平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质表达的影响钟广伟等 3 ( +( + ** 66 )+ + 8#,5%< (, %95( ( /+ '( ( 6(6++#!+ 5 6+' 6+) ;+( '+ 8:7)*

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滑祭钮
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1 3 中南大学学报医学版平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质表达的影响钟广伟胡建军陈泽奇罗艳红张莺尹耀慧李炜易振佳陈国林中南大学湘雅医院中西医结合研究所急诊科长沙 4 摘要目的探讨平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠作用的分子机制方法用电刺激大鼠三叉神经节的方法并灌服附子汤复制偏头痛肝阳上亢证模型采用平肝潜阳方中药进行干预运用双向凝胶电泳技术分离偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞的总蛋白图像分析识别差异表达的蛋白质点基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图搜索数据库鉴定蛋白质结果平肝潜阳方能够明显改善偏头痛大鼠的头痛等症状得到分辨率及重复性较好的正常大鼠偏头痛肝阳上亢证大鼠中药治疗大鼠血淋巴细胞的双向凝胶电泳图谱共得到肽质量指纹图谱个无质谱结果搜索到具有统计学意义的蛋白质个包括乙醇脱氢酶糖原磷酸化酶 85 合酶链膜联蛋白泛素中性粒细胞防御素前体黑素瘤相关性 1 抗原热休克蛋白 3 膜联蛋白 8 硫氧还蛋白过氧化物酶谷胱甘肽合成转移酶片断结论平肝潜阳方治疗后的偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质的表达与治疗前比较有差异所鉴定的个蛋白质可能与平肝潜阳方的作用机制有关关键词平肝潜阳方蛋白质组学偏头痛肝阳上亢证血淋巴细胞 %,!2! '!++ +)!?": +- ) +)?": -%:77'/ $&' 1:-. #$%* -8:7,:*' #,,- 1:7'* "#"'&,'&&#& :#' $%&''! (&!& )#%& '& '#! &#& 4 & "() 5* *+ *)'+ ) *6 6*+' 6*+) ;+( '+ 8:7 + +*( / (+* *6 +);*6 ;+8:7 * 8+*( *6+ / +);*6;+8:7/ ( +*' )+ )+* '* ( (+* *6*+(+* *6<'( )*)*5 * +**6 *) +/+ +( *( +(( ( * )+**+ 1 ( 1 /( E' 3 *6/++ 收稿日期! " " 作者简介钟广伟硕士主治医师主要从事中医药治疗脑血管疾病的基础与临床研究通信作者! 钟广伟 1/3)* 基金项目 7! 国家自然科学基金 2 3 湖南省中医药科研计划项目!3 5/*+0 / '*+( :*:'+)) <*'(* *62 3 ( +*)<'( *65+( * () ( +')6)9+) *6' +*;) 9!3

异表达的蛋白质点基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图搜索数据库鉴定蛋白质结果平肝潜阳方能够明显改善偏头痛大鼠的头痛等症状得到分辨率及重复性较好的正常大鼠偏头痛肝阳上亢证大鼠中药治疗大

2 平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质表达的影响钟广伟等 3 ( +( *+* ** *66 )+* + 8#,5%< (, %95( ( /+ '( *( 6(6++*#!+ 5 6*+' 6*+) ;+( '+ 8:7)*'( *+*; () +*'* ( ++*(') 1+*6+*) 6+* *+ *( ( +' /+ * (1; *6 * (6++* */+ ')) 6' ( 6( 8#,5%<5 +* /+ )**( (+* 8 )* **+ 85 ) '.' '+*( 6 +)'+*+ **)( 1 *)0 +*3 8 +*+(* $)'* +6+ <+ 7 +! 6+)*))'+ + * *6*) +* + +/ (+* *6 + );*6;+8:76++ / 6*+' 6*+) ;+( '+ 8:7 ( ( 6( +* * *)( / ), -6*+' 6*+) ;+( '+ 8:7+**)+ (+* +);*6;+8:7*) 偏头痛 + 在以头痛为症状的疾病中占有很重要的地位为发病率较高的疾病之一在美国约 3? 的女性和 2? 的男性曾有偏头痛发作但仅有 4? 的患者就诊至今其发病机制仍未完全明确蛋白质组学的迅速发展为研究偏头痛的发病机制提供了新的思路肝阳上亢证是偏头痛中的常见证型也是中医肝脏象的临床常见证型之一许多学者在应用平肝潜阳药物治疗偏头痛肝阳上亢证方面做了积极的努力取得了较好的疗效但平肝潜阳药物治疗偏头痛肝阳上亢证的作用机制目前尚未阐明应用蛋白质组学技术研究平肝潜阳药物对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞表达的影响以揭示平肝潜阳方治疗偏头痛肝阳上亢证的分子机制. / 材料与方法材料实验时间实验于 2 年! 月至 3 年月在中南大学湘雅医院中西医结合所实验室生殖与遗传实验室卫生部肿瘤蛋白质组实验室完成实验动物雄性 +' / 大鼠只清洁级体质量 H 由中南大学实验动物中心提供许可证号 D> 湘试剂大鼠淋巴细胞分离液产自天津灏洋生物有限公司丙烯酰胺甲叉双丙烯酰胺固化梯度干胶条,7 + :# ) 均由美国 8 + *)) 公司提供二硫苏糖醇 (*+* 55 甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮胰蛋白酶 : *' '6* # )*+( 5>+ 乙腈 )* 8: 三氟乙酸 +6'*+*)))( 5<8 基质氰基羟基肉桂酸 )* (+*)) )( 8 均由美国公司提供附子汤由单味制附子由中南大学湘雅医院中药房提供组成将药物先泡煎煮次后再将药液合并浓缩为含生药 # 的药液平肝潜阳方自拟方天麻钩藤石决明牡蛎川芎石决明和牡蛎先煎钩藤后下浓缩为含生药 4 # 的药液仪器 5%1#5,:7 5# 鼠脑定位仪系美国 5%1#5,:7 产品生理电子刺激仪 E 型为蚌埠实用技术研究所产品 1 8#5 垂直电泳槽和,) + 扫描仪购自美国 8 + 公司 E' 3 分析软件购自美国 *9( 公司 1D#4 自动酶标仪购自美国 50,+' =* #,5%< 质谱仪购自美国 8( * 公司

3 3 中南大学学报医学版方法动物造模偏头痛模型复制参照 +(*' 等的方法实验动物在? 水合氯醛麻醉 # 在头顶作正中切口在前囟旁根据动物大小可变动后处用手术刀凿一直径为的小孔操作鼠脑立体定位仪将不锈钢电极由钻孔处垂直插入深度在硬脑膜下! 处达三叉神经节应用生理电子刺激仪进行电刺激刺激电流 8 波宽持续完毕后拔除电极缝合头皮外敷青霉素粉剂预防感染手术过程及苏醒期间以 2 灯泡维持体温在 3 A 肝阳上亢证复制参照鄢东红等的方法连续灌服附子汤 # 次日次共 ( 复制成偏头痛肝阳上亢大鼠模型动物分组只大鼠随机分为组正常对照组简称正常组 4 蒸馏水 # 灌胃日次共! ( 偏头痛肝阳上亢组简称模型组 4 麻醉手术电刺激附子汤灌胃 # 次日次共 ( 第天开始蒸馏水 # 灌胃至第 3 周末平肝潜阳方治疗组简称中药组 4 造偏头痛肝阳上亢模型后的第 3 周开始用平肝潜阳方灌胃日次至第 3 周末实验中动物无脱落血淋巴细胞分离所有动物在处死前均从腹腔注射麻醉剂水合氯醛? # 待动物麻醉后断头收集血浆用等量 0 液稀释后加在淋巴细胞分离液上 4 + 离心 A 洗涤次 4 + 离心 A 沉淀物用 9,2 稀释成适用浓度的淋巴细胞悬 2 # 随后放入 "4 A 冰箱中保存备用淋巴细胞总蛋白质的抽提样品加入 # 细胞裂解液 3 *# 尿素 *# 硫脲? :? 5+* D *#55? 胆胺丙基甲氨基丙磺酸 8 *# 乙二胺四乙酸 *#5+? 两性载体室温下静置于 A 下 + 离心 2 吸取上清液作为细胞的总蛋白取 # 上清用于 E' 蛋白质定量试剂盒的微量测试法测定总蛋白质浓度其余上清液冻存于 "4 A 备用双向电泳及考马斯亮蓝染色用 ) 干胶条上样量为 4 具体操作按,7*+ 等电聚焦系统指南和 7*+ 2 等的方法进行 A 水化行等点聚焦总电压时间积达 2 = 聚焦后将胶条先后在含 55 和碘乙酰胺的平衡液中平衡然后行? 聚丙烯酰氨凝胶电泳 871 电泳考马斯亮蓝染色凝胶通过,) + 扫描仪及 #) 扫描软件进行扫描获取图像利用 E' 3 分析软件对图像进行强度校正点检测背景消减匹配等分析 2 差异蛋白质点质谱分析选取分辨较好的蛋白质点利用 8#,5%< 质谱仪进行质谱分析获得肽质量指纹图谱将获得的肽质量指纹图谱用 )*+ 软件识别单同位素峰获得的肽段的质荷比数值输入 )* 软件进行检索 :,+ 及,9%5 数据库 3 统计学处理搜索数据库为采用统计软件计量资料均以 H# 表示采用方差分析等级计数资料采用秩和检验计数资料采用检验以为差异有统计学意义 / 结 // 果大鼠行为学变化模型组大鼠较对照组食量减少体质量减轻毛发干枯前肢频繁搔头刺激侧咀嚼肌收缩有时可见口鼻分泌物增加经中药治疗周后大鼠进食增加体质量增加毛发变得光泽搔头次数减少性情变化及旋转时间模型组在附子汤灌胃周后其激惹程度发生了很大的变化多表现为级且半数出现了眼结膜充血与正常组比较差异具有统计学意义正常组旋转时间均大于都以计算模型组大鼠在造模后旋转时间较对照组缩短差异具有统计学意义中药组在治疗后激惹程度及旋转时间均有所改善与正常组比较差异无统计

处达三叉神经节应用生理电子刺激仪进行电刺激刺激电流 8 波宽持续完毕后拔除电极缝合头皮外敷青霉素粉剂预防感染手术过程及苏醒期间以 2 灯泡维持体温在 3 A 肝阳上亢证复制参照鄢东红等的方法连续灌服附子汤 # 次日次共

4 平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质表达的影响钟广伟等 3 学意义表组大鼠血淋巴细胞 1 图谱及差异蛋白质点在相同条件下分别将正常组模型组和中药组血淋巴细胞总蛋白质样品进行次双向电泳其总蛋白分布模式非常相似以, 4 和分子质量 3 0 ' 范围的蛋白质点最多图经 E' 3 软件分析相同条件下识别的蛋白质斑点数分别为正常组 H 个模型组 3 H22 个中药组 3 H2! 个图像分析时将正常组的一块凝胶选为参考胶其他凝胶中蛋白质点与其相匹配结果模型组的平均匹配点数为 4 H 个平均匹配率为 43? 中药组的平均匹配点数为 2 H23 个平均匹配率为!? 图像分析统计后发现偏头痛肝阳上亢组与正常组相比有个蛋白质下调和 4 个蛋白质上调其中经中药治疗后这些蛋白点有 2 个恢复至正常水平或接近正常表./ 组动物性情变化外观及旋转时间的比较 $1./! 组别性情变化结膜充血旋转时间正常组 4 H 模型组 4 43 H3 中药组 4! H2 与正常组比较与模型组比较图./ 各组大鼠血淋巴细胞的考马斯亮蓝染色双向凝胶电泳图谱 8 正常组模型组中药组 71./$ !+18:*++*' *( +*' 5+ +*' 差异表达蛋白质点的 8#,5%< 质谱鉴定及数据库查询结果随机选取图像分析统计后的差异大于倍的蛋白质点个胶内酶切提取蛋白进行质谱鉴定共得到个肽质量指纹图谱其中个无质谱结果搜索到具有统计学意义的蛋白质个图是号蛋白质点的肽质量指纹图图为经 )* 软件搜到的号蛋白质点的评分其中鉴定的蛋白分别为乙醇脱氢酶 )**( (+* 8 糖原磷酸化酶 )* **+ 85 合酶链 85 ) 膜联蛋白泛素 '.' 中性粒细胞防御素前体 '+*( 6 +)'+*+ 黑素瘤相关性 1 抗原 * *)( 1 热休克蛋白 3 *)0 +* 3 膜联蛋白 8 8 硫氧还蛋白过氧化物酶 +*+(* 谷胱甘肽合成转移酶片断 $ )'* +6+ <+ 7 表

个图像分析时将正常组的一块凝胶选为参考胶其他凝胶中蛋白质点与其相匹配结果模型组的平均匹配点数为 4 H 个平均匹配率为 43? 中药组的平均匹配点数为 2 H23 个平均匹配率为!

5 3 中南大学学报医学版!#()*+,-./0.! 1%.... "#$%&'..,#!+#2"34( 图 / 采用 *"&%$7* 检测到的 2 号差异表达蛋白质点肽指纹图谱 71/ + 2! *"&%$7*1 图 /2 号差异点差异点肽质量指纹图谱在 9%#$ 数据库中检索结果 71/*!+ 2 9%#$1 表 / 组大鼠血淋巴细胞差异表达蛋白信息 $1/++! 编号登录号蛋白名称分数相对分子质量等电点匹配的肽段匹配率表达情况 E3=!J985 )**( (+*! 3!? 2 )* **+ 3!3! 2! 3? 1!43J985 *)0 +*3 2! ? 1<J985 '+*( 6 +)'+*+ 2 4! 4? 22! 4 2 2!!2? **)( ? 3 85J ) 2 4 4! 23? 4 E2 '.' ?! !? 3 +*+(* 4!!2 4!? E!$!2 $)'* !? 模型组与正常组比较和分别表示该蛋白点在模型组中表达上调和下调中药治疗后恢复至正常水平 / 讨 // 论偏头痛是一种常见病多发病其临床表现为反复发作单侧搏动性头痛可伴有恶心呕吐视物异常耳鸣等症状由于发病机制的研究尚不明确西药缓解偏头痛的急性发作研究成效显著但许多药物副反应大或价格昂贵因此防治偏头痛的药物研究成为当今一大医学研究热点开发有效而且低毒副作用的中药在防治偏头痛的发作方面将有所作为大多数学者认为偏头痛常见为肝阳上亢痰浊上泛淤血阻络和气血亏虚型 3 清代叶天士首创肝阳上亢学术论点在临证指南医案中明确指出肝为风脏因精血衰耗水不涵木木少滋荣故肝阳偏亢其基本病机为肝脏阴阳平衡失调肝阴不能制阳以致肝阳不潜浮动于上临床上采用平肝潜阳制剂治疗偏头痛疗效明显但对平肝潜阳药物治疗偏头痛的机制研究尚未见报道在本实验中也发现该疗法能够改善偏头痛大鼠的头痛等症状平肝潜阳方中药复方由天麻钩藤石决明川芎和牡蛎等种中药组成是由天麻钩藤饮化裁而来全方共奏平肝潜阳之效现代药理学研究发现天麻钩藤牡蛎的有效成分均能够降低中枢神经系统的兴奋性调节免疫力石决明镇静川芎的有效成分则能降低血小板活性抗血小板聚集并对中枢有抑制作用淋巴细胞为外周血中较易分离的细胞且有细胞核并能进行有氧呼吸和合成蛋白质在代谢方面与组织脏器细胞相近已被证实是最

1<J985 '+*( 6 +)'+*+ 2 4! 4? 22! 4 2 2!!2? 2 871 **)( 1 2 22? 3 85J985 85 ) 2 4 4! 23? 4 E2 '.' 3 4 2 22 4?! 4 8 34 4 4 22!? 3 +*+(* 4!!2 4!? E!$!2 $)'* +6+ 6+!

6 平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质表达的影响钟广伟等 3 近似反映组织细胞功能特性的外周血细胞 4 研究显示偏头痛患者均伴随有淋巴细胞内游离钙水平的增加且淋巴细胞内游离钙的变化与偏头痛发作呈正相关关系故本研究选择血淋巴细胞为靶点! 本实验中模型组与正常组比较经图像分析统计后有个蛋白质表达下调 4 个蛋白质表达上调表明淋巴细胞蛋白质表达异常可以作为偏头痛肝阳上亢证的临床诊断标志物之一而中药组与模型组比较表达下调 4 个蛋白质中有个表达增强而表达上调个蛋白质中有个表达降低表明平肝潜阳药物治疗偏头痛肝阳上亢证大鼠可能是通过调节淋巴细胞蛋白质的表达而实现本研究鉴定的个差异蛋白质点包括乙醇脱氢酶糖原磷酸化酶 85 合酶链膜联蛋白泛素中性粒细胞防御素前体黑素瘤相关性 1 抗原热休克蛋白 3 膜联蛋白 8 硫氧还蛋白过氧化物酶谷胱甘肽合成转移酶片断它们均与偏头痛发生发展密切相关有可能是偏头痛的相关诊断指标乙醇脱氢酶是含锌原子 :8 依赖的胞质二聚体酶可逆氧化各种醇为相应的醛酮是乙醇代谢的关键酶有研究表明饮酒可以诱发偏头痛的发生与发展但目前饮酒与偏头痛之间相互关系的潜在机制尚不完全清楚中性粒细胞防御素为生物体内参与机体最初防御活动的小分子肽中性粒细胞也可释放防御素越来越多的证据表明中性粒细胞防御素能激活细胞的高敏感钙通道还能通过形成上皮顶膜的通道而激活氯化物的分泌可与嗜酸性粒细胞相互作用参与偏头痛的发病同时防御素的表达受炎症因子的调控谷胱甘肽是细胞内最主要的巯基和含量最丰富的低分子多肽参与细胞许多功能活动它作为一种还原物质和抗氧化剂能清除体内过氧化氢和许多有害的过氧化代谢产物阻断脂质过氧化连锁反应从而起到保护细胞结构和功能完整的作用同时它具有降低血液黏稠性抑制血小板聚集具有血栓作用表明谷胱甘肽与偏头痛的发病有关研究发现偏头痛肝阳上亢证大鼠乙醇脱氢酶和谷胱甘肽表达下调而中性粒细胞防御素表达上调经平肝潜阳方中药干预后可以调节其表达失调膜联蛋白 8 是表皮生长因子受体激酶蛋白激酶等的磷酸化底物参与了炎症细胞分化和增殖有关的信号转导过程热休克蛋白 3 属于小分子热休克蛋白家族为 4 8> 信号转导通路中的信号蛋白并参与多种效应反应可能是在机体抗损伤中起一定作用 1;+6*; 等的研究发现该蛋白的突变与进行性神经性肌萎缩和遗传性运动神经病有关硫氧还蛋白过氧化物酶属于硫氧还蛋白系统广泛存在于各种组织中可以清除自由基从而对组织起保护作用本研究发现热休克蛋白 3 膜联蛋白 8 和硫氧还蛋白过氧化物酶个蛋白在模型大鼠中表达上调平肝潜阳方可以调节个蛋白的表达失衡本课题组在研究平肝潜阳方对高血压病肝阳上亢证和甲亢肝阳上亢证的蛋白质表达中发现 2 这个蛋白质表达失衡推测这个蛋白质与中医肝阳上亢证的发生和形成密切相关可能是平肝潜阳方治疗肝阳上亢证的作用分子机制之一综上所述本研究采用血淋巴细胞蛋白质组学方法对偏头痛大鼠进行了研究这为筛选用于偏头痛诊断和治疗的分子标志物奠定了基础这些相关蛋白质的功能及其在偏头痛发病中的作用还有待进一步的证实和研究致谢本课题承中南大学生殖与遗传重点实验室及湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组重点实验室的技术支持指导和帮助在此表示衷心的感谢参考文献 #* 9 /+ < *( +;) ( '+( *6+ $( (6+* 8 +) + '(, & () 赵瑞成周慎偏头痛辨治规律分析 & 湖南中医杂志 4-8% 9') -%$ 8* +'++' *6(+* (6+)6)* 6*++ & ' &*'+*65+(* () 4 周慎杨维华孙兆泉等平肝通络颗粒治疗偏头痛肝风血瘀证的临床及实验研究 & 中成药 2 4 -%$ 8:7 ' $: -*.' ) 6)*6*'*7+'* + / ;+ /( ( **( * & 5+(*

本实验中模型组与正常组比较经图像分析统计后有个蛋白质表达下调 4 个蛋白质表达上调表明淋巴细胞蛋白质表达异常可以作为偏头痛肝阳上亢证的临床诊断标志物之一而中药组与模型组比较表达下调 4 个蛋白质中有个表达增强

7 32 中南大学学报医学版 () 2 4 +(*' = ' 7 *0*/ 8 5+ *+6 +'* (')*+**))+ 6))+* +('++) & :'+* ))!!! 3 鄢东红金益强肖纯等自发性高血压大鼠肝阳上亢证模型的复制 & 湖南中医学院学报!!!! 4 8: ** &,:. D,8%' ') *( *6 ) ; +*6;+8:7 (+* * *' +; + & &*'+*6' 5+(* () $;+*6'!!!! 4 2 7*+8 % ++ *' 7 5 )' + *6/*( * )+**+/ *( +( & 1)+** 张树彪王景阁偏头痛的中西医治疗进展 & 天津中医学院学报 2 2-8:7 '* 8:7&+*+ *6+( +( * ( + () + + & &*'+*65 * *65+(* ( ) %5 ''+ >(*>,+) '+*( ' )*)+* *)( ++*)*6 / +* & & +&! 4 4! 3 3 4! +) 8 +8 (8 +*6*+) *0 ( * *)' ( *) + + * +''+**( *6+ /*' '+ ( ) & () *** * ***: #** )'* *6)**( (+* / )*6)*+6*+ * *6 +')'+ ( ); & * )*+* #)+, '7 +* +7 9,(')* *6 )*+( )+* ) 6*+ )+( ( & +*):8)( )$8!! 3! ! &'0 + '*6' = +**)( 6)* *6 '+'( *6*+ * * */+;+ )++) & 张立勇赵晓航吴膜联蛋白, 的结构和功能 & 生物化学与生物物理进展! 3-8:7 #* -8% D* $ 5 +')'+ ( 6')*)+)+)*6 & +*+ *) +( *)! 3 1;+6*;%= +*;,,+*& ' *)0 +* 3 )' *+)*+5** ( ( ( +(+ **+ '+* & : 钟广伟李炜罗艳红等平肝潜阳药物对偏头痛肝阳上亢证患者的临床疗效及其对血淋巴细胞蛋白质表达的影响 & 中西医结合学报! 3 -%:7 7'/ #, #$% * + 6*+**;+( '(' + *6+ / +); ;+(+* ( 6)* * ) +* + * +(*( )*+*( + & &*'+*6,+; ()! 3 钟广伟李炜罗艳红等平肝潜阳药物对高血压病肝阳上亢证患者淋巴细胞蛋白质表达的影响 & 中南大学学报医学版 4 -%:7 7'/ #, #$% * 16)*6 ) ;+( '+ +); 8:7 (+' * *) +* +* / +); *6;+8:7 & &*'+*6+*' $;+ ())) 4 本文编辑傅希文

!!! 4 2 7*+8 % ++ *' 7 5 )' + *6/*( * )+**+/ *( +( & 1)+**+ 2 3 3 张树彪王景阁偏头痛的中西医治疗进展 & 天津中医学院学报 2 2-8:7 '* 8:7&+*+ *6+( +( * ( + () + + & &*'+*65 * *65+(* ( ) 2 2 4 %5 ''+

第期熊安萍等 *1$ 文件系统中范围锁机制的应用研究! 锁命名空间 '+'($($ 描述了资源和锁的集合它同时在客户节点和服务节点存在不同之处只是利用一个数据标识来有效区

第期熊安萍等 *1$ 文件系统中范围锁机制的应用研究! 锁命名空间 '+'($($ 描述了资源和锁的集合它同时在客户节点和服务节点存在不同之处只是利用一个数据标识来有效区第卷第期重庆邮电大学学报自然科学版年月!"#$" %$&'$ ''())$($*($'('+$$,-./0 1' 文件系统中范围锁机制的应用研究熊安萍葛军邹洋重庆邮电大学计算机科学与技术学院重庆! 摘要分布式锁机制是分布式文件系统的重要机制 *1$

平 肝 潜 阳 方 对 偏 头 痛 肝 阳 上 亢 证 大 鼠 血 淋 巴 细 胞 蛋 白 质 表 达 的 影 响 钟 广 伟 等 3 ( +( *+* ** *66 )+* + 8#,5%< (, %95( ( /+ '( *( 6(6++*#!+ 5 6*+' 6*+) ;+( '+ 8:7)*

平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质表达的影响钟广伟等 3 ( +( + ** 66 )+ + 8#,5%< (, %95( ( /+ '( ( 6(6++#!+ 5 6+' 6+) ;+( '+ 8:7)*