项 目 概 况 项 目 名 称 承 担 单 位 肿 瘤 免 疫 细 胞 技 术 研 究 及 应 用 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 生 物 科 技 有 限 公 司 A 农 牧 业 B 生 态 C 能 源 D 化 工 E 装 备 所 属 技 术 领 域 制 造 F 材 料 G 信 息 H 生 物 医 药

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1 鄂 尔 多 斯 市 科 技 计 划 项 目 申 报 书 ( 试 行 ) 项 目 名 称 : 肿 瘤 免 疫 细 胞 技 术 研 究 及 应 用 推 荐 部 门 : 康 巴 什 新 区 科 信 局 申 报 单 位 : ( 加 盖 公 章 ) 项 目 类 别 : 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 生 物 科 技 有 限 公 司 应 用 技 术 研 究 与 开 发 鄂 尔 多 斯 市 科 技 局 制

2 项 目 概 况 项 目 名 称 承 担 单 位 肿 瘤 免 疫 细 胞 技 术 研 究 及 应 用 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 生 物 科 技 有 限 公 司 A 农 牧 业 B 生 态 C 能 源 D 化 工 E 装 备 所 属 技 术 领 域 制 造 F 材 料 G 信 息 H 生 物 医 药 I 低 碳 与 环 保 L 民 生 科 技 M 创 新 载 体 建 设 N 其 他 生 物 医 药 A 创 新 基 金 B 应 用 技 术 研 究 与 开 发 C 科 技 申 报 项 目 类 别 合 作 D 科 技 特 派 员 应 用 技 术 研 究 与 开 发 生 物 治 疗 是 继 手 术 放 疗 化 疗 之 后 肿 瘤 的 第 四 大 治 疗 手 段, 其 中 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 近 年 来 成 为 国 际 研 究 及 应 用 的 热 点 FDA 已 批 准 第 一 个 免 疫 细 胞 治 疗 产 品 (Provenge), CAR-T 在 血 液 肿 瘤 治 疗 上 取 得 了 90% 的 完 全 治 愈 率 本 项 目 研 究 及 应 用 的 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 包 括 : 项 目 内 容 摘 要 1) Mac-DC/CIK, 多 重 激 活 CIK 和 DC-CIK 技 术 2) H-NK, 高 纯 活 化 NK 3) DC1s-CTL, 结 合 靶 向 DC 疫 苗 及 体 外 特 异 性 CTL 扩 增 的 靶 向 高 效 免 疫 治 疗 技 术 4)CD20-CAR, 基 于 CD20 抗 体 的 嵌 合 抗 原 受 体 技 术 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 产 业 化 将 整 合 国 际 领 先 技 术, 打 造 集 细 胞 免 疫 治 疗 应 用 转 化 细 胞 制 备 标 准 化 治 疗 服 务 于 一 体 的 完 整 的 产 业 链, 对 提 高 肿 瘤 生 物 治 疗 水 平 与 自 治 区 细 胞 生 物 产 业 的 迅 速 崛 起 具 有 重 要 意 义, 也 能 为 广 大

3 患 者 带 来 康 复 的 希 望 联 系 人 孙 彬 电 话 经 费 概 算 ( 万 元 ) 总 投 资 申 请 拨 款 实 施 年 限 2 申 报 年 度 2015

4 一 项 目 背 景 和 意 义 1.1 项 目 研 究 的 重 要 性 癌 症 是 严 重 威 胁 人 类 生 命 和 社 会 发 展 的 重 大 疾 病, 运 用 科 学 的 方 法 对 癌 症 进 行 预 防 控 制 已 成 为 全 球 最 重 要 的 公 共 卫 生 问 题 之 一 近 几 十 年 来, 随 着 疾 病 模 式 的 转 变 和 人 口 老 龄 化 趋 势, 我 国 癌 症 负 担 日 益 增 加, 癌 症 防 治 面 临 严 峻 的 形 势 自 上 世 纪 起, 癌 症 发 病 人 数 日 益 增 加 我 国 三 次 全 国 范 围 内 的 死 因 调 查 数 据 显 示, 近 30 年, 中 国 癌 症 在 死 因 中 的 构 成 比 由 20 世 纪 70 年 代 的 10.13% 上 升 至 22.32%, 死 亡 率 由 73.99/10 万 上 升 至 /10 万 在 城 市 地 区, 癌 症 列 居 全 死 因 的 第 一 位, 而 在 农 村 地 区, 列 居 全 死 因 的 第 二 位 癌 症 不 仅 严 重 影 响 居 民 的 身 体 健 康, 而 且 给 家 庭 和 社 会 造 成 沉 重 的 疾 病 经 济 负 担 2010 年 全 国 恶 性 肿 瘤 防 治 费 用 总 额 为 亿 元, 占 慢 性 病 防 治 费 用 的 7.35%, 占 同 期 卫 生 总 费 用 的 5.14%, 占 国 内 生 产 总 值 的 0.24% 传 统 的 肿 瘤 治 疗 方 法, 化 学 疗 法 放 射 线 疗 法 及 外 科 手 术 切 除 疗 法 虽 然 取 得 了 一 定 的 疗 效, 但 由 于 这 些 治 疗 手 段 缺 乏 靶 向 性, 在 治 疗 过 程 中 会 杀 死 大 量 正 常 组 织 细 胞, 从 而 导 致 如 机 体 免 疫 力 下 降 等 诸 多 副 作 用, 并 且 肿 瘤 复 发 后, 部 分 肿 瘤 患 者 会 对 放 化 疗 产 生 较 强 的 耐 药 性, 从 而 导 致 治 疗 无 效 伴 随 现 代 分 子 生 物 学 分 子 免 疫 学 肿 瘤 免 疫 学 生 物 工 程 学 和 信 息 科 学 的 飞 速 发 展, 肿 瘤 的 生 物 治 疗 已 成 为 继 手 术 放 疗 和 化 疗 之 后 的 第 四 大 治 疗 模 式, 在 肿 瘤 综 合 治 疗 中 发 挥 着 愈 来 愈 重 要 的 作 用 肿 瘤 生 物 治 疗 是 通 过 从 体 外 补 充 诱 导 或 活 化 机 体 内 本 来 固 有 的 生 物 应 答 调 节 系 统, 活 化 和 调 动 具 有 细 胞 毒 活 性 的 生 物 活 性 细 胞 和 细 胞 因 子, 以 调 整 各 种 免 疫 杀 伤 性 的 生 物 反 应, 包 括 细 胞 因 子 技 术 过 继 性 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 单 克 隆 抗 体 及 其 偶 联 物 技 术 肿 瘤 疫 苗 技 术 和 基 因 治 疗 技 术 通 过 诱 导 机 体 主 动 免 疫 或 过 继 性 免 疫 法 来 重 新 调 整 被 破 坏 的 机 体 与 癌 之 间 的 平 衡, 使 癌 症 患 者 的 免 疫 功 能 得 到 恢 复, 延 长 患 者 生 存 期 ; 也 可 以 通 过 基 因 干 预 分 子 靶 向 放 射 免 疫 生 长 刺 激 等 多 种 生 物 调 节 机 制 来 调 整 多 种 生 物 反 应 和 生 物 信 息 传 导, 达 到 控 制 肿 瘤 生 长 的 目 的 从 目 前 肿 瘤 治 疗 研 究 的 趋 势 来 看, 手 术 放 化 疗 结 合 生 物 治 疗 的 综 合 治 疗 方 案 是 治 疗 肿 瘤 的 最 佳 手 段 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 技 术, 又 称 过 继 性 免 疫 细 胞 治 疗 (Adoptive cellular immunotherapy,aci) 是 目 前 肿 瘤 生 物 治 疗 在 基 础 研 究 和 临 床 应 用 中 最 活 跃 的 领

5 域, 它 促 进 肿 瘤 治 疗 由 器 官 靶 向 转 入 细 胞 靶 向 治 疗 阶 段 过 继 性 细 胞 免 疫 治 疗 是 将 体 外 培 养 活 化 基 因 修 饰 的 自 体 异 体 T 细 胞 或 NK 细 胞 回 输 给 患 者, 旨 在 利 用 这 些 体 外 驯 化 细 胞 所 拥 有 的 强 大 抗 肿 瘤 或 抗 病 毒 活 性 来 治 疗 疾 病 对 于 肿 瘤 治 疗 来 说,ACI 的 目 标 在 于 清 除 肿 瘤 细 胞 和 阻 止 肿 瘤 复 发 过 继 性 免 疫 细 胞 治 疗 包 括 肿 瘤 浸 润 性 淋 巴 细 胞 (TIL) 淋 巴 因 子 激 活 的 杀 伤 细 胞 (LAK) 细 胞 因 子 诱 导 的 杀 伤 细 胞 (CIK) 树 突 状 细 胞 (DC) 和 细 胞 毒 性 T 淋 巴 细 胞 (CTL) 等 多 种 治 疗 方 法 体 细 胞 与 多 种 肿 瘤 治 疗 手 段 相 结 合, 已 在 临 床 形 成 了 多 元 化 的 肿 瘤 生 物 治 疗 形 式, 将 肿 瘤 生 物 治 疗 推 向 了 新 的 发 展 阶 段 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 已 经 成 为 肿 瘤 临 床 综 合 治 疗 的 一 部 分, 目 前 越 来 越 多 的 实 验 与 临 床 试 验 证 明 : 对 晚 期 肿 瘤 患 者, 尤 其 是 不 能 接 受 放 疗 化 疗 或 放 化 治 疗 无 效 后 的 患 者, 应 用 细 胞 治 疗 仍 能 控 制 和 稳 定 病 情, 如 果 结 合 微 创 治 疗 效 果 更 好, 能 改 善 病 人 的 生 存 质 量 延 长 病 人 的 生 存 期 特 别 对 肿 瘤 微 小 病 灶 化 放 疗 后, 术 后 辅 助 放 化 疗 后 使 用 细 胞 治 疗 效 果 显 著, 能 使 病 人 长 期 无 瘤 生 存, 减 少 复 发 死 亡 风 险 生 物 治 疗 在 肿 瘤 治 疗 中 的 作 用 越 来 越 重 要, 是 不 可 阻 挡 的 发 展 趋 势 1.2 国 内 外 进 展 国 际 上, 生 物 细 胞 治 疗 研 究 已 经 开 展 多 年, 而 连 续 2 年 从 事 生 物 细 胞 治 疗 相 关 研 究 工 作 的 科 学 家 获 得 诺 贝 尔 生 理 与 医 学 奖, 预 示 着 生 物 细 胞 治 疗 将 是 疾 病 治 疗 的 未 来 发 展 方 向 而 在 临 床 治 疗 中, 生 物 细 胞 疗 法 已 在 多 种 重 大 疾 病 特 别 是 癌 症 病 人 治 疗 中 已 经 被 广 泛 应 用, 并 且 取 得 了 很 好 的 效 果 在 国 外, 生 物 细 胞 治 疗 特 别 是 免 疫 细 胞 治 疗 作 为 一 种 副 作 用 微 小 的 新 型 疗 法 已 经 引 起 极 大 的 关 注 2011 年 12 月 自 然 杂 志 Nature 上 发 表 一 篇 综 述 免 疫 治 疗 肿 瘤 的 时 代 已 经 到 来 (Cancer immunotherapy comes of age), 充 分 肯 定 了 生 物 细 胞 疗 法 治 疗 癌 症 病 人 的 效 果, 并 认 为 生 物 细 胞 治 疗 具 有 十 分 美 好 的 前 景 更 加 令 人 振 奋 的 是,DC 疫 苗 sipulucel-t(provenge) 已 被 美 国 FDA 批 准 用 于 前 列 腺 患 者 的 治 疗 在 2011 年, 美 国 与 欧 洲 同 时 批 准 生 物 细 胞 治 疗 药 物 Yervoy (Ipilimumab) 用 于 恶 性 黑 色 素 瘤 患 者 的 治 疗 不 仅 如 此,2012 年 与 2013 年 的 美 国 临 床 肿 瘤 学 医 师 大 会 (ASCO) 上 更 是 传 出 令 人 振 奋 的 消 息, 多 项 生 物 细 胞 治 疗 药 物 已 经 进 入 临 床 实 验, 并 取 得 了 良 好 的 疗 效 如 韩 国 的 CreaVaxRCC 巴 西 的 Hybricell 俄 罗 斯 的 OncoPhage

6 欧 洲 的 OncoVax 和 BiovaxID 加 拿 大 的 Melacrine 和 古 巴 的 CimaVax EGF 等 国 外 的 这 些 成 果 多 是 实 验 室 研 究 成 果, 并 有 部 分 一 期 二 期 临 床 试 验 而 在 我 国, 生 物 细 胞 治 疗 被 广 泛 应 用 于 临 床 中, 国 内 的 多 家 医 院 经 过 多 年 实 践 证 实 生 物 细 胞 治 疗 在 癌 症 病 人 治 疗 中 有 不 错 的 效 果 临 床 实 践 证 明, 生 物 细 胞 治 疗 能 够 改 善 肿 瘤 患 者 的 病 情, 特 别 是 恶 性 黑 色 素 瘤 肺 癌 鼻 咽 癌 肾 癌 患 者, 延 长 肿 瘤 患 者 生 存 期 生 物 细 胞 治 疗 经 历 了 一 个 由 非 特 异 性 治 疗 到 肿 瘤 特 异 性 治 疗 的 发 展 过 程 传 统 上 的 过 继 细 胞 免 疫 治 疗 如 淋 巴 因 子 激 活 的 杀 伤 细 胞 ( lymphokine activated killer cells,lak) 和 细 胞 因 子 诱 导 的 杀 伤 细 胞 (Cytokine-Induced Killer Cell,CIK) 治 疗, 是 非 特 异 的 免 疫 治 疗, 不 能 特 异 性 的 攻 击 肿 瘤 细 胞, 具 有 很 大 的 局 限 性, 疗 效 不 明 显 而 在 LAK 和 CIK 细 胞 治 疗 的 基 础 上, 从 肿 瘤 病 人 的 瘤 体 中 提 取 肿 瘤 浸 润 的 T 细 胞 (Tumor-infiltrating Lymphocyte,TIL) 的 治 疗 方 案 发 展 起 来 这 些 T 细 胞 主 要 是 肿 瘤 特 异 性 T 细 胞, 是 目 前 疗 效 最 肯 定 的 肿 瘤 生 物 治 疗 手 段 但 临 床 应 用 发 现 这 种 传 统 的 过 继 细 胞 免 疫 方 法 还 存 在 缺 陷 为 了 克 服 这 些 缺 陷, 用 基 因 转 染 技 术 把 克 隆 的 肿 瘤 TCR 导 入 患 者 自 身 的 或 来 自 于 正 常 人 的 T 细 胞 中, 使 这 些 正 常 T 细 胞 因 携 带 特 异 性 的 TCR 成 为 抗 原 特 异 性 的 T 细 胞 并 具 有 靶 向 特 异 性 的 识 别 并 清 除 肿 瘤 细 胞 的 功 能 该 技 术 可 在 体 外 产 生 大 量 的 肿 瘤 特 异 性 T 细 胞, 该 领 域 也 成 为 了 目 前 国 际 上 生 物 治 疗 研 究 的 热 点 课 题 近 年 来, 脐 血 细 胞 在 肿 瘤 治 疗 中 的 应 用 逐 渐 增 多, 这 类 细 胞 既 可 以 帮 助 恢 复 患 者 的 造 血 功 能, 又 可 以 抑 制 肿 瘤 的 生 长, 而 且 可 以 主 动 修 复 免 疫 系 统 脐 血 细 胞 诱 导 成 熟 的 T 细 胞 治 疗 成 为 了 肿 瘤 生 物 细 胞 治 疗 的 最 新 热 点 除 了 在 肿 瘤 患 者 治 疗 中 被 广 泛 采 用 外, 生 物 细 胞 治 疗 还 在 自 体 免 疫 病 患 者 和 病 毒 感 染 病 人 治 疗 中 被 广 泛 应 用 国 外 已 经 有 多 项 临 床 研 究 报 道, 但 在 临 床 实 践 中 的 应 用 还 比 较 少 而 在 我 国, 这 类 治 疗 的 研 究 与 应 用 更 是 滞 后, 目 前 尚 未 有 大 样 本 研 究 报 道 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 治 疗 从 基 础 研 究 走 向 临 床 应 用 经 历 了 漫 长 而 曲 折 的 过 程, 从 淋 巴 因 子 激 活 的 杀 伤 细 胞 ( lymphokine activated killer cells,lak) 的 兴 起 与 废 止, 到 树 突 状 细 胞 - 细 胞 因 子 诱 导 的 杀 伤 细 胞 ( dendritic cells-cytokine induced killer cells,dc-cik) 的 迅 猛 发 展, 再 到 sipleucel-t 批 准 上 市, 见 证 了 细 胞 治 疗 发 展 的

7 艰 辛 历 程 下 面 就 目 前 主 要 应 用 的 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 进 行 阐 述 细 胞 因 子 诱 导 的 杀 伤 细 胞 ( CIK) CIK 细 胞 是 由 血 液 或 骨 髓 的 单 个 核 细 胞 在 体 外 与 多 种 细 胞 因 子 共 同 培 养 获 得 的 NK 样 T 细 胞, 兼 有 T 细 胞 的 抗 瘤 活 性 与 NK 细 胞 的 非 MHC 限 制 性 杀 瘤 特 点 CIK 细 胞 是 一 种 异 质 细 胞, 是 一 个 混 合 的 细 胞 群 体 CD3 + CD56 + 细 胞 和 CD3 + CD8 + 细 胞 是 其 主 要 成 分, 其 主 要 的 效 应 细 胞 是 CD3 + CD56 + 细 胞 虽 然 CD3 + CD56 + 细 胞 在 外 周 血 淋 巴 细 胞 中 仅 含 1% ~ 5%, 然 而 该 细 胞 可 在 一 定 的 培 养 条 件 下 迅 速 扩 增, 一 般 情 况 下 在 体 外 培 养 20 d 左 右 扩 增 数 量 可 达 倍 以 上, 而 且 回 输 体 内 后, 在 IL-2 存 在 的 情 况 下 仍 可 进 一 步 增 殖 目 前 认 为 CIK 细 胞 的 抗 肿 瘤 作 用 机 制 可 能 有 以 下 方 面 : ( 1) 当 CIK 细 胞 被 激 活 时, 通 过 免 疫 球 蛋 白 Fc 受 体 使 淋 巴 细 胞 功 能 相 关 抗 原 -1 (LFA-1) 和 细 胞 间 黏 附 分 子 (ICAM-1) 的 结 合 从 低 亲 和 力 转 为 高 亲 和 力, 并 向 细 胞 外 排 出 含 有 α- 氮 - 甲 苯 碳 酰 基 - 左 旋 - 赖 氨 酸 硫 甲 苯 酯 的 毒 性 颗 粒, 引 发 毒 性 颗 粒 依 赖 性 溶 细 胞 作 用, 致 靶 细 胞 死 亡 ; ( 2) CIK 细 胞 也 可 因 表 面 CD3 受 体 结 合 而 激 活,CD3 与 T 细 胞 抗 原 受 体 结 合, 参 与 信 号 传 递, 导 致 胞 质 毒 性 颗 粒 释 放 而 产 生 溶 瘤 作 用 ; ( 3) CIK 细 胞 自 身 能 分 泌 IL-2 IL-6 TNF 和 GM-CSF 等 细 胞 因 子, 这 些 因 子 在 较 高 浓 度 下 可 单 独 杀 伤 靶 细 胞 或 提 高 效 应 细 胞 的 活 性 ; ( 4) CD3 + CD56 + CIK 细 胞 能 分 泌 穿 孔 蛋 白 (PFP), 该 蛋 白 与 靶 细 胞 溶 解 有 关 ;( 5) CIK 细 胞 也 可 诱 导 肿 瘤 细 胞 凋 亡, 因 CIK 细 胞 能 活 化 肿 瘤 细 胞 凋 亡 基 因 1991 年 Schmidt 等 首 次 报 道 了 CIK 细 胞, 1996 年 国 内 已 有 CIK 细 胞 治 疗 技 术 临 床 应 用 的 研 究 论 文 发 表, 目 前 国 内 已 有 超 过 百 家 的 医 疗 单 位 开 展 了 该 项 治 疗 技 术 的 相 关 临 床 应 用 与 研 究 Hontscha 等 对 多 项 临 床 试 验 归 纳 发 现, 治 疗 的 384 例 患 者 中,24 例 获 得 完 全 缓 解,27 例 患 者 部 分 缓 解, 仅 有 3 例 患 者 肿 瘤 减 小 ; 由 于 单 一 的 CIK 细 胞 难 以 达 到 缩 小 肿 瘤 体 积 的 疗 效, 因 此 常 作 为 辅 助 治 疗, 与 手 术 或 放 化 疗 联 合 应 用 中 国 是 世 界 上 唯 一 批 准 CIK 细 胞 治 疗 用 于 临 床 的 国 家 由 于 卫 生 部 将 CIK 细 胞 治 疗 列 入 可 以 开 展 的 第 三 类 临 床 技 术, 中 国 人 口 底 数 大, 肿 瘤 发 病 率 高, 这 一 技 术 在 过 去 的 5 年 之 内 基 本 覆 盖 各 大 三 甲 医 院, 并 且 许 多 中 小 医 院 也 引 进 了 该 项 技 术, 使 得 CIK 成 为 肿 瘤 免 疫 治 疗 应 用 最 广 泛 的 手 段 虽 然 CIK 在 清 除 微 小 病 灶 残 留 促 进 患 者 免 疫 能 力 上 具 有 一 定 的 作 用, 然 而 由 于 其 缺 乏 靶 向 肿 瘤 杀 伤 作 用,

8 在 肿 瘤 的 治 疗 效 果 方 面 仍 非 常 有 限 另 外, 在 CIK 研 究 及 DC 研 究 的 基 础 上, 实 验 研 究 还 证 实,DC-CIK 共 培 养 后 其 抗 肿 瘤 活 性 明 显 高 于 单 纯 CIK 因 此 临 床 上 利 用 DC 和 CIK 联 合 治 疗 的 方 案 也 是 目 前 比 较 常 见 的 手 段 DC-CIK 细 胞 抗 肿 瘤 治 疗 的 特 点 包 括 : 1DC 刺 激 CIK 细 胞 后, 其 抗 肿 瘤 活 性 显 著 增 高 2DC 与 CIK 细 胞 共 培 养 时,DC 成 熟 表 面 标 志 CD86 CD80 CD40 人 类 白 细 胞 抗 原 表 达 增 加, 细 胞 上 清 IL-12 干 扰 素 γ 分 泌 量 明 显 增 多, 增 加 DC 和 共 刺 激 分 子 呈 递 抗 原 的 特 异 性 3DC 细 胞 激 活 CIK 细 胞 增 殖, 从 而 得 到 大 量 高 效 的 免 疫 细 胞 4DC 与 CIK 细 胞 共 培 养 可 降 低 CIK 细 胞 群 中 免 疫 抑 制 T 细 胞 ( Treg 即 CD4+ CD25+ 细 胞 ) 的 数 量 及 其 分 泌 的 IL-10, 削 弱 Treg 对 抗 肿 瘤 免 疫 细 胞 的 抑 制 作 用 自 然 杀 伤 细 胞 ( NK 细 胞 ) 自 然 杀 伤 细 胞 (natural killer cell,nk cell) 的 发 现 距 今 已 有 35 年 的 历 史, 属 于 固 有 免 疫 系 统, 是 人 体 免 疫 系 统 的 第 一 道 防 线 是 已 知 最 有 效 的 杀 伤 肿 瘤 细 胞 的 免 疫 细 胞 之 一 NK 细 胞 约 占 血 液 中 淋 巴 细 胞 的 10%~15%, 同 时 也 存 在 于 外 周 组 织 中, 如 肝 脏 腹 膜 腔 胎 盘 等 NK 细 胞 识 别 靶 细 胞 无 MHC 限 制 性, 可 以 在 无 预 先 致 敏 的 情 况 下 杀 伤 肿 瘤 细 胞 同 时, 还 可 以 产 生 一 系 列 的 细 胞 因 子, 进 而 对 机 体 的 获 得 性 免 疫 进 行 调 节, 是 连 接 机 体 固 有 免 疫 和 特 异 性 免 疫 的 桥 梁 NK 细 胞 具 有 以 下 功 能 :( 1) 对 病 毒 感 染 细 胞 白 血 病 细 胞 及 其 他 肿 瘤 细 胞 产 生 直 接 细 胞 毒 活 性 ;( 2) 分 泌 多 种 免 疫 调 节 细 胞 因 子 ( 如 :IFN- γ, TNF- α, GM- CSF) ;( 3) 通 过 细 胞 膜 FcγRⅢ( CD16) 与 抗 体 Fc 段 结 合 从 而 介 导 抗 体 依 赖 的 细 胞 毒 ( ADCC) 作 用 临 床 造 血 干 细 胞 移 植 和 过 继 NK 细 胞 免 疫 治 疗 结 果 提 示 NK 细 胞 在 控 制 和 ( 或 ) 清 除 一 些 人 造 血 系 统 恶 性 肿 瘤 具 有 一 定 作 用 通 常 情 况 下, 浸 润 到 肿 瘤 组 织 中 的 NK 细 胞 数 量 非 常 少, 有 NK 细 胞 浸 润 的 肿 瘤 类 型 也 很 少, 在 某 些 类 型 的 肿 瘤 中, NK 细 胞 浸 润 肿 瘤 组 织 显 著 延 长 了 患 者 的 生 存 时 间, 此 外, 有 NK 细 胞 浸 润 的 肿 瘤 扩 散 的 比 率 也 明 显 低 于 没 有 NK 细 胞 浸 润 的 患 者 临 床 试 验 表 明, 自 体 NK 细 胞 输 注 是 安 全 的, 但 NK 细 胞 短 期 活 化 对 细 胞 表 型 和 功 能 的 恢 复 不 够, 自 体 NK 细 胞 输 注 要 发 挥 临 床 作 用 可 能 需 要 长 期 的 体 外 活 化 为 验 证 此 假 设,Alici 等 对 来 自 多 发 性 骨 髓 瘤 患 者 的 自 体 NK 细 胞 分 别 进 行 长 期 和 短 期 的 扩 增 和 活 化 发 现 长 期 活 化 NK 细 胞 对 自 身 肿 瘤 细 胞 的 杀 伤 活

9 性 明 显 高 于 短 期 活 化 应 进 一 步 完 善 与 提 高 NK 细 胞 体 外 活 化 和 扩 增 技 术 树 突 状 细 胞 ( DC) DC 细 胞 是 目 前 已 知 功 能 最 强 的 专 职 抗 原 呈 递 细 胞, 成 熟 DC 可 有 效 诱 导 抗 原 特 异 性 T 细 胞 增 殖 和 活 化, 是 机 体 抗 肿 瘤 免 疫 反 应 的 主 要 启 动 者 和 参 与 者 树 突 状 细 胞 (DC) 的 发 现 是 最 近 几 十 年 来 免 疫 学 里 程 碑 式 的 成 就, 也 扮 演 着 从 Innate 免 疫 ( 非 特 异 性 ) 转 向 Adaptive 免 疫 ( 特 异 性 ) 的 枢 纽 而 DC 的 发 现 者 Ralph Steinman 也 获 得 2011 年 诺 贝 尔 奖 树 突 状 细 胞 最 吸 引 人 的 地 方 是 能 够 将 抗 原 吸 收, 处 理, 并 表 达 到 细 胞 表 面, 让 T 细 胞 识 别 并 激 活, 从 而 杀 死 带 有 这 种 表 面 抗 原 的 细 胞 ( 如 病 毒 感 染 细 胞 和 某 些 肿 瘤 细 胞 ) 单 一 性 DC 细 胞 以 DC 为 基 础 的 肿 瘤 疫 苗 或 DC 联 合 其 他 过 继 性 细 胞 治 疗 均 可 有 效 地 激 发 特 异 性 抗 肿 瘤 免 疫 反 应, 被 公 认 为 最 有 前 途 的 肿 瘤 治 疗 手 段 基 于 DC 细 胞 的 研 究, 肿 瘤 疫 苗 领 域 出 现 了 将 肿 瘤 相 关 抗 原 或 肿 瘤 特 异 抗 原 负 载 于 DC 细 胞 而 获 得 的 DC 疫 苗, 通 过 DC 细 胞 呈 递 肿 瘤 抗 原 或 肿 瘤 抗 原 基 因 转 染 DC, 直 接 激 活 T 细 胞, 大 大 提 高 了 免 疫 细 胞 杀 伤 肿 瘤 细 胞 的 靶 向 性 2010 年 4 月, 美 国 食 品 和 药 品 监 督 管 理 局 批 准 了 Sipuleucel-T( Provenge) 治 疗 晚 期 前 列 腺 癌, 此 方 制 备 了 具 有 前 列 腺 癌 特 异 性 抗 原 前 列 腺 酸 性 磷 酸 酶 (PAP) 和 GM-CSF 的 融 合 蛋 白 PA2024, 将 PA2024 与 DC 细 胞 相 互 作 用 制 备 肿 瘤 疫 苗, 通 过 激 发 患 者 自 身 特 异 性 免 疫 应 答 治 疗 前 列 腺 癌, 适 用 于 转 移 且 常 规 激 素 治 疗 无 效 的 无 症 状 或 症 状 轻 微 的 患 者 临 床 前 Ⅰ~Ⅲ 期 研 究 不 仅 证 明 了 Provenge 的 安 全 性, 而 且 Provenge 能 诱 导 机 体 特 异 性 免 疫 应 答,31 例 转 移 性 雄 激 素 抵 抗 型 前 列 腺 癌 患 者 中 有 38% 产 生 针 对 PAP 的 T 细 胞 效 应,53% 产 生 特 异 性 抗 体,3 例 患 者 PSA 降 低 > 50%, 另 外 3 例 PSA 降 低 25%~49% CAR-T 过 继 性 T 细 胞 回 输 技 术 被 用 于 肿 瘤 治 疗 有 着 超 过 50 年 的 历 史, 但 在 早 期 由 于 对 T 细 胞 功 能 和 肿 瘤 抗 原 的 了 解 不 够, 在 策 略 上 没 有 优 化, 导 致 其 疗 效 甚 微 现 在, 由 于 对 T 细 胞 免 疫 学 以 及 肿 瘤 免 疫 学 的 飞 速 发 展, 人 们 认 识 到 由 于 肿 瘤 突 变 抗 原 的 存 在, 免 疫 系 统 基 于 这 一 特 点 可 以 区 分 正 常 组 织 和 肿 瘤 组 织 这 些 突 变 的 抗 原 能 够 被 T 细 胞 特 殊 识 别, 从 而 在 从 原 则 上 肯 定 了 过 继 性 T 细 胞 回 输 技 术 能 够 特 异 性 杀 伤 肿 瘤, 用 于 肿 瘤 治 疗 的 可 能 性 嵌 合 抗 原 受 体 ( chimeric antigen receptor,car) 修 饰 T 细 胞 是 近 年 来 迅 速 发 展 的 肿 瘤 过 继 免 疫 治 疗 新 手 段, 其

10 独 特 的 作 用 机 制 和 诱 人 的 应 用 前 景 为 肿 瘤 生 物 治 疗 开 辟 了 一 个 崭 新 的 舞 台 CAR 将 识 别 肿 瘤 相 关 抗 原 的 单 链 抗 体 和 T 细 胞 的 活 化 基 序 相 结 合, 通 过 基 因 转 导 赋 予 T 细 胞 肿 瘤 靶 向 性 更 强 的 杀 伤 活 性 和 持 久 的 生 命 力, 转 染 CAR 基 因 的 T 细 胞 可 以 通 过 非 MHC 依 赖 的 方 式 直 接 特 异 性 识 别 和 杀 伤 肿 瘤 细 胞 由 于 CAR-T 能 够 克 服 病 人 HLA 的 局 限 性, 对 肿 瘤 抗 原 的 高 亲 和 力, 使 其 成 为 当 前 主 要 的 过 继 性 T 细 胞 回 输 技 术 的 研 究 和 治 疗 方 向 这 些 改 造 过 的 超 级 T 细 胞 具 有 强 大 的 肿 瘤 杀 伤 能 力, 每 个 细 胞 能 杀 伤 1000 到 4000 个 肿 瘤 细 胞, 远 远 好 于 未 改 造 T 细 胞 由 TCR 介 导 的 杀 伤 基 于 CAR 技 术 的 T 细 胞 回 输 技 术, 在 对 常 规 治 疗 无 效 的 B 细 胞 淋 巴 癌 中 显 示 了 85-90% 的 有 效 率, 也 正 是 其 令 人 瞩 目 的 疗 效 使 得 其 与 免 疫 监 测 点 阻 断 抗 体 疗 法 一 起 被 Science 评 为 2013 年 度 十 大 科 学 突 破 之 首 1989 年,Eshhar 研 究 小 组 首 次 提 出 将 针 对 肿 瘤 抗 原 单 克 隆 抗 体 的 可 变 区 和 T 细 胞 受 体 ( T cellreceptor,tcr) 的 亚 基 融 为 一 体, 重 定 向 T 细 胞 ( redirectingt cell) 的 免 疫 反 应 表 达 CAR 的 T 细 胞 以 抗 原 依 赖 非 MHC 限 制 的 方 式 结 合 肿 瘤 抗 原, 启 动 并 活 化 下 游 级 联 反 应, 特 异 性 杀 伤 肿 瘤 第 一 代 CAR 由 识 别 肿 瘤 表 面 抗 原 的 单 链 抗 体 ( single chain variable fragment,scfv) 和 免 疫 受 体 酪 氨 酸 活 化 基 序 ( immunoreceptor tyrosine-based activation motif,itam, 通 常 为 CD3δ 和 FcεRIγ) 组 成 早 期 的 实 验 证 明 了 CAR 的 可 行 性, 然 而 第 一 代 CAR 只 能 引 起 短 暂 的 T 细 胞 增 殖 和 较 低 的 细 胞 因 子 分 泌, 不 能 提 供 长 时 间 的 T 细 胞 扩 增 信 号 和 持 续 的 体 内 抗 肿 瘤 效 应 依 照 T 细 胞 活 化 的 双 信 号 模 型, 第 二 和 三 代 CAR 引 入 了 共 刺 激 分 子 ( costimulatory molecule,cm), 旨 在 提 高 T 细 胞 的 细 胞 毒 活 性 增 殖 性 与 存 活 时 间, 促 进 细 胞 因 子 的 释 放 众 多 的 研 究 以 肿 瘤 抗 原 识 别 - 细 胞 因 子 释 放 - 细 胞 毒 性 反 应 激 活 的 嵌 合 模 式, 验 证 了 抗 Her2 CEA PMSA 等 单 链 抗 体 与 CD28 CD134 ( OX40) CD137( 4-1BB) 等 共 刺 激 分 子 构 成 的 CAR 转 染 T 细 胞 后 的 抗 肿 瘤 作 用 共 刺 激 分 子 在 决 定 T 细 胞 激 活 阀 值 应 答 类 型 和 存 活 时 间 等 方 面 至 关 重 要 为 了 进 一 步 提 高 T 细 胞 的 抗 肿 瘤 活 性, 第 三 代 CAR 引 入 了 双 共 刺 激 分 子 研 究 表 明, 与 第 二 代 CD28-CD3δ T 细 胞 相 比, 第 三 代 CD28-CD134-CD3δT 细 胞 分 泌 的 细 胞 因 子 ( Th1 /Th2) 能 够 产 生 更 强 更 持 久 的 抗 肿 瘤 作 用

11 CAR 结 构 图 CAR 胞 内 信 号 区 的 结 构 演 变 随 着 免 疫 学 基 因 治 疗 和 细 胞 工 程 等 领 域 不 断 取 得 新 突 破,CAR 从 实 验 室 向 临 床 转 化 的 障 碍 将 会 逐 一 扫 除,CAR 有 望 成 为 主 流 的 肿 瘤 治 疗 方 法 基 于 CD19/20 是 目 前 发 现 的 B 细 胞 癌 变 的 肿 瘤 特 异 性 抗 原, 而 在 其 他 组 织 中 均 不 表 达 ( 成 熟 B 细 胞 也 表 达 ),CD19/20-CAR 在 B 细 胞 淋 巴 瘤 急 性 淋 巴 细 胞 白 血 病 (ALL) 慢 性 淋 巴 细 胞 白 血 病 (CLL) 上 的 的 临 床 试 验 中 成 就 尤 为 瞩 目 全 球 最 知 名 的 CAR-T 研 究 学 者 宾 州 大 学 Carl June 教 授 2011 年 在 The New England Journal of Medicine 上 报 道, 使 用 第 二 代 CD19-CAR 修 饰 T 细 胞 治 疗 3 例 CLL 患 者,2 例 达 到 完 全 缓 解,1 例 病 情 稳 定,CAR 修 饰 T 细 胞 在 体 内 扩 增 倍 以 上 维 持 活 性 达 6 个 月 之 久, 部 分 CAR 修 饰 T 细 胞 甚 至 以 记 忆 细 胞 形 式 存 在 2014 年 Carl June 团 队 同 样 在 The New England Journal of Medicine 上 报 道 了 一

12 个 更 大 样 本 量 的 临 床 试 验 :ALL 入 组 病 例 总 共 30 例, 其 中 27 例 病 人 达 到 完 全 缓 解, 完 全 缓 解 率 达 90%, 进 一 步 显 示 了 CAR-T 在 恶 性 血 液 病 上 的 良 好 效 果 正 是 由 于 CAR-T 在 在 血 液 肿 瘤 治 疗 上 显 示 出 的 令 人 振 奋 的 良 好 效 果 及 其 在 实 体 瘤 上 的 巨 大 应 用 潜 力, 全 球 制 药 巨 头 纷 纷 花 巨 资 投 入 该 领 域 的 相 关 产 品 开 发 2012 年 8 月 6 日 诺 华 (Novartis) 宣 布, 与 美 国 宾 夕 法 尼 亚 大 学 达 成 独 家 全 球 性 合 作, 研 究 开 发 并 商 业 化 靶 向 性 嵌 合 抗 原 受 体 免 疫 疗 法 2014 年 7 月 10 日 FDA 宣 布 已 经 授 予 诺 华 公 司 开 发 的 个 性 化 CAR-T 癌 症 疗 法 CTL019 突 破 性 药 物 认 证 2014 年 9 月, 诺 华 投 资 2000 万 美 元, 在 费 城 建 立 一 个 专 门 负 责 开 发 CAR-T 疗 法 的 研 发 中 心 10 月 15 日, 与 英 国 牛 津 生 物 医 药 (Oxford BioMedica) 签 署 一 笔 9000 万 美 元 的 合 作 协 议, 进 一 步 扩 大 双 方 在 CAR-T 领 域 的 合 作 辉 瑞 (Pfizer) 是 诺 华 在 CAR-T 领 域 投 资 的 跟 进 者,2014 年 6 月 18 日, 辉 瑞 与 法 国 生 物 技 术 公 司 Cellectis 联 合 宣 布 双 方 已 达 成 全 球 战 略 性 合 作, 签 署 29 亿 美 元 协 议 进 入 CAR-T 领 域 辉 瑞 将 支 付 一 笔 8000 万 美 元 的 预 付 款, 作 为 辉 瑞 所 选 择 靶 标 及 双 方 合 作 的 4 个 靶 标 的 研 发 资 金 肿 瘤 细 胞 免 疫 治 疗 经 过 近 30 年 的 临 床 研 究, 已 经 迈 入 了 一 个 崭 新 的 发 展 时 期 作 为 肿 瘤 细 胞 免 疫 治 疗 领 域 的 最 杰 出 代 表,CAR-T 在 B 细 胞 恶 性 肿 瘤 治 疗 上 取 得 的 重 大 成 就, 也 吸 引 了 全 球 制 药 巨 头 诺 华 辉 瑞 等 纷 纷 涉 足 本 领 域 毫 无 疑 问, CAR-T 疗 法 当 前 只 是 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 大 家 庭 中 的 一 员, 未 来 将 有 更 多 的 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 在 临 床 应 用 上 获 得 革 命 性 突 破, 因 此 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 的 发 展 前 景 毋 庸 置 疑, 也 可 能 是 解 决 肿 瘤 治 疗 难 题 的 终 极 解 决 方 案 二 主 要 内 容 本 项 目 主 要 研 究 及 应 用 的 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 技 术 体 系 包 括 以 下 内 容 : 1 Mac-DC/CIK, 隆 耀 生 物 自 主 开 发 的 多 重 激 活 CIK 和 多 种 激 活 DC-CIK 技 术, 比 普 通 免 疫 细 胞 技 术 能 获 得 更 高 水 平 的 NKT 细 胞 及 更 高 的 肿 瘤 杀 伤 能 力 应 用 于 多 种 肿 瘤 的 广 谱 性 术 后 治 疗 2 H-NK, 高 效 活 化 NK, 获 得 最 高 达 90% 纯 度 的 NK 细 胞, 且 肿 瘤 杀 伤 能 力 高 于 普 通 NK 技 术 3-4 倍 主 要 应 用 于 恶 性 血 液 病 的 广 谱 性 术 后 治 疗 3 DC1s-CTL, 结 合 靶 向 DC 疫 苗 及 体 外 特 异 性 CTL 扩 增 的 靶 向 高 效 免 疫 治 疗 技 术 由 隆 耀 生 物 与 美 国 匹 兹 堡 大 学 合 作 开 发 目 前 可 以 针 对 13 种 肿 瘤 开 展 靶 向 治 疗, 结 合 了 最 新 的 DC 疫 苗 技 术 及 抗 原 肽 技 术

13 4 CD20-CAR, 基 于 CD20 抗 体 的 第 三 代 嵌 合 抗 原 受 体 技 术 由 隆 耀 生 物 与 美 国 芝 加 哥 大 学 合 作 研 发 CAR 技 术 是 目 前 能 确 定 治 愈 肿 瘤 的 最 前 沿 的 免 疫 治 疗 方 法 CD20-CAR 主 要 用 于 急 性 淋 巴 细 胞 白 血 病 (ALL) 慢 性 淋 巴 细 胞 白 血 病 (CLL) B 细 胞 淋 巴 瘤 等 B 细 胞 癌 变 的 恶 性 血 液 病 CAR 研 发 内 容 以 临 床 前 研 究 为 主, 完 成 CD20-CAR 的 动 物 实 验 模 型 试 验 三 项 目 创 新 点 该 免 疫 细 胞 治 疗 研 究 及 转 化, 技 术 创 新 及 先 进 性 主 要 体 现 以 下 几 个 方 面 : 1 免 疫 细 胞 培 养 与 功 能 的 改 进 : 目 前 临 床 应 用 的 免 疫 细 胞 治 疗 方 案 在 不 同 患 者 中 的 疗 效 差 异 较 大, 这 与 患 者 个 体 差 异 有 关, 为 了 克 服 这 些 困 难, 我 们 将 研 究 患 者 个 体 化 治 疗 方 案, 调 整 细 胞 培 养 方 案, 使 治 疗 更 加 个 性 化 特 异 化, 增 强 免 疫 细 胞 功 能, 提 高 免 疫 细 胞 治 疗 效 果 ; 2 NK 细 胞 /NK 样 T 细 胞 治 疗 研 究 : 通 过 体 外 扩 增 非 特 异 性 肿 瘤 杀 伤 性 细 胞, 并 改 善 其 扩 增 及 向 肿 瘤 归 巢 能 力, 与 上 述 肿 瘤 特 异 性 治 疗 方 案 一 起 应 用, 达 到 更 佳 的 清 除 肿 瘤 作 用 ; 3 Ⅰ 型 极 化 树 突 免 疫 细 胞 (DC1s) 的 研 究 : 树 突 细 胞 疫 苗 是 国 际 上 细 胞 治 疗 研 究 的 重 点, 主 要 应 用 于 肿 瘤 病 毒 性 疾 病 包 括 肝 炎 以 及 自 身 免 疫 性 疾 病 等 的 临 床 治 疗 树 突 状 细 胞 是 人 体 内 效 用 最 强 的 抗 原 呈 递 细 胞, 它 在 体 内 和 体 外 均 可 激 活 自 然 杀 伤 T 细 胞, 这 一 特 点 使 得 DC 细 胞 成 为 癌 症 疫 苗 研 究 中 最 有 吸 引 力 的 辅 助 细 胞 但 是, 以 DC 为 基 础 的 疫 苗 只 能 从 患 者 自 身 获 得 树 突 状 细 胞, 费 用 昂 贵 的, 且 细 胞 的 供 应 有 限 我 们 团 队 将 优 化 筛 选 高 效 的 DC 细 胞 亚 群 Ⅰ 型 极 化 树 突 免 疫 细 胞 (DC1s) 来 克 服 这 一 缺 陷, 同 时 在 体 外 能 够 大 量 扩 增, 制 造 出 适 合 临 床 大 规 模 应 用 的 癌 症 疫 苗 4 基 因 改 造 免 疫 细 胞 功 能 的 研 究 : 利 用 包 括 分 子 生 物 学 基 因 工 程 等 在 内 的 各 种 现 代 生 物 技 术, 将 识 别 肿 瘤 相 关 抗 原 的 单 链 抗 体 和 T 细 胞 的 活 化 基 序 相 结 合, 通 过 基 因 转 导, 以 嵌 合 抗 原 受 体 ( chimeric antigen receptor,car) 修 饰 T 细 胞, 赋 予 T 细 胞 的 肿 瘤 靶 向 性, 能 够 重 塑 T 增 殖 性 和 持 久 性, 有 效 地 提 高 其 特 异 性 杀 伤 活 性

14 5 脐 血 来 源 免 疫 细 胞 的 功 能 研 究 : 肿 瘤 杀 伤 性 免 疫 细 胞 因 为 是 成 体 细 胞, 增 值 能 力 有 限, 往 往 在 体 内 存 活 时 间 短, 很 容 易 凋 亡, 不 能 持 久 存 在 而 脐 血 细 胞 具 有 增 殖 能 力 强, 存 活 时 间 长 等 特 点, 通 过 细 胞 生 物 学 等 手 段 把 脐 血 细 胞 诱 导 转 化 成 为 具 有 肿 瘤 杀 伤 能 力 的 免 疫 细 胞, 来 解 决 目 前 疾 病 生 物 治 疗 中 存 在 的 问 题 和 瓶 颈 ; 6 改 善 肿 瘤 微 环 境, 促 进 肿 瘤 免 疫 治 疗 效 果 : 根 据 已 知 的 肿 瘤 微 环 境 免 疫 抑 制 因 素, 开 展 体 内 和 体 外 实 验 来 研 究 降 低 这 些 危 险 因 素 的 手 段, 来 达 到 增 进 免 疫 治 疗 效 果 的 目 的 ; 7 清 除 免 疫 调 节 细 胞 (Treg) 和 免 疫 抑 制 细 胞 (Ts) 的 抑 制 功 能 : 在 肿 瘤 患 者 中, Treg 细 胞 和 Ts 细 胞 往 往 抑 制 肿 瘤 杀 伤 细 胞 的 活 性, 影 响 细 胞 治 疗 的 效 果, 我 们 前 期 研 究 发 现 通 过 加 入 不 同 的 细 胞 因 子 或 抑 制 剂 能 够 改 变 肿 瘤 微 环 境 中 Treg 细 胞 和 Ts 细 胞 的 含 量 及 贮 存, 可 影 响 细 胞 治 疗 的 影 响 我 们 将 进 一 步 对 此 进 行 研 究, 分 析 如 何 清 除 不 同 肿 瘤 患 者 体 内 的 Treg 细 胞 和 Ts 细 胞, 来 提 高 细 胞 治 疗 效 果 四 项 目 目 标 技 术 研 发 类 项 目 列 出 技 术 指 标 ; 产 业 化 项 目 创 新 载 体 项 目 的 效 益 分 析 ( 经 济 社 会 生 态 效 益 等 ) 1 总 体 目 标 该 项 目 实 施 年 限 为 二 年, , 项 目 执 行 期 间 计 划 总 投 资 额 为 600 万 元, 新 建 总 建 筑 面 积 为 200 平 米 的 生 物 治 疗 GMP 实 验 室, 将 建 成 内 蒙 古 自 治 区 内 乃 至 西 北 地 区 集 细 胞 免 疫 治 疗 应 用 转 化 细 胞 制 备 标 准 化 治 疗 服 务 于 一 体 的 完 整 的 产 业 链 研 究 及 开 发 Mact-DC/CIK H-NK DC1s-CTL 以 及 CAR-T 技 术, 开 发 相 关 产 品 4-6 种, 并 实 现 技 术 及 产 品 的 产 业 转 化, 年 提 供 治 疗 用 免 疫 细 胞 500 份 在 自 治 区 内 占 据 70% 左 右 的 生 物 治 疗 市 场 在 生 物 治 疗 行 业 内 成 为 世 界 一 流 的 生 物 治 疗 技 术 服 务 及 产 品 公 司, 并 吸 引 周 边 省 市 患 者 前 往 合 作 医 院 治 疗 2 技 术 创 新 目 标 该 项 目 完 成 后, 将 在 免 疫 细 胞 及 在 肿 瘤 治 疗 等 技 术 方 面 实 现 较 大 的 突 破, 主 要 实 现 的 技 术 创 新 目 标 包 括 以 下 几 点 :

15 1) 建 立 省 内 首 个 专 业 的 生 物 治 疗 的 免 疫 细 胞 制 备 及 质 量 控 制 平 台, 建 立 免 疫 细 胞 制 备 及 应 用 的 企 业 标 准 ; 2) 国 内 首 次 研 究 及 开 发 Mact-DC/CIK 技 术 及 产 品, 采 用 OKT3 糖 脂 等 多 种 因 子 诱 导 刺 激, 获 得 的 D3 + CD56 + NKT 细 胞 及 NK 细 胞 等 效 应 细 胞 比 例 大 于 70%, 细 胞 扩 增 数 量 达 到 7 亿 -10 亿 数 量 级 3) 国 内 首 次 研 究 及 开 发 H-NK 技 术 及 产 品, 以 饲 养 细 胞 系 转 录 稳 定 表 达 IL-12 IL-15 IL-18 IL-21 等 细 胞 因 子 及 共 刺 激 分 子 (4-1BBL), 使 上 述 细 胞 因 子 表 达 在 细 胞 膜 上, 成 为 跨 膜 蛋 白 经 辐 照 及 离 心 收 集 饲 养 细 胞, 与 PBMC 共 同 培 养, 选 择 性 扩 增 NK 细 胞 通 过 此 方 法 获 得 的 NK 细 胞 数 量 扩 增 ±26.13 倍, 杀 伤 功 能 (CD107a 脱 颗 粒 ) 提 高 4 倍 左 右, 分 泌 细 胞 因 子 功 能 ( 胞 内 IFNg 表 达 ) 提 高 15 倍 左 右 4) 国 内 首 次 研 究 及 开 发 DC1s-CTL 技 术 及 产 品,DC1s,1 型 极 化 DC 细 胞, 与 常 规 DC 诱 导 方 法 (GM-CSF/IL-4/TNF-α 诱 导 体 系 ) 相 比,IL-12 的 分 泌 量 最 高 增 加 100 倍 IL-12 是 诱 导 CTL 生 成 最 重 要 的 第 三 信 号 分 子 1 型 趋 化 因 子 CXCL10 分 泌 量 也 大 大 增 强 不 同 抗 原 肽 诱 导 产 生 的 CTL 的 水 平 提 升 40 倍 建 立 肿 瘤 抗 原 库, 开 发 包 括 黑 色 素 瘤 肝 癌 肺 癌 乳 腺 癌 食 管 癌 肾 癌 前 列 腺 癌 胃 癌 卵 巢 癌 胰 腺 癌 结 直 肠 癌 头 颈 部 肿 瘤 肉 瘤 13 种 肿 瘤 抗 原 复 合 物 5) 建 立 CD20-CAR-T 技 术 体 系, 国 内 率 先 实 现 CAR-T 技 术 在 急 慢 性 粒 细 胞 白 血 病 以 及 B 细 胞 淋 巴 瘤 的 临 床 应 用 6) 主 持 内 蒙 古 自 治 区 免 疫 细 胞 的 制 备 及 质 量 控 制 技 术 标 准 的 制 定, 完 成 30 例 肿 瘤 病 人 的 临 床 试 验 4 经 济 与 社 会 发 展 目 标 项 目 实 施 期 内, 开 发 出 4-6 种 免 疫 细 胞 技 术 及 产 品, 并 将 技 术 及 产 品 产 业 化 应 用 于 临 床 治 疗, 累 计 实 现 销 售 收 入 300 万 元 项 目 完 成 后 3 年 销 售 收 入 翻 两 番, 即 2020 年, 年 销 售 收 入 为 1200 万 元, 缴 税 总 额 为 200 万, 实 现 净 利 润 超 过 380 万 元 项 目 实 施 完 成 后, 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 在 内 蒙 古 自 治 区 内 将 占 据 70% 的 市 场, 企 业 在 国 内 生 物 治 疗 胞 行 业 内 整 体 实 力 进 入 前 列 该 项 目 将 引 进 美 国 芝 加 哥 大 学 匹 兹 堡 大 学 以 及 国 内 上 海 交 通 大 学 郑 州 大

16 学 等 专 家 团 队, 并 与 自 治 区 内 相 关 三 甲 医 院 合 作, 推 动 自 治 区 生 物 细 胞 治 疗 研 究 的 进 步 加 快 生 物 治 疗 研 究 团 队 建 设 生 物 细 胞 治 疗 方 案 的 改 进 与 创 新 促 进 生 物 细 胞 治 疗 研 究 成 果 的 临 床 转 化 与 应 用 完 善 生 物 细 胞 治 疗 产 业 及 产 品 提 升 我 市 乃 至 我 省 生 物 细 胞 治 疗 能 力 与 水 平, 为 肿 瘤 患 者 的 疾 病 治 疗 带 来 新 的 重 大 突 破 五 主 要 方 法 技 术 路 线 等 该 项 目 所 涉 及 的 五 个 技 术 的 研 究 方 法 及 技 术 路 线 如 下 : 1 Mact-DC/CIK (1) 研 究 方 法 : 入 组 标 准 : 预 计 生 存 期 >6 个 月 的 肿 瘤 患 者, 年 龄 :20-60, 卡 氏 评 分 (Karnofsky 评 分,KPS 评 分 ) 不 小 于 60 分, 治 疗 期 间 无 严 重 的 病 毒 细 菌 感 染 治 疗 方 案 : 细 胞 治 疗 每 4~ 6 个 月 1 个 疗 程, 每 个 疗 程 连 续 三 天 回 输 三 次, 若 结 合 放 化 疗, 细 胞 回 输 时 间 为 放 化 疗 后 一 周, 观 察 指 标 : 通 过 随 访 患 者 了 解 患 者 在 疗 程 完 毕 后 3 个 月 内 的 症 状 变 化 和 与 疾 病 进 展 相 关 的 影 像 学 指 标 主 观 感 受 包 括 体 力 体 重 食 欲 睡 眠 疼 痛 等 情 况 有 无 改 变 影 像 学 资 料 为 患 者 复 查 的 B 超 X 线 CT PET 等 所 能 提 供 的 肿 瘤 体 积 变 化 评 价 指 标 : 按 卫 生 部 1988 年 颁 布 实 体 瘤 客 观 疗 效 评 定 标 准 进 行 疗 效 评 价 完 全 缓 解 (CR): 瘤 体 完 全 消 失 持 续 4 周 以 上 部 分 缓 解 (PR): 肿 瘤 病 灶 最 大 直 径 之 和 减 少 50% 以 上, 持 续 4 周 微 效 (MR): 瘤 体 最 大 直 径 之 缩 小 25% 至 50% 稳 定 (SD): 肿 瘤 增 大 或 缩 小 不 超 过 25%, 未 出 现 新 病 灶 进 展 (PD): 肿 瘤 增 长 超 过 25% 或 出 现 新 病 灶 (2) 技 术 路 线 :

17 2 H-NK (1) 研 究 方 法 : 入 组 标 准 : 预 计 生 存 期 >6 个 月 的 恶 性 血 液 肿 瘤 患 者, 年 龄 :20-60, 卡 氏 评 分 (Karnofsky 评 分,KPS 评 分 ) 不 小 于 60 分, 治 疗 期 间 无 严 重 的 病 毒 细 菌 感 染 治 疗 方 案 : 细 胞 治 疗 每 4~ 6 个 月 1 个 疗 程, 每 个 疗 程 连 续 三 天 回 输 三 次, 若 结 合 放 化 疗, 细 胞 回 输 时 间 为 放 化 疗 后 一 周, 观 察 指 标 : 通 过 随 访 患 者 了 解 患 者 在 疗 程 完 毕 后 3 个 月 内 的 症 状 变 化 和 与 疾 病 进 展 相 关 的 影 像 学 指 标 主 观 感 受 包 括 体 力 体 重 食 欲 睡 眠 疼 痛 等 情 况 有 无 改 变 影 像 学 资 料 为 患 者 复 查 的 B 超 X 线 CT PET 等 所 能 提 供 的 肿 瘤 体 积 变 化 评 价 指 标 : 按 卫 生 部 1988 年 颁 布 实 体 瘤 客 观 疗 效 评 定 标 准 进 行 疗 效 评 价 (2) 技 术 路 线

18 3 DC1s-CTL (1) 研 究 方 法 : 入 组 标 准 : 预 计 生 存 期 >6 个 月 的 肿 瘤 患 者, 年 龄 :20-60, 卡 氏 评 分 (Karnofsky 评 分,KPS 评 分 ) 不 小 于 60 分, 治 疗 期 间 无 严 重 的 病 毒 细 菌 感 染, HLA A2/A3 表 达 阳 性 治 疗 方 案 : 细 胞 治 疗 每 个 疗 程 一 个 月, 包 括 一 次 DC 疫 苗 回 输 (d6) 及 连 续 三 天 CTL 回 输 (d16-18), 观 察 指 标 : 通 过 随 访 患 者 了 解 患 者 在 疗 程 完 毕 后 3 个 月 内 的 症 状 变 化 和 与 疾 病 进 展 相 关 的 影 像 学 指 标 主 观 感 受 包 括 体 力 体 重 食 欲 睡 眠 疼 痛 等 情 况 有 无 改 变 影 像 学 资 料 为 患 者 复 查 的 B 超 X 线 CT PET 等 所 能 提 供 的 肿 瘤 体 积 变 化 评 价 指 标 : 按 卫 生 部 1988 年 颁 布 实 体 瘤 客 观 疗 效 评 定 标 准 进 行 疗 效 评 价 (2) 技 术 路 线 :

19 4 CD20-CAR 技 术 (1) 构 建 针 对 CD20 CAR 基 因 的 慢 病 毒 载 体 : (2) CD20-CAR 慢 病 毒 的 生 产 和 储 存 ; (3) 建 立 表 达 人 CD20 的 B 细 胞 淋 巴 瘤 小 鼠 动 物 模 型, 并 筛 选 高 表 达 及 低 表 达 的 类 群 : (4) 建 立 在 Rag-1 和 TCR tg 或 WT 小 鼠 体 内 表 达 人 CD20 的 肿 瘤 细 胞 系 ; (5) 生 产 并 分 析 CD20-CAR 修 饰 T 细 胞 建 立 最 佳 优 化 的 慢 病 毒 转 染 流 程 ; (6) 建 立 CAR 修 饰 T 细 胞 的 快 速 扩 增 流 程 ; CD20-CAR 修 饰 T 细 胞 输 注 人 源 化 CD20 小 鼠 肿 瘤 模 型 验 证 实 验 六 计 划 进 度 安 排 2015 年 6 月 至 2015 年 12 月 (1) 完 成 200 平 米 生 物 治 疗 GMP 实 验 室 的 装 修 ; (2) 完 成 GMP 实 验 室 仪 器 设 备 的 采 购 ; (3) 引 进 芝 加 哥 大 学 匹 兹 堡 大 学 上 海 交 大 郑 州 大 学 的 专 家 团 队 ; (4) 建 立 Mact-DC/CIK,H-NK DC1s-CTL 以 及 CAR-T 技 术 的 研 究 方 案 ; (5) 建 立 与 鄂 尔 多 斯 中 心 医 院 的 临 床 研 究 方 案 2016 年 1 月 至 2016 年 12 月 (1) 实 现 生 物 治 疗 GMP 实 验 室 的 初 步 运 转 使 用 ;

20 (2)Mact-DC/CIK,H-NK DC1s-CTL 以 及 CAR-T 技 术 的 初 试 生 产 ; (3) 开 展 肿 瘤 免 疫 细 胞 技 术 产 品 的 临 床 研 究, 完 成 临 床 研 究 10 例 2017 年 1 月 至 2017 年 6 月 (1) 生 物 治 疗 GMP 实 验 室 的 正 常 运 转,Mact-DC/CIK,H-NK DC1s-CTL 以 及 CAR-T 技 术 的 中 试 扩 大 化 生 产 ; 标 准 ; (2) 建 立 生 物 治 疗 免 疫 细 胞 技 术 的 企 业 标 准, 并 主 导 建 立 内 蒙 古 自 治 区 的 (3) 完 成 肿 瘤 免 疫 细 胞 技 术 及 产 品 临 床 研 究 20 例 ; (4) 建 立 不 少 于 3 家 合 作 三 甲 医 院, 并 推 广 肿 瘤 免 疫 技 术 产 品, 项 目 实 施 3 年 实 现 经 济 效 益 不 少 于 300 万 元

21 七 经 费 来 源 及 申 请 资 金 预 算 ( 一 ) 经 费 来 源 单 位 : 万 元 分 类 总 额 自 筹 贷 款 申 请 科 技 经 费 金 额 ( 二 ) 经 费 预 算 ( 申 请 科 技 经 费 部 分 ) 单 位 : 万 元 预 算 科 目 名 称 预 算 数 批 准 数 备 注 总 计 直 接 费 用 合 计 : 设 备 费 材 料 费 测 试 化 验 加 工 费 燃 料 动 力 费 差 旅 费 会 议 费 国 际 合 作 与 交 流 费 出 版 / 文 献 / 信 息 传 播 / 知 识 产 权 事 务 费 劳 务 费 专 家 咨 询 费 其 他 3.00 间 接 费 用 合 计 : 仪 器 设 备 房 屋 使 用 或 折 旧 水 电 气 暖 有 关 管 理 费 用 4.00

22 八 承 担 项 目 的 技 术 力 量 状 况 ( 一 ) 项 目 负 责 人 情 况 姓 名 叶 圣 勤 性 别 男 年 龄 50 政 治 面 貌 党 员 职 务 董 事 长 职 称 高 级 所 学 专 业 预 防 医 学 学 历 学 士 学 位 中 国 衰 老 与 抗 衰 老 科 学 委 员 会 副 主 任 委 员 中 国 衰 老 与 抗 衰 老 科 学 委 员 会 干 细 胞 研 究 部 主 任 中 国 衰 老 与 抗 衰 老 产 业 联 盟 理 事 长 江 苏 省 干 细 胞 产 业 技 术 创 新 战 略 联 盟 理 事 长 辽 宁 省 干 细 胞 产 业 技 术 创 新 战 略 联 盟 理 事 长 上 海 隆 耀 集 团 董 事 长 15 年 从 事 卫 生 事 业 管 理 工 作 的 工 作 经 历,15 年 从 事 企 业 管 理 的 工 作 经 历 ; 工 作 涉 及 医 院 管 理 疾 病 控 制 卫 生 信 息 规 划 管 理 健 康 教 育 生 物 科 技 企 业 管 理 等 方 面, 发 表 论 文 20 余 篇, 参 与 编 写 预 防 医 学 专 著 ( 任 副 主 编 ),1999 年 晋 升 主 要 成 就 技 术 职 称 为 副 主 任 医 生 主 持 开 展 了 国 家 发 改 委 干 细 胞 工 程 技 术 高 科 技 转 化 项 目, 国 家 科 技 部 临 床 级 干 细 胞 分 离 培 养 扩 增 诱 导 和 保 存 运 输 等 产 业 化 关 键 技 术 研 发 - 子 课 题 : 临 床 级 干 细 胞 库 和 干 细 胞 储 运 技 术, 江 苏 省 科 技 厅 脐 带 间 充 质 干 细 胞 技 术 转 化 及 在 自 身 免 疫 性 疾 病 治 疗 中 的 应 用 重 大 成 果 转 化 项 目, 河 南 省 发 改 委 河 南 省 干 细 胞 及 再 生 医 学 转 化 项 目 等 科 研 项 目 ; 依 据 严 格 的 国 际 标 准 主 持 建 立 的 干 细 胞 工 程 基 地 及 干 细 胞 库 的 技 术 体 系, 全 国 第 一 家 通 过 AABB 认 证, 全 世 界 第 一 家 通 过 间 充 质 干 细 胞 认 证 ( 二 ) 项 目 参 加 主 要 人 员 情 况

23 项 目 参 加 人 姓 名 性 别 年 龄 专 业 及 程 度 职 称 工 作 单 位 傅 阳 心 男 57 肿 瘤 免 疫 / 博 导 高 级 美 国 芝 加 哥 大 学 张 毅 男 51 肿 瘤 免 疫 / 博 导 高 级 郑 大 一 附 院 杨 选 明 男 35 肿 瘤 免 疫 / 硕 导 高 级 上 海 交 通 大 学 孙 彬 男 33 经 济 管 理 其 他 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 生 物 科 技 有 限 公 司 汪 鑫 男 32 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 细 胞 生 物 / 硕 高 级 生 物 科 技 有 限 公 士 司 李 伟 男 35 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 细 胞 生 物 / 硕 高 级 生 物 科 技 有 限 公 士 司 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 刘 建 玲 女 42 医 学 硕 士 高 级 生 物 科 技 有 限 公 司 陈 应 炉 男 31 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 细 胞 生 物 / 硕 高 级 生 物 科 技 有 限 公 士 司 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 瞿 苏 男 34 免 疫 学 / 博 士 高 级 生 物 科 技 有 限 公 司 沃 园 君 男 26 生 物 学 / 学 士 中 级 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 生 物 科 技 有 限 公 司 朱 洪 流 男 26 生 物 学 / 学 士 中 级 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 生 物 科 技 有 限 公 司 周 俊 峰 男 27 生 物 学 / 学 士 中 级 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 生 物 科 技 有 限 公 司 ( 三 ) 项 目 参 加 人 员 总 体 情 况

24 参 加 项 目 总 人 数 高 级 职 称 中 级 职 称 博 士 硕 士 其 它

25 九 项 目 承 担 单 位 基 本 情 况 内 蒙 古 隆 耀 紫 荆 生 物 科 技 有 限 公 司 由 上 海 隆 耀 生 物 科 技 有 限 公 司 与 内 蒙 古 紫 荆 投 资 有 限 公 司 投 资 成 立, 主 要 致 力 于 内 蒙 乃 至 大 西 北 地 区 的 肿 瘤 神 经 损 伤 糖 尿 病 等 重 大 疾 病 的 生 物 治 疗 技 术 的 研 究 开 发 及 临 床 应 用 推 广 隆 耀 生 物 已 经 开 展 了 多 项 肿 瘤 免 疫 细 胞 技 术 研 究 及 转 化, 取 得 了 大 量 的 研 究 基 础, 主 要 如 下 : (1)DC1s-CTL DC1s-CTL 细 胞 疗 法 是 T 淋 巴 细 胞 诱 导 的 产 生 大 量 的 1 型 极 化 DC 细 胞, 已 建 立 的 DC1 能 够 分 泌 产 生 大 量 IL-2 TNF-a, 并 且 具 有 高 效 的 肿 瘤 特 异 性 抗 原 呈 递 能 力, 诱 导 产 生 CTL 细 胞 特 异 性 杀 伤 肿 瘤 细 胞 在 美 国 Pittsburgh 大 学 和 多 家 临 床 研 究 机 构 已 开 展 了 临 床 Ⅱ Ⅲ 期 临 床 研 究, 在 B 型 肝 癌 脑 瘤 头 颈 部 肿 瘤 淋 巴 瘤 卵 巢 癌 结 肠 癌 取 得 了 显 著 效 果 (2)CAR-T 已 建 立 临 床 级 的 CD19 D20-CAR 修 饰 的 T 细 胞 技 术 体 系, 包 括 : 1) 用 于 改 造 T 细 胞 的 CAR 慢 病 毒 载 体 2) 体 外 修 饰 T 细 胞 并 检 测 肿 瘤 特 异 杀 伤 功 能, 建 立 质 控 体 系 3) CAR 修 饰 T 细 胞 体 外 扩 增 技 术 4) 建 立 有 效 应 对 CAR 修 饰 T 细 胞 回 输 技 术 引 起 的 副 作 用 策 略 由 于 CAR 修 饰 的 T 细 胞 的 超 级 肿 瘤 杀 伤 作 用, 短 期 内 大 量 的 肿 瘤 坏 死 可 能 会 激 活 大 量 的 细 胞 因 子 产 生, 造 成 细 胞 因 子 风 暴 综 合 症 另 外 由 于 对 B 细 胞 的 大 量 杀 伤, 为 造 成 免 疫 球 蛋 白 缺 陷 5) 已 建 立 肿 瘤 特 异 性 的 氨 基 酸 突 变 蛋 白 抗 原 ( 如 EGFR VIII) 和 糖 基 化 修 饰 改 变 抗 原 的 实 验 动 物 模 型 目 前 已 实 现 CAR 技 术 在 B 细 胞 淋 巴 瘤 ALL CLL 方 面 的 临 床 应 用 研 究 有 望 近 期 扩 展 CAR 修 饰 的 T 细 胞 回 输 技 术 到 实 体 肿 瘤 治 疗 领 域 (3) 肿 瘤 抗 原 肽 库 肿 瘤 抗 原 是 指 细 胞 恶 性 变 过 程 中 出 现 的 新 抗 原 (neoantigen) 物 质 的 总 称 细 胞 恶 性 变 过 程 中 由 于 基 因 突 变 或 正 常 静 止 基 因 的 激 活 都 可 以 产 生 新 的 蛋 白 分 子 这 些 蛋 白 质 在 细 胞 内 降 解 后, 某 些 降 解 的 短 肽 可 与 MHCⅠ 类 分 子 在 内 质 网 中 结 合, 并 共 表 达 于 细 胞 表 面, 成 为 被 CD8+CTL 识 别 和 杀 伤 的 肿 瘤 特 异 抗 原 此 外, 某 些 细 胞 在 恶 性 变 后, 可 使 正 常 情 况 下 处 于 隐 蔽 状 态 的 抗 原 决 定 簇 暴 露 出 来, 成 为 肿 瘤 相 关 抗 原, 可 被 B 细 胞 识 别 产 生 抗 肿 瘤 抗 体 肿 瘤 细 胞 有 大 量 变 异 的 或 失 调 的 基 因 表 达, 从 而 产 生 异 常 的 正 常 但 过 度 表 达 的 或 新 的 蛋 白 随 着 分 子 生 物 学 技 术 的 发 展, 越 来 越 多 的 肿 瘤 抗 原 被 鉴 定

26 出 来 构 建 一 个 自 然 或 多 肽 的 肿 瘤 抗 原 库, 结 合 免 疫 筛 选 肽 推 论 和 序 列 排 列 分 析, 然 后, 从 中 挑 出 具 有 抗 原 性 的 肽 筛 选 出 来 的 肿 瘤 抗 原 可 以 用 于 免 疫 诊 断 及 高 危 人 群 的 筛 查, 监 测 肿 瘤 患 者 的 病 情, 用 于 靶 向 肿 瘤 免 疫 细 胞 治 疗 以 及 肿 瘤 疫 苗 等 具 有 广 阔 的 应 用 前 景 已 建 立 乳 腺 癌 肺 癌 肾 癌 以 及 卵 巢 癌 等 30 多 种 肿 瘤 相 关 抗 原 库, 为 靶 向 特 异 性 肿 瘤 治 疗 的 开 展 提 供 重 要 保 障 已 授 权 专 利 : (1) 专 利 1: 具 有 人 群 广 谱 性 的 抗 肿 瘤 CTL 表 位 肽 (2) 专 利 2:MAGE-4 抗 肿 瘤 CTL 表 位 肽 及 其 应 用 (3) 专 利 3:PIWIL2 抗 肿 瘤 CTL 表 位 肽 及 其 应 用 (4) 专 利 4:MTA1 来 源 的 抗 肿 瘤 CTL 表 位 肽 及 其 应 用 (5) 专 利 5:PLAC1 抗 肿 瘤 CTL 表 位 肽 及 其 应 用 发 表 的 相 关 论 文 : 1. Lymphotoxin beta receptor-dependent control of lipid homeostasis. Lo JC, Wang Y, Tumanov AV, Bamji M, Yao Z, Reardon CA, Getz GS, Fu YX. Science Apr 13;316(5822): Immunology. Autoreactive B cells migrate into T cell territory. Fu YX, Storb U. Science Sep 20;297(5589): Costimulatory molecule-targeted antibody therapy of a spontaneous autoimmune disease.sun Y, Chen HM, Subudhi SK, Chen J, Koka R, Chen L, Fu YX. Nat Med Dec;8(12): Lymphotoxin signalling in immune homeostasis and the control of microorganisms.upadhyay V, Fu YX. Nat Rev Immunol Apr;13(4): Targeting the tumor microenvironment with interferon-β bridges innate and adaptive immune responses.yang X, Zhang X, Fu ML, Weichselbaum RR, Gajewski TF, Guo Y, Fu YX. Cancer Cell Jan 13;25(1): Innate and adaptive immune cells in the tumor microenvironment.gajewski TF, Schreiber H, Fu YX.Nat Immunol Oct;14(10): Innate Lymphoid Cells Control Early Colonization Resistance against Intestinal Pathogens through ID2-Dependent Regulation of the Microbiota.Guo X, Liang Y, Zhang Y, Lasorella A, Kee BL, Fu YX. Immunity Apr 21;42(4): A BTLA-mediated bait and switch strategy permits Listeria expansion in CD8α(+) DCs to promote long-term T cell responses.yang X, Zhang X, Sun Y, Tu T, Fu ML, Miller M, Fu YX. Cell Host Microbe Jul 9;16(1): Induction of innate lymphoid cell-derived interleukin-22 by the transcription factor STAT3 mediates protection against intestinal infection.guo X, Qiu J, Tu T, Yang X, Deng L, Anders RA, Zhou L, Fu YX. Immunity Jan 16;40(1): LIGHT delivery to tumors by mesenchymal stem cells mobilizes an effective antitumor immune response.zou W, Zheng H, He TC, Chang J, Fu YX, Fan W. Cancer Res Jun 15;72(12): Induction of CD8+ T-Cell Responses Against Novel Glioma-Associated Antigen Peptides

27 and Clinical Activity by Vaccinations With {alpha}-type 1 Polarized Dendritic Cells and Polyinosinic-Polycytidylic Acid Stabilized by Lysine and Carboxymethylcellulose in Patients With Recurrent Malignant Glioma.Okada, H., P. Kalinski, F. S. Lieberman. J ClinOncol : Intratumoral IL-12 Gene Therapy Results in the Crosspriming of Tc1 Cells Reactive Against Tumor-associated Stromal Antigens.Zhao, X., A. Bose, H. P. Kalinski, J. M. Kirkwood, and W. J. Storkus. MolTher. (2011) 19: Alpha-type 1-polarized dendritic cells loaded with apoptotic allogeneic myeloma cell line induce strong CTL responses against autologous myeloma cells. Yang, D.H., M.H. Kim, C.Y. Hong, P. Kalinski, and J.J. Lee Ann Hematol 89: Helper Activity of NK Cells during the Dendritic Cell-mediated Induction of Melanoma-specific Cytotoxic T Cells.Wong, J., Mailliard, R.B., P. Kalinski. J. Immunother. (2011) 34: Successful cross-presentation of allogeneic myeloma cells by autologous alpha-type 1-polarized dendritic cells as an effective tumor antigen in myeloma patients with matched monoclonal immunoglobulins.yang DH, Kim MH, Lee YK, Hong CY, Lee HJ, Nguyen-Pham TN, Bae SY, Ahn JS, Kim YK, Chung IJ, Kim HJ, Kalinski P, Lee JJ. Ann Hematol. (2011)90: Positive Feedback between PGE2 and COX2 Redirects the Differentiation of Human Dendritic Cells towards Stable Myeloid-Derived Suppressor Cells.Obermajer, N., R. Muthuswamy, J. Lesnock, R. P. Edwards, and P. Kalinski. Blood, (20): 十 项 目 实 施 组 织 管 理 措 施 (1) 项 目 组 织 管 理 方 式 项 目 正 式 运 作 后, 隆 耀 紫 荆 整 体 负 责 项 目 工 作, 监 督 项 目 的 实 施 保 障 科 研 服 务 协 调 内 外 关 系 统 一 协 调, 充 分 发 挥 各 成 员 单 位 的 科 研 优 势, 最 大 限 度 地 提 高 创 新 效 率 ; 负 责 组 织 专 家 会 议, 对 科 研 项 目 进 行 讨 论 和 审 核, 并 监 督 项 目 的 实 施 ; 负 责 科 研 成 果 形 成 后 的 相 关 成 果 申 报 工 作 和 推 广 工 作 (2) 资 金 的 专 户 管 理 及 使 用 办 法 : 我 公 司 对 该 项 市 拨 资 金 开 立 专 用 存 款 账 户, 实 行 专 户 管 理, 专 款 专 用, 量 入 为 出, 使 该 项 省 拨 资 金 按 规 定 的 用 途 使 用 并 能 达 到 预 期 目 标 我 公 司 将 对 该 项 省 拨 资 金 实 行 单 独 核 算 并 划 清 与 日 常 业 务 开 支 的 界 限, 不 互 相 占 用, 并 建 立 专 项 资 金 使 用 管 理 责 任 制, 努 力 提 高 该 项 资 金 使 用 效 率 (3) 财 务 管 理 机 制 : 我 公 司 财 务 组 将 根 据 中 华 人 民 共 和 国 会 计 法 和 新 企 业 会 计 准 则 及 科 技 局 有 关 规 定 对 本 项 目 资 金 实 行 专 项 管 理 财 务 组 将 根 据 项 目 计 划, 在 阶 段 性 工 作 完 成 时, 对 项 目 专 项 资 金 使 用 情 况 进 行 专 项 审 计, 保 证 项 目 资 金 使 用 合 理

28 规 范 十 一 推 荐 部 门 意 见 ( 并 加 盖 公 章 )