Microsoft Word doc

Size: px
Start display at page:

Download "Microsoft Word doc"

Transcription

1 动物学研究 2011,Aug. 32(4): CN /Q ISSN Zoological Research DOI: /SP.J 三叶因子 Bm-TFF2 突变体在原核体系中的表达及促细胞迁移活性 余果宇 1,2,#, 向阳 1,3,#, 张红芸 4, 江萍 1, 李文辉 1, 张云 1, 张勇 1,* (1. 中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室, 云南昆明 ; 2. 昆明医学院生物化学教研室, 云南 昆明 ; 3. 中国科学院研究生院, 北京 ; 4. 昆明医学院第一附属医院妇产科, 云南昆明 ) 摘要 : 大蹼铃蟾三叶因子 Bm-TFF2 具有较人 TFF2 更强的促细胞迁移和抗凋亡活性 该研究利用 RT-PCR 方法扩增得到野生型 Bm-TFF2 的基因, 然后分别构建 N 端 C 端和分子中两个精氨酸突变的突变体, 最后连接表达载体产生 pet32a(+)/bm-tff2 突变型重组质粒, 转入大肠杆菌中, 经 37 C 培养, IPTG 诱导, 其融合蛋白主要存在于包涵体中, 用组氨酸标签的亲合柱纯化溶解后的包涵体上清, 进一步用 RP-HPLC 纯化得到硫氧还蛋白 (TRX)/Bm-TFF2 突变型融合蛋白 通过 SDS-PAGE 和 Western blotting 检测分析其纯度和特异性 最终, 从 1L 培养基中得到 20 mg 纯度为 95% 的三种重组突变型融合蛋白 三种突变型重组蛋白都具有剂量依赖性的促细胞迁移活性, 并且其活性无显著差异 该研究为进一步研究 Bm-TFF2 结构和功能的关系以及揭示其作用的分子机制奠定了基础 关键词 :Bm-TFF2; 突变体 ; 表达 ; 纯化 ; 细胞迁移中图分类号 :Q786; Q 文献标志码 :A 文章编号 : (2011) Expression of Bm-TFF2 mutants in Escherichia coli and their cell migration-promoting activity YU Guo-Yu 1,2,#, XIANG Yang 1,3,#, ZHANG Hong-Yun 4, JIANG Ping 1, LEE Wen-Hui 1, ZHANG Yun 1, ZHANG Yong 1,* (1. Key Laboratory of Animal Models and Human Disease Mechanisms, Kunming Institute of Zoology, the Chinese Academy of Sciences, Kunming Yunnan , China; 2. Biochemistry Section of Kunming Medical College, Kunming Yunnan , China; 3. Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, Beijing , China; 4. Department of Obstetrics and Gynecology, the First Affiliated Hospital of Kunming Medical College, Kunming Yunnan , China) Abstract: Bm-TFF2, a trefoil factor from the large-webbed bell toad (Bombina maxima), can stimulate cell migration and inhibit cell apoptosis. To study the structure-function relationship of Bm-TFF2, we constructed wild-type and mutated Bm-TFF2 plasmids and expressed recombinant proteins in E. coli. The wild-type Bm-TFF2 gene encoding mature peptide was obtained by RT-PCR, while the N-terminal, C-terminal and two arginine mutated Bm-TFF2 clones were constructed, and ligated into pet-32a(+) expression vectors. The fusion proteins were induced by IPTG at 37 C. The mutant Bm-TFF2 fusion proteins expressed mainly in the inclusion bodies. The mutant (TRX)/Bm-TFF2 could be purified by using Ni 2+ -chelating chromatography and reverse-phase HPLC from the inclusion body supernatant. The fusion proteins were analyzed by SDS-PAGE and Western blotting. The yield of mutant Bm-TFF2 fusion proteins of above 95% purity was about 20 mg/l. All three recombinant mutant proteins can promote the migration of AGS cells in a dose-dependent manner with no obvious activity difference. Key words: Bm-TFF2; Mutant; Expression; Purification; Cell migration 收稿日期 : ; 接受日期 : 基金项目 : 中国科学院 西部之光 (Y ); 973 项目 (2010CB529800); 国家基金委面上项目 ( ) 通讯作者 (Corresponding author), Tel: , # 共同第一作者 (Authors contributed equally to the work) 第一作者简介 : 余果宇 (1972 ), 女, 博士, 研究方向为胃肠肿瘤的分子生物学 ; 向阳 (1983-), 男, 博士生, 研究方向为胃肠肿瘤的细胞生物学

2 380 动物学研究 32 卷 三叶因子 (trefoil factor, TFFs) 是一类含一个或几个三叶因子结构域的分泌蛋白, 该结构域是一段 38 或 39 个氨基酸的多肽, 其中的六个半胱氨基以 1-5, 2-4, 3-6 配对的构型方式生成三对二硫键, 从而形成典型的三叶状结构, 此结构赋予 TFFs 家族蛋白耐酸 碱和蛋白酶水解的性质, 同时也是其行使功能所必需的 人 TFFs 包括含一个三叶因子结构域 与乳腺癌相关的多肽 (TFF1 或 PS2) 和小肠三叶因子 (TFF3 或 ITF) 以及含两个结构域的解痉挛多肽 (SP 或 TFF2) TFFs 在黏膜防御 修复和再生等过程中通过促进细胞增殖 细胞迁移和对抗细胞凋亡等过程发挥重要作用 (Baus-Loncar et al, 2005; Dignass et al, 1994; Oertel et al, 2001; Taupin et al, 2000) 此外, TFFs 在多种肿瘤中表达异常的事实提示, 它们广泛参与肿瘤细胞增殖 浸润和转移过程 (Cook et al, 1999; Fox et al, 2007; Lalani et al, 1999; Siu et al, 2004) 同时, TFF2 表达的增加还常常相关于肿瘤的发展以及不良预后 (Dhar et al, 2003; Emami et al, 2004; Katoh, 2003) Bm-TFF2 是从大蹼铃蟾皮肤分泌物中获得的一种具有血小板激动活性的两栖类三叶因子 (Zhang et al, 2005), 进一步的研究又发现天然 Bm-TFF2 以浓度依赖的方式促进人 AGS HT-29 以及小鼠肠上皮细胞 IEC-6 的迁移, 并且 ERK1/2 活性的激活是其发挥促细胞迁移活性的关键 同时, Bm-TFF2 还具有对抗 C2- 丙烯酰胺引发的细胞凋亡作用, 从而促进细胞的增殖 这些结果提示, Bm-TFF2 通过 MAPK 途径促进细胞迁移并抑制细胞凋亡是其发挥伤口修复功能的基础 (Chatterjee et al, 2010) 在进一步对重组 Bm-TFF2 进行结构与功能研究时, 我们发现全长和单结构域的 Bm-TFF2 都具有促细胞迁移和伤口修复活性, 但抗细胞凋亡活性却是全长依赖的, 即 Bm-TFF2 的两个单结构域剪切体都无抗细胞凋亡活性 (Canas et al, 2009), 提示 Bm-TFF2 的不同活性需要不同的结构基础 所以, 我们在表达了 Bm-TFF2 全长和单结构域的基础上, 利用基因工程的原理和技术, 分别构建和表达了 Bm-TFF2 的三个突变体, 并进而检测和分析了它们的促细胞迁移活性, 这为更加深入地揭示 Bm-TFF2 的结构与功能关系以及分析可能的分子作用机制奠定了基础 1 材料和方法 1.1 材料大肠杆菌 DH5α BL21(DE3) 表达载体 pet-32a(+) 购于德国 Novagen 公司 ; 逆转录酶 (RNAase H) 限制性内切酶 Kpn I 和 EcoR I PCR 聚合酶 T4 DNA 连接酶和克隆载体 pmd-19t simple PrimeScript Reverse Transcriptase 购于大连宝生物公司 ; 动物组织总 RNA 提取试剂盒 质粒小提试剂盒和胶回收试剂盒购于北京天根生物科技公司 ; QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kit 为 STRATAGENE 公司产品 ; 组氨酸选择的镍亲合层析胶购于 Sigma; 蛋白定量试剂盒购于 Bio-Rad; 辣根过氧化物酶偶联的山羊抗兔和山羊抗鼠血清购自美国 Santa Cruz 生物科技公司 ; Bm-TFF2 多克隆抗血清为实验室免疫兔所得 ; 三氟乙酸 (TFA) 乙氰 (ACN) 为德国 Merck 公司产品 ; C4 色谱柱为大连依利特分析仪器有限公司产品 ; ECL 化学发光试剂盒为德国 Thermo scientific 公司产品 ; AGS 细胞系来自于美国的 American Type Culture Collection; Millicells 为美国 Millipore 公司产品 ; 其余试剂均为国产分析纯 1.2 方法 pet-32a(+)/ 突变型 Bm-TFF2 重组质粒的构建取大蹼铃蟾皮肤组织约 20 mg, 按总 RNA 提取试剂盒说明提取组织总 RNA(TRNA), 并用分光光度计和 1.2% 琼脂糖凝胶电泳检测其纯度和完整性 取一定量的总 RNA, 用 Oligo(dT) 和 PrimeScript Reverse Transcriptase 逆转录为 cdna PCR 引物由上海生工生物工程公司合成, 各突变体的引物序列见表 1 各突变体的正向引物序列都包括 Kpn I 酶切位点 ( 斜体 ) 和对应的 N 端 5 个氨基酸序列 ( 黑体 ), 反向引物序列包括 EcoR I 酶切位点 ( 斜体 ) 终止子 ( 下划线 ) 和相应 C 端的 5 个氨基酸序列 ( 黑体 ) N 端突变体 ( 记为 BNM) 缺乏 N 端起始的 4 个氨基酸, C 端突变体 ( 记为 BCM) 缺乏 C 端的 5 个氨基酸 以 Bm-TFF2 表 1 BM-TFF2 突变体的引物序列 Tab. 1 The primer sequences of BM-TFF2 mutants 突变体 Mutants 引物序列 Prime sequence (5'-3') BNM Sence prime tatggtacctatgagatagataac Anti-sence prime tatgtcg ttattcttgaggtttaaa BCM Sence prime tatggtaccggttttccaatctat Anti-sence prime tat gtcga ttaaaagcaccatactgt BAM Sence prime tat ggtaccggttttccaatctat Anti-sence prime tatgtcgacttattcttgaggtttaaa

3 4 期余果宇等 : 三叶因子 Bm-TFF2 突变体在原核体系中的表达及促细胞迁移活性 381 的 cdna 为模板, 按照 95 C 预变性 4 min, 94 C 变性 30 s, 60 C 退火 30 s, 72 C 延伸 30 s, 进行 35 个循环, 最后 72 C 延伸 7 min 获得 PCR 产物, 产物通过 TA 克隆与 pmd-19t simple 克隆载体连接形成 pmd-19t/bm-tff2 突变型重组质粒, 将重组质粒转化 DH5α 次日, 挑出经蓝白斑筛选的白色克隆并用克隆载体的通用引物 M13-47 和 RV-M 行菌落 PCR 检测 抽提阳性克隆质粒, 用 Kpn I/EcoR I 双酶切后再与相同酶切后的 pet-32a(+) 连接形成 pet-32a(+)/bm-tff2 突变型重组质粒, 转化 BL21(DE3) 并用表达载体的通用引物 S.Tag 和 T7-Ter 行菌落 PCR 检测生长的克隆并将阳性克隆测序 构建精氨酸突变体的 ( 记为 BAM) 正向引物序列 :5'-tgctgttttatttcagcaatcgtcaatacaatttggtgctttaaacttaa a-3'; 反向引物序列 :5'-tttaagtttaaagcaccaaattgtatttct ccttgctgaaataaaacagca-3' 按照 QuikChange Site- Directed Mutagenesis Kit 进行操作并测序确认两个精氨酸已经突变为异亮氨酸和缬氨酸 再以该突变质粒为模板, 用 BAM 的引物扩增, 同上方法操作即可得精氨酸突变的表达载体 重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化分别挑取测序正确的 N 端 C 端突变以及第 44 和 45 位精氨酸各突变为异亮氨酸和缬氨酸的单克隆于 5 ml LB 培养基, 37 C, 140 r/min 摇过夜 次日晨, 取过夜菌液 1 ml 接种到 1 L 含 100 μg/ml 氨苄青霉素的 LB 培养瓶, 相同条件下, 摇菌液至 OD 600 为 0.6, 加异丙基 -β-d- 硫代半乳糖苷 (IPTG) 至终浓度 0.5 mmol/l, 37 C 诱导 4 h 收集菌液, g 离心 10 min 获得细胞沉淀 将沉淀悬浮于 100 ml 冰冷的含 0.3 mol/l NaCl 10 mmol/l 咪唑 ph8.0 的 50 mmol/l 磷酸盐溶液中, 冰浴中用超声波细胞粉碎机 (JY92-2D, 宁波新芝生物科技有限公司 ) 以 350 W 工作 60 个循环 ( 工作 6 s, 间歇 10 s) 4 C, g 离心 30 min, 弃上清, 收集包涵体部份并用 Equilibration Buffer( 含 8 mol/l 尿素, 100 mmol/l 磷酸盐溶液, ph:8.0) 常温溶解 4 h, r/min, 离心 30 min, 取上清并用组氨酸选择的镍亲合层析柱纯化 10 倍体积的 Washing Buffer( 含 8 mol/l 尿素, 100 mmol/l 磷酸盐溶液, ph:6.3) 洗脱结合镍柱的非特异性蛋白, 最后用 Elution Buffer( 含 8 mol/l 尿素, 100 mmol/l 磷酸盐溶液, ph:5.0) 洗脱结合在镍柱上的融合蛋白 收集洗脱液并用含 6 mol/l 尿素的生理磷酸盐溶液于 4 C 进行梯度透析, 直至最后用无 尿素的生理磷酸盐溶液透析三次, 收集透析液超滤浓缩, 用胶浓度为 12% 的 SDS-PAGE 并行考马斯亮蓝染色分析重组融合蛋白的纯化过程 RP-HPLC 对超滤浓缩的蛋白液进一步纯化 操作如下 : 选用 C4 色谱柱 (Zorbax 300 SB C 4 column, mm), 将样品分别上样于预先用含 0.1%TFA 的超纯水平衡好的 C 4 柱, 待穿透峰流出后, 用含 0.1%TFA 的 ACN 进行线性梯度洗脱 重组融合蛋白的鉴定收集 280 nm 对应的最高洗脱峰, 抽干 TFA 和 ACN 后, 冻干和溶解样品, 蛋白定量试剂盒定量 各取等量的 TRX-BNM TRX-BCM 和 TRX-BAM 融合蛋白行 SDS-PAGE (12%) 同时, 遵从 Western blotting 的操作过程, 将 SDS-PAGE 胶上的蛋白转印到 PVDF 膜, 分别用稀释 倍的抗 Bm-TFF2( 实验室免疫家兔制备所得 ) 以及抗 TRX 抗体 (Invitrogen, USA)4 C 反应过夜, 再用 倍稀释的山羊抗兔和山羊抗鼠血清常温下反应 1 h, 化学发光法检测重组融合蛋白的特异性 突变型融合蛋白的促细胞迁移活性用包括有 10% 胎牛血清 (FCS) 100 U/mL 青霉素 100 mg/ml 链霉素的 DMEM 和 Ham s F 12 (1:1) 培养基于 37 C, 5% CO 2 的培养箱中培养人胃癌上皮细胞系 AGS 待细胞生长状况良好时, 更换细胞培养液, 即用无血清的 DMEM 和 Ham s F 12(1:1) 饥饿细胞 24 h, 再采用 Boyden Chamber(Chemicon, 美国 ) 系统测定细胞迁移活性 (Liu et al, 2008) 具体操作如下 : 胶原 (10 μg/cm 2 ) 均匀包埋 Millcells 底部膜的上室面, 取饥饿的过夜细胞, 在每个上室里加入约 的 AGS, 下室中加入激动剂, 包括 100 nmol/l 或 200 nmol/l 重组突变型融合蛋白 10 nmol/l 的生长因子作为阳性对照, 100 nmol/l 或 200 nmol/l 重组的 TRX 作为阴性对照, 37 C 5%CO 2 培养箱中孵育 18 h 后, 用枪头和棉签完全移走上室面没有迁移的细胞, 再用含 2% 无水乙醇, 0.1 mol/l 硼酸 (ph: 9.0) 配制的 0.025% 的结晶紫染色液室温下对细胞染色 30 min, 10% 的乙酸洗脱结合的结晶紫, 在 586 nm 波长下读取各实验组的吸光度值, 并计算比较不同激动剂的迁移率 以上实验重复 3 次 2 结果 2.1 pet-32a(+)/ 突变型 Bm-TFF2 表达质粒的构建提取来源于大蹼铃蟾皮肤组织的总 RNA,

4 382 动物学研究 32 卷 RT-PCR 后分别用对应的突变引物扩增得到 BAM BNM 和 BCM 约 310 bp 的目的片段 ( 图 1 A), 并与 pmd-19t 载体连接后转化 DH5α, 将双酶切阳性克隆质粒所得的 BAM BNM 和 BCM 基因片段分别连接表达载体 pet-32a(+) 形成重组质粒并转化 BL21 选择测序正确的阳性克隆, 并用 Kpn I 和 EcoR I 同时酶切 pet-32a(+)/bam BNM 和 BCM 重组质粒, 其检测结果如图 1 B 所示, 三种突变型重组质粒经双酶切后都在相对分子质量为 310 bp 的位置出现条带, 表明 3 个突变体分别连接到表达载体的相应位置 2.2 重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化测序方法分别检测每种 Bm-TFF2 突变体单克隆的正确性 如图 2 A 所示, BNM 的突变是 N 端缺失了 4 个起始氨基酸 GFPI; 而 BCM 的突变是 C 端缺失了 4 个终末氨基酸 KPQE; BAM 的突变则发生在分子中第 44 和 45 位精氨酸上, 两者分别突变为异亮氨酸和缬氨酸 将测序正确的各突变体克隆分别接种于 1 L LB 培养基中, 37 C, IPTG 诱导 4 h, 如图 2 B 所示, 2 道菌液中相对分子质量为 的位置出现一条颜色深而粗的诱导条带, 提示诱导后融和蛋白的表达量显著增加, 并且每种融和蛋白 图 1 以大蹼铃蟾 cdna 为模板扩增所得的 Bm-TFF2 突变体的 PCR 产物 Fig. 1 The identification of the Bm-TFF2 mutant recombinant plasmids by taking the cdna of Bombina maxima as a template A)Bm-TFF2 突变体的 PCR 产物 ; B)Kpn I 和 EcoR I 双酶切检测构建的 Bm-TFF2/pET-32a(+) 突变质粒 A)The PCR products of Bm-TFF2 mutant fragments. B)The double digestive products of Bm-TFF2/pET-32a(+) mutant plasmids with Kpn I and EcoR I. 图 2 重组 Bm-TFF2 突变体的构建与纯化 Fig. 2 Expression and purification the recombinant Bm-TFF2 mutant proteins A) 野生型 Bm-TFF2 BNM BCM 和 BAM 的氨基酸序列组成 BNM 和 BCM 在野生型 N 端和 C 端各缺少 4 个氨基酸序列 然而, BAM 则是分子中的两个精氨酸分别被异亮氨酸和缬氨酸所替代 B)SDS PAGE 分析 TRX BNM 的表达和纯化过程 1 道, 相对分子质量标准 ; 2 道, 无 IPTG 诱导的细胞裂解液 ; 3 道, 0.5 mmol/l IPTG 诱导的细胞裂解液 ; 4 道, IPTG 诱导后的细胞裂解液上清 ; 5 道, IPTG 诱导后的细胞裂解液沉淀 ; 6 道, 洗脱液洗脱包涵体结合镍亲合柱所得的融合蛋白部分 C) 反向 HPLC C4 柱纯化重组蛋白 TRX BNM 箭头所指的最高峰即为高度纯化的 TRX BNM 融合蛋白 A) The amino acid sequences of wild type Bm-TFF2, BNM, BCM and BAM. The N and C terminus of BNM and BCM lack of 4 amino acid residues, respectively, while in BAM the two Rs are mutated to I and V. B) SDS PAGE analysis of the TRX BNM expression and purification. Lane 1, the molecular weight marker; lane 2, cell lysate without IPTG induction; lane 3, cell lysate with 0.5 mmol/l IPTG induction; lane 4, cell lysate supernatant after IPTG induction; lane 5, cell lysate precipitation after IPTG induction; lane 6, the eluted fusion proteins after His-select nickel affinity column. C) Purification of recombinant TRX BNM in a reverse-phase HPLC C4 column. The peak was the highly purified TRX BNM fusion proteins, as indicated by an arrow.

5 4 期余果宇等 : 三叶因子 Bm-TFF2 突变体在原核体系中的表达及促细胞迁移活性 383 在超声破碎后的菌液上清中含量较少 (3 道 ), 而主要存在于菌液沉淀, 即包涵体中 (4 道 ) 充分溶解包涵体并将离心后的包涵体上清结合组氨酸选择的镍亲合层析柱, 含 8 mol/l 尿素, ph:5.0 的磷酸盐溶液能洗脱与亲合柱结合的蛋白部分, 其纯度可达 70%(5 道 ) 为得到高纯度的重组蛋白, RP-HPLC 进一步纯化透析后的洗脱液, 当洗脱梯度为 70% 时, 280 nm 对应的最高洗脱峰即为纯化的突变型 Bm-TFF2 重组融合蛋白, 如图 2 C 箭头所示 2.3 重组融合蛋白的鉴定收集各样品在 280 nm 处对应的最高洗脱峰, 抽干 TFA 和 ACN, 以及冻干和溶解样品 各蛋白样品经 SDS-PAGE 分析后都在相对分子质量为 33 k 的地方出现明显的单一条带, 其纯度高达 95%( 图 3 A) 抗 Bm-TFF2 抗体 ( 图 3 B) 以及抗 TRX 抗体 ( 图 3 C) 对各重组蛋白进行 Western blotting 检测都在相对分子质量为 的位置出现特异性的反应条带, 表明纯化所得的蛋白即为原核体系构建表达的突变型 Bm-TFF2 重组蛋白 2.4 突变型融合蛋白的促细胞迁移活性促进黏膜细胞再生是三叶因子蛋白的重要功能之一 (Taupin and Podolsky, 2003), 而上皮细胞的迁移又是黏膜再生的重要保障 三种突变型 Bm-TFF2 重组蛋白处理 AGS 细胞 16 h 后, 细胞迁移活性明显增强并且呈剂量依赖性, 即 100 nmol/l 和 200 nmol/l 重组蛋白的促细胞迁移活性呈逐渐增强的趋势, 并且 200 nmol/l 的细胞迁移活性大约是 100 nmol/l 的两倍 TRX 阴性对照的活性变化无统计学意义, 10 nmol/l 的阳性对照 -EGF 与 TRX 相比具有显著的促细胞迁移活性 ( 图 4) 图 4 重组 Bm-TFF2 突变体的促细胞迁移活性 Fig. 4 The activity of epithelial cell migration of recombinant Bm-TFF2 mutant proteins 利用 Boyden 小室, 用不同浓度的 TRX-BNM TRX-BCM 和 TRX-BAM 重组蛋白检测迁移活性 TRX 被用作阴性对照, EGF 被用作阳性对照 取 3 次独立实验的平均值并用均值 ± 标准误表示 P < 0.05 表示有差异 ; P < 0.01 表示差异显著 Using Boyden chamber assay, cell migration activity was stimulated by TRX-BNM, TRX-BCM, or TRX-BAM with different concentrations, TRX was a negative control and EGF was a positive control. Values represent means ± SD of three independent experiments. Significant difference (* P < 0.05); Extremely significant difference (**P < 0.01). 3 讨论 图 3 SDS PAGE 和 Western blotting 分析重组蛋白 Fig. 3 SDS PAGE and Western blotting analysis of the recombinant proteins A)SDS PAGE 分析重组 TRX-BNM, TRX-BCM 和 TRX-BAM 蛋白 ; B)Bm-TFF2 抗体行 Western blotting 检测重组 TRX-BNM, TRX-BCM 和 TRX-BAM 蛋白的特异性 ; C)TRX 抗体行 Western blotting 检测重组 TRX-BNM, TRX-BCM 和 TRX-BAM 蛋白 A) SDS PAGE of the recombinant TRX-BNM, TRX-BCM, TRX-BAM; B) Identification of the recombinant TRX-BNM, TRX-BCM, TRX-BAM by Western blotting with anti-bm-tff2 antibody; C)Identification of the recombinant TRX-BNM, TRX-BCM, TRX-BAM by Western blotting with anti-trx antibody. 三叶因子蛋白在大蹼铃蟾皮肤中有两种存在形式 一种是由三个结构域组成的 βγ-cat 的 β 亚基, βγ-cat 是非晶状体 βγ-crystallin 和三叶因子蛋白形成的复合物, 具有促细胞迁移和引发细胞凋亡的活性 ; 另一种是由两个结构域组成, 具有促细胞迁移和细胞增殖活性的 Bm-TFF2(He et al, 2008; Liu et al, 2008) 近期研究又发现重组 Bm-TFF2 全长以及它的两个单结构域都有促细胞迁移活性, 并且全长 Bm-TFF2 还具有抗细胞凋亡活性, 而它的两个单结构域则无此活性, 提示 Bm-TFF2 活性的发挥依赖不同的结构基础 (Yu et al, 2010) 该项研究通过比较 Bm-TFF2 和人 TFF2 蛋白的氨基酸组成发

6 384 动物学研究 32 卷 现, Bm-TFF2 在 40~50 位的氨基酸组成中由两个具有亲水性的精氨酸替代了人 TFF2 中相应位置的疏水性氨基酸, 推测两个精氨酸是其发挥生物学活性的关键, 而且这一区域又常常是 TFF 蛋白中受体 / 配体结合的重要部位 (Polshakov et al, 1997; Zhang et al, 2005) 另外, Bm-TFF2 在其 N 端和 C 端序列组成中也出现了与人 TFF2 较大的差异 为此, 我们分别对其分子中的两个精氨酸以及 N 端和 C 端序列进行了突变并检测各种突变体的促细胞迁移活性 因此, 该项研究立足于在体外建立原核表达体系以表达 Bm-TFF2 突变体并研究其结构和功能的关系 由于原核表达体系是一种较为经济和方便的手段, 加之表达量大的优点, 所以选用 pet-32a(+) 体系在大肠杆菌中表达 Bm-TFF2 突变体 pet-32a(+) 表达重组蛋白时, 其显著的特点是其融合蛋白部份 -TRX 能够增强目的蛋白的溶解性, 并且有助于分子中二硫键的正确生成 (LaVallie et al, 1993; Stewart et al, 1998) 同时, 由于表达的融合蛋白带有 6 个组氨酸, 所以很容易用组氨酸标签的亲合柱来进行纯化 我们选用原核体系表达 N 端和 C 端, 分别缺失 4 个氨基酸的 TRX-BNM 和 TRX-BCM 突变体以及分子中两个精氨酸突变的 TRX-BAM 突变体 ( 图 2 A) 在表达重组融合蛋白时, 如图 2 B 所示, IPTG 诱导后的菌液出现明显的相对分子质量为 的诱导条带, 这与先前野生型 Bm-TFF2 的表达相似, 但突变型的 Bm-TFF2 由于分子组成的改变使得诱导蛋白主要存在于菌液沉淀中, 这与野生型 Bm-TFF2 的诱导表达有所差异, 后者的诱导蛋白主要存在于菌液上清 (Yu et al, 2010) 溶解的包涵体上清经组氨酸选择的亲合柱纯化后可得到纯度达 70% 的融合蛋白, 再用 RP-HPLC 进一步纯化能够使目的蛋白的纯度达 95%( 图 3 A) 抗 Bm-TFF2 抗体 ( 图 3 B) 以及抗 TRX 抗体 ( 图 3 C) 证实了三种重组蛋白的特异性, 结果显示在相对分子质量为 的位置出现反应条带, 表明纯化所得的蛋白即为原核体系构建表达的突变型 Bm-TFF2 重组蛋白 在获得重组蛋白后, 我们进一步对其活性进行了分析 基于三叶因子的重要功能之一是促进黏膜细胞的再生, 而这一功能的完成与细胞迁移活性相关 (Taupin & Podolsky, 2003) 同时通过促进黏膜边缘细胞的迁移来发挥伤口修复和治愈的功能 (Dignass et al, 1994; Oertel et al, 2001) 因此, 我们检测了三种突变型 Bm-TFF2 重组蛋白的促细胞迁移活性 结果提示在作用浓度为 100~200 nmol/l 时, 三种突变型的 Bm-TFF2 都具有明显的促 AGS 细胞迁移活性, 并且这一活性具有剂量依赖性, 即 200 nmol/l 重组蛋白的促细胞迁移活性显著性高于 100 nmol/l, 大约是其活性的两倍 同时, 在相同浓度作用下, 无外源蛋白插入的空载体 - 硫氧还蛋白的促细胞迁移活性却不明显 与 TRX 相比, 10 nmol/l 的 EGF 却具有显著的促细胞迁移活性 更为有趣的是, 三种突变型重组蛋白的促细胞迁移活性之间无明显差异, 并且与重组野生型 Bm-TFF2 全长以及两个单结构域的促细胞迁移活性之间亦无显著差异 由以上结果可以推论, Bm-TFF2 的 N 端 C 端和分子中两个精氨酸的突变体, 甚至是单结构域的 Bm-TFF2 都不影响它的促细胞迁移活性, 而这一活性, 是 Bm-TFF2 发挥伤口修复功能的最基本要素之一 事实上, 三叶因子家族蛋白在胃肠道粘膜的保护和修复过程中发挥着重要功能 它们能与表皮生长因子 (EGF) 及转化生长因子 α(tgfα) 协同作用, 参与损伤组织的上皮重建, 即促进受损黏膜周围完好的上皮细胞向损伤黏膜表面迁移覆盖, 从而促进损伤黏膜的修复 (Wong et al, 1999) ERK1/2 的磷酸化常常为细胞迁移活性所必需并且也是 TFFs 调节信号的关键 (Klemke et al, 1997) 研究报道 TFFs 肽能够促进支气管上皮细胞 BEAS-2B 的迁移, 而这一活性, 是依赖蛋白激酶 C(PKC) 和胞外信号调节激酶 -ERK1/2 的激活, 即 ERK1/2 的磷酸化 (Chwieralski et al, 2004) 总之, 我们用原核表达体系 pet32a(+) 成功表达出三种 Bm-TFF2 的突变型重组蛋白, 并用组氨酸选择的亲合柱和 RP-HPLC 进行纯化, SDS-PAGE 和 Western blotting 检测了重组蛋白的纯度和特异性, 进而用重组蛋白检测了它们的促细胞迁移活性, 结果提示三种突变型 Bm-TFF2 重组蛋白都具有剂量依赖性的促细胞迁移活性, 并且其活性之间无明显的差异 这为揭示 Bm-TFF2 的结构和功能关系以及解释其作用的分子机制提供了有力的依据, 也为进一步开辟 TFFs 的生物制药途径奠定了基础 参考文献 : Baus-Loncar M, Kayademir T, Takaishi S, Wang T, Trefoil factor family 2 deficiency and immune response [J]. Cell Mol Life Sci, 62(24):

7 4 期余果宇等 : 三叶因子 Bm-TFF2 突变体在原核体系中的表达及促细胞迁移活性 Canas M, Moran Y, Rivero MB, Bohorquez A, Villegas V, Rendon Y, Ramirez E, Valderrama E, Briceno Z, Chiurillo MA, Interleukin-1 genetic polymorphism: association with gastric cancer in the high-risk Central-Western population of Venezuela [J]. Rev Med Chil, 137(1): Chatterjee DK, Gnanasammandhan MK, Zhang Y, Small upconverting fluorescent nanoparticles for biomedical applications [J]. Small, 6(24): Chwieralski CE, Schnurra I, Thim L, Hoffmann W, Epidermal growth factor and trefoil factor family 2 synergistically trigger chemotaxis on BEAS-2B cells via different signaling cascades [J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 31(5): Cook GA, Familari M, Thim L, Giraud AS, The trefoil peptides TFF2 and TFF3 are expressed in rat lymphoid tissues and participate in the immune response [J]. FEBS Lett, 456(1): Dhar DK, Wang TC, Maruyama R, Udagawa J, Kubota H, Fuji T, Tachibana M, Ono T, Otani H, Nagasue N, Expression of cytoplasmic TFF2 is a marker of tumor metastasis and negative prognostic factor in gastric cancer [J]. Lab Invest, 83(9): Dignass A, Lynch-Devaney K, Kindon H, Thim L, Podolsky DK, Trefoil peptides promote epithelial migration through a transforming growth factor β-independent pathway [J]. J Clin Invest, 94(1): Emami S, Rodrigues S, Rodrigue CM, Le Floch N, Rivat C, Attoub S, Bruyneel E, Gespach C, Trefoil factor family (TFF) peptides and cancer progression [J]. Peptides, 25(5): Fox JG, Rogers AB, Whary MT, Ge Z, Ohtani M, Jones EK, Wang TC, Accelerated progression of gastritis to dysplasia in the pyloric antrum of TFF2 -/- C57BL6 x Sv129 Helicobacter pylori-infected mice [J]. Am J Pathol, 171(5): He YY, Liu SB, Lee WH, Zhang Y, Melanoma cell growth inhibition by βγ-cat, which is a novel non-lens βγ-crystallin and trefoil factor complex from frog Bombina maxima skin [J]. Toxicon, 52(2): Katoh M, Trefoil factors and human gastric cancer (review) [J]. Int J Mol Med, 12(1): 3-9. Klemke RL, Cai S, Giannini AL, Gallagher PJ, de Lanerolle P, Cheresh DA, Regulation of cell motility by mitogen-activated protein kinase [J]. J Cell Biol, 137(2): Lalani EN, Williams R, Jayaram Y, Gilbert C, Chaudhary KS, Siu LS, Koumarianou A, Playford R, Stamp GW, Trefoil factor-2, human spasmolytic polypeptide, promotes branching morphogenesis in MCF-7 cells [J]. Lab Invest, 79(5): LaVallie ER, DiBlasio EA, Kovacic S, Grant KL, Schendel PF, McCoy JM, A thioredoxin gene fusion expression system that circumvents inclusion body formation in the E. coli cytoplasm [J]. Biotechnology: N Y, 11(2): Liu SB, He YY, Zhang Y, Lee WH, Qian JQ, Lai R, Jin Y, A novel non-lens βγ-crystallin and trefoil factor complex from amphibian skin and its functional implications [J]. PLoS One, 3(3): e1770. Oertel M, Graness A, Thim L, Buhling F, Kalbacher H, Hoffmann W, Trefoil factor family-peptides promote migration of human bronchial epithelial cells: synergistic effect with epidermal growth factor [J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 25(4): Polshakov VI, Williams MA, Gargaro AR, Frenkiel TA, Westley BR, Chadwick MP, May FE, Feeney J, High-resolution solution structure of human pnr-2/ps2: a single trefoil motif protein [J]. J Mol Biol, 267(2): Siu LS, Romanska H, Abel PD, Baus-Loncar M, Kayademir T, Stamp GW, Lalani el N, TFF2 (trefoil family factor2) inhibits apoptosis in breast and colorectal cancer cell lines [J]. Peptides, 25(5): Stewart EJ, Aslund F, Beckwith J, Disulfide bond formation in the Escherichia coli cytoplasm: an in vivo role reversal for the thioredoxins [J]. EMBO J, 17(19): Taupin D, Podolsky DK, Trefoil factors: initiators of mucosal healing [J]. Nat Rev Mol Cell Biol, 4(9): Taupin DR, Kinoshita K, Podolsky DK, Intestinal trefoil factor confers colonic epithelial resistance to apoptosis [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 97(2): Wong WM, Poulsom R, Wright NA, Trefoil peptides [J]. Gut, 44(6): Yu G, Zhang Y, Xiang Y, Jiang P, Chen Z, Lee W, Cell migrationpromoting and apoptosis-inhibiting activities of Bm-TFF2 require distinct structure basis [J]. Biochem Biophys Res Commun, 400(4): Zhang J, Zhang Y, Wan SG, Wei SS, Lee WH, Bm-TFF2, a trefoil factor protein with platelet activation activity from frog Bombina maxima skin secretions [J]. Biochem Biophys Res Commun, 330(4):

材料 方法

材料 方法 生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽

More information

材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析

材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析 生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌

More information

21 13 D / 2 10 ig ig 10 d 1. 0 g kg /2 2 β- 5 g kg g kg mg kg - 1 ig ig 24 h 5% 1 2% CMC-Na 2. 5 ml 30

21 13 D / 2 10 ig ig 10 d 1. 0 g kg /2 2 β- 5 g kg g kg mg kg - 1 ig ig 24 h 5% 1 2% CMC-Na 2. 5 ml 30 21 13 1 2 1* 2 1. 430065 2. 445000 20 10 5 g kg - 1 5 mg kg - 1 ig 10 d ig HE 1 TFF1 TFF1 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 05 R285. 5 doi 10. 13422 /j. cnki. syfjx. 2015130100 A 1005-9903 2015 13-0100-05

More information

标题

标题 环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨

More information

Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT

Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT 42 6 Vol.42, No.6 2011 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2011 南极衣藻 (Chlamydomonas sp. ICE-L) 谷胱 * 甘肽还原酶基因的原核表达及其条件优化 1 1 燏 1 1 2 (1. 524025; 2. 266061) RT-PCR GR ORF cdna, ; IPTG,, pet-gr BL21,

More information

Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr

Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus

More information

pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC

pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC 35 3 12 9 JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY Natural Science Edition Vol 35 No 3 Sept 12 pet28a + CD 210046 Rituximab VL VH CH3 CD overlap PCR Rituximab VL VH Linker ScFv ScFv IgG1 CH3 IgG1 cdna pet28a

More information

<30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D34A3A92E6D6469>

<30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D34A3A92E6D6469> 212 绎 Vol.14 No.5 ScienceDirect 阴 元元 元元 / 99978 5 doi: 1.3969/j.issn.1674-3849.212.5.3 2 1 29 72.7% 21 27.1% 24.26% 1 [1] 1 2 21 7.85 [2] 1 29 21% 662 26 9.38 211 3.8 27.2% 1 212-3-26 212-1-19 元 UL16/9-Y4/CMS/WYT1/ICMS

More information

DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0.

DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0. 118 217 5 38 1 DOI 1.3969/j.issn.5-6521.217.1.28 Food Research And Development 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1. 731 2. 731 - UPLC-MS/MS 5. 1 mol/l ProElut PXC 5 % - Thermo Hypersil Gold mm 2.1 mm 1.9 μm ESI

More information

197 2 相 关 背 景 多 巴 胺 D 2 类 受 体 包 括 D 2 D 3 和 D 4 受 体 1975 年,Randrup 首 先 提 出, 多 巴 胺 可 能 参 与 抑 郁 症 的 发 病 后 来 Maj 等 通 过 一 系 列 的 实 验 证 明, 几 乎 所 有 的 长 期 抗 抑

197 2 相 关 背 景 多 巴 胺 D 2 类 受 体 包 括 D 2 D 3 和 D 4 受 体 1975 年,Randrup 首 先 提 出, 多 巴 胺 可 能 参 与 抑 郁 症 的 发 病 后 来 Maj 等 通 过 一 系 列 的 实 验 证 明, 几 乎 所 有 的 长 期 抗 抑 196 未 来 药 物 新 型 多 巴 胺 D 2 类 受 体 部 分 激 动 剂 brexpiprazole 刘 长 鹰 1, 于 鹏 2, 李 祎 亮 1 1. 天 津 药 物 研 究 院 天 津 市 新 药 设 计 与 发 现 重 点 实 验 室, 天 津 300193 2. 天 津 药 物 研 究 院 医 药 信 息 中 心, 天 津 300193 摘 要 : 在 多 巴 胺 D 2 类 受

More information

2 : 111 ( Pinctada maxima), 13, 11,,,,,, 15, 25 cm, cm, 4 5 kg 1-2],,, 3-7] 24] 25-26],,, ] min, 1, 5 m 4 m, 20 m , 9-22],,, (

2 : 111 ( Pinctada maxima), 13, 11,,,,,, 15, 25 cm, cm, 4 5 kg 1-2],,, 3-7] 24] 25-26],,, ] min, 1, 5 m 4 m, 20 m , 9-22],,, ( 12 2 2 0 1 6 4 South China Fisheries Science Vol. 12, No. 2 Apr., 2016 doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-0780. 2016. 02. 016,,,, (,,, 510300) : ( Pinctada maxima),,,, 54. 55%, 0 0. 25 m - 2, 0 70. 31 gm - 2,

More information

864 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 of apoptosis related factors, decrease the incidence of adverse reactions, which is of great

864 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 of apoptosis related factors, decrease the incidence of adverse reactions, which is of great 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 6 期 2016 年 6 月 863 曲 妥 珠 单 抗 联 合 多 西 紫 杉 醇 治 疗 Her-2 阳 性 乳 腺 癌 的 临 床 研 究 * 周 永 安, 刘 训 碧 黄 石 市 中 心 医 院 ( 普 爱 院 区 ) 乳 腺 肿 瘤 外 科, 湖 北 黄 石 435000 摘 要 : 目 的 探 析 注 射 用 曲

More information

<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CCA3BA4542B2A1B6BE52746120496747BFB9CCE5D3EBB1C7D1CAB0A9B7D6C6DAB5C4B9D8CFB52E646F63>

<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CCA3BA4542B2A1B6BE52746120496747BFB9CCE5D3EBB1C7D1CAB0A9B7D6C6DAB5C4B9D8CFB52E646F63> EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶

More information

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min 25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.

More information

马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,

马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼, 1072 基 础 研 究 Basic Research www.tumorsci.org 肿 瘤 2011 年 12 月 第 31 卷 第 12 期 TUMOR Vol. 31, December, 2011 DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.12. 004 Copyright 2011 by TUMOR 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat

More information

标题

标题 吉林农业大学学报 2016 38 1 87 91 Journal of Jilin Agricultural University http xuebao jlau edu cn E mail jlndxb vip sina com 神 经 生 长 因 子 mrna 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 130118

More information

:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet

:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet 2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot

More information

淺 談 保 健 食 材 與 阿 茲 海 默 氏 症 之 預 防 食 營 系 詹 吟 菁 特 聘 教 授 由 於 醫 療 的 進 步 及 人 民 生 活 品 質 的 改 善, 平 均 壽 命 得 以 延 長, 罹 患 退 化 性 疾 病 的 人 口 也 隨 之 增 多 而 退 化 性 疾 病 的 患

淺 談 保 健 食 材 與 阿 茲 海 默 氏 症 之 預 防 食 營 系 詹 吟 菁 特 聘 教 授 由 於 醫 療 的 進 步 及 人 民 生 活 品 質 的 改 善, 平 均 壽 命 得 以 延 長, 罹 患 退 化 性 疾 病 的 人 口 也 隨 之 增 多 而 退 化 性 疾 病 的 患 各 位 親 愛 的 系 友 們, 大 家 好! 在 邁 入 2016 年 之 初, 再 次 感 謝 前 輩 師 長 及 系 友 們 40 年 來 在 協 助 母 系 發 展 方 面 所 付 出 之 心 血 及 系 友 們 不 斷 的 鼓 勵 與 支 持 母 系 在 全 體 師 生 共 同 努 力 經 營 之 下, 始 終 穩 定 的 成 長 且 屢 獲 佳 績 首 先 恭 賀 104 學 年 度 獲

More information

从 灵 敏 度 和 特 异 度 综 合 分 析, 认 为 PGⅠ 60 μg/l PGⅠ/PGⅡ 6 是 中 国 胃 癌 高 发 区 居 民 胃 癌 和 慢 性 萎 缩 性 胃 炎 筛 查 较 为 合 适 的 界 定 值 何 宝 国 等 [8] 应 用 乳 胶 增 强 免 疫 比 浊 法 进 行 测

从 灵 敏 度 和 特 异 度 综 合 分 析, 认 为 PGⅠ 60 μg/l PGⅠ/PGⅡ 6 是 中 国 胃 癌 高 发 区 居 民 胃 癌 和 慢 性 萎 缩 性 胃 炎 筛 查 较 为 合 适 的 界 定 值 何 宝 国 等 [8] 应 用 乳 胶 增 强 免 疫 比 浊 法 进 行 测 胃 蛋 白 酶 原 测 定 在 胃 癌 及 其 癌 前 病 变 诊 断 中 的 应 用 关 键 词 胃 蛋 白 酶 原 测 定 胃 癌 癌 前 病 变 胃 癌 是 我 国 死 亡 率 最 高 的 恶 性 肿 瘤, 提 高 早 期 胃 癌 的 检 出 率 可 大 大 降 低 胃 癌 死 亡 率, 改 善 病 人 生 活 质 量 日 本 早 期 胃 癌 较 高 的 发 现 率 及 手 术 率 得 益 于

More information

1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法

1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法 1448 相 对 校 正 因 子 在 中 药 多 指 标 测 定 中 的 应 用 研 究 进 展 1, 罗 祖 良 2, 仇 峰 1 1,, 韦 日 伟 2 1,, 覃 禹 2, 张 坤 1, 覃 洁 萍 2, 杨 美 华 1. 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京 100193 2. 广

More information

2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告

2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告 PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)

More information

時間

時間 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 手 冊 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 座 談 會 時 間 :104 年 7 月 9 ( 星 期 四 ) 1:30 PM 地 點 : 正 心 222 程 序 : 1. 新 生 第 二 階 段 報 到 1:20~1:30pm 2. 師 資 課 程 等 相 關 事 項 介 紹 1:30~2:00 pm 3. 各 老 師 領 域 專

More information

填 表 说 明 1. 本 表 所 填 数 据 截 至 时 间 为 2011 年 9 月 底 2. 本 表 请 用 A4 纸 双 面 打 印, 加 盖 学 校 公 章 后 上 报 3. 表 内 所 填 数 据 请 学 校 认 真 核 实, 确 保 准 确 无 误 4. 建 设 完 成 情 况 对 照

填 表 说 明 1. 本 表 所 填 数 据 截 至 时 间 为 2011 年 9 月 底 2. 本 表 请 用 A4 纸 双 面 打 印, 加 盖 学 校 公 章 后 上 报 3. 表 内 所 填 数 据 请 学 校 认 真 核 实, 确 保 准 确 无 误 4. 建 设 完 成 情 况 对 照 填 表 说 明 1. 本 表 所 填 数 据 截 至 时 间 为 2011 年 9 月 底 2. 本 表 请 用 A4 纸 双 面 打 印, 加 盖 学 校 公 章 后 上 报 3. 表 内 所 填 数 据 请 学 校 认 真 核 实, 确 保 准 确 无 误 4. 建 设 完 成 情 况 对 照 表 等 相 关 表 格 栏 高 不 够 请 自 行 增 加 5. 表 格 中 填 写 的 相 关 量

More information

Microsoft Word - 6--李铁松_news_.doc

Microsoft Word - 6--李铁松_news_.doc 重组七鳃鳗 PHB2 蛋白的原核表达及纯化 李铁松, 王颖, 高杨, 李庆伟 (, 116081) 摘要 : 为了研究 PHB2 蛋白的生物学活性及后续抗体的制备, 作者以前期构建的 pmd18-t-lm-phb2 质粒为模板, PCR 扩增 Lm-PHB2 基因全长 CDS 区, PCR 产物经 Hind III 和 EcoR I 双酶切后连接至表达载体 pet-32a, 构建重组质粒 pet-32a-lm-phb2

More information

H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g

H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g 16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%

More information

Supplemental information Exome sequencing identifies truncating mutations in the PRRT2 gene that cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia Wan-Jin Chen

Supplemental information Exome sequencing identifies truncating mutations in the PRRT2 gene that cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia Wan-Jin Chen Supplemental information Exome sequencing identifies truncating mutations in the PRR gene that cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia Wan-Jin hen,, Yu Lin, Zhi-Qi Xiong 3, Wei Wei, Wang Ni,, uo-he an

More information

TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C

TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C 2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~

More information

Microsoft Word - 8 期中文目次.doc

Microsoft Word - 8 期中文目次.doc 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 8 期 2013 年 4 月 989 养 阴 清 肺 糖 浆 指 纹 图 谱 研 究 1, 姜 姗 2, 冯 丽 君 2, 孔 慧 2, 曲 昌 海 2, 尹 兴 斌 2, 倪 健 1. 北 京 中 医 药 大 学 教 务 处, 北 京 100029 2. 北 京 中 医 药 大 学 中 药 学

More information

林学 园艺

林学 园艺 中国农学通报 2015,31(10):153-157 Chinese Agricultural Science Bulletin 蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展 杨 辉 李 猛 王 平 孙吉康 代明龙 中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 410004 摘 要 总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征 地理分布差异 组织培养 扦插嫁接 有性繁育 遗 传多样性分析 药用成分的种类 有效成分的分离纯化方法

More information

Microsoft Word - 360145.doc

Microsoft Word - 360145.doc 项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗

More information

932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio

932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio 2010 30 5 931 Ad-E1A 215123 Ad-E1A BALB /c Ad-E1A RT-PCR E1A H22 BALB /c H22 PBS Ad-E1A 5-Fu 7 10 9 pfu /ml Ad-E1A Ad-E1A 5-Fu 66. 7% 68. 8% P > 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu P < 0. 01 P < 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu

More information

5-25袁宏钧.indd

5-25袁宏钧.indd 第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of

More information

5期xin

5期xin 中 国 农 学 通 报 2014,30(5):23-27 Chinese Agricultural Science Bulletin 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 筛 选 及 生 长 曲 线 测 定 喻 华 英, 李 启 峰 ( 塔 里 木 大 学 动 物 科 学 学 院, 新 疆 阿 拉 尔 843300) 摘 要 : 为 探 究 犊 牛 腹 泻 病 中 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 形 成

More information

标题

标题 Vol. 36 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 2015 年 5 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇 摇 摇 摇 摇 摇 886 ~ 892 摇 摇 doi: 10. 7503 / cjcu20140965 一 种 新 的 混 合 斑 精 子 分 离 方 法 伍 贤 军 1,2, 赵 摇 兵 2, 缪 摇 璇

More information



 细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应

More information

,,, A ECs,, A ECs,,, A ECs,,,, ( 8) 213 3,,,,,, A ECs,, ( 9) 7,,,,,, ( 10),,, 28,,A ECs,,A ECs, A ECs 7 ;, ( ) ( 11) 3 BL M IPF, IPF [2

,,, A ECs,, A ECs,,, A ECs,,,, ( 8) 213 3,,,,,, A ECs,, ( 9) 7,,,,,, ( 10),,, 28,,A ECs,,A ECs, A ECs 7 ;, ( ) ( 11) 3 BL M IPF, IPF [2 512 Chinese Medical Journal of Metallurgical Industry,October 2005,Vol122 No1 5 3 1 1 1 2 1 ( 300020) 2 : : (5 mg/ kg), 3 7 28 : 3, ; 7 :,, ; 28 :,,, :, R 563 A 1005-5495 (2005) 05-0512 - 03 Ultrastructural

More information

戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s

戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s 370 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(3) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 戊 酸 雌 二 醇 片 联

More information

4期

4期 中 国 农 学 通 报 2013,29(04):39-43 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 药 荆 芥 最 新 研 究 进 展 1,2 1,2 赵 立 子, 魏 建 和 ( 1 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 北 京 100193; 2 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京

More information

Microsoft Word - _6-15_--CCMP93-CT-107.doc

Microsoft Word - _6-15_--CCMP93-CT-107.doc Yearbook of Chinese Medicine and Pharmacy, 23(6),303-320,2005 中 醫 藥 年 報 第 23 期 第 6 冊 編 號 :CCMP93-CT-107 補 中 益 氣 湯 抑 制 多 種 惡 性 細 胞 腫 瘤 生 長 機 轉 的 體 外 細 胞 與 肺 氣 虛 老 鼠 模 型 之 先 驅 研 究 沈 建 忠 長 庚 大 學 中 醫 系 摘 要

More information

第 33 卷 第 2 期 2010 年 4 月 - 149 - 脱 蛋 白 较 好 的 方 法 是 Sevag 法, 它 是 根 据 蛋 白 质 在 氯 仿 等 有 机 溶 剂 中 变 性 的 特 点, 使 蛋 白 质 变 性 成 胶 状, 此 法 条 件 温 和, 可 避 免 多 糖 的 降 解

第 33 卷 第 2 期 2010 年 4 月 - 149 - 脱 蛋 白 较 好 的 方 法 是 Sevag 法, 它 是 根 据 蛋 白 质 在 氯 仿 等 有 机 溶 剂 中 变 性 的 特 点, 使 蛋 白 质 变 性 成 胶 状, 此 法 条 件 温 和, 可 避 免 多 糖 的 降 解 - 148 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.2 April 2010 植 物 多 糖 的 研 究 进 展 陶 遵 威 1, 郑 夺 1, 邸 明 磊 2, 单 晓 菊 1 天 津 市 医 药 科 学 研 究 所, 天 津 300020; 2 天 津 中 医 药 大 学, 天 津 300073 2 摘 要 多 糖 是 由 单 糖 连 接 而 成 的 多 聚 物,

More information

2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE : g/ d a : b : a/ b Ag As Au Cd Ce 1817

2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE : g/ d a : b : a/ b Ag As Au Cd Ce 1817 2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 15 2 : 1006 2 446X (2008) 02 2 00152 17. (, 201800) :,, ;, : ; ; ; ; : R 15313 : A, () () ( ) () () () [ 1 ],, 1,, ( ) 1996 1997, 4 ( ), 12 42 [ 2 ], (1) 1, 36, 17

More information

mm 400 mm 15 mm EOF mm/10a Fig. 1 Distributions

mm 400 mm 15 mm EOF mm/10a Fig. 1 Distributions 7 2 2011 3 ADVANCES IN CLIMATE CHANGE RESEARCH Vol. 7 No. 2 March 2011 1673-1719 (2011) 02-0097-07 1961 2007 77 5 5 6 2 3 8 11 1980 1980 1990 2015 8 11 P426.6 A 7.86% 4 50 0.35 5 6 19 7 8 9 1 1906 2005

More information

Technical Acoustics Vol.27, No.4 Aug., 2008,,, (, ) :,,,,,, : ; ; : TB535;U : A : (2008) Noise and vibr

Technical Acoustics Vol.27, No.4 Aug., 2008,,, (, ) :,,,,,, : ; ; : TB535;U : A : (2008) Noise and vibr 8 8 Technical Acoustics Vol., No. Aug., 8,,, (, 8) :,,,,,, : ; ; : TB;U.+ 9 : A : -(8)--- Noise and vibration tests for fuel cell vehicel and noise sources identification SHEN Xiu-min, ZUO Shu-guang, CAI

More information

: 307, [], [2],,,, [3] (Response Surface Methodology, RSA),,, [4,5] Design-Expert 6.0,,,, [6] VPJ33 ph 3,, ph, OD, Design-Expert 6.0 Box-Behnken, VPJ3

: 307, [], [2],,,, [3] (Response Surface Methodology, RSA),,, [4,5] Design-Expert 6.0,,,, [6] VPJ33 ph 3,, ph, OD, Design-Expert 6.0 Box-Behnken, VPJ3 微 生 物 学 通 报 FEB 20, 2008, 35(2) 306~30 Microbiology 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@im.ac.cn 生 物 实 验 室 响 应 面 分 析 法 优 化 副 溶 血 性 弧 菌 生 长 条 件 刘 代 新 宁 喜 斌 * 张 继 伦 2 (. 200090) (2. 20202) 摘 要

More information

中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗

中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗 1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华

More information

[1] Nielsen [2]. Richardson [3] Baldock [4] 0.22 mm 0.32 mm Richardson Zaki. [5-6] mm [7] 1 mm. [8] [9] 5 mm 50 mm [10] [11] [12] -- 40% 50%

[1] Nielsen [2]. Richardson [3] Baldock [4] 0.22 mm 0.32 mm Richardson Zaki. [5-6] mm [7] 1 mm. [8] [9] 5 mm 50 mm [10] [11] [12] -- 40% 50% 38 2 2016 4 -- 1,2, 100190, 100083 065007 -- 0.25 mm 2.0 mm d 10 = 0.044 mm 640 3 300. Richardson--Zaki,,, O359 A doi 10.6052/1000-0879-15-230 EXPERIMENTAL STUDY OF FLUID-SOLID TWO-PHASE FLOW IN A VERTICAL

More information

分 级 和 气 管 是 否 受 侵 是 影 响 预 后 的 独 立 危 险 因 素 关 键 词 状 腺 肿 瘤 ; 癌, 乳 头 状 ; 预 后 Clinical outcomes of 600 papillary thyroid carcinoma patients ZHANG Zong-min,

分 级 和 气 管 是 否 受 侵 是 影 响 预 后 的 独 立 危 险 因 素 关 键 词 状 腺 肿 瘤 ; 癌, 乳 头 状 ; 预 后 Clinical outcomes of 600 papillary thyroid carcinoma patients ZHANG Zong-min, 移 性 鳞 癌 患 者 的 临 床 资 料, 比 较 不 同 治 疗 手 段 的 效 果 50 例 患 者 男 性 44 例, 女 性 6 例, 年 龄 29~73 岁, 中 位 年 龄 52.5 岁 ; 临 床 分 期 :N2c 占 64% (32/50),N3 占 36% (18/50) 30 例 患 者 行 双 颈 淋 巴 结 清 扫 术 50 例 患 者 均 行 放 疗, 剂 量 为 50~66

More information

中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 51 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 对 照 品 栀 子 苷 ( 批 号 1109-201115) 甘 草 苷 ( 批 号 1110-201106) 连 翘 酯 苷

中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 51 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 对 照 品 栀 子 苷 ( 批 号 1109-201115) 甘 草 苷 ( 批 号 1110-201106) 连 翘 酯 苷 50 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱 研 究 * 胡 建 兰, 邵 萌, 余 林 中 南 方 医 科 大 学 中 医 药 学 院, 广 东 广 州 510515 摘 要 : 目 的 研 究 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱, 建

More information

材料與方法

材料與方法 10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20

More information

[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig

[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig 40 6 2011 6 Vol.40 No.6 Infrared and Laser Engineering Jun. 2011 808 nm 2000 W 1 1 1 1 2 2 2 2 2 12 (1. 710119 2. 710119) : bar 808 nm bar 100 W 808 nm 20 bar 2 000 W bar LIV bar 808 nm : : TN248.4 TN365

More information

380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂

380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂 中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 379-384 http://www.cjcb.org 全 小 麦 啤 酒 酵 母 菌 株 的 诱 变 育 种 及 应 用 研 究 袁 仲 1* 张 百 胜 1 张 慎 举 1 马 绮 云 2 陈 柯 羽 2 ( 1 商 丘 职 业 技 术 学 院 园 林 食 品 加 工 系,

More information

PCR专题改.doc

PCR专题改.doc Primer3 http://frodowimitedu/cgi-bin/primer3/primer3_wwwcgi Primer5 Oligo665 Primer5 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=38536 Oligo667 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=40898 1 PCR 1

More information

114 () ml,60 2 g 20 ml, 120 r/ min,12. 3,, 3, ( Fluroscein diacetate, FDA). 2 mg FDA 1 ml, 50,0. 04 g/ L. FDA 1 1, 10 min,,., = / 100

114 () ml,60 2 g 20 ml, 120 r/ min,12. 3,, 3, ( Fluroscein diacetate, FDA). 2 mg FDA 1 ml, 50,0. 04 g/ L. FDA 1 1, 10 min,,., = / 100 48 1 () Vol. 48 No. 1 2009 1 Journal of Xiamen University (Nat ural Science) Jan. 2009 1, 1 3, 2 (1.,, 361005 ; 2., 730000) :, (DMSO). :DMSO,. 75 mmol/ L DMSO 48 h,, 1. 6 1. 8 ;10mol/ L 48 h,,;,. : ; ;

More information

Microsoft Word - 20120619-188_editing

Microsoft Word - 20120619-188_editing 固 定 时 间 - 离 子 选 择 性 电 极 浓 度 直 读 法 快 速 测 定 腐 竹 中 的 硼 砂 魏 姜 勉 1 高 向 阳 1 * 张 娜 (1 河 南 农 业 大 学 食 品 科 学 技 术 学 院, 郑 州, 450002, 中 国 ; 2 郑 州 科 技 学 院, 郑 州,450064, 中 国 ) 2 摘 要 : 为 建 立 一 种 快 速 测 定 食 品 中 硼 砂 的 新 方

More information

<4D6963726F736F667420576F7264202D20ECFAD0C0D0C0C2DBCEC4CCE1BDBB6F7665722E646F63>

<4D6963726F736F667420576F7264202D20ECFAD0C0D0C0C2DBCEC4CCE1BDBB6F7665722E646F63> 硕 士 专 业 学 位 论 文 论 文 题 目 鲍 温 病 临 床 病 理 特 征 和 几 种 治 疗 方 法 比 较 的 分 析 研 究 研 究 生 姓 名 指 导 教 师 姓 名 禚 欣 欣 康 定 华 专 业 名 称 皮 肤 性 病 学 研 究 方 向 皮 肤 肿 瘤 与 皮 肤 病 理 论 文 提 交 日 期 2013 年 4 月 I 鲍 温 病 临 床 病 理 特 征 和 几 种 治 疗

More information

< F63756D656E D2D796E2D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA34C6DA2DC4BFC2BC2D34C6DA2E6D6469>

< F63756D656E D2D796E2D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA34C6DA2DC4BFC2BC2D34C6DA2E6D6469> 梽 / 8 min min doi:.8/wst... R8. [ ] [ ] [] [6] [7] [8] [9~] [ ] [] min t /. min [] 元元元 --9 --7 ZX9-- BLP. ICR ~8 g SCXK -. nanas comosus L. Bolo Leaf Phenols BLP p - coumaric cid.% 巿

More information

1 y ml / h kg x mg /d y 2. 5 ml / h kg 0. 3 ml / h kg y = 0. 143 + 0. 046 x r = 0. 994 7 10 PAVELKA 2 Wistar 5 Br - Cl - HCO3 - ClO - 4 SCN - 14 d 82

1 y ml / h kg x mg /d y 2. 5 ml / h kg 0. 3 ml / h kg y = 0. 143 + 0. 046 x r = 0. 994 7 10 PAVELKA 2 Wistar 5 Br - Cl - HCO3 - ClO - 4 SCN - 14 d 82 1006-446X 2011 10-0001-021 1 2 1. 201800 2. 201800 2001 2010 80% 8 5 O 613. 43 R 969 A 1857 1912 1980 20 1 1. 1 SOREMARK 1960 12 d 1 SANGSTER 1983 10 d MAY 1992 8 ~ 14 d 6 ~ 8 d RAUWS 1975 91 mg /kg 3

More information

材料 方法

材料 方法 生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人

More information

典型自编教材汇总

典型自编教材汇总 江 苏 大 学 食 品 与 生 物 工 程 实 验 中 心 典 型 自 编 实 验 教 材 汇 总 目 录 1. 分 子 生 物 学 与 基 因 工 程 实 验 教 程 ( 中 国 轻 工 业 出 版 社 ).1 2. 食 品 工 程 原 理 ( 化 工 原 理 ) 实 验 指 导 书 ( 讲 义 )..20 3. 仪 器 分 析 实 验 指 导 书 ( 讲 义 ).58 4. 植 物 生 理 学

More information

strated that cell clones were decreased with increase of the concentration of procyanidins. PI staining a- nalysis showed that cell cycle was a

strated that cell clones were decreased with increase of the concentration of procyanidins. PI staining a- nalysis showed that cell cycle was a 32 2 Vol. 32 No. 2 2011 4 Journal of Jinan University Medicine Edition Apr. 2011 HepG2 1 1 2 1 1 1 1. 510632 2. 510080 HepG2 MTT WST-8 HepG2 PI Annexin V-FITC /PI Western blotting HepG2 - P < 0. 01 HepG2

More information

32期

32期 中 国 农 学 通 报 2014,30(32):38-42 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 草 药 饲 料 添 加 剂 对 黄 鳝 性 激 素 含 量 的 影 响 1,2 1,2 1,2 2 赵 庆 凯, 丁 炜 东, 邴 旭 文, 王 建 新 ( 1 南 京 农 业 大 学 无 锡 渔 业 学 院, 江 苏 无 锡 214081; 2 中 国 水 产

More information

untitled

untitled 理 類 CN9626 行 96 年 1 1 96 年 12 31 參 行 97 年 2 28 1 行 離 Lactic acid bacteria 金 Staphylococcus aureus 行 離 159 API 50 CHL 行 離 159 不 度 了 行 H 2 O 2 1 Lactobacillus plantarum 了 識 益 益 來 不 利 來 益 切 了 流 Joerger 2003

More information

基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作

基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作 16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 210037;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 233100) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting

More information

JOURNAL OF EARTHQUAKE ENGINEERING AND ENGINEERING VIBRATION Vol. 31 No. 5 Oct /35 TU3521 P315.

JOURNAL OF EARTHQUAKE ENGINEERING AND ENGINEERING VIBRATION Vol. 31 No. 5 Oct /35 TU3521 P315. 31 5 2011 10 JOURNAL OF EARTHQUAKE ENGINEERING AND ENGINEERING VIBRATION Vol. 31 No. 5 Oct. 2011 1000-1301 2011 05-0075 - 09 510405 1 /35 TU3521 P315. 8 A Earthquake simulation shaking table test and analysis

More information

+

+ ~ 1 ~ ~ 2 ~ 1-1 UHPLC-SEC 法对治疗性抗体的分析 TSKgel UP-SW3 UHPLC HPLC A TSKgel UP-SW3 2 μm (4.6 mm ID. 15 cm B UHPLC-SEC 1.7 μm (4.6 mm ID. 15 cm mmol/l (ph 6.7 + 2SO4 mmol/l Na +.5 % NaN3.35 ml/ 25 UV 28 nm 5

More information

名称未設定

名称未設定 127 Insulin IR Glucose transport GLUT4 P P IRS PI3K P GLUT4 Akt/PKB GSK-3 P Inactive GSK-3 Active GS Active GS Inactive P Glycogen synthesis 128 129 IRS-1 PH PTB 1242 IRS-2 PH PTB NGDY NDQY 1338 IRS-3

More information

~ ~ ~

~ ~ ~ 36 4 2015 385 ~ 397 The Chinese Journal for the History of Science and Technology Vol. 36 No. 4 2015 1951 ~ 1956 100049 100190 1951 ~ 1966 1951 ~ 1956 N092 P62-092 A 1673-1441 2015 04-0385-13 1951 ~ 1966

More information

< 1+1 <! " #$% &!"#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) "' )!"#$%&' (1% ( )* " + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物

< 1+1 <!  #$% &!#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) ' )!#$%&' (1% ( )*  + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物 213456!"# $ % # %557;&/55/?5,/ @@@!88>>!"#!$% &'()*+ 武汉市疾病预防控制中心 武汉 /&55, % 华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物教研室 武汉 /&55&5 & 武汉市第十一医院 武汉 /&5555,- O ' 0 ' =! 6!, 2 M*34!. 5 '2 ' 0 0* 6) 7 88^9:;0, 6! 89-4 O?@ 7%58

More information

材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响

材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响 水相中 组氨酸单分散分子印迹聚合物微球的合成 表征及其识别性能研究 李思平等 李思平 徐伟箭 较佳工艺条件下 在水性体系中选用无皂乳液聚合法制得的单分散微米级聚苯乙烯微球为种球 分别以组氨酸 甲基丙烯酸 或丙烯酸胺 乙二醇二甲基丙烯酸酯 为模板分子 功能单体和交联剂 合成了 组氨酸分子印迹聚合物微球 研究了形貌 粒径及其分布以及模板分子与功能单体之间的相互作用 分别以 激光粒度分析仪紫外分光光度法和红外光谱表征功能单体与交联剂之间的共聚情况

More information

10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the

10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the 2012 44 4 9 2 2 3 1. 225009 2. 200240 3. 200072 R PCR p215c3lyz R pqe-31 R IPTG Western blotting pqe- p215c3lyz COS- DH5α OD 600 Western blotting p215c3lyz Western blotting R R S852. 4 A 0529-5130 2012

More information

Microsoft Word - A200907-269.doc

Microsoft Word - A200907-269.doc 子 宫 肌 瘤 的 治 疗 研 究 进 展 朱 晗, 张 梦 云 成 都 中 医 药 大 学 药 学 院, 成 都 (610075) E-mail: zhuhan1122@yahoo.com.cn 摘 要 : 子 宫 肌 瘤 是 妇 科 常 见 病, 多 发 于 中 年 妇 女, 随 着 医 学 模 式 的 转 变, 及 人 们 对 生 命 质 量 要 求 的 不 断 提 高, 如 何 对 早 期

More information

综合报道

综合报道 55 doi:10.3969j.issn.1000-3606.2014.01.01 论 著 不 同 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 赵 玉 祥 岳 虹 霓 杨 占 华 江 苏 省 淮 安 市 保 健 院 新 生 儿 科 ( 江 苏 淮 安 223002) 摘 要 : 目 的 探 讨 妊 娠 期 高 血 压 疾 病 胎 膜 早 破 等 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 方 法 回 顾 性

More information

EV Allander [1] Human BocavirusHBoV 4 HBoV1-4 HBoV1 HBoV2-4 HBoV2 HBoV3 2 4 HBoV HBoV B19 973, : ( EV71 1 RNA mir-296 EV71 microrna mir

EV Allander [1] Human BocavirusHBoV 4 HBoV1-4 HBoV1 HBoV2-4 HBoV2 HBoV3 2 4 HBoV HBoV B19 973, : ( EV71 1 RNA mir-296 EV71 microrna mir 2008 3 EV71 19 16 84.2% EV71 EV71 RNA mir-296 EV71 EV71 HBoV1 NP IFN HBoV1 NS1 NS1-70 NF-κB HBoV1 VP2 RIG-I Journal of Immunology,Journal of Virology, ACS Nano, Biomaterials 30 8 6.83 Nature ACS NanoBiomaterialsJIVJI

More information

13期

13期 中 国 农 学 通 报,9():- Chinese Agricultural Science Bulletin 药 百 合 种 子 萌 发 及 染 色 体 倍 性 检 测 吴 昀, 马 怡 迪, 张 琳, 夏 宜 平 ( 浙 江 大 学 农 业 与 生 物 技 术 学 院 园 艺 系 / 农 业 部 园 艺 植 物 生 长 发 育 与 品 质 调 控 重 点 开 放 实 验 室, 杭 州 ) 摘 要

More information

the southern city was higher than that in the northern city. In rural areas the proportion of the nuclear family in the northern region was higher tha

the southern city was higher than that in the northern city. In rural areas the proportion of the nuclear family in the northern region was higher tha 2015 1 208 POPULATION & ECONOMICS No. 1 2015 Tot. No. 208 2010 100028 2010 2000 2010 2000 2010 C92-05 DOI 10. 3969 /j. issn. 1000-4149. 2015. 01. 004 A 1000-4149 2015 01-0034 - 15 A Comparative Analysis

More information

HGC27 MKN45 SGC7901 MGC803 BGC823 AGS GES μl ATCC RPMI X F12K Sigma SDS-PAGE PBS 4 d CCK-8 Tris-base Biosharp 10% CCK μ

HGC27 MKN45 SGC7901 MGC803 BGC823 AGS GES μl ATCC RPMI X F12K Sigma SDS-PAGE PBS 4 d CCK-8 Tris-base Biosharp 10% CCK μ 516 1002-0217 2017 06-0516 - 05 3 1,2, 1, 1, 1 1. 210029 2. 244000 3 RT-PCR Western-blot RNA CCK-8 Western-blot P < 0. 05 P < 0. 001 LC3Ⅱ P < 0. 001 P62 P < 0. 001 3 R 735. 2 A DOI 10. 3969 / j. issn.

More information

12-1b T Q235B ML15 Ca OH Table 1 Chemical composition of specimens % C Si Mn S P Cr Ni Fe

12-1b T Q235B ML15 Ca OH Table 1 Chemical composition of specimens % C Si Mn S P Cr Ni Fe * - - 100084 Q235B ML15 Ca OH 2 DOI 10. 13204 /j. gyjz201508023 STUDY OF GALVANIC CORROSION SENSITIVITY BETWEEN ANY COUPLE OF STUD WELDMENT OR BEAM Lu Xinying Li Yang Li Yuanjin Department of Civil Engineering

More information

Microsoft Word - 22 栗志民.doc

Microsoft Word - 22 栗志民.doc 44 6 Vol.44, No.6 2013 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2013 (Argopecten irradians concentricus) * 1 1 2 2 (1. 524025; 2. 524022) 2011 10 2012 4 (Argopecten irradians concentricus),,,,,,,, (P

More information

168 健 等 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 第1期 the view of the comprehensive rooting quality, spraying wood vinegar can change rooting situation, and the optimal concent

168 健 等 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 第1期 the view of the comprehensive rooting quality, spraying wood vinegar can change rooting situation, and the optimal concent 第 31 卷 第 1 期 2013 年 3 月 经 济 林 研 究 Nonwood Forest Research Vol. 31 No.1 Mar. 2013 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 健 1,2 杨国亭 1 刘德江 2 (1. 东北林业大学 生态研究中心 黑龙江 哈尔滨 150040 2. 佳木斯大学 生命科学学院 黑龙江 佳木斯 154007) 摘 要 为了解决小浆果扦插繁殖中生根率及成活率低等问题

More information

~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ % % ~ 20% 50% ~ 60%

~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ % % ~ 20% 50% ~ 60% 33 202 67 ~ 79 The Chinese Journal for the History of Science and Technology Vol. 33 No. 202 896 ~ 949 404 00083 896 ~ 907-908 ~ 98-99 ~ 949 - - N092 TF-092 A 673-44 202 0-0067-3 R. F. Tylecote R. I. McCallum

More information

... (1)....(3)..(5)... (22) (22)......(22)... (22)... (23)....(33)... (33)....(34)....(47)....(51).....(52)......(61)......(62)

... (1)....(3)..(5)... (22) (22)......(22)... (22)... (23)....(33)... (33)....(34)....(47)....(51).....(52)......(61)......(62) 97017608 OO ... (1)....(3)..(5)... (22).......(22)......(22)... (22)... (23)....(33)... (33)....(34)....(47)....(51).....(52)......(61)......(62) C 2002 2 2003 12 146 64.27 110 36 Logistic 2003 12 2004

More information

22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.

22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0. 2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.

More information

12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL

12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL ( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot

More information

22期xin

22期xin 中 国 农 学 通 报 0,0():86-90 Chinese Agricultural Science Bulletin SH 系 矮 砧 苹 果 园 节 水 灌 溉 比 较 高 敬 东, 王 骞, 蔡 华 成, 李 春 燕, 杨 廷 桢 ( 山 西 省 农 科 院 果 树 研 究 所, 山 西 太 谷 0085) 摘 要 : 为 了 研 究 出 一 套 适 宜 山 西 省 自 然 条 件 的 SH

More information

, GC/MS ph GC/MS I

, GC/MS ph GC/MS I S00017052 O O , GC/MS ph GC/MS I Abstract Drug abuse is a serious issue throughout the world. Amphetamine-type stimulants (ATS) are substances frequently used by drug abusers. There are significant needs

More information

211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont

211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont 210 毛 果 芸 香 碱 联 合 拉 坦 前 列 素 治 疗 原 发 性 急 性 闭 角 型 青 光 眼 的 疗 效 观 察 符 元 党 1, 郑 振 优 2, 林 再 雄 2, 周 吉 良 1. 昌 江 黎 族 自 治 县 中 西 医 结 合 医 院, 海 南 昌 江 572700 2. 海 南 医 学 院 附 属 医 院 眼 科, 海 南 海 口 570100 1 摘 要 : 目 的 探 讨

More information

096THU DOC

096THU DOC 2-1 DNA 1 DNA(plasmid DNA) pet21ahmyh hmyh (6A C) BL-21 Gold strain, 2003 2-1 pet21ahmyh Qiagen mini-preparation kit DNA DNA DNA( hmyh ) DNA( hmyh ) DNA DNA 2-2 DNA DNA AS-PCR 2 DNA DNA genomic DNA 30

More information

标题

标题 摇 1524 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 中 医 证 型 研 究 进 展 综 述 扶 伟 摇 徐 立 然 摇 马 秀 霞 摇 孟 鹏 飞 摇 宋 夕 元 摇 李 亮 平 摇 李 正 摇 丁 雪 摇 邱 荃 摇 杨 超 华 揖 摘 要 铱 摇 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 的 治 疗 过 程 中 因 其 病 因 复 杂, 临 床 症 状 多 样, 辨 证 分 型 及 临 床 疗 效 评

More information

畜牧 动物医学 蚕 蜂

畜牧 动物医学 蚕 蜂 中国农学通报 2015,31(20):181-185 Chinese Agricultural Science Bulletin 老河口市砂梨花期的物候特点分析 邓 环 1 马德栗 1 徐洪海 2 洪国平 1 2 武汉区域气候中心 武汉 430074 老河口气象局 湖北老河口 441800 1 摘 要 为掌握湖北省老河口市砂梨花期的物候规律 利用老河口市 20 年的砂梨裂蕾期 初花期 和盛花期 4

More information

公 Hygiene Pharmacy and Pharmacy Administration carbamazepine carbamazepine HLA-B*1502 SJS/TEN IC carbamazepine HLA-B*1502 carbamaz

公 Hygiene Pharmacy and Pharmacy Administration carbamazepine carbamazepine HLA-B*1502 SJS/TEN IC carbamazepine HLA-B*1502 carbamaz Carbamazepine Carbamazepine 敏 基 因 檢 測 提 示 機 制 公 林 口 長 庚 紀 念 醫 院 劑 部 師 盧 柏 先 鄭 吉 元 陳 琦 華 林 口 長 庚 紀 念 醫 院 檢 驗 醫 科 醫 檢 師 甯 孝 真 基 隆 長 庚 紀 念 醫 院 劑 科 師 陳 玉 瑩 摘 要 2011 7 HLA-B HLA-B*1502 carbamazepine SJS/TEN

More information

II ABSTRACT Severe acute respiratory syndrome (SARS) was the first severe infectious disease in the 21 century,which was caused by a new coronavirus,n

II ABSTRACT Severe acute respiratory syndrome (SARS) was the first severe infectious disease in the 21 century,which was caused by a new coronavirus,n I SARS 21 SARS-CoV GeneBank SARS-CoV Tor2 PCR N PN422 N 40% SARS N 95% N C N 38 15%~30% SARS N N 39 Western N 30 60aa 160~170aa N Bal b/c 8 39 Western Blot 8 6 2 N N 30 184 301 360 2 2 IgG1 10 6 10 9 M

More information

600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa

600 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 were significantly decreased, but the levels of IL-12 in two groups were significantly increa 现 代 药 物 与 临 床 Drugs & Clinic 第 31 卷 第 5 期 2016 年 5 月 599 喘 可 治 注 射 液 联 合 细 辛 脑 注 射 液 治 疗 小 儿 毛 细 支 气 管 炎 的 临 床 研 究 唐 辉 英, 佘 定 平, 马 颐 娇 深 圳 市 儿 童 医 院 呼 吸 科, 广 东 深 圳 518026 摘 要 : 目 的 探 讨 喘 可 治 注 射 液 联 合

More information

< 愛 滋 病 毒 感 染 與 人 類 乳 突 病 毒 感 染 之 相 關 問 題. 上 > 毒 在 細 胞 核 中 複 製 病 毒 基 因 可 分 為 三 個 區 塊, 包 括 非 轉 錄 的 長 調 控 區 (noncoding long control region;lcr, 約 1 Kb)

< 愛 滋 病 毒 感 染 與 人 類 乳 突 病 毒 感 染 之 相 關 問 題. 上 > 毒 在 細 胞 核 中 複 製 病 毒 基 因 可 分 為 三 個 區 塊, 包 括 非 轉 錄 的 長 調 控 區 (noncoding long control region;lcr, 約 1 Kb) 人 類 乳 突 病 毒 介 紹 張 淑 媛 台 大 醫 學 院 醫 技 系 人 類 乳 突 病 毒, 或 稱 人 類 乳 頭 狀 瘤 病 毒 (Human papillomavirus,hpv ) 是 一 種 無 套 膜 (un-enveloped) 具 二 十 面 體 外 殼 (capsid) 的 雙 股 DNA 病 毒 人 類 乳 突 病 毒 為 乳 突 瘤 病 毒 科 成 員 之 一, 能 夠

More information

第二部分

第二部分 中 国 农 通 报 0,7(04):478-48 Chinese Agricultural Science Bulletin 基 于 网 络 平 台 的 生 物 统 计 改 革 及 实 践 效 果 分 析 袁 文, 彭 惠 茹, 张 洪 亮, 刘 文 欣, 华 金 平, 苏 胜 宝, 孔 繁 玲 ( 中 国 农 大 科 技 术 发 展 研 究 院, 北 京 0093; 中 国 农 大 农 与 生 物

More information

( ) [11 13 ] 2 211,,, : (1),, 1990 ( ) ( ),, ; OD, ( ) ( ) ; , ( ), (2) 50 %,, 1999 ( ) ( ) ; (3),,

( ) [11 13 ] 2 211,,, : (1),, 1990 ( ) ( ),, ; OD, ( ) ( ) ; , ( ), (2) 50 %,, 1999 ( ) ( ) ; (3),, 21 3 2002 5 GEO GRAPHICAL RESEARCH Vol1 21, No1 3 May, 2002 : 100020585 (2002) 0320313211, (, 210093) : GIS, ( ) :, ; 4 ;,, : ; ; ; : F12919 : A 1 20 40 80, 90 [1 ], 5, 4 : (1), [2,3 ] ; (2) [4,5 ], [6

More information

《中国科学》A、E、G与F小开本版式设计

《中国科学》A、E、G与F小开本版式设计 222 E 2006, 36(2): 222~234 * 1** 1,2 1,2 1,2 1,2 3 3 1 1 1,2 (1., 100080; 2., 100039; 3., 200031),. ;,,.. 20 90 (human genome project, HGP), ; HGP 2003, 21. (proteomics) ; (computational proteomics),,,

More information

< F63756D656E D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA31C6DA2D30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D31A3A92E6D6469>

< F63756D656E D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA31C6DA2D30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D31A3A92E6D6469> 绎 阴 元元 / 100102 MCAT MCAO 84~333 mg kg -1 167 333 mg kg -1 MCAT 84 167 mg kg -1 MCAT 27% 37% 84~333 mg kg -1 MCAT 21%~ 32% MCAO LDH 10%~ 12% MDA 28%~38% SOD 15%~36% GSH 14%~36% doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2013.01.016

More information

PowerPoint Presentation

PowerPoint Presentation High Efficiency Particulate Air Filter HEPA CO 2 74 30 min 2 min CO 2 37 5 CO 2 CO 2 90 14 h) 3000 CO 2 4-20 -80-196 1000 2500 rpm Zeiss 70 1. 5 2. 3. 4. 15 20 1 2 3 4 2 NaOH 5 6 5 30 min

More information

untitled

untitled 20 1 2010 10 Vol.20 Special 1 The Chinese Journal of Nonferrous Metals Oct. 2010 1004-0609(2010)S1-s0127-05 Ti-6Al-4V 1 2 2 (1. 710016 2., 710049) 500~1 000 20 Ti-6Al-4V(TC4) TC4 800 TC4 800 TC4 TC4 800

More information