环境工程学报第卷第期年月目次综述评述人工湿地基质再生技术的研究进展水污染防治武俊梅徐栋张丽萍贺锋吴振斌预氯化及常规工艺对消毒副产物的影响微波氧化法处理间硝基苯胺废水温度和底物浓度对混合菌群木糖厌氧生物产氢的影响牛志广孙媛媛张颖王楠楠郑彤

Size: px

Start display at page:

Download "环境工程学报第卷第期年月目次综述评述人工湿地基质再生技术的研究进展水污染防治武俊梅徐栋张丽萍贺锋吴振斌预氯化及常规工艺对消毒副产物的影响微波氧化法处理间硝基苯胺废水温度和底物浓度对混合菌群木糖厌氧生物产氢的影响牛志广孙媛媛张颖王楠楠郑彤"

液韶
5 years ago
Views:

2 环境工程学报第卷第期年月目次综述评述人工湿地基质再生技术的研究进展水污染防治武俊梅徐栋张丽萍贺锋吴振斌预氯化及常规工艺对消毒副产物的影响微波氧化法处理间硝基苯胺废水温度和底物浓度对混合菌群木糖厌氧生物产氢的影响牛志广孙媛媛张颖王楠楠郑彤张广山王鹏张丹丹邱春生孙力平谢春雨胡鑫烟秸杆生物碳对铬废水的吸附动力学和热力学唐文清曾荣英冯泳兰刘梦琴张复兴彭刚戴友芝表流水平流复合人工湿地对高污染河水的净化蠡河底泥中氨氧化细菌复合菌群的富集和过程中群落结构的变化膜电解氢自养膜生物反应器还原水中的!" # %&' 负载改性竹炭去除水中的氨氮温度及渗透流速影响下的溶解性有机质运移特征微波辅助生物淋滤废旧碱性电池锌锰的溶出苕溪流域典型区域重金属污染特征瓜环对污水厂二级处理出水中有机污染物的混凝性能熊家晴杜晨郑于聪葛媛王怡雯王晓昌雍佳君成小英张健高孟春张优任云赵从从 $ 陈靖李伟民丁文川王欣悦胡崇亮 $ 李任政王心义刘小满杨建牛志睿辛宝平庞康江明荣李卓珏赵姣姣张咪吴纪南卢少勇李湘腸陈方鑫郑西强徐利斌王文王文东范庆海岳强杨琴模拟光伏间歇曝气两级的脱氮除磷效果秦燕周北海马方曙 & 测序分析活性污泥系统中细菌群落的动态变化闻韵王晓慧林常青固定化生物活性炭快速启动处理微污染水混合床生物滤柱预处理恩杜罗消毒废水郑璐高乃云甘霖区永杰胡栩豪李长君杜尔登夏玉峰洪俊明金朝荣黄柏山半 ()* 羧甲基纤维素 % 聚丙烯酰胺共甲基丙烯酸钠水凝胶制备及其吸附性能张敏李碧婵陈良壁曝气对黑臭河道污染物释放的影响表面改性活性炭对水中头孢拉定的吸附性能二段铁盐沉淀深度脱除高浓度含砷废水中的砷硫自养填充床生物反应器去除水中的高氯酸盐非沥青粘结剂煤质活性炭处理微污染水王美丽刘春白璐袁震白雪梅贺方兵孟睿何连生孙瑞杰梅小乐胡翔廖亚龙周娟彭志强黄斐荣万东锦刘永德樊荣张健王依依郭彦江张永发李国强付亚利 " %+ " 深度处理印染废水二级出水严一超张耀斌 $ 典型南方水源溶解性有机物荧光特性变化与去除蔡广强刘丽君卢小艳张金松曲莹邢艳刘文彬 $$ 臭氧对化工园区废水厂二级出水的选择性氧化涂勇张耀辉徐军唐敏陈勇白永刚刘伟京滇池流域种坡耕地农林复合系统的地表径流泥沙输出及径流 *) 流失的特征丁志磊祖艳群陈建军李博李元胺化麻黄废渣生物吸附剂对水中阳离子染料的吸附时洋马春芳冯宁川 $ 六羧基 $ 六羟肟酸甲氧基杯芳烃对铀,( 的萃取周洁王劲松林艳朱雷谢水波杨金辉荷负电超滤膜同时去除水中天然有机物和铅离子微波催化剂 "%- 微波催化氧化降解废水中的苯酚陈秀雯傅晶邵嘉慧殷诚周继承尹静雅谌敏飞杨叶兵 + 值离子强度和重金属离子对腐殖酸紫外谱图的影响杨毅兰亚琼金鹏康王晓昌养猪废水回收 &-) 时抗生素与重金属的残留楼耀尹邓玉君叶志隆叶欣陈少华响应面法在超滤过程分析和评价中的应用改进的模糊评价法在太湖水质评价中的应用王彩虹陆美青闫新秀梁恒李圭白 $ 崔嘉宇张宁红郁建桥刘雷钟声 + " 强化水力空化降解罗丹明废水张波沈立龚文娟 - %" 耦合 & 工艺的启动及 %* 对其产电性能的影响付进南王晓慧海热提向龙刘睿李媛紫外辐射加速磺胺嘧啶生物降解的机理介质阻挡等离子放电臭氧氧化乙醛废水甜菜碱对肝素钠废水好氧处理的影响重庆冬季水芹浮床对富营养化水体的修复侯硕豪潘诗卉刘辛悦蔡泽仁李恩杰张永明陆彬 $ 杨红薇何婷谢帆 $ 向文英彭颖

3 环境工程学报第卷第期年月铝型材含氟镍酸性废水二级处理工艺赵旭德张丽莉艾立刘婷 " 去除水体中的邻仲丁基二硝基苯酚曹刚罗恺邵基伦李紫惠李明玉任刚基于单质硫回收的高含硫废水氧化聚乙烯醇与海藻酸钠对玫瑰色微球菌的固定化及其脱氮性能的优化北方城市垃圾渗滤液水量水质变化特征王兵王丹李永涛任宏洋岳丞罗东宁林奇 $ 周明辉荚荣张弛王国红李晓姣李平广西农村连片整治的污水处理现状问题及其对策成官文李海翔吴琼芳韩彪黄付平张维维 0 " 1 分析活性焦吸附生物降解去除稠油废水中 1" 的历程仝坤蔺爱国宋启辉胡琳王东孟晓捷净化剂对猪场沼液中 "1 的去除及其应用条件的响应面优化基于能值分析的农村污水处理工艺可持续性评价黄婧肖艳春陈彪曹秀芹张楠吕小凡 % 复合规整型微电解材料去除废水中的 * 李秋华刘敏超天然黄铁矿对草甘膦的吸附性能印染生化物化尾水反渗透回收特性低能耗印染废水处理工艺与运行条件镉和磷酸根离子在铝柱撑膨润土上的协同吸附胡俊松李睿华孙茜茜刘卓张小梅罗丹许玉东王学华刘峰王浩黄勇李芳郴罗岳平陈镇戴友芝葛飞许银 $, 氧化法降解有机氟废水王淼李立闫小武丁利群孟昭福李忠强龚宁刘艳萍杨亚莉 $ 改性玉米秸秆对水中砷的吸附范荣桂姜清凤张世强郜秋平氧化石墨烯氧化锌净化铅离子废水侯若梦贾瑛张永勇贺亚南电催化氧化技术处理煤气化废水生物滴滤塔净化苯乙烯废气的强化启动及工艺性能 & 改性活性焦催化剂低温性能大气污染防治滤袋长度对袋式除尘器内流场影响的数值模拟研究滕科均陈月芳张馨月陈凯华李明潘建通杨百忍王丽萍梁煜新丁成谭月杨柳盛重义周爱奕单云霞胡宇峰丁倩倩李珊红李彩亭唐奇王娅曼郭威焙烧温度对层柱粘土催化剂 % )(0 催化丙烯还原 *" 反应的影响王琪莹刘自力邹汉波吴俊荣国产活性炭喷射去除大型城市生活垃圾焚烧发电厂烟气中的二恶英张漫雯冯桂贤黄蓉尹文华青宪任明忠张素坤生物滴滤塔处理 + 臭气太原市近地面臭氧浓度变化规律及其与气象要素的关系王毅范志东谢乐温彦平吸附浓缩催化燃烧工艺处理低浓度大风量有机废气李蕾王学华王浩秦毅臭氧二氧化钛光催化技术脱除硫化氢不同粒径垃圾焚烧底渣对固化市政污泥工程特性的影响超声波对污泥中 - 释放影响及作用效应研究疏浚底泥隧道式微波干燥特性及能效分析过硫酸盐氧化法对污泥脱水性能的影响废旧印刷电路板差速破碎分析超声波联合厌氧消化处理制药污泥水泥窑处置生活垃圾过程中的 " 排放污泥蛋白肽对土壤微生态及植物生长调控铅锌厂重金属污染土壤的螯合剂淋洗修复及其应用固体废物处置土壤污染防治一株嗜油不动杆菌的分离鉴定及石油降解特性噪声污染治理赵士奇王磊王东辉金君素胡学涛梁冰陈亿军易富蔡佳骏王晓霞孙贤波赵婧婧韩久春方申柱王文江吕小凤吴燕宋秀兰石杰吴丽雅 $ 陈俊冬张尚李雪赖小林马岚茜娅于晓华姚宏裴晋刘木林蔡玉良邢涛李波杨学权肖国先胡道和汤秋云高琪李思彤陈红兵李亚东汤行春冯静张增强李念李荣华李晓龙沈锋周婷陈吉祥杨智秦波李彦林赵霞考虑相位的屏障衍射声场工程算法研究相关研究阮学云李志远魏浩征铝合金与铸铁缸盖的生命周期评价对比分析李娟杨沿平陈轶嵩

4 第 - 卷第期环境工程学报 - 年月 $ % $" &1$7 $( $#" 1$ $ $ 7 一株嗜油不动杆菌的分离鉴定及石油降解特性周婷陈吉祥杨智秦波李彦林赵霞兰州理工大学石油化工学院兰州, 中国科学院兰州化学物理研究所兰州, 摘要从石油污染土壤分离到株石油降解菌经复筛得到一株适应能力强对石油降解效率高的优势菌株该菌株在温度为 *) - 盐度 " 为 + % 条件下生长良好在以原油为惟一碳源的培养基中生长后对原油的降解率达 + 通过形态学观察生理生化实验及 0 ' 序列分析初步鉴定属于嗜油不动杆菌 ' ( ' ( 菌株在以正戊烷正己烷十六烷十八烷苯甲苯二甲苯邻苯二酚萘芘为惟一碳源培养基中都能很好生长用特异性 6 检测发现具有酰基辅酶 ' 脱氢酶苹果酸合成酶异柠檬酸裂合酶 $ 依赖性铁载体受体铁载体受体蛋白多功能脂肪酸氧化酶复合体亚单位等代谢功能基因及烷烃单加氧酶芳烃双加氧酶联苯双加氧酶邻苯二酚双加氧酶萘双加氧酶甲苯双加氧酶等降解功能基因关键词石油降解嗜油不动杆菌鉴定特性降解基因中图分类号, 文献标识码 ' 文章编号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石油开采运输和使用过程中泄漏所造成的环境污染问题日益严重由于石油成分复杂污染土壤后消除缓慢对土壤生态系统造成严重破坏其主要成分如烷烃苯及多环芳香烃等进入食物链对人体造成危害目前处理石油污染的方法有物理化学和生物方法而生物修复具有费用低无二次污染及处理彻底等特点 0, 已报道降解石油的微生物有多个属多种重要的有假单胞菌属 &! 不动杆菌属 ' ( 红球菌属 + 无色杆菌属 +(! ( 诺卡氏菌属 2 ( ' 和棒状杆菌属 ( ('"! 等不动杆菌属 ' ( 细菌广泛存在基金项目国家自然科学基金资助项目,0- 甘肃省自然科学基金资助项目 6 B', 收稿日期 E E 修订日期 E E- 作者简介周婷 - 女硕士研究生主要从事环境微生物学研究工作 1 (" "@ $ 0!(

5 第期周婷等一株嗜油不动杆菌 ' ( ' ( 的分离鉴定及石油降解特性 0, 于土壤污染水体底泥等自然环境及生物体表许多从环境分离的不动杆菌种类有石油降解有机磷降解表面活性剂合成等重要应用价值 - 本研究从西部地区石油污染土壤样品中筛选出一株降解能力较高适应性较强的石油降解菌通过生理生化特性及 0 ' 序列分析对其进行了初步鉴定属于不动杆菌研究了该菌生长特性石油降解能力分析了与石油降解相关的关键酶基因为石油污染生物修复提供新的菌种资源和信息为实际应用打下基础材料与方法 2 试剂与仪器 " ' 聚合酶 ' "% "C"6" #! $ 8 细菌基因组 ' 抽提试剂盒上海生工生物工程股份有限公司细菌微量生化反应管杭州天和微生物试剂有限公司紫外可见分光光度计尤尼柯上海仪器有限公司 6 恒温振荡器美国精骐有限公司 -0 : 基因扩增仪杭州博日科技有限公司 1 - 水平电泳槽 1 数显稳压稳流电泳仪 "$ $ 凝胶图像处理系统上海天能科技有限公司 2% 样品及培养基样品采集土壤样品采自甘肃金川公司周边石油污染土壤于无菌袋中密闭保存备用基础培养基 > C > C > " 2 >, > " 蒸馏水 ( ), 2 石油降解菌的筛选及鉴定称取石油污染土样加入到装有 ( 无菌水的 ( 锥形瓶中于 * ( $ 振荡使细菌分散于水中静置 ( $ 取上清液在不同浓度原油为惟一碳源的基础培养基中驯化原油浓度由 ( 逐级增加至 ( 取末次驯化的培养液以 E E E 和 E 稀释后涂布培养基选择优势菌分离纯化后于 E* 保藏对筛选出的菌株在含油培养基中进一步培养筛选选出生长能力强降解效果较好的菌株保存于 E* 备用细菌形态观察革兰氏染色生理生化鉴定参照文献进行用 1 ) 柱式基因组 ' 抽提试剂盒细菌提取细菌总 ' 采用 0 ' 通用引物, ':': :' : ': -6 :: ' : ' :' 6 扩增目的片段反应循环参数如下 -* 预变性 ( $-* 变性 % * 退火 ( $,* 延伸 ( $ 个循环最后,* 继续延伸 ( $ 6 产物送至上海生工生物工程公司测序并与 #) "%#$! $ ( $ 7 "%#! 中 0 ' 序列进行同源性比较构建系统进化树通过对的 0 ' 序列同源性比较得到与其同源性最高的已知菌株选择该菌株生长代谢关键酶基因设计特异性引物进行 6 检测反应体系为 6 & (( 2 " 酶引物各 ' 模板双蒸水补足反应循环参数为 -* 预变性 ( $-* 变性 %0* 退火 %,* 延伸 % 个循环 2 菌株生长特性将菌株活化后以 + 的接种量接入 ( 液体培养基分别在和 * 等不同温度下培养后测菌液 > 0 $( 确定菌株最适生长温度将接种于 0, - 和等不同初始 ) 液体培养基中 * ( $ 培养测菌液 > 0 $( 确定菌株生长最适初始 ) 将接种于盐 " 浓度和,+ % 的液体培养基中 * ( $ 培养测菌液 > 0 $( 确定菌株生长最适盐浓度将接入装有 ( 液体培养基于 * ( $ 恒温培养每隔取样测 > 0 $( 值绘制其生长曲线 2$ 石油降解率测定将菌株接种于石油浓度为的基础培养基于 * ( $ 振荡培养在第, 和天取样将样品移至分液漏斗中加入石油醚充分振荡萃取待分层后将石油醚层转入盛有无水硫酸钠的砂型漏斗中静置吸水收集滤液重复萃取数次待石油醚挥发完全干燥称重降解率 G $ E$ $ + 式中 $ 为空白样中石油质量 $ 为样品中石油质量 2 菌株对十六烷粘附特性将菌株用 ), 的磷酸缓冲液冲洗遍重悬菌液加入 + 的十六烷振荡混匀 ( $ 静置 ( $ 待溶液分层后吸取菌液测

6 0 环境工程学报第 - 卷 > 0 $( 值以大肠杆菌 ' 为对照测定粘附前后菌液密度变化计算粘附率粘附率 G E + 式中为空白含菌量为分层后水相的含菌量 2- 菌株在不同有机物中生长特性菌株用 + % 生理盐水冲洗遍后重悬接种于以不同浓度的正戊烷正己烷十二烷十六烷十八烷苯甲苯二甲苯萘芘和邻苯二酚为惟一碳源的基础培养基中 * ( $ 培养取样稀释涂平板计数计算菌株在不同有机物中的生长数 2 降解基因检测通过对同源性较高的菌株基因组序列分析 - 选择与石油降解相关的烷烃单加氧酶芳烃双加氧酶联苯双加氧酶邻苯二酚双加氧酶萘双加氧酶甲苯双加氧酶等降解相关基因设计特异性引物表进行 6 扩增检测功能基因扩增程序如下 -* 预变性 ( $ -* 变性 ( $ 退火 ( $ 温度见表,* 延伸 ( $ 个循环,* 继续延伸 ( $ 表石油降解基因引物 ' + ( ' 8 (!! (#( #!(#! 降解基因引物序列至退火温度 * 6 片段大小 ) 烷烃单加氧酶 '(,0 ':' ' ' ' ' : '(,6 ' '''' : : : : ' 芳烃双加氧酶 ' '' ' :: ' :' ' :' ' 06 : ''' ' : '': : ' 联苯双加氧酶 ': ::' ': : ' 6 :': :'' :'' ' : 甲苯双加氧酶 ' ' :' ' : : ':',6 '' ' '' ' :: ' - 萘双加氧酶 : :' ' : ' ' :'' -6 : '' ' ' :':' 0 邻苯二酚双加氧酶 - : '':: '' ' : :' 0,-6 : ' ' : '' : 0 % 结果 %2 石油降解菌筛选及鉴定从石油污染土样中筛选出能以原油为惟一碳源和能源的石油降解菌株株对筛选出的菌株在含油培养基中进一步培养筛选发现菌株生长速度快降解效果好且稳定该菌株菌落呈淡黄色表面光滑边缘规整细胞呈球杆状革兰氏阴性无芽孢其生理生化特性见表采用 0 ' 通用引物从菌株基因组中扩增获得大小为 ) 左右特异性片段扩增产物经上海生工生物工程有限公司进行序列测定并与库中序列进行同源性比较发现与嗜油不动杆菌 ' ( ' ( 的 0 ' 序列相似性为 --+ 在系统发育树上与其聚类图结合其生理生化特征初步确定为嗜油不动杆菌 ' ( ' ( 选择嗜油不动杆菌生长代谢的关键酶基因设计系列特异性引物进行 6 检测发现具有酰基辅酶 ' 脱氢酶苹果酸合成酶异柠檬酸裂合酶 $ 依赖性铁载体受体铁载体受体蛋白多生理生化表 % 菌株生理生化特性 %', #!! ' ( ' ( 0 生理生化 ' ( ' ( 0 硝酸盐还原 E 果糖 E 接触酶过氧化氢酶 F F 蜜二糖 E 运动型 E 柠檬酸盐 F F 需氧性 F F 侧金盏醇 E 磷酶 F 糊精 E 二磷酶 E 阿拉伯糖 E 硫化氢 E 乳糖 E 实验 F 阿拉伯醇 E 产气 F 核糖 E 耐盐性实验 + + 木糖 F 枸橼酸盐 E 肌醇 E 丙二酸盐 F F 尿素 F F 葡萄糖 F F 七叶苷 E 蔗糖 E 山梨醇 E 麦芽糖 E 山梨糖 E 甘露醇 E 鼠李糖 E 甘露糖 F F 半乳糖苷 > : E 木糖醇 E 鸟氨酸脱羧酶 F 半乳糖 F 赖氨酸脱羧酶 F 松二糖 E 精氨酸脱羧酶 F 棉子糖 E 精氨酸双水解酶 E 注 F 阳性反应 E 阴性反应未检测

7 第期周婷等一株嗜油不动杆菌 ' ( ' ( 的分离鉴定及石油降解特性 0- 图菌株的系统发育树 8 $ #!# &%#" $ 功能脂肪酸氧化酶复合体亚单位等代谢功能基因图进一步验证该菌株可能属于嗜油不动杆菌 ' ( ' ( 图生长代谢功能基因 6 检测凝胶电泳图 1!#) % % & 6 #!# $ & ( #" %( "# $ % &%#" $ %2% 菌株生长特性菌株接种于液体培养基中在不同温度和初始 ) 下培养发现菌株的生长温度初始 ) 及盐度适应范围较广在 *) -+ + 盐浓度下均能较好生长图 "! 生长曲线图所示菌株没有明显的适应期对数生长期较长后进入稳定期 %2 菌株对石油降解动力学菌株在以石油为唯一碳源培养基中生长情况如图所示在最初的菌株生长迅速菌体数量达到最高后菌体数量开始下降, 后保持较低的生长量时有一定的回升时保持较低水平生长菌株对石油的降解率则呈逐渐增加趋势在第天时对石油的降解率可达 + %2 菌株对十六烷的粘附将菌株和对照菌株大肠杆菌 # ' 的培养物分别用磷酸缓冲液冲洗重悬后加入十六烷检测其粘附特性发现对十六烷具有很强的粘附力粘附率可达 -0,+ 而对照菌株大肠杆菌的粘附率仅为 + 图 %2$ 菌株对石油组分不同有机物利用将菌株接于不同有机物为惟一碳源的基础培养基中 * 培养取样稀释进行涂平板计数如表所示在不同浓度烷烃除十二烷芳香烃及苯同系物中均能较好生长 %2 菌株降解相关基因检测通过特异性 6 扩增从基因组 ' 扩增得到部分石油组分降解关键酶基因包括烷烃单加氧酶芳烃双加氧酶联苯双加氧酶邻苯二酚双加氧酶萘双加氧酶甲苯双加氧酶图 0 讨论不动杆菌属 ' ( 细菌广泛存在于自然环境许多种类在石油烃降解过程起着重要作用本文从石油污染土壤中分离的石油降解菌通过细胞形态生理生化 0 ' 序列分析及功能基因分析初步鉴定为嗜油不动杆菌 ' " ( ' ( 而有关嗜油不动杆菌在国内外报道较少目前只有韩国学者 C"$ 等从稻田土壤分离的 ' ( ' ( 6 我们分离的菌株在原油培养基中培养对原油的降解率达 + 对环境适应性较广在 *) - 盐度 + + 的条件下生长良好与 C"$ 等分离的嗜油不动杆菌 ' ( ' ( 6 相比具有更广泛的温度及 ) 适应性适合于盐碱地等复杂环境中石油污染的生物修复

8 'H&( 环境工程学报第E 卷图 F-菌株 [! 以石油为惟一碳源培养基中的生长及石油降解率 * 0F-X 2 d, 6= = * = 2 6, [! =?@ d,?=2 > 77 6* > _ ? 图 '-菌株 [! 和大肠杆菌对十六烷的粘附 * 0'-=, , c = [! 6= 0 K 表 "#菌株 ]:"K! 在不同有机物中生长情况 %&'( )"#[1 0O >>&1 & ) 1, +, &, ]:"K!, C2 0 ) 1 ) + C'+ 1 & ) + 碳源生长量碳源生长量正戊烷%& p pppp 正己烷%& p pppp 十二烷%& L pp 十六烷%& pppp 十八烷%& ppp pppp p ppp + i, 样品中菌落数小于等于空白菌落数- + p, 样品中菌落数为空白菌落数的 # \F 倍- + p p, 样品中菌落数为空白菌落数的 F \H 倍- + ppp, 样品中菌落数为空白菌落数的 H \!( 倍- + p p p p, 样品中菌落数大于空白菌落数!( 倍" 图 &-菌株 [! 的生长特性只能降解 :# # \:& ( 的石油组分 ' # ( ( # 溶血不动杆菌 * 0&-X 2 d,, [! % 1,J = K ; 0% & P[ (! 和约氏不动杆菌 --不动杆菌属细菌由于种类和菌株不同对石油降解能力不同 #所能降解石油组分也有差异#R ;,等报道醋酸钙不动杆菌% 1,J = =K =J 0% & P! % 1,J = C,, & P[ F 对柴油烃降解能力较好 ' #! ( #王虎等从石油污染土壤中分离的两株不动杆菌#其中 1,J = A$! 对 :#! \:#' 的烷烃有明显降解作用#1,J = A$# 对 :#( \:&( 的烷烃有

9 第期周婷等一株嗜油不动杆菌 ' ( ' ( 的分离鉴定及石油降解特性 0 图 0 菌株石油降解相关基因 6 检测 0 6 #!# $ & " $ "# $ % &%#" $ 明显降解作用韩如等从不同来源土壤中分离的株不动杆菌 1 ' 1 ' 1 ' 和 1 ' 仅能利用的烷烃原油及柴油但不能利用单环和多环芳烃菌株可以利用正戊烷正己烷十六烷十八烷等不同链长的烷烃及苯甲苯二甲苯邻苯二酚萘芘等芳香烃类及衍生物说明其具有稳定和广泛的底物降解能力细菌对烷烃有氧代谢的第一步是通过各种烷烃羟化酶所催化的末端氧化使其转化为可溶性的醇和脂肪酸再通过氧化而彻底降解烷烃羟化酶有膜烷烃羟化酶细胞色素加氧酶铜离子依赖性烷烃羟化酶等而芳烃代谢主要通过芳烃加氧酶催化作用引入羟基使芳香环打开主要有苯系物双加氧酶和单加氧酶双加氧酶是在苯环上直接加个氧形成儿茶酚单加氧酶则直接攻击苯环或者氧化侧链进而形成儿茶酚再经过儿茶酚双加氧酶作用使苯环裂解最终进入三羧酸循环不同种类微生物对石油烃的降解途径及代谢酶基因存在多样性对几种主要的石油降解菌相关基因进行了分析发现恶臭假单胞菌 &! ' 具有烷烃单加氧酶萘双加氧酶甲苯双加氧酶邻苯二酚双加氧酶基因不动杆菌 ' (%)# 具有烷烃单加氧酶基因产碱假单孢菌 & "! ' 具有联苯双加氧酶基因红球菌 + %)# 具有烷烃单加氧酶基因 2" 从醋酸钙不动杆菌 ' ( ' 1 中克隆获得 A 基因属于可溶性细胞色素家族能降解的烷烃 0 6"#"! " 等从不动杆菌 ' 菌株中克隆出膜烷烃羟化酶基因 62 可以降解以上烷烃, 不动杆菌 2 能够在的烷烃培养基上生长其所含铜离子依赖性烷烃羟化酶能催化烷烃的氧化我们发现不动杆菌不仅具有烷烃降解的关键酶烷烃单加氧酶基因而且还存在芳烃和多环芳烃氧化相关的芳烃双加氧酶联苯双加氧酶邻苯二酚双加氧酶萘双加氧酶甲苯双加氧酶等关键酶基因基因的多样性与其利用不同链长及种类的芳香烃生长一致从分子水平上进一步证实该菌具有降解烷烃及苯等多环芳烃的能力菌株对烷烃具有很强的粘附能力在 + 的十六烷中吸附 ( $ 其粘附率可达 -0,+ 而对照组大肠杆菌 # ' 的粘附率只有 + 一般认为细菌对有机物的粘附是实现对其利用的重要环节菌株对烷烃的粘附可能有助于对其降解利用详细机制有待于进一步研究参考文献 "$ A # $ "$ %#"$ $ A #" $! # $" $ 7 % #8 &% (! "!(( $ # %&( & 7!$#"( $"# & % $ $" 21 $" % 2" % $ 1 % &%#" %#) ) $ #! $ % $ "!#"$ & %# % $ ( "# $ $# >) $ $ $ 2! 8 %, - -, > ' " BC ' " 1 8!" $ " "# $ $ "# $ #! % &"! 8 )! #8 "( $ "!# " 8!" $ " %&() # (!$ #"( $"# # % # $7 $( $#$# $"# $" # "# $ D " "# $ %0 0,,- "8"# ' (" '"( B2 #"!# & $ # ( "))!"# $ & & $ $ % " # %)! " & $! # (!!"! ""!# %#!% %!! $ 8 %% - 0 "$ A " = #" $%#!# $ &"$ "# &! " (!" " "!# "!$%# ( # "# &! $# 8 " %! $" &"" %2"# " % % 0 0 $ C"$ 2! "$ "$ ' #" ( "# $ $7 $( $#"! "$ ) # $ $ $ $#>) $ $ $ #! $ 8 % -,, = "# $!" $ : "% " #" % " # $ &:"( ) % # 7 " "$ " %&( " 8!" $!$#"( $"# 2 # "$ "$ % $ $" &') ) 2! 8 % - > 7 2" #2 # ( 2! 8;"% $ #$ ' 2 %% %$ 0 - = $ B "$ "$ $ "$$ #" % "# $ "$! ""!# "# $ &(" $ % " $ ' "

10 0 环境工程学报第 - 卷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王虎吴玲玲周立辉等陕北地区石油污染土壤中不动杆菌属的筛选鉴定及降解性能生态学报 % -, - ;"$ ; $ $ B #" $# &!"# $ "$ " $ ) &("$! & ' (%) % "# &( # ""$?!$#"( $"# % '!#"1!!" $!" % -, - $ $ % 韩如闵航程志强等石油降解细菌的表型特性和系统发育分析生物多样性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

39 应信息与通信工程学院信息与通信工程全日制 40 张信息与通信工程学院信息与通信工程全日制 41 时 **

39 应 ** 信息与通信工程学院信息与通信工程全日制 40 张 ** 信息与通信工程学院信息与通信工程全日制 41 时 ** 1 林 ** 100138092010346 381 83 78 信息与通信工程学院 081000 信息与通信工程全日制 2 刘 ** 100138111310146 380 76 76 信息与通信工程学院 081000 信息与通信工程全日制 3 曲 * 100138111310204 355 82 75 信息与通信工程学院 081000 信息与通信工程全日制 4 姚 * 100138111310389