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夜翎贡
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1 2016 年 11 月 Vol October 2016 Chinese Journal of Chromatography 1055 ~ 1062 研究论文 DOI: / SP.J 超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速筛查辣椒粉中 27 种农药残留刘永强, 李凯, 许文娟, 郭礼强, 孙军 ( 潍坊出入境检验检疫局, 山东潍坊 ) 摘要 : 建立了超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱 (UPLC Q TOF / MS) 快速筛查辣椒粉中 27 种农药残留的检测方法样品采用乙腈提取, 经 Carb / NH 2 固相萃取小柱净化, 用乙腈乙酸乙酯 (3 1, v / v) 洗脱, 电喷雾正离子模式检测在一级质谱模式下, 以目标物的保留时间精确质量数同位素分布和同位素丰度比定性, 以准分子离子峰的峰面积定量在 Targeted MS / MS 模式下, 通过相应碰撞能量下的离子碎片信息进一步确证 27 种化合物在各自的线性范围内线性关系良好, 相关系数均大于种化合物的定量限为 2 5~ 5 0 μg / kg, 在 3 个添加水平下的回收率为 72 3 ~ 118 9, 相对标准偏差 (RSD) 为 0 21 ~ 12 7 (n = 6) 该方法快速灵敏准确, 适用于辣椒粉中多种农药残留的同时检测关键词 : 超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱 ; 筛查 ; 农药残留 ; 辣椒粉中图分类号 :O658 文献标识码 :A 文章编号 : (2016) Rapid screening of 27 pesticide residues in chili powder by ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole time of flight mass spectrometry LIU Yongqiang, LI Kai, XU Wenjuan, GUO Liqiang, SUN Jun (Weifang Entry Exit Inspection and Quarantine Bureau, Weifang , China) Abstract: An analytical method was established for the simultaneous determination of 27 pesti cide residues in chili powder by ultra performance liquid chromatography coupled with quadru pole time of flight mass spectrometry ( UPLC Q TOF / MS). The samples were extracted with acetonitrile, and cleaned up by solid phase extraction ( SPE) with Carb / NH 2 cartridges, and eluted with acetonitrile ethyl acetate (3 1, v / v). The eluent was determined by UPLC Q TOF / MS with electrospray ionization in positive mode. The confirmatory analysis was carried out by comparing the retention times, accurate masses, isotope abundance and isotope spacing of all the compounds and fragment ions with Targeted MS / MS. The correlation coefficients ( r) were greater than in the linear ranges of the 27 pesticides. The limits of quantification (LOQs) of the 27 pesticides were μg / kg. At the three spiked levels, the recoveries were between 72 3 and 118 9, with the relative standard deviations (RSDs, n = 6) ranging from 0 21 to The method is efficient, sensitive and accurate, and can meet the requirement of the determination of the 27 pesticides in chili powder. Key words: ultra performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrome try ( UPLC Q TOF / MS); screening; pesticide residues; chili powder 收稿日期 : 通讯联系人.E mail:liuyongqianga@ 163.com. 基金项目 : 山东出入境检验检疫局科研课题 (SK201613); 潍坊市科学技术发展计划项目 (2015Z J1101). Foundation item: Program of Shandong Entry Exit Inspection and Quarantine Bureau ( SK201613); Weifang Science and Technology Development Plan Project ( 2015Z J1101).

2 1056 色谱第 34 卷农药在现代农业的生产过程中起到不可替代的作用, 为粮食果蔬的增产做出了重大贡献然而农药的广泛使用伴随着日益严重的农药残留问题, 农药的滥用对人体健康和生态环境等方面造成了严重危害 [1] 随着新型农药的使用和农药最大残留限量 ( MRLs) 的日益严格, 研发高效简便准确的农药多残留检测方法成为检测人员的首要任务目前辣椒中农药多残留的分析方法主要有气相色谱 (GC) 法 [2-4] [5] 气相色谱质谱 ( GC MS) 法和液相色谱串联质谱 (LC MS / MS) 法 [6] GC 法定性能力较弱 ;GC MS 和 LC MS / MS 法均采用低分辨质谱, 全扫描模式下的灵敏度较低 [7], 选择离子监测 (SIM) 和多反应监测 ( MRM) 模式下需分组检测目标物 [8-10] 此外,GC GC MS 和 LC MS / MS 法的定性分析必须有标准物质进行比对近年来高分辨质谱法在农药多残留检测方面的发展为以上问题提供了良好的解决途径四极杆飞行时间质谱 ( Q TOF / MS) 是一种四极杆和飞行时间质量分析器相结合的高分辨质谱技术, 具有较高的灵敏度, 理论上可同时扫描目标物的数量无上限, 真正实现高通量分析 [11-13] Q TOF / MS 还可通过目标化合物的保留时间精确质量数同位素分布和同位素丰度比等信息, 利用建立的筛查谱库, 实现在无标准品比对的情况下对目标物进行准确定性 [14] 因此,Q TOF / MS 的高分辨率和高质量精度的特点可以有效降低化学噪音, 从而提高定性结果的可靠性和定量结果的准确度, 尤其适合复杂基质体系中未知化合物的痕量分析 [15] 本文采用固相萃取的前处理方法, 建立了超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱 ( UPLC Q TOF / MS) 同时分析辣椒粉中常见的 27 种农药残留的快速筛查方法该方法利用 UPLC Q TOF / MS 技术建立了包含精确质量数保留时间和 3 个碰撞能量 ( ev) 下碎片离子质谱图信息的 27 种农药筛查谱库, 通过筛查谱库对检测结果进行检索分析, 实现了无标准品情况下对辣椒粉样品中 27 种农药的快速筛查和确认, 同时可对检测到的目标物进行准确定量 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 Agilent 超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱仪 ( 美国 Agilent 公司 ); T25 均质器 ( 德国 IKA 公司 ); 5810R 高速冷冻离心机 ( 德国 Eppendorf 公司 ); R 210 旋转蒸发仪 ( 瑞士 BUCHI 公司 ); MMV 1000W 振荡器 ( 日本 EYELA 公司 ) 27 种农药标准品 ( 纯度 91 5 ~ 99 7) 均购自德国 Dr. Ehrenstorfer 公司 ; 正己烷乙腈乙酸乙酯 ( 色谱纯 ) 和甲酸 ( 分析纯 ) 均购自美国 Merck 公司 ; 无水硫酸钠 ( 分析纯 ) 购自天津天大化工实验厂 ; 氯化钠 ( 优级纯 ) 购自天津科密欧化学试剂有限公司 ; 乙酸铵 ( 色谱纯 ) 购自上海晶纯生化科技股份有限公司 ; 石墨化碳氨丙基键合硅胶复合固相萃取柱 (Carb / NH 2, 500 mg / 500 mg / 6 ml) 购自北京迪马欧泰科技发展中心 ; 乙腈饱和的正己烷 : 将乙腈和正己烷按 1 1( v / v) 混合, 振荡, 上层即为乙腈饱和的正己烷 ; 实验用水为纯水系统 ( 美国 Millipore 公司 ) 制得 1.2 标准溶液的配制准确称取 10 mg( 精确至 0 01 mg) 标准品, 置于 10 ml 棕色容量瓶中, 用甲醇定容至刻度, 得单标准储备液, 于 -18 避光保存用甲醇稀释并配制中间浓度的标准工作液, 于 4 避光保存用空白辣椒粉提取液配制标准工作液, 现用现配分别量取 50 μl 27 种农药单标准储备液至 100 ml 棕色容量瓶中, 用甲醇定容至刻度, 得到质量浓度为 500 μg / L 的 27 种农药混合标准溶液, 现用现配 1.3 样品前处理称取辣椒粉 2 g( 精确至 0 01 g), 置于 100 ml 塑料离心管中, 加入 15 ml 水, 涡旋 0 5 min, 浸泡 30 min, 加入 40 ml 乙腈溶液, 以 r / min 均质 1 min 后, 加入 5 g 氯化钠, 以 r / min 均质 1 min, 以 r / min 离心 5 min 后, 取 20 ml 乙腈层于 250 ml 梨形分液漏斗中, 分别加入 20 ml 乙腈和 10 ml 乙腈饱和的正己烷, 振荡 4 min, 将乙腈层置于 250 ml 尖底旋蒸瓶中, 旋蒸至近干, 加入 3 ml 乙腈乙酸乙酯 (3 1, v / v) 溶液, 溶解残渣, 待净化将 Carb / NH 2 固相萃取小柱固定于装置上, 加入 2 g 无水硫酸钠后, 用 8 ml 乙腈乙酸乙酯 (3 1, v / v) 溶液预淋洗小柱, 流速为 1 ml / min 将 3 ml 溶解液过柱, 于旋蒸瓶中加入 3 ml 乙腈乙酸乙酯 (3 1, v / v) 溶液后, 过柱用 25 ml 乙腈乙酸乙酯 (3 1, v / v) 洗脱, 收集全部洗脱液于 250 ml 尖底旋蒸瓶中, 旋蒸至近干, 用 0 1 ( v / v) 甲酸乙腈 (9 1, v / v) 定容至 2 ml, 待分析 1.4 色谱质谱条件色谱柱 :Poroshell 120 SB C18(100 mm 3 0 mm, 2 7 μm) 流动相 :A 为含 5 mmol / L 乙酸铵的 0 1 (v / v) 甲酸水溶液, B 为乙腈梯度洗脱程

3 第 11 期刘永强, 等 : 超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速筛查辣椒粉中 27 种农药残留 1057 序 :0 ~ 5 00 min, 1 B ~ 40 B; 5 00 ~ 8 00 min, 40 B; 8 00 ~ min, 40 B ~ 60 B; ~ min, 60 B ~ 90 B; ~ min, 90 B; ~ min, 90 B ~ 1 B; ~ min, 1 B 流速 :0 4 ml / min 柱温 :40 电喷雾离子 ( ESI) 源, 正离子模式 ; 干燥气温度 :325 ; 干燥气流速 :10 L / min; 雾化器压力 :276 kpa; 鞘气温度 :325 ; 鞘气流速 :11 L / min; 参比离子 :m / z ; 扫描方式 : 全扫描 ; 扫描范围 :m / z 100 ~ 1 000; MS 扫描速率 :3 spec tra / s; MS / MS 扫描速率 :2 spectra / s; 二级质谱数据在 Targeted MS / MS 模式下采集, 在 Targeted List Table 中设置母离子保留时间碰撞能量等信息 ; 采用 Agilent MassHunter Workstation (Version B05 01) 软件进行数据采集与处理 1.5 筛查谱库的建立配制 27 种农药的混合标准溶液, 在一级质谱模式下进行测定, 获得化合物的精确质量数保留时间和母离子信息 ; 在 Targeted MS / MS 模式下, 对化合物进行数据采集, 每种化合物选择 3 个碰撞能量 ( ev) 下的碎片离子质谱图, 并将其导入 PCDL 软件, 与对应农药的保留时间和精确质量数等信息相关联, 从而建立筛查谱库 27 种农药的分子式保留时间理论质量数 CAS 号母离子碰撞能量和相对丰度最高的 2 ~ 3 个质谱碎片离子及对应的相对丰度比见表 1 Table 1 表 1 27 种农药的分子式保留时间理论质量数 CAS 号母离子碰撞能量和碎片离子信息 Formulas, retention times (t R ), theoretical masses, CAS numbers, precursors, collision energies (CE) and fragmentation ions information of the 27 pesticides Compound Formula 1 methamidophos ( 甲胺磷 ) t R / min Theoretical mass CAS Precursor (m / z) CE / ev Fragment ions (m / z) ( relative abundance ratio) C 2 H 8 NO 2 PS (100), (25 4), (10 6) 2 acephate ( 乙酰甲胺磷 ) C 4 H 10 NO 3 PS (100), (82 6), (54 5) 3 omethoate ( 氧乐果 ) C 5 H 12 NO 4 PS (100), (37 4), (36 0) 4 aldicarb sulfoxide ( 涕灭威亚砜 ) 5 aldicarb sulfone ( 涕灭威砜 ) C 7 H 14 N 2 O 3 S (100), (25 3), (15 4) C 7 H 14 N 2 O 4 S (100), (38 1), (36 3) 6 monocrotophos ( 久效磷 ) C 7 H 14 NO 5 P (100), (29 4) 7 methomyl ( 灭多威 ) C 5 H 10 N 2 O 2 S (100), (50 5) 8 thiamethoxam ( 噻虫嗪 ) C 8 H 10 ClN 5 O 3 S (100), (77 6), (44 1) 9 clothianidin ( 噻虫胺 ) C 6 H 8 ClN 5 O 2 S (100), (77 7), (35 3) 10 mevinphos ( 速灭磷 ) C 7 H 13 O 6 P (100), (11 2) 11 imidacloprid ( 吡虫啉 ) C 9 H 10 ClN 5 O (100), (68 5), (22 6) 12 dimethoate ( 乐果 ) C 5 H 12 NO 3 PS (100), (19 5), (16 2) 13 carbofuran ( 克百威 ) C 12 H 15 NO (100), (37 6) 14 carbaryl ( 甲萘威 ) C 12 H 11 NO (100), (30 8), (21 2) 15 imazalil ( 抑霉唑 ) C 14 H 14 Cl 2 N 2 O (100), (69 1), (63 9) 16 atrazine ( 莠去津 ) C 8 H 14 ClN (100), (39 8), (32 7) 17 malathion ( 马拉硫磷 ) C 10 H 19 O 6 PS (100), (31 8), (26 6) 18 isoprocarb ( 异丙威 ) C 11 H 15 NO (100), (29 1), (13 2) 19 propazine ( 扑灭津 ) C 9 H 16 ClN (100), (84 3), (58 1) 20 fenamidone ( 咪唑菌酮 ) C 17 H 17 N 3 OS (100), (57 2), (15 1)

１０５８色第３４卷谱表１续Ｔａｂｌｅ１ＣｏｎｔｉｎｕｅｄＮｏＣｏｍｐｏｕｎｄＦｏｒｍｕｌａｔｒｍｉｎＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｍａｓｓＣＡＳＮｏＰｒｅｃｕｒｓｏｒｍｚＦｒａｇｍｅｎｔｉｏｎｓｍｚｒｅｌａｔｉｖｅａｂｕｎｄａｎｃｅｒａｔｉｏＣＥｅｖ２１ｍｙｃｌｏｂｕｔａｎｉｌ腈菌唑Ｃ１５Ｈ１７ＣｌＮ４１２４０２８８

4 １０５８色第３４卷谱表１续Ｔａｂｌｅ１ＣｏｎｔｉｎｕｅｄＮｏＣｏｍｐｏｕｎｄＦｏｒｍｕｌａｔｒｍｉｎＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｍａｓｓＣＡＳＮｏＰｒｅｃｕｒｓｏｒｍｚＦｒａｇｍｅｎｔｉｏｎｓｍｚｒｅｌａｔｉｖｅａｂｕｎｄａｎｃｅｒａｔｉｏＣＥｅｖ２１ｍｙｃｌｏｂｕｔａｎｉｌ腈菌唑Ｃ１５Ｈ１７ＣｌＮ４１２４０２８８１１４２８８６７１８９０２８９１２１７７００４１１１００１２５０１５３１４８２２ｅｔｈｏｐｒｏｐｈｏｓ灭线磷Ｃ８Ｈ１９Ｏ２ＰＳ２１２６０２４２０５６４１３１９４４８４２４３０６４０２３ａｌａｃｈｌｏｒ甲草胺Ｃ１４ＨＣｌＮＯ２１３７４２６９１１８２１５９７２６０８２７０１２５７１３０９３８０１００９６９５０９４７９１７２９８４７３７４２４ｔｒｉａｚｏｐｈｏｓ三唑磷Ｃ１２Ｈ１６Ｎ３Ｏ３ＰＳ１３８５３１３０６４９２４０１７４７８３１４０７２４２５ｂｕｐｉｒｉｍａｔｅ乙嘧酚磺酸酯Ｃ１３Ｈ２４Ｎ４Ｏ３Ｓ１３９３３１６１５６９４１４８３４３６３１７１６４３ｂｕｐｒｏｆｅｚｉｎ噻嗪酮Ｃ１５Ｈ１６Ｃｌ３Ｎ３Ｏ２１４７２Ｃ１６Ｈ２３Ｎ３ＳＯ３７５０３０８６７７４７０９５３７６０３８２２６２７２ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ咪酰胺１７６５３０５１５６２６９３２７７６０３０６１６３６２１１提取方法的优化相比于其他溶剂乙腈具有提取效率高去除脂肪蛋白质和糖分等杂质效果好和挥发性低等优点因而本实验采用乙腈作为提取溶剂分析脱水蔬菜样品时检测前需加适量水浸泡以提高农药残留的提取效率１６辣椒粉属脱水蔬菜因此本实验对比了直接提取和加水浸泡后再提Ｆｉｇ１３０８００１０１００３０９９９８１６５１１０６０６５７１００１１６０５３１４０６１１０５９３０２围内其余农药的加标回收率仅为６０５９三唑目前农残检测中多采用乙腈作为提取溶剂１６６０９７５１００２１０１６０２５６８２７２１０６８３４４时只有灭多威和马拉硫磷的加标回收率在正常范前处理条件的优化５６８１０１６２０６６０１００２４７０７５１８２９３１７１６４８６３８取对回收率的影响见图１结果表明直接提取结果与讨论２１１６２１２７９１００２３８０９９６４７３１６３１１８１２１６磷咪唑菌酮和甲草胺的回收率几乎为０加水浸泡后再提取的样品中２７种农药的加标回收率为６４１１０满足实验要求且直接提取和加水浸泡后提取的样品经ＳＰＥ小柱净化后洗脱液的颜色分别呈淡黄色和无色说明直接提取的提取液中含有较多色素和基质干扰物导致后续净化不彻底加水浸泡后样品中部分干扰物转移至水相有利于样品的净化因此本实验采用加水浸泡后再提取的方式图１直接提取和加水浸泡后再提取对２７种农药回收率的影响Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｒｅｃｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｉｍｍｅｒｓｉｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｔｈｅ２７ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ本实验考察了振荡器振荡均质和超声３种提取方式对回收率的影响结果表明振荡器振荡均２１２净化方法的优化辣椒粉中含有大量油脂色素和生物碱属于复质和超声３种提取方式下２７种目标物的回收率在杂基质１７如果净化不彻底容易对目标物的检测均质的提取效率最高采用均质提取时放热较多柱和质谱系统造成严重污染从而增加日常维护仪有利于农药残留的提取且均质可有效保证样品与器的人力和财力因此对辣椒粉样品的净化显得尤试剂充分接触因此最终选择均质作为提取方式为重要７０１范围内的数量分别为１８和１５其中产生干扰影响定性和定量的准确性同时会对色谱

第１１期刘永强等超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速筛查辣椒粉中２７种农药残留１０５９将辣椒粉样品的提取液旋蒸后会明显观察到旋蒸瓶内壁有油脂状的液滴正己烷对油脂具有较好的溶解性用乙腈饱和的正己烷对提取液进行液液萃取能够快速地去除样品中的油脂去除油脂后提取液旋蒸后已无明显的油脂状液滴见图２当乙腈饱和的正己烷与提取液乙腈的比例为１４ｖｖ时

ａｆｔｅｒｒｏｔａｒｙｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎｗｉｔｈｏｒｗｉｔｈｏｕｔｏｉｌｒｅｍｏｖａｌ图３表明除去油脂后更有利于目标物的检测且造成的损失相对更少Ｆｉｇ３图３除油脂对２７种农药回收率的影响Ｅｆｆｅｃｔｏｆｏｉｌｒｅｍｏｖａｌｏｎｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｔｈｅ２７ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ固相萃取柱的选择对净化效果起着至关重要的作用

5 第１１期刘永强等超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速筛查辣椒粉中２７种农药残留１０５９将辣椒粉样品的提取液旋蒸后会明显观察到旋蒸瓶内壁有油脂状的液滴正己烷对油脂具有较好的溶解性用乙腈饱和的正己烷对提取液进行液液萃取能够快速地去除样品中的油脂去除油脂后提取液旋蒸后已无明显的油脂状液滴见图２当乙腈饱和的正己烷与提取液乙腈的比例为１４ｖｖ时去除油脂的效果最好考察了去除油脂和未除油脂２种情况下２７种目标化合物的回收率结果表明去除油脂时８５２的目标物的回收率为７０１未除油脂时５５６的目标物的回收率为７０１除速灭磷外其余２６种化合物在去除油脂情况下的回收率均高于未除油脂的情况见图２除油脂和不除油脂情况下旋蒸后的提取液Ｆｉｇ２Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎｓａｆｔｅｒｒｏｔａｒｙｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎｗｉｔｈｏｒｗｉｔｈｏｕｔｏｉｌｒｅｍｏｖａｌ图３表明除去油脂后更有利于目标物的检测且造成的损失相对更少Ｆｉｇ３图３除油脂对２７种农药回收率的影响Ｅｆｆｅｃｔｏｆｏｉｌｒｅｍｏｖａｌｏｎｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｔｈｅ２７ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ固相萃取柱的选择对净化效果起着至关重要的作用本实验采用乙腈乙酸乙酯３１ｖｖ作为洗脱液比较了不同固相萃取小柱ＣａｒｂＮＨ２柱采集速率越高色谱峰的信号强度越小在ＴａｒｇｅｔｅｄＭＳＭＳ模式下需合理地设定一级质谱ＭＳ和二级质谱ＭＳＭＳ数据的采集速率以获得较好ＮＨ２柱和ＳＡＸＰＳＡ柱对目标物回收率的影响的检测结果以莠去津等９种化合物为研究对象对马拉硫磷三唑磷和噻嗪酮等目标物的回收率过４３２３３３４４２４３和４４以化合物的峰面积来结果表明ＮＨ２柱和ＳＡＸＰＳＡ柱的回收率相近但低ＣａｒｂＮＨ２柱的回收率整体上要高于另２种固相萃取柱７７８的目标化合物的回收率在７０１范围内见图４从净化效果看ＣａｒｂＮＨ２将ＭＳ和ＭＳＭＳ的采集速率分别设为２２２３２衡量色谱峰的信号强度结果表明对同一种化合物当ＭＳ的采集速率相同时随着ＭＳＭＳ采集速率的增大色谱峰的信号强度逐渐降低当ＭＳＭＳ柱去除基质干扰物的能力最强能够有效去除辣椒采集速率相同时ＭＳ的采集速率变化对色谱峰信有双ＮＨ２基团能够去除部分色素和脂肪酸净化别为３ｓｐｅｃｔｒａｓ和２ｓｐｅｃｔｒａｓ时色谱峰的信号因此本实验最终选择ＣａｒｂＮＨ２固相萃取小柱作为２３２２由筛查谱库筛查影响筛查结果的４个主要因素为粉中的色素脂肪酸有机酸等杂质ＳＡＸＰＳＡ柱具效果次之ＮＨ２柱对辣椒粉样品的净化效果最差净化柱质谱条件的优化在质谱的各项参数中质谱图的采集速率ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｒａｔｅｓｐｅｃｔｒａｓ是十分重要的参数号强度影响不大当ＭＳ和ＭＳＭＳ的采集速率分强度最大见图５筛查确证分析实际样品在一级质谱模式下测定获得的数据精确质量偏差保留时间偏差同位素分布和同位素丰度比在ＬＯＱ的添加水平下考察２７种目标化合

１０６０色Ｆｉｇ４第３４卷谱图４不同固相萃取柱对２７种农药回收率的影响ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔＳＰＥｃｏｌｕｍｎｓｏｎｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｔｈｅ２７ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ离子即可获得２个确证分数二级质谱中的每个子离子可获得２５个确证分数在筛查谱库中每种化合物均有２３个特征碎片离子因此结合本文建立的

ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓｏｆＭＳａｎｄＭＳＭＳａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｎｔｈｅｐｅａｋａｒｅａｓ物的精确质量偏差和保留时间偏差的数值结果表明所有化合物的精确质量偏差均低于１０１０６１０质抑制效应本实验采用空白基质提取液和甲醇配制系列质量浓度５１０５０１００ μｇＬ的混合标准溶液

6 １０６０色Ｆｉｇ４第３４卷谱图４不同固相萃取柱对２７种农药回收率的影响ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔＳＰＥｃｏｌｕｍｎｓｏｎｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｔｈｅ２７ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ离子即可获得２个确证分数二级质谱中的每个子离子可获得２５个确证分数在筛查谱库中每种化合物均有２３个特征碎片离子因此结合本文建立的筛查谱库２７种农药化合物均能被准确确证２４基质效应基质效应ｍａｔｒｉｘｅｆｆｅｃｔ是指目标分析物以外的其他组分对测定值的影响通常包括基质抑制和基质增强２种效应当使用ＥＳＩ源时在离子化过程中基质组分与目标分析物产生竞争更易出现基图５Ｆｉｇ５不同的一级质谱和二级质谱采集速率组合对峰面积的影响ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓｏｆＭＳａｎｄＭＳＭＳａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｎｔｈｅｐｅａｋａｒｅａｓ物的精确质量偏差和保留时间偏差的数值结果表明所有化合物的精确质量偏差均低于１０１０６１０质抑制效应本实验采用空白基质提取液和甲醇配制系列质量浓度５１０５０１００ μｇＬ的混合标准溶液以目标物响应值的峰面积对质量浓度作标准曲线比较２条标准曲线的斜率从而判断基质效应的存在情况计算公式基质效应基质标准曲线斜率溶剂标准曲线斜率１８当比值为０８５ｐｐｍ２７种目标化合物的日间保留时间的最大偏１１５时基质效应较弱当比值大于１１５时存在偏差窗口分别设置为１０ｐｐｍ和０３０ｍｉｎ含天然强的基质抑制效应２７种农药中有１５种农药的比差值低于０３０ｍｉｎ因此将精确质量和保留时间同位素的化合物在质谱图中存在着明显的同位素较强的基质增强效应当比值小于０８５时存在较值在０８５１１５范围内１２种农药的比值小于峰如吡虫啉中含１个氯原子同位素峰的ｍｚ为０８５为尽可能地减小基质效应的影响本实验采中含２个氯原子同位素峰的ｍｚ为２９６０４８３２５２５５５２和２５７０４９６相对丰度比为３１抑霉唑２９８０４５６和３０００４３１相对丰度比为９６１同位素的分布和相对丰度比均有特定的规律因此在一级质谱模式下测定的数据使用筛查谱库筛查时可以通过精确质量数保留时间同位素的分布和相对丰度比在无标准品的情况下对可能存在的目标化合物进行准确筛查筛查出的疑似化合物在ＭＳＭＳ模式下进行确证根据欧盟０２６５７ＥＣ决议使用高分辨质谱作为确证技术时检测到１个具有精确质量数的母用基质匹配法进行定量分析方法学验证２５１线性范围和定量限将２７种农药的混合标准溶液用空白样品提取液稀释并配制成不同质量浓度的标准溶液以峰面积Ｙ对相应的质量浓度Ｘ μｇＬ作标准曲线以１０倍信噪比ＳＮ计算定量限ＬＯＱ２７种目标化合物的线性范围线性方程相关系数ｒ定量限ＬＯＱ见表２２７种目标化合物在线性范围内的相关系数均大于０９９５定量限ＬＯＱ为２５５０ μｇｋｇ

7 第 11 期刘永强, 等 : 超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速筛查辣椒粉中 27 种农药残留 1061 Table 2 Linear range / (μg / L) 表 2 辣椒粉中 27 种农药的线性范围线性方程相关系数 (r) 和定量限 Linear ranges, linear equations, correlation coefficients ( r) and LOQs of the 27 pesticides in chili powder Linear equation r LOQ / Linear range / (μg / L) Linear equation Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X Y = X For Nos.1-27, see Table 1; Y: peak area of quasi molecular ions; X: mass concentration, μg / L 回收率和精密度对阴性辣椒粉样品进行 1 2 和 5 倍 LOQ 添加水平的回收率和精密度试验, 按 1 3 节的方法进行预处理, 每个添加水平做 6 个平行样品, 计算回收率 Added / 表 3 辣椒粉中 27 种农药的加标回收率和相对标准偏差 (n = 6) Table 3 Recoveries and RSDs of the 27 pesticides spiked in chili powder (n = 6) Recovery / RSD / Added / Recovery / RSD / Added / r Recovery / LOQ / For Nos.1-27, see Table 1. 和相对标准偏差 ( RSD) 27 种农药的回收率为 72 3 ~ 118 9, RSD 为 0 21 ~ 12 7 ( 见表 3) 说明该方法回收率高稳定性好, 满足辣椒粉中农药残留的检测要求 RSD /

8 1062 色谱第 34 卷 2.6 实际样品的检测利用本方法对市场上购买的 10 份辣椒粉样品进行检测, 其中 1 份辣椒粉样品检出了甲萘威, 含量为 50 7 μg / kg 为验证方法的准确性, 采用 GB / T 标准方法对上述阳性样品进行检测, 结果为 58 2 μg / kg, 与本实验方法结果基本一致 3 结论本文结合固相萃取和 UPLC Q TOF / MS 技术, 建立了辣椒粉中 27 种农药残留的筛查确证方法该方法简便高效灵敏, 回收率重复性和定量限均能满足日常检测的要求, 可同时对样品中的目标物进行准确的定性和定量, 适用于辣椒粉中多种农药残留的快速检测分析参考文献 : [1] Li F P. Modern Food, 2016(4): 61 黎凤平. 现代食品, 2016(4): 61 [2] Liu B S, Lü Y K, Guo C H, et al. Chemical Analysis and Meterage, 2011, 20(3): 50 刘宝圣, 吕运开, 郭春海, 等. 化学分析计量, 2011, 20(3): 50 [3] Li H C, Zhang Y P, Hu D Y, et al. Chinese Journal of Pesti cide Science, 2013, 15(1): 117 李海畅, 张钰萍, 胡德禹, 等. 农药学学报, 2013, 15(1): 117 [4] Zhang Q, Chen W S, Hong L, et al. Food Science, 2014, 35 (8): 295 张权, 陈文生, 洪亮, 等. 食品科学, 2014, 35(8): 295 [5] Liu H S, Feng G, Liu P, et al. Journal of Food Safety and Quality, 2015, 6(4): 1498 刘会双, 冯刚, 刘萍, 等. 食品安全质量检测学报, 2015, 6 (4): 1498 [6] Sun J F, Zhao J H, Xiong G, et al. Journal of Instrumental Analysis, 2011, 30(10): 1094 苏建峰, 赵建晖, 熊刚, 等. 分析测试学报, 2011, 30( 10): 1094 [7] Li X Y, Zhang H Y, Fang C L, et al. Chemistry, 2014, 77 (2): 123 李晓颍, 张红医, 范春林, 等. 化学通报, 2014, 77(2): 123 [8] Li K, Liu Y Q, Zhang J L, et al. Chinese Journal of Analysis Laboratory, 2015, 34(2): 236 李凯, 刘永强, 张金玲, 等. 分析试验室, 2015, 34(2): 236 [9] Jia W, Huang J R, Ling Y, et al. Journal of Instrumental Analysis, 2013, 32(1): 9 贾玮, 黄峻榕, 凌云, 等. 分析测试学报, 2013, 32(1): 9 [10] Zhang A Z, Wang Q L, Cao L L, et al. Chinese Journal of Chromatography, 2016, 34(2): 158 张爱芝, 王全林, 曹丽丽, 等. 色谱, 2016, 34(2): 158 [11] Yu L, Song W, Lü Y N, et al. Chinese Journal of Chroma tography, 2015, 33(6): 597 余璐, 宋伟, 吕亚宁, 等. 色谱, 2015, 33(6): 597 [12] Zhao Z Y, Shi Z H, Kang J, et al. Chinese Journal of Chro matography, 2013, 31(4): 372 赵志远, 石志红, 康健, 等. 色谱, 2013, 31(4): 372 [13] Peng X, Zhao Z Y, Kang J, et al. Chinese Journal of Analy sis Laboratory, 2014, 33(3): 282 彭兴, 赵志远, 康健, 等. 分析试验室, 2014, 33(3): 282 [14] Zhu W Y, Zhang X, Yang J, et al. Chinese Journal of Chro matography, 2015, 33(9): 1002 朱万燕, 张欣, 杨娟, 等. 色谱, 2015, 33(9): 1002 [15] Li X J, Peng T, Li C J. Journal of Instrumental Analysis, 2012, 31(5): 628 李晓娟, 彭涛, 李重九. 分析测试学报, 2012, 31(5): 628 [16] Pan Y X, Dong J, Sun J, et al. Physical Testing and Chem ical Analysis Part B: Chemical Analysis, 2009, 45(8): 991 潘玉香, 董静, 孙军, 等. 理化检验化学分册, 2009, 45 (8): 991 [17] Huang Y S, Luo X, Xiong H L, et al. Chinese Journal of Analysis Laboratory, 2013, 32(10): 72 黄优生, 罗香, 熊华亮, 等. 分析试验室, 2013, 32(10): 72 [18] Wang L Q, He L M, Zeng Z L, et al. Journal of Chinese Mass Spectrometry Society, 2011, 32(6): 321 王立琦, 贺利民, 曾振灵, 等. 质谱学报, 2011, 32(6): 321

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min

g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min 25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.