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1 生物安全概論暨 優良微生物學操作 陳吳銓 (Chen-Wu, Chuan) 國家衛生研究院 環境暨職業安全衛生室 ( 助管理師 ) / 生物安全委員會 ( 執行秘書 ) 斑蚊照片 : 朱美蓮攝疾管局鄧華真科長提供 本次課程目標 生物安全概論 危害辨識 風險評估 生物材料等級分類 危險群 Risk Group (RG 1~4) 生物安全實驗室 防護目的 (Containment/Barrier) 生物安全等級 (BSL 1~4) 優良微生物操作技術 實驗室技術 意外事故應對計畫及緊急應變程序 消毒及滅菌 感染性物質運輸之簡介 ( 建議參考 Laboratory Biosafety Manual, WHO 2004) 生物安全第一等級至第三等級實驗室安全規範 ( 第一版 2013, 疾病管制署 ) 各生物安全實驗室設備及操作須知 (BSL1~2Lab.) 生物安全櫃 BSC( NSF/ANSI 49 Class I~III ) 實驗室安全資訊與應變 ( 危害標示 SDS ) 參考資料 2

2 實驗危害 Hazards Globally Harmonized System Laser hazard High voltage Radiation Biohazard Flammable Explosives Corrosives Gases Acute Toxicity Other Heath Environmental Systemic Substances Effects Effects Health Effects 易燃物質 爆炸物 腐蝕刺激物質 加壓氣體 急毒性物質 其他健康危害 環境危害 系統健康危害 [ 記者洪美秀 / 竹市報導 ] OO 大學生命科學二館傳出火警, 消防人員雖很快撲滅火勢, 但因起火地點是實驗室, 恐影響學生及教授的實驗成果 學生和教授趕到現場了解損害情形 消防人員雖很快撲滅火勢, 但因起火地點是實驗室, 恐影響學生及教授的實驗成果, 現場仍有濃濃嗆鼻味道 現場仍有濃濃嗆鼻味道, 一片狼籍 4

3 生物性危害 感染 (Infection): 生物體在人體內繁殖生長所致 ( 如 : 流行性感冒 痲疹 肺結核 ) 過敏 (Allergy): 生物體以過敏原角色經重覆暴露致使人體免疫系統過度反應所致 ( 如 : 過敏性肺炎 氣喘 過敏性鼻炎 ) 中毒 (Toxicity): 暴露於生物體所產生之毒素 ( 細菌內毒素 細菌外毒素 真菌毒素 ) 所致 ( 如 : 發燒 發冷 肺功能受損 ) 5 BIOLOGICAL MATERIAL Bacteria Viruses Fungi Parasites Pi Prions Zoonotic Pathogens Toxins Recombinant DNA Genetically Modified Organisms Viral Vectors Synthetic DNA and Synthetic Biology Cell Lines 6

4 生物安全與防護的關聯 實驗設施設計 Containment 操作者的安全裝備 Personal Protective Equipment (PPE)& Safety Equipment 標準及特殊的微生物學實驗操作 Good Microbiological Techniques, GMT 初級防護 : 保護人員和緊鄰實驗室的周邊環境次級防護 : 保護緊鄰實驗室周邊之外的環境 7 Containment( 圍堵 / 防護 ) Containment is based on the combination of: -Laboratory practices and techniques -Safety equipment -Laboratory facilities Primary Containment The protection of personnel and the immediate laboratory environmental from exposure to infectious agents Accomplished by good microbiological i l technique (GMT) and the use of safety equipment Secondary Containment The protection of the environment external to the laboratory from exposure to infectious materials This is provided by a combination of laboratory design and operational practices 8

5 生物實驗室安全防護目的 保障人身安全 ( 安全衛生需求 ) 保障操作者本身的安全 維護實驗室其他成員的安全 保障實驗室外其他第三者的安全 避免環境污染 ( 環境保護需求 ) 避免造成實驗室內環境的污染 含儀器, 如冰箱 離心機 微量分注器等 實驗桌 門把及實驗室地面等 避免造成實驗室外環境的污染 如動物飼養場 河川 魚 土壤 植物或作物等 研究成果 ( 實驗需求 ) 9 實驗室生物安全及生物保全 實驗室生物安全係指經由防護原則 技術及操作以預防病原體 毒素暴露或溢出之意外 實驗室生物保全係指持有感染性病原體 檢疫管制之疫病原 具侵襲性之外來種 基因改造生物的機構或個人防範以上持有物遺失 失竊 不當使用 誤用 或意圖散播 實驗室保全內容包含 : 實驗材料物理性保全 工作人員保全 實驗物品控管責任 運送保全 資訊保全 相關管理計畫 10

6 Safety Culture Ladder/The Perfect Friend 11 實驗室操作造成感染之例證 ( 資料來源 NIH) 實驗室相關感染 (LAI) 報導數目遠低於發生次數原因 根據病原體發病率類型分類 LAI: 病毒 > 細菌 > 立克次體 > 寄生蟲 > 真菌 沒有正式的報告機制 隱瞞不願公佈錯誤 32 實驗室事件與疾病關聯不明顯 ( 尤其是潛伏期長的感染 ) 64 可能未識別出亞急性感染, 但血 82 清轉化可能發現亞急性感染 ( 如 果基線明顯確定 ) 143 調查時事件已過, 憑回憶進行的 報告可能不精確或不完整 TOP 10 LAI's ( ) 31 M. tuberculosis 199 Arboviruses 192 Coxiella burnetti Hantavirus Brucella spp. HBV Shigella spp. Salmonella spp HCV Neisseria meningitidis 12

7 病原微生物病毒等危險等級分類 類別描述 RG1)( 健康成年人 ) 不太可能致病 B. Subtilis 枯草芽孢桿菌 ; Saccharomyces cerevisiae 釀酒酵母 RG2) 可能導致人類疾病, 不太可 S. Aureus 金黃葡萄球菌,Legionella 能在人群中傳播, 通常有有效預 spp 軍團桿菌屬,Human herpes virus 防或治療措施人類疱疹病毒 ;Polio virus 脊髓灰質炎病毒 ;HBV B 型肝炎病毒 RG3) 可能導致嚴重人類疾病, 可能在人群中傳播, 通常有有效預防或治療措施 RG4) 導致嚴重人類疾病, 對工作人員造成嚴重危害, 很可能在人群中傳播, 通常沒有有效預防或治療措施 例 Brucella abortus 布魯氏桿菌,M. tuberculosis 結核分枝桿菌 ;HIV 人類後天免疫不全症病毒 ;Plasmodium spp 瘧原蟲屬 Lassa fever virus 拉薩熱病毒 ; Marburg virus 馬堡病毒 ;Ebola virus 伊波拉病毒 13 致癌病原分類 Classification Scheme for Oncogenic Agents Low Risk Oncogenic Viruses 低致癌病毒 Rous sarcoma SV 40 CELO Ad7 SV40 Polyoma Bovine papilloma Rat mammary tumor Avian leukosis Murine leukemia Murine sarcoma Mouse mammary tumor Rat leukemia Hamster leukemia Bovine leukemia Dog sarcoma* Mason Pfizer monkey virus Marek's Guinea pig herpes Lucke (Frog) Adenovirus Shope fibroma Shope papilloma *Although listed by NCI, it is questionable whether a dog sarcoma virus has been isolated. Moderate Risk Oncogenic Viruses 中致癌病毒 Ad2 SV40 FeLV HV Saimiri EBV SSV GaLV HV ateles Yaba FeSV High Risk Oncogenic Viruses 高致癌病毒 At the present time, there are no known oncogenic viruses classified as high risk. 資料來源 : NCI((National Cancer Institute) &University of Wisconsin Milwaukee 14

8 細胞及組織的操作 使用人類細胞及組織潛在危險包括血液傳染病原如 :HBV, HIV, HCV, HTLV, EBV, HPV 及 CMV, 又如 Mycobacterium tuberculosis( 可能於人類肺部組織 ) 實驗室使用細胞或組織等實驗材料操作應進行風險評估 人類和其他靈長類細胞實驗操作應於 BSL2 防護及操作要求下執行 所有實驗步驟應於生物安全櫃 (BSC) 中進行, 實驗廢棄物丟棄前需經過高溫高壓滅菌或去活化處理 應嚴格遵循配備之各人防護裝備包括 : 實驗衣 手套 護目鏡 操作人類組織及細胞的實驗人員應列冊, 並保存其血清檢體, 各單位應提供 B 行肝炎疫苗的施打及相關諮詢, 並定期辦理其人員健康檢查及建立健康狀況異常監控機制 操作 NHP(Normal human prostatic ) 細胞株 血液 體液及其他人類檢體組織者亦同等視之 資料來源 : BMBL5 2007: Appendix H - Working with Human, NHP and Other Mammalian Cells and Tissues 15 腫瘤細胞株 (Oncogenic/ Cancer Cell Line) 操作是否有操作風險? oncogenic cell lines 如本身具有傳染性病毒, 在使用上有較高的風險 一般而言對實驗室直接操作或動物模式研究使用之 oncogenic cell lines, 常以細胞中含血液傳染性病毒及相關病毒做為風險評估的依據, 但並未把癌細胞本身視為 具癌症傳染性 的生物材料 最近的醫學文獻指出器官移植使捐贈者的癌症傳播給受贈者 尚有文獻指出暴露於 oncogenic cell lines 導致腫瘤生長 ( 動物實驗 ) 在一般社會行為的接觸下, 並無證據顯示腫瘤細胞會水平相互傳遞 腫瘤細胞具傳染力一般而言需要特殊的條件如 : 免疫功能被抑制 同基因同源移植 (Sygeneic) 資料提供 : Maureen O Leary, PhD, MBA, CBSP, Uni. Massachusetts-Amherst 16

9 近年新興使用的載體 : Lentiviral vector 由 lentivirus 改造而來 :Packaging plasmid+ Envelopment plasmid+ HIV transfer plasmid+ Self-inactivating ating (SIN) vectors 可感染不分裂 (non dividing) idi 或分化末期 (terminally differentiated) 的細胞 現在證明源自 HIV 的 Lentiviral vector 可有效地進入未刺激的人類 CD34+ 細胞及樹枝狀細胞, 而傳統的反轉錄病毒載體則不易進入此兩類細胞 需於第二級生物安全防護 (BSL2/P2) 等級下操作 若為 oncogene 相關研究, 需於 P2+/BSL2+ 下操作 需定期檢測 RCL(Replication Competent Lentivirus ) 17 實驗操作者如何進行自我風險評估 - 四項要領 我的實驗操作使用哪些材料? 預測潛在之安全考量 明瞭 ( 危害物質 ) 進入身體的途徑 生物醫學相關研究領域實驗操作者對生物性 化學及物理性危害需具備的知識 使用這些材料的潛在危險為何? 危害辨識 風險評估 18

10 不安全的環境職業安全衛生設施災害實驗操作者如何進行自我風險評估 - 四項要領 我如何避免自己 同事及環境, 因實驗操作而暴露於潛在危機中 實驗使用物品的相關參考資料 行政面的控管 我如何維護自身 同事及環境安全 實驗設備的工程控管 個人防護裝備 19 職業災害原因與對策 不安全的環境 ( 機械設備 ) 自主管理 不安全的行為 ( 動作 ) 安全衛生管理 20

11 危害評估 Job Hazard Analysis Job on Operation title 日期 Date Performed 地點 Job Location 操作者 Title of Employee Doing Job 危害 Special or Primary Hazard 個人防護裝備 Personal Protective Equipment required or recommended 實驗步驟 Basic Job Steps 可能的危害 Existing 建議 Recommended Corrective and potential hazaed Measures 細胞繼代 1. 打開瓶蓋 Remove tube cap 1. 手接觸瓶蓋 Hand touch tube cap 2. 吸取培養基 remove media 2. 液滴掉落 Dropping from plate culture 戴手套 Wear latex disposable gloves for Handling culture 2 吸取培養基 di 2 液滴掉落 D i 全面罩防護潑濺 Full face shield required to protect against splash 病毒濃縮 更新細胞計數器 Replace of an old cell counter generating aerosol with a new one 萬一離心管破裂 What if the centrifuge tube broke while spinning? 萬一停電 What if the power supply is interrupted? 21 MMWR / January 6, 2012 / Vol

12 生物實驗意外感染主要途徑及類型 生物實驗意外感染主要途徑 典型生物實驗意外類型 吸入氣溶膠 ( 氣霧 )( 意外 針頭 / 注射器刺傷導致或由於工作操作吸入 ) 感染性物質溢出 / 噴霧接 通過皮膚接觸觸或吸入 黏膜接觸污染物 碎玻璃 / 其他銳器扎傷 吸收攝入 從移液管吸入 動物咬傷 / 抓傷或外寄生蟲造成人畜共通之疾病感染 23 MMWR / January 6, 2012 / Vol

13 疫情報導 - 生安專欄 25 生物污染物擴散至 BSL-3 實驗室外失誤樹分析結果 (1) 疫情報導第 28 卷第 22 期 26

14 生物污染物擴散至 BSL-3 實驗室外失誤樹分析結果 (2) 疫情報導第 28 卷第 22 期 27

15 感染性微生物危險群 (risk group) Laboratory Biosafety Manual, WHO (2004) 29 生物實驗室及生物危險群相對應之安全等級 操作及設備區分 - WHO GMT: Good Microbiological Techniques 30

16 影響微生物 risk group 分類因素 各國家 ( 地區 ) 考量因素 : 微生物致病性 微生物傳播方式及宿主範圍 ( 當地群體免疫程度 宿主人口密度及活動 病媒狀況及飲水衛生環境衛生標準 ) 當地可使用之有效預防方法 ( 疫苗或清潔衛生措施 ) 當地可使用之有效治療方法等 現有分類 : 美國 歐盟 世界衛生組織 其他國家( 如 : 加拿大 澳洲 比利時 新加坡與日本等 ) 等級低 危害低 American Biological i l Safety Association(ABSA) Risk Group Classification for Infectious Agents / /i Risk Group 因不同國情而差異 Picornaviruses a. Polioviruses-all i ll types, wild and attenuated 列為 risk group 3 生物材料 ( 依據國科會 基因重組實驗守則 ( page 53) php?viralgroup=picornaviridae 32

17 基因重組實驗守則科技部生命科學研究發展司 78 年 9 月初版 89 年 11 月增修 91 年 1 月增修 92 年 5 月增修 93 年 6 月增修版 感染性生物材料管理辦法 ( 原感染性生物材料管理及傳染病病人檢體採檢辦法 ) 94 年 9 月 26 日訂定發布 95 年 3 月 26 日施行 95 年 4 月 11 日修正發布 103 年 3 月 11 日修正發布 34

18 衛生福利部現行主要法規與行政管理規定 傳染病防治法 ( 第 4 條第 4 項 第 34 條 第 64 條 第 69 條 ) 感染性生物材料管理辦法 以下簡稱辦法 感染性生物材料管理作業要點 以下簡稱要點 35 衛生福利部 感染性生物材料管理作業要點 發布 修正 各級危險群微生物名單, 如附表一至附表四 (Risk Group, RG) 36

19 衛生福利部 感染性生物材料管理作業要點 發布 修正 各級危險群微生物名單, 如附表一至附表四 (Risk Group, RG) 微生物危險群等級 (Risk Group, RG) 查詢 ( 美國生物安全協會 ) 加拿大衛生部病原體安全資料表 (PSDS) 37 衛生福利部 感染性生物材料管理作業要點 發布 修正 附表五 生物毒素分類 項目及管制總量 分類 一般性生物毒素 管制性生物毒素 項目 項目 管制總量 1.Cholera toxin Botulinum neurotoxins 0.5mg 2.Clostridium perfringens toxins Diacetoxyscirpenol 1000mg 3.Corynebacterium diphtheriae toxin Staphylococcal enterotoxins 5mg (Subtypes:A B C D 及 E) 4.Mycotoxin T-2 toxin 1000mg 5.Pertussis toxin 6.Shiga toxin;shiga-like toxins 7.Staphylococcus aureus toxins 8.Tetanus toxin 9.Verotoxin 10.Verruculogen 38

20 法規應注意事項摘要 ( 重要 ) 實驗室持有 保存或處分第二級以上危險群微生物 (RG2) 或生物毒素, 應經生安會或生安專責人員審核通過, 始得為之 實驗室持有 保存或處分 RG3 以上或管制性生物毒素, 除依前項規定辦理外, 設置單位並應報中央主管機關核准, 始得為之 (#8) 實驗室應定期盤點其持有 保存之 RG2 以上微生物或生物毒素品項及數量 發現有不符或遺失等異常事件時, 應立即通報生安會或生安專責人員 設置單位對於 RG3 以上微生物或管制性生物毒素發現有異常事件時, 應於 24 小時內通報主管機關 (#9) RG2 以上微生物或生物毒素保存場所, 應由專責人員負責管理 設門禁管制 備有保存清單及存取紀錄, 主管機關於必要時, 得會同相關機關進行查核 (#11) 運送感染性生物材料, 應符合中央主管機關另定之三層包裝規定 ; 以空運方式運送感染性生物材料, 其包裝規定並應遵照目的事業主管機關規定辦理 感染性生物材料於運送途中發生洩漏情事時, 運送相關人員應立即為必要之處置, 並通知委託運送之設置單位 設置單位於接獲通知後, 應立即通知事故所在地方主管機關 (#14) 發生實驗室生物安全意外事件或有發生之虞時, 主管機關得要求其停止實驗室使用相關感染性生物材料 前項實驗室於安全疑慮解除後, 經設置單位生安會或生安專責人員確認安全無虞, 並報主管機關同意後, 始得再行使用 (#17) BSL2 以上實驗室, 應於明顯處標示生物安全等級 生物危害標識 實驗室主管 管理人員姓名 聯絡電話及其緊急處理措施 設置單位應定期辦理前項實驗室工作人員健康檢查及建立健康狀況異常監控機制 對於使用 RG3 ( 含 ) 以上微生物之實驗室工作人員, 應保存血清檢體至其離職後 10 年 但使用 RG2 以下危險群微生物之實驗室工作人員, 其血清檢體及保存期限, 由生安會定之 (#18) 實驗室新進人員應接受實驗室生物安全課程至少 8 小時 實驗室工作人員每年應取得實驗室生物安全持續教育至少 4 小時 BSL3 以上實驗室新進人員, 應參加中央主管機關認可之生物安全訓練 (#19)( 註 :# 數字為感染性生物材料管理辦法條文編號 ) 39 生物材料的查詢 ( 國外 ) ATCC (The Global Bioresource Center)

21 BSL-2 實驗室要求 41 Laboratory Biosafety Level Criteria Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition 2007, CDC & NIH, US Dept. HHS * PPE Personal Protective Equipment 42

22 Vertebrate Animal Biosafety Level Criteria Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th Edition 2007, CDC & NIH, US Dept. HHS * PPE Personal Protective Equipment 43 BSL-1 44

23 BSL-2 BSC autoclave 45 Biohazard warning sign for laboratory doors 疾病管制署 實驗室生物安全等級及生物危害標識 範本 46

24 典型 BSL3 實驗室 Sealed-window Shower Inter-locked doors Key-control BSL2 實驗室 47 BSL-3 Windows must be closed, sealed and break-resistant Cfg with safety bucket or containment rotor BSC Autoclave 非手控式水槽 Shower Anti-room doors selfclosing and interlock Dirty change 生物危害標誌 Inward flow Clean change

25 BSL-4 摘自 Maureen Ellis Containment Laboratory Programming and Planning Public Health Agency of Canada, PHAC 49 實驗室內排氣設備分類 50

26 化學櫃或層流櫃 vs 生物安全櫃 不要把化學櫃或層流櫃當作 BSC 使用 51 生物安全櫃量測? 勞工安全衛生研究季刊 生物安全櫃性能之量測陸忠憲 1 鄭詠仁 1 張靜文 2 于台珊 3 蘇恆立 1 93 年 12 月第十二卷第四期第 頁 1 工業技術研究院環境與安全衛生技術發展中心 2 國立台灣大學環境衛生研究所 3 行政院勞工委員會勞工安全衛生研究所 下列角色產生的疑問? 問題? 應注意? 實驗室操作人員 (RA) 實驗室主管 (PI) 研究單位主管 行政採購人員 工程維護人員 BSC 檢測人員 環安衛人員 單位首長 那進口機器效能呢? 52

27 國際生物安全櫃標準簡介 國內目前尚未有關於生物安全櫃產品認證 安裝檢測及年度檢測之國家標準, 而眾多使用中之生物安全櫃大都由歐美各國家進口與部分國產品 美國 :National Sanitation Foundation -NSF/ANSI 49 歐盟 :European Standard d -EN12469 澳洲 :Australian Standard -AS AS1807 註 日本 :JIS K 3800:2000 註 :BSC 製造標準 AS2252.2(Class II biological safety cabinets) 及檢測儀器設備的安全標準 AS

28 生物安全櫃的選擇 (1) 55 生物安全櫃的選擇 (2) 56

29 Setting up the Cabinet 不阻擋欄柵 Do not block grille or airflow slots 使用前消毒工作面 Disinfect work area and work surfaces before setting up 窗戶開到正確高度 Check that the window is in the correct position 確定排水閥關閉 Make sure that the drain valve is closed 確定所須物品到位 Make sure that everything needed to complete the work is in the cabinet 清潔與骯髒物品分開擺放 Segregate clean items from ones that will get contaminated A typical layout for working clean to dirty within a Class II BSC. Clean cultures (left) can be inoculated (center); contaminated pipettes can be discarded in the shallow pan and other contaminated materials can be placed in the biohazard bag (right). This arrangement is reversed for left-handed persons. Figure 11. A typical layout for working clean to dirty within a Class II BSC BSC 內使用明火的必要性?? 58

30 生物安全櫃 (BSC) 之使用 Open flames are not required in the near microbe-free environment of a biological safety cabinet. On an open bench, flaming the neck of a culture vessel will create an upward air current that prevents microorganisms from falling into the tube or flask. An open flame in a BSC, however, creates turbulence that disrupts the pattern of HEPA-filtered air being supplied to the work surface. When deemed absolutely necessary, touch-plate micro burners equipped with a pilot light to provide a flame on demand may be used. Internal cabinet air disturbance and heat buildup will be minimized. The burner must be turned off when work is completed. Small electric furnaces are available for decontaminating bacteriological loops and needles and are preferable to an open flame inside the BSC. Disposable or recyclable sterile loops should be used whenever possible. 59 生物安全櫃 (BSC) 之使用 (3) Touch-O-Matic* Bunsen Burner Bacti-cinerator Glass bead sterilizer BSL-2 實驗室優良微生物操作規範與技術 - 曾燦璋 60

31 Quiz: 請協助點出照片未來可以改善的地方 ( 每張至少 2 個 ) 61 BSC Field Performance Tests (NSF/ANSI 49) Primary Containment for Biohazards: Selection, Installation and Use of Biological Safety Cabinets(3 rd Ed), USA 62

32 Please read the User s Manual before operating the equipment 63 生物危害警示標誌 張貼於操作使用血液 / 具潛在感染性材料 (OPIM) RG2 以上微生物之實驗區域 張貼於儲存血液 /OPIM RG2 以上微生物之冰箱 液態氮桶等貯存設備 標示於操作血液 /OPIM RG2 以上微生物之生物安全櫃 離心機等有污染之虞儀器設備 標示於運送血液 /OPIM RG2 以上微生物之容器 64

33 Principle i of Biosafety Level BSL 1 = Practice + Safety equipment + PPE + P1 BSL 2 = Practice + Safety equipment + PPE + P2 BSL 3 = Practice + Safety equipment + PPE + P3 BSL 4 = Practice + Safety equipment + PPE + P4 65 US CDC Guidelines for Safe Work Practices in Human and Animal Medical Diagnostic Laboratories MMWR / January 6, 2012 / Vol. 61 CONTENTS 1. Introduction: A Culture of Safety for Diagnostic Laboratories 2. Biological Risk Assessment and Biosafety Guidelines 3. Fundamental Safety Practices in Diagnostic Laboratories 4. Tuberculosis Laboratory 5. Autopsy/Necropsy, Surgical Pathology 6. Parasitology Laboratory 7. Mycology Laboratory 8. Virology Laboratory9. Chemistry Laboratory 10. Hematology and Phlebotomy Laboratory 11. Blood Bank 12. Veterinary Diagnostic Laboratory 13. Storing, Packaging, and Shipping Infectious Substances 14. Emergency Procedures and Responsibilities 15. Biosafety Education 16. Continuous Quality Improvement 66

34 生物安全第一等級實驗室設施與操作規範 (1) 衛生福利部疾病管制署 一 生物安全第一等級實驗室 (Biosafety Level 1 Laboratory, BSL-1 Lab) ( 一 ) 適用範圍 BSL-1 實驗室適用於處理已知特性, 不會令免疫力健全之成年人致病, 對實驗室人員及環境帶來之可能危害甚小的微生物 ( 二 ) 實驗室設施規範 1 實驗室位置 必備項目 實驗室無需與大樓建物內部的一般動線相區隔 可以門與公共區域做區隔, 惟應符合其他相關法規之規定 門的大小須足以讓設備能夠進出 1.2 建議項目 提供文書處理與資料收集的工作處所位於實驗室工作區域外 工作通常在開放式工作台上, 無需特殊防護設備或實驗室設施設計, 必要時可依據風險評估結果增加適當防護裝備 2 實驗室物理結構 ( 牆面 地板 天花板 ) 2.1 必備項目 實驗室應採取便於清理的設計, 不宜鋪設地毯 2.2 建議項目 實驗室家具 ( 桌檯 ) 須能支撐預期載重及用途 工作台 櫥櫃與設備之間, 應預留便於清理的空間 工作台表面需為防水 抗熱 抗有機溶劑 酸鹼及其他化學物質 實驗室工作用椅應使用無孔防滲且易於消毒除污的材質 3 實驗室空調處理系統 : 無 4 實驗室壓力系統 : 無 5 生物安全櫃之要求 : 無 67 生物安全第一等級實驗室設施與操作規範 (2) 衛生福利部疾病管制署 消毒滅菌和廢棄物清理 6.1 必備項目 實驗室感染性廢棄物之處理應遵循感染性廢棄物相關法規執行 6.2 建議項目 於實驗室鄰近處提供高溫高壓蒸氣滅菌器或其他可接受的廢棄物處理方式 7 實驗室設施 必備項目 實驗室需設置洗手槽, 宜設置在近出口處 裝設洗眼設施 8 實驗室安全措施 8.1 必備項目 實驗室主管 ( 計畫主持人 ) 應執行本身機構所明訂之實驗室進出管制之政策, 並據以施行 實驗室必須符合消防 安全衛生等相關法規之要求 實驗室內應設置火警警報系統 實驗室應針對火災 地震等災害及實驗室生物安全意外事件擬訂實驗室緊急應變計畫 ( 另可詳參本規範 柒 緊急應變計畫 ) 9 實驗室操作規範 9.1 進入實驗室前應遵循事項 實驗室主管 ( 計畫主持人 ) 應確保實驗室相關人員已受與其職務相關的安全操作訓練, 如防範曝露於病原之必要防範措施以及曝露評估程序等訓練, 工作人員應定期接受再訓練與評估 當有實驗室生物安全相關程序或政策變更時, 相關人員應再接受對應變更之訓練 當個人健康與免疫狀況不佳時, 基於獲得必要免疫能力與健康, 應主動向相關醫療院所尋求適當諮詢與指導 進入實驗室工作者之鞋子應能保護腳部為原則, 不可穿露出腳趾之鞋子 9.2 進入實驗室內應遵循事項 應穿著防止個人衣物受到污染的實驗衣 罩袍 68

35 生物安全第一等級實驗室設施與操作規範 (3) 衛生福利部疾病管制署 實驗室區域禁止飲食 抽菸 取戴隱形眼鏡 梳理頭髮 化妝及存放食物 食物應放在實驗室區域外 專為儲放食物的櫃子或冰箱 禁止以口進行移液, 應使用機械移液裝置 對於針頭 解剖刀 移液管與破裂的玻璃製品等尖銳物品, 應制訂與落實安全處理守則 實驗室管理者應採用可行之工程設計與操作規範, 以減少尖銳物品傷害之風險 下列預防措施用於處理尖銳物品, 包括 : (1) 小心處理針頭及其他尖銳物品 於丟棄針頭前, 不得將其彎曲 剪斷 折斷 回套 從拋棄式注射器取下 或是徒手處理 (2) 用過的拋棄式針頭和注射器, 應小心放入丟棄尖銳物品的專用防穿刺容器, 該容器應設置於方便尖銳物品丟棄之處 (3) 非拋棄式的尖銳物品需放入堅硬容器, 送至處理區進行除污, 並使用高壓滅菌處理為宜 (4) 破裂的玻璃製品不得直接處理, 應以刷子與畚箕 鑷子或鉗子等器具清除 儘量以塑膠製品來取代玻璃製品 所有實驗程序應儘量能減少液體噴濺或氣膠的產生 完成工作後, 應為工作台表面進行除污, 若有潛在感染性材料噴濺至工作台, 應使用適當的消毒劑除污 進行微生物或其他有害物質可能噴濺而出的實驗時, 應配戴護目鏡 戴隱形眼鏡的人員戴隱形眼鏡的人員, 亦應配戴護目鏡, 必要時得配戴面罩 須戴手套以免接觸到危險物質 手套應經過適當風險評估後選用, 並提供乳膠手套以外的選擇 離開實驗室之前必須洗手 此外, BSL-1 實驗室人員應 : (1) 於手套遭到污染 可能有安全疑慮 或是有其必要時, 應更換手套 (2) 於結束危險物質相關工作後, 先取下手套並洗手, 再離開實驗室 (3) 切勿清洗或重複使用拋棄式手套 使用過使用過的手套將與其他實驗室感染性廢棄物, 依感染性廢棄物規定處理之 洗手應依據主管機構公布之洗手時機與方式執行 生物安全第一等級實驗室設施與操作規範 (4) 衛生福利部疾病管制署 實驗室應於入口處張貼生物危害標誌 該標誌可註明使用的病原名稱 實驗室主管 ( 計畫主持人 ) 或其他相關負責人員的姓名及電話號碼 病原資料應依據機構相關政策公布 必要時需制訂有效的害蟲防治計畫 準備離開實驗室應遵循事項 實驗操作完畢時, 需將實驗室現場整理乾淨 離開實驗室前關閉非必要之電源 登記離開實驗室時間 工作結束或中途需要暫時離開, 應依實驗室規定移除個人防護裝備 離開實驗室前應先洗手 70

36 生物安全第二等級實驗室設施與操作規範 (1) 衛生福利部疾病管制署 二 生物安全第二等級實驗室 (Biosafety Level 2 Laboratory, BSL-2 Lab) ( 一 ) 適用範圍 BSL-2 實驗室適用於可能對人員及環境造成中度危害的病原相關工作 ( 二 ) 實驗室設施規範 1 實驗室位置 1.1 必備項目 實驗室無需與大樓建物內部的一般動線相區隔 可以門與公共區域做清楚的區隔, 惟應合其他相關法規之規定 門的大小須足以讓設備能夠進出 實驗室需有人員管制措施 1.2 建議項目 實驗室辦公室區域位於實驗室阻隔區以外 在實驗室工作區域外提供文書處理與資料的工作處所 2 實驗室物理結構 ( 牆面 地板 天花板 ) 2.1 必備項目 實驗室應採取便於清理的設計, 不宜鋪設地毯 實驗室對外開啟的窗戶應加裝紗窗 實驗室家具 ( 桌檯 ) 須能支撐預期載重及用途 工作台 櫥櫃與設備之間, 應預留便於清理的空間 工作台表面需為防水 抗熱 抗有機溶劑 酸鹼及其他化學物質 實驗室工作用椅應使用無孔防滲且易於消毒除污的材質 3 實驗室空調處理系統 3.1 必備項目 通風系統原則上沒有特別要求 4 實驗室壓力系統 : 無 5 生物安全櫃之要求 5.1 必備項目 應設有生物安全櫃 生物安全櫃之安裝位置應遠離門口, 且位於不受進 排氣 和人員走動頻繁影響的實驗區域 生物安全櫃必須通過其原廠所依循之國家檢測標準 產品認證及現場安裝檢測 生物安全櫃以每年至少測試 1 次為原則 71 生物安全第二等級實驗室設施與操作規範 (2) 衛生福利部疾病管制署 消毒滅菌和廢棄物清理 6.1 必備項目 於實驗室鄰近處提供高溫高壓蒸氣滅菌器或感染性廢棄物消毒滅菌及清運之標準作業流程 使用合格的高溫高壓蒸氣滅菌器 曝露在外的蒸氣管路需包覆保溫 所有真空管路須具有 HEPA 過濾器或同等級的設備 7 實驗室設施 7.1 必備項目 實驗室需設置洗手槽並靠近出口處, 洗手槽可採用肘動 腳踏或自動感應操作方式 裝設洗眼設施 8 實驗室安全措施 8.1 必備項目 實驗室需有人員的管制措施 不使用時, 實驗室仍須實施門禁管制 實驗室必須符合消防 安全衛生等相關法規之要求 實驗室內應設置火警警報系統 實驗室應針對火災 地震等災害及實驗室生物安全意外事件擬訂實驗室緊急應變計畫 ( 另可詳參本規範 柒 緊急應變計畫 ) 9 實驗室操作規範 進入實驗室前應遵循事項 除第一級內容外, 應包括以下各項 : 感染性生物材料之操作人員應經其實驗室主管或具二年以上操作經驗之人員訓練測試合格, 方可進入實驗室操作 實驗室門口應標示生物危害標誌 實驗室管理人員 實驗室主管與緊急聯絡人之姓名 職稱 聯絡方式 ( 如手機 ) 及實驗之病原體種類 ( 備註 ) 等 備註 設置單位如有生物保全之考量, 基於保密原則, 可不明列部分機密或敏感之病原體種類 惟未列出之病原體種類及操作所需實驗室生物安全等級, 應於設置單位相關規定及文件中呈現, 並說明列為機密之理由, 以供查核之用 72

37 生物安全第二等級實驗室設施與操作規範 (3) 衛生福利部疾病管制署 進入實驗室的人員應已被告知潛在之危險, 並被要求遵守實驗室進出規定 實驗室操作人員如有身體異常或不適之情形, 應向實驗室管理人員或實驗室主管 ( 計畫主持人 ) 報告, 並暫停進入實驗室工作 實驗室人員需接受適當之醫療管理並針對其處理或可能存於實驗室的病原, 提供既有防護措施 實驗室應保存其操作人員之血清檢體至人員離職 10 年後, 定期辦理人員之健康檢查及建立健康狀況異常監控機制 實驗室應有適當的生物安全手冊並落實執行, 生物安全手冊應放於容易取閱之處 訪客進出實驗室時, 應以書面或其他方式登錄其姓名 進出之日期 時間及事由等 實驗室主管應視操作病原體之屬性, 訂定實驗室操作人員穿著防護裝備之標準作業程序, 並張貼於人員著裝處 ( 建議採圖文方式呈現 ) 9.2 進入實驗室內應遵循事項 除包括第一級內容外, 應包括以下各項 : 收集 操作 處理 存放 或是於實驗室設施內部運送可能具感染性的物質應使用堅固耐用的防漏容器 實驗室設備應定期進行除污, 若遭到溢出 噴濺或其他可能污染後亦要進行相關除污 (1) 感染性物質溢出時應由經過適當訓練的人員使用處理感染性物質專用的設備, 加以隔離 除污及清理 (2) 設備應於維修 保養或移出實驗室之前進行除污 當發生可能曝露於感染性物質的意外事件, 應隨即執行相關評估並按照實驗室生物安全手冊所規範之程序處理 此類事件應通報實驗室主管 ( 計畫主持人 ), 並提供必要之醫療評估與治療, 同時妥善維持相關紀錄 禁止在實驗室留置無關工作的動物或植物 所有可能產生氣膠 (aerosol) 的感染性物質操作程序, 應在生物安全作櫃或其他物理性防護裝置內進行 73 生物安全第二等級實驗室設施與操作規範 (4) 衛生福利部疾病管制署 實驗操作過程中例如更換培養液 上清液移至另一容器 用吸管吸取液體 使用高速旋轉之機具 於固體培養基表面滴加細菌懸浮液 注射針具抽取感染性液體時推出氣泡等, 應盡量減少會產生氣膠之動作 若使用微量吸管吸尖 (micropipette pette tip) 操作感染性液體應選用有加裝過濾器者 吸管輔助器使用時因不慎受污染, 應立即消毒處理並更換過濾膜, 以防他人不知情而繼續使用, 致受污染 對於用過之吸管 滴管 微量吸管尖等先吸入消毒液再將其完全浸入盛消毒液之容器內 實驗室內設置之通訊設備 ( 如電話 對講機等 ) 宜採免持聽筒方式, 如需手持, 應先脫去手套後, 方可手持聽筒通話 使用注射針具抽取感染性液體後, 如需排除氣泡部分, 針頭必須朝上, 並插入塞有棉花之乾淨試管, 以避免產生氣膠 開啟冷凍乾燥菌種 ( 或毒株 ) 密封安瓿瓶 (ampoule) 前, 先使用玻璃切割器切割欲折斷部位 ( 手要戴防割材質手套 ), 以酒精棉擦拭後將封安瓿瓶插入套管內, 外面覆蓋滅菌紗布, 再套上塑膠袋, 才可折斷密封安瓿瓶 如製造廠商有特定規範, 則依該規範處理之 培養物 組織 體液標本 檢體瓶 培養瓶 試管 離心管及其他盛裝感染性或潛在感染性廢棄物的容器, 必須放入感染性廢棄物專用塑膠袋, 以利處理 有病毒培養瓶整瓶凍結時, 解凍前應先套上塑膠袋密封後才可放進 37 恆溫水槽解凍, 以防培養瓶龜裂造成瓶內病毒四處流散 實驗室應使用不掉纖維之抹布, 先浸泡消毒液擦拭後, 再用清水擦拭乾淨 如發生下列情況時, 應使用妥善防護的生物安全操作櫃 其他適用的個人防護裝備 或是其他物理性防護裝置 : 74

38 生物安全第二等級實驗室設施與操作規範 (5) 衛生福利部疾病管制署 (1) 進行可能產生氣膠或噴濺的程序, 包括移液 離心 研磨 攪拌 搖晃 混合 超音波處理 開啟裝有感染性物質的容器 對動物進行鼻腔接種 以及從動物或卵採取遭感染組織 (2) 執行高濃度或大量感染性病原離心作業, 可在開放的實驗室內, 使用密封旋轉盤或離心機安全杯進行 處理危險物質時, 應穿著實驗室指定的實驗衣 罩袍 工作服 進入非實驗室的區域前 ( 如 : 餐廳 圖書館和行政辦公室 ), 必須先脫下防護衣物 妥善處理防護衣物與清洗, 不可將實驗室衣物帶回家中 如需在生物安全操作櫃之外或防護裝置之外處理微生物時, 必要時應使用眼部與臉部防護裝備 ( 如護目鏡 口罩 面罩或其他防噴濺裝備 ) 以預防感染性或其他危險物質噴灑或濺出 眼部與臉部防護裝備須連同其他實驗室感染性廢棄物, 依感染性廢棄物規定處理之, 或者先行除污後再重複使用 戴隱形眼鏡的實驗室人員亦應配戴護目鏡 必須穿戴手套以免接觸到危險物質, 手套應經過適當風險評估 選用, 並提供乳膠手套以外的選擇 不可戴著手套離開實驗室 生物安全第二等級實驗室人員應注意以下事項 : (1) 手套遭到污染有安全疑慮 或是有其必要時, 應更換手套 (2) 結束相關工作後, 先取下手套並洗手, 才能離開實驗室 (3) 勿清洗或重複使用拋棄式手套 使用過的手套將與其他實驗室感染廢棄物, 依感染性廢棄物規定處理之 9.3 準備離開實驗室應遵循事項 實驗操作完畢時, 須將實驗室現場整理乾淨 使用過之器材, 應使用適當之除污方式消毒 離開實驗室前關閉非必要之電源 工作結束或中途需要暫時離開, 應依實驗室規定移除個人防護裝備 離開實驗室前應洗手 75 資料來源 : 食品工業發展研究所黃效民副主任於 2012 生物安全官教育訓練研習會 生物安全實驗室操作基準 優良微生物操作程序與技術 講義資料 76

39 資料來源 : 食品工業發展研究所黃效民副主任於 2012 生物安全官教育訓練研習會 生物安全實驗室操作基準 優良微生物操作程序與技術 講義資料 77 實驗室內常見標示 生物危害 : 貼於 BSC 冰箱 離心機等有污染之虞儀器 感染性廢棄物貯存期限 : (1) 攝氏 5 以上貯存者, 以一日為限 (2) 攝氏 5 以下至零度以上冷藏者, 以七天為限 (3) 於攝氏零度以下冷凍者, 以三十日為限 t / t tn d

40 Pathogen Safety Data Sheets (MSDS) for Infectious Substances Public Health Agency of Canada, PHAC SECTION 1 - INFECTION AGENT 感染性物質 SECTION 2 - HEALTH HAZARD 健康危害 SECTION 3 - DISSEMINATION 散播性 SECTION 4 - VIABILITY 生存力 SECTION 5 - MEDICAL 醫療措施 SECTION 6 - LABORATORY HAZARDS 實驗室危害 SECTION 7 - RECOMMENDED PRECAUTIONS 建議預防措施 SECTION 8 - HANDLING INFORMATION 處理資訊 SECTION 9 - MISCELLANEOUS INFORMATION 其他資訊 79 US CDC Guidelines for Safe Work Practices in Human and Animal Medical Diagnostic Laboratories 80

41 真空過濾系統 One method to protect a house vacuum system during aspiration of infectious fluids. The left suction flask (A) is used to collect the contaminated fluids into a suitable decontamination solution; the right flask (B) serves as a fluid overflow collection vessel. An in-line HEPA filter (C) is used to protect the vacuum system (D) from aerosolized microorganisms. US Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (Appendix A: Figures P.322) 81 為何生物實驗過程中產生氣霧 (Aerosol) 需謹慎考量? 許多實驗室操作步驟會產生氣溶膠 ( 氣霧 ) 氣溶膠 ( 氣霧 ) 需被考量的特性 攪拌器 超音波震盪 使用移液管 ( 特別是最後一滴被吹出時 ) 擰開瓶蓋 從隔離蓋中抽出針頭 組織研磨 清潔動物籠舍 微生物在氣溶膠中的生存力 微生物的濃度 氣溶膠顆粒的大小 ( 對氣溶膠顆粒進入呼吸道的深度和滯留時間有影響 ) 煙霧的持續性 (<10μm 的煙霧顆粒持續飄浮在空氣中,20-30μm 大小的顆粒容易經由通風系統轉移 ) 82

42 氣溶膠 [ 氣霧 ](Aerosol) 的形成 謹慎操作避免氣溶膠 [ 氣霧 ] 的飛濺 使用移液 Pipet 時擠出最後殘存的液滴產生 注射針頭自藥瓶抽出產生 均質機使用產生 83 注射針頭回套易造成意外, 建議使用完直接丟棄於專用容器, 或使用安全針頭 84

43 個人防護具 (PPE) 頭部防護具 : 頭盔 眼和臉部防護具 : 安全眼鏡 防護面罩 耳部防護具 : 耳塞 耳罩 呼吸防護具 : 過濾口罩 濾毒面罩 供濾毒面罩氣式面罩及空氣呼吸器等 手部防護具 : 化學手套 防電手套 防防護乳膏 腳部防護具 : 安全鞋等 全身防護衣 :A,B,C,, 級防護衣 實驗衣 隔離衣 連身衣 工作服等 85 86

44 個人防護具 (PPE) 種類及特性 87 生物實驗室應注意之手部防護 ( 歐盟手套認證圖示與分級標準 ) EN388 Protective Against Mechanical Rist (Abrasion 耐磨性 / Blade Cut Resistance 耐割性 / Tear Resistance 耐撕裂性 / Abrasion Resistance 耐擦刺性 ) 88

45 WHO 感染性物質運輸規範指引 感染性物質的三層包裝系統及其標示方式 (1) P650 P620 A 類感染性物質的三層包裝系統及其標示方式 B 類感染性物質的三層包裝系統範例 89 WHO 感染性物質運輸規範指引 感染性物質的三層包裝系統及其標示方式 (2) 豁免 90

46 91 對環境及操作者的保護 消毒 ( 破壞病原生物之感染能力 ) Alcohol 酒精 Halogens (NaOCl) 次氯酸鈉漂白水 使操作者產生免疫力如疫苗注射 Quaternary Ammonium Compounds 四級胺化合物 Phenolics 酚類水溶液 Aldehydes 戊乙醛 避免氣霧小心操作 清消的方式 : 消毒, 滅菌, 除污 92

47 實驗室常用的不活化方法 病原體確定不活化後方可以降低生物安全等級 常用的不活化方法 組織或細胞固定, 如 70% 酒精 冰醋酸及甲醇混合 或使蛋白質交錯連結的 dimethylsuberimidate 破壞病原體完整性, 如抽取 DNA, RNA or protein 極端的非生理狀態, 如 ph 鹽類 放射線 乾燥 NOTE: 不活化效率不同, 故降低生物安全等級後仍須謹慎操作 93 生物醫療廢棄物標示 94

48 分類分類 - 有害事業廢棄物認定標準 附表三 生物醫療廢棄物 項目一 基因毒性廢棄物 成分與說明 ( 一 ) 屬致癌之細胞毒素或其他藥物 ( 二 ) 可能致癌之細胞毒素或其他藥物 二 廢尖銳器具 azathioprine, chlorambucil( 氮芥苯丁酸 ), chlornaphazine, ciclosporin, cyclophosphamide( 環磷醯胺 ), melphalan( 氮芥苯丙胺酸 ), semustine, tamoxifen( 它莫西芬 ), thiotepa( 沙奧特帕 ), treosulfan. azacitidine, bleomycin, carmustine, chloramphenicol( 氯絲菌素 ), chlorozotocin, cisplatin, dacarbazine, daunorubicin( 道諾魯比辛 ), dihydroxymethylfuratrizine, doxorubicin( 杜薩魯比辛 ), lomustine, methylthiouracil( 鉀硫脲酮 ), metronidazole( 硝基甲嘧唑乙醇 ), mitomycin, i nafenopin, niridazole, id oxazepam( 歐沙氮平 ), phenacetin( 非那西汀 ), phenobarbital( 苯巴比妥 ), phenytoin( 二苯妥因 ), procarbazine hydrochloride, progesterone( 黃體素 ), sarcolysin, streptozocin, trichlormethine. 指對人體會造成刺傷或切割傷之廢棄物品, 包括注射針頭 與針頭相連之注射筒及輸液導管 針灸針 手術縫合針 手術刀 針灸針手術刀載玻片 蓋玻片或破裂之玻璃器皿等 分類 分類 - 有害事業廢棄物認定標準附表三 生物醫療廢棄物 ( 續 ) 三 感染性廢棄物 ( 一 ) 廢棄之微生物培養物 菌株及相關生物製品 指廢棄之培養物 菌株 活性疫苗 培養皿或相關用具, 及感染性生物材料製造過程產生之廢棄物 ( 二 ) 病理廢棄物指手術或驗屍所取出之人體組織 器官 殘肢 體液等 但不含頭顱 屍體 頭髮 指甲及牙齒 ( 三 ) 血液廢棄物指廢棄之人體血液或血液製品, 包括血餅 血清 血漿及其他血液組成分 血清血漿及其他血液組成分 ( 四 ) 受污染動物屍體 殘肢及墊料 指接受微生物感染之實驗動物屍體 殘肢及其墊料, 包括經檢疫後廢棄或因病死亡者 ( 五 ) 手術或驗屍廢棄物指使用於外科手術治療 驗屍或解剖行為而廢棄之衣物 紗布 覆蓋物 排泄用具 褥墊 手術用手套 ( 六 ) 實驗室廢棄物 1. 生物安全等級第三級及第四級實驗室所產生之廢棄物皆屬之 2. 生物安全等級第二級實驗室中與微生物接觸之廢棄物, 包括拋棄式接種環及接種針 檢體 手套 實驗衣 拋棄式隔離衣等 ( 七 ) 透析廢棄物指進行血液透析時與病人血液接觸之廢棄物, 包括拋棄式導管 濾器 手巾 床單 手套 拋棄式隔離衣 實驗衣等 ( 八 ) 隔離廢棄物指收容患傳染病病人之隔離病房所產出之廢棄物 ( 九 ) 受血液及體液污染廢指其他醫療行為所產生與病人血液 體液 引流液或排泄物接觸之廢棄物, 包括棄物各類廢棄之蛇型管 氧氣鼻導管 抽痰管 導尿管 引流管等導尿管, 及沾有可流動人體血液 精液 陰道分泌物 腦脊髓液 滑液 胸膜液 腹膜液 心包液或羊水且可能導致滴濺之廢棄物 但不含止血棉球 使用過之個人衛生用品 沾有不可流動或不可吸收之人體分泌物的紗布 包紮物 尿布 面紙及廁所衛生紙等 四 其他經中央主管機關會商中央目的事業主管機關認定對人體或環境具危害性, 並經公告者 96

49 貯存 包裝-容器材質 規格 97 貯存 98

50 貯存 資料來源 : 環保署醫療機構事業廢棄物管理作業參考手冊 97 年版 99 年 update 貯存設施示意圖 99 清除有害事業廢棄物清除車輛規範示意圖 - 易燃性廢棄物資料來源 : 環保署醫療機構事業廢棄物管理作業參考手冊 97 年版 99 年 update 100

51 清除生物醫療廢棄物清除車輛規範示意圖資料來源 : 環保署醫療機構事業廢棄物管理作業參考手冊 97 年版 99 年 update 101 感染性生物材料管理辦法第十條 - 補充說明 2 要點附表八 實驗室生物安全意外事件危害等級 說明 通報及處理 危害等級 高度 中度 低度 說明通報範例處理 擴及實驗室以 1. 當事人或發現者應立即向實 1. 地震 水災等災害造成感 1. 依設置單位之實驗室生物安全緊急 外區域, 對實 驗室主管報告, 並留存書面 染性材料逸散出實驗室以 應變計畫處理 驗室人員 其 紀錄備查 外區域 2. 對疑似遭受感染人員進行必要之處 他部門或週遭 2. 實驗室主管應立即向設置單 2. 工作人員因操作不當或防 置, 經檢驗或症狀觀察確認已遭受 社區民眾, 有感染或危害之虞 局限於實驗室以內區域, 對實驗室人員可能有感染或危害之虞 位生安會 ( 或生安專責人員 ) 報告 3. 設置單位應於二十四小時內向所在地主管機關及中央主 管機關通報 1. 當事人應立即向實驗室主管報告, 並留存書面紀錄備查 2. 實驗室主管應向設置單位生安會 ( 或生安專責人員 ) 報告 3. 設置單位疑似有實驗室人員 感染時, 應向地方主管機關通報, 並副知中央主管機關 護不足, 遭受感染卻不自知, 將病原體帶出實驗室 1. 於生物安全櫃操作感染性材料過程中, 因風機異常產生正壓, 造成感染性材料逸散到實驗室區域 2. 操作感染性材料不慎噴濺至人員身上 3. 拿取感染性材料時, 不慎掉落地板並濺灑出來 感染時, 應對其進行醫學治療 3. 中央主管機關得統籌指揮相關機關配合處理 4. 設置單位應回報中央主管機關有關 意外事件之處理及改善措施 1. 依設置單位之實驗室生物安全緊急應變計畫處理 2. 對疑似遭受感染人員進行必要之處置, 經檢驗或症狀觀察確認已遭受感染時, 應對其進行醫學治療 3. 主管機關得要求設置單位回報實驗室感染事件之處理及改善措施 局限於實驗室 當事人應向實驗室主管報告, 1. 於生物安全櫃內操作感染 依設置單位之實驗室生物安全緊急應 防護設備內, 並留存書面紀錄備查 性材料之溢出或翻灑 變計畫處理 對實驗室人員 2. 離心時, 發生離心管破裂 較少有感染或 102 危害之虞

52 生物安全相關參考文件 Guidelines 基因重組實驗守則國科會 93 年 6 月 實驗動物管理與使用指南 ( 第三版 ) 中華實驗動物學會 實驗動物手術照護原理與應用中華實驗動物學會 WHO 感染性物質運輸規範指引 - 疾管署 WHO 生物風險管理 - 實驗室生物保全指引 - 疾管署 生物安全第一等級至第三等級實驗室安全規範 - 疾管署 動物生物安全第一等級至第三等級實驗室安全規範 - 疾管署 103 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL) Canadian Biosafety Standards and Gidli Guidelines Laboratory Biosafety Manual CDC, USA 3 rd Edition th Edition th Edition 2007 PHAC & CFIA, Canada The Canadian Biosafety Standards and Guidelines (CBSG), 1st Edition, 2013 has been replaced by the Canadian Biosafety Standard (CBS), 2nd Edition, 2015 and the Canadian Biosafety Handbook (CBH), 2nd Edition on December 1st, WHO 1 st Edition nd Edition rd Edition 2004 ( 中文繁體版 )

53 相關教育訓練資料 Training Resources e 等公務員學習網 ABSA 教育訓練課程資料 ~ 敬請指教 ~ Thank you! 陳吳銓 h 106

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untitled 生物醫療廢棄物 參考判定手冊 98年版 行政院衛生署 出版 財團法人環境資源研究發展基金會 編製 若 I 類 95 年 12 1496 年 7 43 3 療 療 療 料 療 行 療 見 療 參 療 類 療 療 參 料 96 年 異 (1) 療 類 (2) 療 (3) 療 參 料 (1) 說 更 (2) 更 (3) 3(4) 力 類 C-0511 更 療 療 行參 II 錄 療 類 1.1 1.2 1.3

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