更 濺 長 出 時 或 間 蒸 發 5. ELISA ELISA 6. ELISA > 150µL (96 96 ) 請 已 未 2-8 C 4-20 C ( -70 C) 步 見 提 驟 供 型 之 號 材 及 料 規 及 格 設 備 套 見 型 號 及 規 格 IFN-γ ELISA QuantiFERON 先 -TB Gold ELISA. ) 留 要 從 倍 分 濃 鐘 縮 來 軛 框 達 合 架 到 劑 取 溫 以 出 度 外 此 平 的 次 衡 其 還 他 用 全 不 部 到 血 的 漿 微 樣 量 本 盤 及 條 試, 劑 再, 回 必 封 須 於 於 鋁 測 箔 定 袋 前 內 調, 整 送 至 室 冰 溫 箱 存 放 (22 ± 5 C), 且 至 少 依 圖 剩 下 餘 微 的 測 微 量 量 盤 管 盤 條 及 使 條 圖 中 用 至 測 少 有 管 一 的 條 建 要 議 供 標 置 準 圖 品 ) 使 此 用 次, 使 其 用 他 後 的, 則 保 必 留 須 微 足 量 夠 盤 此 框 次 架 測 與 定 蓋 所 子 有 供 測 回 試 封 者 存 之 放 用 之 見 套 注 製 組 標 意 溫 : 準 和 不 品 混 品 標 同 合 籤 將 批 以 所 用 次 防 綠 示 的 起, 色 標 泡 在 稀 準, 凍 釋 品 並 晶 劑 所 確 乾 指 保 燥 示 完 之 的 全 人 配 溶 類 製 解 水 量 配 會 製 標 不 後 準 同 的 品 標 小 準 瓶 品 內 溶 加 液 入 指 即 示 套 量 組 的 標 去 準 離 品 子 濃 水 度 或 為 蒸 餾 水 來 配 ( 2A 2 2B. IFN-γ ( ) 8.0 IU/mL 這 些 標 準 液 在 標 檢 準 測 液 時 必 須 多 組 測 定 稀 釋 至 成 標 少 準 同 個 液 時 濃 測 度 一 組 組 ) 的 標 準 標 液 準 液 請 見 圖 標 只 準 有 液 為 (GD) 4 IFN-γ 1 S1( 1) 4 IU/mL S2( 2) 1 IU/mL S( ) 0.25 IU/mL S4( 4) 0 IU/mL( GD) ( 2 組 請 (

6 分 加 標 示 組 標 準 液 之 建 議 稀 釋 步 驟 別 加 入 根 試 管 的 為 2 a. 4 由 入 套 吸 組 取 標 準 品 加 於 b. 150µL GD S1 S2 S S4 c. 150µL S1, 並 充 分 混 合 d. S1 50µL S2, e. S2 50µL S, 並 充 分 混 合 圖 1: 只 含 標 有 準 液 稀 的 釋 示 意 則 圖 為 零 標 準 品 f. GD S4 分 加 由 a. 只 b. c. d. e. f. g. 別 標 加 示 入 組 標 根 的 準 試 液 管 的 之 為 於 建 議 稀 釋 步 驟 4 S1 S2 S S4 試 管 試 管 只 入 含 套 有 吸 組 取 標 的 準 品 加 則 於 150µL GD S1 210µL GD S2 S S4 150µL S1, 並 充 分 混 合 S1 70µL S2, S2 70µL S, 為 零 標 並 準 充 品 分 混 合 GD S4 在 每 次 測 定 前, 必 須 當 場 製 作 新 的 稀 釋 標 具 泡 凍, 晶 並 乾 確 保 燥 之 軛 合 劑 倍 完 全 濃 溶 縮 解 軛 合 劑 小 瓶 內 加 入 的 去 離 子 水 或 蒸 餾 水 來 配 製 溫 和 混 合 以 防 起 套 工 組 作 標 強 準 度 品 的 軛 合 液 乃 依 標 表 準 液 指 示 1, 視 所 需 的 標 測 準 定 液 量, 2 由 綠 色 稀 標 釋 準 劑 液 製 而 成 去 稀 釋 倍 濃 標 縮 準 軛 液 合 4 劑 配 8.0 IU/mL 4.0 IU/mL 1.0 IU/mL 0.25 IU/mL 0 IU/mL ELISA ( 只 有 GD) 表 1: 軛 合 液 之 配 製 4. 微 量 盤 100 條 數 倍 濃 縮 軛 合 劑 0.mL 綠 色 稀 釋 劑 µL 1.0mL 15µL 1.5mL 4 20µL 2.0mL 5 25µL 2.5mL 6 0µL.0mL 7 5µL.5mL 充 分 但 溫 和 地 以 防 起 泡 8 40µL 4.0mL 製 後, 立 9 即 將 未 使 用 的 45µL 倍 濃 縮 軛 合 劑 再 存 放 4.5mL 只 能 使 用 綠 回 10 色 稀 釋 劑 來 配 製 50µL 5.0mL 測 定 前, 血 漿 11 應 混 合 均 勻 以 確 保 產 55µL 生 之 能 均 勻 分 5.5mL 用 多 爪 式 微 量 散 12 分 吸 管 將 新 配 60µL 製 具 工 作 強 度 的 軛 合 6.0mL 液 C 同 議 樣 配 用 置 多 圖 ) 爪 式 最 微 後 量, 分 再 吸 加 管 入, 標 再 準 將 液 血 漿 至 樣 本 各 加 至 上 述 微 在 加 量 樣 至 盤 本 所 之 內 附 適 的 當 凹 槽 中 微 見 量 圖 盤 凹 槽 及 中 的 建 5. IFN-γ 6. 50µL ELISA 7. ( 2A 2B µL

7 以 以 圖 2A: 排 管 測 定 樣 本 之 建 議 配 置 圖, 每 盤 位 2 (Nil + TB) A 1N 5N 9N 1N 17N S1 S1 25N 29N N 7N 41N B 1A 5A 9A 1A 17A S2 S2 25A 29A A 7A 41A C 2N 6N 10N 14N 18N S S 26N 0N 4N 8N 42N D 2A 6A 10A 14A 18A S4 S4 26A 0A 4A 8A 42A E N 7N 11N 15N 19N 21N 2N 27N 1N 5N 9N 4N 圖 標 樣 準 本 液 對 照 標 血 準 漿 液 樣 本 標 準 液 抗 原 血 漿 標 準 液 F A 7A 11A 15A 19A 21A 2A 27A 1A 5A 9A 4A G 4N 8N 12N 16N 20N 22N 24N 28N 2N 6N 40N 44N H 4A 8A 12A 16A 20A 22A 24A 28A 2A 6A 40A 44A S1( 1) S2( 2) S( ) S4( 4) 1N( 1 Nil );1A( 1 TB ) 2B: 排 管 測 定 樣 本 之 建 議 配 置 圖, 每 盤 位 (Nil + TB + Mitogen) A 1N 1A 1M S1 S1 S1 1N 1A 1M 21N 21A 21M B 2N 2A 2M S2 S2 S2 14N 14A 14M 22N 22A 22M C N A M S S S 15N 15A 15M 2N 2A 2M D 4N 4A 4M S4 S4 S4 16N 16A 16M 24N 24A 24M E 5N 5A 5M 9N 9A 9M 17N 17A 17M 25N 25A 25M 用 標 準 液 標 準 標 準 液 標 準 液 F 6N 6A 6M 10N 10A 10M 18N 18A 18M 26N 26A 26M 以 樣 本 對 照 血 漿 樣 本 抗 原 血 漿 樣 本 對 照 血 漿 G 7N 7A 7M 11N 11A 11M 19N 19A 19M 27N 27A 27M H 8N 8A 8M 12N 12A 12M 20N 20A 20M 28N 28A 28M 在 微 蓋 量 子 盤 覆 振 蓋 盪 器,, 將 並 軛 於 室 液 溫 與 血 漿 樣 本 或 培 標 養 準 液 充 分 分 混 鐘 合 分 鐘 S1( 1) S2( 2) S( ) S4( 4) 1N( 1 Nil );1A( 1 TB );1M( 1 Mitogen ) 每 培 個 之 凹 養 比 槽 期 時 例 間 需, 稀 可 要 微 釋 進 量 並 行 盤 充 不 分 可 具 混 緩 讓 工 合 衝 陽 作 本 液 光 強 測 的 直 度 試 配 射 的 所 製 清 提 洗 供 將 緩 的 衝 液 倍 來 倍 濃 清 濃 縮 洗 縮 之 至 清 少 洗 緩 衝 液, 建 與 足 議 去 夠 使 離 去 用 子 配 微 水 製 量 或 盤 蒸 餾 的 水 清 器, 洗 進 以 緩 行 衝 比 液 (22 ± 5 C) 120 ± 將 徹 底 清 洗 對 本 測 定 的 效 能 極 為 重 要 需 確 保 每 個 凹 槽 在 各 次 清 洗 時, 能 完 全 被 清 洗 緩 衝 液 充 滿 酵 至 頂 建 議 每 次 清 洗 間 隔, 能 保 持 至 少 有 秒 的 浸 泡 期 20 2L 以 微 放 量 流 盤 貯 面 水 向 槽 下 須 添 於 加 吸 標 收 準 拭 實 巾 驗 上 室 輕 消 敲 毒, 劑 以, 去 並 除 建 殘 立 餘 有 清 關 洗 去 滌 除 緩 潛 衝 在 液 傳 染 然 物 後 質 在 污 每 染 個 之 凹 處 槽 理 內 程 加 序 入 400µL 6 培 蓋 素 子 受 覆 質 蓋 液, 並 用 微, 量 並 於 盤 振 室 盪 溫 器 充 分 混 合 培 養 分 鐘 在 培 養 時, 微 量 盤 不 可 讓 陽 光 直 射 100µL 個 停 凹 養 本 止 槽 步 反 的 驟 分 光 應 必 鐘 密 後 須 度 的 與, 步 分 在 驟 鐘 每 個 內 凹, 酵 槽 使 素 內 用 受 加 裝 質 有 入 液 的 添 加 酵 濾 用 素 鏡 相 停 及 同 止 順 液 序 並 且 混 以 合 近 參 乎 考 相 濾 同 鏡 速 的 度 微 添 量 加 盤 至 判 各 讀 凹 儀 槽, 來 測 量 每 12. (22 ± 5 C) µL nm nm (Optical Density, OD) 此 除 軟 使 計 體 用 算 為 及 品 結 管 果 分 判 析 讀, 能 提 供 分 測 析 定 軟 體 產 分 是 生 析 用 標 軟 來 準 體 分 品 外 析 曲, 原 線 結 始 果 資 及 亦 料 各 可 與 樣 根 計 本 據 算 的 下 結 測 列 果 定 方, 結 法 可 果 進 向 行 原 請 判 廠 詳 讀 見 : 結 果 判 取 讀 得 部 分 7. 計 標 若 QuantiFERON 算 準 未 每 品 使 個 曲 用 微 線 量 的 產 生 盤 -TB 中 各 Gold 濃 度 軟 體 IT 標 準 液 所 測 得 之 平 均 值 Cellestis QuantiFERON -TB Gold IT ( QuantiFERON -TB Gold ) OD

8 值 圖 以 利 這 品 平 之 用 此 值 均 ) 標 準 藉 對 品 回 數 曲 歸 值 線 分 從 析 每, 軸 個 求, 樣 出 本 標 準 液 之 值 最, 佳 濃 來 回 推 歸 定 每 標 個 準 對 血 品 數 漿 曲 值 樣 線 本 ) 軸, 濃 此 處 省 略 零 標 準 建 些 議 計 所 算 使 可 用 的 使 軟 用 微 體 必 量 須 盤 判 能 夠 讀 計 儀 所 算 回 附 歸 的 軟 分 體 析, 以 變 及 異 標 差 準 係 試 算 表 或 及 統 相 計 關 軟 係 如 完 成 OD 檢 為 品 所 測 了 之 結 品 果 的 管 得 的 結 的 準 果 平 確 測 均 度 定 取 可 決 值 信 於,: 是 必 否 須 產 生 準 確 標 準 品 曲 線 因 此, 在 判 讀 樣 本 結 果 前, 必 須 先 檢 驗 由 標 準 標 準 及 標 準 液 多 組 測 定 與 的 必 須 若 測 定 所 未 有 符 標 合 準 前 液 述 之 條 平 件 均, 吸 光 析 該 值 軟 所 體 定 計 可 為 算 計 無 而 算 效 得 這 其 且 的 些 平 必 相 品 均 須 關 管 值 再 係 參 之 重 數 差 新 並, 執 提 不 行 必 供 可 須 報 超 告 過 光 密 度 單 位 結 果 零 若 判 平 標 讀 準 均 品 綠 色 稀 釋 劑 則 的 必 平 須 均 檢 查 值 微, 量 必 盤 須 測 的 結 果 是 依 下 清 列 洗 條 步 件 驟 來 注 意 : 當 利 用 本 測 試 去 診 斷 或 排 除 罹 患 結 核 病 及 評 估 是 否 判 讀 : 當 只 用 醫 學 與 管 診 時 斷 : 上 的 發 現 等 資 訊 一 同 列 入 考 慮 的 可 能 性 時, 須 將 流 行 病 學 病 史 抗 和 原 減 去 值 本 結 陰 測 果 試 不 太 可 能 感 判 染 讀 驗 中 和 任 一 組 或 兩 若 組 重 的 複 結 試 果 結 核 菌 仍 判 為 讀 陽 有 性 陽, 性 則 反 該 應 測 試 者 應 被 陽 性 很 可 能 感 染 結 核 菌 不 像 有 感 染 結 核 菌, 但 初 次 結 果 何 呈 陽 性 反 應 者, 該 不 原 確 始 定 血 漿 確 樣 定 本 必 抗 須 原 再 的 重 反 複 應 進 結 行 果 本 不 兩 組 ) 若 重 複 試 驗 中 有 任 一 組 或 兩 組 的 結 果 仍 為 陽 性, 則 該 測 試 者 應 被 判 讀 有 陽 試 驗 反 應 同 時 測 所 臨 能 床 原 試 因 驗 請 中, 少 技 術 資 訊 互 關 測 得 係 濃 度, 其 幅 度 的 不 測 會 試 與 者 感 染 階 段 對 或 照 程 度 免 疫 反 應 程 度 或 可 能 進 展 至 開 放 性 疾 病 有 相 ( 為 之 液 度 線 為 作 數 的 體 數 度 y IFN-γ (IU/mL) x log (e) -log (e) ( ( OD IFN-γ (IU/mL) 來 (:Microsoft Excel) (%CV) (r) 讓 由 標 液 均 液 須 之 ELISA 1 OD 的 1 2 OD %CV, 須 15% 過 零 數 4 OD (r), 須 0.98 均 品 劑 分 均 須 QuantiFERON -TB Gold ( ) OD OD > 0.150, 則 檢 用 管 有 抗 去 QuantiFERON -TB Gold IT LTBI 值 Nil + TB Nil TB Nil 性 (IU/mL) (IU/mL) < < 25% Nil 任 定 對 % Nil 可 在 當 > TB 的 見 於 對 的 會 % Nil IFN-γ > 8.0 IU/mL IFN-γ

9 圖 : 判 讀 流 程 圖 只 用 判 讀 用 Nil + TB 管 否 否 TB 抗 原 減 去 Nil 0.5 IU/mL 是 TB 抗 原 減 去 Nil 25% Nil 值 是 當 用 抗 管 時 : 原 減 去 減 去 本 結 陰 測 果 試 不 太 可 能 感 判 染 讀 陽 性 很 可 能 感 染 結 結 核 核 菌 菌 對 陽 性 對 照 和 抗 何 有 時 值 抗 的 反 應 任 結 何 果 可 能 不 會 確 落 定 在 微 量 確 盤 定 判 讀 抗 儀 原 的 範 反 圍 應 之 結 外 果, 不 兩 不 不 組 會 ) 像 對 檢 有 若 測 感 重 結 染 複 果 結 試 判 核 驗 讀 菌 中, 造 有 但 成 任 初 影 一 次 響 組 結 或 果 兩 呈 組 陽 的 性 結 反 果 應 仍 者 為, 陽 該 性 原, 始 則 血 該 漿 測 樣 試 本 者 必 應 須 被 再 判 重 讀 複 有 進 陽 行 性 本 反 試 應 同 時 測 這 所 臨 能 床 原 試 因 驗 請 中, 少 技 術 資 訊 之 的 疑 測 難 試 排 者 除 對 互 關 測 得 係 濃 度, 其 幅 度 不 會 與 感 染 階 零 段 對 或 照 程 抗 度 原 免 疫 反 應 反 程 應 度 或 可 能 進 展 至 開 放 性 疾 病 有 相 1 2 當 可 4 在 用 抗 管 去 減 陰 性 陰 Nil + TB + Mitogen Nil TB Nil Mitogen (IU/mL) (IU/mL) 任 Nil (IU/mL) 1 < 原 0.5 是 原 < 25% Nil % Nil < 0.5 < 0.5 見 0.5 < 25% Nil < 0.5 > 於 的 Mitogen ( TB ) 的 % IFN-γ IFN-γ 不 確 定 再 確 認 否 性 定 2 Nil 值 8.0 IU/mL 對 TB 會 > 8.0 IU/mL 陽 性 是 驗 (

10 用 圖 4: 判 讀 流 程 圖 圖 判 讀 管 Nil + TB + Mitogen 否 TB 抗 原 減 去 Nil 0.5 IU/mL 是 否 TB 抗 原 減 去 Nil 25% Nil 值 是 Mitogen 減 去 Nil < 0.5 IU/mL 及 / 或 Nil 值 > 8.0 IU/mL 是 不 確 定 再 確 認 Nil 值 8.0 IU/mL 是 否 本 測 測 試 限 試 者 制 的 結 果 值, 陰 若 必 高 須 性 於 結 合 各 試 時 者, 的 將 流 被 行 視 病 為 史 不 確 目 定 前 病 因 況 為 及 在 其 此 他 情 診 況 斷 下 評, 估 對 陽 性 不 可 值, 而 使 其 落 在 本 測 試 測 量 範 圍 之 外 抗 原 的 反 應 可 能 8. 未 血 從 靠 依 抽 液 或 仿 循 血 不 單 環 確 描 中 定 述 的 的 結 步 果 驟, 來 可 操 能 作 起 因 於 以 下 幾 點 : Nil 到 開 始 於 濃 度 過 高 或 出 現 異 嗜 性 抗 體 8 中 IU/mL 培 養 的 時 間 超 過 小 時 TB 25% Nil 效 能 特 性 由 臨 床 試 驗 於 尚 未 有 明 確 的 IFN-γ 標 準 去 評 估 是 7 C 16 培 藉 養 確 由 認 評 是 估 低 開 結 放 核 性 菌 結 感 核 染 病 之 風 患 險 者 9. LTBI, 無 群 已 來 知 估 風 因 計 險 此 因 本 子 測 試 群 的 之 靈 偽 敏 陽 度 性 及 比 特 例 異 來 性 估 幾 計 乎 難 靈 以 敏 評 度 估 則 是 本 藉 測 由 試 評 的 估 特 經 異 痰 性 液 在 特 料 美 及 異 性 國 結 的 核 研 病 究 風 中 險, 因 有 子 其 位 中 自 願 者 接 受 測 試 時, 同 時 抽 血 進 行 本 測 試, 並 以 標 準 方 式 調 查 基 本 資 ( 人 無 已 知 結 核 菌 ) 且 沒 的 有 人 曾 接 經 受 接 過 受 卡 卡 介 介 苗 苗 接 接 種 種 另 兩 一 個 特 異 性 的 研 研 究 究 感 則 結 染 在 果 風 日 請 險 本 見 因, 表 子 同, 樣 2 但 利 完 用 成 本 本 測 測 試 試 評 及 估 低 風 險 者 者 只, 有 其 中 約 人 有, 866 TST 42 TST 91 90% 否

11 則 之 為 及 51%,27% 表 研 2: 究 特 異 卡 接 介 種 苗 率 低 測 結 總 試 核 數 者 菌 感 染 風 險 者 美 本 為 測 不 試 確 結 定 果 陽 本 性 測 者 試 有 數 結 效 果 測 為 試 本 特 測 異 試 性 之 測 結 試 果 者 為 數 陽 發 國 特 異 性 日 總 以 計 對 開 放 性 結 核 為 病 的 靈 診 敏 斷 度 標 準 若 之 特 異 性 本 來 測 評 試 估 之 靈 由 於 敏 度 尚, 未 是 有 藉 明 由 確 檢 標 測 美 準 去 國 評 澳 洲 及 日 本 只 之 好 疑 根 似 據 的 感 結 染 核 到 病 該 患 病 者 的 後 定 續 義 經, 痰 即 液 微 培 生 養 物 確 學 認 培 有 養 結 發 核 現 結 表 核 分 : 摘 枝 靈 要 桿 敏 出 菌 度 兩, 地 來 於 作 陽 為 合 適 患 者 的 替 之 研 代 指 究 標 而 患 對 者 開 在 放 抽 血 性 進 結 行 核 本 病 測 的 整 試 體 前 靈, 敏 所 度 接 受 的 治 療 必 須 少 天 研 究 開 放 性 結 核 病 患 者 本 測 試 結 果 為 陽 性 ( 日 病 有 效 測 試 者 數 本 特 測 異 試 性 之 澳 美 總 計 許 多 已 的 發 診 表 斷 研 究 的 研 究 證 明 本 測 測 試 試 者 能 總 於 數 不 於 同 不 族 同 群 族 診 群 斷 的 研 究 一 些 結 主 果 要 與 的 發 研 究 現 結 果 請 見 表 4 印 度 健 康 照 護 者 核 菌 感 者 染 相 率 當 極 一 高 致, 本 且 測 皆 試 未 陽 有 性 卡 介 苗 接 種 的 影 響 陽 兩 測 試 皆 為 丹 患 者 陽 現 測 性 風 試 結 險 測 果 因 子 與 與 結 年 核 紀 病 陽 及 風 性 進 險 患 行 有 者 關 健 之 康 整 照 護 位 的 檢 時 測 盛 間 為 行 有 陽 率 關 性 的 患 者 年 內 發 住 院 病 童 發 展 疑 為 似 開 感 放 染 關 性 或 結 曾 核 與 病 結 結 核 果 病 不 患 確 接 定 觸 的 兒 童 同 時 檢 顯 測 著 本 測 數 於 全 體 陽 性 之 一 致, 於 未 受 陽 卡 介 苗 接 種 者 兩 一 者 致 結 果 及 德 國 接 觸 者 同 結 群 核 試 以 病 者 本 風 依 測 險 陽 接 試 有 觸 關 檢 程, 測 度 為 於 陽 接 性 種 者 類 只 卡 則 與 介 分 卡 苗 別 介 者 有 苗 接 種 卡 與 介 否 未 苗 有 接 關 種 顯 者 示 於 本 國 測 外 試 與 出 性 未 性 本 表 / 計 用 0% 91 1 / 90 ( ) 15 ~90% / / / 552 (1. %) * 10mm TST 15mm, 估 TST 表 LTBI, 度 有 洲 本 患 國 / 計 15 TB 86 / /27 47 / 表 的 於 出 LTBI LTBI 結 的 麥 4:QuantiFERON -TB Gold IT LTBI (Pai et al 2005) %, 本 兩 得 於 有 HIV HIV (Brock et al 2006) < 100/µL (Dogra et al 2006) TST 測 生 本 有 性 95.2% TST (5mm) (Diel et al 2006) 9 09 (95% CI) 99.2% 為 ( ) 98.8% (95-100) 99.1 % (98-100) 99.1% 性 結 TST / 6 / 91 (95% CI) 9% (86-97%) 89% (70-97%) 81% (68-90%) / % (8-9%) 為 40%,TST 為 而 有 10.5%,TST 15 TST 有 體 者 性 LTBI 2 (n=20,.4%) 有 (10mm) 70%, 9% TST* (95% CI) 98.5% ( ) 為 於 8 89% (157/177) 11% 病 ) 為 性 與 (10mm) 4.6% (27/590) 在 則 1 CD4 9.5% 有 100% 18%

12 有 病 更 患 多 接 已 觸 靈 發 表 敏 的 度 文 稍 低 獻 兒 的 顯 液 示 體 出 抗 本 測 試 的 效 能 陽 性 這 患 些 研 究 使 用 健 本 康 測 照 試 護 去 前 探 代 討 測 不 同 族 免 群 疫, 抑 包 制 括 與 開 放 性 結 核 前 重 以 述 及 複 疑 於 性 美 似 與 感 國 之 染 特 結 對 異 核 後 性 病 續 研 本 究 測, 試 有 的 與 部 影 低 分 響 風 險 測 試 (QuantiFERON 兩 次 的 檢 測, 其 結 果 一 致 性 測 試 者 於 初 次 檢 示 測 前 面 週 後, 測 再 試 次 不 進 會 行 引 本 發 測 本 試 測 試 產 生 陽 人 性 完 反 成 應 此 技 術 資 訊 不 確 定 抽 的 結 果 血 在 血 建 管 未 到 議 開 的 充 並 始 溫 分 非 混 度 常 合 範 態 圍, 中 可 培 能 養 與 的 測 試 間 者 超 存 的 血 免 液 疫 小 狀 時 況 有 關, 但 也 可 能 起 因 於 一 些 技 術 因 素 : 若 清 疑 似 採 血 或 量 處 盤 理 的 血 清 液 洗 樣 不 本 完 全 技 不 時 洗 確 有 或 錯 定 的 其 誤, 結 否 果 則 應 因 該 過 如 操 低 實 作 報 上 告 的 誤 醫 差 值 師 術 時 或 有 可, 過 問 選 可 題 擇 將 時 重 已, 新 刺 值 須 採 激 所 以 血 造 新 或 漿 成 以 樣 的 血 適 本 不 液 當 再 確 樣 的 重 定 本 步 新 結 再 驟 進 果 重 進, 新 行 並 開 檢 不 始 測 會 本 因 檢 再 測 試 次 檢 除 若 測 懷 而 疑 有 是 所 不 改 當 檢 變 的 測 長 凝 時 固 間 的 儲 血 存 漿 血 樣 漿 本 樣 本 會 導 致 血 纖 維 蛋 白 凝 固, 可 離 心 樣 本 來 沉 澱 凝 血 物 質 並 幫 助 吸 取 血 漿 Mitogen 微 非 特 量 異 盤 的 清 疑 可 洗 顏 難 能 不 色 排 原 完 產 除 因 全 生 每 個 凹 槽 至 少 要 清 洗 緩 解 衝 決 液 方 清 法 套 任 一 槽 成 有 分 交 過 叉 期 污 染 有 樣 可 品 的 能 需 吸 要 取 清 及 混 洗 超 合 時 要 次 注 意 每, 次 以 清 降 洗 低 間 風 隔 險, 應 該 次 至 以 少 上 要 視 所 使 秒 用 鐘 的 清 浸 洗 泡 器 期, 濃 確 保 縮 所 軛 合 使 劑 用 仍 的 套 在 組 配 仍 製 日 在 後 有 效 期 限 確 保 所 使 用 已 配 製 標 準 品 倍 酵 素 受 質 液 被 污 染 當 出 現 藍 色 時, 應 丟 棄 受 質 個 月 內 確 保 試 劑 儲 存 器 的 清 潔 標 準 品 的 稀 可 釋 光 能 錯 學 原 誤 密 因 度 過 低 套 組 標 準 品 之 稀 釋 標 準 解 決 方 法 取 培 液 養 錯 時 溫 誤 間 度 太 過 短 低 確 含 保 軛 吸 合 量 物 管 培 標 已 養 校 準 應 正 品 在, 和 室 樣 並 溫 依 品 進 循 的 液 製 微 皆 造 量 商 依 盤 的 應 仿 培 指 單 示 描 述 使 正 用 確 地 配 鐘 製 微 錯 量 誤 盤 判 讀 儀 的 濾 鏡 使 用 應 後 以 應 培 裝 分 鐘 濾 鏡 參 考 濾 鏡 的 判 讀 儀 來 讀 加 取 入 酵 素 受 質 液 試 套 劑 過 任 一 成 分 過 期 濃 確 保 縮 倍 所 軛 濃 合 使 縮 劑 用 軛 仍 的 合 套 在 劑 組 配 以 仍 製 外 日 在 的 有 所 效 有 期 個 試 限 月 劑 內, 確 均 保 應 所 於 使 檢 用 測 的 前 已 置 配 於 製 室 標 溫 準 品 小 時 倍 Gold, 含 與 TST 者 9,11,19,25 從 技 未 採 10. 他 微 ELISA ELISA 疑 ELISA 組 凹 ELISA / 組 / 冷 100 於 7 C 者 童 6-10,25,28 HIV 7,8,10,18 原 者 者 及 -TB Gold IT) ) 2,5,20 15 達 之 % (259/260) 顯 的 過 TST 內 儲 高 16 (22 ± 5 C) Nil 有 養 的 ELISA 0 450nm 以 過 400µL 6 及 行 (17-27 C) 後 nm 者 1,26,2 行 ELISA 洗 6 試 (QuantiFERON 有 -TB 260 養 分 120 ± 5 有 5 者,4,22,2,27,0,1, 非 ELISA 約 1 及 100 及 100

13 微 背 景 值 過 高 培 量 盤 清 可 洗 能 不 原 完 因 全 每 個 凹 槽 至 少 要 清 洗 緩 解 衝 決 液 方 清 法 套 養 溫 任 度 一 過 成 高 分 過 期 有 可 能 需 要 培 清 養 洗 應 超 在 室 溫 次 進 每 次 清 洗 間 隔, 應 該 次 至 以 少 上 要 視 所 使 秒 用 鐘 的 清 浸 洗 泡 器 期, 濃 確 保 縮 所 軛 合 使 劑 用 仍 的 套 在 組 配 仍 製 日 在 後 有 效 期 限 確 保 所 使 用 已 配 製 標 準 品 倍 酵 素 受 質 液 被 污 染 當 出 現 藍 色 時, 應 丟 棄 受 質 液 個 月 內 確 保 試 劑 儲 存 器 的 清 潔 微 非 量 線 盤 性 標 清 可 洗 準 能 不 品 原 完 曲 因 全 線 及 多 組 結 果 有 每 相 個 可 異 凹 能 需 槽 要 至 清 少 要 洗 超 次 清 洗 緩 解 衝 決 液 方 清 法 次 以 上 視 所 使 用 清 洗 器, 標 混 不 合 準 一 不 品 致 足 稀 的 取 釋 錯 液 技 誤 巧 或 準 備 確 在 保 加 套 入 組 微 標 量 準 盤 前 品 之, 稀 試 劑 釋 應 標 藉 準 每 液 由 次 翻 皆 清 轉 依 洗 瓶 仿 間 身 單 隔 或 描, 述 溫 應 和 正 該 確 旋 至 轉 地 少 配 以 要 達 製 充 分 秒 混 鐘 合 的 浸 泡 期 檢 測 時 步 出 驟 影 現 片 干 及 擾 技 術 問 題 對 策 應, 準 以 皆 備 連 可 妥 續 免 當 的 費 方 從 式 原 進 行 樣 本 或 標 取 準 得 品 產 的 品 添 資 加 訊 及 開 技 始 術 進 指 行 南 檢 的 測 光 前, 碟 所 片 有 試 劑 都 參 考 文 獻 11. 參 組 / ELISA 的 以 過 400µL 6 以 過 400µL 廠 6 Cellestis 行 (17-27 C) 1. Andersen, P., et al. Specific immune-based diagnosis of tuberculosis. Lancet ; Balcells, M.E., et al. A comparative study of two different methods for the detection of latent tuberculosis in HIV-positive individuals in Chile. Int J Infect Dis ; Bartalesi, F., et al. QuantiFERON-TB Gold and TST are both useful for latent TB screening in autoimmune diseases. Eur Respir J ; Bocchino, M., et al. Performance of two commercial blood IFN-gamma release assays for the detection of Mycobacterium tuberculosis infection in patient candidates for anti-tnf-alpha treatment. Eur J Clin Microbiol Infect Dis ; Brock, I., et al. Latent tuberculosis in HIV positive, diagnosed by the M.tuberculosis specific interferon-gamma test. Respir Res ; Chun, J.K., et al. The role of a whole blood interferon gamma assay for thedetection of latent tuberculosis infection in bacille Calmette-Guerin vaccinated children. Diagn Microbiol Infect Dis ; Connell, T.G., et al. A three-way comparison of tuberculin skin testing, QuantiFERON-TB Gold and T-SPOT.TB in children. PLoS ONE ; e Detjen, A.K., et al. Interferon-gamma release assays improve the diagnosis of tuberculosis and nontuberculous mycobacterial disease in children in a country with a low incidence of tuberculosis. Clin Infect Dis ; Diel, R., et al. Comparative performance of tuberculin skin test, QuantiFERON-TB Gold In Tube assay, and T-Spot.TB test in contact investigations for tuberculosis. Chest ; Diel, R., et al. Predictive value of a whole-blood IFN-γ assay for the development of active TB disease. Am J Respir Crit Care Med ; Diel, R., et al. Tuberculosis contact investigation with a new, specific blood test in a low-incidence population containing a high proportion of BCG-vaccinated persons. Respir Res ; Dogra, S., et al. Comparison of a whole blood interferon-gamma assay with tuberculin skin testing for the detection 洗 6 洗 6 有 5 有 5 及 100

14 of tuberculosis infection in hospitalized children in rural India. J Infect ; Drobniewski, F., et al. Rates of latent tuberculosis in health care staff in Russia. PLoS Med ; e Gerogianni, I., et al. Whole-blood interferon-gamma assay for the diagnosis of tuberculosis infection in an unselected Greek population. Respirology ; Harada, N., et al. Comparison of the sensitivity and specificity of two whole blood interferon-gamma assays for M. tuberculosis infection. J Infect ; Higuchi, K., et al. Comparison of performance in two diagnostic methods for tuberculosis infection. Med Microbiol Immunol ; Kang, Y.A., et al. Discrepancy between the tuberculin skin test and the whole-blood interferon gamma assay for the diagnosis of latent tuberculosis infection in an intermediate tuberculosis-burden country. JAMA ; Katiyar, S. K., et al. Use of the QuantiFERON-TB Gold In-Tube test to monitor treatment efficacy in active pulmonary tuberculosis. Int J Tuberc Lung Dis ; Kipfer, B., et al. Tuberculosis in a Swiss army training camp: contact investigation using an Interferon gamma release assay. Swiss Med Wkly ; Luetkemeyer, A., et al. Comparison of an interferon-gamma release assay with tuberculin skin testing in HIV-infected individuals. Am J Respir Crit Care Med ; Mackensen, F., et al. QuantiFERON-TB Gold - A new test strengthening longsuspected tuberculous involvement in serpiginous-like choroiditis. Am J Ophthalmol ; Manuel, O., et al. Comparison of QuantiFERON-TB Gold with tuberculin skin test for detecting latent tuberculosis infection prior to liver transplantation. Am J Transplant ; Matulis, G., et al. Detection of latent tuberculosis in immunosuppressed patients with autoimmune diseases performance of a Mycobacterium tuberculosis antigen specific IFN-gamma assay. Ann Rheum Dis ; Mirtskhulava, V., et al. Prevalence and risk factors for latent tuberculosis infection among health care workers in Georgia. Int J Tuberc Lung Dis ; Nakaoka, H., et al. Risk for tuberculosis among children. Emerg Infect Dis ; Pai, M., et al. Mycobacterium tuberculosis infection in health care workers in rural India: comparison of a whole-blood, interferon-g assay with tuberculin skin testing. JAMA ; Ponce de Leon, D., et al. Comparison of an interferon-gamma assay with tuberculin skin testing for detection of tuberculosis (TB) infection in patients with rheumatoid arthritis in a TB-endemic population. J Rheumatol ; Richeldi, L., et al. Prior tuberculin skin testing does not boost QuantiFERON-TB results in paediatric contacts. Eur Respir J ; Rothel, J.S., and Andersen, P. Diagnosis of latent Mycobacterium tuberculosis infection: is the demise of the Mantoux test imminent? Expert Rev Anti Infect Ther ; Schoepfer, A.M., et al. Comparison of interferon-gamma release assay versus tuberculin skin test for tuberculosis screening in inflammatory bowel disease. Am J Gastroenterol ; Silverman, M.S., et al. Use of an interferon-gamma based assay to assess bladder cancer patients treated with intravesical BCG and exposed to tuberculosis. Clin Biochem ; Stebler, A., et al. Whole-blood interferon-gamma release assay for baseline tuberculosis screening of healthcare workers at a Swiss university hospital. Infect Control Hosp Epidemiol ; 681-.

15 之 抽 管 簡 內 取 易 層 檢 都 液 測 至 被 步 採 血 驟 血 液 管 覆 第, 蓋 一 並 階 劇 段 烈 地 血 上 液 下 培 振 養 搖 採 血 管, 以 確 保 整 個 試 12. 將 採 血 管 以 直 立 方 式, 於 培 養 小 時 1. 培 球 細 養 結 胞 束 及 後 血, 漿 採 血 管 以 轉 速 離 心 分 鐘, 分 隔 血 2. 7 C 離 心 後, 從 每 支 採 血 管 取 得 血 漿 以 進 行 的 定 量 RCF(g) 15 第 二 階 段 4. IFN-γ 平 衡 溫 度 至 少 試 劑 分 除 鐘 倍 濃 縮 軛 合 劑 外, 所 有 試 劑 在 室 溫 下 IFN-γ ELISA 1. 配 製 以 ELISA 組 蒸 稀 餾 釋 水 標 或 準 去 液 離 子 水 配 製 套 組 標 準 品, 並 接 著 以 蒸 餾 水 或 去 離 子 配 製 凍 晶 乾 燥 之 倍 濃 縮 軛 合 劑 IU/mL 4 以 綠 色 稀 釋 劑 配 製 具 工 作 強 度 之 軛 合 液, 並 於 每 個 凹 槽 加 入 µL 於 盪 器 適 混 當 凹 合 槽 內 加 入 血 漿 樣 本 與 標 準 液, 並 利 用 微 量 盤 振 室 溫 下 培 養 分 鐘 5. 50µL 50µL 每 個 凹 槽 以 清 洗 緩 衝 液 清 洗 至 少 次 µL 6 管 次 10

16 號 樓 將 酵 素 受 質 液 加 入 凹 槽 中, 並 利 用 微 量 盤 振 盪 器 混 合 室 溫 下 培 養 分 鐘 µL 將 酵 素 停 止 液 加 入 凹 槽 中, 並 利 用 微 量 盤 振 盪 器 混 合 9. 0 以 裝 有 濾 鏡 及 參 考 濾 鏡 的 微 量 盤 判 讀 儀 來 讀 取 µL 分 析 結 果 nm nm 12. 製 造 廠 商 名 資 訊 藥 商 地 名 址 稱 : 禾 伸 台 堂 北 生 市 技 環 股 山 份 路 有 二 限 段 公 司 Cellestis Limited 1046A Dandenong Road, Carnegie, Victoria, 16, Australia 56 1 QFT-G IT / 2009 Aug / TW01