fried granules group Less than normal control group on TNF-α, IL-1β in synovial fluid (P<0.01):There was no group and normal control group on TNF-α, I

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1 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 对 急 性 痛 风 模 型 炎 症 因 子 的 调 节 作 用 谢 建 祥 1 黄 敏 1 黄 国 栋 2 摘 要 目 的 探 讨 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 治 疗 急 性 痛 风 性 关 节 炎 的 作 用 机 制 方 法 对 兔 造 急 性 痛 风 性 关 节 炎, 观 察 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 对 兔 痛 风 性 关 节 炎 模 型 关 节 液 中 TNF α, IL 1β 的 影 响, 并 与 模 型 组 西 药 组 和 正 常 组 进 行 对 比 结 果 模 型 组 关 节 液 中 TNF α IL 1β 含 量 明 显 高 于 正 常 组 (P<0.01), 白 艾 痛 风 灵 中 药 组 和 秋 水 仙 碱 西 药 组 TNF α IL 1β 的 含 量 明 显 低 于 模 型 组 (P<0.01): 白 艾 痛 风 灵 中 药 组 和 秋 水 仙 碱 西 药 组 TNF α IL 1β 的 含 量 与 正 常 组 比 较 无 明 显 差 异 结 论 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 对 急 性 痛 风 性 关 节 炎 具 有 一 定 的 治 疗 作 用 关 键 词 急 性 痛 风 性 关 节 炎 : 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 :TNF α:il 1β: 实 验 研 究 Bai Ai Tongfeng Lin avoid fried granules on regulation of inflammatory cytokines in model of acute gout Xie Jian-xiang 1 Huang Min 2 Huang Guo-dong 3 Abstract:Objective:To investigate the effects and mechanism of Bai Ai Tongfeng Lin avoid fried granules on treatment of acute gouty arthritis.methods:to establish acute gouty arthritis rabbits models.to observe the effects and mechanism of Bai Ai Tongfeng Lin avoid fried granules on the expression of TNF-α IL-1β in acute gouty arthritis rabbits,compared with the normal control group model control group Colchicine group and Bai Ai Tongfeng Lin avoid fried granules group.results:model control group were significantly higher than normal control group on TNF-α, IL-1β in synovial fluid(p<0.01),colchicine group and Bai Ai Tongfeng Lin avoid 作 者 单 位 :1. 江 西 省 儿 童 医 院 ( 南 昌 ):2. 南 昌 大 学 第 一 附 属 医 院 中 西 医 结 合 科 ( 南 昌 ) 作 者 简 介 : 谢 建 祥 (1953 ), 男, 主 任 医 师. 硕 士 生 导 师. 主 攻 方 向 为 风 湿 病 的 研 究, 电 子 邮 箱

2 fried granules group Less than normal control group on TNF-α, IL-1β in synovial fluid (P<0.01):There was no group and normal control group on TNF-α, IL-1β in synovial fluid.conclusion:bai Ai Tongfeng Lin avoid fried granules on acute gouty arthritis had a well therapeutic effect Key words:bai Ai Tongfeng Lin avoid fried granules:tnf-α:il-1β:experimental study 痛 风 是 由 于 遗 传 性 或 获 得 性 病 因 导 致 嘌 呤 代 谢 紊 乱 和 ( 或 ) 尿 酸 排 泄 减 少 所 引 起 的 一 组 疾 病, 急 性 痛 风 性 关 节 炎 是 其 最 常 见 的 首 发 症 状 近 年 来 随 着 人 民 生 活 水 平 的 提 高, 嘌 呤 类 食 物 摄 入 的 增 多, 痛 风 的 发 病 率 逐 年 升 高 临 床 上 笔 者 应 用 自 拟 处 方 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 治 疗 痛 风 取 得 了 显 著 的 疗 效 [1], 动 物 实 验 也 证 实 其 处 方 中 白 艾 能 显 著 地 降 低 高 尿 酸 的 作 用 [2], 本 实 验 就 其 对 急 性 痛 风 模 型 兔 炎 模 型 关 节 液 中 炎 性 细 胞 因 子 TNF α IL 1β 的 影 响 开 展 研 究, 探 讨 该 方 的 抗 痛 风 机 理 1 材 料 与 方 法 1.1 实 验 动 物 实 验 动 物 为 5 8 月 龄 新 西 兰 大 白 兔 32 只, 皆 为 雄 性 体 重 为 2 2.5kg, 由 江 西 医 学 院 医 学 实 验 动 物 中 心 提 供 1.2 实 验 药 品 中 药 组 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 ( 本 院 委 托 三 九 胃 泰 公 司 生 产 ), 各 药 混 匀 后 加 入 沸 水, 制 成 1g/ml(100%) 的 溶 液 后 冷 却 备 用 西 药 组 用 秋 水 仙 碱 ( 云 南 吴 邦 制 药 有 限 公 司 生 产, 批 号 :090410), 用 注 射 用 水 配 制 成 10% 的 溶 液 备 用 1.3 试 剂 及 设 备 1 尿 酸 钠 溶 液 的 制 备 尿 酸 钠 晶 体 (MUS)( 购 于 北 京 化 学 试 剂 公 司, 由 SIGMA CHEMICAL CO 生 产, 批 号 :090405), 取 2500mg 尿 酸 钠 结 晶 颗 粒 加 入 100ml 0.9% 氯 化 钠 注 射 液, 加 温 搅 拌 制 成 浓 度 为 25mg/ml 的 尿 酸 钠 溶 液 备 用,2TNF α IL 1β 试 剂 盒 ( 购 于 北 京 经 纬 博 恒 生 物 科 技 开 发 有 限 责 任 公 司, 批 号 :090424), 3 SN 695 智 能 放 免 γ 测 量 仪 ( 上 海 原 子 能 研 究 所 日 环 仪 器 一 厂 ),4 其 余 相 关 设 备 由 南 昌 大 学 第 一 附 属 医 院 提 供 1.4 实 验 动 物 的 饮 食 各 组 家 兔 在 相 同 条 件 下 自 由 摄 水 饮 食, 饲 料 由 江 西 医 学 院 医 学 实 验 动 物 中 心 提 供, 主 要 成 分 有 青 稞 豆 饼 米 糠 等 1.5 实 验 动 物 的 分 组 将 32 只 新 西 兰 大 白 兔 按 随 机 分 组 法 分 为 4 组, 分 别 为 白 艾 痛 风 灵 中 药 组 ( 简 称 中 药 组 ) 秋 水 仙 碱 西 药 组 ( 简 称 秋 水 仙 碱 组 ) 模 型 组

3 正 常 组, 每 组 8 只 1.6 造 模 方 法 造 模 方 法 按 照 McCarty,DJ 经 典 造 模 方 法 [3], 用 20% 乌 拉 坦 ( 按 5m/kg) 从 耳 缘 静 脉 注 入 将 兔 麻 醉, 双 侧 膝 关 节 周 围 剃 毛, 消 毒 皮 肤, 轻 弯 曲 膝 关 节, 于 关 节 正 中 或 侧 位 进 针, 用 6 号 注 射 针 将 尿 酸 钠 溶 液 0.5ml 通 过 髌 上 韧 带 注 入 兔 膝 关 节 腔, 造 成 急 性 痛 风 性 关 节 炎 病 理 模 型 1.7 实 验 步 骤 32 只 兔 正 常 饲 养 1 周 后, 正 常 组 常 规 饲 养, 不 作 处 理 ; 中 药 组 秋 水 仙 碱 组 模 型 组 均 按 上 述 方 法 造 模, 造 模 成 功 后 分 别 予 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 秋 水 仙 碱 0.9% 氯 化 钠 注 射 液 灌 胃,7d 后 应 用 放 免 法 检 测 膝 关 节 积 液 中 TNF α 和 IL 1β 水 平 参 照 实 验 动 物 学 [4], 根 据 人 用 药 量 与 实 验 动 物 用 药 量 的 换 算 公 式 计 算 出 每 只 兔 每 次 灌 中 药 量 3.85g/kg.d, 西 药 量 0.093mg/kg.d, 7d 后 取 材 取 材 方 法 : 从 兔 耳 缘 静 脉 注 射 20% 乌 拉 坦 (5ml/kg) 深 度 麻 醉 后 ( 不 同 个 体 对 麻 醉 药 量 耐 受 性 不 同, 适 量 加 减 ), 将 其 固 定 于 操 作 台 上, 立 即 切 取 各 组 兔 的 右 侧 膝 关 节 ( 胫 腓 骨 上 1/3 至 股 骨 下 1/3 骨 段, 去 除 关 节 周 围 的 肌 肉 等 硬 组 织, 保 留 完 整 的 关 节 囊 ), 切 开 膝 关 节 囊, 用 1ml 0.9% 氯 化 钠 注 射 液 灌 洗 膝 关 节 腔, 收 集 关 节 液, 然 后 以 锐 利 刀 片 取 少 量 关 节 囊 滑 膜 等 组 织 一 并 离 心 (5000r)10min, 取 上 清 液 分 装 于 EPPENDROF 管 中, 于 20 保 存 待 检 测, 将 兔 处 死 1.8 观 测 指 标 1 放 免 法 检 测 TNF α: 采 用 液 相 竞 争 法 方 法, 参 照 试 剂 盒 说 明 书, 以 N/T B/T 计 算 NSB SO 结 合 百 分 率, 以 B/BO 计 算 标 准 及 待 测 物 结 合 百 分 率, 由 γ 测 量 仪 直 接 读 出 结 果 2 放 免 法 检 测 IL 1β: 采 用 平 衡 法, 以 N/T B/T 计 算 NSB SO 结 合 百 分 率, 以 B/BO 计 算 标 准 及 待 测 物 结 合 百 分 率, 由 γ 测 量 仪 直 接 读 出 结 果 1.9 统 计 学 处 理 采 用 SPSS17.0 软 件 包 对 数 据 进 行 统 计 分 析, 计 量 资 料 以 均 数 ± 标 准 差 ( x ±s) 表 示, 组 间 比 较 经 方 差 齐 性 分 析 后 采 用 成 组 设 计 的 t 检 验, P<0.05 认 为 差 异 有 统 计 学 意 义 2 结 果 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 对 兔 痛 风 性 关 节 炎 模 型 关 节 液 TNF α IL 1β 的 含 量 的 影 响 结 果 见 表 1 模 型 组 关 节 液 中 TNF α IL 1β 含 量 明 显 高 于 正 常 组 (P<0.01), 白 艾 痛 风 灵 中 药 组 和 秋 水 仙 碱 西 药 组 TNF α IL 1β 的 含 量 明 显 低 于 模 型 组 (P <0.01): 白 艾 痛 风 灵 中 药 组 秋 水 仙 碱 西 药 组 TNF α IL 1β 的 含 量 与 正 常 组 对

4 照 组 比 较 无 明 显 差 异 组 别 n TNF α IL 1β 正 常 组 对 照 组 士 士 0.27 模 型 组 对 照 组 士 1.87 # 1.97 士 0.15 # 秋 水 仙 碱 西 药 组 士 0.33 * 1.13 士 0.54 * 白 艾 痛 风 灵 中 药 组 士 1.41 * 0.75 士 0.34 * 注 : 与 正 常 组 对 照 组 比 较,#P<0.01: 与 模 型 组 对 照 组 比 较,*P<0.01: 白 艾 痛 风 灵 中 药 组 秋 水 仙 碱 西 药 组 与 正 常 组 对 照 组 之 间 比 较, P>0.05, 无 统 计 学 差 异 3 讨 论 急 性 痛 风 性 关 节 炎 发 病 机 制 为 沉 积 在 关 节 腔 中 的 尿 酸 盐 结 晶 ( MSU) 被 吞 噬 细 胞 白 细 胞 吞 噬 后, 破 坏 细 胞 的 溶 酶 体 等 细 胞 器, 释 放 出 蛋 白 水 解 酶 激 肤 组 胺 趋 化 因 子 等 物 质, 引 起 局 部 血 管 扩 张 和 通 透 性 增 加 血 浆 渗 出 白 细 胞 聚 集 等 炎 症 反 应, 促 使 炎 症 细 胞 释 放 白 细 胞 介 素 肿 瘤 坏 死 因 子 等 细 胞 因 子, 激 活 环 氧 化 酶 2(COX2) 合 成 前 列 素 类, 导 致 炎 症 范 进 一 步 的 扩 大, 进 而 发 生 急 性 痛 风 性 关 节 炎 总 的 来 讲 尿 酸 盐 在 滑 膜 组 织 沉 积 并 引 起 炎 症 介 质 释 放 是 急 性 痛 风 发 作 的 基 础,PGE2 白 细 胞 三 烯 B4(LTB 4) IL 1 IL 6 IL 8 TNF α 等 是 参 与 炎 症 过 程 的 重 要 因 素 [5,6] 本 实 验 研 究 发 现, 急 性 痛 风 模 型 正 常 组 关 节 液 TNF α IL 1β 的 含 量 基 本 正 常, 模 型 组 关 节 液 TNF α IL 1β 的 含 量 异 常 升 高, 提 示 关 节 炎 滑 膜 炎 症 反 应 剧 烈 在 中 医 方 面 认 为 急 性 痛 风 性 关 节 炎 基 本 病 机 是 痰 湿 瘀 血 阻 滞 经 络, 日 久 郁 而 化 热, 湿 热 浊 毒, 瘀 滞 血 脉, 痹 阻 关 节 白 艾 痛 风 灵 针 对 上 述 病 机 特 点, 采 用 湿 泄 浊 清 热 解 毒 消 肿 散 结 通 络 止 痛 故 方 中 选 白 艾 血 竭 三 七 为 君 药, 白 艾 又 名 鼠 曲 草, 为 菊 科 植 物 鼠 曲 草 的 全 草, 性 味 甘 平, 具 有 祛 风 化 痰 泻 浊 功 效, 用 于 筋 骨 疼 痛 痈 疡 等 [7] ; 血 竭 味 甘 咸 性 平, 内 服 散 瘀 止 血 止 痛 ; 三 七 味 甘 微 苦 性 温, 长 于 散 瘀 止 血, 消 肿 定 痛 : 黄 柏 车 前 草 为 臣 药, 可 清 热 解 毒 利 尿 通 淋 : 秦 艽 青 风 藤 僵 蚕 等 有 祛 风 湿 止 痹 痛 之 功 全 方 紧 扣 病 机, 共 奏 利 湿 泄 浊 清 热 解 毒 消 肿 散 结 通 络 止 痛 之 功 现 代 药 理 研 究 证 明 : 白 艾 能 显 著 地 降 低 高 尿 酸 的 作 用 具 有 良 好 [2] 前 期 临 床 疗 效 证 实, 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 治 疗 急 性 痛 风 性 关 节 炎 见 效 快 药 效 强, 疗 效 与 秋 水 仙 碱 相 当, 且 具 有 降 尿 酸 作 用,

5 关 键 在 于 胃 肠 道 反 应 等 不 良 反 应 少, 与 西 药 相 比 有 明 显 的 优 势, 适 合 长 期 服 用 [1] 本 实 验 研 究 发 现, 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 对 兔 痛 风 性 关 节 炎 模 型 关 节 液 TNF α IL 1β 的 水 平 有 明 显 下 调 作 用, 由 此 推 测 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 在 消 除 炎 症 因 子 方 面 有 一 定 的 作 用 总 之, 白 艾 痛 风 灵 对 兔 痛 风 性 关 节 炎 发 挥 作 用 的 机 制 之 一, 可 能 与 其 降 低 TNF α IL 1β 的 水 平 起 到 抗 炎 作 用 有 关 参 考 文 献 [1]. 舒 小 妹, 谢 建 祥,. 白 艾 痛 风 灵 免 煎 颗 粒 剂 治 疗 急 性 痛 风 性 关 节 炎 30 例 [J]. 实 用 临 床 医 学,2008,9(6): [2]. 林 伟 青, 谢 建 祥, 王 海 东. 白 艾 提 取 液 对 高 尿 酸 血 症 大 鼠 的 实 验 研 究 [J]. 中 华 风 湿 病 学 杂 志,2005,9(8): [3].Terkeltaub R.Pathogenesis and treatment of crystal-induced infammation.in: MccartyDJ,KoopmanW J,eds:Arthritisand applied conditions Philadelphia: lea&febiger USA,1993,36: [4]. 郝 光 荣. 实 验 动 物 学 [M]. 第 2 版. 上 海 : 第 二 军 医 大 学 出 版 社,2004:261. [5].Birrell G L,McQueen D S,Iggo A,et al. PGI2-induced activation and sensization of articular mechanonociceptors[j].neurosci Lett, 1991, 124 :5-8. [6]. Dinarello CA. Biologic basis for interleukin-1 in disease[j].blood,1996,87(6): [7]. 江 苏 新 医 学 院. 中 药 大 辞 典 [M]. 上 海 : 上 海 科 学 技 术 出 版 社 2004 :

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