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夯萨克达
7 years ago
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1 动物学杂志 $ ) $+ - $ $ 0 +$ $ $) $$ 白鹤冷冻精液人工授精实验 $ 张敬周军英赵锡森刘玉平北京动物园北京$ $ 中国动物园协会北京$) ) ) / +$) 的冷冻摘要$ 为了探索鹤类精液冷冻保存和使用技术 ) 0 年进行了白鹤 O 家禽精液稀释液作为白鹤精液稀释液 $k 的二甲基亚砜精液保存及人工授精实验使用 Y +e\ 为冷冻液精液样本冷冻经过三个阶段的降温最后保存在液氮中成功保存了编号 )$ 解冻后白鹤精液精子活率雄性白鹤精液 ) 支h < 支冷冻精液在 i冰水中解冻 ) 0 < 为 h)k p$0h0k $ n$ 和 0 年分别为 $$ 号雌鹤产的两窝卵进行人工授精实验年共产卵 0 枚其中 $ 枚卵受精并成功孵化实验发现在雌鹤产卵前一周和产卵期间每天输精并增加每次输精量同时在每产完 $ 枚卵后内完成一次输精效果最佳关键词冷冻精液稀释液冷冻液精子活率白鹤 ))$ 0 0 中图分类号P文献标识码Q文章编号0 : $ O / / /< R )D = / / / - 0 ) R / 0 RSQ5V[ RS][ G Z $ RSQX \ W]ZG b $/ $/$ $ $ + $ - / +O+ 9 $ $/$) $+ : $ $ : < G G < < J J A E J J J J < < \ E : O ) ) / +$) A JG J Y R <) 0T < \ E : A J J J E J < A G J GE ^G < 9 < < h < < A 9 < A A J Q- < TY b G \ < = J A G J U J G J S h/ J < G ) < < W ) Bb A J J A J G J G < < J < JG $k J < G J +e\ \ < A J G J )h p$h$ < G< J A J$k G< J G J G J +e\ J J G J G A < +e\a JJ J < G gi A A < JT G A ^G E J A +e\ $0 < gi T < A G h < GE 9 < A B ^G J A < G $ g gi g g g/i g/ g g$i9 < A A J gi A ) g0 < J < A G J < << J A T < A A h)k p$0h0k $ n$ < \ E : A < A JG J J JG J A < $ /D$ < 第一作者介绍张敬女高级畜牧师研究方向$鸟类饲养繁殖和保护教育 = $ $0 修回日期$ $ $ 收稿日期$ $

$枚卵受精并成功孵化实验发现在雌鹤产卵前一周和产卵期间每天输精并增加每次输精量同时在每产完 $ 枚卵后内完成一次输精效果最佳关键词冷冻精液稀释液冷冻液精子活率白鹤 ))$ 0 0 中图分类号P文献标识码Q文章编号0 : $ O / / /< R )D = / / / - 0 ) R / 0 RSQ5V[ RS][ G Z $ RSQX \$

2 ) $ ) $+ - 动物学杂志卷 G G G ^G A G G < BG < JG Q < E < A JG J A G J 0 A J < J A J B A G G E J < < ) < = $ 9 < = J 9 G f < \ E : O ) ) / +$) $ 年第一次对鹤进行了人工授精作为的只白鹤雌鹤与雄鹤隔笼单独饲养雌鹤一门实用的繁殖技术人工授精已经应用于鹤产卵规律雄鹤编号 )$ $$ 年出生雌 $ $$ 类繁殖和提高受精率 = 鹤编号 $$ $ 年出生雄鹤和输精的雌 )/+ )9 : ) 的精年首次成功将鸡 O+ 鹤均身体健康处于繁殖年龄北京动物园的 $$ 从液进行了低温保存 \ 笼养白鹤每年月开始繁殖白鹤窝卵数为此在多种鸟类中利用低温保存精液进行人工枚产卵间隔一般为 ) J 如果雌鹤产的第 $ 冷冻保存授精获得了成功 V 一窝卵被拿出间隔 $ J 后一般还会产的鸟类精液可以在需要时随时解冻使用还下第二窝卵卵孵化期为 J 可在国内和国际间交换用以防止近亲繁殖 A 精液稀释液的配置低温保存鹤类精液保持笼养个体的基因多样性所以精液的冷冻家禽精液稀释液只要将稀时使用 Y 保存对于开展远距离的人工授精和保存优质基释液的 S与渗透压做相应的调整就可以用因有重要的意义张雁云于不同种鹤精液的冷冻保存 = 鹤类精液冷冻时需要使用鹤类精液稀释 $ 使用冰点渗透压仪测得白鹤精液渗透液冷冻液精液按照一定的步骤经过低温处 < W) Bb 将 Y 家禽压为) < 理后长久保存在液氮中使用冷冻精液人工 $ 精液稀释液 S调整为 h/ V 授精时需要将精液解冻后尽快完成输精由 < W) Bb 作为冷渗透压调整为 ) < 于在冷冻过程中有 0k k的精子损失所冻保存白鹤精液的稀释液以用冷冻精液输精时与使用鲜精液输精不同 E 精液采集和短期保存使用按摩法采集为了提高卵的受精率一般输入相当于 )$ 号雄性白鹤精液采集到的精液用白鹤 $ 虽然解冻倍鲜精液输精量 = 精液稀释液进行 h h 倍稀释移到冻存后精子活率是评估冷冻精液质量的指标但与管内密封记录于 i 冰水中暂时保存鲜精输精一样检验冷冻精液人工授精成功与 ) < 之内在实验室进行活率和密度检测否的最可靠依据还是卵的受精率 $ 年国 J 精液的冷冻保存白鹤精液冷冻保存参 )A 的冷冻精液内首次将笼养白枕鹤 O 考了鹤类基金会使用的鹤类精液冷冻保存方法用于人工授精获得成功张玲等 $ = $ 将需冷冻保存的精液于为了探索鹤类精液冷冻保存和使用技术 i 加入稀释后精液量一半体积的冷冻液 ) 0 年采集了白鹤 O ) / +$) - $k 的二甲基亚砜 J < G J 精液进行冷冻保存筛选了合适的稀释液冷 +e\ i 平衡 $0 < 平衡后检测活冻液和冷冻仪器用白鹤冷冻精液进行人工授力并记录之后分装在冻存管中进行冷冻保精得到 $ 枚受精卵成功繁殖白鹤 $ 只存 h < 支研究对象和方法研究对象研究对象为北京动物园饲养冷冻过程需要三步$ 使用程序降温盒 5QWV=5= : $i 9 : : 5 0$ g$ 和一台索尼 g i 低温冰箱

在多种鸟类中利用低温保存精液进行人工枚产卵间隔一般为 ) J 如果雌鹤产的第 $ 冷冻保存授精获得了成功 V 一窝卵被拿出间隔 $ J 后一般还会产的鸟类精液可以在需要时随时解冻使用还下第二窝卵卵孵化期为 J 可在国内和国际间交换用以防止近亲繁殖 A 精液稀释液的配置低温保存鹤类

3 期张敬等$白鹤冷冻精液人工授精实验 ) 完成 gi 的降温过程将装有待冻精液 / < 后加入 $ 0k 苯胺黑溶液的冻存管放入程序降温盒中一同放入 gi 用盖玻片拉成薄层用吹风机吹干在显微镜低温冰箱中用探头式电子温湿度计下观察计数透明的为活精子染红的为死精 =TS0 监测盒中温度下降过程 $i < 匀子精子活率 n 活精子总数精子总数速降温利用液氮完成 g g/i的降温过 q$k <的塑程将冻存管迅速放在距液氮面约 0 卵的孵化和受精卵的确定 $$ 号雌降温速度平均料架子上保持 $ < 鹤产卵后尽快取出将卵换入自然孵卵的其 0i < 此过程用探头式低温温度计检测温他雌鹤腹下孵卵 $0 J 后再将卵取出放入孵度此处的温度约为 ghi 将冻存管直接卵机内孵育直到出雏孵卵过程中的第 $ 浸入液氮进行 g/ g$i 的降温最终在天和第天进行验卵可以确定卵是否受精液氮中将冻存管放在事先做好标记的套管中受精卵在孵育 ) J 以后照卵时透过卵壳隐约转移到盛有液氮的储存罐中保存可见蛛网状血管网从中心点辐射开来随着胚冷冻精液的解冻和输精进行人工授精胎的发育血管增大延卵黄周围蔓延白鹤时将存放精液的冻存管从液氮罐中取出浸卵壳较厚照卵时无法看到卵中的胚胎在孵待精液融化后取出冻存入冰水中 ) 0 < 卵过程中的第 $ 天和第天通过观察卵的晃管将精液吸入 $ <注射器中立即进行人工输动验卵在孵育 $ J 以后平放在桌面上可以 $ 年 $$ 号雌鹤产精 = 观察到卵微微晃动孵育 J 后可以观察到卵期间每天解冻冷冻精液输精 $ 次如果雌卵明显晃动孵卵时间超过白鹤孵卵期 ) J 鹤产卵则在产卵后内完成 $ 次输精每未见晃动的卵打开卵壳也可以确定卵是否受次输入 $ 支冷冻精液 0 年雌鹤产卵期精雏鹤孵化出壳后进行人工养育间每两天输精 $ 次若雌鹤产卵则在产卵后内完成 $ 次输精每次输入 $ 支冷冻精 A 结果液在每次输精之前操作人员先捕捉雌鹤用 A 白鹤精液品质 ) 年和年共采手触摸雌鹤腹部检查当天是否即将产卵若集 )$ 号雄性白鹤精液 $0 次精液质量好通过触摸判断雌鹤很快产卵则等这枚卵产下呈乳白色黏稠状平均采精量h$ ph < 以后再做冷冻输精 / < 精子活率精子密度 h$ ph q$ 个用按摩法给雌鹤输精将已吸入 $ <解 //k p )hk $ n $0 精液渗透压冻后精液的玻璃注射器轻轻地插入雌鹤泄殖 ) < < W) Bb 腔在左侧壁探寻找到一个较松软的开口部 AA精液解冻和输精冷冻保存了 )$ 号位即为输卵管开口将注射器轻轻插入开雄性白鹤精液 ) 支h < 支解冻输精 $ 口推入注射器内的精液次表 $ 解冻后精液中精子活率 h)k p Q精子的密度及活率检测方法实验室中 $0h0k $ n$ 年 $$ 号雌鹤产卵用盐水杀死精子取稀释后的白鹤精液枚产卵期间每天解冻输精 $ 次输精量在倍显微镜观察计数记录结果计算出精 h$ ph$ < 次 $ n 其中 $ 枚卵受 < n 稀释后精子密度精子密度个精 0 年 $$ 号雌鹤产卵 ) 枚产卵期间 h q稀释倍数稀释倍数液中的精子数每 J 解冻输精 $ 次输精量 h p n鹤类精液稀释液量精液量 h$ < 次 $ n ) 枚卵均未受精染色法检使用伊红苯胺黑雌鹤 $$ 产卵比较规律每窝产枚 $ $ 载玻片上放测精子活力 = 卵两窝卵之间间隔 $ J 年雌鹤溶液混合精液与的 0k 伊红月日和 0 日产一窝卵在此之前一周到产

此过程用探头式低温温度计检测温他雌鹤腹下孵卵 $0 J 后再将卵取出放入孵度此处的温度约为 ghi 将冻存管直接卵机内孵育直到出雏孵卵过程中的第 $ 浸入液氮进行 g/ g$i 的降温最终在天和第天进行验卵可以确定卵是否受精液氮中将冻存管放在事先做好标记的套管中

4 )/ $ ) $+ - 动物学杂志卷表 bax 号雌性白鹤冷冻精液输精统计表 + : $ / / /) T / / /$ / 卵期间使用冷冻精液输精每天解冻输精 $ O$ / 的 $ 枚受精卵是在最后一次鲜次且在雌鹤每产完 $ 枚卵后内完成一次精稀释输精后的第 $ 天产下的这说明黑颈输精同时增加每次输精量输入支或支鹤精子在雌鹤输卵管中至少可以存活 $ J 以上的冷冻精液量枚卵中月 0 日所产的经实验证明鸟类精液经冷冻后精子活率第枚卵受精此枚卵经孵化后顺利出雏雏下降存活时间也缩短家鸡精液解冻后平均鹤 0$ 号经过人工养育成活就开始下活率为 0k 解冻后精子活率 0 < 0 年雌鹤产卵之前一周到月 $ 日下降明显 $ $h0 精子全部死亡降 < 月日和 0 月日所产的 ) 枚卵期间每天李世英等 $0 V 等 $ 认为使用鹤输精 $ 次雌鹤每产完 $ 枚卵后内完成 $ 类解冻精液进行人工授精时要得到理想的受次输精每次输入 $ 支冷冻精液结果 0 精率每次授精至少要输入 $0 年产的 ) 枚卵均未受精个精子白枕鹤精液冷冻后精子活率 )k左 E 讨论右为提高卵受精率研究人员建议在产完第 $ 枚卵后可进行早晚两次输精张玲等 $ E 冷冻精液与鹤卵的受精精子被输入到我们进行白鹤冷冻精液实验解冻后精子平雌鹤输卵管后在那里能够存活一段时间通均活率为 h)k 从实验结果看产卵期间每过实验发现家鸡一次交配后个体单独饲养观天输精增加每次输精量弥补精液冷冻过程 +/ 察最长受精日期为 )0 J 火鸡中精子的损失同时在最佳时机输精即在雌在一次交配后的第天尚可产出受 /+ +A 鹤产完一枚卵后内尽早完成输精是今后精卵郑光美 $0 鹤类精子在雌鹤输卵管白鹤冷冻精液输精的首选方法中也能存活较长时间年我们得到黑颈鹤致谢感谢北京师范大学张雁云教授北京动

$h0 精子全部死亡降 < 月日和 0 月日所产的 ) 枚卵期间每天李世英等 $0 V 等 $ 认为使用鹤输精 $ 次雌鹤每产完 $ 枚卵后内完成 $ 类解冻精液进行人工授精时要得到理想的受次输精每次输入 $ 支冷冻精液结果 0 精率每次授精至少要输入 $0 年产的 ) 枚卵均未受精个精子白枕鹤精液冷冻后精子活率

5 期张敬等$白鹤冷冻精液人工授精实验 ) 物园张金国副园长张恩权副科长刘斌副队长 \ : \ S J = U : J : V$$M E 以及杨明海刘赫王志坚对本研究的支持与 < B GJ G < J b G \ ) $ 0 g0 帮助李世英李焕玲胡松庭等$0鸡精液冷冻技术研究山东农业科学 $ 0 g0 参考文献张玲刘大军宋艳珠等$白枕鹤精液冷冻技术的研 = + S V V 9 e J: e$ :fq5=\$ T Y SG E J J : U +:$ + < 5 Y \ Y E U$ : 9 GJ $0 $ B e f \ T[ $: V V9 Y < < V \ J : T [ G $ / g/ U J e < 究黑龙江动物繁殖 $ $ g/ 张雁云鸟类的人工授精中国鸟类学会台北市鸟类学会中国野保护学会中国鸟类学研究$ 第四届海峡两岸鸟类学术研讨会文集北京$ 北京林业出版社 ) g))) 郑光美$0鸟类学北京$ 北京师范大学出版社 ) g

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0 年上半年评价与考核细则序号部门要素值考核内容考核方式考核标准考核 ( 扣原因 ) 考评得 3 安全生产目 30 无同等责任以上道路交通亡人事故无轻伤责任事故无重大质量

0 年上半年评价与考核细则序号部门要素值考核内容考核方式考核标准考核 ( 扣原因 ) 考评得 3 安全生产目 30 无同等责任以上道路交通亡人事故无轻伤责任事故无重大质量 0 年上半年评价与考核细则序号部门要素值考核内容考核方式考核标准无同等责任以上道路交通亡人事故 3 无轻伤责任事故目标 30 及事无重大质量工作过失故管无其他一般责任事故理在公司文明环境创建中, 无工作过失及被追究的

) $ ) $+ - 动物学杂志 卷 G G G ^G A G G < BG < JG Q < E < A JG J A G J 0 A J < J A J B A G G E J < < ) < = $ 9 < = J 9 G f < \ E : O ) ) / +$) $ 年第一次对鹤进行了人工

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