3. 结 果 3.1 色 谱 分 离 及 最 低 检 测 限 3.1 色 谱 分 离 及 最 低 检 测 限 各 化 合 物 通 过 此 种 方 法 可 以 实 现 有 效 的 分 离 图 1 为 1ppb15 种 药 物 的 色 谱 图 ( 按 照 从 左 至 右, 从 上 到 下 各 化 合 物
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- 阜阿 葛
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1 应 用 文 献 Note: CM53 气 相 色 谱 / 三 重 四 极 杆 质 谱 (TSQ Quantum XLS) 用 于 15 种 常 见 的 精 神 类 药 物 的 快 速 检 测 分 析 朱 曼 洁 叶 芳 挺 赛 默 飞 世 尔 科 技 关 键 词 毒 物 分 析 TSQ Quantum XLS QED 精 神 类 药 物 1. 前 言 安 定 等 精 神 类 药 物 是 临 床 常 用 的 一 类 药 物, 广 泛 应 用 于 催 眠 镇 静 抗 惊 厥 和 抗 精 神 失 常 等 临 床 疾 病 但 是 这 些 药 物 经 常 会 因 为 滥 用 和 误 用 而 引 起 急 性 中 毒, 所 以 该 类 药 物 的 分 析 对 医 疗 抢 救 和 刑 事 案 件 鉴 定, 都 有 着 重 要 的 意 义 本 文 采 用 的 赛 默 飞 世 尔 科 技 三 重 四 级 杆 气 相 色 谱 质 谱 联 用 仪 既 具 有 气 相 色 谱 高 分 离 性, 又 具 有 质 谱 准 确 鉴 定 化 合 物 的 优 点 通 过 二 级 质 谱 扫 描 充 分 减 少 了 在 复 杂 基 质 样 品 中 的 背 景 干 扰 影 响, 提 高 目 标 化 合 物 的 检 测 灵 敏 度, 使 得 检 出 更 低 浓 度 的 化 合 物 成 为 可 能 并 且, 在 公 安 刑 侦 系 统 内, 除 了 要 求 准 确 的 对 目 标 组 分 进 行 定 量 以 外, 还 有 严 格 的 定 性 要 求 TSQ Quantum XLS 三 重 四 极 杆 质 谱 仪 具 有 定 量 增 强 数 据 关 联 扫 描 (QED) 功 能, 在 定 量 的 同 时 兼 顾 定 性, 排 除 假 阳 性 检 出, 可 充 分 保 证 检 测 结 果 的 准 确 率, 从 而 为 毒 物 检 测 提 供 了 一 个 新 的 有 效 的 方 法 2. 实 验 部 分 2.1 仪 器 和 试 剂 TSQ Quantum XLS 气 相 色 谱 - 三 重 四 级 杆 质 谱 仪 ( 赛 默 飞 世 尔 科 技, 美 国 ),TR- Pesticide II 3m*.25mm*.25μm 毛 细 管 色 谱 柱 ( 带 5m 预 柱 ) 2.2 方 法 气 相 方 法 : 柱 温 箱 :7ºC 保 持 1min, 以 5ºC/min 升 至 19ºC, 保 持 1min, 再 以 2ºC/min 的 速 率 升 至 3ºC, 保 持 5.3min 进 样 口 :PTV 不 分 流 进 样, 不 分 流 时 间 1min, 进 样 口 初 始 温 度 为 6ºC, 进 样 时 间 为.5min, 转 移 温 度 为 28ºC, 转 移 时 间 为 2min 载 气 : 恒 流,1ml/min 传 输 线 :28ºC 质 谱 方 法 : 离 子 源 温 度 为 25 ºC, 采 用 EZ-SRM 的 方 法, 具 体 检 测 离 子 对 如 下 表 所 示 : No. Name 中 文 名 Parent Product (CE) Scan time range StartTime EndTime 1 barbital 巴 比 妥 141 8(12), 98(12) phenobarbital 苯 巴 比 妥 (1), 161(1) promethazine 异 丙 嗪 (5) (18) lorazepam 罗 拉 (6), 274.4(6) diazepam 安 定 (17), 248.4(17), 268.4(17) chlorpromazine 氯 丙 嗪 (22), 257.3(22) chlordiazepoxide 利 眠 宁 (15), 246.3(15), 247.5(15) midazolam 咪 达 唑 仑 (22), 29.7 (22) trifluoperazine 三 氟 拉 嗪 (1), 37.4(1), 35.6(1) nitrazepam 硝 基 安 定 (14), 27.3(14) (13) clonazepam 氯 硝 安 定 (24), 268.3(16), clozapine 氯 氮 平 (2), 28.4(2) estazolam 舒 乐 安 定 (15) (2), 239.2(2) alprazolam 阿 普 唑 仑 (18), 244.2(18) (6) triazolam 三 唑 仑 (19), 277.3(19)
2 3. 结 果 3.1 色 谱 分 离 及 最 低 检 测 限 3.1 色 谱 分 离 及 最 低 检 测 限 各 化 合 物 通 过 此 种 方 法 可 以 实 现 有 效 的 分 离 图 1 为 1ppb15 种 药 物 的 色 谱 图 ( 按 照 从 左 至 右, 从 上 到 下 各 化 合 物 通 过 此 种 方 法 可 以 实 现 有 效 的 分 离 图 1 为 1ppb15 种 药 物 的 色 谱 图 ( 按 的 顺 序 排 列 的 15 种 化 合 物 ) 照 从 左 至 右, 从 上 到 下 的 顺 序 排 列 的 15 种 化 合 物 ) RT: SM: 7G RT: 5.47 SN: RT: SM: 7G RT: 8.3 SN: RT: SM: 7G RT: 9.58 SN: 41 1 RT: SM: 7G RT: 1.18 SN: 58 1 RT: SM: 7G RT: 1.32 SN: RT: SM: 7G RT: 1.64 SN: RT: SM: 7G RT: 1.7 SN: RT: SM: 7G RT: 11.1 SN: RT: SM: 7G RT: SN: RT: SM: 7G RT: SN: RT: 11.4 SN: RT: 11.1 SN: RT: SM: 7G RT: 12.8 SN: 43 1 RT: SM: 7G RT: 13.6 SN: 28 1 RT: SM: 7G RT: SN: RT: SM: 7G RT: SN: 95 1 RT: SM: 7G RT: SN: RT: SN: 图 1 1ppb15 种 精 神 类 药 物 的 色 谱 图 图 1 1ppb15 种 精 神 类 药 物 的 色 谱 图 3.2 标 准 曲 线 及 重 现 性 以 二 氯 甲 烷 为 溶 剂, 分 别 配 制 1ppb,5ppb,1ppb,5ppb,1ppb,5ppb,1ppb 的 混 标 溶 液, 建 立 标 准 曲 线, 各 化 合 物 的 标 准 曲 线 如 图 2 所 示, 相 关 系 数 (R) 均 大 于.995, 表 明 这 15 种 化 合 物 的 标 准 曲 线 线 性 良 好 将 1ppb 的 样 品 重 复 进 样 5 针, 得 到 各 化 合 物 的 重 现 性 在 % 之 间
3 3.2 标 准 曲 线 及 重 现 性 以 二 氯 甲 烷 为 溶 剂, 分 别 配 制 1ppb,5ppb,1ppb,5ppb, 1ppb,5ppb,1ppb 的 混 标 溶 液, 建 立 标 准 曲 线, 各 化 合 物 的 标 准 曲 线 如 图 2 所 示, 相 关 系 数 (R) 均 大 于.995, 表 明 这 15 种 化 合 物 的 标 准 曲 线 线 性 良 好 将 1ppb 的 样 品 重 复 进 样 5 针, 得 到 各 化 合 物 的 重 现 性 在 % 之 间 barbital Y = *X R^2 =.9993 W: Equal phenobarbital Y = *X R^2 =.9956 W: Equal 5 1 promethazine Y = *X R^2 =.9977 W: Equal lorazepam Y = *X R^2 =.9961 W: Equal 5 1 diazepam Y = *X R^2 =.9997 W: Equal chlorpromazine Y = *X R^2 =.9974 W: Equal 5 1 chlordiazepoxide Y = *X R^2 =.9976 W: Equal nitrazepam Y = *X R^2 =.9941 W: Equal estazolam Y = *X R^2 =.9925 W: Equal midazolam Y = *X R^2 =.997 W: Equal clonazepam Y = *X R^2 =.9938 W: Equal alprazolam Y = *X R^2 =.9911 W: Equal 图 2 15 种 精 神 类 药 物 的 标 准 曲 线 2 15 种 精 神 类 药 物 的 标 准 曲 线 trifluoperazine Y = *X R^2 =.9955 W: Equal 5 1 clozapine Y = *X R^2 =.9977 W: Equal triazolam Y = *X R^2 =.9977 W: Equal 5 1
4 的 碰 撞 能 量 便 由 一 个 恒 定 的 碰 撞 能 量 (collision Energy,CE) 变 更 为 反 向 碰 撞 能 量 阶 梯 (RER), 即 高 CE 值 线 性 降 到 低 CE 值 同 时,Q3 由 低 质 量 端 向 高 质 量 3. 定 量 数 据 关 联 二 级 全 扫 描 (QED) 功 能 兼 顾 定 性 QED MS/MS 是 赛 默 飞 世 尔 科 技 TSQ 系 列 产 品 独 有 的 端 的 全 扫 描 即 被 启 动 所 以 在 一 次 扫 描 中, 我 们 既 可 以 得 到 SRM 的 数 据 用 来 定 专 利 功 能, 创 新 性 地 实 现 了 一 次 进 样 的 同 时 完 成 定 量 量, 同 时 也 可 以 得 到 子 离 子 的 全 扫 描 谱 图 用 于 定 性 分 析 和 定 性 确 证 以 检 测 巴 比 妥 为 例, 在 GC/MS/MS 定 量 实 验 中, 一 旦 仪 器 检 测 到 巴 比 妥 SRM 的 子 离 子 响 图 3 和 图 4 分 别 为 浓 度 为 1ppb 的 巴 比 妥 样 品 和 苯 巴 比 妥 样 品 用 毒 物 相 关 的 QED 应 超 过 设 定 的 阈 值,Q2 的 碰 撞 能 量 便 由 一 个 恒 定 的 谱 库 进 行 检 索 的 结 果, 从 图 中 可 以 看 出, 我 们 可 以 用 QED 得 到 的 MS/MS 谱 图 碰 撞 能 量 (collision Energy,CE) 变 更 为 反 向 碰 撞 能 量 阶 梯 (RER), 即 高 CE 值 线 性 降 到 低 CE 值 同 通 过 搜 库 实 现 化 合 物 的 结 构 确 证, 从 而 在 实 际 样 品 检 测 中 尽 可 能 得 减 少 假 阳 性 的 时,Q3 由 低 质 量 端 向 高 质 量 端 的 全 扫 描 即 被 启 动 可 能 所 以 在 一 次 扫 描 中, 我 们 既 可 以 得 到 SRM 的 数 据 用 来 定 量, 同 时 也 可 以 得 到 子 离 子 的 全 扫 描 谱 图 用 于 定 性 图 3 和 图 4 分 别 为 浓 度 为 1ppb 的 巴 比 妥 样 品 和 苯 巴 比 妥 样 品 用 毒 物 相 关 的 QED 谱 库 进 行 检 索 的 结 果, 从 图 中 可 以 看 出, 我 们 可 以 用 QED 得 到 的 MS/MS 谱 图 通 过 搜 库 实 现 化 合 物 的 结 构 确 证, 从 而 在 实 际 样 品 检 测 中 尽 可 能 得 减 少 假 阳 性 的 可 能 图 3 巴 比 妥 QED 谱 库 检 索 结 果 图 3 巴 比 妥 QED 谱 库 检 索 结 果
5 图 4 苯 巴 比 妥 QED 谱 库 检 索 结 果 图 4 苯 巴 比 妥 QED 谱 库 检 索 结 果 4. 讨 论 4. 讨 论 采 用 Thermo Fisher 公 司 全 新 一 代 三 重 四 级 杆 质 谱 TSQ 采 用 Quantum Thermo XLS, Fisher 使 15 公 种 司 药 全 物 在 新 15min 一 代 内 三 分 重 析 四 完 级 杆 质 谱 TSQ Quantum XLS, 使 15 种 毕, 极 大 得 缩 短 了 检 测 时 间, 能 够 满 足 实 验 室 高 通 量 药 物 在 15min 内 分 析 完 毕, 极 大 得 缩 短 了 检 测 时 间, 能 够 满 足 实 验 室 高 通 量 的 要 的 要 求 并 且,TSQ Quantum XLS 具 有 超 高 的 灵 敏 度 求, 在 并 本 且 实 验,TSQ 中 所 有 化 Quantum 合 物 的 最 低 XLS 定 量 具 检 出 有 限 超 都 高 在 的 灵 能 敏 度, 在 本 实 验 中 所 有 化 合 物 的 最 1ppb, 使 得 此 种 方 法 可 以 应 用 于 常 规 的 分 析 检 测 低 定 量 检 出 限 都 在 1ppb, 使 得 此 种 方 法 可 以 应 用 于 常 规 的 分 析 检 测 采 用 EZ-method 设 定 分 析 方 法, 使 整 个 分 析 方 法 一 目 采 用 EZ-method 设 定 分 析 方 法, 使 整 个 分 析 方 法 一 目 了 然, 只 需 要 了 解 化 合 了 然, 只 需 要 了 解 化 合 物 的 出 峰 时 间, 然 后 再 设 定 一 个 时 间 范 围, 保 证 化 合 物 的 出 峰 时 间 在 这 个 范 围 内 物 的 出 峰 时 间, 然 后 再 设 定 一 个 时 间 范 围, 保 证 化 合 物 的 出 峰 时 间 在 这 个 范 围 内 不 需 要 划 分 时 间 段, 系 统 会 自 动 优 化 扫 描 每 个 离 子 对 不 需 要 划 分 时 间 段, 系 统 会 自 动 优 化 扫 描 每 个 离 子 对 的 时 间, 从 而 使 方 法 建 立 更 的 时 间, 从 而 使 方 法 建 立 更 为 简 单 方 便 采 用 定 量 增 强 数 据 关 联 二 级 全 扫 描 (QED) 功 能, 创 新 性 地 实 现 了 一 次 进 样 的 同 时 完 成 定 量 分 析 和 定 性 确 证 所 以 QED 在 样 品 定 性, 尤 其 是 在 基 质 较 复 杂 的 样 品 分 析 当 中, 可 以 最 大 限 度 地 减 少 假 阳 性 结 果 的 可 为 简 单 方 便 采 用 定 量 增 强 数 据 关 联 二 级 全 扫 描 (QED) 功 能, 创 新 性 地 实 现 了 一 次 进 样 的 同 时 完 成 定 量 分 析 和 定 性 确 证 所 以 QED 在 样 品 定 性, 尤 其 是 在 基 质 较 复 杂 的 样 品 分 析 当 中, 可 以 最 大 限 度 地 减 少 假 阳 性 结 果 的 可 能 CM53 3/8 Page 3 of 8 Page 4 of 8
养鸭实用技术(三)
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