86 张德福, 等 : 克隆家畜安全性评估及其产业化研究进展 犫 ) 血液学和血液临床化学 : 该研究对 30 头克隆牛及其 7 头克隆后代的血液学和临床化学特征进行了检测, 大部分检测在动物围产期进行, 其他检测在动物出生后 1 个月内进行 因为季节 饲养条件和年龄等均对血液学和临床化学指标产生影
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- 融鸯 李
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1 上海农业学报 2013,29(1):85-90 犃犮狋犪犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犲犛犺犪狀犵犺犪犻 文章编号 : (2013) 克隆家畜安全性评估及其产业化研究进展 张德福, 戴建军, 张廷宇, 吴彩凤, 张树山, 顾晓龙,3 ( 1 上海市农业科学院畜牧兽医研究所, 上海 ; 2 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室, 上海 ; 3 四川农业大学动物医学院, 雅安 ) 摘要 : 综述了克隆牛 猪和羊的研究现状 克隆动物的生长与繁殖等生物学特性以及克隆动物的再克隆等最新研究进展, 为克隆家畜的产业化发展和安全性评估提供参考 关键词 : 克隆家畜 ; 安全评估 ; 产业化中图分类号 : 犛 814 文献标识码 : 犃 犃犱狏犪狀犮犲狊犻狀狉犲狊犲犪狉犮犺狅狀狊犪犳犲狋狔犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀犪狀犱犻狀犱狌狊狋狉犻犪犾犻狕犪狋犻狅狀狅犳犮犾狅狀犻狀犵犳犪狉犿犪狀犻犿犪犾狊 犣犎犃犖犌犇犲 犳狌, 犇犃犐犑犻犪狀 犼狌狀, 犣犎犃犖犌犜犻狀犵 狔狌, 犠犝犆犪犻 犳犲狀犵,3 犣犎犃犖犌犛犺狌 狊犺犪狀, 犌犝犡犻犪狅 犾狅狀犵 ( 1 犐狀狊狋犻狋狌狋犲狅犳犃狀犻犿犪犾犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犞犲狋犲狉犻狀犪狉狔犕犲犱犻犮犻狀犲, 犛犺犪狀犵犺犪犻犃犮犪犱犲犿狔狅犳犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊, 犛犺犪狀犵犺犪犻 , 犆犺犻狀犪 ; 2 犇犻狏犻狊犻狅狀狅犳犃狀犻犿犪犾犌犲狀犲狋犻犮犈狀犵犻狀犲犲狉犻狀犵, 犛犺犪狀犵犺犪犻犓犲狔犔犪犫狅狉犪狋狅狉狔狅犳犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犌犲狀犲狋犻犮狊犪狀犱犅狉犲犲犱犻狀犵, 犛犺犪狀犵犺犪犻 , 犆犺犻狀犪 ; 3 犃狀犻犿犪犾犕犲犱犻犮犪犾犆狅犾犲犵犲, 犛犻犮犺狌犪狀犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔, 犢犪 犪狀 , 犆犺犻狀犪 ) 犃犫狊狋狉犪犮狋 : 犜犺犻狊狆犪狆犲狉狊狌犿犿犪狉犻狕犲犱狋犺犲犮狌狉狉犲狀狋狊犻狋狌犪狋犻狅狀狅犳犮犾狅狀犻狀犵犮犪狋犾犲, 狆犻犵狊犪狀犱狊犺犲犲狆犪狀犱狋犺犲犾犪狋犲狊狋狆狉狅犵狉犲狊狅犳狉犲狊犲犪狉犮犺犻狀犵犻狀狋狅狋犺犲犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犮犺犪狉犪犮狋犲狉狊狅犳犮犾狅狀犲犱犪狀犻犿犪犾狊犻狀犵狉狅狑狋犺犪狀犱狉犲狆狉狅犱狌犮 狋犻狅狀犪狀犱狋犺犲狉犲 犮犾狅狀犲犱犪狀犻犿犪犾狊狊狅犪狊狋狅狆狉狅狏犻犱犲犪狉犲犳犲狉犲狀犮犲犳狅狉犱犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋犪狀犱狊犪犳犲狋狔犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀狅犳犮犾狅狀犲犱犾犻狏犲狊狋狅犮犽犻狀犱狌狊狋狉犻犪犾犻狕犪狋犻狅狀. 犓犲狔狑狅狉犱狊 : 犆犾狅狀犲犱犳犪狉犿犪狀犻犿犪犾 ; 犛犪犳犲狋狔犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀 ; 犐狀犱狌狊狋狉犻犪犾犻狕犪狋犻狅狀, 动物克隆技术的诞生 [1] 是当代生物技术发展的一个重要里程碑, 为生命科学研究开辟了新的思路 基于生物技术有可能危及人类健康和生态环境, 克隆动物的生物安全性备受社会关注, 学术界对其是否 [2-11] 存在安全隐患存在较大争议, 许多研究机构分别就此问题进行了大量相关研究 本研究对近年来国内外 ( 特别是日本 美国 阿根廷和巴西 ) 克隆家畜 ( 牛 猪和羊 ) 安全性研究现状及其产业化进展进行了综述, 旨在为促进克隆家畜产业化健康发展提供一些借鉴 1 牛体细胞克隆安全性评估和产业化现状 1.1 克隆牛生产现状及安全性评估 犠犪狋犪狀犪犫犲等 [7] 对 年日本 171 头克隆牛及 32 头克隆牛后代的健康状况和畜牧学性状进行了跟踪调查, 并对研究结果进行了总结, 主要包括遗传相似性 血液学和临床化学 病理学 生长性能 繁殖性能 产肉性能和产奶性能等 7 个方面 犪 ) 遗传相似性 : 该研究选择 17~23 对微卫星, 对 14 个细胞系及来自该细胞系的 40 头克隆牛的遗传相似性进行了检查, 没有检测到任何遗传变异的存在, 说明克隆牛及其克隆供体的遗传特征完全一致 收稿日期 : 基金项目 : 国家转基因生物新品种培育科技重大专项 (2008 犣犡 ,2009 犣犡 犅 ); 上海市科技兴农攻关项目 ( 沪农科攻字 ); 上海市科技兴农推广项目 ( 沪农科推字 ) 和上海市科委科技成果转化项目 ( 犖 1800) 资助作者简介 : 张德福 (1963-), 男, 博士, 研究员, 主要研究方向 : 动物胚胎工程 犜犲犾 :(021) ; 犈 犿犪犻犾 : 狕犺犪狀犵犱犲犳狌 10@ 狔犪犺狅狅. 犮狅犿. 犮狀
2 86 张德福, 等 : 克隆家畜安全性评估及其产业化研究进展 犫 ) 血液学和血液临床化学 : 该研究对 30 头克隆牛及其 7 头克隆后代的血液学和临床化学特征进行了检测, 大部分检测在动物围产期进行, 其他检测在动物出生后 1 个月内进行 因为季节 饲养条件和年龄等均对血液学和临床化学指标产生影响, 选择合适的对照组显得很重要 血液学分析选择了 1~14 个指标, 包括红细胞? 白细胞数和红细胞比容等 ; 临床化学分析选用了 5~42 个指标, 包括葡萄糖 犅犝犖 犔犇犎 2+ 和犆犪等 克隆动物及其后代与对照组相比, 在这些指标上均无显著差异 对于 4 头克隆母牛和 2 头克隆公牛的超过 3 年的血液学和血液临床化学分析检测也均没有找出任何差异存在 犮 ) 病理学 :15 头克隆牛和 3 头克隆牛后代病理学的研究结果显示, 克隆牛围产期死亡比例为 4?13, 大多数克隆动物在此阶段发现存在心脏 肺脏 肾脏和脐带异常 对于 6 头青年到成年阶段克隆牛的检测, 则没有发现有任何异常存在 总之, 表型正常的牛几乎没有检测出病理学特征的存在, 而对于那些死亡的克隆牛却都存在严重的异常 值得注意的是, 克隆动物的异常病理学特征在传统技术生产的牛群中也很常见 克隆牛的后代虽然样本较小, 但并无异常出现 犱 ) 生长性能 : 该研究对 59 头克隆牛和 5 头克隆牛后代进行了生长性能评估, 包括体重 肩峰高 胸围和胸深等 数据显示, 成年克隆动物及其后代的品种特征值和个体差异都在正常范围内, 克隆牛及其后代与正常牛的生长曲线也都非常相似 犲 ) 繁殖性能 : 该研究共选取了处于繁殖期的 34 头克隆母牛和 16 头克隆公牛, 用于检测的繁殖技术有犃犐 ( 犃狉狋犻犳犻犮犻犪犾犻狀狊犲犿犻狀犪狋犻狅狀 ) 犐犞犉 ( 犐狀犻狀狋狉狅犳犲狉狋犻犾犻狕犪狋犻狅狀 ) 和犈犜 ( 犈犿犫狉狔狅狋狉犪狀狊犳犲狉 ) 在犃犐试验中, 绝大部分克隆母牛都具备正常繁殖能力, 只有 1 头牛因子宫异常而导致不孕 部分克隆母牛超数排卵胚胎移植给 9 头受体牛后, 产下 5 头后代, 部分牛流产 另外, 部分克隆牛血液中孕酮和雌激素 17 β ( 犈 2) 的浓度测定和卵泡波发生的检测并没有发现异常 绝大部分克隆公牛都来自于冠军牛, 对其中 14 头的精液品质进行了检测, 精子浓度 精子活力和精液狆犎没有发现任何异常 采用传统冷冻技术对克隆牛的精液进行冷冻保存, 解冻后人工授精,69 头母牛有 35 头怀孕并产下 30 头后代 ; 犐犞犉的试验也未发现任何异常 上述系列研究表明, 成年克隆牛的繁殖能力总体上是正常的 ( 个别异常现象在普通公牛中也存在 ) 犳 ) 产肉性能 : 该研究对 19 头克隆牛和 23 头克隆牛后代的产肉性状进行了检测, 指标包括体增重和酮体性状 酮体性状主要有酮体重 眼肌面积 脂肪厚度 屠宰率和大理石花纹评分等 对克隆牛和其供体牛的体增重和酮体性状的比较结果显示, 克隆牛和其细胞供体牛在上述指标上均无差异 克隆牛后代的上述指标与对照组相比同样无显著差异 肉制品品尝试验认为, 克隆肉牛 ( 日本黑牛 ) 牛肉味道鲜美的自愿者比例为 87%( 狀 =161), 而认为克隆肉牛后代 ( 日本褐牛 ) 牛肉味道鲜美的自愿者比例为 45% 自愿者愿意购买 克隆肉牛 和 克隆后代肉牛 的比例为 92.1% 和 50.0% 犵 ) 产奶性能 : 该研究对 22 头克隆牛产奶性能进行了检测, 检测指标包括产奶量 泌乳曲线和奶成分 乳成分包括 3~11 项质量参数, 如总脂肪 总蛋白 体细胞含量 非尿氮乳糖和非脂固形物 克隆牛的产乳量与对照组无差异, 个体及品种差异均在正常范围之内 虽然以上研究证实克隆牛与正常牛大多数生长性状没有显著差异 但是, 也有研究表明, 克隆牛在某些方面与正常牛有显著的不同 首先到达初情期的时间比普通牛平均晚 62 犱, 且克隆牛初情期明显延 [12,13] 长 ; 但由于各种客观因素的影响, 目前还没有得到克隆牛生长繁殖的普遍规律 其次有报道发现, 健康克隆牛和 19 头人工授精牛在同等条件下尽管血液学指标在正常范围内, 但血红蛋白浓度和红细胞压 [14] 积显著低于普通牛, 克隆牛出现贫血现象 ; 还有研究发现, 克隆牛外周血中嗜中性白细胞较多, 血浆中 狉 谷氨酰转移酶较低 另外, 以犇犲犾狋犪 9 脱氢酶活性为评价标准发现克隆牛和普通牛在脂质代谢上存在差异 [12,13,15] 1.2 美洲 ( 美国 阿根廷和巴西 ) 三国克隆牛商业化生产现状 [4] 2007 年犘犪狀犪狉犪犮犲等总结了美国 阿根廷和巴西 3 个国家 5 年来进行商业克隆牛的概况 5 年来共移植胚胎 3374 枚, 有 388 头克隆牛诞生, 仅有 9% 的移植胚胎产下了牛犊 ; 克隆效率在 0%~45%( 大多数在 1%~10%, 有 24% 的细胞系从未产出过牛犊 ) 每头牛移植 1 枚或 2 枚胚胎的怀孕率没有显著差异 怀孕前 90 犱, 发现 2 个可以检测胚胎死亡的超声波标记 ;27% 死亡的克隆牛被观察到存在顶臀长小于 7.5 犿犿或心率少于 150 犫狆犿, 或两项指标共同存在, 且妊娠 100 犱后, 胎盘水肿 胎儿水肿和逐渐增大的腹围逐渐被用来作为胎儿流产的超声波标记 在怀孕的 114 犱, 死亡克隆胎牛的腹围显著比发育到期的胎牛大, 同时也比犕犗犈犜 ( 超数排卵 胚胎移植 ) 和 犐犞犉源的胎牛的腹围大 自从选择性的剖腹产被自然生产和辅助生产部分取代以来, 剖腹产率从 2000 年的 100% 下降到了 2005 年的 54% 平均来看,42% 的克隆牛死于分娩过程和出生后的 150 犱 最常见的异常有脐带过大症
3 上海农业学报 87 (37%) 和呼吸障碍 (19%) 出生后第 1 周的 11 项血液指标检查结果显示, 乳酸盐含量相对于正常牛下降了 50%, 从生后 24 犺到 7 犱葡萄糖含量增加到原来的 2 倍 成年克隆母牛的配种率和产犊率均正常, 克隆公牛同样可以生产高质量的精液, 并且可以成功用于人工受精或自然交配 1.3 国内克隆牛研究现状 [10] 犪 ) 遗传相似性 :2004 年黄银花等分析了来自同一细胞系的体细胞克隆牛甜甜 庆庆 浒娃及来源同一细胞系转基因体细胞克隆牛九妹 乐娃和 1 个妊娠 8 个月转基因流产胎牛 8 犆 2 以及随机抽取的 1 头鲁西黄牛 ( 犔犡 ) 1 头褐斯坦牛 ( 犎犛 ) 在 24 个微卫星位点标记牛的基因型 结果表明,24 个多态位点均表现出多态, 等位基因数为 1~5 个, 平均为 3.17 个 根据网上公布的数据, 按其最高频率计算, 甜甜 庆庆 浒娃 九妹 乐娃 8 犆 2 与培养细胞系 转基因细胞系间匹配概率为 , 根据该研究观察到的数据计算, 匹配概率为 ; 而与随机抽取的 1 头鲁西黄牛及褐斯坦牛的基因型分别在 23 和 20 个位点上完全不同 犫 ) 生物学特性 :2007 年郝海生 [11] 对比了 22 头雌性体细胞克隆奶牛与 5 头人工受精雌性奶牛发现 : 0~15 月龄的克隆牛体重和体尺参数与对照组之间无显著差异 ; 克隆牛初情期显著晚于对照组, 但二者都在正常范围内且发情周期与对照组相似 ; 对 13~14 月龄克隆牛血液学和理化指标进行检测, 其主要血液生理生化指标正常 2 猪体细胞克隆安全性评估和产业化现状 2.1 猪体细胞克隆产业化关键问题探讨相比于克隆牛和克隆羊, 克隆猪的技术难度较大, 目前国际上仅有 9 个国家 ( 地区 ) 获得过成功 猪体细胞克隆技术具有重要的研究应用价值 在医学上, 利用克隆转基因技术生产经遗传修饰的克隆猪, 可望提供大量廉价的器官以进行异体器官移植的临床研究和应用 ; 在畜牧生产中, 利用体细胞核移植技术可培育优良的猪种, 加速猪遗传改良进程 由于目前未对克隆技术本身的许多问题进行深入的研究, 克隆动物及其产品的生物安全性受到普遍关注 因此, 在克隆猪及其后代被应用于整个克隆生产 食品加工和其他相关研究领域之前, 建立科学 安全的评价体系具有重要的现实意义 2.2 体细胞克隆猪畜牧学性状评估与体细胞克隆牛相比, 克隆猪的畜牧学性状评估研究较少, 涵盖的研究内容也较少, 主要从病理学 生长性能 繁殖性能 遗传学 产肉或 ( 和 ) 产奶以及再克隆性等方面进行探讨 病理学评价目前克隆猪体系中, 大部分将早期猪克隆胚胎进行输卵管移植, 因此在体外培养的时间相对较短, 出现异常的机会相对较少 ( 相对于克隆牛 ), 较为常见的病理学症状主要有死胎 木乃伊胎和弱胎等, 相关的 [9] 机理研究也相对较少 生长性能评估 [5] 犛犺犻犫犪狋犪等研究发现, 克隆金华猪的平均初生重 (0.91 犽犵 ) 与普通金华猪 (0.87 犽犵 ) 相似, 没有出现其他克隆家畜上较常见的胎儿增大症 出生后 3~6 周, 克隆金华猪的体重显著高于普通金华猪, 但 7 周之后无显著差别 随后的生长率都无差别, 并具备普通金华猪的体征 但克隆金华猪后代的平均初生重却显著低于普通猪 (0.71 狏狊 0.87) 从出生到体重 30 犽犵, 克隆金华猪的后代与普通金华猪的日增重无显著差异, 但 30~70 犽犵时, 前者的日增重显著高于后者 (549.0 犵狏狊 犵 ) 本实验室在克隆巴马小型猪 克隆枫泾猪的研究结果则显示, 克隆猪的初生重及断奶重显著高于普通繁殖猪 繁殖性能评估 [5] 犛犺犻犫犪狋犪等研究发现, 克隆金华猪的性成熟非常早 (89~125 犱 ), 符合金华猪的基本特征 ; 本课题组对克隆巴马小型猪的观察也表明, 克隆巴马小型猪在 3 月龄时就出现爬跨动作, 性成熟非常早, 符合其品种基本特征 在克隆金华猪生长至 217~270 犱时, 进行人工授精, 所有 7 头猪第一个发情期正常受精并且自然产仔 克隆金华猪与普通金华猪在平均窝产仔数 (10.8 狏狊 11.0) 窝产活仔数 (10.2 狏狊 10.0) 和窝断奶数 (8.4 狏狊 9.1) 上无显著差异 ; 而且其繁殖性能包括怀孕期 窝产仔数和护仔性均与普通金华猪相近 与普通金华猪不同的是克隆金华猪后代的初生重低, 但日增重却显著提高 克隆金华猪后代的酮体质量与普
4 88 张德福, 等 : 克隆家畜安全性评估及其产业化研究进展 通金华猪也类似即背部脂肪厚 眼肌面积小, 而且肉质也相同, 肌间脂肪含量和嫩度也相近 总之, 克隆猪及其后代在生长性能 繁殖性能和产肉性能上与普通金华猪相似 遗传相似性同源染色体配对和重组是减数分裂和有性繁殖的重要组成部分 通过染色单体的断裂和重新连接, 遗传物质得到重新组合, 使得有性繁殖后代的遗传多样性得以增加 而体细胞核移植技术则避开了遗传重组, 克隆动物性细胞的减数分裂能力受到影响的程度还不清楚 为了评估体细胞克隆技术对于性细胞 [2] 减数分裂过程的影响程度, 犎犪狉狋等利用细胞免疫技术, 以精母细胞上的联会复合体蛋白 3( 犛犆犘 3) 和减数分裂配对二价体上的错配修复蛋白 1( 犕犔犎 1) 位点作为遗传重组发生的指示器, 对克隆公牛和正常公牛的性细胞发生过程中的遗传重组过程进行了比较 结果显示, 正常公牛 克隆公牛及其后代每个精母细胞发生重组交换的频数无显著差异 这说明绕过遗传重组的无性繁殖技术生产大的动物及其后代在性细胞减数分裂中遗传重组的发生并没有受到影响 这为包括体细胞克隆猪在内的哺乳动物的体细胞克隆及其产业化发展奠定了必要的遗传学基础 产肉性能 [5] 犛犺犻犫犪狋犪等对克隆金华猪 普通金华猪和杜洛克猪的酮体性状和肉质品质进行了检测, 发现克隆金华猪后代的背膘厚与普通猪相似且均高于杜洛克猪 克隆金华猪后代的眼肌面积与普通金华猪也相似, 但均小于杜洛克猪 (9.8,9.7 狏狊 14.8) 而且, 克隆金华猪与普通金华猪猪肉的应力值均显著低于杜洛克猪 (5.65,5.44 狏狊 7.38) 虽然两种来源猪的水渗出量无差异(6.69 狏狊 7.56), 但狆犎 (5.47 狏狊 5.67) 和烹煮损失量却差异显著 (26.80 狏狊 24.89) 犠犪犾犽犲狉等 [6] 对 404 头猪的眼肌化学成分组成进行了分析 该研究选用了 58 项不同的参数共生成 和 9396 个数据点, 并根据对照组样本的测量值为克隆后代肉质指标制定标准, 具体做法为 : 总值的 10% 加到最大值上构成数据上限, 最小值减去总值的 10% 构成下限, 超出上下限视为临床异常点 结果显示, 在克隆猪后代的 个数据点中, 有 3 个点超出了临床异常范围, 但其中的 2 个点在美国农业部国家营养数据库参考标准 ( 犝犛犇犃犖犪狋犻狅狀犪犾犖狌狋狉犻犲狀狋犇犪狋犪犫犪狊犲犳狅狉犛狋犪狀犱犪狉犱犚犲犳犲狉犲狀犮犲 ) 范围之内 超出范围的指标是二十碳二烯酸, 通常情况下在猪肉中微量存在, 在美国农业部国家营养数据库参考标准内没有该物质的记录 总之, 数据表明, 克隆动物后代的肉质组成与正常来源的猪无明显差异, 克隆猪后代的肉产品是安全的 克隆猪的再克隆性克隆猪或转基因克隆猪进行快速扩增的方法之一就是再克隆, 扩大传统育种的基础群后, 可以比传 [3] 统育种获得更快的遗传进展 犓狑狅狀等将来源于体细胞克隆胎儿的细胞系转染犺犌犕 犆犛犉基因 ( 人 犌犕 犆犛犉基因 ) 获得转基因细胞系, 获得核移植胚胎后移植给 6 头受体母猪, 有 2 头母猪产仔, 共产下 7 头成活的转基因体细胞再克隆猪 该研究从胚胎移植阶段算起的总克隆效率为 0.6%(7?1243), 证实克隆猪的再克隆是具有可操作性的 3 羊体细胞克隆安全性评估和产业化现状 3.1 羊体细胞克隆病理学评价目前, 世界上克隆羊成功率在 0.4%~4.3%( 活后代数与核移植胚胎总数的百分比 ) [16,17], 仍然处于较低水平 经过深入的研究, 学者们发现克隆羊中血管性血友病因子 ( 狏狅狀犠犻犾犲犫狉犪狀犱犳犪犮狋狅狉 ) 调宁蛋白 ( 犆犪犾狆狅狀犻狀 ) 的含量降低可能导致胎盘形状改变 数量减少及胎盘血管发育不良 胎盘绒毛及血管发育不成熟, 胎盘血管发生降低及滋养层细胞发育不良及与犆犇 34 含量的降低有密切关系 克隆羊犐犌犉 2 含量的下降对其影响最为严重, 它会造成滋养层细胞凋亡 双核细胞数减少 增加毛细血管 滋养层基膜的厚 [18] 度 在克隆羊胎儿早期, 就病理学而言, 发现克隆绵羊 35 犱的胎盘出现异常, 血管严重发育不良, 且妊 [19-21] 娠后期也发现这一现象 利用人工辅助生殖技术 ( 犃犚犜狊 ), 以牛和绵羊作为体细胞核移植受体时, 晚期妊娠并发症 ( 水肿和难产 ) 出现的几率升高, 而以猪和山羊为受体时则没有相似症状的报道 在人工辅助生殖技术生产的动物上, 尤其是体外生产的动物上存在大后代综合征症状 ( 犔犗犛 ) 围产期的克隆犊牛 羔羊死亡和出生缺陷发生率增加, 出现与犔犗犛相似的症状 但是克隆猪没有大后代综合征症状的相关报道
5 上海农业学报 克隆羊生长性能评估 [22] 2010 年李平等通过对 2 只体细胞克隆波尔山羊 ( 单胎母羊 ) 和与其相同饲养条件下自然繁殖出生的波尔山羊 ( 单胎母羊 )0~12 月龄的体重 体尺指标测定, 初步分析了其生长发育的变化规律 结果表明 : 克隆羊初生重 体尺略高于自繁羊, 但差异不显著 ; 克隆羊 3 月龄 6 月龄 12 月龄体重指标明显高于自繁羊, 差异极显著 ; 克隆羊 3 月龄 6 月龄 12 月龄体尺指标除体长略高于自繁羊外, 体高 胸围均极显著高于自繁羊 克隆羊生长发育速度前期快, 逐渐减慢, 后期趋于正常 0~3 月龄阶段总增重 日增重明显高于自繁羊, 差异极显著 ;3~6 月龄阶段高于自繁羊, 差异显著 ;6~12 月龄阶段略高于自繁羊, 差异不显著 目前, 对于克隆羊的遗传相似性 生长性能 繁殖性能 产肉产奶性能的报道较少 不过, 这间接说明克隆羊在这些方面并未出现明显的异常现象 美国食品及药物管理局 ( 犉犇犃 ) 认为围产期后存活的克隆绵羊 克隆山羊 克隆牛和克隆猪在幼畜期间都没有出现额外的疾病或死亡, 且其生长发育基本上正常 3.3 转基因克隆山羊的再克隆目前利用再克隆方法扩增转基因克隆动物的报道还较为少见 如果外源基因在再克隆过程中能遗 [23] 传下去, 且能保持与原代转基因克隆山羊相同或相近的表达量, 就可用于扩繁转基因动物 有报道称, 以转染外源基因的成年山羊的颗粒细胞和耳成纤维细胞进行 11 次再克隆试验, 得到重构胚 ( 融合卵 )219 枚, 出生 5 只再克隆转基因山羊, 其中 3 只生长发育正常 ; 与用山羊转基因胎儿成纤维细胞进行的克隆试验生产转基因山羊效率无显著差异 这为用再克隆技术生产转基因动物提供了理论依据 3.4 羊体细胞克隆产业化现状我国在体细胞克隆羊研究领域一直走在国际前列, 中国科学院动物研究所陈大元研究员 扬州大学成勇教授 ( 与中国科学院发育所杜淼研究员合作 ) 和西北农林科技大学张涌教授研究小组, 早在 1999 年 2000 年就成功获得体细胞克隆山羊 转基因克隆山羊 扬州大学的转基因克隆羊于 1999 年 10 月和 2000 年 5 月共出生 12 只, 存活 8 只, 经犇犖犃检测证明克隆羔羊的遗传物质来源于供核体细胞 ; 西北农林科技大学于 2000 年 6 月获得 2 只体细胞核直接胞质注射的克隆羔羊, 存活 1 只, 经犇犖犃检测证明其遗传物质来源于供核体细胞 目前中国克隆家畜生产距离产业化还有漫长的道路, 克隆动物存活率低的问题, 仍然是目前克隆家畜生产产业化的瓶颈 4 研究展望 实际上, 上市的克隆动物食品多是克隆动物的第一代或第二代的肉 乳制品, 克隆动物本身因其数量少 成本高一般不会被屠宰而制成食品出售, 克隆食品主要是来自克隆动物经过有性繁殖的后代 克隆动物与正常动物之间表观遗传上的差异已经越来越受到人们的重视 那些看似健康而实际上由于表观 [24] 遗传的改变造成潜在生理缺陷的克隆动物的产品食用后是否安全是人们最担忧的问题 生物学假设和试验结果发现克隆动物后代经过有性繁殖可能消除表观遗传带来的缺陷, 但这是否是普遍的生物学现 [25] 象还有待于进一步考证 对克隆动物的健康评估表明, 虽然克隆过程可能使克隆动物的健康存在风险, 但这些风险没有一个是克隆动物所特有的, 其在自然交配或人工辅助生殖技术中也同样存在 美国食品及药物管理局 ( 犉犇犃 ) 公布了关于克隆动物风险性的评估草案和最终办法, 指出来源于克隆动物及其后代的食品, 包括肉和奶, 与目前自然繁殖或现有科学手段生产的有性繁殖动物产品一样, 不存在食品安全性问题 但是由于相关的研究还很少, 选取的克隆动物及其后代的样本还有限, 所以克隆动物及其后代的风险评估在今后一段 [4,26] 时间还是一个值得关注的问题 参考文献 [1] 犆犪犿狆犫犲犾犓犎, 犕犮犠犺犻狉犑, 犚犻狋犮犺犻犲犠犃, 犲狋犪犾. 犛犺犲犲狆犮犾狅狀犲犱犫狔狀狌犮犾犲犪狉狋狉犪狀狊犳犲狉犳狉狅犿犪犮狌犾狋狌狉犲犱犮犲犾犾犻狀犲 [ 犑 ]. 犖犪狋狌狉犲,1996,380: [2] 犎犪狉狋犈, 犘犻狀狋狅狀犃, 犘狅狑犲犾犃, 犲狋犪犾. 犕犲犻狅狋犻犮狉犲犮狅犿犫犻狀犪狋犻狅狀犻狀狀狅狉犿犪犾犪狀犱犮犾狅狀犲犫狌犾狊犪狀犱狋犺犲犻狉狅犳犳狊狆狉犻狀犵 [ 犑 ]. 犆狔狋狅犵犲狀犲狋犻犮犪狀犱犌犲狀狅犿犲犚犲狊犲犪狉犮犺,2008,120: [3] 犓狑狅狀犇, 犘犪狉犽犆, 犢犪狀犵犅, 犲狋犪犾. 犆狅狀狋狉狅犾狅犳狀狌犮犾犲犪狉狉犲犿狅犱犲犾犻狀犵犪狀犱狊狌犫狊犲狇狌犲狀狋犻狀狏犻狋狉狅犱犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋犪狀犱犿犲狋犺狔犾犪狋犻狅狀狊狋犪狋狌狊狅犳狆狅狉犮犻狀犲狀狌犮犾犲犪狉狋狉犪狀狊犳犲狉犲犿犫狉狔狅狊 [ 犑 ]. 犚犲狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀,2008,135:649. [4] 犘犪狀犪狉犪犮犲犕, 犃犵狌犲狉狅犑, 犌犪狉狉狅狋犲犕, 犲狋犪犾. 犎狅狑犺犲犪犾狋犺狔犪狉犲犮犾狅狀犲狊犪狀犱狋犺犲犻狉狆狉狅犵犲狀狔 :5 狔犲犪狉狊狅犳犳犻犲犾犱犲狓狆犲狉犻犲狀犮犲 [ 犑 ]. 犜犺犲狉犻狅犵犲狀狅犾狅犵狔, 2007,67:
6 90 张德福, 等 : 克隆家畜安全性评估及其产业化研究进展 [5] 犛犺犻犫犪狋犪犕, 犗狋犪犽犲犕, 犜狊狌犮犺犻狔犪犛, 犲狋犪犾. 犚犲狆狉狅犱狌犮狋犻狏犲犪狀犱犵狉狅狑狋犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犻狀犑犻狀犎狌犪狆犻犵狊犮犾狅狀犲犱犳狉狅犿狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾狀狌犮犾犲犻犪狀犱狋犺犲犿犲犪狋狇狌犪犾犻狋狔狅犳狋犺犲犻狉狅犳犳狊狆狉犻狀犵 [ 犑 ]. 犑狅狌狉狀犪犾狅犳犚犲狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀犪狀犱犇犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋,2006,52: [6] 犠犪犾犽犲狉犛, 犆犺狉犻狊狋犲狀狊狅狀犚, 犚狌犻狕犚, 犲狋犪犾. 犆狅犿狆犪狉犻狊狅狀狅犳犿犲犪狋犮狅犿狆狅狊犻狋犻狅狀犳狉狅犿狅犳犳狊狆狉犻狀犵狅犳犮犾狅狀犲犱犪狀犱犮狅狀狏犲狀狋犻狅狀犪犾狔狆狉狅犱狌犮犲犱犫狅犪狉狊 [ 犑 ]. 犜犺犲狉犻狅犵犲狀狅犾狅犵狔,2007,67: [7] 犠犪狋犪狀犪犫犲犛, 犖犪犵犪犻犜. 犎犲犪犾狋犺狊狋犪狋狌狊犪狀犱狆狉狅犱狌犮狋犻狏犲狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲狅犳狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾犮犾狅狀犲犱犮犪狋犾犲犪狀犱狋犺犲犻狉狅犳犳狊狆狉犻狀犵狆狉狅犱狌犮犲犱犻狀犑犪狆犪狀 [ 犑 ]. 犑狅狌狉狀犪犾狅犳犚犲狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀犪狀犱犇犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋,2008;54:6-17. [8] 犠犲犾狊犇, 犉狅狉狊狔狋犺犑, 犕犮犕犻犾犪狀犞, 犲狋犪犾. 犚犲狏犻犲狑 : 狋犺犲犺犲犪犾狋犺狅犳狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾犮犾狅狀犲犱犮犪狋犾犲犪狀犱狋犺犲犻狉狅犳犳狊狆狉犻狀犵 [ 犑 ]. 犆犾狅狀犻狀犵牔犛狋犲犿犆犲犾狊, 2004,6: [9] 犣犺犪狅犑, 犚狅狊狊犑, 犎犪狅犢, 犲狋犪犾. 犛犻犵狀犻犳犻犮犪狀狋犻犿狆狉狅狏犲犿犲狀狋犻狀犮犾狅狀犻狀犵犲犳犳犻犮犻犲狀犮狔狅犳犪狀犻狀犫狉犲犱犿犻狀犻犪狋狌狉犲狆犻犵犫狔犺犻狊狋狅狀犲犱犲犪犮犲狋狔犾犪狊犲犻狀犺犻犫犻狋狅狉狋狉犲犪狋犿犲狀狋犪犳狋犲狉狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾狀狌犮犾犲犪狉狋狉犪狀狊犳犲狉 [ 犑 ]. 犅犻狅犾狅犵狔狅犳狉犲狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀,2009,81:525. [10] 黄银花, 徐公瑾, 杜志强. 体细胞克隆牛和转基因体细胞克隆牛的遗传学分析 [ 犑 ]. 生物化学与生物物理进展,2004,31(8): [11] 郝海生. 体细胞克隆牛生物学特性的初步研究 [ 犇 ]. 北京 : 中国农业科学院,2007. [12] 犎犲狔犿犪狀犢, 犆犺犪狏犪狋犲 犘犪犾犿犲狉犘, 犅犲狉狋犺犲犾狅狋犞, 犲狋犪犾. 犃狊狊犲狊狊犻狀犵狋犺犲狇狌犪犾犻狋狔狅犳狆狉狅犱狌犮狋狊犳狉狅犿犮犾狅狀犲犱犮犪狋犾犲 : 犪狀犻狀狋犲犵狉犪狋犻狏犲犪狆狆狉狅犪犮犺 [ 犑 ]. 犜犺犲狉犻狅犵犲狀狅犾狅犵狔,2007,67: [13] 犎犲狔犿犪狀犢, 犆犺犪狏犪狋犲 犘犪犾犿犲狉犘, 犉狉狅犿犲狀狋犻狀犌, 犲狋犪犾. 犙狌犪犾犻狋狔犪狀犱狊犪犳犲狋狔狅犳犫狅狏犻狀犲犮犾狅狀犲狊犪狀犱狋犺犲犻狉狆狉狅犱狌犮狋狊 [ 犑 ]. 犃狀犻犿犪犾,2007,1(7): [14] 犆犺犪狏犪狋犲 犘犪犾犿犲狉犘, 犚犲犿狔犇, 犆狅狉犱狅狀狀犻犲狉犖, 犲狋犪犾. 犎犲犪犾狋犺狊狋犪狋狌狊狅犳犮犾狅狀犲犱犮犪狋犾犲犪狋犱犻犳犳犲狉犲狀狋犪犵犲狊 [ 犑 ]. 犆犾狅狀犻狀犵犛狋犲犿犆犲犾狊,2004,6: [15] 犓狑狅狀犵犠, 犠犻犾犱犃, 犚狅犫犲狉狋狊犘, 犲狋犪犾. 犕犪狋犲狉狀犪犾狌狀犱犲狉狀狌狋狉犻狋犻狅狀犱狌狉犻狀犵狋犺犲狆狉犲犻犿狆犾犪狀狋犪狋犻狅狀狆犲狉犻狅犱狅犳狉犪狋犱犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋犮犪狌狊犲狊犫犾犪狊狋狅犮狔狊狋犪犫狀狅狉犿犪犾犻狋犻犲狊犪狀犱狆狉狅犵狉犪犿犿犻狀犵狅犳狆狅狊狋狀犪狋犪犾犺狔狆犲狉狋犲狀狊犻狅狀 [ 犑 ]. 犇犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋,2000,127: [16] 犠犲犾狊犇犖, 犕犻狊犻犮犪犕, 犇犪狔犜犃, 犲狋犪犾. 犘狉狅犱狌犮狋犻狅狀狅犳犮犾狅狀犲犱犮犪犾狏犲狊犳狅犾狅狑犻狀犵狀狌犮犾犲犪狉狋狉犪狀狊犳犲狉狑犻狋犺犮狌犾狋狌狉犲犱犪犱狌犾狋犿狌狉犪犾犵狉犪狀狌犾狅狊犪犮犲犾狊 [ 犑 ]. 犅犻狅犾犚犲狆狉狅,1999,60: [17] 犠犻犾犿狌狋犐, 犛犮犺狀犻犲犽犲犃, 犕犮犠犺犻狉犑, 犲狋犪犾. 犞犻犪犫犾犲狅犳犳狊狆狉犻狀犵犱犲狉犻狏犲犱犳狉狅犿犳狅犲狋犪犾犪狀犱犪犱狌犾狋犿犪犿犿犪犾犻犪狀犮犲犾狊 [ 犑 ]. 犖犪狋狌狉犲,1997,385: [18] 犘犪犾犿犻犲狉犻犆, 犔狅犻犘, 犘狋犪犽犌, 犲狋犪犾. 犚犲狏犻犲狑狆犪狆犲狉 : 犪狉犲狏犻犲狑狅犳狋犺犲狆犪狋犺狅犾狅犵狔狅犳犪犫狀狅狉犿犪犾狆犾犪犮犲狀狋犪犲狅犳狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾狀狌犮犾犲犪狉狋狉犪狀狊犳犲狉犮犾狅狀犲狆狉犲犵狀犪狀犮犻犲狊犻狀犮犪狋犾犲, 狊犺犲犲狆犪狀犱犿犻犮犲 [ 犑 ]. 犞犲狋犘犪狋犺狅犾,2008,45: [19] 犇犲犛狅狌狊犪犘犃, 犓犻狀犵犜, 犎犪狉犽狀犲狊犔, 犲狋犪犾. 犈狏犪犾狌犪狋犻狅狀狅犳犵犲狊狋犪狋犻狅狀犪犾犱犲犳犻犮犻犲狀犮犻犲狊犻狀犮犾狅狀犲犱狊犺犲犲狆犳犲狋狌狊犲狊犪狀犱狆犾犪犮犲狀狋犪犲 [ 犑 ]. 犅犻狅犾犚犲狆狉狅犱, 2001,65: [20] 犔犲犲犚犛, 犘犲狋犲狉狊狅狀犃犑, 犇狅狀狀犻狊狅狀犕犑, 犲狋犪犾. 犆犾狅狀犲犱犮犪狋犾犲犳犲狋狌狊犲狊狑犻狋犺狋犺犲狊犪犿犲狀狌犮犾犲犪狉犵犲狀犲狋犻犮狊犪狉犲犿狅狉犲狏犪狉犻犪犫犾犲狋犺犪狀犮狅狀狋犲犿狆狅狉犪狉狔犺犪犾犳 狊犻犫犾犻狀犵狊狉犲狊狌犾狋犻狀犵犳狉狅犿犪狉狋犻犳犻犮犻犪犾犻狀狊犲犿犻狀犪狋犻狅狀犪狀犱犲狓犺犻犫犻狋犳犲狋犪犾犪狀犱狆犾犪犮犲狀狋犪犾犵狉狅狑狋犺犱犲狉犲犵狌犾犪狋犻狅狀犲狏犲狀犻狀狋犺犲犳犻狉狊狋狋狉犻犿犲狊狋犲狉 [ 犑 ]. 犅犻狅犾犚犲狆狉狅犱,2004,70:1-11. [21] 犚犪狏犲犾犻犮犺犛犚, 犛犺犲犾犻狀犵犃犖, 犚犪犿犪犮犺犪狀犱狉犪狀犃, 犲狋犪犾. 犃犾狋犲狉犲犱狆犾犪犮犲狀狋犪犾犾犪犮狋狅犵犲狀犪狀犱犾犲狆狋犻狀犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀犻狀狆犾犪犮犲狀狋狅犿犲狊犳狉狅犿犫狅狏犻狀犲狀狌 犮犾犲犪狉狋狉犪狀狊犳犲狉狆狉犲犵狀犪狀犮犻犲狊 [ 犑 ]. 犅犻狅犾犚犲狆狉狅犱,2004,71: [22] 李平, 刘海军, 池炳杰, 等. 体细胞克隆波尔山羊 0~12 月龄生长发育测定研究 [ 犑 ]. 中国草食动物,2010,30(2): [23] 李宁, 朱作言. 动物遗传育种与克隆的分子生物学基础研究 [ 犕 ]. 北京 : 科学出版社,2008. [24] 犚犲狀犪狉犱犑犘, 犆犺狌狆犻狀犇. 犆犾狅狀犻狀犵狉犻狊犽犪狊狊犲狊犿犲狀狋 : 犫狌犻犾犱犻狀犵狌狆犪狊犮犻犲狀狋犻犳犻犮犲狓狆犲狉狋犻狊犲 [ 犑 ]. 犆犾狅狀犻狀犵犛狋犲犿犆犲犾狊,2004,6: [25] 犚狌犱犲狀犽狅犔, 犕犪狋犺犲狊狅狀犑犆, 犛狌狀犱犾狅犳犛犉. 犃狀犻犿犪犾犮犾狅狀犻狀犵犪狀犱狋犺犲犉犇犃 狋犺犲狉犻狊犽犪狊犲狊狊犿犲狀狋狆犪狉犪犱犻犵犿狌狀犱犲狉狆狌犫犾犻犮狊犮狉狌狋犻狀狔 [ 犑 ]. 犖犪狋狌狉犲, 2007,25: [26] 犢犪犿犪犵狌犮犺犻犕, 犐狋狅犺犕, 犐狋狅犢, 犲狋犪犾. 犃 12 犿狅狀狋犺犳犲犲犱犻狀犵狊狋狌犱狔狅犳狉犲狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀? 犱犲狏犲犾狅狆犿犲狀狋犻狀狉犪狋狊犳犲犱犿犲犪狋? 犿犻犾犽狆狅狑犱犲狉狊狌狆狆犾犲犿犲狀 狋犲犱犱犻犲狋狊犱犲狉犻狏犲犱犳狉狅犿狋犺犲狆狉狅犵犲狀狔狅犳犮犾狅狀犲犱犮犪狋犾犲狆狉狅犱狌犮犲犱犫狔狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾狀狌犮犾犲犪狉狋狉犪狀狊犳犲狉 [ 犑 ]. 犑狅狌狉狀犪犾狅犳犚犲狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀犪狀犱犇犲狏犲犾 狅狆犿犲狀狋,2008,54: 檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭 欢迎订阅 2013 年 上海蔬菜 上海蔬菜 是上海市农业科学院和上海蔬菜经济研究会共同主办的蔬菜专业性期刊, 双月刊, 单价 6.00 元, 全年共计 元, 邮发代号 :4 679 本刊依托上海雄厚的科技和信息资源优势, 立足华东, 面向全国, 旨在为广大蔬菜生产者 经营者提供科技支持和准确的市场导向, 从而促进我国蔬菜产业的健康发展 本刊注重科技成果的先进性 新颖性 实用性和可操作性, 报告面广, 信息量大, 可读性强, 一直深得全国读者喜爱 上海蔬菜 是您打开致富之门的金钥匙! 全国各地邮局均可订阅, 漏订者可向本刊编辑部邮购 本刊实用性强, 具有长期保存价值 广告价位低, 回报率高, 欢迎广大种子生产和经营单位, 塑料薄膜 遮阳网 防虫网生产单位, 农药 激素 化肥生产单位, 果蔬加工机械生产单位刊登广告和各种信息 欢迎广大果蔬科技工作者 生产者 经营者积极给本刊来稿, 交流经验, 互通信息 地址 : 上海市奉贤区金齐路 1000 号, 邮编 : 电话 : , 犈 犿犪犻犾 : 狓狓 9@ 狊犪犪狊. 狊犺. 犮狀网址 : 狑狑狑. 狊犺犪狀犵犺犪犻狊犺狌犮犪犻. 狊犺. 犮狀
( ( (CIP ( /. 5 :,2014.1 ( ISBN978 7 5628 3719 0 Ⅰ.1... Ⅱ.1... Ⅲ.1 Ⅳ.1H314 CIP (2013263740 ( ( / / / / / : 130,200237 :(02164250306( (02164252710( :(02164252707 : 狆狉犲狊. 犲犮狌狊狋. 犲犱狌. 犮狀 / /787 犿犿 1092 犿犿
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西班牙文学简史
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前 言 本标准的附录 A 附录 B 和附录 C 为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准起草单位 : 中华人民共和国山西出入境检验检疫局 本标准主要起草人 : 薛平 连庚寅 宋欢 苑利 杜利君 潘雅丽 宋洁 康杰 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准 Ⅰ
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛犖 / 犜 2115 2008 进出口食品和饲料中总氮及粗蛋白的检测方法杜马斯燃烧法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲狋狅狋犪犾狀犻狋狉狅犵犲狀犮狅狀狋犲狀狋犪狀犱犮犪犾犮狌犾犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犮狉狌犱犲狆狉狅狋犲犻狀犮狅狀狋犲狀狋犻狀犳狅狅犱犪狀犱犳犲犲犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犆狅犿犫狌狊狋犻狅狀犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲犇狌犿犪狊狆狉犻狀犮犻狆犾犲
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛犖 / 犜 进出口化妆品中氢溴酸右美沙芬的测定液相色谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犱犲狓狋狉狅犿犲狋犺狅狉狆犺犪狀犺狔犱狉狅犿犻犱犲犻狀犮狅狊犿犲狋犻犮狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犔犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犿
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口化妆品中氢溴酸右美沙芬的测定液相色谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犱犲狓狋狉狅犿犲狋犺狅狉狆犺犪狀犺狔犱狉狅犿犻犱犲犻狀犮狅狊犿犲狋犻犮狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犔犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犿犲狋犺狅犱 2009 02 20 发布 2009 09 01 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 前 言 本标准的附录
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前 言 本标准的附录 A 附录 B 和附录 C 为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准起草单位 : 中华人民共和国山西出入境检验检疫局 本标准主要起草人 : 薛平 连庚寅 宋欢 苑利 杜利君 潘雅丽 宋洁 康杰 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准 Ⅰ
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛犖 / 犜 2115 2008 进出口食品和饲料中总氮及粗蛋白的检测方法杜马斯燃烧法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲狋狅狋犪犾狀犻狋狉狅犵犲狀犮狅狀狋犲狀狋犪狀犱犮犪犾犮狌犾犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犮狉狌犱犲狆狉狅狋犲犻狀犮狅狀狋犲狀狋犻狀犳狅狅犱犪狀犱犳犲犲犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犆狅犿犫狌狊狋犻狅狀犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲犇狌犿犪狊狆狉犻狀犮犻狆犾犲
前 言 本标准的附录 A 为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准由中华人民共和国上海出入境检验检疫局负责起草 本标准主要起草人 : 倪昕路 韩丽 周瑶 郭德华 朱坚 本标准系首次发布的检验检疫行业标准 Ⅰ
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛犖 / 犜 2326 2009 食品及油脂中反式脂肪酸含量的检测傅立叶变换红外光谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋狉犪狀狊犳犪狋狔犪犮犻犱狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犪狀犱狅犻犾狊 犉犜犐犚犿犲狋犺狅犱 2009 07 07 发布 2010 01 16 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 前 言 本标准的附录 A 为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口
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中学第二教材：高中语文：选修：语言规范与创新：配套江苏版教材
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Unit3 WHEN IGROW UP 乐学单元 亲爱的同学们, 每个人都有梦想, 每个人都对未来从事的职业有一种期待, 你梦想的职业是什么呢? 我们常听到的职业有医生 护士 消防员 警察 飞行员和宇航员 那么他们都做哪些具体的工作呢? 你了解吗? 在这个单元, 他们中的一些代表会走近你, 并告诉你他们的日常生活 让我们赶快一起去看看吧 还有, 当你了解他们的具体工作后, 你是否还坚持你的梦想职业,
前 言 本标准按照 GB/T 给出的规则起草 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准起草单位 : 中华人民共和国山东出入境检验检疫局 中华人民共和国陕西出入境检验检疫局 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局 本标准主要起草人 : 王建华 汤志旭 孙忠松 王艳丽 王松 李
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛犖 / 犜 2646 2010 进出口食品中吡螨胺残留量检测方法气相色谱 质谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犲犫狌犳犲狀狆狔狉犪犱狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犌犆 犕犛犿犲狋犺狅犱 2010 11 01 发布 2011 05 01 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 前 言 本标准按照 GB/T1.1
中考英语命题趋势与总复习策略 ( ),, (1), ; (2) ; (3) ; (4) ; (5),, ; (6), 2, (1) 120 ; (2) 120 ; (3), ; (4), 6~8, 80~90 ; (5), 1,2 1 ( ) 15% 18% 22% 30%
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JournalofSoiland WaterConservation Vol.32No.3 Jun.,2018 '? c 1,011 1, 2, 3, 3, 2 3, 3 2, 45 1 (1. N156, E, 9: <, <,271018; 2. : <, N, E, :/[
323 20186 JournalofSoiland WaterConservation Vol.32No.3 Jun.,2018 '? c 1,011 1, 2, 3, 3, 2 3, 3 2, 45 1 (1. N156, E, 9:
前 言 本标准按照 GB/T 给出的规则起草 本标准代替 SN 出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验方法 本标准与 SN 相比, 主要技术变化如下 : 样品净化方法采用全自动凝胶渗透色谱净化方法替代原有的液液分配法 ; 测定采用柱后衍生液相色谱 荧光检
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛犖 / 犜 0122 2011 代替 SN0122 1992 进出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验方法液相色谱 柱后衍生荧光检测法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犪狉犫犪狉狔犾狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犿犲犪狋犪狀犱犿犲犪狋狆狉狅犱狌犮狋狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱 犲狓狆狅狉狋 犎犘犔犆 犳犾狌狅狉犲狊犮犲犱犲狋犲犮狋狅狉狑犻狋犺狆狅狊狋犮狅犾狌犿狀犱犲狉犻狏犪狋犻狅狀
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前 言 本标准的附录 A 附录 B 和附录 C 均为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准起草单位 : 中华人民共和国湖南出入境检验检疫局 本标准主要起草人 : 颜鸿飞 张莹 孙菲 胡宇东 黄志强 付善良 李拥军 王美玲 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准 Ⅰ
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 动物源食品中乙氧喹啉残留量的测定方法高效液相色谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犲狋犺狅狓狔狇狌犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀 犎犘犔犆犿犲狋犺狅犱 2010 03 02 发布 2010 09 16 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 前 言 本标准的附录 A 附录 B 和附录 C 均为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口
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批发零售业实用英语对话及词汇手册
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前 言 本标准的附录 A 和附录 B 均为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准起草单位 : 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局 中华人民共和国重庆出入境检验检疫局 中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局 本标准主要起草人 : 刘永 杨长志 王国民 康庆贺 林维宣 李贤良 吴
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的检测方法液相色谱 质谱 / 质谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狌狉狅狋狉狅狆犻狀犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳狊狅犳 犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犔犆 犕犛 / 犕犛犿犲狋犺狅犱 2008 11 18 发布 2009 06 01 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 前
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B53A B4 ( B ) Vol.53 No.4 2014B7C JournalofXiamenUniversity (NaturalScience) Jul.2014 doi:10.6043/j.issn.0438 0479.2014.04.028 34 3< 5, 6 犚犖犃 / 犇犖犃 J*!,, 2 (WX @ ) @T, DY@ 2., WX 361102) MN: \Z \ 23 4(
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前 言 本标准的附录 A 为规范性附录, 附录 B 和附录 C 为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准由中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局 中华人民共和国浙江出入境检验检疫局 中国检验检疫科学研究院 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局负责起草 本标准主要起草人 : 林维
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口动物源性食品中糖皮质激素类兽药残留量的检测方法液相色谱 质谱 / 质谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犵犾狌犮狅犮狅狉狋犻犮狅狊狋犲狉狅犻犱狊狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳狊狅犳 犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犔犆 犕犛 / 犕犛犿犲狋犺狅犱 2008 11 18 发布 2009 06 01 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
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标准分享网 免费下载 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口动物源食品中 14 种 β 内酰 胺类抗生素残留量检测方法 液相色谱 质谱 / 质谱法 SN/T 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街 16 号 邮政编码 : 网址 www
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口动物源食品中 14 种 β 内酰胺类抗生素残留量检测方法液相色谱 质谱 / 质谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳 14 犫犲狋犪 犾犪犮狋犪犿犪狀狋犻犫犻狅狋犻犮狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犲狓狆狅狉狋犪狀犱犻犿狆狅狉狋 犔犆 犕犛 / 犕犛犿犲狋犺狅犱 2008 04 29 发布 2008 11 01 实施
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809 DOI:10.13350/j.cjpb.180802 ' ()*+,-./(0 F, GH,I+J ( G,HD I JKX32 L D/ W, GMN750021) @ OR G-. 0. ], @M G-. 0 P,FG ].@, QR I ` OR FG]3OR, FG @M,?@ ST U:
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165 DOI:10.13350/j.cjpb.190209 HQR)OST + 1,2,c 2,3,c 1,3, 1,3,! " 1,3 (1. /,-+, / V 810001;2. /,-+ %&';3. / ( #$%&') C2 34 7 DE" X FG(EmTspan)? @ NM NCBI EmTspanFG?X H I, 2 ProtParam ProtScale SOSUI DNASTAR
中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口食品中生物苄呋菊酯 氟丙菊酯 联苯菊酯等 28 种农药残留量的检测方法气相色谱 质谱法 SN/T 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街 16 号邮政编码 : 网址 电话 :
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛犖 / 犜 2151 2008 进出口食品中生物苄呋菊酯 氟丙菊酯 联苯菊酯等 28 种农药残留量的检测方法气相色谱 质谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狆犲狊狋犻犮犻犱犲狊狉犲狊犻犱狌犲狅犳 28 犽犻狀犱狊狅犳犻狀犮犾狌犱犻狀犵犫犻狅狉犲狊犿犲狋犺狉犻狀 犪犮狉犻狀犪狋犺狉犻狀 犫犻犳犲狀狋犺狉犻狀犻狀犳狅狅犱犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犌犪狊犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔
JOURNALOFXI ANJIAOTONG UNIVERSITY Vol.46 No.10 Oct.2012 犖犪犽犪犵犪犿犻 犿, ( )-/*<= ) : Nakagami 犿!"#$%&' # (#$)*+,-./0(EPA
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JournalofSoiland WaterConservation Vol.32No.5 Oct.,2018 KZ[ Y\]^ "_`a P O 1,<) 2,3,4,*73 2,3,4,+ 1,2,3,4,E 9 5 (1.? Q3 45 ;,? 71210
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325 201810 JournalofSoiland WaterConservation Vol.32No.5 Oct.,2018 KZ[%@,;3@Y\]^ "_`ap O 1,
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156 控制算法 ( 即模糊逻辑或神经网络 ) 这两种方式来研 [1] 究泊车. 犑犪犿犻犾设计出一种泊车辅助器 可帮助驾驶员方便安全地泊车 但在实现泊车的全自动方面有待改进. 文献 [2-3] 分别基于模糊逻辑控制进行泊车系统研究 逻辑控制依赖于人的操作知识 因此 [4] 需要大量的泊车实验. 刘
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上海理工大学学报 第 37 卷 第 2 期 犑. 犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔狅犳犛犺犪狀犵犺犪犻犳狅狉犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犜犲犮犺狀狅犾狅犵狔 犞狅犾.37 犖狅.2 2015 文章编号 :1007-6735(2015)02-0155-04 犇犗犐 :10.13255/ 犼. 犮狀犽犻. 犼狌狊狊狋.2015.02.011 基于模糊算法垂直泊车转向控制策略的研究 王友楠 方祖华 孙鍴 王康 徐宏兵 ( 上海师范大学信息与机电工程学院
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新世纪英语丛书 英语四 六级考试词汇速记 ( 第 4 版 ) 主编刘宇慧陈晓明
新世纪英语丛书 英语四 六级考试词汇速记 ( 第 4 版 ) 主编刘宇慧陈晓明 图书在版编目 (CIP) 数据 英语四 六级考试词汇速记 / 刘宇慧, 陈晓明主编. 4 版. 上海 : 华东理工大学出版社,2014.1 犐犛犅犖 978 7 5628 3704 6 Ⅰ.1 英... Ⅱ.1 刘...2 陈... Ⅲ.1 大学英语水平考试词汇自学参考资料 Ⅳ.1 犎 313 中国版本图书馆犆犐犘数据核字
暋暋图书在版编目 (CIP) 数据播音主持快速入门十八招儿 / 赵秀环编著. 北京 : 中国传媒大学出版社, ISBN978 灢 7 灢 5657 灢 0136 灢 8 栺灡栙播 暋栻灡栙赵 暋栿. 栙播音 语言艺术暋栚广播节目 主持人 语言艺术暋栛电视节目 主持人 语言艺术桇灡栙 G2
暋暋图书在版编目 (CIP) 数据播音主持快速入门十八招儿 / 赵秀环编著. 北京 : 中国传媒大学出版社,2011.1 ISBN978 灢 7 灢 5657 灢 0136 灢 8 栺灡栙播 暋栻灡栙赵 暋栿. 栙播音 语言艺术暋栚广播节目 主持人 语言艺术暋栛电视节目 主持人 语言艺术桇灡栙 G222.2 中国版本图书馆 CIP 数据核字 (2010) 第 261459 号 暋暋播音主持快速入门十八招儿
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,2017,37(10):2087-2096 犃犮狋犪犅狅狋. 犅狅狉犲犪犾. 犗犮犮犻犱犲狀狋. 犛犻狀. :1000 4025(2017)10 2087 10 犱狅犻 :10.7606/j.issn.1000 4025.2017.10.2087 "#$%&' ( )* "#+,-./0 1,2, 1, 1, 1, 1,2, 1,2 (1 34567 89:,; 611130;2 34567 #$,;
胱抑素 C 水平的测定在 2 型糖尿病肾功能评价中的应用 刘传勇, 古东海, 周丽华, 等 814 临床研究 综 16SrRNAPCR 基因测序鉴定临床标本军团菌 宣瑞红, 王娟, 胡朝晖, 等 816 核酸扩增检测技术在血液筛查中的应用 张健, 谢秀华, 黄呈辉, 等 818 胱抑素 C 测定评价
国际检验医学杂志 INTERNATIONALJOURNALOFLABORATORY MEDICINE 月刊 1980 年 1 月创刊第 31 卷第 8 期 2010 年 8 月 30 日出版 主 主 管 重庆市卫生局 办 重庆市卫生信息中心 ( 重庆市药品集中采购服务中心 ) 编辑 出版 总编 国际检验医学杂志编辑委员会 重庆市卫生信息中心 府伟灵 执行总编 徐永柱 编辑部主任 杨庆华 通讯地址 5
,2018,38(11): 犃犮狋犪犅狅狋. 犅狅狉犲犪犾. 犗犮犮犻犱犲狀狋. 犛犻狀. : (2018) 犱狅犻 : /j.issn "#$%& 犆犻犘犝犅 22 ' (,,,,,,!
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38 11 Vol.38No.11 201711 ActaEcologiaeAnimalisDomastici Nov.2017!"#$ %&' () *+, 1, 1, 1, 1, 1, 1,! 2,"#$ 1,%&' 1 (1.!"#$%&', 350002; 2. ()*+,-./0, 351100) [-.] ()*+,-./01 23456789:;
670 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 第 34 卷 胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤 我国胃癌每 [1] 年死亡人数居恶性肿瘤的首位 胃癌起病隐匿, 早期无明显特异症状, 一旦发现已属中晚期 目前胃癌的主要治疗手段仍为手术及化疗, 但很难得到根治, 且均存在较大副作用 因此, 寻找治疗胃癌新的药物和
![670 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 第 34 卷 胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤 我国胃癌每 [1] 年死亡人数居恶性肿瘤的首位 胃癌起病隐匿, 早期无明显特异症状, 一旦发现已属中晚期 目前胃癌的主要治疗手段仍为手术及化疗, 但很难得到根治, 且均存在较大副作用 因此, 寻找治疗胃癌新的药物和](/thumbs/91/106824580.jpg "670 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 第 34 卷 胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤 我国胃癌每 [1] 年死亡人数居恶性肿瘤的首位 胃癌起病隐匿, 早期无明显特异症状, 一旦发现已属中晚期 目前胃癌的主要治疗手段仍为手术及化疗, 但很难得到根治, 且均存在较大副作用 因此, 寻找治疗胃癌新的药物和")
第 34 卷第 5 期 2013 年 9 月 西安交通大学学报 ( 医学版 ) 犑狅狌狉狀犪犾狅犳犡犻 犪狀犑犻犪狅狋狅狀犵犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔 ( 犕犲犱犻犮犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊 ) 犞狅犾.34 犖狅.5 犛犲狆.2013 散癖平胃方剂对人胃癌细胞株增殖和凋亡的影响 姜炅 1, 董蕾 1, 秦斌 1, 郭晓燕 1, 王新阳 2, 李红 1 ( 西安交通大学医学院 :1. 第二附属医院消化科, 陕西西安
1320 例血培养结果分析 赵苏瑛, 李岷, 李克涓 1102 综 慢性丙型肝炎合并非酒精性脂肪肝的临床观察 邓建平, 陈云鹏 1104 济南市部分体检人群血尿酸水平的现况分析 杜敏, 尹承华 1106 精神分裂症患者血清中 IL 6 IL 10 与 TNF α 检测的临床意义 陈茜 1108 不同
国际检验医学杂志 INTERNATIONALJOURNALOFLABORATORY MEDICINE 月刊 1980 年 1 月创刊第 31 卷第 10 期 2010 年 10 月 30 日出版 主 主 管 重庆市卫生局 办 重庆市卫生信息中心 ( 重庆市药品集中采购服务中心 ) 编辑 出版 总编 国际检验医学杂志编辑委员会 重庆市卫生信息中心 府伟灵 执行总编 徐永柱 编辑部主任 杨庆华 通讯地址
,2017,37(6): 犃犮狋犪犅狅狋. 犅狅狉犲犪犾. 犗犮犮犻犱犲狀狋. 犛犻狀. : (2017) 犱狅犻 : /j.issn "#$%& 6 ' ()*+ 1,2, 1, 1,
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252 上海理工大学学报 2013 年第 35 卷 经济持续快速的增长, 但另一方面亦深受气候 环境恶化, 能源供需压力的困扰. 研究能源消耗与经济发展的关系问题对我国有越来越重要的现实意义. 美国是世界上最发达国家, 是经济发展的领头羊 ; 日本亦为发达国家, 但同时也是资源匮乏的国家之一 ; 而
上海理工大学学报 第 35 卷 第 3 期 犑. 犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔狅犳犛犺犪狀犵犺犪犻犳狅狉犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犜犲犮犺狀狅犾狅犵狔 犞狅犾.35 犖狅.3 2013 文章编号 :1007-6735(2013)03-0251-05 中国和其他国家经济发展与能源消费关联性指标的比较 杨青, 栾贵勤, 盖伦 ( 上海理工大学管理学院, 上海 200093) 摘要 : 将能源消费弹性系数 绝对能源消费弹性系数及能源消费强度
2013(5) 谢景欣, 等 : 负压二级生物安全实验室设计关键控制点分析 39 物安全柜可靠性的考虑, 希望室内呈负压洁净状态 目前, 越来越多的单位建造了负压状态的二级生物安全实验室 但由于缺乏相关标准规范, 许多建设与设计单位对负压实验室的设计理念含混不 [12] 清, 致使工程缺陷较多 本文
![2013(5) 谢景欣, 等 : 负压二级生物安全实验室设计关键控制点分析 39 物安全柜可靠性的考虑, 希望室内呈负压洁净状态 目前, 越来越多的单位建造了负压状态的二级生物安全实验室 但由于缺乏相关标准规范, 许多建设与设计单位对负压实验室的设计理念含混不 [12] 清, 致使工程缺陷较多 本文](/thumbs/51/27347415.jpg "2013(5) 谢景欣, 等 : 负压二级生物安全实验室设计关键控制点分析 39 物安全柜可靠性的考虑, 希望室内呈负压洁净状态 目前, 越来越多的单位建造了负压状态的二级生物安全实验室 但由于缺乏相关标准规范, 许多建设与设计单位对负压实验室的设计理念含混不 [12] 清, 致使工程缺陷较多 本文")
38 暖通空调犎犞牔犃犆 2013 年第 43 卷第 5 期科学实验室环境控制 负压二级生物安全实验室设计关键控制点分析 江苏省疾病预防控制中心谢景欣 王欢王建锋杨杰 摘要以两个负压二级生物安全实验室为例, 分析了实验室的功能分区与平面布局 通风空调方式 气流组织 送排风系统等关键控制点的设计 建议核心工作间 ( 动物室 ) 划分相对清洁侧和相对污染侧 ; 设置缓冲间 更衣室和准备间 ; 通风空调采用全空气直流系统
北大绿卡：新课标教材课时同步讲练 七年级语文下 人教版
: : : : : : : (CIP) : /,. :,2007 3 ISBN978 7 5602 4795 3 Ⅰ.. Ⅱ.1. 2. Ⅲ. Ⅳ.G634 CIP(2007) 037245 118 (130117) :0431 85695744 85688470 :0431 85695734 :htp: www nenup com :sdcbs@mail jl cn :nenupyuwen@yahoo.cn