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- 背甭 耿
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1 立
2 (Health Food) 狀 行 類 (Functional Food) 理 類 了 不 更 力 更 更 2
3 (Diet Supplement) 列 量 (Nutraceuticals) 來 度 量 () 念 (Functional Food) (Functional Health Food) (Health Food) 理 不 療 類 類 了 () 不 理 類 律 3
4 () () 理 () 念 Breckman (the third State) (Elicit Illness State) 累 度 () 4
5 類 療 () 不 更 5
6 18% % % % 480 1,500 () 料來 Nutrition Business Journal 2005 料 8% 8% 13% 37% 14% / 20% ( 類 ) 料來 Nutrition Business Journal
7 料 8% 8% 13% 37% 14% / 20% ( 類 ) 料來 Nutrition Business Journal % % % % () 料來 Nutrition Business Journal
8 ( 金 ) 流行 Bar, Cereal, Beverage 益 Dairy, Beverage Speciality oils 料來 Nutrition Business Journal, 2005 Food Technology, Vol. 59, No. 5, May, 2005 令 度 療 療 料來, Vol. 35, No.3, p.19 8
9 理 理 年 年 年 年 六 ( 列 理 ) 理 行 年 良 年 9
10 理 年六 立 年六 立 參 參 年 來 利 理 年 年 糖 年 勞 老 10
11 流 理 降 率 療 療 不易 11
12 靈 勞 不易 3% 糖 1.5% 10% 10% 35% 32% 12
13 13
14 2004 年 6,439 ( 糖 ) 81.4% (4.5%) 降 糖 (4.5%) 降 (3.7%) (2.8%) (2.4%) 降 (0.7%) -- () 年 年度 料來 14
15 16% 糖 度 5% 15% 3% 2% 度 3% 56% 糖 率 ( 糖 -prebiotics) 22% 19% 精糖 料 5% 2004 年 70 6% 17% 塚 11% 9% 11% 樂 料來 15
16 率 (-probiotics) 20% 23% 6% 2% 2004 年 1% 2% % 料來 率 (-) 7% 14% 8% 27% 塚 薬 % 2004 年 18% 14% 料來 16
17 糖 年 率 (%) ()
18 (1991 年, 1999 年 ) 年度 數 年度 年度 累 累 累 數 料來 :.,, 2004 (2003 年 12) 193 (48.5%) 降 69 (17.4%) 38 (9.5%) 糖 49 (12.3%) 23 (5.8%) 26 (6.5%) 340 (92.7%) 狀 29 (7.3%) (2005 年 822) 24 (35%) 降 22 (32%) 7 (10%) 7 (10%) 2 (3%) 勞 2 (3%) 不易 2 (3%) 1 (1.5%) 糖 1 (1.5%) 34 (50%) 狀 34 (50%) 料來 :.,,
19 類 益 + 益 (Probiotics + Prebiotics) 3 益 (Prebiotics) 1 益 (Probiotics) 18 19
20 年 數 數
21 AB 酪 利 料 () Lactobacillus acidophilus La-5 Bifidobacterium lactisbb- 12 Bifidobacterium longum BB536 糖 異 + 糖 糖糖 益 降 螺 數量 益 Bifidus 數 金車 酪 () Bifidobacterium longum Lactobacillus acidophilus 益 力 益 Bifidobacterium lactis HN019 DR10TM Bifidobacterium longum Lactobacillus acidophilus Bifidobacterium lactis Bb-12 Lactobacillus casei Enterococcus faecium 益 益 21
22 () Streptococcus thermophillus Lactobacillus delbrueckii 龍 Encapsulated Bifidobacterium longum Streptococcus thermophillus Lactobacillus delbrueckii 益 益 ABC 益 / 酪 酪 益 () Streptococcus thermophillus Lactobacillus delbrueckii Lactobacillus acidophilus Bifidobacterium longum Lactobacillus paracasei Bifidobacterium longum Bifidobacterium lactis Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei 益 益 益 22
23 金車 益 () Bifidobacterium lactis Lactobacillus acidophilus Enterococcus faecium Lactobacillus paracasei Lactobacillus casei sp.rhamnosus GG Bifidobacterium lactis Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei Bifidus 數 益 金車 樂 林 酪 益 () Lactobacillus casei Shirota Bifidobacterium longum Lactobacillus acidophilus Bifidobacterium lactis Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei 益 益 益 樂 23
24 TCELL-1 樂 益 粒 () Lactobacillus rhamnosus Tcell-1 Lactobacillus sporogenes (Bacillus coagulans) powderbifidobacterium longum powderoligo saccharide 益 益 寧 () LGG 酪 () Lactobacillus acidophilus Lactobacillus bulgaricus Bifidobacterium bifidum Bifidobacterium longum Streptococcus thermophilus Lactobacillus bulgaricus Streptococcus thermophilus Lactobacillus rhamnosus GG Lactobacillus bulgaricus Bifidobacterium bifidum Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei 益 益 24
25 () (Daidzein 糖 nystose) 益 數 不
26 LGG 酪 (7 ) Lactobacillus bulgaricus Lactobacillus rhamnosus GG Lactobacillus bulgaricus Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei Bifidobacterium bifidum Streptococcus thermophilus ABC 益 / 酪 (5 ) 寧 () (5 ) Lactobacillus delbrueckii Lactobacillus acidophilus Lactobacillus paracasei Bifidobacterium longum Streptococcus thermophillus Lactobacillus acidophilus Lactobacillus bulgaricus Bifidobacterium bifidum Bifidobacterium longum Streptococcus thermophilus 26
27 益 (5 ) Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei Bifidobacterium lactis Bb-12 Bifidobacterium longum Enterococcus faecium 金車 金車 (4 ) Lactobacillus acidophilus Lactobacillus paracasei Bifidobacterium lactis Enterococcus faecium 27
28 益 (3 ) Lactobacillus delbrueckii Bifidobacterium longum Streptococcus thermophillus Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei Bifidobacterium lactis 益 益 (3 ) Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei Bifidobacterium lactis Lactobacillus acidophilus Lactobacillus casei Bifidobacterium lactis 28
29 AB 酪 酪 (2 ) Lactobacillus acidophilus Bifidobacterium lactis Lactobacillus acidophilus Bifidobacterium longum 林 酪 (2 ) Lactobacillus delbrueckii Streptococcus thermophillus Lactobacillus acidophilus Bifidobacterium longum 29
30 樂 益 粒 (2 ) Lactobacillus sporogenes (Bacillus coagulans) powder Bifidobacterium longum powder 力 (1 ) Bifidobacterium longum BB536 Bifidobacterium lactis HN019 DR10TM 30
31 酪 (1 ) Bifidobacterium longum Lactobacillus casei sp. rhamnosus GG 樂 TCELL-1 (1 ) Lactobacillus casei Shirota Lactobacillus rhamnosus Tcell-1 31
32 益 (Prebiotic) 金車 利 料 益 糖 異 + 糖 糖糖 益 + 益 (Synbiotic) 樂 益 粒 寧 () Lactobacillus acidophilus Lactobacillus bulgaricus Bifidobacterium bifidum Bifidobacterium longum Streptococcus thermophilus 不 Lactobacillus sporogenes (Bacillus coagulans) powder Bifidobacterium longum powder 益 Oligo saccharide (Daidzein 糖 nystose) 32
33 2 3 9 糖 酪
34 Lactobacillus 20 L. acidophilus, L. gasseri, L. bifidus, L. helveticus, L. brevis, L. kefir, L. bulgaricus, L. lactis, L. casei subsp. rhamnosus, L. lactis subsp. lactis, L. cremoris, L. paracasei, L. delbrueckii, L. plantarum, L. delbrueckii subsp. bulgaricus, L. fermentum, L. reuteri, L. rhamnosus, L. salivarius, L. sporogenes Bacillus 1 Bacillus coagulans Bifidobacterium 5 B. bifidum, B. breve, B. infantis, B. lactis, B. longum Enterococcus 2 E. faecalis, E. faecium Sporolactobacillus 1 S. inulinus Streptococcus 3 S. lactis, S. salivarius subsp. thermophilus, S. thermophilus 34
35 類 料 理 錄 料 類 料 類 料 類 料 類 類 類 列 行 料 理 錄 料 35
36 類 類 料 列 料 28 類 類 料 列 料 90 36
37 類 類 料 類 列 料 90 列 類 類 不 行 TCELL-1 類 類 行 37
38 TCELL-1 兩 38 兩 行 不 量 量 Lactobacillus rhamnosus Tcell () 異 糖 4 TCELL-1 論 (AST (GOT)ALT (GPT)ALPALK-PBMI Total Bilirubin (T-bil)) (RBCHGBHCTMCVMCHMCHC PLTWBC) 尿 ( 度 尿 尿糖 尿 尿 ) 論 量 異 不 38
39 TCELL-1 論 量 狀 不良 TCELL-1 不 狀 不良 論 異 糖 量 TCELL-1 不 TCELL-1 TCELL SPF(SD, Sprague-Dawley) ( 量 量 量 )80 飼 量 7x10 10 CFU3.5x10 11 CFU7x10 11 CFU ( 量 )L. rhamnosus Tcell-1 量 六 連 28 不 量 不 不 量 理 不 39
40 TCELL-1 -- Wistar 20 量 量 量 度 1 g/kg (7x10 11 CFU)0.5 g/kg (3.5x10 11 )0.1 g/kg (7x10 10 CFU) 度 老 理 123 4L. rhamnosus TCELL-1 理 異 理 L. rhamnosus TCELL-1 類 異 率 度 行 度 HPRT 異 28 量 40
41 -HPRT 卵 不 S96 不 S9 度 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50, 100 (L/mL) 0.1 L/mL methanesulfonic acid, ethyl ester18~24 S9 度 , 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50 (L/mL) 100 g/ml N-nitrosodimethylamine18~24 卵 HPRT 度 不 率 - ICR 老 老 25%, 50%, 100%20 ml/kg 率 mitomycin C 1 mg/kg 36~48 行 論 度 率 (MN/1000RETs) 異 不 ICR 41
42 - 異 卵 理 不 S9 理 3 不 S9 連 理 20 理 行 5 度 理 -S9, 3+S9, 3-S9, 20 理 行 5 度 (L/mL)6.25, 12.5, 25, 50, 100 -S9 mitomycin C 1M +S9cyclophosphamide 40M 不 理 不 理 卵 異 率 異 - SD ml/kg (20 ml/kg) 兩 行臨 14 SD 量 臨 狀 42
43 -28 量 SD ml/kg/day (15 ml/kg/day) 行臨 28 量 臨 狀 不 異 尿 數 尿 異 數 量 量 異 不 BB536 料 行 LD g/kg LD g/kg 0.56 g/kg 年 理 不 1010 女 1 ( L. acidophilus)7 什 不利 43
44 Male adult swiss mice L. casei strain GG (1.5x10 11 CFU), S. thermophilus (4x10 10 CFU), L. helveticus 230 (2x10 10 CFU)1, 2, 4, 6 g bacteria /kg b.w. 連 兩 24 復 ; 老 異 ; male swiss mice LD 50 6 g/kg body weight L. casei strain GGS. thermophilus L. helveticus 230 不 44
45 年 兩 兩 狀 狀 不 力 老 狀 理 Bifidobacterium 了 年來 Bifidobacterium 理 Clostridium perfringens 不 理 理 Clostridium perfringens Clostridium perfringens Clostridium perfringens NH 3 類 indoles 硫 不 45
46 老 Bifidobacterium 降 Clostridium perfringens 來 老 說 臨老 來臨 來 年 異 論 Bifidobacterium 46
47 (dietary fiber) 不 量 來 念 論 便 便 來 見 裡 例 LG21 不 (Helicobacter pylori) 量 來 47
48 行 兩 行 若 不 不 行 度 48
49 數量 行 4 行 2 數量 類 數 8 數 10 來 數 8 行 參 飼料 飼料 行 飼料 例 AINAmerican Institute of Nutrition 行 例 (test kit) 49
50 率 : Trypsin Chymotrypsin Amylase Lipase Leucine amino peptidase Disaccharidase 不 量 不良 量 便 狀 數 (p<0.05) 量 不良 了 量 便 狀 不良 狀 (p<0.05) 50
51 (disaccharidase) (lipase) (leucine aminopeptidase LAP) 參 Lundh Schilling D-xylose 老 (Sprague-Dawley Wistar ) ( 不 ) 0.2 g 2 ml protease (1 µm phenylmethylsulfonylfluoride 2.2 mm iodoacetic acid) 4 0.9% NaCl 51
52 理 30 µl 15 µl 56 mm ( 糖 糖 糖 ) µl 0.6 N NaOH 10 µl 6 N HCl 45 µl 理 糖 (0-40 mg/ml) 625 µl (50 mm Tris-malate33 mm sodium potassium phosphate 30 mm MgCl 2 ph 6.8) 150 µl 1 mm ATP 150 µl 1 mm NADP 15 µl 330 IU/mL hexokinase 15 µl 170 IU/mL glucose-6-phosphate dehydrogenase 糖 量 度 340 nm NADPH 良 Lowry 量 µm 糖 //µg (Sigma Lipase-PS ) 900 µl (1.1 mm 1,2-diglyceride2 mm sodium N-ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-mtoluidine0.66 mm ATP860 U/L monoglyceride lipase1340 U/L glycerol kinase40,000 U/L glycerol-3-phosphate oxidase1340 U/L horseradish peroxidase40,000 U/L co-lipase ) 15 µl () µl (36 mm deoxycholate6 mm 4-aminoantipyrine0.05% sodium azide )37 3 度 550 nm 2 良 Lowry 量 unit/µg 52
53 (Sigma Diagnostics LAP) 0.5 ml 0.5 ml LAP (20 mg/dl L-leucyl-β-naphthylamine phosphate ph 7.1) ml 2 N HCl1.5 ml 理 1.5 ml (0-12 Sigma unit/ml) 0.5 ml sodium nitrite ml 0.5% (w/v) ammonium sulfamate ml N-1- naphthylethylenediamine 精 45 度 580 nm 良 Lowry 量 Sigma unit/µg 1 Sigma unit 37 ph µmole β-naphthylamine 量 參 Lundh Schilling D-xylose 53
54 1 益 Bifidobacterium 1 益 Clostridium perfringens 1 益 Bifidobacterium 1 益 Clostridium perfringens 若 bifidobacteria Clostridium perfringens 便 ( 狀 ) 0.5 g 4.5 ml ( 5 粒 ) 狀 (cecum) 1 g 9 ml ( 5 粒 ) 便 ( 狀 ) 行 (BAM) 54
55 Bacteriological Analytical Manual, 8 th Ed. AOAC International. 55
56 56
57 57
58 58
59 59
60 60
61 6 Spraguae Dawley SD Wistar (Bifidobacteria) 參 Bifidobacteria iodoacetate medium 25 (BIM-25) MPN medium (Clostridium perfringens) 參 Tryptose-sulfite-D-cycloserine (TSC) agar 參 FDA 行 Bacteriological Analytical Manual (BAM) 61
62 Bifidobacterium Bifidobacteria iodoacetate medium 25BIM-25 Reinforced clostridial agar BBL Microbiology systems, Cockeyville, MD Nalidixic acid Polymyxin B sulfate Kanamycin sulfate Iodoacetic acid (sodium salt) 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride Distilled water 51 g 20 mg 8.5 mg 50 mg 25 mg 25 mg 1 L 殺 殺 冷 50 濾 62
63 參 Tryptose-sulfite-cycloserineTSCagar Tryptose 15 g Yeast extract 5 g Soytone 5 g Ferric ammonium citrate 1 g Sodium metabisulfite 1 g Agar 20 g Distilled water 1 L 121 殺 15 min 冷 50 63
64 D-cycloserine solution 1 g D-cycloserine (Sigma) 200 ml distilled water 濾 濾 4 50% egg yolk emulsion 70% (v/v) 精 1 量 理 0.85% NaCl 4 TSC medium 250 ml TSC 20 ml D- cycloserine solution 20 ml 50% egg yolk emulsion Gelatin (Difco) Distilled water Salts solution Resazurin solution (25 mg/100 ml H 2 O) 0.2 g 50 ml 50 ml 0.4 ml 冷 0.05 g cysteine 9 ml 121 殺 15 min 殺 64
65 anaerobic jar gas generating kitanaerobic system 65
66 View from above of microbiologist working in an anaerobic chamber 66
67 Gas Pak 利 GasPak 5-7% CO 2 BBL GasPak : 濾 (sodium borohydride,nabh 4 ), 粒 (sodium bicarbonate, NaHCO 3 ) 粒 (citric acid) 粒 67
68 68
69 BBL GasPak 說 ml 來 離 良 BBL GasPak 暴露 藍 藍 69
70 70
71 蠟 3% CO 2 蠟 3%CO 2 狀 1 ml 9 ml 行 列 數 spread plate methodpour plate method 狀 35~37 數 落數 71
72 數 0.1 ml eggyolk TSC 不 egg-yolk TSC medium ( 5-10 ml) ( 狀 ) 35~37 ( ) 數 落 數 72
73 73
74 數 異數 (Analysis of variance ANOVA) 異 若 異 (Duncan s multiple range test) 95% 度 異 74
75 若 便 bifidobacteria Clostridium perfringens 若 bifidobacteria Clostridium perfringens () ( ) 便 粒數 狀 () 便 便 量 狀 便 75
76 () 離 老 1-2 cm (organ bath) (95%O 2 5%CO 2 ) 2 hr (0.5-1 gm) 若 (p<0.05) () (10% ) 率 易 30 率 Charcoal marker Charcoal Transit = 100% Intestinal length 76
77 () : gastric emptying study (Tc-99m and In-111) 量 90 率 : 度 600 cc (barium salt) 15 (ileocecal valve) 便 量 粒數 便 (p<0.05) 便 77
78 () 離 2 (ph=4) indomethacin 率 (viability) (MTT assay) 若 (p<0.05) () 泌 Shay Shay s ulcer 老 24 復 4 量 01 N NaOH 度 若 p<
79 (p<0.05) 金車 利 料 Oligo 數 (p<0.05) 數 (p<0.05) Mix 數 (p<0.05) 度 Oligo(p<0.05) M 數 異 79
80 樂 女 36 兩 行 A 兩 100 ml 樂 B 兩 A 兩 B 兩 100 ml 樂 便 行 論 便 L. casei Shirota 樂 Bifidobacterium 數 P<0.05 便 L. casei Shirota 數 10 7 CFU/g faeces 量 L. casei Shirota TCELL-1 - 益 兩 38 兩 行 不 量 Lactobacillus rhamnosus T cell () 異 糖 4 益 Bifidobacterium 量 益 Bifidobacterium (p<0.05) 異 量 益 Bifidobacterium TCELL-1 益 Bifidobacterium TCELL-1 益 80
81 TCELL-1-4 女 4 Lactobacillus rhamnosus Tcell-1 4 Lactobacillus rhamnosus TCELL-1 便 Lactobacillus rhamnosus TCELL- 150% 便 兩 12.5% 說 Lactobacillus rhamnosus TCELL-1 TCELL-1 -Lactobacillus rhamnosus TCELL-1 益 行 SD, Sqrague- Dawley 六 異 糖 ( 量 ) 8 40 異 糖 量 g /kg 量 0.84 g /kg 量 0.42 g /kg( 4825)0.42 g /kg (4)4.2 x 10 9 CFU/kg 便 行 異 糖 ( 量 ) 異 便 數 數 降 TCELL-1 益 81
82 TCELL-1 - 益 Sprague-Dawley(SD)610 ( 量 量 量 )40 飼 125 量 Tcell-1 連 數都 都 異 ( 量 P<0.01 量 P<0.05) 數都 量 都 異 ( 量 P<0.01) 量 量 數 量 異 (P<0.05) TCELL-1 益 便 連 Lactobacillus rhamnosus Tcell-1L. rhamnosus Tcell-1colonize 年 (4 4 女 ) 行 酪 酪 便 數 (0.52±0.37) x10 8 (4.59±3.53) x10 8 P<0.05 落數 益 82
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Probiotics Prebiotics prebiotics synbiotics B.. () ()ph (). K 4. Obradovic 996 7 005 9 00 ml.5 mmol/l 0 L. para. subsp. paracasei NTU 0 6.4. 4. A - 88 8 7 4 7 4 68 4 4 9 7 0 4 9 synbiotic (prebiotic) (
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