2012年18期
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- 钜 冯
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1 中 国 农 学 通 报 2012,28(18): Chinese Agricultural Science Bulletin 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 多 克 隆 抗 体 的 制 备 与 鉴 定 顾 文 亮 1, 夏 启 玉 2, 姚 晶 1, 胡 新 文 1 2, 郭 建 春 ( 1 海 南 大 学 农 学 院, 海 口 ; 2 中 国 热 带 农 业 科 学 院 热 带 生 物 技 术 研 究 所, 海 口 ) 摘 要 : 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 是 中 国 所 特 有 的 植 物 马 槟 榔 种 子 中 的 甜 味 蛋 白, 将 其 作 为 新 型 甜 味 剂 有 着 广 阔 的 市 场 前 景 为 了 给 重 组 马 宾 灵 的 基 因 工 程 应 用 提 供 可 靠 的 蛋 白 质 检 测 与 鉴 定 的 抗 体, 通 过 离 子 交 换 法 从 马 槟 榔 (Capparis masaikai Lévl) 种 子 中 分 离 纯 化 马 宾 灵, 将 其 作 为 抗 原 免 疫 新 西 兰 大 白 兔, 收 集 免 疫 后 血 清 经 抗 原 亲 和 纯 化 制 备 马 宾 灵 多 克 隆 抗 体 结 果 表 明, 制 备 的 马 宾 灵 多 克 隆 抗 体 经 ELISA 检 测 效 价 比 达 到 1:256000,Western-blot 检 测 表 明 其 具 有 良 好 的 反 应 性 和 特 异 性 本 研 究 制 备 的 马 宾 灵 多 克 隆 抗 体 可 用 于 马 宾 灵 在 不 同 生 物 反 应 器 中 表 达 的 检 测, 为 马 宾 灵 的 基 因 工 程 研 究 提 供 灵 敏 可 靠 的 免 疫 学 鉴 定 关 键 词 : 马 槟 榔 ; 马 宾 灵 ; 多 克 隆 抗 体 ; 植 物 甜 蛋 白 中 图 分 类 号 :Q819 文 献 标 志 码 :A 论 文 编 号 : Preparation and Identification of the Polyclonal Antibody Against Plant Sweet Protein MabinlinⅡ Gu Wenliang 1, Xia Qiyu 2, Yao Jing 1, Hu Xinwen 1, Guo Jianchun 2 ( 1 College of Agriculture, Hainan University, Haikou ; 2 Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou ) Abstract: The plant sweet protein MabinlinⅡ is found rich in mature seeds of Capparis masaikai Lévl which is particular to China and may have wide application prospects in food sweeteners industry. In this study, in order to provide a reliable testing antibody for engineering applications of recombinant MabinlinⅡ, Mabinlin Ⅱ was separated and purified from the mature seeds of Capparis masaikai Lévl by ion exchange chromatography. The purified protein was used as antigen to immunize New Zealand rabbits to prepare polyclonal antibody against the Mabinlin Ⅱ protein. The result of Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay (ELISA) showed that the titer of the polyclonal antibody to purified Mabinlin Ⅱ was 1:256000, and the polyclonal antibody against the purified Mabinlin Ⅱ also had highly reactivity and specialty in western blot analysis. The polyclonal antibody against Mabinlin Ⅱ could be used for detecting the protein amounts of MabinlinⅡ expressed in various bioreactors, which may serve sensitive and reliable methods for immunology detection in genetic engineering research of MabinlinⅡ. Key words: Capparis masaikai Lévl; MabinlinⅡ; polyclonal antibody; plant sweet protein 基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 马 宾 灵 基 因 (Mabinlin) 体 外 甜 味 表 达 及 其 结 构 发 生 规 律 研 究 ( );2010 年 海 南 省 研 究 生 创 新 科 研 课 题 分 子 伴 侣 SUMO 融 合 表 达 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 研 究 第 一 作 者 简 介 : 顾 文 亮, 男,1984 年 出 生, 湖 北 黄 石 人, 博 士, 主 要 从 事 植 物 分 子 遗 传 学 方 面 的 研 究 通 信 地 址 : 海 南 省 海 口 市 龙 华 区 学 院 路 4 号 热 带 生 物 技 术 研 究 所,Tel: , gwl84@126.com 通 讯 作 者 : 郭 建 春, 女,1965 年 出 生, 湖 南 桃 江 人, 研 究 员, 博 士 生 导 师, 博 士, 主 要 从 事 分 子 生 物 学 植 物 基 因 工 程 等 方 面 的 研 究 通 信 地 址 : 海 南 省 海 口 市 龙 华 区 学 院 路 4 号 热 带 生 物 技 术 研 究 所,Tel: , jianchunguoh@163.com 收 稿 日 期 : , 修 回 日 期 :
2 顾 文 亮 等 : 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 多 克 隆 抗 体 的 制 备 与 鉴 定 引 言 目 前 全 世 界 一 共 发 现 有 7 种 植 物 甜 味 蛋 白 及 矫 味 蛋 白 [1], 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 是 唯 一 在 中 国 发 现 的 植 物 甜 蛋 白 [2] 马 宾 灵 来 源 于 植 物 马 槟 榔 的 种 子 [3], 经 研 究 发 现 在 马 槟 榔 种 子 中 存 在 4 种 马 宾 灵 同 系 物 蛋 白, 而 其 中 仅 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 具 有 最 佳 的 热 稳 定 性 也 研 究 的 最 为 深 入 [4] 马 宾 灵 在 食 品 与 药 用 等 方 面 有 着 非 常 大 的 开 发 前 景, 但 是 由 于 野 生 的 马 槟 榔 资 源 极 其 有 限 并 且 还 在 持 续 萎 缩 [5], 人 工 合 成 的 马 宾 灵 因 成 本 偏 高 副 产 物 混 杂 纯 化 复 杂 难 以 大 规 模 开 发 利 用 [6], 利 用 基 因 工 程 手 段 开 发 利 用 马 宾 灵 遂 成 为 研 究 的 热 点 [7] 刘 敬 梅 等 在 2001 年 将 马 宾 灵 基 因 转 入 莴 苣 中 表 达, [8] 李 晓 东 等 在 2004 年 将 马 宾 灵 基 因 转 入 番 茄 中 表 达, [9] 顾 文 亮 等 在 2009 年 将 重 组 马 宾 灵 基 因 转 入 拟 南 芥 与 [10] [11] 大 肠 杆 菌 中 表 达, 张 菲 菲 等 在 2011 年 拟 将 重 组 马 [12] 宾 灵 基 因 转 入 人 参 果 中 表 达, 王 昌 博 等 在 2011 年 也 将 全 长 马 宾 灵 基 因 转 入 大 肠 杆 菌 中 表 达 当 前 随 着 技 术 手 段 的 不 断 进 步, 将 马 宾 灵 及 其 重 组 基 因 导 入 多 中 生 物 反 应 器 中 表 达 已 经 成 为 可 能, 因 而 制 备 专 一 和 灵 敏 马 宾 灵 多 克 隆 抗 体 用 于 马 宾 灵 基 因 工 程 产 物 的 检 测 显 得 尤 为 必 要 为 此, 笔 者 将 具 有 甜 味 活 性 的 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 免 疫 新 西 兰 大 白 兔, 制 备 了 构 象 型 的 马 宾 灵 兔 源 多 克 隆 抗 体, 经 ELISA 和 Western-blot 检 测 表 明 所 制 备 的 抗 体 可 用 于 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 的 基 因 工 程 产 物 检 测 以 期 为 重 组 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 的 开 发 应 用 提 供 相 应 蛋 白 质 鉴 定 方 面 的 参 考 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 马 槟 榔 种 子 采 集 于 广 西 云 南 贵 州 等 地 的 野 生 马 槟 榔 植 物, 保 存 在 4 冰 箱 中 CM Sepharose Fast Flow 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 介 质 购 自 GE Healthcare 公 司 ; 新 西 兰 大 白 兔 购 自 海 南 医 学 院 实 验 动 物 中 心 ; 弗 氏 完 全 佐 剂 和 弗 氏 不 完 全 佐 剂 购 自 Sigma 公 司 ;ELISA 酶 标 板 购 自 Cosmo 公 司 ;HRP 标 记 的 羊 抗 兔 IgG 够 自 Abmart 公 司 ;Immobilon-PSQ PVDF 膜 与 Amicon Ultra-15 3K 的 超 滤 管 购 自 Millipore 公 司 ; 低 分 子 量 蛋 白 Marker 预 染 蛋 白 Marker 及 AEC 显 色 试 剂 盒 购 自 上 海 生 工 ; 其 他 试 剂 均 为 进 口 或 国 产 分 析 纯 1.2 方 法 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 分 离 与 纯 化 参 照 Liu [13], Li [14] 等 的 方 法 并 适 当 改 变, 马 槟 榔 种 子 去 壳 粉 碎 后 用 石 油 醚 ( 沸 点 30~60 ) 浸 提 脱 脂, 取 0.5 g 自 然 风 干 的 脱 脂 干 粉 溶 于 100 ml 的 0.5 mol/l NaCl 溶 液 中, 浸 提 30 min 后 r/min 4 离 心 10 min 后 再 过 滤 去 除 残 渣, 提 取 液 中 加 入 硫 酸 铵 至 70% 的 饱 和 度 即 出 现 沉 淀, r/min 4 离 心 10 min 收 集 沉 淀, 沉 淀 用 10 ml 的 50 mmol/l Glycine/NaOH ph 9.0 溶 液 溶 解, 样 品 液 经 0.45 µm 的 滤 膜 过 滤 后 即 可 供 CM Sepharose Fast Flow 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 分 离 样 品 液 直 接 上 用 50 mmol/l Glycine/NaOH ph 9.0 含 0.1 mol/l NaCl 的 溶 液 平 衡 的 羧 甲 基 纤 维 素 柱 层 析 柱, 用 前 述 平 衡 液 洗 至 流 出 液 在 紫 外 吸 收 波 长 280 nm 处 无 吸 收, 然 后 分 别 用 含 0.2 mol/l NaCl 0.45 mol/l NaCl 和 0.8 mol/l NaCl 的 50 mmol/l Glycine/NaOH ph 9.0 洗 脱 液 顺 序 分 步 洗 脱, 在 紫 外 波 长 280 nm 处 检 测, 收 集 各 个 洗 脱 峰 收 集 的 各 部 分 洗 脱 峰 可 用 透 析 袋 对 蒸 馏 水 透 析 脱 盐, 或 用 Amicon Ultra-15 3K 的 超 滤 管 超 滤 脱 盐 浓 缩, 经 真 空 冰 冻 干 燥 后 收 集 粉 末 于 -20 冰 箱 中 保 存 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 Tricine-SDS-PAGE 分 析 与 甜 味 及 热 稳 定 性 测 试 参 照 Nature Protocol [15] 上 的 方 法 配 制 含 浓 缩 胶 夹 层 胶 与 分 离 胶 的 Tricine-SDS-PAGE 凝 胶 及 其 正 极 与 负 极 电 泳 缓 冲 液, 取 各 部 分 洗 脱 峰 的 [2] 纯 化 蛋 白 溶 液 上 样 凝 胶 电 泳 参 照 胡 忠 等 的 方 法 进 行 纯 化 的 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 甜 味 测 试 与 热 稳 定 性 测 试 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 的 制 备 初 次 免 疫 前 取 新 西 兰 大 白 兔 的 血 清 作 为 阴 性 对 照 首 次 免 疫 时 取 0.5 mg 的 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 溶 于 1 ml 的 PBS 缓 冲 液 (ph 7.4), 再 与 完 全 弗 氏 佐 剂 以 1:1 的 体 积 比 混 合, 充 分 乳 化 后 采 用 颈 背 部 皮 下 多 点 注 射 法 对 4 只 新 西 兰 大 白 兔 进 行 免 疫 2 周 后 取 0.5 mg 的 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 加 不 完 全 弗 氏 佐 剂 进 行 第 一 次 加 强 免 疫, 分 别 以 同 样 的 剂 量 于 第 五 周 和 第 八 周 时 进 行 第 二 次 与 第 三 次 加 强 免 疫 在 第 一 次 加 强 免 疫 后 的 7 天 后 分 别 对 4 只 新 西 兰 大 白 兔 进 行 耳 静 脉 采 血, 分 离 血 清 测 定 效 价 比 进 行 初 步 免 疫 应 答 评 估, 在 第 三 次 加 强 免 疫 后 的 7 天 后 分 别 对 4 只 新 西 兰 大 白 兔 进 行 耳 静 脉 采 血, 分 离 血 清 测 定 效 价 比 进 行 最 终 免 疫 应 答 评 估 取 最 终 免 疫 应 答 评 估 时 ELISA 效 价 较 高 的 2 只 新 西 兰 大 白 兔 进 行 麻 醉 后 心 脏 取 血, 血 液 在 37 恒 温 箱 中 放 置 30 min 后 置 于 4 过 夜 将 血 液 转 移 至 离 心 管 中, r/min 4 离 心 10 min, 收 集 上 清 液 即 为 抗 血 清 采 用 抗 原 亲 和 纯 化 法 对 抗 血 清 进 行 纯 化, 经 上 样 平 衡 洗 脱 并 收 集 洗 脱 液, 将 纯 化 的 抗 体 加 入 NaN 3 至 终 浓 度 0.02% 再 分 装 后 于 -20 保 存 备 用 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 的 ELISA 测 试 取 少 量 的 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 抗 血 清 进 行 间 接 酶 联 免 疫 吸 附 实 验 测 定 其 效 价 比, 以 免 疫 前 血 清 作 为 阴 性
3 196 中 国 农 学 通 报 对 照 用 50 mmol/l 的 Na 2CO 3-NaHCO 3 (ph 9.6) 包 被 缓 冲 液 将 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 稀 释 至 0.01 mg/ml, 酶 标 板 上 每 孔 中 加 入 100 µl, 置 于 4 中 过 夜 第 二 日 弃 酶 标 板 孔 内 的 溶 液, 用 洗 涤 缓 冲 液 PBST 洗 3 次, 每 孔 加 200 µl 的 封 闭 液 于 37 封 闭 1 h, 用 PBST 洗 酶 标 板 3 次 后, 将 免 疫 前 血 清 用 封 闭 液 以 1:1000 稀 释, 抗 血 清 以 起 始 1:1000 稀 释, 然 后 依 次 按 前 次 稀 释 倍 数 的 2 倍 进 行 梯 度 稀 释, 每 孔 加 入 100 µl 各 个 梯 度 稀 释 的 抗 血 清, 放 置 于 37 温 育 1 h 用 PBST 洗 板 3 次 后, 每 孔 中 加 入 100 µl 的 1:3000 稀 释 的 HRP 标 记 的 羊 抗 兔 IgG, 放 置 于 37 温 育 1 h, 再 用 PBST 洗 板 3 次, 然 后 用 ddh 2O 洗 涤 1 次, 每 孔 中 加 入 TMB 底 物 溶 液 100 µl, 放 置 于 37 温 育 10 min, 最 后 在 每 孔 中 加 入 50 µl 的 2 mol/l 硫 酸 终 止 反 应 在 ELISA 酶 标 仪 上 于 450 nm 处 以 空 白 对 照 孔 调 零 后 测 每 孔 的 吸 光 值 A, 以 A 大 于 等 于 阴 性 对 照 的 2.1 倍 为 阳 性 马 宾 灵 (Mabinlin Ⅱ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 的 Western-blot 鉴 定 取 纯 化 的 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 粉 末 溶 于 PBS 缓 冲 液 (ph 7.4) 中, 稀 释 至 终 浓 度 为 0.01 mg/ml, 取 10 µl 的 稀 释 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 溶 液 上 样 进 行 Tricine-SDS-PAGE 凝 胶 电 泳 电 泳 结 束 后, 根 据 预 染 Marker 将 含 目 的 条 带 的 凝 胶 切 下, 用 半 干 式 转 膜 仪 电 转 移 至 PVDF 膜 上 (60 V,2 h), 用 5% 脱 脂 奶 粉 的 TBST 缓 冲 液 在 室 温 进 行 封 闭 1 h, 用 TBST 缓 冲 液 洗 膜 3 次 后, 加 入 纯 化 多 克 隆 抗 体 作 为 一 抗, 以 1:3000 稀 释 于 TBST 缓 冲 液 中, 放 置 于 4 缓 慢 摇 动 过 夜 第 二 日 用 TBST 缓 冲 液 于 室 温 下 洗 膜 3 次, 加 入 HRP 标 记 的 羊 抗 兔 IgG 作 为 二 抗, 以 1:2000 稀 释 于 TBST 缓 冲 液 中, 放 置 于 37 孵 育 1 h 后 用 TBST 缓 冲 液 洗 膜 3 次, 用 AEC 显 色 试 剂 盒 显 色 并 拍 照 保 存 1.3 数 据 统 计 分 析 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 的 ELISA 测 试 以 免 疫 前 的 新 西 兰 大 白 兔 血 清 作 为 阴 性 对 照, 将 免 疫 前 的 新 西 兰 大 白 兔 血 清 用 封 闭 液 以 1:1000 稀 释, 免 疫 后 的 新 西 兰 大 白 兔 抗 血 清 以 起 始 1:1000 稀 释, 然 后 依 次 按 前 次 稀 释 倍 数 的 2 倍 进 行 梯 度 稀 释, 共 进 行 10 个 梯 度 的 稀 释 至 1:512000, 每 个 样 品 设 置 3 个 重 复 孔 取 ELISA 酶 标 仪 上 于 450 nm 处 以 空 白 对 照 孔 调 零 后 测 每 孔 的 吸 光 值 A, 对 每 个 样 品 的 平 均 吸 光 值 A 进 行 数 据 统 计 分 析, 以 A 大 于 等 于 阴 性 对 照 的 2.1 倍 为 阳 性 2 结 果 与 分 析 2.1 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 提 取 及 其 鉴 定 分 别 取 0.2 mol/l NaCl 0.45 mol/l NaCl 和 0.8 mol/l NaCl 的 洗 脱 液 样 品, 经 变 性 后 进 行 Tricine-SDS-PAGE 电 泳 分 析 ( 图 1) 结 果 如 图 1 中 所 示,0.2 mol/l NaCl 的 洗 脱 液 ( 图 1 中 4 号 泳 道 ) 中 多 为 杂 质 蛋 白 ;0.45 mol/l NaCl 的 洗 脱 液 ( 图 1 中 5 号 泳 道 ) 中 的 主 要 成 分 为 马 宾 灵 (MabinlinⅡ), 其 在 低 分 量 蛋 白 Marker 的 6.5 kd 处 有 2 条 主 要 的 蛋 白 条 带, 与 马 宾 灵 的 A- 链 和 B- 链 的 分 子 量 相 一 致 ;0.8 mol/l NaCl 的 洗 脱 液 ( 图 1 中 6 号 泳 道 ) 中 的 主 要 成 分 为 马 宾 灵 M kd 45 kd 35 kd 27 kd 20 kd 14.4 kd 9.5 kd 6.5 kd 4.1 kd M: 低 分 子 量 蛋 白 质 Marker;1:CM Sepharose Fast Flow 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 样 品 ;2:CM Sepharose Fast Flow 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 未 结 合 样 品 ; 3:CM Sepharose Fast Flow 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 平 衡 液 洗 脱 样 品 ;4:CM Sepharose Fast Flow 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 0.2 mol/l NaCl 的 50 mmol/l Glycine/NaOH ph 9.0 洗 脱 液 洗 脱 样 品 ;5:CM Sepharose Fast Flow 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 0.45 mol/l NaCl 的 50 mmol/l Glycine/NaOH ph 9.0 洗 脱 液 洗 脱 样 品 ;6:CM Sepharose Fast Flow 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 0.8 mol/l NaCl 的 50 mmol/l Glycine/NaOH ph 9.0 洗 脱 液 洗 脱 样 品 图 1 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 过 柱 纯 化 图
4 顾 文 亮 等 : 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 多 克 隆 抗 体 的 制 备 与 鉴 定 197 (MabinlinⅡ) 的 其 他 3 种 同 系 物 蛋 白 取 0.45 mol/l NaCl 洗 脱 液 的 纯 化 马 宾 灵 和 0.8 mol/l NaCl 的 洗 脱 液 的 纯 化 马 宾 灵 同 系 物 经 脱 盐 浓 缩 处 理 后 的 样 品 水 溶 液 进 行 甜 味 测 试 与 热 稳 定 测 试, 所 纯 化 的 马 宾 灵 与 纯 化 的 马 宾 灵 同 系 物 都 有 强 烈 的 甜 味 感 觉 ; 纯 化 的 马 宾 灵 在 85 温 浴 0.5 h 后 仍 有 甜 味 感 觉, 而 纯 化 的 马 宾 灵 同 系 物 在 85 温 浴 0.5 h 后 则 没 有 甜 味 感 觉 纯 化 后 的 马 宾 灵 的 在 分 子 量 甜 味 感 觉 和 热 稳 定 性 等 方 面 均 符 合 前 人 的 描 述, 所 纯 化 的 马 宾 灵 的 纯 度 达 86.9%, 满 足 下 一 步 作 为 抗 原 进 行 免 疫 新 西 兰 大 白 兔 的 要 求 2.2 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 的 ELISA 测 试 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 的 ELISA 结 果 ( 图 2) 显 示, 经 过 4 轮 的 免 疫, 新 西 兰 大 白 兔 的 血 清 抗 体 效 价 达 到 1: 以 上, 表 明 马 宾 灵 可 诱 导 所 免 疫 的 新 西 兰 大 白 兔 产 生 良 好 的 体 液 免 疫 反 应, 所 制 备 的 马 宾 灵 兔 源 多 克 隆 抗 体 具 有 较 好 的 效 价 比 2.3 马 宾 灵 (Mabinlin Ⅱ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 的 Western-blot 鉴 定 根 据 马 宾 灵 (Mabinlin Ⅱ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 的 Western-blot 鉴 定 结 果 ( 图 3) 所 示, 所 制 备 的 马 宾 灵 兔 71 kd 50 kd 35 kd 25 kd 16 kd 8 kd M 1 2 M: 低 分 子 量 范 围 预 染 蛋 白 质 Marker;1: 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 样 品 检 测 ; 2: 未 免 疫 的 新 西 兰 大 白 兔 血 清 作 阴 性 对 照 检 测 图 3 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 多 克 隆 抗 体 的 Western-blot 检 测 图 1 表 示 免 疫 的 1 号 兔 子,2 表 示 免 疫 的 2 号 兔 子 图 2 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 多 克 隆 抗 体 的 ELISA 效 价 图 源 多 克 隆 抗 体 作 为 一 抗 经 1:3000 倍 稀 释 后, 可 特 异 性 识 别 纯 化 的 马 宾 灵 (Mabinlin Ⅱ) 样 品 且 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 A 链 与 B 链 均 有 杂 交 条 带 显 示, 而 以 免 疫 前 的 新 西 兰 大 白 兔 血 清 作 为 一 抗 阴 性 对 照 则 未 检 测 到 任 何 条 带, 表 明 所 制 备 的 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 具 有 良 好 的 反 应 性 3 结 论 从 马 槟 榔 种 子 中 提 取 纯 化 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 (MabinlinⅡ), 将 具 有 甜 味 活 性 构 型 的 马 宾 灵 (Mabinlin Ⅱ) 蛋 白 为 抗 原 免 疫 新 西 兰 大 白 兔, 免 疫 后 的 新 西 兰 大 白 兔 血 清 经 抗 原 亲 和 纯 化 制 备 马 宾 灵 多 克 隆 抗 体 本 研 究 所 制 备 的 马 宾 灵 多 克 隆 抗 体 经 ELISA 检 测 效 价 比 达 到 1:256000,Western-blot 检 测 表 明 其 具 有 良 好 的 反 应 性 和 特 异 性, 可 用 于 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 的 基 因 工 程 产 物 检 测 4 讨 论 抗 体 效 价 比 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 是 目 前 在 世 界 上 所 发 现 的 7 种 植 物 甜 味 蛋 白 中 唯 一 在 中 国 发 现 的 植 物 甜 味 蛋 白, 在 中 国 众 多 的 研 究 人 员 开 展 了 马 宾 灵 的 多 方 面 研 究 工 [4] 作 胡 忠 等 首 次 从 马 槟 榔 种 子 中 分 离 得 到 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 (MabinlinⅡ), 并 且 研 究 了 采 用 不 同 提 取 溶 液 下 如 磷 酸 缓 冲 液 盐 酸 溶 液 甘 油 水 溶 液 硫 酸 铵 提 取 液 和 50% 丙 酮 水 溶 液 的 马 宾 灵 得 率, 认 为 50% 丙 酮 水 溶 液 的 马 宾 灵 得 率 最 高, 达 到 13.93% 此 后 研 究 人 员
5 198 中 国 农 学 通 报 多 采 用 50% 丙 酮 水 溶 液 作 为 马 宾 灵 的 提 取 溶 液, 本 研 究 初 期 采 用 前 述 方 法, 但 通 过 具 体 实 验 发 现 50% 丙 酮 水 溶 液 中 离 心 时 极 易 引 起 蛋 白 质 聚 集 而 变 性, 且 直 接 采 用 50% 丙 酮 水 溶 液 上 羧 甲 基 纤 维 素 层 析 柱 进 行 分 离 纯 化 时 对 层 析 介 质 有 较 大 的 破 坏 作 用 笔 者 参 考 了 [13] Liu 等 的 方 法, 采 用 0.5 mol/l NaCl 提 取 溶 液 加 70% 饱 和 度 硫 酸 铵 沉 淀 的 方 法, 该 方 法 较 50% 丙 酮 水 溶 液 的 方 法 温 和 且 对 层 析 介 质 无 损 伤, 通 过 不 同 梯 度 NaCl 浓 度 的 洗 脱 液 的 比 较, 认 为 0.45 mol/l NaCl 浓 度 的 洗 脱 液 对 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 洗 脱 效 果 较 好 采 用 本 研 究 的 方 法, 以 干 重 为 1 g 的 马 槟 榔 种 子 脱 脂 干 粉 为 基 础, 可 纯 化 得 到 11.3 mg 的 马 宾 灵, 以 纯 化 的 马 宾 灵 纯 度 为 86.9% 计 算, 最 终 的 马 宾 灵 得 率 达 到 9.82%, 达 到 较 高 的 水 平 目 前 中 国 的 野 生 马 槟 榔 果 树 资 源 已 经 越 来 越 少, 在 2009 年 的 进 行 实 地 植 物 资 源 调 查 中 仅 发 现 野 生 的 马 槟 榔 活 体 植 株 145 株, 据 此 预 测 中 国 野 生 的 马 槟 榔 总 植 株 数 量 已 不 足 2000 株 [5] 随 着 当 前 研 究 的 不 断 深 入, 对 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 蛋 白 质 结 构 及 [14] 其 甜 味 机 理 也 有 了 更 加 全 面 的 认 识, 对 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 的 基 因 进 行 重 组, 将 重 组 后 的 马 宾 灵 基 因 转 入 大 肠 杆 菌 和 毕 赤 酵 母 等 多 个 体 外 蛋 白 质 表 达 系 统 进 行 高 效 表 达, 以 期 获 得 具 有 甜 味 活 性 的 重 组 植 物 甜 蛋 白 马 宾 灵 也 逐 渐 成 为 可 能 制 备 高 效 价 比 与 特 异 构 象 型 的 马 宾 灵 抗 体 是 检 测 与 鉴 定 重 组 马 宾 灵 基 因 工 程 表 达 的 基 础 多 克 隆 抗 体 虽 然 在 特 异 性 稳 定 性 方 面 不 如 单 克 隆 抗 体, 但 其 制 备 简 便 成 本 低 廉 具 有 多 个 与 抗 原 决 定 簇 相 结 合 的 位 点 本 研 究 在 制 备 马 宾 灵 (MabinlinⅡ) 兔 源 多 克 隆 抗 体 时, 所 采 用 的 抗 原 为 纯 化 后 的 具 有 甜 味 活 性 的 马 宾 灵, 而 非 以 大 肠 杆 菌 表 达 的 重 组 马 宾 灵 蛋 白 作 为 抗 原 采 用 正 确 折 叠 形 成 甜 味 构 象 的 活 性 马 宾 灵 为 抗 原 时, 在 动 物 体 内 免 疫 产 生 的 多 克 隆 抗 体 多 为 构 象 型 抗 体, 能 够 识 别 在 基 因 工 程 表 达 的 具 有 甜 味 构 象 的 重 组 马 宾 灵, 符 合 在 马 宾 灵 的 重 组 基 因 工 程 表 达 时 要 求 参 考 文 献 [1] 朱 海 霞. 甜 蛋 白 的 研 究 进 展 [J]. 中 国 食 品 添 加 剂,2003(6): [2] 胡 忠, 何 敏. 马 槟 榔 甜 味 蛋 白 的 研 究 I. 提 取, 纯 化 和 某 些 特 性 [J]. 云 南 植 物 研 究,1983,5(2): [3] 李 永 康, 黄 威 廉, 王 兴 国, 等. 贵 州 植 物 志 ( 第 3 卷 )[M]. 贵 州 : 贵 州 人 民 出 版 社,1990:118. [4] 胡 忠, 彭 丽 萍, 何 敏. 马 槟 榔 甜 味 蛋 白 的 研 究 II. 甜 蛋 白 II 和 甜 蛋 白 I 的 比 较 [J]. 云 南 植 物 研 究,1985,7(1):1-10. [5] 于 旭 东, 张 超, 郭 建 春, 等. 马 槟 榔 种 质 资 源 调 查 报 告 [A]. 植 物 科 学 研 究 进 展 暨 中 国 热 带 特 色 植 物 科 学 学 术 研 讨 会 论 文 集 [C]. 海 南 海 口, 海 南 省 植 物 学 会,2009,12: 附 加 页. [6] Kohmura M, Ariyoshi Y. Chemical synthesis and characterization of the sweet protein mabinlin Ⅱ [J]. Biopolymers,1998,46(4): [7] 刘 敬 梅, 陈 大 明, 陈 杭. 甜 蛋 白 基 因 MBLⅡ 对 莴 苣 的 遗 传 转 化 [J]. 园 艺 学 报,2001,28(3): [8] 李 晓 东, 刘 敬 梅, 陈 杭 等. 甜 蛋 白 基 因 MBLⅡ 对 番 茄 的 遗 传 转 化 [J]. 西 北 植 物 学 报,2004,24(5): [9] 顾 文 亮, 胡 新 文, 郭 建 春. 马 槟 榔 甜 蛋 白 基 因 (MBLⅡ) 的 剪 切 重 组 和 结 构 分 析 [J]. 植 物 生 理 学 通 讯,2009,45(4): [10] 顾 文 亮, 夏 启 玉, 胡 新 文, 等. 重 组 马 槟 榔 甜 蛋 白 MabinlinⅡ 在 大 肠 杆 菌 中 的 表 达 [J]. 基 因 组 学 与 应 用 生 物 学,2009,28(3): [11] 张 菲 菲, 彭 治 云, 张 金 文, 等. 马 槟 榔 MBLⅡ 基 因 重 组 及 果 实 特 异 表 达 载 体 构 建 [J]. 甘 肃 农 业 大 学 学 报,2011,46(1): [12] 王 昌 博, 黄 东 彦, 胡 文 锋, 等. 植 物 甜 蛋 白 Mabinlin Ⅱ 在 大 肠 杆 菌 中 的 表 达 [J]. 现 代 食 品 科 技, 2011,27(4): [13] Liu X Z, Maeda S J, Hu Z, et al. Purification, complete amino acid sequence and structural characterization of the heat-stable sweet protein, mabinlinⅡ[j].european Journal of Biochemistry,1993(211): [14] Li D F, Jiang P H, Zhu D Y, et al. Crystal structure of Mabinlin Ⅱ: A novel structural type of sweet proteins and the main structural basis for its sweetness[j].journal of Structural Biology,2008(162): [15] Hermann Schägger. Tricine SDS-PAGE[J].Nature Protocols,2006, 1(1):16-22.
深圳市新亚电子制程股份有限公司
证 券 代 码 :002388 证 券 简 称 : 新 亚 制 程 公 告 编 号 :2016-053 深 圳 市 新 亚 电 子 制 程 股 份 有 限 公 司 2016 年 第 二 次 临 时 股 东 大 会 决 议 公 告 本 公 司 及 董 事 会 全 体 成 员 保 证 公 告 内 容 真 实 准 确 和 完 整, 不 存 在 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 者 重 大 遗 漏 特
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何 秋 琳 张 立 春 视 觉 学 习 研 究 进 展 视 觉 注 意 视 觉 感 知
第 卷 第 期 年 月 开 放 教 育 研 究 何 秋 琳 张 立 春 华 南 师 范 大 学 未 来 教 育 研 究 中 心 广 东 广 州 随 着 图 像 化 技 术 和 电 子 媒 体 的 发 展 视 觉 学 习 也 逐 步 发 展 为 学 习 科 学 的 一 个 研 究 分 支 得 到 研 究 人 员 和 教 育 工 作 者 的 广 泛 关 注 基 于 此 作 者 试 图 对 视 觉 学 习
¹ º ¹ º 农 业 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 农 业 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个 月 及 以 上 的 流 动 人 口 非 农 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 非 农 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个
¹ 改 革 开 放 年 来 人 口 流 动 规 模 持 续 增 加 对 我 国 社 会 经 济 的 持 续 发 展 起 到 了 重 要 作 用 为 全 面 了 解 我 国 流 动 人 口 生 存 状 况 准 确 把 握 流 动 人 口 发 展 规 律 和 趋 势 不 断 加 强 流 动 人 口 服 务 管 理 引 导 人 口 有 序 流 动 合 理 分 布 国 家 人 口 计 生 委 于 年 月 启
人 工 抗 原 的 鉴 定
生 物 技 术 通 报 张 海 棠 王 自 良 刘 耀 东 传 统 的 理 化 分 析 方 法 在 食 品 污 染 检 测 方 面 发 挥 了 重 要 的 作 用 但 均 存 在 一 定 的 缺 陷 急 需 建 立 快 速 高 效 的 检 测 方 法 食 品 污 染 免 疫 检 测 是 一 种 新 型 的 分 析 方 法 与 理 化 分 析 方 法 相 比 具 有 省 时 省 力 费 用 低 廉 便
说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度, 对 2015 年 春 季 期 教 运 行 基
内 部 资 料 东 北 师 范 大 教 运 行 基 本 状 态 据 报 告 2015 年 春 季 期 教 务 处 2015 年 10 月 27 日 说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度,
文 化 记 忆 传 统 创 新 与 节 日 遗 产 保 护 根 据 德 国 学 者 阿 斯 曼 的 文 化 记 忆 理 论 仪 式 与 文 本 是 承 载 文 化 记 忆 的 两 大 媒 体 在 各 种 仪 式 行 为 中 节 日 以 其 高 度 的 公 共 性 有 组 织 性 和 历 史 性 而 特 别 适 用 于 文 化 记 忆 的 储 存 和 交 流 节 日 的 文 化 功 能 不 仅 在 于
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华 中 师 范 大 学 2016 年 接 收 校 内 外 优 秀 硕 士 研 究 生 调 剂 信 息 表 名 称 经 济 与 工 商 管 理 学 院 020101 政 治 经 济 学 1 经 济 学 类 毕 业 学 校 与 报 考 学 校 不 低 于 我 校 办 学 层 次 经 济 与 工 商 管 理 学 院 020105 世 界 经 济 学 1 经 济 学 类 毕 业 学 校 与 报 考 学 校
中 国 软 科 学 年 第 期!!!
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( ) ( )... 李 雪 岩, 龙 耀 (. 广 西 民 族 大 学 商 学 院, 广 西 南 宁 ;. 中 山 大 学 教 育 学 院, 广 东 广 州 ) : 高 等 教 育 是 专 业 教 育 高 考 是 为 高 等 教 育 服 务 的, 是 为 高 等 专 业 教 育 选 拔 有 专 业 培 养 潜 质 的 人 才 现 行 高 考 制 度 忽 略 专 业 潜 质 的 因 素, 过 份 强
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中 国 应 对 气 候 变 化 的 政 策 与 行 动 2013 年 度 报 告 国 家 发 展 和 改 革 委 员 会 二 〇 一 三 年 十 一 月 100% 再 生 纸 资 源 目 录 前 言... 1 一 应 对 气 候 变 化 面 临 的 形 势... 3 二 完 善 顶 层 设 计 和 体 制 机 制... 4 三 减 缓 气 候 变 化... 8 四 适 应 气 候 变 化... 20
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第 期 马 海 燕 等 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 材 料 与 方 法 臭 氧 水 的 制 取 臭 氧 水 处 理 超 声 波 处 理 超 声 波 和 臭 氧 水 协 同 处 理 对 照 处 理 邻 苯 二 胺 分 光 光 度 法 测
第 卷 第 期 年 月 食 品 与 生 物 技 术 学 报 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 马 海 燕 张 慜 孙 金 才 食 品 科 学 与 技 术 国 家 重 点 实 验 室 江 南 大 学 江 苏 无 锡 海 通 食 品 集 团 股 份 有 限 公 司 浙 江 慈 溪 由 于 速 冻 蔬 菜 加 工 过 程 中 的 热 烫 处 理 对
100566035515613 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566035715658 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566037615926 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000100357 101 思 想
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简 报 要 点 ESI 共 有 22 个 学 科 门 类, 江 苏 高 校 目 前 只 有 16 个 学 科 门 类 进 入 了 世 界 1%, 分 别 是 一 般 社 会 科 学 临 床 医 学 农 业 科 学 分 子 生 物 学 和 遗 传 学 动 植 物 科 学 化 学 地 球 科 学 工 程
江 苏 高 等 院 校 ESI 学 科 评 估 简 讯 2016 年 第 2 期 2016-03-17 ESI(Essential Science Indicators, 基 本 科 学 指 标 ) 是 基 于 Web of Science 权 威 数 据 建 立 的 分 析 型 数 据 库, 将 全 球 学 科 分 成 22 个 大 学 科, 来 自 于 Web of Science 的 10 年
珠江钢琴股东大会
证 券 代 码 :002678 证 券 简 称 : 珠 江 钢 琴 公 告 编 号 :2015-038 广 州 珠 江 钢 琴 集 团 股 份 有 限 公 司 2015 年 年 度 股 东 大 会 决 议 公 告 本 公 司 及 董 事 会 全 体 成 员 保 证 信 息 披 露 的 内 容 真 实 准 确 完 整, 没 有 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 重 大 遗 漏 特 别 提 示 :
第 期 王 兴 涛 等 猪 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 种 猪 精 液 分 离 株 的 鉴 定 及 进 化 分 析 病 料 毒 株 及 细 胞 试 剂 引 物 设 计 提 取 及 基 因 克 隆 及 测 序
河 南 农 业 科 学 王 兴 涛 罗 俊 滕 蔓 樊 剑 鸣 鄂 巍 禹 斌 刘 力 张 改 平 利 用 技 术 对 河 南 省 某 规 模 化 猪 场 乙 脑 疑 似 病 例 的 种 猪 精 液 进 行 分 析 从 部 分 样 本 中 扩 增 出 与 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 基 因 和 基 因 具 有 高 度 同 源 性 的 预 期 产 物 在 日 龄 乳 鼠 脑 内 接 种 种 猪
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( 一 ) 系 统 整 体 操 作 流 程 简 述 3 ( 二 ) 系 统 中 各 角 色 操 作 功 能 说 明 5 1. 学 院 管 理 员 5 2. 教 学 院 长 8 3. 指 导 教 师 10 4. 答 辩 组 组 长 12 5. 学 生 12 6. 系 统 管 理 员 15 ( 一 ) 论 文 系 统 常 见 问 题 16 ( 二 ) 论 文 查 重 常 见 问 题 22 1 2 主
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附 件 1 国 际 中 药 专 业 高 级 技 术 职 称 评 审 条 件 及 报 名 材 料 一 系 列 ( 一 ) 中 1 高 级 专 科 ( 副 ) 高 级 专 科 ( 副 ) 1 取 得 中 专 科 职 称 后, 独 立 从 事 中 临 床 实 践 5 年 以 上 2 取 得 中 博 士 学 位 后, 临 床 实 践 2 年 以 上 3 取 得 中 硕 士 学 位 后, 临 床 实 践 7
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: 周 晓 虹 : - -., - - - -. :( ), -,.( ),,, -. - ( ).( ) ', -,,,,, ( ).( ),,, -., '.,, :,,,, :,,,, ,,,,, :,, (.,, );, (, : ), (.., ;. &., ;.. &.., ;, ;, ),,,,,,, ( ) ( ),,,,.,,,,,, : ;, ;,.,,,,, (., : - ),,,,
供 试 材 料 试 验 试 剂 和 仪 器 基 因 组 提 取 分 析 方 法 反 应 体 系 最 佳 配 比 的 筛 选 退 火 温 度 对 扩 增 效 果 的 影 响
生 物 技 术 通 报 胡 立 敏 陶 兴 林 侯 栋 朱 惠 霞 张 东 琴 选 取 温 敏 花 椰 菜 不 育 系 与 杂 交 组 合 的 高 可 育 和 高 不 育 单 株 构 建 基 因 池 利 用 对 随 机 引 物 对 其 进 行 标 记 同 时 采 用 正 交 设 计 对 其 反 应 体 系 及 扩 增 条 件 进 行 优 化 试 验 结 果 表 明 在 反 应 体 系 中 含 引 物
课程类 别
美 声 演 唱 方 向 培 养 方 案 一 培 养 目 标 本 方 向 要 求 学 生 德 智 体 美 全 面 发 展, 培 养 能 在 文 艺 团 体 从 事 声 乐 演 唱 及 能 在 艺 术 院 校 从 事 本 方 向 教 学 的 高 级 门 人 才 二 培 养 规 格 本 方 向 学 生 应 系 统 掌 握 声 乐 演 唱 方 面 的 理 论 和 技 能, 具 备 较 高 的 声 乐 演 唱
随着执业中医师资格考试制度的不断完善，本着为我校中医学专业认证服务的目的，本文通过对我校中医类毕业生参加2012年和2013年的中医执业医师考试成绩及通过率、掌握率进行分析，并与全国的平均水平进行差异比较分析，以此了解我校执业中医师考试的现状，进而反映我校中医类课程总体教学水平，发现考核知识模块教学中存在的不足，反馈给相关学院和教学管理部门，以此提高教学和管理水平。
2012-2013 中 医 类 别 执 业 医 师 综 合 笔 试 成 绩 分 析 反 馈 报 告 教 务 处 二 零 一 三 年 三 月 1 目 录 1 前 言 3 2 2012-2013 中 医 类 别 执 业 医 师 综 合 笔 试 成 绩 分 析 反 馈 报 告 4 附 件 1:2012 年 中 医 类 别 医 师 资 格 综 合 笔 试 院 校 学 科 成 绩 分 析 报 告 附 件 2:2013
一 从 分 封 制 到 郡 县 制 一 从 打 虎 亭 汉 墓 说 起
县 乡 两 级 的 政 治 体 制 改 革 如 何 建 立 民 主 的 合 作 新 体 制 县 乡 人 大 运 行 机 制 研 究 课 题 组 引 言 一 从 分 封 制 到 郡 县 制 一 从 打 虎 亭 汉 墓 说 起 二 密 县 在 周 初 是 两 个 小 国 密 国 和 郐 国 三 密 县 的 第 一 任 县 令 卓 茂 四 明 清 时 代 的 密 县 二 从 集 中 的 动 员 体
评 委 : 徐 岩 宇 - 个 人 技 术 标 资 信 标 初 步 审 查 明 细 表 序 号 投 标 单 位 投 标 函 未 按 招 标 文 件 规 定 填 写 漏 填 或 内 容 填 写 错 误 的 ; 不 同 投 标 人 的 投 标 文 件 由 同 一 台 电 脑 或 同 一 家 投 标 单
评 委 : 徐 岩 宇 - 个 人 清 标 评 审 明 细 表 评 审 因 素 序 号 投 标 单 位 清 标 评 审 1 深 圳 市 创 捷 科 技 有 限 合 格 2 四 川 川 大 智 胜 软 件 股 份 有 限 合 格 3 北 京 航 天 长 峰 科 技 工 业 集 团 有 限 公 司 合 格 4 深 圳 中 兴 力 维 技 术 有 限 合 格 5 深 圳 键 桥 通 讯 技 术 股 份 有
张 荣 芳 中 山 大 学 历 史 系 广 东 广 州 张 荣 芳 男 广 东 廉 江 人 中 山 大 学 历 史 系 教 授 博 士 生 导 师 我 们 要 打 破 以 前 学 术 界 上 的 一 切 偶 像 以 前 学 术 界 的 一 切 成 见 屏 除 我 们 要 实 地 搜 罗 材 料 到 民 众 中 寻 方 言 到 古 文 化 的 遗 址 去 发 掘 到 各 种 的 人 间 社 会 去
西 南 民 族 学 院 学 报 哲 学 社 会 科 学 版 第 卷 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 年 年 新 中 国 五 十 年 统 计 资 料 汇 编 中 国 人 口 统 计 年 鉴 年 数 据 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 中 国 统 计 出 版 社 年 版 资 料 来 源
郑 长 德 教 育 的 发 展 人 力 资 源 的 开 发 是 决 定 西 部 民 族 地 区 未 来 发 展 的 关 键 因 素 之 一 是 实 施 西 部 大 开 发 战 略 提 高 其 经 济 竞 争 力 和 综 合 实 力 的 重 要 保 障 本 文 从 西 部 民 族 地 区 教 育 发 展 的 现 状 入 手 指 出 中 华 人 民 共 和 国 成 立 多 年 来 西 部 民 族 地 区
2006年顺德区高中阶段学校招生录取分数线
2014 年 顺 德 区 高 中 阶 段 学 校 考 试 提 前 批 第 一 批 第 二 批 学 校 录 取 根 据 佛 山 市 办 提 供 的 考 生 数 据, 现 将 我 区 2014 年 高 中 阶 段 学 校 考 试 提 前 批 第 一 批 第 二 批 学 校 的 录 取 公 布 如 下 : 一 顺 德 一 中 录 取 分 第 1 志 愿, 总 分 585, 综 合 表 现 评 价 A, 考
国债回购交易业务指引
附 件 1 上 海 证 券 交 易 所 新 质 押 式 国 债 回 购 交 易 业 务 指 引 一 总 述 根 据 上 海 证 券 交 易 所 债 券 交 易 实 施 细 则, 上 证 所 将 于 2006 年 5 月 8 日 起 推 出 新 质 押 式 国 债 回 购 新 质 押 式 回 购 与 现 行 质 押 式 回 购 相 比 区 别 主 要 在 以 下 几 个 方 面 :1 新 质 押 式
0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 考 核 ( 扣 原 因 ) 考 评 得 3 安 全 生 产 目 30 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 无 轻 伤 责 任 事 故 无 重 大 质 量
0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 3 无 轻 伤 责 任 事 故 目 标 30 及 事 无 重 大 质 量 工 作 过 失 故 管 无 其 他 一 般 责 任 事 故 理 在 公 司 文 明 环 境 创 建 中, 无 工 作 过 失 及 被 追 究 的
伊 犁 师 范 学 院 611 语 言 学 概 论 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 语 言 学 纲 要 笔 记, 由 考 取 本 校 本 专 业 高 分 研 究 生 总 结 而 来, 重 点 突 出, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 效
伊 犁 师 范 学 院 611 语 言 学 概 论 全 套 考 研 资 料 ......2 伊 犁 师 范 学 院 802 文 学 概 论 全 套 考 研 资 料 ......2 伊 犁 师 范 学 院 702 普 通 物 理 全 套 考 研 资 料 ......3 伊 犁
浙 江 大 学 化 学 工 程 与 生 物 工 程 学 系 硕 士 学 位 论 文 混 合 模 式 吸 附 层 析 分 离 猪 血 免 疫 球 蛋 白 研 究 姓 名 : 庄 甜 甜 申 请 学 位 级 别 : 硕 士 专 业 : 化 学 工 程 指 导 教 师 : 林 东 强 20100101 混
18 上 报 该 学 期 新 生 数 据 至 阳 光 平 台 第 一 学 期 第 四 周 至 第 六 周 19 督 促 学 习 中 心 提 交 新 增 专 业 申 请 第 一 学 期 第 四 周 至 第 八 周 20 编 制 全 国 网 络 统 考 十 二 月 批 次 考 前 模 拟 题 第 一 学
1 安 排 组 织 全 国 网 络 统 考 九 月 批 次 网 上 考 前 辅 导 第 一 学 期 第 一 周 统 考 考 前 半 个 月 2 下 发 全 国 网 络 统 考 九 月 批 次 准 考 证 第 一 学 期 第 一 周 导 出 下 半 年 成 人 本 科 学 士 学 位 英 语 统 一 考 试 报 考 3 信 息 第 一 学 期 第 一 周 4 教 学 计 划 和 考 试 计 划 上 网,
古 地 理 学 报 年 月
第 卷 第 期 年 月 古 地 理 学 报 胡 广 成 鲍 志 东 张 震 罗 小 玉 蔡 雨 刘 丽 中 国 石 油 大 学 北 京 资 源 与 信 息 学 院 北 京 贵 州 桐 梓 松 坎 剖 面 中 下 三 叠 统 发 育 齐 全 化 石 丰 富 出 露 良 好 是 研 究 上 扬 子 地 区 海 相 地 层 的 理 想 剖 面 之 一 根 据 地 层 划 分 与 对 比 将 其 分 为 下
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上 海 德 载 中 怡 律 师 事 务 所 关 于 昂 华 ( 上 海 ) 自 动 化 工 程 股 份 有 限 公 司 二 〇 一 二 年 年 度 股 东 大 会 法 律 意 见 书 上 海 德 载 中 怡 律 师 事 务 所 上 海 市 银 城 中 路 168 号 上 海 银 行 大 厦 1705 室 (200120) 电 话 :8621-5012 2258 传 真 :8621-5012 2257
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- 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - 做 四 个 全 面 的 宣 传 者 实 践 者 - 6 - - 7 - - 8 - - 9 - - 10 - - 11 - - 12 - - 13 - - 14 - - 15 - - 16 - - 17 - - 18 - - 19 - - 20 - 创 新 调 处 新 机 制 构 筑 稳 定 防 火 墙 - 21 - - 22 - - 23
CONTENTS
江 苏 省 三 维 打 印 产 业 技 术 创 新 战 略 联 盟 江 苏 省 三 维 打 印 产 业 技 术 创 新 战 略 联 盟 秘 书 处 主 办 江 苏 省 三 维 打 印 装 备 与 制 造 重 点 实 验 室 南 京 三 维 打 印 学 会 承 办 第 7 期 2015 年 12 月 CONTENTS 南 京 3D 数 字 化 产 业 合 作 交 流 大 会 在 宁 隆 重 召 开 1
2015-2016 学 年 第 二 学 期 集 中 考 试 安 排 (18 周 ) 考 试 日 期 :6 月 27 日 星 期 一 8:10-9:50 第 二 公 共 教 学 楼 A 区 A303 10811046 高 等 数 学 ( 理 二 2) 复 材 1501-2 材 料 科 学 与 工 程
考 试 时 间 2015-2016 学 年 第 二 学 期 集 中 考 试 安 排 (18 周 ) 考 试 日 期 :6 月 27 日 星 期 一 考 场 所 在 教 学 楼 ( 教 学 区 ) 考 试 教 室 课 程 号 课 程 名 考 生 所 在 专 业 ( 班 级 ) 考 生 所 属 学 院 8:10-9:50 第 二 公 共 教 学 楼 A 区 A101 10811026 高 等 数 学 (
抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 % # % % % ) % % # # + #, ) +, % % % % % % % %
抗 战 时 期 国 民 政 府 的 银 行 监 理 体 制 探 析 王 红 曼 抗 战 时 期 国 民 政 府 为 适 应 战 时 经 济 金 融 的 需 要 实 行 由 财 政 部 四 联 总 处 中 央 银 行 等 多 家 机 构 先 后 共 同 参 与 的 多 元 化 银 行 监 理 体 制 对 战 时 状 态 下 的 银 行 发 展 与 经 营 安 全 进 行 了 大 规 模 的 设 计 与
证券代码：000066 证券简称：长城电脑 公告编号：2014-000
证 券 代 码 :000066 证 券 简 称 : 长 城 电 脑 公 告 编 号 :2016-092 中 国 长 城 计 算 机 深 圳 股 份 有 限 公 司 2016 年 度 第 三 次 临 时 股 东 大 会 决 议 公 告 本 公 司 及 其 董 事 会 全 体 成 员 保 证 信 息 披 露 内 容 的 真 实 准 确 完 整, 没 有 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 重 大 遗
龚 亚 夫 在 重 新 思 考 基 础 教 育 英 语 教 学 的 理 念 一 文 中 援 引 的 观 点 认 为 当 跳 出 本 族 语 主 义 的 思 维 定 式 后 需 要 重 新 思 考 许 多 相 连 带 的 问 题 比 如 许 多 发 音 的 细 微 区 别 并 不 影 响 理 解 和
语 音 语 篇 语 感 语 域 林 大 津 毛 浩 然 改 革 开 放 以 来 的 英 语 热 引 发 了 大 中 小 学 英 语 教 育 整 体 规 划 问 题 在 充 分 考 虑 地 区 学 校 和 个 体 差 异 以 及 各 家 观 点 的 基 础 上 遵 循 实 事 求 是 逐 级 定 位 逐 层 分 流 因 材 施 教 的 原 则 本 研 究 所 倡 导 的 语 音 语 篇 语 感 语 域
江 苏 瑞 峰 建 设 集 团 有 限 公 有 限 公 江 苏 鲁 工 建 设 工 程 有 限 公 江 苏 溧 鸿 建 设 有 限 公 江 苏 明 创 科 技 园 发 展 有 限 公 公 公 有 限 公 江 苏 茂 盛 建 设 有 限 公 江 苏 鼎 洪 建 工 有 限 公 富 强 机 电 安 装
溧 阳 市 上 沛 小 学 校 舍 改 造 项 目 工 程 中 标 公 示 工 程 编 码 工 程 名 称 建 设 单 位 LYS201405001 溧 阳 市 上 沛 小 学 校 舍 改 造 项 目 溧 阳 市 上 沛 小 学 工 程 类 别 施 工 招 标 方 式 公 开 招 标 建 设 地 点 溧 阳 市 上 沛 小 学 校 内 项 目 所 在 区 域 常 州 溧 阳 项 目 建 筑 面 积
二 工 资 制 度 与 教 师 道 德 风 险 行 为
义 务 教 育 学 校 绩 效 工 资 改 革 的 经 济 学 分 析 李 萍 盘 宇 章 吕 荣 西 南 财 经 大 学 成 都 本 文 利 用 委 托 代 理 理 论 对 义 务 教 育 学 校 绩 效 工 资 改 革 中 教 师 行 为 和 地 方 政 府 行 为 分 别 进 行 了 分 析 研 究 发 现 绩 效 工 资 的 最 优 设 计 是 工 资 函 数 中 包 含 一 个 固 定 支
测 谱 学 基 础 宽 波 段 遥 感
燕 守 勋 武 晓 波 周 朝 宪 刘 朝 晖 庄 永 成 曹 春 香 魏 欣 欣 于 彩 虹 肖 春 生 中 国 科 学 院 遥 感 应 用 研 究 所 北 京 有 色 金 属 矿 产 地 质 调 查 中 心 北 京 青 海 西 部 资 源 公 司 西 宁 青 海 青 海 省 地 质 调 查 院 西 宁 青 海 根 据 年 出 版 的 专 辑 近 年 来 发 表 的 相 关 文 献 以 及 研 究
本 文 从 贫 困 概 念 及 演 化 提 出 新 贫 困 人 口 的 定 义 和 类 型 认 为 新 贫 困 人 口 是 我 国 计 划 经 济 向 市 场 经 济 制 度 转 轨 过 程 中 的 利 益 受 损 者 解 决 新 贫 困 人 口 的 生 存 权 和 发 展 权 问 题 是 政 府 的 基 本 责 任 由 此 从 社 会 保 障 的 内 涵 功 能 和 价 值 基 础 等 角 度 阐
ETF、分级基金规模、份额变化统计20130816
ETF 分 级 基 金 规 模 份 额 变 化 统 计 截 至 上 周 末, 全 市 场 股 票 型 ETF 规 模 约 1451 亿, 份 额 约 1215 亿,ETF 总 份 额 及 规 模 的 周 变 动 值 分 别 为 -23-44 亿, 份 额 与 规 模 均 下 降 ; 分 级 基 金 规 模 约 438 亿, 份 额 572 亿, 总 份 额 及 规 模 的 周 变 动 值 分 别 为
抗 日 战 争 研 究 年 第 期
田 子 渝 武 汉 抗 战 时 期 是 国 共 第 二 次 合 作 的 最 好 时 期 在 国 共 合 作 的 基 础 上 出 现 了 抗 日 救 亡 共 御 外 侮 的 局 面 这 个 大 好 局 面 的 出 现 与 中 共 长 江 局 的 丰 功 伟 绩 是 分 不 开 的 但 长 期 以 来 由 于 有 一 个 王 明 的 右 倾 错 误 直 接 影 响 了 对 它 的 全 面 科 学 准 确
金 不 少 于 800 万 元, 净 资 产 不 少 于 960 万 元 ; (3) 近 五 年 独 立 承 担 过 单 项 合 同 额 不 少 于 1000 万 元 的 智 能 化 工 程 ( 设 计 或 施 工 或 设 计 施 工 一 体 ) 不 少 于 2 项 ; (4) 近 三 年 每 年
工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 一 总 则 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 ( 一 ) 为 了 加 强 对 从 事 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 企 业 的 管 理, 维 护 建 筑 市 场 秩 序, 保 证 工 程 质 量 和 安 全, 促 进 行 业 健 康 发 展, 结 合 建 筑 智 能 化 工 程 的 特 点, 制 定 本 标
第 期 李 伟 等 用 方 法 对 中 国 历 史 气 温 数 据 插 值 可 行 性 讨 论
李 伟 李 庆 祥 江 志 红 使 用 插 值 方 法 对 已 经 过 质 量 控 制 和 均 一 化 的 年 月 年 月 中 国 全 部 基 本 基 准 站 气 温 资 料 逐 月 进 行 空 间 插 值 通 过 站 点 的 实 际 序 列 与 插 值 后 格 点 序 列 进 行 比 较 针 对 相 关 系 数 和 线 性 趋 势 等 多 个 量 来 检 验 方 法 对 气 候 资 料 插 值 的
网 球 / 排 球 1 教 师 硕 士 四 级 男 性 诊 断 教 研 室 1 教 师 博 士 或 硕 士 六 级 本 科 阶 段 为 临 床 医 学 专 业, 男 士 温 病 教 研 室 2 教 师 博 士 或 硕 士 六 级 中 医 专 业 中 医 诊 断 教 研 室 诊 断 学 / 中 医 诊
校 本 部 工 程 项 目 管 理 或 土 木 工 程 医 学 类 / 计 算 机 / 图 书 馆 专 业 1 专 技 硕 士 以 上 六 级 1 专 技 硕 士 以 上 六 级 1 年 以 上 工 程 造 价 管 理 或 现 场 施 工 管 理 经 验 的 ( 限 男 性 ) 中 医 药 类 专 业 1 编 辑 博 士 六 级 医 学 或 生 物 学 专 业 医 学 或 生 物 学 专 业 2 实
公 开 刊 物 须 有 国 内 统 一 刊 (CN), 发 表 文 章 的 刊 物 需 要 在 国 家 新 闻 出 版 广 电 总 局 (www.gapp.gov.cn 办 事 服 务 便 民 查 询 新 闻 出 版 机 构 查 询 ) 上 能 够 查 到 刊 凡 在 有 中 国 标 准 书 公 开
杭 教 人 2014 7 杭 州 市 教 育 局 关 于 中 小 学 教 师 系 列 ( 含 实 验 教 育 管 理 ) 晋 升 高 级 专 业 技 术 资 格 有 关 论 文 要 求 的 通 知 各 区 县 ( 市 ) 教 育 局 ( 社 发 局 ), 直 属 学 校 ( 单 位 ), 委 托 单 位 : 为 进 一 步 规 范 杭 州 市 中 小 学 教 师 系 列 ( 含 实 验 教 育 管
上证指数
上 证 与 修 正 方 法 一 ( 一 ) 计 算 公 式 1. 上 证 指 数 系 列 均 采 用 派 许 加 权 综 合 价 格 指 数 公 式 计 算 2. 上 证 180 指 数 上 证 50 指 数 等 以 成 份 股 的 调 整 股 本 数 为 权 数 进 行 加 权 计 算, 计 算 公 式 为 : 报 告 期 指 数 =( 报 告 期 样 本 股 的 调 整 市 值 / 基 期 )
解 决 困 扰 事 业 单 位 高 效 运 行 的 人 员 编 制 难 题 应 摒 弃 既 有 经 验 化 判 断 的 思 维 限 囿 经 由 规 范 化 程 式 化 维 度 专 注 于 事 业 单 位 人 员 编 制 的 标 准 管 理 考 虑 到 事 业 单 位 人 员 编 制 的 复 杂 性 和 公 益 导 向 宜 在 编 制 标 准 定 位 上 确 定 整 体 性 发 展 性 公 益 性 取
公 路 交 通 科 技 黄 文 元 王 旭 东 刘 瀚 飚 周 朝 毅 公 路 货 运 超 载 呈 现 愈 演 愈 烈 的 态 势 各 种 危 害 显 现 已 经 引 起 相 关 的 技 术 和 行 业 主 管 层 面 的 广 泛 关 注 建 立 在 充 分 统 计 数 据 上 的 定 量 危 害 分 析 一 直 非 常 欠 缺 使 得 公 路 基 础 设 施 建 设 和 维 护 与 交 通 现 状
物 流 从 业 人 员 职 业 能 力 等 级 证 书 分 为 四 个 级 别, 分 别 为 初 级 助 理 级 中 级 和 高 级 ; 采 购 从 业 人 员 职 业 能 力 等 级 证 书 分 为 三 个 级 别, 分 别 为 中 级 高 级 和 注 册 级 请 各 有 关 单 位 按 照 通
物 联 培 字 2016 16 号 各 有 关 单 位 : 为 适 应 国 家 一 带 一 路 战 略 实 施 和 物 流 产 业 转 型 升 级 对 人 才 的 新 要 求, 确 保 物 流 采 购 人 才 培 养 工 作 有 序 衔 接 和 持 续 健 康 发 展, 参 照 国 际 惯 例, 中 国 物 流 与 采 购 联 合 会 ( 以 下 简 称 中 物 联 ) 经 研 究 决 定, 以 物
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美 国 旧 金 山 湾 区 田 野 调 查 札 记 !!!!! ! 个 案 一 男 士 年 龄 岁 籍 贯 沈 阳! !! 个 案 二 女 士 年 龄 岁 籍 贯 沈 阳!! !!! 一 新 古 典 经 济 学 移 民 理 论 的 解 释!! 二 制 度 层 面 的 原 因! 三 社 会 资 本 理 论 与 东 北 人 移 民 网 络 !!!!!! 四 社 会 关 系 网 络 资 源 配 置 理 论
1600 1000 40 50 2030 2000 采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路 2
简 略 版 本 :2015 3 10 2016 2021 全 球 卫 生 部 门 病 毒 性 肝 炎 战 略 2016 2021 2015 3 12 2012 2010 2014 2015 2016 2021 140 55% 35% 5 15% 5 20% 2.4 1.3 1.5 1 1600 1000 40 50 2030 2000 采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路
002 电 子 科 学 与 工 程 学 院 拟 招 生 150 人 联 系 人 : 周 老 师, 电 话 025-83492263 080901 物 理 电 子 学 电 路 分 析 电 磁 场 理 论 01 电 磁 物 理 与 微 波 电 子 学 02 光 子 学 与 光 电 技 术 03 微 纳
南 京 邮 电 大 学 2016 年 硕 士 研 究 生 招 生 专 业 目 录 001 通 信 与 信 息 工 程 学 院 拟 招 生 440 人 联 系 人 : 王 老 师, 电 话 :025-83492423 081001 通 信 与 信 息 系 统 科 目 01 移 动 通 信 与 无 线 技 术 02 无 线 数 据 与 移 动 计 算 03 下 一 代 通 信 网 络 技 术 数 字 信
静 注 人 免 疫 球 蛋 白 (PH4) 注 射 液 2.5g(5% 50ml) 1 玻 璃 瓶 瓶 贵 州 泰 邦 生 物 制 品 有 限 公 司 静 注 人 免 疫 球 蛋 白 (PH4) 注 射 液 2.5g(5% 50ml) 1 玻 璃 瓶 瓶 贵 州 中 泰 生 物 科 技 有 限 公
附 件 : 移 入 供 应 紧 张 药 品 管 理 系 统 的 血 液 制 品 产 品 目 录 通 用 名 剂 型 规 格 转 换 比 材 质 单 位 生 产 企 业 冻 干 静 注 人 免 疫 球 蛋 白 (PH4) 冻 干 粉 针 剂 1.25g 1 配 溶 媒 冻 干 静 注 人 免 疫 球 蛋 白 (PH4) 冻 干 粉 针 剂 2.5g 1 配 溶 媒 冻 干 静 注 人 免 疫 球 蛋
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工 业 品 专 刊 浙 江 出 入 境 检 验 检 疫 局 政 策 研 究 室 (WTO 研 究 室 ) 2010 年 05 月 27 日 目 录 工 作 动 态 浙 江 检 验 检 疫 局 专 家 参 加 欧 盟 洗 衣 机 洗 碗 机 能 效 及 生 态 设 计 通 报 评 议 会 1 浙 江 检 验 检 疫 局 举 办 出 口 玩 具 检 验 监 管 工 作 研 讨 会 2 台 州 出 口 鞋
关于修订《沪市股票上网发行资金申购
关 于 修 订 沪 市 股 票 上 网 发 行 资 金 申 购 实 施 办 法 的 通 知 各 有 关 单 位 : 沪 市 股 票 上 网 发 行 资 金 申 购 实 施 办 法 ( 修 订 稿 ) ( 见 附 件 ) 已 经 中 国 证 券 监 督 管 理 委 员 会 批 准, 现 将 修 订 所 涉 主 要 内 容 公 布 如 下 一 第 二 条 ( 二 ) 申 购 单 位 及 上 限 修 改
2014年中央财经大学研究生招生录取工作简报
2015 年 中 央 财 经 大 学 研 究 生 招 生 录 取 工 作 简 报 一 硕 士 研 究 生 招 生 录 取 情 况 2015 年 共 有 8705 人 报 考 我 校 硕 士 研 究 生, 其 中 学 术 型 研 究 生 报 考 3657 人, 专 业 硕 士 研 究 生 报 考 5048 人 ; 总 报 考 人 数 较 2014 年 增 长 1.4%, 学 术 型 报 考 人 数 较
中 国 社 会 科 学 年 第 期!!!! ( ( ) % ) ) ) % % % %
转 变 外 贸 发 展 方 式 的 经 验 与 理 论 分 析 中 国 应 对 国 际 金 融 危 机 冲 击 的 一 种 总 结 裴 长 洪 彭 磊 郑 文 在 应 对 国 际 金 融 危 机 冲 击 中 中 国 各 级 政 府 和 外 贸 企 业 不 仅 创 造 了 新 的 实 践 而 且 实 现 了 从 转 变 外 贸 增 长 方 式! 到 转 变 外 贸 发 展 方 式! 的 认 识 飞 跃
( 此 页 无 正 文, 为 广 东 东 方 精 工 科 技 股 份 有 限 公 司 关 于 提 供 资 料 真 实 准 确 和 完 整 的 承 诺 函 之 签 署 页 ) 广 东 东 方 精 工 科 技 股 份 有 限 公 司 法 定 代 表 人 : 唐 灼 林 2016 年 7 月 28 日
广 东 东 方 精 工 科 技 股 份 有 限 公 司 关 于 提 供 资 料 真 实 准 确 和 完 整 的 承 诺 函 鉴 于 广 东 东 方 精 工 科 技 股 份 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 本 公 司 ) 拟 收 购 北 京 普 莱 德 新 能 源 电 池 科 技 有 限 公 司 股 权, 为 保 证 本 次 交 易 的 顺 利 完 成, 按 照 中 国 证 券 监 管 部 门 相
生 物 技 术 通 报 相 关 载 体 及 试 剂 动 物 组 织 及 细 胞 培 养 总 的 提 取 及 反 转 录 内 蒙 古 白 绒 山 羊 基 因 的 分 子 克 隆 生 物 信 息 学 分 析
生 物 技 术 通 报 鲍 文 蕾 杨 娇 馥 李 彬 刘 俊 娥 王 潇 郭 旭 东 王 志 钢 侯 鑫 刘 东 军 旨 在 克 隆 内 蒙 古 白 绒 山 羊 血 管 内 皮 生 长 因 子 基 因 并 分 析 其 基 本 表 达 模 式 采 用 技 术 克 隆 基 因 将 得 到 的 基 因 序 列 及 其 编 码 的 氨 基 酸 序 列 进 行 生 物 信 息 学 分 析 利 用 半 定 量
上海证券交易所会议纪要
附 件 上 海 市 场 首 次 公 开 发 行 股 票 网 下 发 行 实 施 细 则 第 一 章 总 则 第 一 条 为 规 范 拟 在 上 海 证 券 交 易 所 ( 以 下 简 称 上 交 所 ) 上 市 的 公 司 首 次 公 开 发 行 股 票 网 下 发 行 业 务, 提 高 首 次 公 开 发 行 股 票 网 下 申 购 及 资 金 结 算 效 率, 根 据 证 券 发 行 与 承 销
一 开 放 性 的 政 策 与 法 规 二 两 岸 共 同 的 文 化 传 承 三 两 岸 高 校 各 自 具 有 专 业 优 势 远 见 杂 志 年 月 日
河 北 师 范 大 学 学 报 新 时 期 海 峡 两 岸 高 校 开 放 招 生 问 题 探 讨 郑 若 玲 王 晓 勇 海 峡 两 岸 高 校 开 放 招 生 是 新 时 期 推 进 海 峡 两 岸 高 等 教 育 交 流 与 合 作 的 重 要 尝 试 系 统 梳 理 改 革 开 放 以 来 两 岸 招 生 政 策 与 就 学 人 数 发 展 变 化 的 历 史 进 程 可 发 现 促 进 两
孙 建 董 小 萍 程 永 现 成 都 中 医 药 大 学 四 川 成 都 中 国 科 学 院 昆 明 植 物 研 究 所 植 物 化 学 与 西 部 植 物 资 源 持 续 利 用 国 家 重 点 实 验 室 云 南 昆 明 衰 老 是 自 然 界 一 种 复 杂 的 生 命 现 象 我 国 人 口 老 龄 化 趋 势 明 显 抗 衰 老 这 一 世 界 性 医 学 课 题 在 我 国 受 到 关
一 公 共 卫 生 硕 士 专 业 学 位 论 文 的 概 述 学 位 论 文 是 对 研 究 生 进 行 科 学 研 究 或 承 担 专 门 技 术 工 作 的 全 面 训 练, 是 培 养 研 究 生 创 新 能 力, 综 合 运 用 所 学 知 识 发 现 问 题, 分 析 问 题 和 解 决
上 海 市 公 共 卫 生 硕 士 专 业 学 位 论 文 基 本 要 求 和 评 价 指 标 体 系 ( 试 行 ) 上 海 市 学 位 委 员 会 办 公 室 二 O 一 二 年 三 月 一 公 共 卫 生 硕 士 专 业 学 位 论 文 的 概 述 学 位 论 文 是 对 研 究 生 进 行 科 学 研 究 或 承 担 专 门 技 术 工 作 的 全 面 训 练, 是 培 养 研 究 生 创
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梁 运 文 霍 震 刘 凯 本 文 利 用 奥 尔 多 中 心 的 调 查 数 据 从 三 个 方 面 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 状 况 进 行 了 详 细 的 实 证 分 析 首 先 刻 画 了 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 的 总 体 统 计 特 征 然 后 从 财 产 构 成 出 发 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 进 行 了 结 构 分 解 最 后 通
立 场 反 思 教 育 学 与 哲 学 和 科 学 的 对 话 杨 小 微 从 某 种 意 义 上 说 教 育 学 是 在 与 哲 学 等 相 关 学 科 的 对 话 中 成 长 起 来 的 它 先 后 经 历 了 亲 哲 学 和 亲 科 学 阶 段 而 今 正 在 走 向 事 理 知 识 时 期 对 话 使 教 育 学 从 马 克 思 主 义 哲 学 自 然 科 学 及 系 统 方 法 论 人 本
中 中 中 中 部 中 岗 位 条 件 历 其 它 历 史 师 地 理 师 生 物 师 体 与 健 康 师 04 05 06 07 从 事 中 历 史 工 从 事 中 地 理 工 从 事 中 生 物 工 从 事 中 体 与 健 康 工 2. 课 程 与 论 ( 历 史 ); 2. 科 ( 历 史 )
中 中 中 部 中 26 年 系 统 事 业 公 开 计 划 岗 位 条 件 历 其 它 数 师 英 语 师 物 理 师 02 0 从 事 中 数 工 从 事 中 英 语 工 从 事 中 物 理 工 2. 课 程 与 论 ( 数 ); 2. 科 ( 数 );. 数 ; 4. 基 础 数 ; 5. 计 算 数 ; 6. 概 率 论 与 数 理 统 计 ; 7. 应 用 数 ; 8. 数. 课 程 与
工 程 勘 察 资 质 标 准 根 据 建 设 工 程 勘 察 设 计 管 理 条 例 和 建 设 工 程 勘 察 设 计 资 质 管 理 规 定, 制 定 本 标 准 一 总 则 ( 一 ) 本 标 准 包 括 工 程 勘 察 相 应 专 业 类 型 主 要 专 业 技 术 人 员 配 备 技 术
住 房 和 城 乡 建 设 部 关 于 印 发 工 程 勘 察 资 质 标 准 的 通 知 建 市 [2013]9 号 各 省 自 治 区 住 房 和 城 乡 建 设 厅, 北 京 市 规 划 委, 天 津 上 海 市 建 设 交 通 委, 重 庆 市 城 乡 建 设 委, 新 疆 生 产 建 设 兵 团 建 设 局, 总 后 基 建 营 房 部 工 程 局, 国 务 院 有 关 部 门 建 设 司,
第 卷 第 辑 高 明 华 蔡 卫 星 曾 诚 股 权 结 构 与 信 息 披 露 质 量 来 自 证 券 分 析 师 盈 余 预 测 特 征 的 证 据!!
第 卷 第 辑 年 月 产 业 经 济 评 论 高 明 华 蔡 卫 星 曾 诚 本 文 利 用 年 中 国 股 上 市 公 司 的 相 关 数 据 使 用 证 券 分 析 师 盈 余 预 测 特 征 作 为 信 息 披 露 质 量 的 代 理 变 量 从 股 权 集 中 和 股 权 制 衡 的 角 度 探 讨 了 股 权 结 构 与 信 息 披 露 质 量 之 间 的 关 系 我 们 的 研 究 发
上海证券交易所会议纪要
附 件 上 海 市 场 首 次 公 开 发 行 股 票 网 上 发 行 实 施 细 则 第 一 章 总 则 第 一 条 为 规 范 上 海 市 场 首 次 公 开 发 行 股 票 网 上 发 行 行 为, 根 据 证 券 发 行 与 承 销 管 理 办 法 及 相 关 规 定, 制 定 本 细 则 第 二 条 通 过 上 海 证 券 交 易 所 ( 以 下 简 称 上 交 所 ) 交 易 系 统 并
编号：
编 号 : 企 业 内 高 技 能 人 才 培 养 评 价 实 施 方 案 ( 仅 适 用 于 企 业 特 有 行 业 特 有 工 种 ) 实 施 单 位 ( 公 章 ) 申 报 日 期 年 _ 月 日 1 企 业 内 高 技 能 人 才 培 养 评 价 项 目 实 施 方 案 申 报 表 项 目 名 称 等 级 项 目 性 质 课 时 申 报 单 位 联 系 人 通 讯 地 址 电 话 手 机 电
所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 具 有 肉 品 科 学 与 技 术 食 品 科 学 专 业 背 景, 熟 悉 畜 禽 屠 宰 副 产 物 加 工 领 域 科 学 发 展 前 沿, 在 海 外 取 得 博 士 学 位 或 有 3 年 以 上 国 外 博 士 后 科 研 工
中 国 农 业 科 学 院 农 产 品 加 工 研 究 所 2016 年 青 年 英 才 计 划 人 才 招 聘 岗 位 和 应 聘 条 件 所 属 团 岗 位 名 称 研 究 方 向 应 聘 条 件 熟 悉 粮 油 加 工 品 质 学 植 物 蛋 白 质 工 程 活 性 短 肽 与 多 糖 等 研 究 领 域, 在 海 外 获 得 博 士 学 位 或 获 得 博 油 料 加 工 与 品 粮 油 加
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北 京 市 中 医 管 理 局 二 一 五 年 四 月 ... 1... 18 2015... 30 京 中 医 政 字 [2014]160 号 1 2 一 充 分 认 识 中 医 健 康 乡 村 建 设 工 作 的 重 要 意 义 二 建 立 健 全 工 作 保 障 机 制 2014 12 15 三 做 好 工 作 启 动 的 准 备 事 宜 1 2014 12 15 5-10 2014 12 15
黄 金 原 油 总 持 仓 增 长, 同 比 增 幅 分 别 为 4.2% 和 4.1% 而 铜 白 银 以 及 玉 米 则 出 现 减 持, 减 持 同 比 减 少 分 别 为 9.4%,9.4% 以 及 6.5% 大 豆, 豆 粕 结 束 连 续 4 周 总 持 仓 量 增 长, 出 现 小 幅
小 麦 净 多 持 仓 增 加, 豆 油 豆 粕 净 多 持 仓 减 少 美 国 CFTC 持 仓 报 告 部 门 : 市 场 研 究 与 开 发 部 类 型 : 量 化 策 略 周 报 日 期 :212 年 5 月 7 日 电 话 :592-5678753 网 址 :www.jinyouqh.com 主 要 内 容 : 根 据 美 国 CFTC 公 布 的 数 据, 本 报 告 中 的 11 个
2. 本 次 修 改 后, 投 资 者 申 购 新 股 的 持 有 市 值 要 求 市 值 计 算 规 则 及 证 券 账 户 使 用 的 相 关 规 定 是 否 发 生 了 变 化? 答 : 未 发 生 变 化 投 资 者 申 购 新 股 的 持 有 市 值 是 指, 以 投 资 者 为 单 位
新 股 网 上 网 下 发 行 实 施 细 则 问 答 上 交 所 2016-01-05 一 网 上 发 行 业 务 问 答 1. 本 次 修 改 的 主 要 内 容 是 什 么? 答 : 本 次 修 改 的 主 要 内 容 包 括 : 一 是 取 消 了 投 资 者 在 申 购 委 托 时 应 全 额 缴 纳 申 购 资 金 的 规 定, 明 确 了 投 资 者 应 根 据 最 终 确 定 的 发
3 月 30 日 在 中 国 证 券 报 上 海 证 券 报 证 券 时 报 证 券 日 报 和 上 海 证 券 交 易 所 网 站 上 发 出 召 开 本 次 股 东 大 会 公 告, 该 公 告 中 载 明 了 召 开 股 东 大 会 的 日 期 网 络 投 票 的 方 式 时 间 以 及 审
北 京 市 君 致 律 师 事 务 所 关 于 浪 潮 软 件 股 份 有 限 公 司 2015 年 度 股 东 大 会 的 法 律 意 见 书 致 : 浪 潮 软 件 股 份 有 限 公 司 北 京 市 君 致 律 师 事 务 所 ( 以 下 简 称 本 所 ) 受 浪 潮 软 件 股 份 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 公 司 ) 的 委 托, 指 派 律 师 出 席 2016 年 4 月
第 六 章 债 券 股 票 价 值 评 估 1 考 点 一 : 债 券 价 值 的 影 响 因 素 2
Professional Accounting Education Provided by Academy of Professional Accounting (APA) CPA 财 务 管 理 习 题 班 第 八 讲 债 券 股 票 价 值 评 估 IreneGao ACCAspace 中 国 ACCA 国 际 注 册 会 计 师 教 育 平 台 Copyright ACCAspace.com
现 场 会 议 时 间 为 :2016 年 5 月 19 日 网 络 投 票 时 间 为 :2016 年 5 月 18 日 -2016 年 5 月 19 日 其 中 通 过 深 圳 证 券 交 易 所 交 易 系 统 进 行 网 络 投 票 的 时 间 为 2016 年 5 月 19 日 9:30-
证 券 代 码 :300439 证 券 简 称 : 美 康 生 物 公 告 编 号 :2016-046 宁 波 美 康 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 2015 年 度 股 东 大 会 决 议 公 告 公 司 及 董 事 会 全 体 成 员 保 证 信 息 披 露 的 内 容 真 实 准 确 完 整, 没 有 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 重 大 遗 漏 特 别 提 示 : 1 2016
六 业 年 限 四 年 制 本 科,3~6 年 弹 性 制 七 授 予 位 工 士 八 毕 业 分 要 求 生 物 工 程 专 业 分 及 比 例 分 配 总 计 通 识 必 科 基 础 必 专 业 必 必 选 践 专 业 公 共 小 计 理 论 其 他 小 计 理 论 验 小 计 理 论 验 选
2. 生 物 工 程 专 业 本 科 培 养 方 案 2.1 生 物 工 程 专 业 简 介 一 专 业 培 养 目 标 培 养 德 智 体 全 面 发 展, 系 统 掌 握 生 物 工 程 技 术 及 其 产 业 化 的 科 原 理 工 艺 技 术 过 程 等 基 本 理 论 和 基 本 技 能, 能 够 在 科 研 机 构 高 等 院 校 从 事 科 研 究 或 教 工 作, 在 生 物 工 程
曹 学 丽 王 尉 裴 海 闰 北 京 工 商 大 学 化 学 与 环 境 工 程 学 院 北 京 市 植 物 资 源 研 究 开 发 重 点 实 验 室 北 京 逆 流 色 谱 是 一 种 新 型 高 效 的 液 液 分 配 色 谱 分 离 技 术 由 于 它 不 需 要 固 体 分 离 介 质 因 而 具 有 传 统 的 液 固 色 谱 所 不 具 备 的 独 特 优 势 本 文 在 简 介 分
浙 江 海 洋 学 院 417 普 通 生 态 学 与 鱼 类 学 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 基 础 生 态 学 笔 记, 此 笔 记 为 高 分 研 究 生 复 习 所 用, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 效 率, 把 握 报
浙 江 海 洋 学 院 417 普 通 生 态 学 与 鱼 类 学 全 套 考 研 资 料 ......2 浙 江 海 洋 学 院 340 农 业 知 识 综 合 二 全 套 考 研 资 料 ......2 浙 江 海 洋 学 院 341 农 业 知 识 综 合 三 全 套 考 研 资 料
第 期 王 日 根 徐 士 林 与 清 初 福 建 汀 漳 道 的 社 会 治 理
王 日 根 厦 门 大 学 历 史 研 究 所 福 建 厦 门 徐 士 林 任 职 汀 漳 道 期 间 留 下 了 一 些 断 案 记 录 这 些 断 案 记 录 体 现 了 如 下 追 求 士 子 应 成 为 社 会 的 仪 型 地 方 上 的 健 讼 风 气 必 须 得 到 抑 制 对 于 社 会 发 展 中 的 纠 纷 的 解 决 务 求 公 正 以 确 立 正 确 的 社 会 价 值 导 向
避 孕 节 育 作 为 保 障 中 国 计 划 生 育 成 功 的 核 心 技 术 路 径 已 成 为 每 位 已 婚 育 龄 个 体 生 命 历 程 中 无 法 回 避 的 社 会 现 实 本 研 究 从 中 国 避 孕 节 育 政 策 避 孕 节 育 技 术 的 进 展 及 避 孕 节 育 使 用 等 方 面 对 中 国 实 施 计 划 生 育 以 来 的 避 孕 节 育 历 程 进 行 了 梳
附 件 : 上 海 市 建 筑 施 工 企 业 施 工 现 场 项 目 管 理 机 构 关 键 岗 位 人 员 配 备 指 南 二 一 四 年 九 月 十 一 日 2
公 开 上 海 市 城 乡 建 设 和 管 理 委 员 会 文 件 沪 建 管 2014 758 号 上 海 市 城 乡 建 设 和 管 理 委 员 会 关 于 印 发 上 海 市 建 筑 施 工 企 业 施 工 现 场 项 目 管 理 机 构 关 键 岗 位 人 员 配 备 指 南 的 通 知 各 区 县 建 设 和 交 通 委 员 会 : 为 进 一 步 加 强 对 建 设 工 程 施 工 现
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机 电 一 级 注 册 建 造 师 继 续 教 育 培 训 广 东 培 训 点 网 上 报 名 操 作 使 用 手 册 (2013 年 1 月, 第 一 版 ) 第 一 章 个 人 注 册 与 个 人 信 息 管 理 1. 个 人 注 册 ( 请 每 人 只 申 请 一 个 注 册 号, 如 果 单 位 批 量 报 班 单 位 帮 申 请 注 册, 不 需 个 人 再 注 册 ) 首 次 报 班,
浙 江 天 册 律 师 事 务 所 关 于 杭 州 电 缆 股 份 有 限 公 司 2015 年 年 度 股 东 大 会 的 法 律 意 见 书 发 文 号 :TCYJS2016H0228 致 : 杭 州 电 缆 股 份 有 限 公 司 根 据 中 华 人 民 共 和 国 证 券 法 ( 下 称 证
关 于 杭 州 电 缆 股 份 有 限 公 司 2015 年 年 度 股 东 大 会 的 法 律 意 见 书 浙 江 天 册 律 师 事 务 所 浙 江 省 杭 州 市 杭 大 路 1 号 黄 龙 世 纪 广 场 A 座 11 楼 电 话 :+86 571 87901111 传 真 :+86 571 87901501 浙 江 天 册 律 师 事 务 所 关 于 杭 州 电 缆 股 份 有 限 公 司
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有 限 理 性 动 物 精 神 及 市 场 崩 溃 对 情 绪 波 动 与 交 易 行 为 的 实 验 研 究 林 树 俞 乔 资 本 市 场 的 经 验 表 明 市 场 参 与 主 体 投 资 者 的 情 绪 波 动 对 资 产 交 易 与 价 格 决 定 产 生 了 不 可 忽 视 的 影 响 但 是 现 有 文 献 尚 缺 乏 对 这 一 重 要 因 素 的 研 究 因 此 本 文 的 目 的
导 数 和 微 分 的 概 念 导 数 的 几 何 意 义 和 物 理 意 义 函 数 的 可 导 性 与 连 续 性 之 间 的 关 系 平 面 曲 线 的 切 线 和 法 线 导 数 和 微 分 的 四 则 运 算 基 本 初 等 函 数 的 导 数 复 合 函 数 反 函 数 隐 函 数 以
2015 年 考 研 数 学 二 考 试 大 纲 考 试 科 目 : 高 等 数 学 线 性 代 数 考 试 形 式 和 试 卷 结 构 一 试 卷 满 分 及 考 试 时 间 试 卷 满 分 为 150 分, 考 试 时 间 为 180 分 钟. 二 答 题 方 式 答 题 方 式 为 闭 卷 笔 试. 三 试 卷 内 容 结 构 高 等 教 学 约 78% 线 性 代 数 约 22% 四 试 卷
( 四 ) 教 授 二 资 质 与 推 荐 ( 一 ) 实 行 教 师 资 质 管 理 的 国 家, 申 请 国 际 中 医 药 教 师 高 级 职 称 评 审 者, 必 须 具 有 所 在 国 教 育 部 认 定 的 教 师 资 格 ( 二 ) 没 有 实 行 教 师 资 质 管 理 的 国 家,
世 界 中 联 发 2011 10 号 国 际 中 医 药 教 师 职 称 考 试 ( 评 审 ) 实 施 方 案 ( 试 行 ) 根 据 需 求, 国 际 中 医 药 教 师 专 业 技 术 职 称, 暂 从 高 级 职 称 评 审 启 动 依 据 国 际 中 医 药 专 业 技 术 职 称 考 试 ( 评 审 ) 管 理 办 法, 制 定 本 实 施 方 案 一 级 别 设 置 国 际 中 医
张 琳 段 紫 英 耿 欣 李 克 刚 魏 宗 胡 颂 平 从 蛇 足 石 杉 的 培 养 组 织 中 分 离 内 生 真 菌 利 用 传 统 方 法 观 察 菌 落 的 外 观 形 态 对 照 真 菌 鉴 定 手 册 对 其 进 行 鉴 定 通 过 马 铃 薯 培 养 基 培 养 菌 体 通 过 三 点 接 种 分 区 划 线 的 方 法 进 行 分 离 纯 化 利 用 显 微 摄 影 的 技 术
2.5 选 举 陈 晓 非 女 士 为 第 六 届 董 事 会 董 事 候 选 人 的 议 案 ; 2.6 选 举 卢 婕 女 士 为 第 六 届 董 事 会 董 事 候 选 人 的 议 案 ; 2.7 选 举 张 文 君 先 生 为 第 六 届 董 事 会 独 立 董 事 候 选 人 的 议 案
证 券 代 码 :000982 证 券 简 称 : 中 银 绒 业 公 告 编 号 :2014-83 宁 夏 中 银 绒 业 股 份 有 限 公 司 董 事 会 关 于 召 开 2014 年 第 五 次 临 时 股 东 大 会 网 络 投 票 流 程 的 提 示 公 告 本 公 司 及 董 事 会 全 体 成 员 保 证 信 息 披 露 的 内 容 真 实 准 确 完 整, 没 有 虚 假 记 载
全国建筑市场注册执业人员不良行为记录认定标准（试行）.doc
- 1 - - 2 - 附 件 全 国 建 筑 市 场 注 册 执 业 人 员 不 良 记 录 认 定 标 准 ( 试 行 ) 说 明 为 了 完 善 建 筑 市 场 注 册 执 业 人 员 诚 信 体 系 建 设, 规 范 执 业 和 市 场 秩 序, 依 据 相 关 法 律 法 规 和 部 门 规 章, 根 据 各 行 业 特 点, 我 部 制 订 了 全 国 建 筑 市 场 注 册 执 业 人
其 中 :A 股 股 东 持 有 股 份 总 数 31,126,938,909 境 外 上 市 外 资 股 股 东 持 有 股 份 总 数 (H 股 ) 6,454,698,427 3 出 席 会 议 的 股 东 所 持 有 表 决 权 股 份 数 占 公 司 有 表 决 权 股 份 总 数 的 7
证 券 代 码 :601998 证 券 简 称 : 中 信 银 行 公 告 编 号 :2016-31 中 信 银 行 股 份 有 限 公 司 2015 年 年 度 股 东 大 会 2016 年 第 一 次 A 股 类 别 股 东 会 及 2016 年 第 一 次 H 股 类 别 股 东 会 决 议 公 告 本 公 司 董 事 会 及 全 体 董 事 保 证 本 公 告 内 容 不 存 在 任 何 虚