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- 泉汝 施
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1 1544 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (10): 研究论文 抗 VEGFR-2 全人源 IgG1 抗体的构建及其在 CHO-k 细胞中的表达 李致科, 何远, 张娟 * *, 解伟, 曹婉璐, 王泽根, 王旻 ( 中国药科大学天然药物活性组分与药效国家重点实验室, 生命科学与技术学院, 江苏南京 ) 摘要 : 本文在实验室构建的单链抗体 -Fc 融合抗体 [scfv(ak404r)-fc] 的基础上构建抗 VEGFR-2 全人源 IgG1 样全长抗体 (Mab-04) 利用重叠 PCR, 获得 Mab-04 的轻链和重链的核酸序列后分别克隆到真核表达载体 pcdna3.1, 获得重组质粒 脂质体法将重组质粒转染至 CHO-k 细胞, 经 Protein A 柱纯化细胞培养上清液获得目的蛋白, 利用 Western blotting 检测目的蛋白, ELISA 检测 Mab-04 与抗原亲和力 测序表明重组质粒构建成功, Western blotting 检测显示目的蛋白成功表达 (1 μg ml 1 ), ELISA 检测阐明该抗体能与抗原结合并呈浓度依赖性 (IC 50 为 50 nmol L 1 ), 表明 Mab-04 成功表达并正确装配, 为进一步大量制备该抗体及其活性研究打下基础 关键词 : VEGFR-2; 全长抗体 ; 抗肿瘤血管生成中图分类号 : R963 文献标识码 : A 文章编号 : (2013) Construction of anti-vegfr-2 IgG1 like human antibody and its expression in CHO-k cells LI Zhi-ke, HE Yuan, ZHANG Juan *, XIE Wei, CAO Wan-lu, WANG Ze-gen, WANG Min * (State Key Laboratory of Natural Medicines, College of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing , China ) Abstract: Anti-angiogenesis mechanism plays a vital role in tumor targeting immunotherapy. Based on the amino acid sequence of an anti-vegfr-2 scfv-fc fusion antibody (AK404R-Fc), this article is aimed to generate an anti-vegfr-2 human IgG1-like full length antibody (Mab-04). Firstly, the light chain (L-chain) and heavy chain (H-chain) were obtained by overlap PCR and then linked to eukaryotic expression vector pcdna3.1, separately. The recombinant plasmids (pcdna3.1-l-chain and pcdna3.1-h-chain) were then co-transfected into CHO-k cells using liposome transient transfection. Subsequently, Mab-04 antibody was expressed and purified by Protein A affinity chromatography. Western blotting was applied to identify the expression of Mab-04 and its affinity was detected by ELISA assay. DNA sequencing revealed the successful construction of recombinant plasmids and Western blotting assay proved the successful expression of fulllength antibody (1 μg ml 1 ). Finally, ELISA assay illustrated that the binding of the antibody to its antigen was in a concentration-dependent manner (IC 50 : 50 nmol L 1 ). These outcomes above indicated that Mab-04 was successfully expressed and assembled, which laid the foundation for further preparation and antineoplastic activity study. Key words: VEGFR-2; full length antibody; anti-tumor angiogenesis 收稿日期 : ; 修回日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 ( , ); 天然药物活性组分与药效国家重点实验室资助项目 (JKGP201101); 江苏省青蓝工 程项目 (2010). * 通讯作者 Tel / Fax: , juancpu@126.com; Tel / Fax: , minwang@cpu.edu.cn
2 李致科等 : 抗 VEGFR-2 全人源 IgG1 抗体的构建及其在 CHO-k 细胞中的表达 1545 血管生成是肿瘤发生 发展的必要条件, 而血管内皮生长因子受体 (vascular endothelial growth factor receptor, VEGFR) 作为血管生成关键因子 VEGF 的受体也成为抗肿瘤药物的靶向研究热点 [1] VEGFR 有 3 种亚型 : Flt1 (VEGFR-1) KDR (VEGFR-2) VEGFR-3, 其中 VEGFR-2 与 VEGF 具有高亲和力也是介导血管内皮生成的主要受体 [2 4] 利用 VEGFR-2 的单克隆抗体对其的竞争性结合, 阻断和 VEGF 的结合, 从而抑制 VEGF 促血管生长的作用, 进而发挥抗肿瘤效应 基因工程开发的全人源 IgG1 型抗体药物结构与人体内存在的天然抗体构象非常接近, 因此降低诱发免疫原性反应风险 此外, 与单链抗体 融合抗体片段相比, 完整的 IgG 样四聚体抗体具有完整的重链和轻链, 可以诱发较强的抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 (antibody-dependent cellular cytotoxicity, ADCC) 效应 ; 同时, 全人源 IgG1 型抗体具有高特异性 高亲和力 体内半衰期长等特性, 可以发挥更大的生物活性 [5] 因此, 近几年来, 全人源及全长治疗性抗体药物在市场上显现出极强的市场竞争力 [6] 截止到 2012 年 3 月, 全世界已有 34 种治疗性抗体药物上市, 其中, 全人源抗体和人源化抗体比率高达 68%, 全长抗体占 75% [7] 与其他肿瘤分子靶向抗体药物相比, 抗肿瘤血管生成抗体具有靶向性 特异性 专一性等特性, 能特异性阻断肿瘤血管的发生发展, 降低对其他组织的杀伤作用 [8] 目前临床唯一的抗肿瘤血管生成的抗体药物贝伐单抗 (bevacizumab, Avastin) 于 2004 年被美国 FDA 批准用于非小细胞肺癌的治疗, 并在其他肿瘤的治疗中表现出良好的疗效 然而, 由于其全面阻断了 VEGF 介导的相关信号通路, 导致患者出现高血压 鼻出血 蛋白尿等严重不良反应 [9] 选择性地阻断 VEGFR-2 与其配体的相互作用所引发的信号传导, 可以有效地避免对 VEGFR-1 和 VEGFR-3 的抑制而引发的不良反应 本课题组在前期工作中获得抗 VEGFR-2 的单链抗体 scfv-ak404r 及融合抗体 scfv-fc [10, 11] 的基础上, 通过基因工程方法成功构建了抗 VEGFR2 的全人源 IgG1 样抗体 Mab-04 基因, 旨在获得更接近天然抗体构象的基因工程抗体, 提高抗体与抗原的亲和力并使其激活全部补体效应, 从而提高其对癌症的疗效 通过转染 CHO-k 细胞成功获得了一定量的蛋白, 在对其分子量大小进行检测和初步活性检测后, 证实了 Mab-04 构建表达成功, 为其大量制备和抗肿瘤活性研究打下了基础 材料与方法菌株 质粒与细胞株 TOP10 大肠杆菌购自美吉生物公司 ; 带有 IgG1 Fc 片段的真核表达载体 pcdna3.1 购自 Life Technologies 公司 ; AK404R-Fc 由本实验室构建, CHO-k 细胞 ( 野生型中国仓鼠卵巢细胞 ) 为本实验室保存 试剂质粒中提试剂盒 (Qiagen); 1 ml Hi-Trap Protein A 预装纯化柱 (GE Healthcare); T4 连接酶 限制性内切酶 Hind III EcoR I Xba I (Fermentas); Easy Taq 聚合酶 ( 北京全式金公司 ); HS 高保真 PCR 酶 (TaKaRa); 质粒小提试剂盒 琼脂糖凝胶回收 /PCR 产物纯化试剂盒 (Biomega 公司 ); Lipofectamine 2000 脂质体转染试剂盒 (Life Technologies); His 标记鼠单抗 ( , Cell Signaling, 27E8); HRP 标记羊抗鼠 IgG ( , MultiSciences Biotech, 11-GAM007); 鼠抗人 IgG1-HRP 单克隆抗体 (Life Technologies, ); DMEM 高糖培养基 新生牛血清 (Gibco); ECL 发光显色液 30 kd 超滤管 (Millipore) PCR 引物由上海捷瑞公司合成, KDR 胞外区蛋白由本实验室自行纯化获得, 其他试剂均为国产分析纯 抗 VEGFR-2 全人源全长抗体 Mab-04 的构建在 GenBank 中查找到适合的轻链恒定区 (CL) 及重链恒定区 1 (CH 1 ) 片段, 对其进行 CHO 偏爱密码子优化后合成 L-chain 及 CH 1 以实验室已构建好的 scfv-fc 融合抗体为模板, 分别设计 7 条引物 ( 表 1) 进行 PCR 扩增 以引物对 P1/P2 扩增 scfv-fc 获得其重链可变区 VH (94 5 min; s, s, s, 30 个循环 ; min), 以引物对 P5/P6 扩增 scfv-fc 获得 Fc 片段 利用重叠 PCR (overlap PCR), 以 VH 及 CH 1 为模板, 获得 VH-CH 1 (95 5 min; s, s, s, 10 个循环 ; 加入引物对 P1/P4, s, s, s, 20 个循环 ; min) 最后用重叠 PCR 在相同条件下以 VH-CH 1 和 Fc 片段为模板 引物对 P1/P6 扩增获得完整重链基因 (H-chain) PCR 产物由 1% 琼脂糖凝胶电泳分析, 并对目的片段切胶回收 将 PCR 扩增产物 H-chain 和 pcdna3.1 载体均用 Hind III 和 Xba I 分步酶切, 用 Hind III 和 EcoR I 同步酶切 psg1-l-chain 及 pcdna3.1 载体, 对酶切产物切胶回收后用 T4 DNA 连接酶于 16 条件下过夜连接 ( 图 1) 将连接产物转入大肠杆菌 TOP10 感受态细胞, 涂布 1.5% 琼脂粉 LB 固体培养基平皿 37 培养过夜, 次日挑取单克隆接菌提取质粒进行酶切鉴定, 酶切
3 1546 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (10): Table 1 Oligonucleotide primers used in the construction of the full length IgG1. GenBank accession number: VH (KF021248), VL (KF031143); see also reference [10] which contained the amino acid sequence of Mab-04 variable domain Primer Sequence (5' 3' ) P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 CCCAAGCTT[Hind III]CCACCATGGAGCCAGAGGGAAGACGGA TATACCCAAGCTTGCCACCATG ATAGTTTAGCGGCCGCAACCTTCT TCCGTCTTCCCTCTGGCTCCAT GAGCGCTGCGGCTCCCAAATCTTG GCTCTAGA[Xba I]GCGTTATTTACCTGGAGACAGGGAGAGG GGAATTC[EcoR I]GCGGCTTAGCTGCACTCAGCAGGG Figure 1 Construction of H-chain and L-chain. Fragments of L-chain and H-chain were connected by overlap PCR, primers were shown in Table 1. The H-chain and L-chain were double digested, separately and then linked with digested vectors 鉴定阳性克隆送上海美吉生物公司测序 CHO-k 细胞的培养及脂质体法转染 CHO-k 细胞用含 10% 新生牛血清的 DMEM 高糖培养基, 于 37 5% CO 2 的培养箱内贴壁培养 ; 隔天更换培养基, 细胞长至 95% 汇合度时用 0.25% 胰蛋白酶消化传代 取对数期 CHO-k 细胞铺 24 孔细胞培养板, 细胞数为 / 孔, 待细胞恢复生长状态, 采用 Life Technologies 公司的 Lipofectamine 2000 脂质体转染试剂盒, 参照说明书将重组质粒转染 CHO-k 细胞, 同时设置阴性对照组 转染 6 h 后更换无血清高糖 DMEM 培养基培养 72 h, 收集上清液 Protein A 亲和层析柱小样纯化取 72 h 培养基上清液, r min 1 离心 10 min 去除细胞碎片, 参照 GE 公司 Hi-Trap Protein A 柱说明书, 用 20 倍柱体积 (column volume, CV) 平衡缓冲液平衡 Protein A HP 预装柱, 充分去除乙醇和杂质后上样 (<10 mg), 5CV 平衡缓冲液去除非特异性吸附后用洗 脱液洗脱至流出液 OD 280 < 0.01 整个操作过程流速 均为 1 ml min 1, 经柱纯化的样品用 1 mol L 1 缓冲液调其 ph 至 7.0 左右 Western blotting 检测目的蛋白的表达 Tris 用超滤 管对柱纯化后样品进行浓缩, 浓缩后样品被分为还 原组 ( 加 2% β- 巯基乙醇 ) 和非还原组 使用 10% 分 离胶和 5% 浓缩胶分别对还原与非还原样品进行 SDS-PAGE 分析 将蛋白凝胶电转印至 PVDF 膜, 5% 脱脂奶粉 37 封闭 2 h 后加入鼠抗人 IgG1-HRP 单克 隆抗体 ( ), 37 孵育 1 h 后用 TBST 洗膜, 滴 加 ECL 发光显色液并用凝胶成像仪曝光拍照 ELISA 检测抗原抗体结合力 对 Mab-04 进行倍 比稀释, 稀释浓度为 ( 及 6.25 nmol L 1 ), 包被量为 100 μl/ 孔, 4 包被过夜, 每个 浓度做 3 个复孔 PBS 洗 3 次后, 加入 8% 脱脂牛奶, 37 封闭 2 h 0.1% PBST 和 PBS 各洗 3 次, 每次洗 5 min, 将 KDR3 单链抗体稀释至 nmol L 1, 每 孔加入 100 μl, 孵育后依次加入 His 标记鼠单抗 ( ), HRP 标记羊抗鼠 IgG ( ), 37 孵 育 1 h 后洗 5 次, 各孔加底物液 TMB 100 μl, 避光显 色 20 min 后, 用 2 mol L 1 H 2 SO 4 终止反应 酶标仪 读取 OD 450 及 OD 650 值 结果 1 轻重链基因的扩增和 pcdna3.1-h-chain 及 pcdna3.1-l-chain 重组质粒的构建和鉴定 Mab-04 重链片段 PCR 产物经 1% 琼脂糖凝胶电 泳检测 ( 图 2), 在 306 bp (VH, lane 1) 436 bp (CH 1, lane 2) 及 750 bp (IgG1 Fc, lane 4) 均出现目的条带, 并在 736 bp (VH-CH 1, lane 3) 及 bp (H-chain: VH-CH 1 -IgG1 Fc, lane 5) 出现通过 overlap PCR 拼接 获得产物分子量相当的条带, 测序结果正确 将合成好的 PCR 产物经 1% 琼脂糖凝胶电泳检 测, 在双酶切连接 L-chain (Hind III 及 Xba I) 的
4 李致科等: 抗 VEGFR-2 全人源 IgG1 抗体的构建及其在 CHO-k 细胞中的表达 1547 有条带, 同时阳性对照 (scfv-fc 融合抗体, 图 4B, lane 2) 在 60 kd 处有条带, 阴性对照 CHO-k 细胞培 养上清液呈阴性反应 (图 4B, lane 3), 说明瞬时转染 的 Mab-04 没有在细胞内发生装配错误, 且其表达量 约为 1 μg ml 1 Figure 2 Amplification of H-chain by PCR. Lane M: Marker; Lane 1: Heavy chain variable region (VH, 306 bp); Lane 2: Heavy chain constant region 1 (CH 1, 436 bp); Lane 3: Heavy chain variable region-constant region 1 (VH-CH 1, 736 bp); Lane 4: IgG Fc fragment (750 bp); Lane 5: Heavy chain (H-chain, VH-CH1-Fc, bp) pcdna3.1 产物在 750 bp 出现与 L-chain 分子量相当 的条带 (图 3A, lane 2); 双酶切 H-chain (Hind III 及 EcoR I) 的 pcdna3.1 产物在 bp 出现与目的片 段大小相当的条带 (图 3B, lane 1), 与预期结果相 符 切胶回收后送上海美吉生物公司测序, 测序结果 正确, 表明重组质粒构建成功 Figure 4 Target protein expressed by transient transfected CHO-k cells detected by Western blotting. A: Non-reduced SDS-PAGE; lane 1, empty CHO-k cell culture (negative control); lane 2, L-pcDNA3.1 & H-pcDNA3.1 co-transfect CHO-k culture (full length IgG: 150 kd); lane 3, scfv-fc recombinant protein (dimer of scfv-fc: 120 kd, 1 μg ml 1) expressed by recombinant CHO-k cell. B: Reduced SDS-PAGE; lane 1, L-pcDNA3.1 & H-pcDNA3.1 co-transfect culture (H-chain: 50 kd; L-chain: 25 kd); lane 2, scfv-fc recombinant protein expressed by recombinant CHO-k cell (single scfv-fc: 55 kd); lane 3, empty CHO-k cell culture (negative control) 3 Mab-04 与 KDR 的 ELISA 检测 横 坐 标为 浓 度梯 度 稀释的 Mab-04, 纵 坐标 为 OD450 与 OD650 的差值, 阴性对照为 PBS 溶液, 阳 性对照为 100 nmol L 1 KDR3 (图 5) KDR3 与不同 稀释度 ( 及 100 nmol L 1) 的 Mab-04 均可发生结合反应 (mean ± SE, n = 3, P < Figure 3 Construction of recombinant plasmids. A: Lane M, DNA marker; lane 1, double digest pgs1-l-chain ( Hind III and Xba I), L-chain (750 bp); lane 2, double digest pcdna3.1l-chain (Hind III and Xba I), L-chain (750 bp). B: Lane M, DNA marker; lane 1, double digest pcdna 3.1-H-chain ( Hind III and EcoR I), H-chain (1 447 bp) ), OD 450 与 OD650 的差值与 Mab-04 的浓度呈正相 关, 说明 Mab-04 具有与 KDR3 结合的能力且其 IC50 值为 50 nmol L 1 全长抗体基因瞬时转染 CHO-k 细胞表达抗体 Western blotting 检测 非还原条件下, CHO-k 细胞培养上清液呈阴性反 应 (图 4A, lane 1), Mab-04 在 150 kd 处有条带 (图 4A, lane 2), 本实验室已构建 scfv-fc 融合抗体作为阳性 对照, 于 120 kd (scfv-fc 二聚体, 1 μg ml 1) 处有条 带 (图 4A, lane 3), 说明瞬时转染可以表达四聚体形 式的完整 IgG1 样 Mab-04 在还原条件下, Mab-04 (图 4B, lane 1) 在 50 kd (重链) 及 25 kd (轻链) 处均 Figure 5 Target protein combined with KDR3 detected by ELISA assay (mean ± SE, n = 3, P < 0.05). Positive control: 100 nmol L 1 KDR3; Negative control: PBS solution; Mab-04: nmol L 1; IC50: 50 nmol L 1
5 1548 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2013, 48 (10): 讨论 目前, 单克隆抗体在肿瘤的治疗和诊断方面得到 了广泛应用, 以 VEGF/VEGFR 为靶标, 封闭 VEGFR 竞争性抑制 VEGF 与 VEGFR 的结合等方向研发抗血 [12] 管生成抗肿瘤药物已取得了很大进展 如 Willett 等 研究发现抗 VEGF 单克隆抗体贝伐单抗 (Avastin) 能 抑制结肠癌患者肿瘤血管灌注及扩张, 降低肿瘤微 血管密度及组织液压并减少活性血管内皮细胞数量 本课题组基于全人源合成噬菌体抗体库中筛选 得到单链抗体 (scfv) 并验证了其可以抑制人内皮静 脉细胞增殖与迁移 [10] 与该 scfv 相比, Mab-04 的可 变区与其完全一致, 即可以识别相同的抗原决定簇, 发挥相同的生物学功能 ; 此外, Mab-04 含有 Fc 片段, 可以增强抗体的体内作用并可作为亲和标签简化纯 化步骤 [13, 14] 与 scfv-fc 融合抗体相比, Mab-04 构象 更接近天然人免疫球蛋白, 可以完全发挥抗体恒定 区的全部作用, 提高抗体可变区的亲和力以及相应 药效 [15] 与市售相似靶点抗体相比, Mab-04 是基于全 人源合成噬菌体抗体库中筛选 scfv 构建的全长抗体, 从根本上防止了鼠源性抗体或者嵌合抗体应用于人 体后产生强烈的人抗鼠抗体反应 (human anti-mouse antibody, HAMA) [16] 本研究在前期构建时发现, Overlap PCR 中两个 目的片段大小相仿能提高其成功率, 以本课题中重 链构建为例 : 宜先将 VH 及 CH 1 基因片段拼接为 VH- CH 1 (736 bp) 片段, 再与 IgG1 Fc (750 bp) 片段拼接 获得全长重链基因 在转染的方法方面, 脂质体法转 染操作手册上介绍细胞表达蛋白时间为 24~96 h, 实际表达过程中作者发现, 并不是表达的时间越长 越好, 以 Mab-04 为例 : 最佳表达时间为 72 h, 延长时 间蛋白表达量反而会降低 推测是由于 72 h 后 CHO-k 细胞状态逐渐变差, 细胞裂解物释放于培养基内, 这 会导致已经表达抗体发生降解 Western blotting 实验 显示 Mab-04 成功表达, 但表达量偏低 这可能是由 于 pcdna3.1 表达载体或转染方式限制所致, 故在后 续的研究工作中, 可以从优化载体或通过更换电击 转染方式入手, 来提高 Mab-04 的表达量并筛选稳定 高产细胞株 ELISA 检测证明抗体 Mab-04 与抗原结 合呈浓度依赖性, 验证了本研究的可行性, 为后续稳 定转染筛选稳定细胞株 大量制备抗 VEGFR-2 全长 抗体等工作奠定了基础 此外, 针对全长抗体分子大 组织穿透性差以及 临床使用剂量大 生产成本高的问题, 抗体药物偶联 物 (antibody drug conjugates, ADCs) 已日渐成为抗 [17, 肿瘤抗体药物研发的新热点 18] 而 IgG1 样抗体由 于分子量大且其构象接近天然抗体, 拥有较多药物 偶联位点, 对抗原有高亲和力, 并且在导向性和载药 量上有较大优势, 因而成为目前已批准上市的大部 分 ADCs 中首选的抗体类型 [19] 本文构建的 IgG1 样 抗体 Mab-04 为全人源抗体, 与已上市 ADCs 中鼠源 抗体及人鼠嵌合抗体相比免疫原性小, 以其为抗体 制备 ADCs 也会成为一个重要的研究方向 References [1] Rapisarda A, Melillo G. Role of the VEGF/VEGFR axis in cancer biology and therapy [J]. Adv Cancer Res, 2012, 114: [2] Vecchiarelli-Federico LM, Cervi D, Haeri M, et al. Vascular endothelial growth factor a positive and negative regulator of tumor growth [J]. Cancer Res, 2010, 70: [3] Kiselyov A, Balakin KV, Tkachenko SE. VEGF/VEGFR signalling as a target for inhibiting angiogenesis [J]. Expert Opin Investig Drugs, 2007, 16: [4] Hsu JY, Wakelee HA. Monoclonal antibodies targeting vascular endothelial growth factor: current status and future challenges in cancer therapy [J]. BioDrugs, 2009, 23: [5] Aaron LN, Eugen D, Janice MR. Development trends for human monoclonal antibody therapeutics [J]. Nat Rev Drug Discov, 2010, 39: [6] Wang X, Das TK, Kumar S, et al. Potential aggregation prone regions in biotherapeutics: a survey of commercial monoclonal antibodies [J]. MAbs, 2009, 1: [7] Reichert JM. Marketed therapeutic antibodies compendium[j]. MAbs, 2012, 4: [8] Robert LF, Elizabeth MJ, Soldano F. Tumor antigentargeted, monoclonal antibody based immunotherapy: clinical response, cellular immunity, and immunoassayed [J]. J Clin Oncol, 2010, 28: [9] Mulder K, Scarfe A, Spratlin J, et al. The role of bevacizumab in colorectal cancer: understanding its benefits and limitations [J]. Expert Opin Biol Ther, 2011, 11: [10] Zhang J, Li H, Wang X, et al. Phage-derived fully human antibody scfv fragment directed against human vascular endothelial growth factor receptor 2 blocked its interaction with VEGF [J]. Biotechnol Prog, 2012, 28: [11] Yang YL, Zhang J, Wang M, et al. Construction of anti- VEGFR-2 scfv-fc fusion antibody and stable expression in CHO-k cells [J]. Pharm Biotechnol, 2011, 18:
6 李致科等 : 抗 VEGFR-2 全人源 IgG1 抗体的构建及其在 CHO-k 细胞中的表达 1549 [12] Willett CG, Boucher Y, di Tomaso E, et al. Direct evidence that the VEGF-specific antibody bevacizumab has antivascular effects in human rectal cancer [J]. Nat Med, 2004, 10: [13] Greenberg JI, Cheresh DA. VEGF as an inhibitor of tumor vessel maturation: implications for cancer therapy [J]. Expert Opin Biol Ther, 2009, 9: [14] Wang XY, Yu P. Construction of single-chain Fv antibody and its application in the medicine [J]. J Pathog Biol ( 中国病原生物学杂志 ), 2009, 4: [15] Cao M, Cao P, Zhang SQ, et al. Construction, purification, and characterization of anti-baff scfv Fc fusion antibody expressed in CHO/dhfr-cells [J]. Appl Biochem Biotechnol, 2009, 157: [16] Xia ZN, Cai XT, Cao P. Monoclonal antibody: the corner stone of modern biotherapeutics [J]. Acta Pharm Sin ( 药学学报 ), 2012, 47: [17] Miao QF, Shao RG, Zhen YS. An overview of antibody-based cancer therapy [J]. Acta Pharm Sin ( 药学学报 ), 2012, 47: [18] Lin L, Ding Q, Zhan JB. Antibody-drug conjugates and their application in the treatment of hematological malignancies [J]. Acta Pharm Sin ( 药学学报 ), 2012, 47: [19] Carter PJ, Senter PD. Antibody-drug conjugates for cancer therapy [J]. Cancer J, 2008, 14: 药学学报 入选全国 百强科技期刊 据中华人民共和国出版总署网 2013 年 7 月 18 日消息,2013 年 百强报刊 推荐结果揭晓, 在 5000 余种科技期刊中, 由中国科协主管 中国药学会和中国医学科学院药物研究所共同主办的 药学学报 入选 百强科技期刊 这是继 2011 年荣获出版政府奖期刊奖提名奖后, 该期刊又一次荣获国家级期刊奖 据介绍, 百强报刊 推荐活动是实施报刊业 十二五 时期发展规划 建设精品报刊工程的一项重要工作, 其作用是通过动态评估推荐, 重点推出一批内容原创能力强 社会效益和经济效益俱佳 具有较大发展潜力和竞争力的名报名刊, 形成时政 学术 行业专业 大众服务等门类品牌报刊方阵, 充分发挥其在舆论传播 公共服务和学术创新等方面的引领示范作用, 促进报刊业繁荣发展 今年推荐活动自年初开始, 经过各省 ( 区 市 ) 新闻出版局 中央报刊主管单位认真推荐, 国家新闻出版广电总局组织有关专家严格评审, 最终确定了百强报纸 百强社科期刊及百强科技期刊推荐名单, 并于 2013 年 6 月 14 日在中华人民共和国中央政府网 中国新闻出版网进行了公示 日前, 总局下发通知公布推荐结果, 最终确定 99 种报纸 100 种社科期刊 100 种科技期刊推荐名单 本刊编辑部
材料 方法
生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽
+
~ 1 ~ ~ 2 ~ 1-1 UHPLC-SEC 法对治疗性抗体的分析 TSKgel UP-SW3 UHPLC HPLC A TSKgel UP-SW3 2 μm (4.6 mm ID. 15 cm B UHPLC-SEC 1.7 μm (4.6 mm ID. 15 cm mmol/l (ph 6.7 + 2SO4 mmol/l Na +.5 % NaN3.35 ml/ 25 UV 28 nm 5
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC
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EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
<30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D34A3A92E6D6469>
212 绎 Vol.14 No.5 ScienceDirect 阴 元元 元元 / 99978 5 doi: 1.3969/j.issn.1674-3849.212.5.3 2 1 29 72.7% 21 27.1% 24.26% 1 [1] 1 2 21 7.85 [2] 1 29 21% 662 26 9.38 211 3.8 27.2% 1 212-3-26 212-1-19 元 UL16/9-Y4/CMS/WYT1/ICMS
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio
2010 30 5 931 Ad-E1A 215123 Ad-E1A BALB /c Ad-E1A RT-PCR E1A H22 BALB /c H22 PBS Ad-E1A 5-Fu 7 10 9 pfu /ml Ad-E1A Ad-E1A 5-Fu 66. 7% 68. 8% P > 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu P < 0. 01 P < 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the
2012 44 4 9 2 2 3 1. 225009 2. 200240 3. 200072 R PCR p215c3lyz R pqe-31 R IPTG Western blotting pqe- p215c3lyz COS- DH5α OD 600 Western blotting p215c3lyz Western blotting R R S852. 4 A 0529-5130 2012
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
1 MCF-7 VEGF spss 20 5 ~ 6 h Cck-8 6 h r 2 = Cck-8 6 h 450 nm v Cck-8 v = h 450 nm 3 A = A - A A r 2 Cck -8 Mcf-7 1
42 1 Vol 42 No 1 2018 1 Journal of Jiangxi Normal University Natural Science Jan 2018 1000-5862 2018 01-0100-06 MCF-7 VEGF 1 2 1 1 1 1* 1 570228 2 70102 Mcf -7 Cck-8 TUNEL- DAPI Cck-8 Cck-8 TUNEL-DAPI
Supplemental information Exome sequencing identifies truncating mutations in the PRRT2 gene that cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia Wan-Jin Chen
Supplemental information Exome sequencing identifies truncating mutations in the PRR gene that cause paroxysmal kinesigenic dyskinesia Wan-Jin hen,, Yu Lin, Zhi-Qi Xiong 3, Wei Wei, Wang Ni,, uo-he an
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
5期xin
中 国 农 学 通 报 2014,30(5):23-27 Chinese Agricultural Science Bulletin 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 筛 选 及 生 长 曲 线 测 定 喻 华 英, 李 启 峰 ( 塔 里 木 大 学 动 物 科 学 学 院, 新 疆 阿 拉 尔 843300) 摘 要 : 为 探 究 犊 牛 腹 泻 病 中 大 肠 杆 菌 生 物 膜 的 形 成
标题
Vol. 36 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 2015 年 5 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇 摇 摇 摇 摇 摇 886 ~ 892 摇 摇 doi: 10. 7503 / cjcu20140965 一 种 新 的 混 合 斑 精 子 分 离 方 法 伍 贤 军 1,2, 赵 摇 兵 2, 缪 摇 璇
7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0
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227 ELISA 刘 沙 洲 1,2, 桑 小 雪 1, 欧 阳 华 学 3, 雷 绍 荣 3, 白 林 含 1, * (1. 四 川 大 学 生 命 科 学 学 院, 四 川 成 都 610065;2. 成 都 市 食 品 药 品 检 测 中 心, 四 川 成 都 610045; 3. 四 川 省 农 业 科 学 院 分 析 测 试 中 心, 四 川 成 都 610066) 目 的 : 比 较
The Status and Development Prospect of Chinese Antibody Drug Industry 2 Ma Shan-shan 1,2 Ma Su-yong 2 Zhao Guang-rong 1 * 1. School of Chemical Engine
2015-11-17 10:20:14 http://www.cnki.net/kcms/detail/11.4816.q.20151117.1020.004.html 1,2 2 1* 1 300072 2 100085 1 CFDA CDE 2015-08-08 2015-10-24 E-mail mashanshan@northland-bio.com * Tel 022-87401546 Email
Microsoft PowerPoint - 14 Monoclonal Antibodies.pptx
Pharmaceutical Biotechnology Monoclonal Antibodies By Yuqiong Xia 2014 Keywords Monoclonal antibody (mab), epitope, myeloma Chimeric, complement, complementary Phage display, hinge, cytotoxity Apoptosis,
第 猿 猿 卷 第 愿 期 20 员 猿 年 愿 月 张 媛 媛 等 院 肥 胖 与 雌 激 素 的 相 互 关 系 及 其 对 子 宫 的 作 用 研 究 原 员 远 员 原 素 等 多 种 原 因 有 关 袁 对 于 女 性 而 言 绝 经 后 雌 激 素 水 平 下 降 是 更 年 期 肥 胖
原 员 远 原 南 京 医 科 大 学 学 报 渊 自 然 科 学 版 冤 ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING 渊 Natural Science 冤 第 猿 猿 卷 第 愿 期 20 员 猿 年 愿 月 肥 胖 与 雌 激 素 的 相 互 关 系 及 其 对 子 宫 的 作 用 研 究 张 媛 媛 袁 张 日 华 袁 薛 一 袁 刘 梦 兰 袁 黄 琼 袁
1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法
![1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法](/thumbs/40/22057924.jpg "1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法")
1448 相 对 校 正 因 子 在 中 药 多 指 标 测 定 中 的 应 用 研 究 进 展 1, 罗 祖 良 2, 仇 峰 1 1,, 韦 日 伟 2 1,, 覃 禹 2, 张 坤 1, 覃 洁 萍 2, 杨 美 华 1. 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京 100193 2. 广
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
11. Fab 867 (Infectious bursal disease IBD) IBD ().25 mmol/l IPTG 37 4 h [1] SDS-PAGE 1 Table 1 Primers used in the amplification of the target gene P
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37 11 215 11 中国预防兽医学报 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Vol. 37 No.11 Nov. 215 doi: 1.3969/j.issn.8-589.215.11.12 张瑛杰 1, 尹杰超 1, 李天鹤 2, 周兵 3, 徐鹏飞 1, 荆燕 1,4, 任桂萍 1*, 李德山 1* (1. 153 2. 49
Microsoft Word - _6-15_--CCMP93-CT-107.doc
Yearbook of Chinese Medicine and Pharmacy, 23(6),303-320,2005 中 醫 藥 年 報 第 23 期 第 6 冊 編 號 :CCMP93-CT-107 補 中 益 氣 湯 抑 制 多 種 惡 性 細 胞 腫 瘤 生 長 機 轉 的 體 外 細 胞 與 肺 氣 虛 老 鼠 模 型 之 先 驅 研 究 沈 建 忠 長 庚 大 學 中 醫 系 摘 要
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作
16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 210037;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 233100) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting
Microsoft Word - 16周同.doc
生物工程学报 Chin J Biotech 2009, November 25; 25(11): 1697-1704 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved
臨 床 藥 物 治 療 學 Therapeutics of Clinical Drugs ( 5% 10%) 3 EGFRIs ( ) 4 (10-17%) TKI (5-9%) ( clindamycin 1%) doxycycline 100 mg minocycline 100 mg isot
Therapeutics of Clinical Drugs 臨 床 藥 物 治 療 學 表 皮 生 長 因 子 抑 制 劑 皮 膚 併 發 症 中 山 醫 學 大 學 附 設 醫 院 藥 劑 科 藥 師 林 政 仁 吳 雀 維 中 山 醫 學 大 學 附 設 醫 院 醫 師 劉 親 穎 摘 要 (epidermal growth factor receptor inhibitors EGFRIs)
绎 阴 元元 510515 Caco-2 Caco-2 P 林学 园艺
中国农学通报 2015,31(10):153-157 Chinese Agricultural Science Bulletin 蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展 杨 辉 李 猛 王 平 孙吉康 代明龙 中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 410004 摘 要 总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征 地理分布差异 组织培养 扦插嫁接 有性繁育 遗 传多样性分析 药用成分的种类 有效成分的分离纯化方法
ment group was more effective than that of the control group OR = % CI = Conclusion The clinical efficacy of Chinese medic
33 243 HAART Meta * 1 1 1 1 1 2 3 3 3 1. 530001 2. 538000 3. 530011 highly active anti-retroviral therapy HAART Pubmed HAART randomized controlled trials RCT Jadad RevMan5. 3 Meta 5 RCT 761 Meta HAART
Microsoft Word - 360145.doc
项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗
, GC/MS ph GC/MS I
S00017052 O O , GC/MS ph GC/MS I Abstract Drug abuse is a serious issue throughout the world. Amphetamine-type stimulants (ATS) are substances frequently used by drug abusers. There are significant needs
Microsoft PowerPoint - David_Lam_materials.ppt
與 癌 共 存 新 概 念 肺 癌 治 療 新 進 展 肺 癌 的 化 學 及 標 靶 治 療 林 志 良 醫 生 瑪 麗 醫 院 內 科 胸 肺 專 科 香 港 大 學 內 科 學 系 臨 床 助 理 教 授 二 零 一 一 年 三 月 十 九 日 與 癌 共 存 盡 量 延 長 病 患 的 存 活 期 症 狀 得 以 減 輕 改 善 並 提 高 生 活 質 素 肺 癌 治 療 個 人 化 腫 瘤
第 33 卷 第 2 期 2010 年 4 月 - 149 - 脱 蛋 白 较 好 的 方 法 是 Sevag 法, 它 是 根 据 蛋 白 质 在 氯 仿 等 有 机 溶 剂 中 变 性 的 特 点, 使 蛋 白 质 变 性 成 胶 状, 此 法 条 件 温 和, 可 避 免 多 糖 的 降 解
- 148 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.2 April 2010 植 物 多 糖 的 研 究 进 展 陶 遵 威 1, 郑 夺 1, 邸 明 磊 2, 单 晓 菊 1 天 津 市 医 药 科 学 研 究 所, 天 津 300020; 2 天 津 中 医 药 大 学, 天 津 300073 2 摘 要 多 糖 是 由 单 糖 连 接 而 成 的 多 聚 物,
DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0.
118 217 5 38 1 DOI 1.3969/j.issn.5-6521.217.1.28 Food Research And Development 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1. 731 2. 731 - UPLC-MS/MS 5. 1 mol/l ProElut PXC 5 % - Thermo Hypersil Gold mm 2.1 mm 1.9 μm ESI
時間
104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 手 冊 104 學 年 度 生 醫 系 碩 士 班 新 生 座 談 會 時 間 :104 年 7 月 9 ( 星 期 四 ) 1:30 PM 地 點 : 正 心 222 程 序 : 1. 新 生 第 二 階 段 報 到 1:20~1:30pm 2. 師 資 課 程 等 相 關 事 項 介 紹 1:30~2:00 pm 3. 各 老 師 領 域 專
第一章 图 １ １ 传染病的特征 ９ Ｔ ｈ１ Ｔ ｈ２ 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 Ｔ Ｎ Ｆα 和 ＩＦＮγ 可抑制放线菌的生长而 ＩＬ ６ 的作用则 反之 ＩＬ １ ２ 和 ＧＭ ＣＳＦ 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 ＩＬ １ｒａ 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 51 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 对 照 品 栀 子 苷 ( 批 号 1109-201115) 甘 草 苷 ( 批 号 1110-201106) 连 翘 酯 苷
50 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱 研 究 * 胡 建 兰, 邵 萌, 余 林 中 南 方 医 科 大 学 中 医 药 学 院, 广 东 广 州 510515 摘 要 : 目 的 研 究 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱, 建
* CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI /j. issn X Incipient Fault Detection in Papermaking Wa
2 *. 20037 2. 50640 CUSUM EWMA PCA TS79 A DOI 0. 980 /j. issn. 0254-508X. 207. 08. 004 Incipient Fault Detection in Papermaking Wastewater Treatment Processes WANG Ling-song MA Pu-fan YE Feng-ying XIONG
1.0 % 0.25 % 85μm % U416 Sulfate expansion deformation law and mechanism of cement stabilized macadam base of saline areas in Xinjiang Song
1.0 % 0.25 % 85μm 0.97 0.136 % U416 Sulfate expansion deformation law and mechanism of cement stabilized macadam base of saline areas in Xinjiang Song Liang 1,2 Wang Xuan-cang 1 1 School of Highway, Chang
抗肿瘤药理学 网课件xjwang.ppt
2016-11-04 cytotoxic agents Cell Cycle-nonspecific (CCNS) agents Alkylating agents Carmustine Chlorambucil, Melphalan, Cyclophosphamide, Thiotepa Anthracyclines Daunorubicin, Doxorubicin, Epirubicin
Microsoft Word 赵凯-二校 出4154
6 10 Vol. 6 No. 10 2015 10 Journal of Food Safety and Quality Oct., 2015 赵 1, 凯 2, 贾彦博 3*, 王啸 2, 丁枫芸 2, 肖海龙 3, 黄建萍 3 (1., 310058; 2., 310019; 3., 310022) 摘要 : 目的 ELISA 方法, Balb/c 4, ELISA,,, ELISA 结果,
[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig
![[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig](/thumbs/91/106435555.jpg "[1-3] (Smile) [4] 808 nm (CW) W 1 50% 1 W 1 W Fig.1 Thermal design of semiconductor laser vertical stack ; Ansys 20 bar ; bar 2 25 Fig")
40 6 2011 6 Vol.40 No.6 Infrared and Laser Engineering Jun. 2011 808 nm 2000 W 1 1 1 1 2 2 2 2 2 12 (1. 710119 2. 710119) : bar 808 nm bar 100 W 808 nm 20 bar 2 000 W bar LIV bar 808 nm : : TN248.4 TN365
ph ph ph Langmuir mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 3 CO 2-3 PO mg /L 5 p
1 2 1 2 3 1 2 1. 100054 2. 100054 3. 100036 ph ph ph Langmuir 166. 67 mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 4 5. 00 mg /L 5 ph doi 10. 13928 /j. cnki. wrahe. 2017. 03. 017 TV213. 4 + TU991. 26 + 6 A 1000-0860
討論
MTT cell viability assay 1 [45] succinate dehydrogenase MTT Kreb s cycle 2 MTT 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide DMSO 570 nm 15 3 MTT solution MTT Sigma Cat. M-2128 ( PBS ) 5
II ABSTRACT Severe acute respiratory syndrome (SARS) was the first severe infectious disease in the 21 century,which was caused by a new coronavirus,n
I SARS 21 SARS-CoV GeneBank SARS-CoV Tor2 PCR N PN422 N 40% SARS N 95% N C N 38 15%~30% SARS N N 39 Western N 30 60aa 160~170aa N Bal b/c 8 39 Western Blot 8 6 2 N N 30 184 301 360 2 2 IgG1 10 6 10 9 M
标题
摇 878 环 球 中 医 药 2015 年 7 月 第 8 卷 第 7 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, July 2015,Vol 郾 8, No 郾 7 慢 性 前 列 腺 炎 外 治 法 治 疗 进 展 综 述 莫 旭 威 摇 王 彬 摇 李 海 松 摇 赵 冰 摇 刘 洋 揖 摘 要 铱 摇 目 前 慢 性 前 列 腺 炎 的 治 疗 已 经
Microsoft Word - A200811-224.doc
β- 环 糊 精 及 其 衍 生 物 在 难 溶 性 中 药 成 分 增 溶 1 上 的 应 用 欧 水 平 1, 欧 阳 彩 霞 2, 王 森 1, 吴 品 江 1, 钟 英 1 1,2, 杨 明 1 成 都 中 医 药 大 学 研 究 生 院, 成 都 (611137) 2 江 西 中 医 学 院 现 代 中 药 制 剂 教 育 部 重 点 实 验 室, 南 昌 (330004) E-mail:oushuiping1208@126.com
12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL
![12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL](/thumbs/91/106935627.jpg "12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL")
( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot
从 灵 敏 度 和 特 异 度 综 合 分 析, 认 为 PGⅠ 60 μg/l PGⅠ/PGⅡ 6 是 中 国 胃 癌 高 发 区 居 民 胃 癌 和 慢 性 萎 缩 性 胃 炎 筛 查 较 为 合 适 的 界 定 值 何 宝 国 等 [8] 应 用 乳 胶 增 强 免 疫 比 浊 法 进 行 测
![从 灵 敏 度 和 特 异 度 综 合 分 析, 认 为 PGⅠ 60 μg/l PGⅠ/PGⅡ 6 是 中 国 胃 癌 高 发 区 居 民 胃 癌 和 慢 性 萎 缩 性 胃 炎 筛 查 较 为 合 适 的 界 定 值 何 宝 国 等 [8] 应 用 乳 胶 增 强 免 疫 比 浊 法 进 行 测](/thumbs/40/21925308.jpg "从 灵 敏 度 和 特 异 度 综 合 分 析, 认 为 PGⅠ 60 μg/l PGⅠ/PGⅡ 6 是 中 国 胃 癌 高 发 区 居 民 胃 癌 和 慢 性 萎 缩 性 胃 炎 筛 查 较 为 合 适 的 界 定 值 何 宝 国 等 [8] 应 用 乳 胶 增 强 免 疫 比 浊 法 进 行 测")
胃 蛋 白 酶 原 测 定 在 胃 癌 及 其 癌 前 病 变 诊 断 中 的 应 用 关 键 词 胃 蛋 白 酶 原 测 定 胃 癌 癌 前 病 变 胃 癌 是 我 国 死 亡 率 最 高 的 恶 性 肿 瘤, 提 高 早 期 胃 癌 的 检 出 率 可 大 大 降 低 胃 癌 死 亡 率, 改 善 病 人 生 活 质 量 日 本 早 期 胃 癌 较 高 的 发 现 率 及 手 术 率 得 益 于
Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com
Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com Bethyl 公司 Bethyl Laboratories, Inc. ) 成立于1972年 一直秉承改善生活的理念致力于科学研究的理念 提供高质量的抗体产品 和抗体定制服务 Bethyl所销售的每一个抗体都是在德克萨斯州的蒙哥马利的唯一工厂生产 并且都经过Bethyl
陆睿等 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测 05,(0) 7 作用较大 半衰期短的缺点 重组人纤溶酶原 HCG 097丽珠集团丽珠制药厂 胎牛血清 激活剂 rhpaf E K 区缺失体 具有出血副作 SH0070.0HyClone M G80Sigma 用小 半衰期长 溶栓活性高等
生物技术通报 研究报告 IOTECHNOLOGY ULLETIN 05, (0):6- 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的 检测 陆睿 宋绍征 祁正强 葛欣 邵宾 成勇 江苏省转基因动物制药工程研究中心扬州 5009 摘 要 人组织纤溶酶原激活剂 ht-pa 是临床血栓疾病治疗的主要生物药品应用转基因动物乳腺生物反应器制备已有 报道但重组人纤溶酶原激活剂 rhpa 在转基因动物中表达尚未见报道
H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g
16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%
SO 2 g/kg 2.0 ppm 2
ISSN 0255-6162 GPN 2006900031 273 92 9 20 161-2 02 26531318 http://www.nlfd.gov.tw 1 SO 2 g/kg 2.0 ppm 2 (Center of Biological Evaluation and Research, FDA) 30 1991 FDA 91 10 30 Trend of Vaccine Development
PCA+LDA 14 1 PEN mL mL mL 16 DJX-AB DJ X AB DJ2 -YS % PEN
21 11 2011 11 COMPUTER TECHNOLOGY AND DEVELOPMENT Vol. 21 No. 11 Nov. 2011 510006 PEN3 5 PCA + PCA+LDA 5 5 100% TP301 A 1673-629X 2011 11-0177-05 Application of Electronic Nose in Discrimination of Different
Microsoft Word 冯 凡.doc
4 4 Vol. 4 No. 4 2013 8 Journal of Food Safety and Quality Aug., 2013 B 1 冯 凡 1 1,, 许杨 2*, 王丹 1, 雷达 1, 孙澄浩 1 (1., 330047; 2., 330047) 摘要 : 目的 F7 方法 pet22b-f7, E. coli BL21(DE3), 结果 F7 AFB1, ELISA AFB1
Protein Labeling and Detection
ECL plex Product Specialist 1/ Western Blot 2/ Western Blotting- PI 3/ Western Blotting 1. 2 1 2. 3. 4. Y 3 4 5. 4/ 1. SDS- (SDS-PAGE) SDS ( β- ) --SDS 5/ SDS-PAGE - - - (Tris-HCL ph 6.8) glycine/chloride
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4期
中 国 农 学 通 报 2013,29(04):39-43 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 药 荆 芥 最 新 研 究 进 展 1,2 1,2 赵 立 子, 魏 建 和 ( 1 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 北 京 100193; 2 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京
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2005 年 第 25 卷 有 机 化 学 Vol. 25, 2005 第 7 期, 771~779 Chinese Journal of Organic Chemistry No. 7, 771~779 综 述 与 进 展 紫 草 素 的 全 合 成 研 究 进 展 徐 德 锋 管 鹏 健 毛 志 强 李 绍 顺 * ( 上 海 交 通 大 学 药 学 院 上 海 200030) 摘 要 综 述
细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
出國報告.docx.docx
出 國 報 告 ( 出 國 類 別 : 進 修 ) 兒 童 急 性 淋 巴 性 白 血 病 的 基 因 體 變 化 服 務 機 關 : 國 立 臺 灣 大 學 醫 學 院 附 設 醫 院 / 檢 驗 醫 學 部 姓 名 職 稱 : 楊 永 立 / 醫 師 派 赴 國 家 : 美 國 /St. Jude Children s Research Hospital 出 國 期 間 : 101 年 11 月
SVM OA 1 SVM MLP Tab 1 1 Drug feature data quantization table
38 2 2010 4 Journal of Fuzhou University Natural Science Vol 38 No 2 Apr 2010 1000-2243 2010 02-0213 - 06 MLP SVM 1 1 2 1 350108 2 350108 MIP SVM OA MLP - SVM TP391 72 A Research of dialectical classification
38 張 元 素 歸 經 引 經 理 論 研 究 本 文 以 張 元 素 著 述 為 主 要 材 料, 采 用 上 海 涵 芬 樓 景 印 元 杜 思 敬 濟 生 拔 粹 刊 本 4 ; 醫 學 啟 源 為 任 應 秋 點 校 本, 任 本 以 明 成 化 八 年 刊 本 為 底 本, 旁 校 上
J Chin Med 24(1): 37-47, 2013 37 1 1,2, * 1,2 1,2 1 2 101 04 09 101 09 26 張 元 素, 字 潔 古, 金 代 易 州 ( 河 北 易 水 ) 人, 他 學 識 淵 博, 臨 證 經 驗 豐 富, 善 於 化 裁 古 方 他 建 立 了 以 臟 腑 辨 證 為 核 心 的 臨 床 證 治 體 系, 創 新 了 用 藥 理 論,
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39 6 Vol. 39, No. 6 2013 6 ACTA AUTOMATICA SINICA June, 2013 1, 2,,,. DOI,,,., 2013, 39(6): 697 702 10.3724/SP.J.1004.2013.00697 Present Situation and Development Tendency of Aerospace Control Techniques
2000.11 2000.11 2000 11 Abstract: Background: The development of autoantibodies in the sera of patients with cancers has been described, but the mechanism is still not clear. Objective: The aim of this
197 2 相 关 背 景 多 巴 胺 D 2 类 受 体 包 括 D 2 D 3 和 D 4 受 体 1975 年,Randrup 首 先 提 出, 多 巴 胺 可 能 参 与 抑 郁 症 的 发 病 后 来 Maj 等 通 过 一 系 列 的 实 验 证 明, 几 乎 所 有 的 长 期 抗 抑
196 未 来 药 物 新 型 多 巴 胺 D 2 类 受 体 部 分 激 动 剂 brexpiprazole 刘 长 鹰 1, 于 鹏 2, 李 祎 亮 1 1. 天 津 药 物 研 究 院 天 津 市 新 药 设 计 与 发 现 重 点 实 验 室, 天 津 300193 2. 天 津 药 物 研 究 院 医 药 信 息 中 心, 天 津 300193 摘 要 : 在 多 巴 胺 D 2 类 受
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
AFLP % 1. 1 DNA 5 RAPD DNA 0. 1g % ~ ph 6 10 DNA 9 40μl TE SSR STS 20ng /L
2012 13 2 201-206 Journal of Plant Genetic Resources / 071001 41 SSR 21 SSR 41 52 2 ~ 4 2. 5 Shannon 0. 21 ~ 1. 40 0. 73 5. 54 3 7 9 13. 16% ~ 186. 49% 5. 48 6 11 SSR Genetic Diversity of Peanut Arachis
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绎 1. 100193 2. 100080 3. 100080 2014 5 29 764 8 doi: 10.11842/wst.2014.06.007 G25 A 3 Apocynum venetum LinnPoa 原 [4] [5] [6] cynum pictum Sckrenk Baill [7] Poacynum hendersonii Hook. Woodson [8] [9] [10]
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中 国 农 业 大 学 学 报 1999, 4(3): 109~113 Journal of China Agricultural University 小 鼠 桑 棍 胚 玻 璃 化 冷 冻 前 后 生 物 频 谱 处 理 对 体 外 发 青 的 影 晌 1 朱 士 恩 2 王 海 彦 曾 申 明 王 永 胜 张 忠 诚 ( 中 国 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院 ) 周 林 陈 银 (
strated that cell clones were decreased with increase of the concentration of procyanidins. PI staining a- nalysis showed that cell cycle was a
32 2 Vol. 32 No. 2 2011 4 Journal of Jinan University Medicine Edition Apr. 2011 HepG2 1 1 2 1 1 1 1. 510632 2. 510080 HepG2 MTT WST-8 HepG2 PI Annexin V-FITC /PI Western blotting HepG2 - P < 0. 01 HepG2
4 : pcdna3.1(+) ;PLV-EF1A-EGFP(2A) 30s,41 30s,72 2min,35 ; Puro ; TG1; (Hu min 1% manembryonickidney293cels); (Ma- din-darbycaninekidneyce
33 4 2017 6 CHINESEJOURNALOF VIROLOGY Vol.33 No.4 June 2017 1# 2#,, 2, 2, 1 3* 1*,, (1., 511436; 2., 510230; 3., 510663) : HEK-293-HA RT-PCR HA, pcdna3.1(+ ), pcdna3.1(+ )-HA pcdna3.1(+)-ha PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro
第16卷 第2期 邯郸学院学报 2006年6月
第 18 卷 第 4 期 邯 郸 学 院 学 报 2008 年 12 月 Vol.18 No.4 Journal of Handan College Dec. 2008 赵 文 化 研 究 论 赵 都 邯 郸 与 赵 国 都 城 研 究 问 题 朱 士 光 ( 陕 西 师 范 大 学 历 史 地 理 研 究 所, 陕 西 西 安 710062) 摘 要 : 战 国 七 雄 之 一 的 赵 国 都 城
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Theory of carduonephric disharmony and irritable bowel syndrome Xia-min Lu 1, Min Lu 1 Nanjing University of Traditional Chinese Medicine, Nanjing, China Department of Digestive System, Jiangsu Integrated
20-1385-0723.doc
药 学 学 报 Acta Pharmaceutica Sinica 2011, 46 (11): 1385 1389 1385 复 方 红 霉 素 延 迟 起 释 型 缓 释 片 的 研 制 及 其 体 外 释 放 陈 海 霞 1, 陈 志 鹏 2, 王 启 荣 2*, 刘 泽 坤 3, 马 全 龙 4 (1. 山 东 大 学 齐 鲁 医 院 药 学 部, 山 东 济 南 250012; 2. 山
2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE : g/ d a : b : a/ b Ag As Au Cd Ce 1817
2008 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 15 2 : 1006 2 446X (2008) 02 2 00152 17. (, 201800) :,, ;, : ; ; ; ; : R 15313 : A, () () ( ) () () () [ 1 ],, 1,, ( ) 1996 1997, 4 ( ), 12 42 [ 2 ], (1) 1, 36, 17
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微 生 物 学 通 报 FEB 20, 2008, 35(2) 306~30 Microbiology 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@im.ac.cn 生 物 实 验 室 响 应 面 分 析 法 优 化 副 溶 血 性 弧 菌 生 长 条 件 刘 代 新 宁 喜 斌 * 张 继 伦 2 (. 200090) (2. 20202) 摘 要
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生物技术通报 材料 方法
生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显
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医 学 科 研 方 法 主 讲 苏 秀 兰 细 胞 生 物 学 教 授 第 一 讲 绪 论 一 概 念 : 在 医 学 科 学 研 究 活 动 中, 运 用 科 学 的 实 践 和 理 论 思 维 的 技 巧, 充 分 发 挥 自 己 的 智 慧, 去 寻 找 观 念 世 界 与 现 实 世 界 之 间 的 联 系 或 规 律, 从 而 发 现 新 现 象, 提 出 新 理 论 的 手 段 二 医
12-1b T Q235B ML15 Ca OH Table 1 Chemical composition of specimens % C Si Mn S P Cr Ni Fe
* - - 100084 Q235B ML15 Ca OH 2 DOI 10. 13204 /j. gyjz201508023 STUDY OF GALVANIC CORROSION SENSITIVITY BETWEEN ANY COUPLE OF STUD WELDMENT OR BEAM Lu Xinying Li Yang Li Yuanjin Department of Civil Engineering
2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1. 1. 2 500 730 2 5 1 1 1. 1. 3 739 127 116 712 265 3 143 50 2 2 1 13 2 14 3 15 4 16 5 17 6 18 7 19 8 20 9
2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE 18 12 1006-446X 2011 12-0001-28 1 2 2 1. 201800 2. 510070 R 244. 9 A 1 1. 1 3 2000 1. 1. 1 1973 3 52 299 31 136 100 32 1 13 2011-10 -20 1 2011 GUANGDONG WEILIANG YUANSU
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第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
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32 1 2013 2 Journal of Chinese Electron Microscopy Society Vol. 32 No. 1 2013-02 1000-6281 2013 01-0054-08 1 1* 2 1 1 1. 2. 710062 AFM SEM WPOJ-DS UPOJ-DS WPOJ-DS β- UPOJ-DS AFM WPOJ-DS UPOJ-DS SEM UPOJ-DS
2015 1 330 GLOBAL EDUCATION Vol. 44 No1 2015 / 300387 / 300387 20 20 1926 20 1912 1912 1918 1919 34 1919 1921 1 1922 1923 1925 7 100 2 1922 3 1923 5 1923 1924 4 1927 1949 20 1. 20 5 35 2. 20 20 1927 1949
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2011 33 6 1117-1121 http / /xuebao. jxau. edu. cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E - mail ndxb7775@ sina. com * 311400 Alcalase 2. 4 L TS225. 1 + 6 A 1000-2286 2011 06-1117 - 05 A Study on
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填 表 说 明 1. 本 表 所 填 数 据 截 至 时 间 为 2011 年 9 月 底 2. 本 表 请 用 A4 纸 双 面 打 印, 加 盖 学 校 公 章 后 上 报 3. 表 内 所 填 数 据 请 学 校 认 真 核 实, 确 保 准 确 无 误 4. 建 设 完 成 情 况 对 照
填 表 说 明 1. 本 表 所 填 数 据 截 至 时 间 为 2011 年 9 月 底 2. 本 表 请 用 A4 纸 双 面 打 印, 加 盖 学 校 公 章 后 上 报 3. 表 内 所 填 数 据 请 学 校 认 真 核 实, 确 保 准 确 无 误 4. 建 设 完 成 情 况 对 照 表 等 相 关 表 格 栏 高 不 够 请 自 行 增 加 5. 表 格 中 填 写 的 相 关 量
《红楼梦》中茗烟与李贵的对比分析
第 13 卷 第 2 期 中 南 大 学 学 报 ( 社 会 科 学 版 ) Vol.13 No.2 2007 年 4 月 J. CENT. SOUTH UNIV. (SOCIAL SCIENCE) Apr. 2007 红 楼 梦 茗 烟 与 李 贵 形 象 比 较 研 究 李 鸿 渊, 奉 旨 亨 ( 湖 南 科 技 大 学 人 文 学 院, 湖 南 湘 潭,411201) 摘 要 : 茗 烟 与
380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂
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在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079