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1 多 肽 基 础 知 识 问 答 目 录 1. 什 么 是 多 肽? 2. 多 肽 的 来 源 有 哪 些? 3. 多 肽 的 保 存 应 该 注 意 的 因 素? 4. 多 肽 怎 样 溶 解? 5. 多 肽 的 纯 度 测 定 6. 多 肽 的 纯 度 和 多 肽 的 净 含 量 的 区 别? 7. 冻 干 粉 状 多 肽 除 了 净 含 量 外, 还 包 含 哪 些 物 质? 8. 多 肽 的 包 装 与 包 材 要 求 9. 多 肽 的 运 输 过 程 中 应 注 意 的 问 题? 10. 开 始 使 用 多 肽 时, 应 注 意 的 问 题 有 哪 些? 11. 多 肽 的 应 用 领 域 包 含 哪 些 方 面? 12. 多 肽 药 物 的 应 用 分 类 是 怎 样 的? 13. 我 公 司 多 肽 产 品 介 绍 及 适 应 症 1

2 1. 什 么 是 多 肽? 所 谓 肽 peptide, 它 是 分 子 结 构 介 于 氨 基 酸 和 蛋 白 质 之 间 的 一 类 化 合 物 它 由 氨 基 酸 构 成, 但 与 蛋 白 质 又 有 所 不 同, 属 于 它 们 之 间 的 中 间 物 质 氨 基 酸 能 够 彼 此 以 肽 键 相 互 连 接 的 化 合 物 称 作 肽 一 种 肽 含 有 的 氨 基 酸 少 于 10 个 就 被 称 为 寡 肽, 超 过 的 就 称 为 多 肽, 氨 基 酸 为 50 多 个 以 上 的 多 肽 称 为 蛋 白 质 蛋 白 质 是 人 体 内 最 重 要 的 调 控 物 质, 它 所 含 氨 基 酸 少 则 几 十 个, 多 可 达 上 万 个 我 们 所 指 的 多 肽 产 品 大 部 分 是 小 分 子 蛋 白 质, 为 方 便 起 见, 一 般 将 寡 肽 多 肽 和 小 分 子 蛋 白 质 等 生 物 制 品 统 称 为 多 肽 类 药 物 2. 多 肽 的 来 源 有 哪 些? 2.1 天 然 多 肽 : 一 般 可 分 为 植 物 来 源 动 物 和 微 生 物 来 源 植 物 源 多 肽 主 要 应 用 于 保 健 品, 比 如 大 豆 多 肽 人 参 多 肽 ; 动 物 源 多 肽 主 要 提 取 于 动 物 的 脏 器 丰 富 的 海 洋 微 生 物 等 资 源, 比 如 国 内 外 上 市 的 注 射 用 促 肝 细 胞 生 长 因 子 脑 苷 肌 肽 注 射 液 注 射 用 胸 腺 肽 等 均 为 富 含 动 物 源 多 肽 类 药 物, 广 泛 应 用 于 临 床 的 免 疫 抑 制 剂 环 孢 素 就 是 产 生 于 微 生 物 的 多 肽 2.2 酶 法 多 肽 : 酶 工 程 技 术 是 利 用 酶 的 催 化 作 用 进 行 的 物 质 转 换 技 术 酶 工 程 技 术 为 新 药 开 发 开 辟 了 新 的 途 径 采 用 酶 工 程 技 术 生 产 的 多 肽 药 物, 的 通 过 固 定 化 动 物 细 胞 得 以 高 效 率 低 成 本 地 生 产, 比 如 人 胰 岛 素 脑 蛋 白 水 解 物 注 射 液 注 射 用 促 肝 细 胞 生 长 因 子 2

3 脑 苷 肌 肽 注 射 液 注 射 用 胸 腺 肽 等 2.3 化 学 合 成 的 方 法 : 目 前 产 业 化 生 产 多 肽 的 主 流 方 法, 分 固 相 合 成 和 液 相 合 成 固 液 相 合 成 各 有 优 缺 点, 一 般 而 言, 液 相 适 合 于 合 成 短 肽, 固 相 适 合 于 中 长 肽 也 可 采 用 固 液 相 相 结 合 2.4 基 因 重 组 多 肽 3. 多 肽 的 保 存 应 该 注 意 的 因 素? 在 可 能 的 情 况 下, 应 该 将 多 肽 以 冻 干 粉 的 形 式 在 -20 下 保 存, 这 样 会 在 几 年 内 避 免 细 菌 的 降 解, 二 级 结 构 的 形 成 氧 化 或 其 他 修 饰 的 发 生 多 肽 在 溶 液 中 的 稳 定 性 要 差 一 些, 所 以 强 烈 建 议 使 用 灭 菌 水 或 灭 菌 过 滤 的 方 式 进 行 溶 解, 如 果 序 列 中 有 Cys Met 或 Trp 等 残 基, 用 无 氧 的 溶 剂 进 行 溶 解 以 避 免 氧 化 使 用 冷 冻 的 溶 液 时, 建 议 将 溶 液 进 行 分 装, 以 避 免 多 次 的 溶 解 和 冷 冻 对 多 肽 造 成 的 损 害 ph 的 推 荐 范 围 是 3-6 之 间 由 于 多 肽 具 备 吸 湿 性, 使 用 前 应 保 证 包 装 容 器 和 所 装 物 品 回 温 到 室 温, 以 避 免 吸 水 如 果 吸 水 将 会 降 低 其 稳 定 性 及 减 少 多 肽 含 量 称 量 多 肽 时 应 该 动 作 标 准 且 迅 速, 并 立 即 将 瓶 口 封 存 完 好 多 肽 溶 液 最 好 即 配 即 用, 使 用 过 程 中 将 肽 溶 液 保 持 在 低 温 但 不 结 冻 的 状 态 下 长 期 保 存 (3 个 月 以 上 ): 冻 干 粉, 在 -20 下 冷 冻 干 燥 保 存 ; 中 期 保 存 (0-3 个 月 ):-20 冷 冻 液 体 或 冻 干 粉 冷 藏 ; 短 期 保 存 (<1 周 ): 冷 藏 的 液 体 或 冻 干 粉 3

4 4. 多 肽 怎 样 溶 解? 由 于 多 肽 的 种 类 不 同, 溶 解 性 可 能 各 不 相 同, 最 通 常 的 溶 解 方 法 是 用 1ml 蒸 馏 水 溶 解 1mg 多 肽 多 肽 的 溶 解 与 多 肽 的 序 列 相 关, 首 先 试 蒸 馏 水 和 超 声 (1-10MG/ML) 如 果 不 溶, 计 算 肽 中 的 碱 性 残 基 (Lys,Arg,His 和 自 由 氨 基 端 ) 和 酸 性 残 基 (Glu,Asp 和 自 由 羧 基 端 ) 的 数 目 如 果 碱 性 基 团 偏 多, 可 以 滴 加 1N 的 醋 酸, 直 到 溶 解 为 止 ; 如 果 酸 性 基 团 居 多, 滴 加 1N 的 氨 水, 直 到 溶 解 为 止 如 果 在 实 验 中 需 要 用 缓 冲 液, 建 议 在 多 肽 完 全 溶 解 之 前 不 要 加 入 盐, 因 为 盐 会 使 肽 的 溶 解 度 降 低 如 果 上 述 溶 液 中 肽 都 不 溶, 可 以 试 试 用 少 量 有 机 溶 剂 如 DMSO, 乙 腈 或 DMF 附 加 : 多 肽 序 列 中 氨 基 酸 的 酸 碱 性 Basic: Arg (R), His (H), Lys (K) Nonpolar hydrophobic: Ala (A), Ile (I), Leu (L), Met (M), Phe (F), Pro (P), Trp (W), Val (V) Polar uncharged: Asn (N), Cys (C), Gly (G), Gln (Q), Ser (S), Thr (T), Tyr (Y) Acidic: Asp (D), Glu (E) 5. 多 肽 的 纯 度 测 定 多 肽 的 纯 度 是 通 过 HPLC 检 测, 用 每 分 钟 1% 的 标 准 乙 腈 梯 度 来 检 测 决 定 的 合 成 过 程 中, 氨 基 酸 之 间 的 交 联 效 率 不 是 总 能 达 到 100%, 因 而 产 生 一 系 列 的 氨 基 酸 缺 失 的 杂 质 大 多 数 这 样 的 氨 基 酸 缺 失 的 杂 质 在 纯 化 过 程 中 都 被 去 掉 了, 但 有 少 数 的 杂 质 其 色 谱 表 现 与 目 标 多 肽 很 相 近 这 些 氨 基 4

5 酸 缺 失 的 杂 质 肽 留 在 了 多 肽 样 品 中 就 构 成 了 余 下 的 几 个 百 分 点, 即 通 常 所 说 的 有 关 物 质 6. 多 肽 的 纯 度 和 多 肽 的 净 含 量 的 区 别? 不 能 将 肽 的 净 含 量 和 肽 的 纯 度 混 为 一 谈, 它 们 是 完 全 不 同 的 两 个 概 念 纯 度 通 常 是 由 HPLC 决 定 的 纯 度 定 义 的 是 多 肽 样 品 中 含 正 确 序 列 的 组 分 的 百 分 比, 而 肽 的 净 含 量 是 指 样 品 中 肽 类 物 质 相 对 于 总 物 质 所 占 的 百 分 比, 肽 的 净 含 量 通 常 是 用 氨 基 酸 组 分 分 析 或 紫 外 分 光 法 测 定 的 这 个 信 息 主 要 是 在 一 些 对 肽 的 浓 度 很 敏 感 的 实 验 中, 对 计 算 肽 的 浓 度 是 很 重 要 的 7. 冻 干 粉 状 多 肽 除 了 净 含 量 外, 还 包 含 哪 些 物 质? 冻 干 粉 状 多 肽 不 仅 仅 包 含 多 肽 净 含 量, 还 包 含 有 一 些 非 肽 的 组 份, 如 水 盐 和 被 吸 收 的 溶 剂 配 位 离 子 等 肽 的 净 含 量 是 指 肽 在 其 中 的 重 量 百 分 比, 这 个 百 分 比 的 数 值 范 围 很 大, 可 能 从 50% 到 90%, 取 决 于 纯 度 序 列 以 及 合 成 和 纯 化 的 方 法 8. 多 肽 的 包 装 与 包 材 要 求 多 数 情 况 下, 多 肽 应 包 装 在 密 闭 避 光 的 的 容 器 里, 贮 存 温 度 为 2~8 为 长 期 保 存, 应 置 于 -20 或 更 低 的 温 度, 以 保 证 最 大 稳 定 性 根 据 不 同 的 多 肽 品 种 的 产 品 特 性, 其 包 材 的 选 择 要 求 是 不 一 样 的 与 其 他 化 学 药 物 不 同, 多 肽 药 物 可 能 具 有 一 定 程 度 的 表 面 活 性, 有 与 直 接 接 触 药 品 的 包 装 材 料 和 容 器 发 生 吸 附 等 相 互 作 用 的 可 能, 从 而 引 起 制 5

6 剂 效 价 生 物 活 性 下 降 例 如 有 些 多 肽 分 子 能 够 与 玻 璃 表 面 的 硅 醇 基 发 生 相 互 作 用 因 此, 在 包 装 材 料 的 选 择 方 面 需 注 意 其 与 多 肽 药 物 相 互 作 用 的 研 究, 有 些 情 况 下 可 选 择 特 殊 处 理 后 的 包 装 容 器, 如 表 面 经 硅 烷 化 处 理 的 容 器 等 由 于 多 肽 具 有 吸 湿 性 的 特 点, 贮 存 时 需 要 保 证 包 装 的 密 封 性 隔 湿 性 比 如 比 伐 卢 定, 其 内 包 材 是 聚 乙 烯 材 质 的 多 层 聚 乙 烯 热 封 袋, 该 多 层 聚 乙 烯 热 封 袋 外 面 再 被 铝 箔 层 包 装 并 密 封, 铝 箔 层 密 封 能 起 到 整 个 包 装 不 透 气 的 隔 湿 保 护 作 用 针 对 易 吸 湿 的 多 肽, 也 会 要 求 在 内 包 装 密 封 完 好 后 与 特 定 的 干 燥 剂 一 起 存 放 在 外 包 装 容 器 内, 保 证 外 包 装 容 器 内 依 然 是 干 燥 的 环 境 9. 多 肽 的 运 输 过 程 中 应 注 意 的 问 题? 通 常 情 况 下, 包 装 是 以 多 肽 冻 干 粉 密 封 包 装 的, 可 以 保 存 在 室 温 中 而 不 受 损 害 在 运 输 中 也 会 采 用 冰 袋 来 保 持 运 输 中 的 温 度 控 制, 短 期 的 运 输 不 会 影 响 多 肽 的 有 效 期 和 质 量 客 户 在 收 到 产 品 后 请 立 即 冷 冻 保 存 10. 开 始 使 用 多 肽 时, 应 注 意 的 问 题 有 哪 些? 1 从 冷 冻 室 取 出 包 装 后, 应 置 于 室 温 中, 使 其 温 度 逐 渐 恢 复 到 室 温 状 态 2 打 开 包 装 之 前, 分 装 间 要 除 湿, 并 且 在 洁 净 的 分 装 环 境 中 迅 速 取 出 所 需 的 用 量 3 将 剩 余 的 多 肽 重 新 密 封 并 保 存 于 -20 以 下 的 冷 冻 室 内 11. 多 肽 的 应 用 领 域 包 含 哪 些 方 面? 6

7 多 肽 的 应 用 领 域 包 括 多 肽 类 药 物 食 品 工 业 ( 保 健 品 营 养 品 普 通 食 品 ) 化 妆 品 等 领 域 其 中, 应 用 于 多 肽 类 药 物 治 疗 领 域 的 最 多, 包 括 治 疗 糖 尿 病 高 血 压 骨 质 疏 松 症 免 疫 调 节 剂 子 宫 内 膜 异 位 症 前 列 腺 癌 内 分 泌 抗 早 产 及 产 后 出 血 抗 血 栓 多 发 性 硬 化 症 等 等 广 泛 应 用 于 食 品 工 业 中 的 多 肽 如 阿 巴 斯 甜, 一 种 低 热 量 的 食 品 调 味 剂 ; CPP 酪 蛋 白 磷 酸 肽 ( 也 称 作 促 钙 吸 收 肽 ), 抗 骨 质 疏 松 ; 大 豆 蛋 白 多 肽 具 备 降 脂 减 肥 提 高 运 动 机 能 ; 白 蛋 白 多 肽 具 有 提 高 免 疫 促 消 化 功 能 应 用 于 化 妆 品 的 多 肽 : 胶 原 多 肽 和 上 肢 生 长 因 子 (EGF), 胶 原 多 肽 是 对 皮 肤 有 抗 皱 保 湿 的 效 果,EGF 是 皮 肤 再 生 因 子, 都 是 化 妆 品 多 肽 的 优 秀 代 表 12. 多 肽 药 物 的 应 用 分 类 是 怎 样 的? 12.1 多 肽 疫 苗 12.2 抗 肿 瘤 多 肽 12.3 抗 病 毒 多 肽 12.4 多 肽 导 向 药 物 12.5 细 胞 因 子 模 拟 肽 12.6 抗 菌 性 活 性 肽 12.7 心 血 管 疾 病 的 多 肽 12.8 其 它 要 用 小 肽 12.9 诊 断 用 多 肽 7

8 13. 我 公 司 多 肽 产 品 介 绍 及 适 应 症 产 品 名 称 ( 中 文 英 文 ) 适 应 症 阿 托 西 班 Atosiban Acetate 临 床 主 要 用 于 预 防 和 治 疗 早 产 布 舍 瑞 林 临 床 主 要 应 用 于 治 疗 前 列 腺 癌, 乳 腺 癌, 子 宫 内 膜 异 位 症, 子 宫 肌 瘤 Buserelin Acetate 等 应 用 于 经 皮 冠 状 动 脉 成 型 术 PTCA 中 的 抗 凝 血 剂 和 经 皮 冠 状 动 脉 介 入 治 比 伐 卢 定 疗 PCI Bivalirudin Trifluoroacetate[DMF] 的 抗 凝 血 剂 临 床 主 要 应 用 于 老 年 骨 质 疏 松 症 绝 经 后 骨 质 疏 松 症 骨 折 变 形 性 鲑 降 钙 素 骨 Calcitonin(Salmon) 炎 高 钙 血 症 等 临 床 主 要 应 用 于 夜 间 遗 尿 症, 中 枢 性 尿 崩 症, 血 友 病 等 ; 也 用 于 肾 尿 去 氨 加 压 素 液 浓 缩 Desmopressin Acetate[DMF # 20752] 功 能 的 测 试 临 床 主 要 应 用 于 急 性 冠 脉 综 合 症 ( 不 稳 定 性 心 绞 痛, 非 Q 波 型 心 肌 梗 依 替 巴 肽 死 ) Eptifibatide Acetate[DMF] 冠 脉 内 介 入 治 疗 前 和 急 性 Q 波 型 心 肌 梗 死 临 床 应 用 于 评 估 糖 尿 病 患 者 胰 岛 β 细 胞 的 最 大 分 泌 情 况 ; 用 于 处 理 接 高 血 糖 素 受 胰 岛 素 治 疗 的 糖 尿 病 患 者 发 生 的 严 重 低 血 糖 反 应 ; 进 行 胃 肠 道 检 查 Glucagon(1-29)(Human)Hydrochloride 时 用 于 暂 时 抑 制 肠 道 蠕 动. 戈 舍 瑞 林 Goserelin Acetate 临 床 主 要 应 用 于 治 疗 前 列 腺 癌 乳 腺 癌 及 子 宫 内 膜 异 位 症 戈 那 瑞 林 用 于 诊 断 下 丘 脑 - 垂 体 - 性 腺 功 能 低 下 引 起 的 生 育 障 碍 和 其 它 内 分 泌 失 Gonadorelin Acetate 调 疾 病 临 床 主 要 用 于 治 疗 子 宫 内 膜 异 位 症 ; 伴 有 月 经 过 多 下 腹 痛 腰 痛 及 贫 血 等 子 宫 肌 瘤 ; 绝 经 前 乳 腺 癌, 且 雌 激 素 受 体 阳 性 患 者 ; 前 列 腺 癌 ; 中 枢 亮 丙 瑞 林 性 性 Leuprorelin\Leuprolide Acetate 早 熟 症 奥 曲 肽 临 床 主 要 用 于 治 疗 肢 端 肥 大 症, 类 癌 瘤 综 合 症,VIP 肿 瘤 ( 一 种 肠 血 管 Octreotide Acetate[DMF] 活 性 肽 的 肿 瘤 ) 等 缩 宫 素 临 床 主 要 用 于 引 产 催 产 产 后 及 流 产 后 因 宫 缩 无 力 或 缩 复 不 良 而 引 Oxytocin Acetate[DMF] 起 的 子 宫 出 血 ; 了 解 胎 盘 贮 备 功 能 ( 催 产 素 激 惹 试 验 ) 临 床 主 要 用 于 严 重 急 性 食 道 静 脉 曲 张 出 血, 严 重 急 性 胃 出 血 或 十 二 指 肠 溃 疡 出 血, 并 发 性 急 性 糜 烂 性 胃 炎 或 出 血 性 胃 炎, 胰 胆 和 肠 瘘 的 生 长 抑 素 辅 助 治 疗, 胰 腺 手 术 后 并 发 症 的 预 防 和 治 疗, 糖 尿 病 酮 症 酸 中 毒 的 辅 Somatostatin Acetate 助 治 疗 胸 腺 五 肽 临 床 主 要 用 于 重 度 急 性 肝 炎 患 者 的 治 疗, 严 重 感 染 及 外 科 手 术 感 染, Thymopentin 恶 性 肿 瘤 的 辅 助 治 疗 及 各 种 免 疫 功 能 低 下 的 疾 病 的 治 疗 8

9 临 床 主 要 用 于 慢 性 乙 型 肝 炎 或 慢 性 丙 型 肝 炎 的 治 疗, 作 为 免 疫 损 害 患 胸 腺 肽 α1 者 的 疫 苗 Thymosin α1[dmf] 佐 剂 曲 普 瑞 林 临 床 主 要 用 于 治 疗 激 素 依 赖 性 前 列 腺 癌 子 宫 内 膜 异 位 症 及 子 宫 肌 瘤 Triptorelin Acetate 等 卡 贝 缩 宫 素 Carbetocin Acetate 临 床 应 用 于 控 制 产 后 出 血 普 兰 林 肽 Pramlintide Acetate[DMF] 临 床 应 用 于 1 型 和 2 型 糖 尿 病 艾 塞 那 肽 Exenatide Acetate 临 床 应 用 于 2 型 糖 尿 病 特 立 帕 肽 Teriparatide Acetate 临 床 主 要 用 于 治 疗 骨 质 疏 松 症 格 拉 替 雷 Glatiramer Acetate 临 床 应 用 于 治 疗 多 发 性 硬 化 症 特 利 加 压 素 临 床 应 用 于 脓 毒 性 ( 感 染 性 ) 休 克 肝 肾 综 合 症 急 性 静 脉 曲 张 性 出 血 Terlipressin Acetate ( 食 道 血 管 曲 张 ). 9

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i i i ii 1 2 3 4 % N) 5 50.0 AMINO ACID #64 [modified by Administrator] IntAmp_1 nc 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0-10.0 1 - ala - 10.483 2 - thr - 11.107 3 - gly - 11.872 4 - val - 13.458 5 - ser - 14.903 6 - pro

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